一種從墨旱蓮中提取蟛蜞菊內(nèi)酯類(lèi)單體化合物的制備方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種從中藥墨旱蓮中提取純化蟛蜞菊內(nèi)酯類(lèi)單體化合物的制備方法，粉碎成墨旱蓮粉末，加入醇-酸水溶液進(jìn)行多級(jí)逆流萃取提取，提取液過(guò)濾后減壓濃縮得蟛蜞菊內(nèi)酯粗品；大孔吸附樹(shù)脂分離純化，梯度洗脫，收集洗脫液，分別減壓濃縮后分別得蟛蜞菊內(nèi)酯和去甲蟛蜞菊內(nèi)酯。利用蟛蜞菊內(nèi)酯類(lèi)化合物在弱酸條件下具有良好穩(wěn)定的物化性質(zhì)，醇-酸水溶液在提取時(shí)保護(hù)墨旱蓮的有效成分，大大提高墨旱蓮藥材中有效成分的提取率，大孔吸附樹(shù)脂可反復(fù)利用，以乙醇-水溶液作為溶劑，經(jīng)濟(jì)實(shí)用，可以方便高效地獲取高純度蟛蜞菊內(nèi)酯和去甲蟛蜞菊內(nèi)酯單體化合物，各單體化合物純度達(dá)95%以上，工藝簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便，成本低，適于批量生產(chǎn)。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種從墨旱蓮中提取蟛蜞菊內(nèi)酯類(lèi)單體化合物的制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及，具體涉及一種從中藥墨旱蓮中提取純化蟛蜞菊內(nèi)酯和去甲蟛蜞菊內(nèi) 酯單體化合物的制備方法，屬于中藥植物化學(xué)【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002] 墨旱蓮又名旱蓮草、豬牙草，始載于《唐本草》。為菊科植物鱧腸 （Eclipta prostrata L.)干燥地上部分。性涼；味甘酸；歸肝、腎經(jīng)。有涼血，止血，補(bǔ)腎，益陰等功 效，在臨床主要用于治療治療冠心病、出血性疾病等?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，墨旱蓮具有 抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗炎等藥理作用。其含有多種活性分子，如三萜皂苷類(lèi)、黃酮類(lèi)、噻吩 類(lèi)及香豆草醚類(lèi)等。蟛其菊內(nèi)酯類(lèi)成分中有有蟛其菊內(nèi)酯（Wedelolactone)、甲基蟛其菊 內(nèi)酯（Demethylwedelolactone)、去甲基螺其菊內(nèi)酯 _7_ 菊萄糖苷（Demethylwedelolact one-7-inulinside)、異去甲基螺蜞菊內(nèi)酯（Isodemethylwedelolactone)等。螺蜞菊內(nèi) 酯為IKK-2抑制劑，具有多種生物學(xué)活性，如抗炎、抗病毒、治療肺炎、肝硬化等功用。哈 佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院的袁鈞瑛院士發(fā)現(xiàn)IKK-2抑制劑蟛蜞菊內(nèi)酯能夠抑制脂多糖介入半胱天冬 酶-11 (Caspase-ΙΙ)的誘導(dǎo)作用，可以用來(lái)治療腐敗性休克、中風(fēng)和其它炎癥方面的疾 病等，隨著IKK-2抑制劑蟛蜞菊內(nèi)酯在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的日趨活躍，其需求量將得到高速增 長(zhǎng)。（① K0B0RI MASUK0, YANG ZHEN，YUAN JUNYING)Methods for treating cell death diseases and inflammation, US20000735848;②張朝鳳，許翔鴻，張勉，薛倩，賀湘， 鄒倩，墨旱蓮提取物在制備抗肺纖維化藥物中的應(yīng)用，中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利：CN103768117A.; ?WAGNER HILDEBERT，GEYER BETTINA, Process for the preparation of extracts of Eclipta alba standardized for wedelolactone and/or desmethylwedelolactone and use of the extracts for the preparation of a liver therapeutic, DE3525363A)〇 最近研究發(fā)明蟛蜞菊內(nèi)酯化合物具有抗前列腺癌的作用（SIVALOKANATHAN SARVESWARAN, SUBHASH C. GAUTAM, and JAGADANANDA GHOSH, Wedelolactone, a medicinal plant-derived coumestan, induces caspase-dependent apoptosis in prostate cancer cells via downregulation of PKC ε without inhibiting Akt, Int J Oncol. Dec2012 ;41 (6) :2191-2199)。及抗乳腺癌及子宮內(nèi)膜癌的作用，（徐德鋒，張傳祥，紀(jì)葉 俊，6H-苯并呋喃[3, 2-c][l]苯并吡喃-6-酮類(lèi)化合物及其制備方法和應(yīng)用，中國(guó)專(zhuān)利： CN102093381A)，并申請(qǐng)了蟛蜞菊內(nèi)酯的化學(xué)合成專(zhuān)利（徐德鋒，李紹順，蟛蜞菊內(nèi)酯的化 學(xué)全合成方法，中國(guó)專(zhuān)利：CN，101235039)。本發(fā)明涉及，蟛蜞菊內(nèi)酯單體化合物，包含，蟛蜞 菊內(nèi)酯類(lèi)單體化合物為，蟛蜞菊內(nèi)酯和去甲蟛蜞菊內(nèi)酯，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：
[0003]

【權(quán)利要求】
1. 一種從中藥墨旱蓮中提取純化蟛蜞菊內(nèi)酯類(lèi)單體化合物的制備方法，其特征在于， 包括以下步驟： 步驟A :將墨旱蓮藥材粉碎成墨旱蓮粉末，加入4-8倍的70%-95%體積濃度的醇-酸水 溶液，進(jìn)行多級(jí)逆流萃取提取2-6小時(shí)，提取液過(guò)濾后在30-60°C度下減壓濃縮得蟛蜞菊內(nèi) 醋粗品； 步驟B :大孔吸附樹(shù)脂分離純化：將上述蟛蜞菊內(nèi)酯粗品加入到大孔吸附樹(shù)脂層析柱 中進(jìn)行梯度洗脫，洗脫液分別收集、進(jìn)行TLC跟蹤，得到蟛蜞菊內(nèi)酯洗脫液和去甲蟛蜞菊內(nèi) 酯洗脫液，分別減壓濃縮后分別得蟛蜞菊內(nèi)酯和去甲蟛蜞菊內(nèi)酯。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從中藥墨旱蓮中提取純化蟛蜞菊內(nèi)酯類(lèi)單體化合物的制備 方法，其特征在于：所述醇-酸水溶液為甲醇-乙酸水溶液、乙醇-乙酸水溶液、甲醇-磷酸 水溶液、乙醇-磷酸水溶液、甲醇-甘氨酸水溶液、乙醇-甘氨酸水溶液、甲醇-丙氨酸水溶 液、乙醇-丙氨酸水溶液中的一種或幾種。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從中藥墨旱蓮中提取純化蟛蜞菊內(nèi)酯類(lèi)單體化合物的制備 方法，其特征在于：所述醇-酸水溶液的PH值為4. 0-6. 8。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的從中藥墨旱蓮中提取純化蟛蜞菊內(nèi)酯類(lèi)單體化合物的制備 方法，其特征在于：所述醇-酸水溶液的PH值為4. 5-6. 0。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從中藥墨旱蓮中提取純化蟛蜞菊內(nèi)酯類(lèi)單體化合物的制備 方法，其特征在于：所述減壓濃縮的真空度為0. 05-0. IMPa。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從中藥墨旱蓮中提取純化蟛蜞菊內(nèi)酯類(lèi)單體化合物的制備 方法，其特征在于：所述墨旱蓮粉末的粒度為20-80目。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的從中藥墨旱蓮中提取純化蟛蜞菊內(nèi)酯類(lèi)單體化合物的制備 方法，其特征在于：所述墨旱蓮粉末的粒度為40-60目。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從中藥墨旱蓮中提取純化蟛蜞菊內(nèi)酯類(lèi)單體化合物的制備 方法，其特征在于：所述大孔吸附樹(shù)脂為D101型或DM-301型大孔吸附樹(shù)脂。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從中藥墨旱蓮中提取純化蟛蜞菊內(nèi)酯類(lèi)單體化合物的制 備方法，其特征在于：所述梯度洗脫中蟛蜞菊內(nèi)酯粗品上樣量與大孔吸附樹(shù)脂質(zhì)量比為 1:30-100。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從中藥墨旱蓮中提取純化蟛蜞菊內(nèi)酯類(lèi)單體化合物的制備 方法，其特征在于：所述梯度洗脫的洗脫液梯度設(shè)置為體積濃度分別為48-52%的乙醇-水 溶液，58-62%的乙醇-水溶液，68-72%的乙醇-水溶液，78-82%的乙醇-水溶液和88-92% 的乙醇-水溶液。
【文檔編號(hào)】C07D493/04GK104193758SQ201410433292
【公開(kāi)日】2014年12月10日 申請(qǐng)日期:2014年8月27日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月27日
【發(fā)明者】徐德鋒 申請(qǐng)人:南京慧博生物科技有限公司