專利名稱：一種流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法在線檢測(cè)穿心蓮內(nèi)酯的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬植物化學(xué)、天然產(chǎn)物化學(xué)、食品化學(xué)、分析化學(xué)、有機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)、植物次生代謝物質(zhì)的生理學(xué)、植物生物活性物質(zhì)、穿心蓮內(nèi)酯的提取和純化及結(jié)晶、穿心蓮的栽培和育種、穿心蓮內(nèi)酯在食品、藥品中的安全檢測(cè)領(lǐng)域，特別涉及一種流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法在線檢測(cè)穿心蓮內(nèi)酯的方法。
背景技術(shù)：
穿心蓮為常用中藥，具有清熱解毒、涼血消腫等功效。臨床上多用于上呼吸道感染、急性菌痢、胃腸炎、感冒發(fā)熱及高血壓等心血管疾病的治療。并作為消炎利膽片、清火桅麥片等的原料廣泛用于中成藥生產(chǎn)。隨著抗生素濫用及不良反應(yīng)的增加，開發(fā)具有良好抗菌效果的中藥的呼聲越來越高。穿心蓮作為抗菌作用顯著的中藥，越來越受到醫(yī)藥界關(guān)注。因此，對(duì)穿心蓮內(nèi)酯的含量檢測(cè)也成為必不可少的重要組成部分。穿心蓮的化學(xué)成分主要為內(nèi)酯類和黃酮類。內(nèi)酯類有穿心蓮內(nèi)酯；新穿心蓮內(nèi)酯； 脫羥基穿心蓮內(nèi)酯；高穿心蓮內(nèi)酯；14-脫氧-11氧(代)穿心蓮內(nèi)酯；14-脫氧-11、12-二脫氧穿心蓮內(nèi)酯；穿心蓮內(nèi)酯甙；14-去氧穿心蓮內(nèi)酯甙等。目前分析檢測(cè)穿心蓮內(nèi)酯的方法有6種方法①高壓液相色譜(謝春英，蘇薇薇 2000 ；宋粉云，鐘兆健，鄧紅2002)；②薄層色譜(顧利紅，朱品業(yè)2000;王海龍，趙慶華，趙玉2000)；③電位滴定法(韋娟1999)；④比色法(郭彬等2002)；⑤流動(dòng)注射分析法(包瑋鴛2003)；⑥化學(xué)發(fā)光法(汪寶琪等1994;張慧，林潔華2010)等。上述各種檢測(cè)方法有*定的缺點(diǎn)①高壓液相色譜法儀器比較貴，同時(shí)要有該專業(yè)技術(shù)人員，一名優(yōu)秀的檢測(cè)師的培養(yǎng)很花時(shí)間，另外專用色譜純的流動(dòng)相和色譜柱比較貴；②薄層色譜法所用的化學(xué)試劑比較多，適合于小樣品的純化；③電位滴定法和④比色法檢測(cè)限大，且重現(xiàn)性差；⑤流動(dòng)注射分析法使用紫外檢測(cè)，檢測(cè)限大，穩(wěn)定性差；這幾種方法都適合于大學(xué)及研究所對(duì)穿心蓮內(nèi)酯的研究；⑥汪寶琪、張慧等做的化學(xué)發(fā)光法化學(xué)試劑比較多，測(cè)樣速度慢，同時(shí)他們的方法使用乙醇為溶劑溶解穿心蓮內(nèi)酯，只適合于工業(yè)化生產(chǎn)的檢查，不適合于農(nóng)業(yè)田間育種或栽培時(shí)對(duì)葉片中穿心蓮內(nèi)酯含量的檢測(cè)；相比之下，我們克服了上述各種情況，使用流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光分析儀讓操作更加簡(jiǎn)單，檢測(cè)成本低，標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性好，檢測(cè)限低，該方法做為常規(guī)性測(cè)定手段易于被農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和工業(yè)生產(chǎn)的企業(yè)所應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法在線檢測(cè)穿心蓮內(nèi)酯的方法。具體步驟為用0. 08 0. 12mol/L H2SO4 作為溶劑配制 3. OX KTW/L 的硫酸鈰銨(Ce (IV))， 用二次蒸餾水作為溶劑配制6. OX Krtiol/L的Na2SO3溶液，用二次蒸餾水為溶劑配制濃度為25 μ g/mL穿心蓮內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品穿心蓮內(nèi)酯溶液。主動(dòng)泵分別將上述濃度的載流 Na2SO3溶液和穿心蓮內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)溶液以30 60r/min的流速通過相應(yīng)的管道進(jìn)行三通混合， 輸入流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光分析儀。待基線平穩(wěn)后，副動(dòng)泵將硫酸鈰銨溶液以50 80r/min的流速通過十六通注射閥，注樣時(shí)間10 20秒，各液混合，流入流通池檢測(cè)其化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度， 記錄數(shù)據(jù)，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線方程；然后重復(fù)上述操作過程，測(cè)試樣品穿心蓮內(nèi)酯的化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，計(jì)算樣品穿心蓮內(nèi)酯的含量。上述測(cè)試過程及各種化學(xué)試劑均保持在35°C恒溫條件下，上述試劑均為分析純。在優(yōu)化的條件下，穿心蓮內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度在1 25 μ g/mL范圍內(nèi)與發(fā)光強(qiáng)度 Δ I呈線性關(guān)系，這表明可利用這一方法對(duì)穿心蓮內(nèi)酯作定量分析。本發(fā)明所述流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法由于其靈敏度高，重復(fù)性好，線性范圍寬，儀器設(shè)備簡(jiǎn)單，操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)成本低，可在線進(jìn)行常規(guī)性測(cè)定，易于應(yīng)用到工業(yè)或農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中。


附圖為本發(fā)明所用15. 00 μ g/mL的穿心蓮內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)溶液的發(fā)光圖譜。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例用0. lmol/L H2SO4作為溶劑配制3. 0 X 10_4mol/L的硫酸鈰銨(Ce(IV))，用二次蒸餾水作為溶劑配制6. 0 X 10_3mol/L的Na2SO3溶液，用二次蒸餾水為溶劑配制濃度為25 μ g/ mL穿心蓮內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品穿心蓮內(nèi)酯溶液。主動(dòng)泵分別將上述濃度的載流妝2503溶液和穿心蓮內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)溶液以45r/min的流速通過相應(yīng)的管道進(jìn)行三通混合，輸入流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光分析儀。待基線平穩(wěn)后，副動(dòng)泵將硫酸鈰銨溶液以65r/min的流速通過十六通注射閥，注樣時(shí)間15秒，各液混合，流入流通池檢測(cè)其化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度，記錄數(shù)據(jù)，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線方程；然后重復(fù)上述操作過程，測(cè)試樣品穿心蓮內(nèi)酯的化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程， 計(jì)算樣品穿心蓮內(nèi)酯的含量。上述測(cè)試過程及各種化學(xué)試劑均保持在35 °C恒溫條件下，上述試劑均為分析純。
權(quán)利要求
1. 一種流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法在線檢測(cè)穿心蓮內(nèi)酯的方法，其特征在于具體步驟為用 0. 08 0. 12mol/L H2SO4作為溶劑配制3. 0 X 10_4mol/L的硫酸鈰銨(Ce (IV))，用二次蒸餾水作為溶劑配制6. 0X10_3mol/L的Na2SO3溶液，用二次蒸餾水為溶劑配制濃度為25 μ g/mL 穿心蓮內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品穿心蓮內(nèi)酯溶液；主動(dòng)泵分別將上述濃度的載流N%S03溶液和穿心蓮內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)溶液以30 60r/min的流速通過相應(yīng)的管道進(jìn)行三通混合，輸入流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光分析儀；待基線平穩(wěn)后，副動(dòng)泵將硫酸鈰銨溶液以50 80r/min的流速通過十六通注射閥，注樣時(shí)間10 20秒，各液混合，流入流通池檢測(cè)其化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度，記錄數(shù)據(jù)，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線方程；然后重復(fù)上述操作過程，測(cè)試樣品穿心蓮內(nèi)酯的化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，計(jì)算樣品穿心蓮內(nèi)酯的含量；上述測(cè)試過程及各種化學(xué)試劑均保持在35°C恒溫條件下，上述試劑均為分析純。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法在線檢測(cè)穿心蓮內(nèi)酯的方法。配制硫酸鈰銨溶液(Ce(IV))，Na2SO3溶液，穿心蓮內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品穿心蓮內(nèi)酯溶液。主動(dòng)泵分別將上述的Na2SO3溶液和穿心蓮內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)溶液以30～60r/min的流速通過相應(yīng)的管道進(jìn)行三通混合，輸入流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光分析儀。待基線平穩(wěn)后，副動(dòng)泵將硫酸鈰銨溶液以50～80r/min的流速通過十六通注射閥，注樣時(shí)間10～20秒，各液混合，流入流通池檢測(cè)其化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度，記錄數(shù)據(jù)，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線方程；重復(fù)上述操作，測(cè)試樣品穿心蓮內(nèi)酯化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，計(jì)算樣品穿心蓮內(nèi)酯的含量。本發(fā)明檢測(cè)方法簡(jiǎn)單，檢測(cè)成本低，可在線進(jìn)行常規(guī)性測(cè)定，易于應(yīng)用到工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中。
文檔編號(hào)G01N21/76GK102262085SQ20111009430
公開日2011年11月30日 申請(qǐng)日期2011年4月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月13日
發(fā)明者李子院, 李海云, 王秀麗, 蔣澤軍, 郝再彬, 黃斌 申請(qǐng)人:桂林理工大學(xué)