專(zhuān)利名稱(chēng)：水合氯醛用于制備肺纖維化疾病藥物的新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體是涉及水合氯醛的新用途。
背景技術(shù)：
特發(fā)性肺纖維化(IPF)是以彌漫性肺泡炎和肺泡結(jié)構(gòu)紊亂，最 終導(dǎo)致肺纖維化的間質(zhì)性肺疾病。目前病因尚不明確，病情一般持續(xù) 發(fā)展，最終因呼吸衰竭而死亡。近年來(lái)其發(fā)病率呈不斷上升趨勢(shì)，多 為中老年人，常在50 70歲發(fā)病，隱匿起病，主要臨床表現(xiàn)是逐漸
加重的呼吸困難，伴有刺激性干咳，確診后平均生存時(shí)間僅2 3年。
對(duì)于這種疾病傳統(tǒng)的治療是長(zhǎng)期使用糖皮質(zhì)激素治療，但常常只能緩 解癥狀，而對(duì)生存時(shí)間沒(méi)有影響。而長(zhǎng)期大量的口服糖皮質(zhì)激素將帶 來(lái)嚴(yán)重的副作用，病人可能出現(xiàn)高血壓、糖尿病、胃潰瘍、股骨頭壞 死等嚴(yán)重并發(fā)癥，也可能因免疫功能底下而并發(fā)嚴(yán)重的肺部或全身感 染而死亡。因此，攻克肺纖維化的難關(guān)，已成為當(dāng)今醫(yī)學(xué)科研的熱點(diǎn)， 尋找新的抗纖維化藥物，是當(dāng)今各國(guó)科學(xué)家研究的熱門(mén)課題。人們期 盼著有新的突破，使這種類(lèi)似癌癥的疾病能得到控制，從而挽救肺纖 維化病人的生命。
關(guān)于水合氯醛(Chloeal Hydrate),我國(guó)藥典規(guī)定的適應(yīng)范圍是 (1)作為催眠藥用于治療失眠(2)作為鎮(zhèn)靜藥可抗焦慮(3)可用于癲癇持續(xù)狀態(tài)的治療。它的中樞性鎮(zhèn)靜作用被認(rèn)為是由于它的代謝 產(chǎn)物三氯乙醇所致，它口服或灌腸后迅速吸收，吸收后大部分在肝臟 和其他組織內(nèi)被乙醇脫氫酶作用成為具有活性的三氯乙醇，其半衰期 約為7 10小時(shí)?？诜撍?0分鐘內(nèi)既能入睡，作用持續(xù)時(shí)間為4
8小時(shí)，三氯乙醇進(jìn)一步與葡萄糖醛酸結(jié)合而失活，后經(jīng)腎臟排除。 不良反應(yīng)有(1)過(guò)敏性皮疹，精神錯(cuò)亂，異常興奮。(2)長(zhǎng)期用藥 后可出現(xiàn)撤藥綜合癥；精神錯(cuò)亂、幻覺(jué)、惡心嘔吐、煩躁、異常興奮。 在嚴(yán)重心臟病，有藥物泛用或依賴(lài)史者，嚴(yán)重肝、腎功能損害時(shí)應(yīng)慎 用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種水合氯醛的新用途。 具體的是關(guān)于水合氯醛用于制備肺纖維化疾病藥物的新用途。
具體實(shí)施例方式
將動(dòng)物氣管內(nèi)灌注博來(lái)霉素后，將動(dòng)物分五組，前四組于灌注當(dāng) 日下午分別給地塞米松、姜黃素、卡介菌多糖核酸和水合氯醛四種藥 物腹腔注射，第五組為模型組，給予生理鹽水腹腔注射。于造模后第
7天和第28天處死動(dòng)物，取右肺按常規(guī)病理學(xué)方法進(jìn)行固定、包埋、 切片。將病理切片分別進(jìn)行HE和Maason染色，又根據(jù)Szapielp提 供的方法確定肺泡炎(0—+ + +級(jí))及肺纖維化(0— + + + )程度。 結(jié)果造模后28天，模型組肺泡炎+，纖維化+ + + 。姜黃素組: 肺泡炎0，纖維化+ + ?？ń榫嗵呛怂峤M肺泡炎0，纖維化+。 地塞米松組肺泡炎0，纖維化+。水合氯醛組肺泡炎0，纖維化0。
水合氯醛藥理
(1) 藥效學(xué)水合氯醛的中樞性鎮(zhèn)靜作用被認(rèn)為是由于它的代謝產(chǎn) 物三氯乙醇所致，但其作用機(jī)制尚未清楚，可能是與巴比妥類(lèi)相似。
不縮短REMS期。
(2) 藥動(dòng)學(xué)口服或直腸給藥均能迅速吸收，吸收后大部分在肝臟 和其他組織內(nèi)很快被乙醇脫氫酶作用成為具有活性的三氯乙醇，三氯
乙醇的蛋白結(jié)合率為35% 40%，血漿tj勺為7 10小時(shí)?？诜?氯醛30分鐘內(nèi)即能入睡，作用持續(xù)時(shí)間為4 8小時(shí)。三氯乙醇進(jìn)一 步與葡萄醛酸結(jié)合而失活，并經(jīng)腎臟排出，無(wú)滯后作用和蓄積性。 實(shí)驗(yàn)1 :
姜黃素、卡介菌多糖核酸、地塞米松和C380對(duì)博萊霉素所致大 鼠肺纖維化治療效果(其中C380即為水合氯醛) 大鼠肺臟標(biāo)本實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為19組，分別為 空白對(duì)照組；
模型7天組、模型21天組、模型28天組； 姜黃素治療7天組、21天組、28天組； 卡介菌多糖核酸治療7天組、21天組、28天組； 地塞米松治療7天組、21天組、28天組；
卡介菌多糖核酸與地塞米松(卡地)治療7天組、21天組、28 天組；
C380治療7天組、21天組、28天組。標(biāo)本固定于10%中性福爾馬林緩沖液內(nèi)，以乙醇脫水，二甲苯透
明，石蠟包埋，石蠟切片，H.E染色及Masson染色，中性樹(shù)膠封固， 光鏡檢查。
肺纖維化程度的半定量標(biāo)準(zhǔn)
肺泡炎程度定量將肺泡炎分為0 4 +級(jí)O無(wú)肺泡炎；1+輕度 肺泡炎，表現(xiàn)為單核細(xì)胞浸潤(rùn)，肺泡間隔增寬，病變范圍局限于全肺 的20%以下；2+中度肺泡炎，病變范圍占全肺21 50%; 3 +重度肺泡 炎，呈彌漫性肺泡炎，病變范圍大于51%。
肺纖維化定量0表示無(wú)肺纖維化；1 +表示輕度肺纖維化，病
變范圍占全肺20%以下；2 +中度肺纖維化，病變范圍占全肺2廣50%， 肺泡結(jié)構(gòu)紊亂；3 +重度肺纖維化，病變范圍大于51%，肺泡融合， 肺實(shí)質(zhì)結(jié)構(gòu)紊亂。 檢査結(jié)果
空白對(duì)照組空白對(duì)照組大鼠肺內(nèi)支氣管結(jié)構(gòu)正常，支氣管上皮 為假?gòu)?fù)層纖毛柱狀上皮，無(wú)倒伏和鱗狀上皮化生，支氣管壁及其周?chē)?未見(jiàn)炎細(xì)胞浸潤(rùn)，支氣管腺體數(shù)量正常。肺泡管及肺泡無(wú)擴(kuò)張、萎陷， 肺泡腔未見(jiàn)出血、水腫液，肺泡上皮無(wú)損傷。肺泡壁毛細(xì)血管無(wú)擴(kuò)張、 充血，肺泡間隔無(wú)明顯增厚和炎細(xì)胞浸潤(rùn)，為大鼠正常肺組織結(jié)構(gòu)。
模型組
模型7天組肺泡間隔呈局灶性增寬，肺泡壁可見(jiàn)大量單核細(xì)胞 浸潤(rùn)。肺泡腔縮小，部分肺泡塌陷或消失，肺間質(zhì)出現(xiàn)膠原纖維和成 纖維細(xì)胞，可見(jiàn)局灶性纖維組織沉積。炎癥3，纖維化l。模型21天組可見(jiàn)局灶性肺泡間隔增寬，肺泡壁可見(jiàn)單核細(xì)胞 浸潤(rùn)，并出現(xiàn)大量成纖維細(xì)胞。肺泡腔縮小，部分肺泡塌陷或消失， 可見(jiàn)局灶性纖維組織沉積，病變范圍占全肺2廣50%。炎癥l，纖維化2。
模型28天組肺泡壁單核細(xì)胞浸潤(rùn)已不明顯，肺間質(zhì)可見(jiàn)大灶
狀或彌漫性纖維組織沉積，致使肺泡融合，肺泡腔縮小，肺實(shí)質(zhì)結(jié)構(gòu)
紊亂，病變范圍大于全肺的51%。炎癥l，纖維化3。 姜黃素治療組
姜黃素治療7天組可見(jiàn)局灶性肺泡間隔增寬，肺泡壁有少量單 核細(xì)胞浸潤(rùn)。肺泡腔縮小和肺泡塌陷不明顯，肺間質(zhì)未見(jiàn)明顯成纖維
細(xì)胞和膠原纖維沉積。炎癥2，纖維化0。
姜黃素治療21天組肺泡間隔呈局灶性增寬，肺泡壁有少量單 核細(xì)胞浸潤(rùn)，并出現(xiàn)較多成纖維細(xì)胞。肺間質(zhì)可見(jiàn)膠原纖維沉積，但 無(wú)明顯肺泡腔縮小和肺泡塌陷。炎癥l，纖維化l。
姜黃素治療28天組肺泡壁未見(jiàn)明顯單核細(xì)胞浸潤(rùn)，肺間質(zhì)可 見(jiàn)小灶狀纖維組織沉積，肺泡融合，肺泡腔縮小，肺實(shí)質(zhì)結(jié)構(gòu)無(wú)明顯
紊亂，病變范圍占全肺21 50%。炎癥0，纖維化2。
卡介菌多糖核酸治療組
卡介菌多糖核酸治療7天組肺泡炎較明顯，肺泡間隔增寬，肺 泡壁可見(jiàn)單核細(xì)胞浸潤(rùn)。肺間質(zhì)未見(jiàn)明顯成纖維細(xì)胞和膠原纖維沉
積。炎癥2，纖維化0。
卡介菌多糖核酸治療21天組肺泡間隔呈局灶性增寬，肺泡壁有少量單核細(xì)胞浸潤(rùn)，并出現(xiàn)較多成纖維細(xì)胞。肺間質(zhì)可見(jiàn)膠原纖維 沉積，但無(wú)明顯肺泡腔縮小和肺泡塌陷。炎癥l，纖維化l。
卡介菌多糖核酸治療28天組肺泡壁單核細(xì)胞浸潤(rùn)已不明顯， 肺間質(zhì)可見(jiàn)小條狀纖維組織沉積，肺實(shí)質(zhì)結(jié)構(gòu)無(wú)明顯紊亂，病變范圍 小于全肺的20%。炎癥0，纖維化l。
地塞米松治療組
地塞米松治療7天組肺泡炎仍較明顯，肺泡間隔增寬，肺泡壁 可見(jiàn)單核細(xì)胞浸潤(rùn)。僅少數(shù)動(dòng)物肺間質(zhì)可見(jiàn)肺內(nèi)少量纖維組織沉積。
炎癥2,纖維化0。
地塞米松治療21天組肺泡間隔呈局灶性增寬，肺泡壁可見(jiàn)少 量單核細(xì)胞浸潤(rùn)，并出現(xiàn)較多成纖維細(xì)胞。肺間質(zhì)膠原纖維沉積比模
型21天減少，但無(wú)明顯肺泡腔縮小和肺泡塌陷。炎癥l，纖維化l。
地塞米松治療28天組肺泡壁無(wú)明顯單核細(xì)胞浸潤(rùn)，肺間質(zhì)可
見(jiàn)很小灶狀或條形纖維組織沉積，病變范圍小于全肺的20%，肺實(shí)質(zhì)
結(jié)構(gòu)無(wú)明顯破壞。炎癥o，纖維化l。
卡地治療組-
卡地治療7天組肺泡炎不十分明顯，肺泡間隔輕度增寬，肺泡
壁可見(jiàn)很少量單核細(xì)胞浸潤(rùn)，肺間質(zhì)無(wú)明顯纖維組織沉積。炎癥o， 纖維化o。
卡地治療21天組肺泡間隔呈局灶性增寬，肺泡壁有很少量單
核細(xì)胞浸潤(rùn)，并出現(xiàn)較多成纖維細(xì)胞。肺間質(zhì)可見(jiàn)膠原纖維沉積，但
無(wú)明顯肺泡腔縮小和肺泡塌陷，病變范圍小于全肺的20%。炎癥0，纖維化1。
卡地治療28天組肺泡壁無(wú)明顯單核細(xì)胞浸潤(rùn)，肺間質(zhì)可見(jiàn)小 灶狀或條形纖維組織沉積，病變范圍小于全肺的20%，肺實(shí)質(zhì)結(jié)構(gòu)無(wú) 明顯破壞。炎癥0，纖維化l。
C380治療組
C380治療7天組肺泡炎不十分明顯，肺泡間隔輕度增寬，肺 泡壁可見(jiàn)單核細(xì)胞浸潤(rùn)，肺間質(zhì)無(wú)明顯纖維組織沉積。炎癥0，纖維 化0。
C380治療21天組肺泡間隔呈小灶性增寬，肺泡壁有少量單核 細(xì)胞浸潤(rùn)，并可見(jiàn)較多成纖維細(xì)胞。肺間質(zhì)可見(jiàn)膠原纖維沉積，但無(wú) 明顯肺泡腔縮小和肺泡塌陷。炎癥l，纖維化l。
C380治療28天組肺泡壁無(wú)明顯單核細(xì)胞浸潤(rùn)，肺間質(zhì)可見(jiàn)少 量纖維組織沉積，病變范圍小于全肺的20%，肺實(shí)質(zhì)結(jié)構(gòu)無(wú)明顯破壞。 炎癥O,纖維化O。
結(jié)論模型7天組主要表現(xiàn)為肺泡炎，纖維組織沉積不明顯。模 型21天組除了有肺泡炎改變外，出現(xiàn)大量成纖維細(xì)胞，并可見(jiàn)纖維 組織沉積。模型28天組肺泡炎己不明顯，但肺間質(zhì)可見(jiàn)大灶狀或彌 漫性纖維組織沉積，致使肺實(shí)質(zhì)結(jié)構(gòu)破壞、紊亂，病變范圍大于全肺 的51%?？梢?jiàn)肺纖維化模型復(fù)制成功。
姜黃素治療組、卡介菌多糖核酸治療組、地塞米松治療組、卡地 治療組和C380治療組對(duì)博萊霉素所致大鼠肺纖維化的程度均有減輕 作用，總體比較，C380治療組和卡地治療組效果最好，卡介菌多糖核酸治療組及地塞米松治療組次之，姜黃素治療組又次之。 實(shí)驗(yàn)2:地塞米松和C380對(duì)博萊霉素所致大鼠實(shí)驗(yàn)性肺纖維化治療效果(其中C380為水合氯醛)大鼠肺臟標(biāo)本實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為10組，分別為 空白對(duì)照組；模型7天組、模型21天組、模型28天組； 地塞米松治療7天組、21天組、28天組； C380治療7天組、21天組、28天組。標(biāo)本固定于10%中性福爾馬林緩沖液內(nèi)，以乙醇脫水，二甲苯透 明，石蠟包埋，石蠟切片，H.E染色及Masson染色，中性樹(shù)膠封固， 光鏡檢査。肺纖維化程度的半定量標(biāo)準(zhǔn)肺泡炎程度定量將肺泡炎分為0 4 +級(jí)O無(wú)肺泡炎；1+輕度 肺泡炎，表現(xiàn)為單核細(xì)胞浸潤(rùn)，肺泡間隔增寬，病變范圍局限于全肺的20%以下；2+中度肺泡炎，病變范圍占全肺21 50%; 3 +重度肺 泡炎，呈彌漫性肺泡炎，病變范圍大于51%。肺纖維化程度定量O表示無(wú)肺纖維化；1+表示輕度肺纖維化， 病變范圍占全肺20%以下；2+中度肺纖維化，病變范圍占全肺 21 50%，肺泡結(jié)構(gòu)紊亂；3 +重度肺纖維化，病變范圍大于51%，肺 泡融合，肺實(shí)質(zhì)結(jié)構(gòu)紊亂。檢查結(jié)果-空白對(duì)照組空白對(duì)照組大鼠肺內(nèi)支氣管上皮為假?gòu)?fù)層纖毛柱狀 上皮，無(wú)倒伏和鱗狀上皮化生，支氣管壁及其周?chē)匆?jiàn)炎細(xì)胞浸潤(rùn)， 支氣管腺體數(shù)量正常。肺泡管及肺泡無(wú)擴(kuò)張、萎陷，肺泡腔未見(jiàn)出血、 水腫液，肺泡上皮無(wú)損傷。肺泡壁毛細(xì)血管無(wú)擴(kuò)張、充血，肺泡間隔 無(wú)明顯增厚和炎細(xì)胞浸潤(rùn)，為大鼠正常肺組織結(jié)構(gòu)。肺泡炎癥0;纖 維化0。
模型組
模型7天組肺泡間隔呈局灶性增寬，肺泡壁可見(jiàn)大量單核細(xì)胞 浸潤(rùn)。肺泡腔縮小，部分肺泡塌陷或消失，肺間質(zhì)出現(xiàn)膠原纖維和成 纖維細(xì)胞，可見(jiàn)局灶性纖維組織沉積。肺泡炎癥3;纖維化l。
模型21天組可見(jiàn)局灶性肺泡間隔增寬，肺泡壁可見(jiàn)單核細(xì)胞 浸潤(rùn)，并出現(xiàn)大量成纖維細(xì)胞。肺泡腔縮小，部分肺泡塌陷或消失， 可見(jiàn)局灶性纖維組織沉積，病變范圍占全肺21 50%。肺泡炎癥2; 纖維化2。
模型28天組肺泡壁單核細(xì)胞浸潤(rùn)己不明顯，肺間質(zhì)可見(jiàn)大灶 狀或彌漫性纖維組織沉積，致使肺泡融合，肺泡腔縮小，肺實(shí)質(zhì)結(jié)構(gòu) 紊亂，病變范圍大于全肺的51%。肺泡炎癥l;纖維化3。
地塞米松治療組
地塞米松治療7天組肺泡炎仍較明顯，肺泡間隔增寬，肺泡壁 可見(jiàn)單核細(xì)胞浸潤(rùn)。僅少數(shù)動(dòng)物肺間質(zhì)可見(jiàn)肺內(nèi)少量纖維組織沉積。 肺泡炎癥2;纖維化l。
地塞米松治療21天組肺泡間隔呈局灶性增寬，肺泡壁可見(jiàn)少量單核細(xì)胞浸潤(rùn)，并出現(xiàn)較多成纖維細(xì)胞。肺間質(zhì)膠原纖維沉積比模 型21天減少，但無(wú)明顯肺泡腔縮小和肺泡塌陷。肺泡炎癥1;纖維 化2。
地塞米松治療28天組肺泡壁無(wú)明顯單核細(xì)胞浸潤(rùn)，肺間質(zhì)可 見(jiàn)很小灶狀或條形纖維組織沉積，病變范圍小于全肺的20%，肺實(shí)質(zhì) 結(jié)構(gòu)無(wú)明顯破壞。肺泡炎癥l;纖維化2。
C380治療組
C380治療7天組肺泡炎不十分明顯，肺泡間隔輕度增寬，肺 泡壁可見(jiàn)單核細(xì)胞浸潤(rùn)，肺間質(zhì)無(wú)明顯纖維組織沉積。肺泡炎癥O; 纖維化0。
C380治療21天組肺泡間隔呈小灶性增寬，肺泡壁有少量單核
細(xì)胞浸潤(rùn)，并可見(jiàn)較多成纖維細(xì)胞。肺間質(zhì)可見(jiàn)膠原纖維沉積，但無(wú)
明顯肺泡腔縮小和肺泡塌陷。肺泡炎癥O;纖維化l。
C380治療28天組肺泡壁無(wú)明顯單核細(xì)胞浸潤(rùn)，肺間質(zhì)可見(jiàn)少 量纖維組織沉積，病變范圍小于全肺的20%,肺實(shí)質(zhì)結(jié)構(gòu)無(wú)明顯破壞。
肺泡炎癥O;纖維化l。 討論
模型7天組主要表現(xiàn)為肺泡炎，纖維組織沉積不明顯。模型21 天組除了有肺泡炎改變外，出現(xiàn)大量成纖維細(xì)胞，并可見(jiàn)纖維組織沉 積。模型28天組肺泡炎已不明顯，但肺間質(zhì)可見(jiàn)大灶狀或彌漫性纖 維組織沉積，致使肺實(shí)質(zhì)結(jié)構(gòu)破壞、紊亂，病變范圍大于全肺的51%。 表明肺纖維化模型復(fù)制成功。地塞米松治療組和C380治療組均能減輕博萊霉素所致大鼠肺纖 維化的程度，其中C380治療組的效果優(yōu)于地塞米松治療組。
權(quán)利要求
1、水合氯醛用于制備肺纖維化疾病藥物的新用途。
全文摘要
水合氯醛用于制備肺纖維化疾病藥物的新用途，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。本發(fā)明的目的是提供一種水合氯醛的新用途。本發(fā)明具體的是關(guān)于水合氯醛用于制備肺纖維化疾病藥物的新用途。本發(fā)明攻克肺纖維化的難關(guān)，使這種類(lèi)似癌癥的疾病能得到控制，從而挽救肺纖維化病人的生命。
文檔編號(hào)A61P11/00GK101310713SQ20071005567
公開(kāi)日2008年11月26日 申請(qǐng)日期2007年5月23日 優(yōu)先權(quán)日2007年5月23日
發(fā)明者吳艷峰, 安繼紅, 張曼穎, 董春玲 申請(qǐng)人:吉林大學(xué)第二醫(yī)院