青蒿琥酯在制備治療特發(fā)性肺纖維化藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及青蒿琥酯的用途，尤其涉及青蒿琥酯在制備治療特發(fā)性肺纖維化藥物 中的應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 特發(fā)性肺纖維化（IdiopathicPulmonaryFibrosis，簡(jiǎn)稱IPF)是最難治的慢性纖 維化肺部疾病，其病情不可逆轉(zhuǎn)，其死亡率甚至超過許多癌癥。其病理機(jī)制復(fù)雜，病因尚未 完全闡明。其主要的病理特點(diǎn)為彌漫性的肺泡炎、肺實(shí)質(zhì)炎癥和同質(zhì)纖維化。研究顯示，大 量的細(xì)胞外基質(zhì)沉積，導(dǎo)致成纖維細(xì)胞灶出現(xiàn)，可能在肺纖維化中發(fā)揮了關(guān)鍵作用。盡管過 去十年間IPF臨床治療有了很大的進(jìn)步，但由美國(guó)胸科學(xué)會(huì)、歐洲呼吸學(xué)會(huì)、日本呼吸學(xué)會(huì) 及拉丁美洲胸科學(xué)會(huì)2011年共同制定的《特發(fā)性肺纖維化診治循證指南》依然宣布到目前 為止IPF尚無特效治療藥物。
[0003] 目前，IPF的治療方法主要有多種，包括傳統(tǒng)糖皮質(zhì)激素和免疫抑制劑治療，內(nèi)皮 素拮抗劑治療，抗纖維化藥物（吡非尼酮、干擾素等）治療，抗氧化（N-乙酰半胱氨酸）治 療，細(xì)胞因子及其特異性抑制劑治療，靶向基因治療，肺移植和中醫(yī)中藥治療。雖然各個(gè)方 法在治療肺纖維化中都具有一定的作用，但也都存在不足。如糖皮質(zhì)激素聯(lián)合免疫抑制劑 曾用于治療特發(fā)性肺纖維化，但其副作用大，且回顧性研究顯示，僅有不到10 %的患者對(duì)糖 皮質(zhì)激素有效?！短匕l(fā)性肺纖維化診治循證指南》亦不推薦糖皮質(zhì)激素聯(lián)合免疫抑制劑的療 法。
[0004] 內(nèi)皮素拮抗劑對(duì)特發(fā)性肺纖維化有一定的療效。因?yàn)閮?nèi)皮素-1是一種前炎因子， 能促進(jìn)炎癥細(xì)胞釋放基質(zhì)蛋白和彈性蛋白。但研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)皮素拮抗劑組疾病惡化和死亡 事件發(fā)生率高于安慰劑組。膠原合成抑制劑吡非尼酮有抗纖維化、抗炎和抗氧化作用，但在 臨床實(shí)驗(yàn)中，吡非尼酮組的不良反應(yīng)發(fā)生率顯著高于安慰劑組。抗氧化治療，細(xì)胞因子及其 特異性抑制劑治療和靶向基因治療目前也主要處在實(shí)驗(yàn)階段，目前的臨床研究資料還較缺 乏。肺移植是目前最有效的治療肺纖維化的方法，但是供體的缺乏、免疫排斥反應(yīng)、高昂的 費(fèi)用等限制了其應(yīng)用。因此，需要發(fā)現(xiàn)對(duì)特發(fā)性肺纖維化確切有效的藥物。
[0005] 青蒿琥酯酯（Artesunate，簡(jiǎn)稱AS)，是以雙氫青蒿素為原料合成的一種青蒿素衍 生物，青蒿素是從中草藥黃花蒿中分離得到的倍半萜內(nèi)酯化合物，被廣泛用于抗瘧治療，青 蒿琥酯的抗瘧疾效價(jià)比青蒿素高6倍，且在臨床應(yīng)用中未發(fā)現(xiàn)有明顯的不良反應(yīng)。青蒿琥 酯易溶于水，可肌肉注射和靜脈注射給藥，也可口服給藥。
[0006] 青蒿琥酯的化學(xué)名為二氫青蒿素-1，2-a-琥珀酸單酯，化學(xué)分子式為C19H28O8，分 子量384Da，白色結(jié)晶，熔點(diǎn)為1290~1400°C，無臭、味苦，易溶于氯仿，在丙酮中溶解，在甲 醇或乙醇中微溶，幾乎不溶于水。近年來的研究顯示，青蒿素類藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞有殺滅作 用，主要通過誘導(dǎo)凋亡的途徑實(shí)現(xiàn)，對(duì)于正常細(xì)胞幾乎無細(xì)胞毒性。但目前還沒有青蒿琥酯 用于制備治療特發(fā)性肺纖維化藥物的公開報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有技術(shù)不足，提供一種青蒿琥酯在制備治療特發(fā)性肺纖維 化藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明將臨床證明無明顯毒副作用的藥物青蒿琥酯用于制備治療特發(fā)性 肺纖維化藥物，開辟了新的應(yīng)用領(lǐng)域。
[0008] 本發(fā)明解決上述技術(shù)問題的技術(shù)方案如下：青蒿琥酯在制備治療特發(fā)性肺纖維化 藥物中的應(yīng)用。
[0009] -種治療特發(fā)性肺纖維化的藥物，所述藥物為將青蒿琥酯制成注射劑，所述注射 劑中青蒿琥酯的質(zhì)量體積濃度為10mg/mL。
[0010] 在上述技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，本發(fā)明還可以做如下改進(jìn)。
[0011] 進(jìn)一步，所述注射劑的重量為每支60mg。
[0012] 所述注射劑在臨用前，取1支注射劑，1支注射劑含60mg青蒿琥酯，先加入質(zhì)量百 分比為5%的碳酸氫鈉注射液0. 6mL，振搖2分鐘，待完全溶解后，加入質(zhì)量百分比為5%的 葡萄糖注射液或葡萄糖氯化鈉注射液5. 4mL稀釋，即所述注射劑中，每ImL溶液含青蒿琥酯 IOmg0
[0013] -種如上所述治療特發(fā)性肺纖維化的藥物的使用方法，給病人靜脈注射所述的藥 物，1天1次，1次60mg，7天一個(gè)療程。
[0014] 本發(fā)明的青蒿琥酯治療可減少炎性細(xì)胞在肺部的浸潤(rùn)，抑制特發(fā)性肺纖維化疾病 進(jìn)程；促進(jìn)肺組織中基質(zhì)金屬蛋白酶2和9(MMP-2、MMP-9)的表達(dá)，抑制及基質(zhì)金屬蛋白酶 組織抑制因子1和201MP-1、HMP-2)和IV型膠原的表達(dá)。肺纖維化發(fā)生的一個(gè)主要病 理過程就是細(xì)胞外基質(zhì)（ECM)的沉積。由于各種因素導(dǎo)致I型肺泡上皮細(xì)胞受損、基底膜 暴露，而IV型膠原就是基底膜組成的主要成分，MMP-2和MMP-9可以特異性的降解IV型膠 原。HMP-I和HMP-2作為MMP-2和MMP-9的內(nèi)源性抑制因子，可與MMP-2和MMP-9不可逆 結(jié)合，降低MMP-2和MMP-9的活性，使ECM降解失調(diào)，ECM沉積增多，從而形成了肺纖維化。
[0015] 青蒿素類藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞有殺滅作用，主要通過誘導(dǎo)凋亡的途徑實(shí)現(xiàn)，對(duì)于正常 細(xì)胞幾乎無細(xì)胞毒性。因此，用青蒿琥酯制備的肺纖維化藥物沒有明顯的毒副作用。
[0016] 用青蒿琥酯制備的藥物治療特發(fā)性肺纖維化，下調(diào)了肺組織和原代細(xì)胞中HMP-I 和HMP-2的表達(dá)，上調(diào)了MMP-2和MMP-9的表達(dá)，從而促進(jìn)IV型膠原和ECM的降解，減輕 肺纖維化，達(dá)到治療的目的。
[0017] 本發(fā)明的有益效果是：
[0018] 1.本發(fā)明將已知的青蒿琥酯用于制備治療特發(fā)性肺纖維化藥物，開辟了新的應(yīng)用 領(lǐng)域，并帶來了顯著的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。
[0019] 2.本發(fā)明的青蒿琥酯安全無毒、藥理作用強(qiáng)，有著良好的藥用前景。
[0020] 3.現(xiàn)有的治療特發(fā)性肺纖維化的藥物副作用大、效果不理想，因此青蒿琥酯的應(yīng) 用對(duì)提高特發(fā)性肺纖維化的救治率具有重要意義。
[0021] 4.本發(fā)明的青蒿琥酯具有顯著的抑制特發(fā)性肺纖維化的作用，能夠有效地預(yù)防與 治療特發(fā)性肺纖維化。
【附圖說明】
[0022] 圖1為本發(fā)明的NS組的肺組織蘇木精-伊紅染色結(jié)果。
[0023] 圖2為本發(fā)明的BLM組的肺組織蘇木精-伊紅染色結(jié)果。
[0024] 圖3為本發(fā)明的AT組的肺組織蘇木精-伊紅染色結(jié)果。
[0025] 圖4為本發(fā)明的AC組的肺組織蘇木精-伊紅染色結(jié)果。
[0026] 圖5為本發(fā)明的用免疫印跡法檢測(cè)NS、BLM、AT、AC組的肺組織中IV型膠原、 MMP-2、MMP-9、HMP-I和HMP-2 蛋白表達(dá)結(jié)果。
[0027] 圖6為本發(fā)明的用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)NS、BLM、AT、AC組的原代培養(yǎng)的肺成纖維 細(xì)胞中IV型膠原、MMP-2、MMP-9、HMP-I和HMP-2的RNA水平的結(jié)果。
【具體實(shí)施方式】
[0028] 以下結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的原理和特征進(jìn)行描述，所舉實(shí)例只用于解釋本發(fā)明，并 非用于限定本發(fā)明的范圍。
[0029] (1)肺纖維化動(dòng)物模型的建立
[0030] 取80只體重為180~250g的雄性SD大鼠，均購自桂林醫(yī)學(xué)院SPF動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。 隨機(jī)分為生理鹽水對(duì)照組（簡(jiǎn)稱NS組）、生理鹽水+博來霉素對(duì)照組（簡(jiǎn)稱BLM組）、博來 霉素+青蒿琥酯治療組（簡(jiǎn)稱AT組）和生理鹽水+青蒿琥酯對(duì)照組（簡(jiǎn)稱AC組），各組大 鼠隨機(jī)分為20只/組。
[0031] 生理鹽水對(duì)照組（NS組）：一次性氣管內(nèi)注入生理鹽水0. 3~0.