穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的分離提取工藝的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮及其分離提取工藝，是先取穿心蓮藥材地上部分干燥品，粉碎后投入提取罐中，用75%乙醇提取3次，將前2次穿心蓮藥材提取液減壓回收乙醇，濃縮，進(jìn)行高速離心分離，收集離心沉淀，稱重，棄去離心液；加入離心沉淀重量7倍、濃度為80%的乙醇，攪拌；過濾，澄清，將過陶瓷膜的濾液通過裝有離子交換樹脂的樹脂柱，再用75%乙醇洗脫，將經(jīng)離子交換樹脂的脫色液通過裝填有精制輔料的層析柱，向氧化鋁精制液中加入脫色劑，混合均勻，過濾，得脫色液；將脫色液減壓回收乙醇；控制脫色液的濃縮體積與乙醇度數(shù)實(shí)現(xiàn)分步結(jié)晶與重結(jié)晶，提純產(chǎn)品，抽濾分離得結(jié)晶；將2種結(jié)晶真空干燥得成品。本發(fā)明生產(chǎn)成本低，產(chǎn)品收率高，生產(chǎn)周期短，能規(guī)?；a(chǎn)。
【專利說明】穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的分離提取工藝

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物科技，具體是一種穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的分離提取工 藝。

【背景技術(shù)】
[0002] 穿心蓮，又名一見喜、欖核蓮，是廣西、廣東、海南等省所產(chǎn)的一年生草本植物。穿 心蓮地上部分主要含有二萜內(nèi)酯化合物穿心蓮乙素（穿心蓮內(nèi)酯)、穿心蓮甲素(去氧穿心 蓮內(nèi)酯）以及穿心蓮丙素(新穿心蓮內(nèi)酯）等。
[0003] 穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯具有抗病原微生物、解熱、抗炎、影響機(jī)體免疫功 能、抗生育、利膽保肝、抗腫瘤等活性，此外，穿心蓮內(nèi)酯可增加腎上腺皮質(zhì)功能，穿心蓮甲、 乙、丙、丁素在較大劑量時可使幼年小鼠胸腺萎縮。臨床應(yīng)用：用于菌痢、鉤端螺旋體病、腦 膜炎、肺炎、增強(qiáng)腎上腺皮質(zhì)功能、上呼吸道感染。
[0004] 對穿心蓮有效成分的提取，現(xiàn)有的專利技術(shù)有： (1)采用超臨界萃取和純化技術(shù)，但該技術(shù)設(shè)備投入大，生產(chǎn)成本高，生產(chǎn)加工量小，而 穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的售價相對較低，不足2000元/kg。目前國內(nèi)未有一家企業(yè) 采用超臨界萃取技術(shù)生產(chǎn)穿心蓮提取物。
[0005] (2)采用硅膠、氧化鋁等吸附層析技術(shù)，以及二氯甲烷、三氯甲烷(氯仿)、石油醚、 乙酸乙酯等有機(jī)溶劑洗脫精制。但該技術(shù)使用大量吸附層析劑及有機(jī)溶劑，生產(chǎn)成本高，且 有機(jī)溶劑有毒有害，、易揮發(fā)而引起生產(chǎn)成本過高。目前國內(nèi)未有一家企業(yè)采用此技術(shù)生產(chǎn) 穿心蓮提取物。
[0006] (3)采用大孔吸附樹脂精制，但穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯是醇溶性成分，不易 被大孔吸附樹脂吸附，此技術(shù)的生產(chǎn)可行性，需要進(jìn)一步確定。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的目的是要提供一種生產(chǎn)成本低，產(chǎn)品收率高，生產(chǎn)周期短，能規(guī)?；a(chǎn) 的穿心蓮內(nèi)酯含量> 98%、脫水穿心蓮內(nèi)酯含量> 98%、顏色白色、重金屬、農(nóng)藥殘留、微生 物符合國標(biāo)的提取分離工藝。
[0008] 實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的技術(shù)方案是： 一種穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的分離提取工藝，包括如下步驟： (1) 醇提：取穿心蓮藥材地上部分干燥品，粉碎后投入提取罐中，用75%乙醇、在溫度 50°C?60°C提取3次。加入75%乙醇量分別為藥材重量的5、4、5倍；采用循環(huán)套用提取方 法，提取時間分別為2h、l. 5h、lh，每次過濾后的濾渣進(jìn)入下一次提??； (2) 減壓回收乙醇：將前2次穿心蓮藥材提取液減壓回收乙醇，濃縮； (3) 離心：將濃縮液進(jìn)行高速離心分離，收集離心沉淀，稱重，棄去離心液； (4) 醇溶沉淀與澄清：加入離心沉淀重量7倍、濃度為80%的乙醇，攪拌使離心沉淀完 全溶解；將離心沉淀的乙醇溶液用200目不銹鋼濾網(wǎng)過濾，濾液經(jīng)澄清設(shè)備分離澄清，得澄 清透明的濾液； (5) 離子交換樹脂脫色：按每噸穿心蓮藥材用0. 3噸離子交換樹脂的比例，即1:0. 3,將 過陶瓷膜的濾液通過裝有離子交換樹脂的樹脂柱，再用75%乙醇洗脫，自進(jìn)濾液起開始收 集，收集至進(jìn)完料液后再收集2倍樹脂體積止，得脫色液； (6) 氧化鋁精制：將經(jīng)離子交換樹脂的脫色液通過裝填有精制輔料的層析柱，進(jìn)樣量為 每1000L脫色液用50kg精制輔料。進(jìn)完料液后，用洗脫液洗脫，自進(jìn)料起收集，至進(jìn)完料后 收集1. 5倍洗脫液 (7) 脫色：向氧化鋁精制液中加入脫色劑，充分?jǐn)嚢枧c混合均勻，放置20min，再攪拌 5min，靜置15min后用板框過濾，得澄清透明色淺的脫色液； (8) 減壓回收乙醇：將脫色液減壓回收乙醇； (9) 分步結(jié)晶、重結(jié)晶：控制脫色液的濃縮體積與乙醇度數(shù)實(shí)現(xiàn)分步結(jié)晶與重結(jié)晶，提 純產(chǎn)品，抽濾分離得結(jié)晶； (10) 真空干燥：將2種結(jié)晶真空干燥得成品。
[0009] 步驟（1)所述的循環(huán)套用提取方法，即第1批物料的第3次提取液套用，作為第2 批物料的第1次提取液。
[0010] 步驟（2)所述濃縮的濃縮程度為穿心蓮藥材重量：濃縮液體積比=1:0. 5~1。
[0011] 步驟（3)所述的離心方式為管式離心、碟片式離心或三足沉降離心。
[0012] 步驟（4)所述的澄清設(shè)備為陶瓷膜成套設(shè)備； 步驟（5)所述的離子交換樹脂為D301或D316或D762陰離子交換樹脂。
[0013] 步驟（6)所述的精制輔料為酸性氧化鋁；（2)洗脫液為75%乙醇洗脫液。
[0014] 步驟（7)所述的脫色劑為粉狀活性炭；脫色劑的加入量：粉狀活性炭為解吸液體 積 0· 3%?0· 5%。
[0015] 廣品經(jīng)檢驗，成品為白色粉末，芽心連內(nèi)醋> 98%、脫水芽心連內(nèi)醋> 98%。
[0016] 穿心蓮內(nèi)酯，又名穿心蓮乙素，系天然植物穿心蓮的主要有效成分，被譽(yù)為天然抗 生素藥物。本品為白色方棱形或片狀結(jié)晶（乙醇或甲醇)，無臭，味苦；在沸乙醇中溶解，在 甲醇或乙醇中略溶，極微溶于氯仿，在水或乙醚中幾乎不溶；熔點(diǎn)230?231°C，（ a ) 17D -126·6±2° (冰醋酸)，[a]D -112.7 ((：，0.53，]^0!1)，與堿性2%3,5-二硝基苯甲酸試 齊U，顯紫紅色，異羥肟酸鐵反應(yīng)呈陽性；密度（21°C) I. 2317g/cm3。
[0017] 脫水穿心蓮內(nèi)酯，又名穿心蓮丁素，系穿心蓮內(nèi)酯脫水而得。本品為無色針狀結(jié)晶 (30%或50%乙醇）；熔點(diǎn)：204°C ;易溶于乙醇、丙酮，可溶于氯仿，微溶于苯，幾乎不溶于水。
[0018] 其穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的結(jié)構(gòu)式分別為：

【權(quán)利要求】
1. 一種穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮的分離提取工藝，其特征是：包括如下步驟： (1) 醇提：取穿心蓮藥材地上部分干燥品，粉碎后投入提取罐中，用75%乙醇、在溫度 50°C飛(TC提取3次；加入75%乙醇量分別為藥材重量的5、4、5倍；采用循環(huán)套用提取方法， 提取時間分別為2h、l. 5h、lh，每次過濾后的濾渣進(jìn)入下一次提?。? (2) 減壓回收乙醇：將前2次穿心蓮藥材提取液減壓回收乙醇，濃縮； (3) 離心：將濃縮液進(jìn)行高速離心分離，收集離心沉淀，稱重，棄去離心液； (4) 醇溶沉淀與澄清：加入離心沉淀重量7倍、濃度為80%的乙醇，攪拌使離心沉淀完 全溶解；將離心沉淀的乙醇溶液用200目不銹鋼濾網(wǎng)過濾，濾液經(jīng)澄清設(shè)備分離澄清，得澄 清透明的濾液； (5) 離子交換樹脂脫色：按每噸穿心蓮藥材用0. 3噸離子交換樹脂的比例，即1:0. 3,將 過陶瓷膜的濾液通過裝有離子交換樹脂的樹脂柱，再用75%乙醇洗脫，自進(jìn)濾液起開始收 集，收集至進(jìn)完料液后再收集2倍樹脂體積止，得脫色液； (6) 氧化鋁精制：將經(jīng)離子交換樹脂的脫色液通過裝填有精制輔料的層析柱，進(jìn)樣量為 每1000L脫色液用50kg精制輔料；進(jìn)完料液后，用洗脫液洗脫，自進(jìn)料起收集，至進(jìn)完料后 收集1. 5倍洗脫液 (7) 脫色：向氧化鋁精制液中加入脫色劑，充分?jǐn)嚢枧c混合均勻，放置20min，再攪拌 5min，靜置15min后用板框過濾，得澄清透明色淺的脫色液； (8) 減壓回收乙醇：將脫色液減壓回收乙醇； (9) 分步結(jié)晶、重結(jié)晶：控制脫色液的濃縮體積與乙醇度數(shù)實(shí)現(xiàn)分步結(jié)晶與重結(jié)晶，提 純產(chǎn)品，抽濾分離得結(jié)晶； (10) 真空干燥：將2種結(jié)晶真空干燥得成品。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離提取工藝，其特征是：步驟（1)所述的循環(huán)套用提取方 法，即第1批物料的第3次提取液套用，作為第2批物料的第1次提取液。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離提取工藝，其特征是：步驟（2)所述濃縮的濃縮程度為穿 心蓮藥材重量：濃縮液體積比=1:0. 5~1。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離提取工藝，其特征是：步驟（3)所述的離心方式為管式離 心、碟片式離心或三足沉降離心。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離提取工藝，其特征是：步驟（4)所述的澄清設(shè)備為陶瓷膜 成套設(shè)備。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離提取工藝，其特征是：步驟（5)所述的離子交換樹脂為 D301或D316或D762陰離子交換樹脂。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離提取工藝，其特征是：步驟（6)所述的精制輔料為酸性氧 化鋁；（2)洗脫液為75%乙醇洗脫液。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離提取工藝，其特征是：步驟（7)所述的脫色劑為粉狀活性 炭；脫色劑的加入量：粉狀活性炭為解吸液體積〇. 39TO. 5%。
9. 用權(quán)利要求1-8之一所述的分離提取工藝提取的純度> 98%的穿心蓮內(nèi)酯。
10. 用權(quán)利要求1-8之一所述的分離提取工藝提取的純度> 98%的脫水穿心蓮內(nèi)酯。
【文檔編號】C07D307/60GK104311515SQ201410447747
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年9月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月4日
【發(fā)明者】劉庚貴, 周迪平, 唐克軍, 廖智強(qiáng), 曾潤清 申請人:桂林甙元生物科技有限公司