菖蒲醇內(nèi)酯化合物及其制備方法與應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中藥研究領(lǐng)域，尤其是菖蒲醇內(nèi)酯化合物及其制備方法與應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)體（SERT)是一種對(duì)5-HT有高度親和力的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，約含630 個(gè)氨基酸殘基，其編碼基因（SLC6A4)分別位于7號(hào)和11號(hào)染色體上，由跨度約為35kb的 14個(gè)外顯子組成。SERT蛋白包含12~13個(gè)跨膜區(qū)，N端及C端位于胞質(zhì)中，靠近N端處 有cAMP依賴性蛋白激酶結(jié)合位點(diǎn)，在第三與第四跨膜區(qū)之間有一位于細(xì)胞外的環(huán)狀部分， 是N-連接的糖基化位點(diǎn)。
[0003] SERT屬于Na+/Cl依賴型轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，主要位于5-HT能神經(jīng)元。SERT從神經(jīng)突觸 間隙中重新攝取5-HT進(jìn)入突觸前神經(jīng)元，直接影響突觸間隙5-HT濃度，改變突觸后受體介 導(dǎo)信號(hào)的量和作用持續(xù)時(shí)間。此外，發(fā)現(xiàn)SERT在胎盤組織、骨髓、腎、肺、心、腎上腺、肝、甲 狀旁腺、甲狀腺、胰腺和小腸等器官亦有分布，提示SERT參與多種生理功能。
[0004] SERT是轉(zhuǎn)運(yùn)5-HT的重要分子，與情緒、食欲、睡眠、記憶、學(xué)習(xí)等許多生理心理功 能相關(guān)，SERT及5-HT表達(dá)改變可引起焦慮、抑郁、強(qiáng)迫癥、恐懼癥，甚至精神分裂癥，并與藥 物成癮性密切相關(guān)；此外，發(fā)現(xiàn)SERT在胃腸道功能性疾病中扮演了重要角色，如臨床上慢 傳輸性便秘、腸道易激綜合征、功能性腹脹等胃腸功能性疾病，采用針對(duì)SERT的抗抑郁藥、 抗焦慮藥物取得了療效。
[0005] SERT是臨床藥物研發(fā)的重要靶點(diǎn)，選擇性5-羥色胺再攝取抑制藥（SSRI)包括 氟西汀、帕羅西汀、舍曲林、氟伏沙明、西酞普蘭等，臨床常用于治療抑郁癥、焦慮癥和強(qiáng)迫 癥等，此類藥物鎮(zhèn)靜作用小，也不損傷精神運(yùn)動(dòng)功能，對(duì)心血管和自主神經(jīng)系統(tǒng)功能影響很 小。
[0006] 石菖蒲Acorus tatarinowii是天南星科菖蒲屬植物，具有化濕和胃，開竅豁痰，醒 神益智功效，石菖蒲已經(jīng)報(bào)道的生物活性包括（1)作用于神經(jīng)系統(tǒng)，如抗抑郁、鎮(zhèn)靜和抗驚 厥、腦保護(hù)和益智，（2)作用于心血管系統(tǒng)，如降脂和減慢心律，（3)作用于呼吸系統(tǒng)，如治 療慢性支氣管炎、支氣管哮喘，（4)抑菌，（5)抗癌等；石菖蒲的化學(xué)成分包括揮發(fā)油、木脂 素、酚酸、生物堿、黃酮等，研究表明，石菖蒲揮發(fā)性成分和非揮發(fā)性成分都有較好的抗抑郁 活性，而在活性的物質(zhì)基礎(chǔ)方面，揮發(fā)性成分報(bào)道較多，非揮發(fā)性成分鮮有報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供菖蒲醇內(nèi)酯化合物。
[0008] 本發(fā)明所要解決的另一技術(shù)問題在于提供上述菖蒲醇內(nèi)酯化合物的制備方法。
[0009] 本發(fā)明所要解決的另一技術(shù)問題在于提供上述菖蒲醇內(nèi)酯化合物的應(yīng)用。
[0010] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案是：
[0011] 一種菖蒲醇內(nèi)酯（tatarinolactone, TATe)化合物，{6, 7, 8_ 三羥基-4 a -異丁 基-4, 7-二甲基六氫-6, 8 a -環(huán)氧苯并吡喃-2 (3H)-酮}，具有下述結(jié)構(gòu)式（I)式：
[0012]
[0013] 優(yōu)選的，上述菖蒲醇內(nèi)酯化合物，其物理化學(xué)和波譜性質(zhì)為：白色針 狀結(jié)晶（甲醇），在各種展開系統(tǒng)中，均為單一斑點(diǎn)，10 %硫酸乙醇顯棕黃色 斑點(diǎn)；UV(MeOH)人nax: 197nm ;CD(MeOH，C = 3. 0X 10 3)人（A e ) :215(+0. 51)、 195 (-0.72)nm;核磁數(shù)據(jù)為 JH-NMIUCDWD，600MHz): 52.09 (lH，dd，J = 10. 8, 16. 8Hz，a -H-3)，2. 55 (1H，dd，J = 2. 4, 15. 6Hz，0 -H-3)，2. 56 (1H，m，H-4)，1. 58 (1H，dd，J = 2. 4, 10. 2Hz，a -H-5)，2. 19 (1H，d，J = 10. 8Hz，0 -H-5)，3. 91 (1H，d，J = 4. 2Hz，H-8)，2. 10 (1H，d，J = 10. 8Hz，a -H-9)，1. 66 (1H，ddd，J = 3. 0, 3. 6, 3. 8Hz，0 -H-9)， 2. 21 (1H, m, H-10), 1. 05 (3H, d, J = 6. 6Hz, H-ll), 1. 09 (3H, d, J = 6. 6Hz, H-12), 1. 37 (3H, s, H-13)，1. 04 (3H，d，J = 6. 6Hz，H-14) ;13C-NMR 數(shù)據(jù)見【具體實(shí)施方式】部分表 1。
[0014] 優(yōu)選的，上述菖蒲醇內(nèi)酯化合物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)包括：
[0015] (1) 1，2-酯鍵可斷裂成2位羧酸和8 a位羥基縮酮基團(tuán)，羧酸基團(tuán)可進(jìn)一步被醇 類、酚類、酰胺或生物堿取代基醚化或胺化，6、7、8、8 a位羥基可進(jìn)一步被羧酸、酚酸或含酰 胺基團(tuán)的取代基酯化或酰胺化；
[0016] (2)6, 8 a -氧橋可斷裂成6位二羥基縮酮和8 a位羥基縮酮基團(tuán)，6、7、8、8 a位羥 基可進(jìn)一步被羧酸、酚酸或含酰胺基團(tuán)的取代基酯化或酰胺化；
[0017] (3)8位叔碳羥基可被取代基?；?、酚醚化、酰胺化成酯、酚醚或含氮化合物；
[0018] (4)6、7位季碳羥基在有機(jī)酸和路易斯酸作為催化劑條件下可被取代基?；⒎用?化、酰胺化成酯、酚醚或含氮化合物；具體情況如圖10所示。
[0019] 上述菖蒲醇內(nèi)酯化合物的制備方法，具體步驟如下：
[0020] (1)每20Kg石菖蒲根莖（天南星科菖蒲屬植物石菖蒲Acorus tatarinowii的根 莖）分別用8、6、6倍重量的水煎煮3次，每次1. 5小時(shí)，合并提取液，減壓濃縮至提取液體 積的1/5-1/10,得粗提物濃縮液；
[0021] (2)所得粗提物濃縮液，經(jīng)D101大孔樹脂柱層析，乙醇-水（v/v)梯度洗脫，得到 30%、50%、70%、95% 4個(gè)乙醇洗脫物，分別減壓回收溶劑至無醇味；
[0022] (3)將30%乙醇洗脫物水分散后用甲酸調(diào)節(jié)pH = 3~4,等體積正丁醇萃取3次， 回收溶劑得正丁醇層浸膏；
[0023] (4)正丁醇層浸膏經(jīng)0DS柱層析，甲醇-水（v/v)梯度洗脫，收集50%甲醇水洗脫 流份，所得組分經(jīng)S印hadex LH-20凝膠柱50%甲醇水（v/v)分離、硅膠G柱層析，硅膠柱以 二氯甲烷-甲醇（v/V)梯度洗脫，二氯甲烷：甲醇=15:1洗脫下來的流份中分離得到該菖 蒲醇內(nèi)酯化合物。
[0024] 上述菖蒲醇內(nèi)酯化合物在制備抑制5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)體（SERT)活性藥物方面的應(yīng) 用。
[0025] 優(yōu)選的，上述菖蒲醇內(nèi)酯類化合物在制備抗抑郁癥、焦慮癥、精神分裂癥、強(qiáng)迫癥、 神經(jīng)退行性疾病、藥物成癮性和消化系統(tǒng)功能紊亂等疾病的治療藥物方面的應(yīng)用。
[0026] 具有上述菖蒲醇內(nèi)酯類化合物的藥物組合物，包含治療和/或預(yù)防有效量的菖蒲 醇內(nèi)酯化合物以及任選的藥學(xué)可接受的賦形劑。
[0027] 上述藥學(xué)可接受的賦形劑可以是藥物制劑領(lǐng)域中任何常規(guī)的賦形劑，特定賦形劑 的選擇將取決于用于治療特定患者的給藥方式或疾病類型和狀態(tài)，用于特定給藥模式的合 適藥物組合物的制備方法完全在藥物領(lǐng)域技術(shù)人員的知識(shí)范圍內(nèi)。例如，可以作為藥學(xué)可 接受的賦形劑包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、載體、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、崩解劑、吸收促 進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體和潤(rùn)滑劑等，必要時(shí)，還可以在藥物組合物中加入香味劑、防腐 劑和甜味劑等。
[0028] 上述藥物組合物可以制成片劑、粉劑、顆粒劑、膠囊、口服液、膏劑、霜?jiǎng)?、注射?劑、注射用無菌粉針等多種形式，各種劑型的藥物均可以按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)方法制備。
[0029] 本發(fā)明的有益效果是：
[0030] 本發(fā)明所述菖蒲醇內(nèi)酯化合物，從天南星科菖蒲屬植物石菖蒲Acorus tatarinowii的根莖中分離純化而得，具有抑制5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)體（SERT)活性的作用，可作 為抑郁癥、焦慮癥、精神分裂癥、強(qiáng)迫癥、神經(jīng)退行性疾病、藥物成癮性和消化系統(tǒng)功能紊亂 等疾病的治療藥物，具有重要的藥物開發(fā)價(jià)值。
【附圖說明】
[0031] 圖1是化合物菖蒲醇內(nèi)酯的關(guān)鍵N0ESY相關(guān)圖；
[0032] 圖2是化合物菖蒲醇內(nèi)酯對(duì)SERT活性的抑制作用，其中，陽(yáng)性對(duì)照藥2 yM Fluoxetine，**p〈0. 01，***P〈0.