專利名稱：1-氧代-2-(苯磺酰氨基)戊基哌啶衍生物，其制備方法及其藥用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及1-氧代-2-(苯磺酰氨基)戊基哌啶衍生物，其制備方法及其藥用。
本發(fā)明化合物如下式(I)所示 其中R1是氫或(C1-C4)烷基，R2是氫或直鏈或支鏈(C1-C4)烷基，R3是直鏈或支鏈(C1-C7)烷基，-(CH2)nOCH3基團(tuán)(其中n是1，2或3)或-CH2O(C2H4O)mCH3(其中m是1，2或3)，R4是氫或鹵原子，R5是直鏈或支鏈(C1-C4)烷基，以及A是任選由一或多個選自鹵原子和直鏈或支鏈(C1-C4)烷基，直鏈或支鏈(C1-C4)烷氧基以及三氟甲基的取代基取代的苯基，或是選自任選按上述取代的吡啶基，噻吩基和呋喃基的雜環(huán)，或是(C5-C8)環(huán)烷基。
本發(fā)明優(yōu)選化合物中R3是直鏈或支鏈(C1-C7)烷基，以及A是選自任選由一或多個選自鹵原子和直鏈或支鏈(C1-C4)烷基，直鏈或支鏈(C1-C4)烷氧基以及三氟甲基的取代基取代的吡啶基，噻吩基和呋喃基的雜環(huán)。
本發(fā)明化合物具有3個非對稱中心。
哌啶基的優(yōu)選構(gòu)型為[2R，4R]。
中間氨基酸部分的構(gòu)型是[S] 這些化合物可以游離堿或藥用酸加成鹽的形式存在。
所有這些形式均構(gòu)成本發(fā)明的一部分。
在下列各式中-CPh3是三苯基甲基。
本發(fā)明式(I)化合物可按反應(yīng)式1合成反應(yīng)式1 在非質(zhì)子溶劑如二氯甲烷(DCM)中于堿如吡啶存在下將式(II)中A和R4如上述的磺酸與式(III)中R3如上述的酰氯反應(yīng)后加入過量三乙胺而得到三乙胺鹽形式的式(IV)化合物；之后將式(IV)化合物與三氟乙酸酐反應(yīng)而得到式(V)化合物并在溶劑如DCM中通過五氯化磷作用而用其得到式(VI)化合物；最后在非質(zhì)子溶劑如DCM中于堿如三乙胺存在下將式(VI)化合物與式(VII)氨的鹽酸鹽(其中R1是氫或(C1-C4)烷基，R2是直鏈或支鏈(C1-C4)烷基以及R5是直鏈或支鏈(C1-C4)烷基)反應(yīng)后使咪唑環(huán)脫保護(hù)基并在乙酸乙醇或乙酸四氟呋(THF)水混合物中回流除去(enlever)三氟乙酰殘基而得到式(I)化合物(其中R2是直鏈或支鏈(C1-C4)烷基)。
在希望得到式(I)中R2是氫的化合物的情況下，可在本技術(shù)領(lǐng)域已知的常規(guī)條件下將相應(yīng)的式(I)化合物(其中R2是直鏈或支鏈(C1-C4)烷基)皂化。
反應(yīng)式2示出了獲得式(Ia)化合物(其中R’3是直鏈或支鏈(C1-C7)烷基)的另一方法反應(yīng)式2 該方法中可將式(II)化合物與三乙胺反應(yīng)而形成三乙胺的鹽并將其與式(IIIa)的酰氯或與式(IIIb)的酸酐反應(yīng)而得到式(Va)的三乙胺鹽形式的對稱酰亞胺，用五氯化磷處理該鹽而得到式(VIa)化合物后在非質(zhì)子溶劑如DCM中于堿如三乙胺存在下將其與式(VII)胺鹽酸鹽反應(yīng)后使咪唑環(huán)脫保護(hù)基并在乙酸乙醇，乙酸水或乙酸四氫呋喃水混合物中回流除去-COR’3殘基之一而得到式(Ia)化合物(其中R2是直鏈或支鏈(C1-C4)烷基)。
在希望得到式(Ia)中R2是氫的化合物的情況下，可在本技術(shù)領(lǐng)域已知的常規(guī)條件下將相應(yīng)的式(Ia)化合物(其中R2是直鏈或支鏈(C1-C4)烷基)皂化。
也可采用反應(yīng)式3所示方法反應(yīng)式3 該方法中用三乙胺處理式(IIb)中R4是鹵原子的化合物后將所得鹽與式(IIIa)中R’3如上述的酰氯反應(yīng)而得到式(IVb)化合物并在溶劑如DCM中通過五氯化磷的作用而用其得到式(VIb)化合物后在非質(zhì)子溶劑如DCM中將式(VIb)化合物與式(VII)胺鹽酸鹽(其中R1是氫或(C1-C4)烷基，R2是直鏈或支鏈(C1-C4)烷基以及R5是氫或直鏈或支鏈(C1-C4)烷基)反應(yīng)，之后在非質(zhì)子溶劑中用氨進(jìn)行處理而除去-COR’3殘基而得到式(VIII)化合物并在溶劑如二甲基甲酰胺(DMF)中于催化劑如四(三苯基膦)(0)存在下將其與式(IX)化合物(其中A如上述以及R是(C1-C4)烷基)反應(yīng)而形成式(X)化合物后在酸性介質(zhì)如在乙酸水混合物中將其加熱到回流溫度而得到式(Ia)中R4是鹵原子的化合物。
如果希望得到式(Ia)中R4是氫的化合物，可將相應(yīng)的式(Ia)化合物(其中R4是鹵原子)進(jìn)行氫解。
在希望得到式(Ia)中R2是氫的化合物的情況下，可在本技術(shù)領(lǐng)域已知的常規(guī)條件下將相應(yīng)的式(Ia)化合物(其中R2是直鏈或支鏈(C1-C4)烷基)皂化。
對于式(I)中R3是-(CH2)nOCH3基團(tuán)(其中n是1，2或3)或-CH2O(C2H4O)mCH3基團(tuán)(其中m是1，2或3)的化合物，也可按照類似于針對反應(yīng)式1中式(V)化合物所述方法的方法用式(IIb)化合物而得到混合酰亞胺后繼續(xù)按反應(yīng)式3將該混合酰亞胺與式(VII)胺反應(yīng)。
式(XI)的中間體化合物是新的并且也構(gòu)成本發(fā)明的一部分 其中R8是氫或三氟乙?；?，R9是-COR3基團(tuán)(其中R3如上述)，和R7是羥基，或R8是三氟乙?；琑9是-COR3基團(tuán)，和R7是氯原子，或R8和R9分別是-COR’3基團(tuán)(其中R’3如上述)，和R7是氯原子或羥基，Z是碘原子或任選由一或多個選自鹵原子和直鏈或支鏈(C1-C4)烷基，直鏈或支鏈(C1-C4)烷氧基或三氟甲基的取代基取代的苯基，或是選自任選按上述取代的吡啶基，噻吩基，呋喃基的雜環(huán)，或是(C5-C8)環(huán)烷基，以及R4如上述。
起始化合物可從市場上得到或已在文獻(xiàn)中作了說明或可按其中所述的方法或本技術(shù)領(lǐng)域眾所周知的方法得到。
式(II)化合物及其制備方法已在法國專利申請No.FR9414129中作了說明。
式(VII)化合物已在歐洲專利申請No.EP0643047中作了說明。
以下實施例說明一些本發(fā)明化合物的制備方法。
微量分析及IR和RMN譜證實了所得化合物的結(jié)構(gòu)。
所舉例的化合物的數(shù)字與后續(xù)表中的數(shù)字對應(yīng)，表中列舉了本發(fā)明某些化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)和物理性質(zhì)。
實施例1(化合物No.8)[2R-[1(S)，2α，4β]]-4-乙基-1-[5-(1H-咪唑-4-基)-2-[[[2-[(3-甲氧基-1-氧代丙基)氨基][1，1’-二苯基]-3-基]磺?；鵠氨基]-1-氧代戊基]哌啶-2-羧酸乙酯的鹽酸鹽1.1.2-[(3-甲氧基-1-氧代丙基)氨基][1，1’-二苯基]-3-磺酸的N，N-二乙基乙胺鹽氮氣中0℃下向1.74g(7mmol)2-氨基[1，1’-二苯基]-3-磺酸和1.6ml(19.5mmol)吡啶在7ml二氯甲烷(DCM)中的溶液中滴加入1.3g(10.5mmol)3-甲氧基丙酰氯在3ml DCM中的溶液。反應(yīng)介質(zhì)在0℃下攪拌放置2小時后加入三乙胺和過量甲醇，之后減壓濃縮。剩余物經(jīng)硅膠柱色層分離法提純(用甲醇∶二氯甲烷∶三乙胺(2∶98∶0.001)混合物洗脫)而得到2.3g粘性油狀產(chǎn)物(收率＝100％)，可直接將其用于下一步驟。
1.2.2-[(3-甲氧基-1-氧代丙基)(三氟乙酰基)氨基][1，1’-二苯基]-3-磺酸的N，N’-二乙基乙胺鹽回流溫度下將2.3g(7mmo1)2-[(3-甲氧基-1-氧代丙基)氨基)[1，1’-二苯基]-3-磺酸的N，N-二乙基乙胺鹽和9.8ml(70mmol)三氟乙酸酐的混合物加熱3小時后減壓濃縮反應(yīng)介質(zhì)而得到3.8g粘性油狀產(chǎn)物(收率＝100％)，可直接將其用于下一步驟。
1.3.2-[(3-甲氧基-1-氧代丙基)(三氟乙?；?氨基][1，1’-二苯基]-3-磺酰氯向3.8g(7mmol)2-[(3-甲氧基-1-氧代丙基)(三氟乙酰基)氨基)[1，1’-二苯基]-3-磺酸的N，N-二乙基乙胺鹽在14mlDCM中的溶液中加入1.75g(8.4mmol)五氯化磷后混合物于回流溫度下加熱3小時，之后減壓濃縮。剩余物用硅膠柱色層分離法提純(用DCM洗脫)而得到1.3g粘性油狀產(chǎn)物(收率＝40％)，可直接將其用于下一步驟。
RMN(CDCl3)，200Mhz，δ，(ppm)8.4-8.2(m，1H)；7.8-7.6(m，2H)；7.5-5.3(m，3H)；7.3-7.2(m，2H)；3.8-3.5(m，2H)；3.3(s，3H)；3.0-2.7(m，2H)1.4.[2R-[1(S)，2α，4β]]-4-乙基-1-[5-(1H-咪唑-4-基-2-[[[2-[(3-甲氧基-1-氧代丙基)氨基][1，1’-二苯基]-3-基]磺?；鵠氨基]-1-氧代戊基]哌啶-2-羧酸乙酯的鹽酸鹽氮氣中0℃下向1.5g(2.4mmol)[2R-[1(S)，2α，4β]]-1-[2-氨基-1-氧代-5-[1-(三苯基甲基)-1H-咪唑-4-基]戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯的鹽酸鹽和0.8ml(5.8mmol)三乙胺在15mlDCM中的混合物中滴加入1.3g(2.89mmol)2-[(3-甲氧基-2-丙酰基)(三氟乙?；?]氨基[1，1’-二苯基]-3-磺酰氯在3mlDCM中的溶液。反應(yīng)介質(zhì)在該溫度下攪拌6小時后減壓濃縮。剩余物用50ml乙酸乙酯提取后依次用50ml 0.5N鹽酸水溶液，50ml 5％碳酸氫鈉溶液和50ml飽和氯化鈉溶液洗滌，并且用硫酸鎂干燥。所得剩余物在含有50ml乙酸和50ml乙醇的混合物中90℃下加熱2小時后減壓濃縮。剩余物經(jīng)硅膠柱色層分離法提純(用乙醇∶二氯甲烷(5∶95)混合物洗脫)而得到1.2g堿形式的產(chǎn)物(收率＝75％)。再將1.2g(1.8mmol)該堿溶于36ml在0.1N鹽酸中的異丙醇溶液后減壓蒸發(fā)而得到其鹽酸鹽。
Pf(熔點)＝74℃[α]＝+60°(c＝0.2；甲醇)實施例2(化合物No.15)[2R-[1(S)，2α，4β]]-4-乙基-1-[5-(5-甲基-1H-咪唑-4-基-2-[[[3’-甲基-2-[(1-氧代丙基)氨基][1，1’-二苯基]-3-基]磺酰基]氨基]-1-氧代戊基]哌啶-2-羧酸乙酯的鹽酸鹽2.1.2-[雙(1-氧代丙基)氨基]-3’-甲基[1，1’-二苯基]-3-磺酸的N，N’-二乙基乙胺鹽將2.1g(8mmol)2-氨基-3’-甲基[1，1’-二苯基]-3-磺酸溶于10ml二氯甲烷中，加入1.34ml(9.6mmol)三乙胺后蒸發(fā)至干。再將所得鹽溶于15.5ml丙酸酐中，混合物于100℃下加熱8小時后蒸發(fā)至干。剩余物經(jīng)硅膠柱色層分離法提純(用DCM/乙醇/三乙胺(98∶2∶0.001)混合物洗脫)而得到3.6g粘性油狀產(chǎn)物(收率＝95％)，可直接將其用于下一步驟。
2.2.2-[雙(1-氧代丙基)氨基]-3’甲基[1，1’-二苯基]-3-磺酰氯0℃下向3.6g(7.6mmol)2-[雙(1-氧代丙基)氨基]-3’-甲基[1，1’-二苯基]-3-磺酸的N，N-二-乙基乙胺鹽在8ml DCM中的溶液中加入1.6g(7.6mmol)五氯化磷后讓混合物溫度回到室溫。然后于回流溫度下將混合物加熱4小時后讓溫度回到室溫。加入乙醚后過濾并將濾液濃縮，剩余物經(jīng)florisilTM柱提純(用乙醚/戊烷(1∶1)混合物洗脫)后用乙醚/戊烷混合物重結(jié)晶而得到1.7g近白色產(chǎn)物晶體(收率＝58％)。
Pf＝91℃2.3.[2R-[1(S)，2α，4β]]-1-[2-[[[2-[雙(1-氧代丙基)氨基]-3’甲基[1，1’-二苯基]-3-基]磺酰基]氨基]-5-[5-甲基-1-(三苯基甲基)-1H-咪唑-4-基]-1-氧代戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯在8ml DCM中溶入787mg(2mmol)2-[雙(1-氧代丙基)氨基]-3’甲基[1，1’-二苯基]-3-磺酰氯后0℃下加入1.3g(2mmol)[2R-(1(S)，2α，4β]]-1-[2-氨基-5-[5-甲基-1-(三苯基甲基)-1H-咪唑-4-基]-1-氧代戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯的鹽酸鹽和0.9ml三乙胺。讓混合物溫度回到室溫，蒸發(fā)后剩余物用100ml乙酸乙酯提取。依次用50ml 1N鹽酸溶液，50ml飽和碳酸氫鈉溶液和50ml飽和氯化鈉溶液洗滌，用硫酸鎂干燥后蒸發(fā)至干而得到1.6g產(chǎn)物，可直接將其用于下一步驟(收率＝84％)。
2.4.[2R-[1(S)，2α，4β]]-4-乙基-1-[5-(5-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-[[[3’-甲基-2-[(1-氧代丙基)氨基][1，1’-二苯基]-3-基]磺?；鵠氨基]-1-氧代戊基]哌啶-2-羧酸乙酯的鹽酸鹽將1.6g(1.7mmol)[2R-[1(S)，2α，4β]]-1-[2-[[[2-[雙(一氧代丙基)氨基]-3’甲基[1，1’-二苯基]-3-基]磺酰基]氨基]-5-[5-甲基-1-(三苯基甲基)-1H-咪唑-4-基]-1-氧代戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯溶于85ml乙酸和17ml水中并于回流溫度下加熱6小時。蒸發(fā)至干后用100ml乙酸乙酯提取并依次用20ml飽和碳酸氫鈉溶液和10ml飽和氯化鈉溶液洗滌后蒸發(fā)至干。剩余物經(jīng)硅膠柱色層分離法提純(用DCM/乙醇(95∶5)混合物洗脫)而得到1g堿形式的產(chǎn)物。用0.1N鹽酸中的異丙醇溶液得到鹽酸鹽后再減壓濃縮。剩余物再經(jīng)RP18柱提純(用乙腈∶水(1∶1)混合物洗脫)。凍干而得到893mg產(chǎn)物(收率＝67％)。
Pf＝140℃[α]＝+115°(c＝0.2；甲醇)實施例3(化合物No.3)[2R-[1(S)，2α，4β]]-4-乙基-1-[5-(5-甲基-1H-咪唑-4-基)-1-氧代-2-[[[2-[(1-氧代丙基)氨基][1，1’-二苯基]-3-基]磺?；鵠氨基]戊基]哌啶-2-羧酸乙酯的鹽酸鹽3.1.2-[雙(1-氧代丙基)氨基][1，1’-二苯基]-3-磺酰氯按實施例2所述方法用2-氨基-[1，1’-二苯基]-3-磺酸和丙酸酐得到產(chǎn)物。
Pf＝113.8℃3.2.[2R-[1(S)，2α，4β]]-1-[2-[[[2-[雙(1-氧代丙基)氨基][1，1’-二苯基]-3-基]磺?；鵠氨基]-5-[5-甲基-1-(三苯基甲基)-1H-咪唑-4-基]-1-氧代戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯將1.88g(4.85mmol)2-[雙(1-氧代丙基)氨基][1，1’-二苯基]-3-磺酰氯溶于20mlDCM中并將混合物置于0℃下。加入2.99g(4.5mmol)[2R-[1(S)，2α，4β]]-1-[2-氨基-5-[5-甲基-1-(三苯基甲基)-1H-咪唑-4-基]-1-氧代戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯的鹽酸鹽并滴加入1.6ml三乙胺。在該溫度下攪拌過夜后減壓濃縮，剩余物用100ml乙酸乙酯提取后依次用50ml 1N鹽酸溶液，50ml飽和碳酸氫鈉溶液和50ml飽和氯化鈉溶液洗滌。用硫酸鎂干燥后減壓濃縮。剩余物經(jīng)硅膠柱色層分離法提純(用DCM/甲醇(98∶2)混合物洗脫)而得到2.9g產(chǎn)物(收率＝62％)。
3.3[2R-[1(S)，2α，4β]]-4-乙基-1-[5-(5-甲基-1H-咪唑-4-基-1-氧代-2-[[[2-[(1-氧代丙基)氨基][1，1’-二苯基]-3-基]磺酰基]氨基]戊基]哌啶-2-羧酸乙酯的鹽酸鹽向2.9g(3mmol)[2R-[1(S)，2α，4β]]-1-[2-[[[2-[雙(1-氧代丙基)氨基][1，1’-二苯基]-3-基]磺?；鵠氨基]-5-[5-甲基-1-(三苯基甲基)-1H-咪唑-4-基]-1-氧代戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯中加入150ml乙酸和50ml水并于回流溫度下將混合物加熱6.5小時。蒸發(fā)至干后剩余物經(jīng)硅膠柱色層分離法提純(用DCM/甲醇(95∶5)混合物洗脫)而得到1.7g堿形式的產(chǎn)物。用10ml在0.1N鹽酸的異丙醇溶液得到鹽酸鹽后再減壓濃縮。剩余物經(jīng)RP18柱提純(用乙腈∶水(1∶1)混合物洗脫)而得到1.3g鹽酸鹽形式的產(chǎn)物(收率＝63％)。
Pf＝104-105℃[α]＝+105°(c＝0.2；甲醇)實施例4(化合物No.29)[2R-[1(S)，2α，4β]]-4-乙基-1-[5-(5-甲基-1H-咪唑-4-基)-1-氧代-2-[[[2-[(1-氧代丙基)氨基]-3-吡啶-2-基苯基]磺?；鵠氨基]戊基]哌啶-2-羧酸乙酯的鹽酸鹽4.1.2-[雙(1-氧代丙基)氨基]-5-溴-3-碘苯磺酸的N，N’-二乙基乙胺鹽回流溫度下將31.7g(66mmol)2-氨基-5-溴-3-碘苯磺酸的N，N-二乙基乙胺鹽在114ml(1.32mol)丙酰氯中的溶液加熱16小時后將反應(yīng)介質(zhì)減壓濃縮并用100ml乙酸乙酯將產(chǎn)物結(jié)晶出來而得到32.5g白色產(chǎn)物晶體(收率＝84％)。
Pf＝124-128℃4.2.2-[雙(1-氧代丙基)氨基]-5-溴-3-碘苯磺酰氯氮氣中0℃下向32.5g(55mmol)2-[雙(1-氧代丙基)氨基]-5-溴-3-碘苯磺酸的N，N-二乙基乙胺鹽在DCM中的溶液中分批加入16.8g(82.4mmo1)五氯化磷。讓溫度回到室溫后回流溫度下將混合物加熱4小時。再倒入200ml乙醚，過濾后將濾液濃縮。剩余物經(jīng)florisilTM柱色層分離法提純(用乙醚/己烷(2∶8)混合物洗脫)后再用乙醚/戊烷混合物重結(jié)晶而得到12g白色產(chǎn)物晶體(收率＝43％)。
Pf＝127-132℃4.3.[2R-[1(S)，2α，4β]]-1-[2-[[[5-溴-3-碘-2-[(1-氧代丙基)氨基]苯基]磺酰基]氨基]-5-[5-甲基-1-(三苯基甲基)-1H-咪唑-4-基]-1-氧代戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯氮氣中0℃下向1.28g(2mmol)[2R-[1(S)，2α，4β]]-1-[2-氨基-5-[5-甲基-1-(三苯基甲基)-1H-咪唑-4-基]-1-氧代戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯的鹽酸鹽在DCM中的溶液中依次加入1.02g(2mmol)-[雙(1-氧代丙基)氨基]-5-溴-3-碘苯磺酰氯后滴加0.69μl(5mmol)三乙胺。0℃下使反應(yīng)介質(zhì)保持?jǐn)嚢?小時后用100ml乙酸乙酯提取。然后依次2次用50ml 0.5N鹽酸，50ml飽和碳酸氫鈉溶液和50ml飽和氯化鈉溶液洗滌。最后用硫酸鎂干燥并減壓濃縮。得到2.1g粘性油狀產(chǎn)物，用100ml四氫呋喃(THF)提取后0℃下用氨氣處理。該溫度下使反應(yīng)介質(zhì)保持?jǐn)嚢?小時后減壓濃縮。剩余物經(jīng)硅膠柱色層分離法提純(用DCM/甲醇(98∶2)混合物洗脫)而得到1.4g粘性油狀產(chǎn)物(收率＝70％)，可直接將其用于下一步驟。
4.4.[2R-[1(S)，2α，4β]]-1-[2-[[[5-溴-2-[(1-氧代丙基)氨基]-3-吡啶-2-基苯基]磺?；鵠氨基]-5-[5-甲基-1-(三苯基甲基)-1H-咪唑-4-基]-1-氧代戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯氬氣中95℃下將2.4ml二甲基甲酰胺(DMF)中含1.2g(1.2mmol)[2R-[1(S)，2α，4β]]-1-[2-[[[5-溴-3-碘-2-[(1-氧代丙基)氨基]苯基]磺酰基]氧基]-5-[5-甲基-1-(三苯基甲基)-1H-咪唑-4-基]-1-氧代戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯，0.53g(1.44mmol)2-(三丁基甲錫烷基)吡啶，14mg(0.07mmol)碘化銅和83mg(0.07mmol)四(三苯基膦)鈀(0)的混合物加熱4小時。然后用100ml乙酸乙酯提取反應(yīng)介質(zhì)，2次用100ml5％碳酸氫鈉溶液洗滌之后用50ml飽和氯化鈉溶液洗滌，用硫酸鎂干燥后減壓濃縮。剩余物經(jīng)硅膠柱色層分離法提純(用DCM/甲醇(98∶2)混合物洗脫)而得到0.72g產(chǎn)物(收率＝63％)，可直接將其用于下一步驟。
Pf＝90-94℃4.5.[2R-[1(S)，2α，4β]]-1-[2-[[[5-溴-2-[(1-氧代丙基)氨基]-3-吡啶-2-基苯基]磺?；鵠氨基]-5-[5-甲基-1H-咪唑-4-基]-1-氧代戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯在含有35ml乙酸和10ml水的混合物中100℃下將0.71g(0.75mmol)[2R-[1(S)，2α，4β]]-1-[2-[[[5-溴-2-[(1-氧代丙基)氨基]-3-吡啶-2-基苯基]磺酰基]氨基]-5-[5-甲基-1-(三苯基甲基)-1H-咪唑-4-基]-1-氧代戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯加熱1小時。反應(yīng)介質(zhì)減壓濃縮后剩余物經(jīng)硅膠柱色層分離法提純(用甲醇/DCM(5∶95)混合物洗脫)而分離出0.452g粘性油狀產(chǎn)物(收率＝83％)，可直接將其用于下一步驟。
4.6.[2R-[1(S)，2α，4β]]-4-乙基-1-[5-(5-甲基-1H-咪唑-4-基)-1-氧代-2-[[[2-[(1-氧代丙基)氨基]-3-吡啶-2-基苯基]磺?；鵠氨基]戊基]哌啶-2-羧酸乙酯的鹽酸鹽回流溫度下將0.45g(0.6lmmol)[2R-[1(S)，2α，4β]]-1-[2-[[[5-溴-2-[(1-氧代丙基)氨基]-3-吡啶-2-基苯基]磺?；鵠氨基]-5-[5-甲基-1H-咪唑-4-基]-1-氧代戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯，0.39g(6mmol)甲酸銨和50mg 10％鈀/炭在8ml甲醇和0.2ml乙酸中的混合物加熱4小時。然后將反應(yīng)介質(zhì)減壓濃縮，剩余物經(jīng)硅膠柱色層分離法提純(用DCM/甲醇(95∶5)混合物洗脫)而得到0.36g粘性油狀產(chǎn)物(收率＝81％)，并按實施例3所述方法得到鹽酸鹽。
Pf＝78-84℃[α]＝+91°(c＝0.2；甲醇)實施例5(化合物No.25)[2R-[1(S)，2α，4β]]-4-乙基-1-[5-(5-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-[[[3’，5’-二甲基-2-((1-氧代丁基)氨基][1，1’，-二苯基]-3-基]磺?；鵠氨基]-1-氧代戊基]哌啶-2-羧酸乙酯的鹽酸鹽5.1.2-[(3’，5’-二甲基)-2-(1-氧代丁基)氨基][1，1’-二苯基]-3-磺酸的N，N-二乙基乙胺鹽在9.3ml(50mmol)丁酸酐中80℃下將2g(7.2mmol)2-氨基-3’，5’-二甲基[1，1’-二苯基]-3-磺酸加熱2小時。讓介質(zhì)溫度回到室溫并減壓濃縮。剩余物經(jīng)RP18柱色層分離法提純(用乙腈/水(2∶8)混合物洗脫)而得到1.5g白色產(chǎn)物固體(收率＝60％)，再按實施例2所述方法得到三乙胺鹽，可直接將其用于下一步驟。
5.2.2-[(3’，5’-二甲基)-2-[(1-氧代丁基)(三氟乙?；?氨基][1，1’-二苯基]-3-磺酸的N，N-二乙基乙胺鹽回流溫度下將1.48g(3.3mmol)2-[(3’，5’-二甲基)-2-(1-氧代丁基)氨基][1，1’-二苯基]-3-磺酸的N，N-二乙基乙胺鹽和4.7ml(33mmol)三氟乙酸酐的混合物加熱1小時后將反應(yīng)介質(zhì)減壓濃縮而得到1.8g粘性油狀產(chǎn)物(收率＝100％)，可直接將其用于下一步驟。
5.3.2-[(3’，5’-二甲基)-2-[(1-氧代丁基)(三氟乙酰基)氨基][1，1’-二苯基]-3-磺酰氯氮氣中室溫下向1.8g(3.3mmol)2-[(3’，5’-二甲基)-2-[(1-氧代丁基)(三氟乙?；?氨基][1，1’-二苯基]-3-磺酸的N，N-二乙基乙胺鹽在10mlDCM中的溶液中加入1.37g(6.6mmol)五氯化磷，混合物于回流溫度下加熱4小時后讓反應(yīng)介質(zhì)溫度回到室溫，再倒入100ml乙醚，過濾后減壓濃縮。這樣得到的剩余物經(jīng)florisilTM柱色層分離法提純(用DCM洗脫)而得到0.78g粘性油狀產(chǎn)物(收率＝51％)，可直接將其用于下一步驟。
RMN(CDCl3)，200Mhz，δ(ppm)8.3(dd，1H，J＝6.5Hz，J＝0.7Hz)；7.85-7.7(m，2H)；7.15-7.00(m，1H)；6.8(s，2H)；2.5-2.3(m，7H)；1.75-1.5(m，3H)；0.9(t，3H，6Hz)5.4.[2R-[1(S)，2α，4β]]-4-乙基-1-[5-(5-甲基-1H-咪唑-4-基)-2-[[[3’，5’-二甲基-2-[(1-氧代丁基)氨基][1，1’-二苯基]-3-基]磺?；鵠磺基]-1-氧代戊基]哌啶-2-羧酸乙酯的鹽酸鹽氮氣中0℃下向0.554g(1.2mmol)2-[(3’，5’-二甲基)-2-[(1-氧代丁基)(三氟乙?；?氨基][1，1’-二苯基]-3-磺酰氯在5mlDCM中的溶液中加入0.815g(1.2mmol)[2R-[1(S)，2α，4β]]-1-[2-氨基-5-[5-甲基-1-(三苯基甲基)-1H-咪唑-4-基]-1-氧代戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯的鹽酸鹽并滴加入0.56ml(4mmol)三乙胺。讓反應(yīng)介質(zhì)在該溫度下攪拌保持6小時后減壓濃縮。剩余物用100ml乙酸乙酯提取后依次用50ml 0.5N鹽酸水溶液，50ml 5％碳酸氫鈉水溶液和50ml飽和氯化鈉溶液洗滌后用硫酸鎂干燥。有機(jī)相再進(jìn)行減壓濃縮而得到1g產(chǎn)物，可直接將其用于下一步驟。
在回流溫度下剩余物在含有12ml乙酸，6ml四氫呋喃(THF)和6ml水的混合物中加熱2小時后反應(yīng)介質(zhì)減壓濃縮。剩余物經(jīng)硅膠柱色層分離法提純(用甲醇/水(5∶95)混合物洗脫)而得到0.475g粘性油狀堿產(chǎn)物(收率＝56％)，再將0.475g該堿溶于14ml在0.1N鹽酸中的異丙醇溶液而得到鹽酸鹽。
Pf＝135℃[α]＝+118°(c＝0.2；甲醇)實施例6(化合物No.34)[2R-[1(S)，2α，4β]]-4-乙基-1-[5-(5-甲基-1H-咪唑-4-基)-1-氧代-2-[[[2-[(1-氧代丙基)氨基]-3-噻吩-2-基苯基]磺?；鵠氨基]戊基]哌啶-2-羧酸乙酯的鹽酸鹽6.1.2-[雙(1-氧代丙基)氨基]-噻吩-2-基苯磺酸的N，N-二乙基乙胺鹽將1.9g(7.8mmol)2-氨基-3-噻吩-2-基苯磺酸溶于10mlDCM中，再加入1.3ml(9.4mmol)三乙胺并蒸發(fā)至干。所得鹽再溶于15ml丙酸酐中，混合物于150℃下加熱8小時后蒸發(fā)至干。剩余物經(jīng)硅膠柱色層分離法提純(用DCM/乙醇/三乙胺(98∶2∶0.001)混合物洗脫)后經(jīng)乙酸乙酯重結(jié)晶而得到2.76g產(chǎn)物(收率＝79％)。
6.2.2-[雙(1-氧代丙基)氨基]-3-噻吩-2-基苯磺酰氯
0℃下向2.8g(6.1mmol)2-[雙(1-氧代丙基)氨基]-3-噻吩-2-基苯磺酸的N，N-二乙基乙胺鹽在6mlDCM中的溶液中加入1.3g(6.1mmol)五氯化磷，然后讓混合物溫度回到室溫?；旌衔镉诨亓鳒囟认录訜?小時后讓溫度再回到室溫。加入乙醚，過濾后用乙醚/戊烷(1∶1)混合物使剩余物沉淀出來。過濾后將濾液減壓濃縮后剩余物經(jīng)florisiTM柱色層分離法提純而得到2.2g產(chǎn)物，該產(chǎn)物再用乙醚/戊烷混合物結(jié)晶而得到1.5g白色產(chǎn)物晶體(收率＝55％)。
Pf＝113.6℃6.3.[2R-[1(S)，2α，4β]]-1-[2-[[[2-[(1-氧代丙基)氨基]-3-噻吩-2-基苯基]磺?；鵠氨基]-5-[5-甲基-1-(三苯基甲基)-1H-咪唑-4-基]-1-氧代戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯將0.9g(2mmol)2-[雙(1-氧代丙基)氨基]-3-噻吩-2-基苯磺酰氯溶于8ml DCM中并將混合物置于0℃下。再加入1.3g(2mmol)[2R-[1(S)，2α，4β]]-1-[2-氨基-5-[5-甲基-1-(三苯基甲基)-1H-咪唑-4-基]-1-氧代戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯的鹽酸鹽并滴加入0.9ml三乙胺。在該溫度下攪拌過夜后減壓濃縮，剩余物用100ml乙酸乙酯提取后依次用50ml 1N鹽酸溶液，50ml飽和碳酸氫鈉溶液和50ml飽和氯化鈉溶液洗滌。用硫酸鎂干燥后減壓濃縮。剩余物經(jīng)硅膠柱色層分離法提純(用DCM/甲醇(98∶2)混合物洗脫)而得到2g產(chǎn)物，可直接將其用于下一步驟。
6.4.[2R-[1(S)，2α，4β]]-4-乙基-1-[5-[5-甲基-1H-咪唑-4-基)-1-氧代-2-[[[2-[(1-氧代丙基)氨基]-3-噻吩-2-基苯基]磺酰基]氨基]戊基]哌啶-2-羧酸乙酯的鹽酸鹽向1.9g(2mmol)[2R-[1(S)，2α，4β]]-1-[2-[[[2-[雙(1-氧代丙基)氨基]-3-噻吩-2-基苯基]磺?；鵠氨基]-5-[5-甲基-1-(三苯基甲基)-1H-咪唑-4-基]-1-氧代戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯中加入100ml乙酸和20ml水后在回流溫度下將混合物加熱6小時。蒸發(fā)至干后剩余物用100ml乙酸乙酯提取，用10ml飽和碳酸氫鈉溶液洗滌后用10ml飽和氯化鈉溶液洗滌，再用硫酸鎂干燥后蒸發(fā)至干。剩余物經(jīng)硅膠柱色層分離法提純(用DCM/甲醇梯度洗脫)而得到1.1g堿產(chǎn)物。用10ml在0.1N鹽酸中的異丙醇溶液得到鹽酸鹽后再減壓濃縮。剩余物經(jīng)RP18柱提純(用乙腈/水(1∶1)混合物洗脫)后凍干而得到0.939g鹽酸鹽產(chǎn)物(收率＝67％)。
Pf＝151℃[α]＝+107°(c＝0.2；甲醇)實施例7(化合物No.42)[2R-[1(S)，2α，4β]]-1-[2-[[[2-(乙酰氨基)-3-環(huán)戊基苯基]磺?；鵠氨基]-5-(5-甲基-1H-咪唑-4-基)-1-氧代戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯的鹽酸鹽7.1.2-(二乙?；被?-3-環(huán)戊基苯磺酸的N，N--二乙基乙胺鹽回流溫度下將3.42g(10mmol)2-氨基-3-環(huán)戊基苯磺酸的N，N-二乙基乙胺鹽在100ml乙酰氯中的溶液加熱48小時后將反應(yīng)介質(zhì)減壓濃縮而得到4.3g油狀產(chǎn)物(收率＝100％)，可直接將其用于下一步驟。
7.2.2-(二乙?；被?-3-環(huán)戊基苯磺酰氯回流溫度下將1.55g(3.6mmol)2-(二乙?；被?-3-環(huán)戊基苯磺酸和1.12g(5.4mmol)五氯化磷在10ml DCM中的溶液加熱2.5小時，然后將反應(yīng)介質(zhì)減壓濃縮。所得剩余物經(jīng)florisilTM柱色層分離法提純(用DCM洗脫)而得到0.62g粘性油狀產(chǎn)物(收率＝50％)，可直接將其用于下一步驟。
7.3.[2R-[1(S)，2α，4β]]-1-[2-[[[2-(二乙酰基氨基)-3-環(huán)戊基苯基]磺?；鵠氨基]-5-[5-甲基-1-(三苯基甲基)-1H-咪唑-4-基]-1-氧代戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯氮氣氛中0℃下向0.77g(1.2mmol)[2R-[1(S)，2α，4β]]-1-[2-氨基-5-[5-甲基-1-(三苯基甲基)-1H-咪唑-4-基]-1-氧代戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯的鹽酸鹽和0.37ml(2.64mmol)三乙胺在5mlDCM中的混合物中滴加入0.35g(1mmol)2-(二乙?；被?-3-環(huán)戊基苯磺酰氯在1mlDCM中的溶液。反應(yīng)介質(zhì)在該溫度下攪拌6小時后減壓濃縮。剩余物用50ml乙酸乙酯提取后依次用50ml 0.55N鹽酸水溶液，50ml飽和碳酸氫鈉溶液和50ml飽和氯化鈉溶液洗滌，用硫酸鎂干燥后有機(jī)相減壓濃縮?？芍苯訉⑹Ｓ辔镉糜谙乱徊襟E。
7.4.[2R-[1(S)，2α，4β]]-1-[2-[[[2-(乙酰氨基)-3-環(huán)戊基苯基]磺酰基]氨基]-5-(5-甲基-1H-咪唑-4-基)-1-氧代戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯的鹽酸鹽回流溫度下將[2R-[1(S)，2α，4β]]-1-[2-[[[2-(二乙?；被?-3-環(huán)戊基苯基]磺?；鵠氨基]-5-[5-甲基-1-(三苯基甲基)-1H-咪唑-4-基]-1-氧代戊基]-4-乙基哌啶-2-羧酸乙酯在含有8ml乙酸，4ml THF和4ml水的混合物中加熱48小時后將反應(yīng)介質(zhì)減壓濃縮。剩余物用18ml在0.1N鹽酸中的異丙醇溶液提取后再減壓濃縮。剩余物經(jīng)RP18柱色層分離法提純(用乙腈/水(6∶4)混合物洗脫)而得到0.31g鹽酸鹽產(chǎn)物(收率＝50％)。
Pf＝140℃[α]＝+74.5°(c＝0.2；甲醇)下表中的術(shù)語“Sel”表示“鹽”，“chlor.”表示“鹽酸鹽”，“Sel”欄中未標(biāo)明表示產(chǎn)物呈堿形式，“[α]”欄中如無相反說明則c＝0.2；溶劑＝甲醇，“F”表示熔點。
表
已用本發(fā)明化合物進(jìn)行藥物研究，結(jié)果表明這類化合物具有抗血栓或抗凝血性并且可用作為具有活療活性的藥物。
1確定對凝血酶的抑制常數(shù)(Ki)在96孔或井(puit)微孔板的每一孔中放入25μl試驗化合物溶液(研究7種濃度)，50μl將產(chǎn)生顏色的物質(zhì)(研究2種濃度；S2238ChromogénixTM)溶于pH7.5的Tris緩沖液(50mM Tris，100mM NaCl和0.1％BSA)的溶液以及最后的25μl濃度為300U/ml的凝血酶溶液。用孔板讀數(shù)儀監(jiān)測405nm下4-硝基苯胺的釋放過程。
Ki值按Dixon方法測定。
本發(fā)明化合物為凝血酶抑制劑，其Ki值為0.001至100μM之間。
2.用人凝血酶體使鼠血漿凝固經(jīng)i.v.，口服或皮下途經(jīng)用試驗化合物或載體處理重150-200g的雄性CD鼠。然后用NembutalTM(60mg/kg；0.1ml/kg)麻醉這些動物，再用3.8％檸檬酸三鈉(1vol/9vol血液)從后眶竇取血樣并在室溫下經(jīng)3600g離心作用15分鐘而制成血漿。然后在37℃將200μl血漿與200μl人凝血酶溶液一起培育，其中最終人凝血酶濃度達(dá)到0.75NIH單位/ml，且注意凝血時間?？鼓Ч硎緸槭鼓獣r間延長100％的劑量。本發(fā)明化合物在0.01-5mg/kg i.v.劑量下可抑制鼠血漿凝結(jié)或凝固。這些化合物經(jīng)口服和皮下途經(jīng)應(yīng)用時亦顯示出活性。
3.人凝血酶誘發(fā)的兔血小板聚集或凝集通過心臟穿刺術(shù)用3.8％檸檬酸三鈉(1vol/9vol血液)抽取血樣，并將其經(jīng)250g離心作用10分鐘。再抽取這樣得到的富含血小板(P3P)的血漿并且將血小板計數(shù)。
將溶于冰冷的pH9.0 Tris緩沖液的2ng/ml的前列環(huán)素加入P3P之中?；旌衔锝?jīng)110g離心作用10分鐘后傾析。再次加入溶于pH12的50mM氫氧化鈉中的前列環(huán)素，以達(dá)到200ng/ml的最終濃度。之后再讓P3P經(jīng)800g離心作用10分鐘。取出貧血小板的血漿并將沉淀物懸浮在含有200ng/ml的前列環(huán)素并且其體積等于最初P3P體積的tyrode之中。該懸浮液經(jīng)800g離心作用10分鐘。在相同的條件下重復(fù)進(jìn)行沉淀物的懸浮和離心作用。將最終的沉淀物懸浮在不含前列環(huán)素的tyrode溶液之中并將其放置2小時以使前列環(huán)素完全去除。用最終濃度為0.3NIH單位/ml的人凝血酶誘發(fā)這些血小板聚集。再應(yīng)用4通道集料稱量計記錄光密度的變化。將試驗化合物或其載體加入血小板懸浮液中(所加最大體積為3μl)，2分鐘后加入凝血酶。最后測定50％抑制聚集的濃度(IC50)。
本發(fā)明化合物可用于所有與血栓形成有關(guān)的臨床病癥或可能涉及到凝血或血栓形成并發(fā)癥的病癥。
在這方面，本發(fā)明化合物可與適當(dāng)賦形劑一起制成所有適宜于口服，胃腸外或靜脲內(nèi)給藥的劑型如片，糖衣丸，明膠膠囊，膠囊劑，可飲用或可注射的懸浮液或溶液等。所有這些劑型均配制成1-1000mg/天/病人的給藥量，該劑量可一次或分多次服用。
權(quán)利要求
1.下式(I)所示 其中R1是氫或(C1-C4)烷基，R2是氫或直鏈或支鏈(C1-C4)烷基，R3是直鏈或支鏈(C1-C7)烷基，-(CH2)nOCH3基團(tuán)(其中n是1，2或3)或-CH2O(C2H4O)mCH3基團(tuán)(其中m是1，2或3)，R4是氫或鹵原子，R5是直鏈或支鏈(C1-C4)烷基，以及A是任選由一或多個選自鹵原子和直鏈或支鏈(C1-C4)烷基，直鏈或支鏈(C1-C4)烷氧基以及三氟甲基的取代基取代的苯基，或是選自任選按上述取代的吡啶基，噻吩基和呋喃基的雜環(huán)，或是(C5-C8)環(huán)烷基，該化合物可呈游離堿或藥用酸加成鹽形式。
2.權(quán)利要求1的化合物，其特征在于其中R3是直鏈或支鏈(C1-C7)烷基，以及A是選自任選由一或多個選自鹵原子和直鏈或支鏈(C1-C4)烷基，直鏈或支鏈(C1-C4)烷氧基以及三氟甲基的取代基取代的吡啶基，噻吩基呋喃基的雜環(huán)。
3.權(quán)利要求1和2中任一項的化合物，其特征在于其中哌啶基優(yōu)選構(gòu)型是(2R，4R)。
4.權(quán)利要求1-3中任一項的化合物，其特征在于中間氨基酸部分的構(gòu)型為[S]
5.權(quán)利要求1的化合物制備方法，其特征在于將式(II)磺酸 其中A和R4如權(quán)利要求1所述，與式(III)酰氯反應(yīng)R3COCl(III)其中R3如權(quán)利要求1所述，然后加入三乙胺以得到式(IV)三乙胺鹽 再將該化合物與三氟乙酸酐反應(yīng)而得到式(V)化合物 之后將該化合物與五氯化磷反應(yīng)而得到式(VI)化合物 此后將該化合物與式(VII)胺的鹽酸鹽縮合 其中R1，R2和R5如權(quán)利要求1所述，然后再于酸性介質(zhì)中處理以得到式(I)化合物(其中R2是直鏈或支鏈(C1-C4)烷基)，其中若想得到式(I)中R2是氫的化合物，則可將所得化合物皂化。
6.式(Ia)權(quán)利要求1的化合物制備方法 其中R’3是直鏈或支鏈(C1-C7)烷基，其特征在于將式(II)化合物與式(IIIa)酰氯反應(yīng)R’3COCl (IIIa)或與式(IIIb)酸酐反應(yīng)(R’3CO)2O(IIIb)得到對稱的酰亞胺，再用其得到式(Va)的三乙胺鹽 然后用五氯化磷處理該化合物而得到式(VIa)化合物 再將該化合物與式(VII)胺的鹽酸鹽反應(yīng)之后在酸性介質(zhì)中處理而得到式(Ia)化合物(其中R2是直鏈或支鏈(C1-C4)烷基)，其中若想得到式(Ia)中R2是氫的化合物，則可將所得化合物皂化。
7.式(Ia)化合物制備方法，其特征在于式(IIb)化合物 其中R4是鹵原子，用三乙胺處理后將所得鹽與式(IIIa)酰氯反應(yīng)R’3COCl(IIIa)其中R’3是直鏈或支鏈(C1-C7)烷基，而得到式(IVb)化合物 該化合物經(jīng)五氯化磷作用而得到式(VIb)化合物 再將該化合物與式(VII)胺的鹽酸鹽反應(yīng)后在堿性介質(zhì)中處理而得到式(VIII)化合物 該化合物再與式(IX)化合物反應(yīng)ASn(R)3(IX)其中A如權(quán)利要求1所述，而R是(C1-C4)烷基，形成式(X)化合物 在酸性介質(zhì)中將該化合物加熱到回流溫度而得到式(Ia)化合物(其中R4是鹵原子)，其中若想到式(Ia)中R4是氫原子的化合物，則可將所得化合物氫解，而若想得到式(Ia)中R2是氫原子的化合物，則可將所得化合物皂化。
8.式(XI)化合物 其中R8是氫或三氟乙?；?，R9是-COR3基團(tuán)(其中R3如上述)，和R7是羥基，或R8是三氟乙?；?，R9是-COR3基團(tuán)，和R7是氯原子，或R8和R9分別是-COR’3基團(tuán)(其中R’3如上述)，和R7是氯原子或羥基，Z是碘原子或任選由一或多個選自鹵原子和直鏈或支鏈(C1-C4)烷基，直鏈或支鏈(C1-C4)烷氧基或三氟甲基的取代基取代的苯基，或是選自任選按上述取代的吡啶基，噻吩基，呋喃基的雜環(huán)，或是(C5-C8)環(huán)烷基，以及R4如上述。該化合物可用作合成權(quán)利要求1所述化合物的中間體。
9.藥劑，其特征在于其中包括權(quán)利要求1-4中任一項所述的化合物。
10.藥物組合物，其特征在于其中含有權(quán)利要求1-4中任一項所述的化合物以及任何藥用的賦形劑。
全文摘要
式(I)所示游離堿或藥用酸加成鹽化合物及其藥用，其中R
文檔編號C07K5/078GK1131153SQ9512145
公開日1996年9月18日 申請日期1995年12月22日 優(yōu)先權(quán)日1994年12月23日
發(fā)明者J·M·阿爾滕堡格, G·拉薩利 申請人:合成實驗室公司