咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽及其制備方法和應用
【專利摘要】本發(fā)明提供一種咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽及其制備方法和應用。該咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽具有如下通式(1)，該通式(1)中，R1選自于?CHO、?M1OH、?OM2、?CH2?NH?M3、?COOM2或?O?CH2?NH?M3，且M1為低級亞烷基、M2為低級烷基、M3為與?NH?形成五元或六元環(huán)的烴基；R2選自于氫、低級烷基、低級烷氧基、芐基、羥基、巰基、酯基、?；蝓０坊１景l(fā)明提供的咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽水溶解度較好，作為小分子的微管蛋白抑制劑不僅具有抗微管作用，還具有優(yōu)異的體內(nèi)抗腫瘤活性，同時該咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽分子量小，合成簡單且毒副作用小。
【專利說明】
咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽及其制備方法和應用
技術領域
[0001] 本發(fā)明涉及一種咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽及其制備方法和應用，屬于醫(yī)藥技 術領域。
【背景技術】
[0002] 隨著腫瘤生物學研究的飛速發(fā)展以及科學家對腫瘤致病機制認識的不斷深入，新 的抗腫瘤治療靶點和具有新型作用機制的抗腫瘤藥物日益成為研發(fā)的熱點。這些新型的抗 腫瘤藥物，如化療增敏劑、蛋白酶抑制劑、血管生成抑制劑、受體拮抗劑等，利用腫瘤生長和 轉(zhuǎn)移過程中的生物學特性，選擇性的抑制腫瘤細胞生長和轉(zhuǎn)移過程，可以在一定程度上克 服細胞毒性藥物在治療實體瘤方面的局限性，從而在腫瘤治療中顯示出廣泛的應用前景。 腫瘤細胞具有快速增殖能力，通過有絲分裂來維持細胞的形態(tài)、功能和增殖，若阻斷有絲分 裂的過程即可導致腫瘤細胞增值受阻，基于微管在有絲分裂過程中發(fā)揮的重要作用，以微 管為靶點的抗腫瘤藥物成為研究的熱點。
[0003] 微管(Microtubule,MT)是由微管蛋白（Tubulin)裝配而成的長絲管狀結(jié)構(gòu)，廣泛 存在于真核細胞中，呈網(wǎng)狀和束狀分布。微管與其他蛋白共同組裝成紡錘體、基粒、中心粒、 纖毛、鞭毛、軸突和神經(jīng)管等結(jié)構(gòu)，在維持細胞形態(tài)、細胞增殖、物質(zhì)運輸及信號轉(zhuǎn)導等方面 扮演著重要角色，是抗腫瘤藥物重要靶點之一。
[0004] 微管蛋白由分別含有455個氨基酸的α亞基和450個氨基酸的β亞基組成，分子量約 為110-kDaw亞基和β亞基上分別有一個三磷酸鳥苷(GTP)的結(jié)合位點，其中，結(jié)合在α亞基 上的GTP不發(fā)生水解，只有結(jié)合在β亞基上的GTP在裝配過程中水解為二磷酸鳥苷(GDP)，為 裝配提供能量的同時也控制著聚集方向。
[0005] 微管蛋白抑制劑可以通過與微管蛋白的特殊位點相結(jié)合，抑制微管的聚合或解 聚，使腫瘤細胞有絲分裂過程中紡錘體難以形成，細胞周期阻斷在Μ期，并進一步誘導腫瘤 細胞凋亡。按其與微管蛋白的結(jié)合位點不同大致分為三類:紫杉醇位點抑制劑、長春新堿位 點抑制劑和秋水仙堿位點抑制劑。目前，紫杉醇和長春堿類抗腫瘤藥物在癌癥治療方面占 據(jù)了重要地位，但也存在以下弊端:作為一種大的天然產(chǎn)物，其合成的難度很大，生物利用 度差，有毒副作用，特別是多重耐藥的糖蛋白（P-gp)的出現(xiàn)，使其治療的有效性受到了嚴重 的挑戰(zhàn)，在某種程度上限制了紫杉醇和長春堿類微管蛋白抑制劑的開發(fā)和應用。因此，合成 新型的具有良好藥理學性質(zhì)的、對各類腫瘤細胞有效的小分子微管蛋白抑制劑是非常有必 要的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明提供一種咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽，其作為小分子的微管蛋白抑制劑 不僅具有抗微管作用，還具有顯著的抗腫瘤活性，同時該咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽分 子量小，合成簡單且毒副作用小。
[0007] 本發(fā)明還提供了制備該類咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽的方法。
[0008] 本發(fā)明還提供了含有該咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽作為活性成分的藥物組合 物。
[0009] 本發(fā)明還提供了該類咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽作為抗腫瘤藥物的應用，其可 以作為微管蛋白抑制劑，尤其是治療實體腫瘤中的應用，包括與其它抗腫瘤的化療藥物和 放療等的聯(lián)合應用。
[0010] 本發(fā)明首先提供一種咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽，其具有如下通式(1):
[0012] 其中，Ri選自于-CH0、-MlOH、-0M2、-CH2-NH-M3、-C00M2或-O-CH2-NH-M3，且 Ml為低級 亞烷基、M2為低級烷基、M3為與-NH-形成五元或六元環(huán)的烴基；
[0013] 辦選自于氫、低級烷基、低級烷氧基、芐基、羥基、巰基、酯基、酰基或酰胺基。
[0014] 本發(fā)明中所述的"低級烷基"尤其是指碳原子數(shù)在1-6的直鏈或支鏈的烷基或環(huán)烷 基，例如，甲基、乙基、正丙基、異丙基、烯丙基、環(huán)丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、環(huán) 丁基、正戊基、異戊基、環(huán)戊基、正己基、異己基、環(huán)己基等。上述具有通式（1)的化合物中例 如可為甲基、乙基、正丙基、異丙基等。
[0015] 所述的"低級亞烷基"尤其是指碳原子數(shù)在1-6的直鏈或支鏈的亞烷基或亞環(huán)烷 基，例如，亞甲基、亞乙基、亞丙基、亞異丙基、亞丁基、亞異丁基、亞環(huán)丁基、亞戊基、亞異戊 基、亞環(huán)戊基、亞己基、亞異己基、亞環(huán)己基等。上述具有通式（1)的化合物中例如可為亞甲 基、亞乙基、亞丙基、亞異丙基等。
[0016] "低級烷氧基"指碳原子數(shù)為1-6個的烷氧基，如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧 基、正丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、異戊氧基、正己氧基、異己氧基等。 上述具有通式(1)的化合物中例如可為甲氧基、乙氧基或丙氧基等
[0017] "酰胺基"可以是甲基酰胺基、乙基酰胺基、正丙基酰胺基、異丙基酰胺基、烯丙基 酰胺基、環(huán)丙基酰胺基、正丁基酰胺基、異丁基酰胺基、正戊基酰胺基、正己基酰胺基、苯基 酰胺基、甲苯基酰胺基等。所述r 2為氫或低級烷基。
[0018] 上述具有通式（1)的化合物中，M3與-NH-形成的五元或六元環(huán)為嗎啉環(huán)、哌嗪環(huán)、 哌啶環(huán)或吡咯環(huán)。
[0019] 上述具有通式（1)的化合物中，R1可以為6位或7位的取代基，例如R1可以為位于咔 唑環(huán)的6位或7位的醛基、芐醇基、低級烷氧基羰基、嗎啉基低級亞烷基、N-低級烷基哌嗪基、 哌嗪基低級亞烷基、吡咯基低級亞烷基、N-低級烷基哌嗪基低級烷氧基、吡咯基低級烷氧 基、哌嗪基低級烷氧基、吡咯基哌啶基低級烷氧基、嗎啉基低級烷氧基、N-低級烷基哌嗪基 低級烷氧基。
[0020] 上述具有通式（1)的具體化合物中，R2可以為氫或低級烷基，例如R2是氫、甲基、乙 基等。
[0021] 本發(fā)明咔唑磺酰胺衍生物，其非限定性的示例有：
[0022] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6_醛基-9-甲基-3-咔唑磺酰胺（13c);
[0023] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-7-醛基-9-甲基-3-咔唑磺酰胺（13e);
[0024] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-7-芐醇-9-甲基-3-咔唑磺酰胺（13h);
[0025] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-7-甲氧羰基-9-甲基-3-咔唑磺酰胺（13i);
[0026] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-芐醇-9-甲基-3-咔唑磺酰胺（13k);
[0027] N-( 2,6-二甲氧基吡啶-3-基）-6-(4-嗎啉基亞甲基）-9-甲基-3-咔唑磺酰胺 (14a)；
[0028] N-( 2,6-二甲氧基吡啶-3-基）-7-(4-嗎啉基亞甲基）-9-甲基-3-咔唑磺酰胺 (14b);
[0029] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-( (N-甲基哌嗪-1-基)亞甲基)-9-甲基-3-咔唑磺 酰胺（14c);
[0030] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-7-( (N-甲基哌嗪-1-基)亞甲基)-9-甲基-3-咔唑磺 酰胺（14d);
[0031] N-( 2,6-二甲氧基吡啶-3-基）-6-(哌嗪-1-基亞甲基）-9-甲基-3-咔唑磺酰胺 (14e)；
[0032] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基）-6-(哌啶-1-基亞甲基）-9-甲基-3-咔唑磺酰胺 (14f)；
[0033] N-( 2,6-二甲氧基吡啶-3-基）-6-(吡咯-1-基亞甲基）-9-甲基-3-咔唑磺酰胺 (14g)；
[0034] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(2-氯乙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺（15a);
[0035] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(2-(4-嗎啉基)-乙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺 (15b);
[0036] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(2-(N-甲基哌嗪-1-基)-乙氧基)-9-甲基-3-咔 唑磺酰胺(15c);
[0037] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(2-(哌啶-1-基)-乙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰 胺(15d);
[0038] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(2-(吡咯-1-基)-乙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰 胺(15e);
[0039] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(2-(哌嗪-1-基)-乙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰 胺（15f);
[0040] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(2-(4-(吡咯-1-基）哌啶-1-基)-乙氧基)-9-甲 基-3-咔唑磺酰胺（15g);
[0041 ] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(3-氯丙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰(16a);
[0042] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(3-(4-嗎啉基)-丙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺 (16b)；
[0043] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(3-(N-甲基哌嗪-1-基)-丙氧基)-9-甲基-3-咔 唑磺酰胺(16c);
[0044] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(3-(哌啶-1-基)_丙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰 胺（16d);
[0045] N-(2,6_二甲氧基吡啶-3-基)-6-(3-(吡咯-1-基)_丙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰 胺(16e);
[0046] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(3-(哌嗪-1-基)_丙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰 胺（16f);
[0047] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(3-(4-(吡咯-1-基）哌啶-1-基)-丙氧基)-9-甲 基-3-咔唑磺酰胺（16g)。
[0048] 作為一類新的小分子微管蛋白抑制劑，經(jīng)藥理實驗表明，該類化合物不僅能將腫 瘤細胞阻斷在有絲分裂(M)期，還具有顯著的抗腫瘤活性。
[0049] 本發(fā)明進一步提供了該咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽作為微管蛋白抑制劑的應 用，及在制備抗腫瘤藥物中的應用。
[0050] 本發(fā)明另一方面還提供了一種抗腫瘤藥物組合物，其包括治療有效量的上述咔唑 磺酰胺衍生物或其藥用鹽及藥學上可接受的藥用輔料。可將化合物本身或其藥用鹽與藥用 賦形劑、稀釋劑等混合制備成片劑、膠囊、顆粒劑、散劑、糖漿劑或注射劑等劑型。
[0051] 上述制劑可通過常規(guī)制藥方法制備。可用的藥用輔劑的例子包括賦形劑(例如糖 類衍生物如乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和山梨糖醇;淀粉衍生物如玉米淀粉、土豆淀粉、 糊精和羧甲基淀粉;纖維素衍生物如結(jié)晶纖維素、羥丙基纖維素、羧甲基纖維素、羧甲基纖 維素鈣、羧甲基纖維素鈉;阿拉伯膠;右旋糖酐;硅酸鹽衍生物如偏硅酸鎂鋁;磷酸鹽衍生物 如磷酸鈣;碳酸鹽衍生物如碳酸鈣;硫酸鹽衍生物如硫酸鈣等）、粘合劑(例如明膠、聚乙烯 吡咯烷酮和聚乙二醇）、崩解劑(例如纖維素衍生物如羧甲基纖維素鈉、聚乙烯吡咯烷酮）、 潤滑劑(例如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、鯨蠟、硼酸、苯甲酸鈉、亮氨酸）、穩(wěn)定劑(對羥基苯 甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯等）、矯味劑(例如常用的甜味劑、酸味劑和香料等）、稀釋劑和 注射液用溶劑(例如水、乙醇和甘油等）。
[0052] 本發(fā)明化合物的給藥量隨患者的年齡、性別和病情等的不同而不同。一般成人的 給藥量為大約50-5000mg/次，可以按照100-3000mg/次，1-3次/日給藥。
[0053]本發(fā)明的咔唑磺酰胺衍生物或其可藥用鹽可以通過任何可行的方法獲得，本發(fā)明 的具體實施方案中，利用適當結(jié)構(gòu)的咔唑磺酰氯化合物與2，6_二甲氧基-3-氨基吡啶反應 得到。在具體合成中可以根據(jù)目的化合物中的結(jié)構(gòu)設計來確定起始物和反應物。
[0054]例如本發(fā)明提供的咔唑磺酰胺衍生物或其可藥用鹽的制備方法，可以選擇化合物 (2)所示的咔唑磺酰氯化合物與2,6_二甲氧基-3-氨基吡啶反應，如反應式(2)所示：
[0056] 在此基礎上，按照的設計，進一步將產(chǎn)物中醛基轉(zhuǎn)化為目的基團。
[0057] 所以，進一步地，當心為羥甲基、甲氧基、芐胺類基團或其鹽、醚烷胺類基團或其鹽 時，可將上述反應產(chǎn)物中的醛基進一步轉(zhuǎn)化為相應基團以制備具有通式（1)結(jié)構(gòu)的咔唑磺 酰胺，具體反應過程可參照現(xiàn)有技術中的方法。
[0058] 其中辦選自于氫、低級烷基、低級烷氧基、芐基、羥基、巰基、酯基、?；蝓０坊?。 [0059] 具有式味唑磺酰氯化合物可以通過參考文獻(Mitsumori，Susum;Tsuri，Tatsuo; Honma,Tsunetoshi；et al.Journal of Medicinal Chemistry(2003),46(12),2436-2445) 的方法或其它相關報道的方法合成。然后，在有機溶劑中該咔唑磺酰氯與2,6-二甲氧基-3-氨基吡啶反應，該過程中的反應條件(溫度、時間、催化劑等）的選擇均為常規(guī)知識，例如，溶 劑可為二甲基甲酰胺(DMF)，在堿性物質(zhì)例如三乙胺(NEt 3)、吡啶(Py)、碳酸鹽等催化下（也 可不加入催化劑)反應，反應時間一般在1-2小時，采用色譜法(簡單的點板方法)可以測知 反應的結(jié)束。
[0060]得到的咔唑磺酰胺衍生物可以參照現(xiàn)有技術中的方法制備成藥用鹽，該藥用鹽例 如可包括與無機酸，如鹽酸、硫酸形成的鹽，與有機酸，如乙酸、三氟乙酸、檸檬酸、馬來酸、 草酸、琥珀酸、苯甲酸、酒石酸、富馬酸、扁桃酸、抗壞血酸或蘋果酸形成的鹽，以及氨基酸， 如丙氨酸、天冬氨酸、賴氨酸形成的鹽，或與磺酸，如甲磺酸、對甲苯磺酸形成的鹽。具體的 制備方法可例如，在冰浴條件下，將得到的咔唑磺酰胺衍生物溶于適量的無水甲醇中，滴入 選定酸的醇溶液并攪拌，反應結(jié)束后提純并固化得藥用鹽固體產(chǎn)品。
[0061 ] 本發(fā)明咔唑磺酰胺衍生物的抗腫瘤活性和藥理實驗
[0062]利用本發(fā)明所制備出的部分咔唑磺酰胺衍生物，發(fā)明人同時提供了以下的實驗結(jié) 果，旨在說明本發(fā)明化合物的藥用功效。
[0063] 一、體外抗腫瘤活性測定
[0064]取培養(yǎng)瓶中指數(shù)生長期細胞(肝癌細胞HepG2和Bel-7402、乳腺癌細胞MCF-7、胰腺 癌細胞MI A PaCa-2)接種于96孔板中，每孔中的細胞數(shù)在4000-8000之間，置37 °C，5 % C02氣 氛中，培養(yǎng)24小時;加入不同濃度的藥物(DMS0的濃度不超過0.5%，v/v)，藥物組設立5個濃 度梯度，設3-4個復孔;繼續(xù)培養(yǎng)48小時后，貼壁細胞用經(jīng)4 °C預冷的50 %三氯乙酸(TCA)固 定，96孔板置于4°C冰箱放置1小時；1小時后，用蒸餾水或者自來水洗滌細胞孔5次，以除去 TCA、培養(yǎng)液、低分子量代謝物以及血清蛋白等;待其細胞板晾干后，用0.4%的SRB染色15-30分鐘；用1 %的乙酸洗滌5次，晾干;加入10mm〇l/L Tris溶液150yL溶解，低速震蕩5-10分 鐘，用酶聯(lián)免疫檢測儀在波長490nm處測定吸收值(0D)。
[0065] 根據(jù)所測得的0D值，按照下列公式計算藥物對細胞的抑制率IC5Q，其作為體外腫瘤 細胞生長抑制活性指標列于表1-3。
[0066] 抑制率=(對照孔0D值-加藥孔0D值)/(對照孔0D值-空白孔0D值）X 100。
[0067] 其中，表1列舉了心為不同取代基的體外抗腫瘤活性(NT代表沒測試），主要考察的 是目標化合物中咔唑環(huán)的Ri基團對抗腫瘤活性的影響，同時考察了咔唑環(huán)上6，7位取代基 對抗腫瘤活性的影響;表2說明不同的醛基以及羥基水溶性衍生物對抗腫瘤活性的影響;表 3列舉了部分咔唑磺酰胺衍生物及其鹽酸鹽抗腫瘤活性的對比。
[0068] 表 1
[0070] 其中，頂B-105，Podo和CA-4為對照藥。由表1可知，本發(fā)明中的化合物普遍對多種 腫瘤細胞均體現(xiàn)出抑制活性。
[0071] 表2中，14a-14g是咔唑磺酰胺化合物的醛基衍生物，15b-15g，16b-16g是咔唑磺酰 胺化合物的羥基衍生物。由表2中數(shù)據(jù)可知，所列舉的咔唑磺酰胺化合物對于多種腫瘤細胞 有抑制活性，尤其對于ifepG2具有較強的抑制活性。
[0072] 表 2
[0073]


[0077]本發(fā)明人還對部分上述咔唑磺酰胺衍生物的鹽酸鹽做了腫瘤細胞抑制活性評價 試驗，如表3所示。表3的數(shù)據(jù)表明，咔唑磺酰胺衍生物的鹽酸鹽同樣具有顯著的抗腫瘤活 性，并且與其對應的原型化合物的抗腫瘤活性幾乎相當。
[0078] 二、小鼠體內(nèi)急性毒性試驗
[0079] 為了初步了解目標化合物的毒性，并為下一步動物體內(nèi)試驗提供一個安全劑量， 本發(fā)明人對部分化合物進行了小鼠體內(nèi)急性毒性預實驗。以14c · HC1和16d · HC1為例，分 別通過腹腔注射和靜脈注射，進行了小鼠體內(nèi)急性毒性預實驗。
[0080] 化合物用生理鹽水稀釋至所需體積（16d · HC1先用5%Tween-80助溶后，再用生理 鹽水稀釋）。給藥劑量為l〇〇〇mg/kg-25mg/kg(不同的化合物設計了不同的給藥計量）；對照 組給予等量的生理鹽水(為含有5 % Tween-80的生理鹽水）。
[0081] 昆明種小鼠（18_20g)按體重平均分組，記錄體重，每組6只，雌雄各半或所為雌性， 給藥前禁食5小時。腹腔注射給藥，給藥體積為0.2mL/只;靜脈注射給藥，給藥體積為0.2mL/ 只。
[0082] 觀察給藥后的一般情況，記錄體重，記錄死亡情況，觀察7天后稱重。表4為腹腔注 射14c · HC1的急性毒性數(shù)據(jù)。表5為腹腔注射16d · HC1的急性毒性數(shù)據(jù)。由表4和表5可知， 14c · HC1 的半數(shù)致死量LD5Q值范圍在200-400mg/kg;16d · HC1 的LD5Q值 100mg/kg左右。
[0083] 表 4
[0084]
[0085] 表 5
[0086]
[0087] 同時，發(fā)明人還對14c · HC1通過尾靜脈注射來考察化合物的毒性。表6為靜脈注射 14c · HC1的急性毒性數(shù)據(jù)。由表6可知，14c · HC1的LD5Q值50-100mg/kg左右。化合物14c · HC1通過尾靜脈注射的毒性是腹腔注射的毒性的4倍，有可能是因為鹽酸鹽化合物通過腹腔 注射進入腹腔，不易透過腸系膜導致進入體循環(huán)的量減少，毒性也相應的減小。
[0088] 表 6
[0089]
[0090]三、化合物的水溶解度試驗
[0091]本發(fā)明人對上述咔唑磺酰胺衍生物的水溶解度進行了測定，具體方法可參照現(xiàn)有 技術。表7為本發(fā)明化合物在不同pH下的水溶解度(NT:無結(jié)果）。如表7所示，與對照藥頂B-105相比，本發(fā)明咔唑磺酰胺化合物的水溶解度都有一定程度的提高。
[0092]具體地，部分含極性基團的化合物的水溶解度在pH= 2.0和7.4兩種條件下較頂B-105提高了 10-100倍;尤其是引入可電離基團（含氮雜環(huán))的化合物，水溶解度提高了上百倍 甚至上千倍;大部分化合物在兩種條件下的水溶解度相當。
[0093]另外，本發(fā)明人還對上述咔唑磺酰胺衍生物的鹽酸鹽也測定了pH = 7.0的水溶解 度。結(jié)果為上述咔唑磺酰胺化合物的大部分鹽酸鹽的水溶解度大于30mg/mL，遠遠高于對照 藥頂B-105。
[0096]四、體內(nèi)抗腫瘤活性測定
[0097]通常，咔唑磺酰胺衍生物的水溶解度和其體內(nèi)活性成一定程度上的正相關性。根 據(jù)上述咔唑磺酰胺衍生物的水溶解度試驗，本發(fā)明人進一步對咔唑磺酰胺衍生物的體內(nèi)抗 腫瘤活性進行了如下試驗。
[0098] 抗人體肝癌BALB/c裸鼠10只（雌性，4-6周齡，體重18-20g)，均采用肝癌HepG2細 胞，裸鼠右側(cè)腋窩皮下接種，10天后瘤體積長到100mm3左右開始分組給藥，空白對照組隔天 給以溶劑，治療組隔天給藥(ip)，對照藥采用頂B-105和Taxol，給藥方式都是腹腔注射。
[0099] 每周測量腫瘤體積直到超過2000mm3時，結(jié)束試驗。腫瘤體積=長X寬2 X 0.52。按 照下式計算給藥組與對照組的腫瘤生長抑制率：
[0100]生長抑制率（％) = (C-T)/CX100
[0101 ] T:給藥組平均腫瘤體積-給藥前平均腫瘤體積
[0102] C:對照組平均腫瘤體積-給藥前平均腫瘤體積
[0103] 根據(jù)初步得到的化合物的LD5Q值進行了三批小鼠體內(nèi)的抑瘤試驗。在BALB/c(nu/ nu)裸鼠右側(cè)腋窩皮下接種的人肝癌!fepG2細胞，給藥方式都是腹腔注射。
[0104] 表8
[0106] 表8的結(jié)果表明14c · HC1腹腔注射100mg/kg，2周治療人肝癌HepG2細胞的抑制率 為55.6%，優(yōu)于11?-105腹腔注射10011^/1^，2周治療人肝癌!1叩62細胞的27.2%，稍弱于 Taxol腹腔注射15mg/kg，2周治療人肝癌Η印G2細胞的58.1%。
[0107] 表9為 14c · HCl(20mg/kg)和 16d · HCl(10mg/kg)對人肝癌Hep-G2裸鼠移植瘤模型 的作用。
[0108] 表9
[0110] 表9和圖1的數(shù)據(jù)結(jié)果表明，14c · HC1腹腔注射20mg/kg，4周治療人肝癌HepG2的瘤 體積抑制率為63.6% ; 16d · HC1腹腔注射10mg/kg，4周治療人肝癌HepG2的瘤體積抑制率為 61.1 %。與對照組相比，兩組治療組裸鼠的體重均未見顯著地變化。腹腔注射10mg/kg 16d · HC1的體內(nèi)抑瘤率分別為61.1%和50.0%，表現(xiàn)出顯著的體內(nèi)抑瘤作用。
[0111] 以上結(jié)果已經(jīng)初步驗證了本發(fā)明的小分子咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽在抗腫 瘤及抑制微管方面的作用，具有良好的應用前景。
【附圖說明】
[0112] 圖1為本發(fā)明的咔唑磺酰胺衍生物的鹽酸鹽用于治療人肝癌HepG2時腫瘤體積隨 接種后天數(shù)的變化曲線。
【具體實施方式】
[0113] 為使本發(fā)明的目的、技術方案和優(yōu)點更加清楚，下面將結(jié)合附圖，對本發(fā)明實施例 中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例是本發(fā)明一部分實施例，而不 是全部的實施例?；诒景l(fā)明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前 提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。
[0114] 實施例1:
[0115] N-( 2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-醛基-9-甲基-3-咔唑磺酰胺（13c)
[0116] 室溫下，N-甲基-6-醛基-3-P鐘坐磺酰氯（12c) (307mg，1 · Ommol)，2，6-二甲氧基-3-氨基吡啶（185mg，1 · 2mmo 1)溶于約1 OmL的DMF中，將碳酸鉀(276mg，2 · Ommo 1)分批加入到上 述溶液中，攪拌約2.Oh。反應液倒入適量的冰水中，用1N的鹽酸水溶液調(diào)其pH值至中性，乙 酸乙酯萃取三次，有機層用清水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，柱層析(PE/ Ac0Et = 3/l)分離純化得類白色固體220mg，產(chǎn)率:52%，熔點：217-219°C</HNMR(DMS0-d6， 400MHz)5ppm3.41(3H,s),3.72(3H,s),4.00(3H,s),6.30(lH,d ,J = 8.4Hz),7.44(lH,d ,J = 8.4Hz) ,7.84(2H,s) ,7.85( lH,d,J = 8.4Hz) ,8.07( lH,dd,J = 8.4,1.6Hz) ,8.62( lH,m), 8·89(lH，d，J=1.6Hz) ,9.41 (lH，s);13CNMR(DMS0-d6，101MHz)Spp m 30.22,53.40,53.87, 101.19,110.61,111.04,112.52,120.75,121.85,122.24,125.47,125.70,127.35,129.64， 132.44,139.94,143.61,145.30,157.28,160.76,192.43；HRMS(ESI+)426.11175,Calcd for C21H20O5N3S 426.11182[M+H] + .
[0117] 實施例2
[0118] N-( 2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-7-醛基-9-甲基-3-咔唑磺酰胺（13e)
[0119] 室溫下，1^-甲基-7-醛基-3-口鐘坐磺酰氯（126)(30711^，1.0_31)，2,6-二甲氧基-3-氨基吡啶（185mg，1 · 2mmo 1)溶于約1 OmL的DMF中，將碳酸鉀(276mg，2 · Ommo 1)分批加入到上 述溶液中，攪拌約1 .〇h。反應液倒入適量的冰水中，用1N的鹽酸水溶液調(diào)其pH值至中性，乙 酸乙酯萃取三次，有機層用清水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，柱層析(PE/ Ac0Et = 2/l)分離純化得類白色固體 150mg，產(chǎn)率35.3%，熔點：232-2341^4^^(01^0-(16, 400MHz)5ppm3.41(3H,s),3.73(3H,s),4.03(3H,s),6.31(lH,d ,J = 8.4Hz),7.44(lH,d ,J = 8.4Hz),7.82(lH,d ,J = 8.0Hz), 7.85(2H,s), 8.27( lH,s), 8.48( lH,d,J = 8.0Hz), 8.60( 1H, s) ,9.41(lH,s),10.18(lH,s)；13CNMR(DMS0-d6,101MHz)5ppm 30.06,53.38,53.87,101.20, 110.36,112.46,112.49,120.76,121.08,121.54,121.77,126.32,126.97,131.80,134.99, 140.04,141.55,144.25,157.31,160.78,193.44；HRMS(ESI+)426.11179,Calcd for C21H20O5N3S 426.11182[M+H] + .
[0120] 實施例3
[0121] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-7-芐醇-9-甲基-3-咔唑磺酰胺（13h)
[0122] 13e(425mg，lmmol)溶于約15mL的THF中，分批加入4倍當量的硼氫化鈉，室溫下攪 拌約30min。反應液倒入適量的冰水中，1N鹽酸溶液調(diào)其pH值至中性。用乙酸乙酯萃取三次， 有機層分別用清水和飽和食鹽水洗滌，無水Na 2S04干燥，過濾，濃縮，柱層析分離純化得類白 色固體290mg，產(chǎn)率約68%，熔點：172-174°C。iHNMI^DMSO-cb，400MHz)δρρπι3.41(3H，s)，3.72 (3H,s) ,3.91 (3H,s), 4.71 (2H,d,J = 5.6Hz), 5.34( lH,t,J = 5.6Hz), 6.29( lH,d,J = 8.4Hz),7.24(lH,d ,J = 8.0Hz), 7.43( lH,d,J = 8.4Hz), 7.61( lH,s), 7.70( lH,s), 7.71( 1H, s)，8.16(lH，d，J = 8.0Hz)，8.44(lH，s)，9.31(lH，s);13CNMR(DMS0-d 6，101MHz)Sppm 29.75， 53.38,53.86,63.88,101.12,107.89,109.47,112.71,119.27,120.01,120.71,120.86， 121.66,124.42,130.78,139.78,142.07,142.42,142.88,157.23,160.67；HRMS(ESI + ) 428.12738,Calcd for C21H22O5N3S 428.12747[M+H]+.
[0123] 實施例4
[0124] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-7-甲氧羰基-9-甲基-3-咔唑磺酰胺（13i)
[0125] 13e(425mg, lmmol)微溶于約20mL的無水甲醇中，加入約5mL H2O2后滴加3滴濃硫 酸，室溫下攪拌約24h。將反應液倒入適量冰水中，用乙酸乙酯萃取三次，有機層用清水和飽 和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，柱層析(PE/AcOEt = 4/1)分離純化得類白色固體 150mg，產(chǎn)率36 · 3 %，熔點：226-228°C。^^?(DMSO-ds，600MHz) δρρπι3 · 41 (3H，s)，3 · 72(3H， s)，3.93(3H，s)，4.00(3H，s) ,6.29(lH，d，J = 8.4Hz)，7.43(lH，d，J = 8.4Hz)，7.83(2H，s)， 7.88(lH,d,J = 8.4Hz) ,8.26( lH,s) ,8.39( lH,d,J = 8.4Hz) ,8.57( lH,s) ,9.39( lH,s)； 13CNMR(DMS〇-d6,151MHz)5ppm29.97,52.69,53.36,53.84,101.14,110.22,111.59,112.50, 120.08,120.71,120.92,121.26,125.89,126.02,128.00,131.60,139.90,141.25,143.93, 157.24,160.71,167.06；HRMS(ESI+)456.12228,Calcd for C22H22O6N3S 456.12238[M+H]+.
[0126] 實施例5
[0127] N-(2,6_二甲氧基吡啶-3-基)-6-芐醇-9-甲基-3-咔唑磺酰胺（13k)
[0128] 室溫下，13c(425mg, 1 .Ommol)溶于約 10mL的THF中，硼氫化鈉(90mg, 1 .Ommol)分批 加入到上述溶液中，繼續(xù)攪拌約2.Oh。反應液倒入適量的冰水中，有固體樣沉淀生成，過濾 得粗產(chǎn)物約420mg，柱層析(PE/AcOEt = 5/4)分離純化得類白色固體350mg，產(chǎn)率84.7 %，熔 (2H,d,5.6Hz) ,5.21( lH,t, 5.6Hz), 6.30( lH,d,J = 8.4Hz) ,7.44( lH,d,J = 8.4Hz) ,7.53 (lH,dd,J = 8.4,1.6Hz),7.63(lH,d,J = 8.4Hz) ,7.70(lH,d,J = 8.4Hz) ,7.74(lH,dd,J = 8.4,1.6Hz),8.14(lH,d ,J=1.2Hz), 8.45( lH,d,J=l. 2Hz), 9.32( lH,s)；13CNMR(DMS0-d6, 101MHz)5ppm29.85,53.41,53.86,63.73,101.11,109.59,109.97,112.73,118.99,120.08, 121.60,121.82,124.62,126.59,130.73,134.86,139.63,141.07,142.92,157.17,160.63; HRMS(ESI+)428.12735,Calcd for C21H22O5N3S 428.12747[M+H]+.
[0129] 實施例6
[0130] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-羥基-9-甲基-3-咔唑磺酰胺（131，中間產(chǎn)物）
[0131] 室溫下，13c (250mg，0.59mmo 1)微溶于無水甲醇中（需要用少許的二氯甲烷助溶）， 加入35%的H2〇2約0. lmL，濃硫酸約0.02mL，反應約3.Oh。將反應液倒入適量的冰水中，乙酸 乙酯萃取三次，有機層用清水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，柱層析(PE/AcOEt =5/4)分離純化得類白色固體17211^，產(chǎn)率70.8%，產(chǎn)率:70.8%，熔點：156-158°(：。 1顯]\? (DMS0-d6,400MHz)5ppm3.44(3H,s),3.73(3H,s),3.85(3H,s),6.29(lH,d,J=8.4Hz),7.04 (lH,dd,J = 8.4,2.4Hz),7.43(lH,d,J = 8.4Hz),7.47(lH,d,J = 8.4Hz),7.48(lH,d,J = 2.4Hz),7.62(lH,d ,J = 8.8Hz), 7.68( lH,dd,J = 8.8,1.6Hz), 8.33( lH,d,J=l. 6Hz), 9.22 (1H, s), 9.28( 1H, s) ； 13CNMR(DMS〇-de, 101MHz )5ppm29.76,53.41,53.85,101.09,105.56, 109.33,110.87,112.79,116.62,120.20,121.26,122.78,124.43,129.87,135.96,139.57， 143.00,152.08,157.13,160.61；HRMS(ESI+)414.11161,Calcd for C20H20O5N3S 414.11182 [M+H]+.
[0132] 實施例7
[0133] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(4-嗎啉基亞甲基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺（14a)
[0134] 室溫下，13c(425mg，1 · Ommol)溶于約10mL 的 THF 中，將嗎啉（0 · 18mL, 2 · Ommol)以及 Ti (OiPr )4(1.2mmol)加入上述溶液中，攪拌1. Oh后，再將氰基硼氫化鈉(NaBH3CN，4. Ommol) 分批投入到反應液中，繼續(xù)反應約1.0-2.Oh。將反應液倒入適量冰水中，有絮狀沉淀生成， 柱層析(DCM/Me0H = 50/l)分離純化得類白色目標產(chǎn)物200mg，產(chǎn)率:40.3%，熔點：193-195 〇C〇1HNMR(DMS0-d6,400MHz)5ppm2.39(4H,m),3.43(3H,s),3.58(4H,m),3.63(2H,s),3.72 (3H,s),3.91(3H,s),6.29(lH,d,J = 8.4Hz) ,7.43(lH,d,J = 8.4Hz),7.50(lH,dd,J = 8.4, 1.2Hz),7.62(lH,d ,J = 8.4Hz), 7.70( lH,d,J = 8.4Hz), 7.74( lH,dd,J = 8.4,1.2Hz), 8.12 (1H, d , J = 1.2Hz) , 8.46 (1H, d , J = 1.2Hz ) , 9.31 (1H, s) ； 13CNMR( DMSO-de, 101MHz ) δ ppm29.83,53.40,53.59X2,53.85,63.10,66.69X2,101.13,109.59,110.06,112.73, 120.23,121.43,121.47,121.91,124.68,128.60,129.83,130.78,139.69,141.18,142.91, 157.17,160.64；HRMS(ESI+)497.18525,Calcd for C25H29O5N4S 497.18532[M+H]+.
[0135] 實施例8
[0136] N-( 2，6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(4-嗎啉基亞甲基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺鹽酸 鹽（14a · HC1)
[0137] 冰浴條件下，14a( 100mg，0.20mmol)溶于適量的無水甲醇中，滴入311鹽酸甲醇溶液 0.04mL，低溫條件下攪拌lh。將反應液濃縮后，加入適量無水乙醚中，攪拌0.5h，固化，過濾， 得鹽酸鹽固體約lOOmgJS m/z( % )497(M+1，100) ·。
[0138] 實施例9
[0139] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-7-(4-嗎啉基亞甲基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺（14b)
[0140] 室溫下，13e(425mg，1.0mmol)溶于約 10mL 的 THF 中，將嗎啉（0.18mL，2.0mmol)以及 Ti (OiPr )4(1.2mmol)加入上述溶液中，攪拌1. Oh后，再將氰基硼氫化鈉(NaBH3CN，4. Ommol) 分批投入到反應液中，繼續(xù)反應約1.0-2.Oh。將反應液倒入適量冰水中，有絮狀沉淀生成， 柱層析(001/^0!1 = 50/1)分離純化得類白色固體30011^，產(chǎn)率:60.5%，熔點：157.4-158.3 To^NMR(DMSO-de,400MHz)5ppm 2.42(4H,m) ,3.43(3H,s) ,3.60(4H,m) ,3.67(2H,s) ,3.72 (3H,s) ,3.92(3H,s) ,6.29( lH,d,J = 8.4Hz) ,7.25( lH,d,J = 8.0Hz) ,7.43( lH,d,J = 8.4Hz) ,7.58(lH,s),7.72(2H,m) ,8.17(lH,d,J = 8.0Hz) ,8.45(lH,s) ,9.32(lH,s) ；13CNMR (DMSO-de,101MHz)5ppm 29.79,53.40,53.75 X 2,53.85,63.54,66.68 X 2,101.11,109.56, 110.43,112.71,120.07,120.77,121.20,121.53,121.64,124.57,130.84,137.53,139.72, 142.04,142.90,157.22,160.66；HRMS(ESI+)497.18411,Calcd for C25H29O5N4S 497.18532 [M+H]+.
[0141] 實施例10
[0142] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-( (N-甲基哌嗪-1-基)亞甲基)-9-甲基-3-咔唑磺 酰胺（14c)
[0143] 室溫下，13c(425mg，l .Ommol)溶于約 10mL的THF中，將N-甲基哌嗪（(K22mL， 2 . Ommol)以及Ti (OiPr )4( 1.2mmol)加入上述溶液中，攪拌1. Oh后，再將氰基硼氫化鈉 (NaBH3CN，4. Ommol)分批投入到反應液中，繼續(xù)反應約1.0-2 . Oh。將反應液倒入適量冰水 中，有絮狀沉淀生成，柱層析(DCM/MeOH = 70/1)分離純化得類白色目標產(chǎn)物250mg，產(chǎn)率： 49 · 1 %，熔點：177 · 5-179 · 5 °C。hNMR(DMS〇-d6，400MHz) δρρπι2 · 17 (3H，s)，2 · 22-2 · 46 (8H，m)， 3.43(3H，s)，3.63(2H，s)，3.72(3H，s)，3.92(3H，s)，6.30(lH，d，J = 8.4Hz)，7.43(lH，d，J = 8.4Hz),7.49(lH,dd,J = 8.4,1.2Hz) ,7.62(lH,d,J = 8.4Hz),7.71(lH,d,J = 8.4Hz),7.74 (lH,dd ,J = 8.4,1.2Hz),8.11(lH,d ,J=1.2Hz),8.46(lH,d ,J=1.2Hz),9.32(1H,s)；13CNMR (DMSO-de,101MHz)5ppm29.83,46.13,52.87 X 2,53.40,53.85,55.18 X 2,62.68,101.13, 109.57,110.03,112.74,120.20,121.27,121.49,121.89,124.65,128.52,130.34,130.76, 139.67,141.15,142.90,157.16,160.63；HRMS(ESI+)510.21684,Calcd for C26H32O4N5S 510.21695[M+H]+.
[0144] 實施例11
[0145] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-7-( (N-甲基哌嗪-1-基)亞甲基)-9-甲基-3-咔唑磺 酰胺（14d)
[0146] 室溫下，13e(425mg,l .Ommol)溶于約 10mL的THF中，將N-甲基哌嗪（(K22mL， 2 . Ommol)以及Ti (OiPr )4( 1.2mmol)加入上述溶液中，攪拌1. Oh后，再將氰基硼氫化鈉 (NaBH3CN，4. Ommol)分批投入到反應液中，繼續(xù)反應約1.0-2 . Oh。將反應液倒入適量冰水 中，有絮狀沉淀生成，柱層析(DCM/Me0H/TEA = 200/40/1)分離純化得類白色固體310mg，產(chǎn) 率：60.9%，熔點：148-150°(：。1腿?(0150-(16,4001抱）3 ??1111.24(3!1，8)，2.59(4!1，111)，2.98-3.06(4H，m)，3.43(3H，s)，3.72(3H，s)，3.73(2H，s)，3.92(3H，s)，6.29(lH，d，J=8.4Hz)， 7.26(lH,d,J = 8.0Hz) ,7.42(lH,d,J = 8.4Hz) ,7.61(lH,s) ,7.74(2H,m) ,8.19(lH,d,J = 8.0Hz) ,8.45( lH，s) ,9.34( lH，s) ;13C匪R(DMS0-d6，101MHz)Sppm 29.81,45.94,50.56, 52.46,53.41,53.86,62.20,101.10,109.64,110.53,112.70,120.15,120.91,121.39， 121.46,121.64,124.68,130.92,137.20,139.74,142.01,142.92,157.25,160.67；HRMS (ESI+)510.21674,Calcd for C26H32O4N5S 510.21695[M+H]+.
[0147] 實施例12
[0148] n-(2,6_二甲氧基吡啶-3-基）-6-(哌嗪-1-基亞甲基）-9-甲基-3-咔唑磺酰胺 (14e)
[0149] 室溫下，13c(425mg，1 · Ommol)溶于約 10mL的THF中，將哌嗪（172mg，2 · Ommol)以及 Ti (OiPr )4(1.2mmol)加入上述溶液中，攪拌1. Oh后，再將氰基硼氫化鈉(NaBH3CN，4. Ommol) 分批投入到反應液中，繼續(xù)反應約1.0-2.Oh。將反應液倒入適量冰水中，有絮狀沉淀生成， 柱層析(DCM/Me0H= 100/3)分離純化得類白色固體235mg，產(chǎn)率:47.5%，熔點：168-170°C。 ^Mfl^DMSO-dsJOOMHzMppm 2.41，2.95(4H，m)，3.34(4H，m)，3.44(3H，s)，3.68(2H，s)， 3.73(3H，s)，3.92(3H，s)，6.30(lH，d，J = 8.4Hz) ,7.43(lH，d，J = 8.4Hz) ,7.50(lH，dd，J = 8.4Hz,1.2Hz) ,7.63( lH,d,J = 8.4Hz) ,7.72( lH,d,J = 8.4Hz) ,7.76( lH,dd,J = 8.8Hz, 1 · 4Hz), 8 · 14(1H, d , J = 1 · 2Hz), 8 · 46(1H, d, J = 1 · 2Hz); 13C匪R(DMS〇-d6，100MHz) δρρπι 29.86,44.53X2,51.49X2,53.42,53.87,62.70,101.13,109.66,110.08,112.76,120.24， 121.44,121.49,121.94,124.73,128.61,129.61,130.84,139.72,141.22,142.91,157.22, 160.65；HRMS(ESI+)496.20117,Calcd for C25H30O4N5S 496.20130[M+H]+.
[0150] 實施例13
[0151] N-( 2,6-二甲氧基吡啶-3-基）-6-(哌啶-1-基亞甲基）-9-甲基-3-咔唑磺酰胺 (14f)
[0152] 室溫下，13c(425mg，1 ·Ommol)溶于約10mL的THF中，將哌啶（0 · 20mL, 2·Ommol)以及 Ti (OiPr )4(1.2mmol)加入上述溶液中，攪拌1. Oh后，再將氰基硼氫化鈉 (NaBH3CN，4. Ommol) 分批投入到反應液中，繼續(xù)反應約1.0-2.Oh。將反應液倒入適量冰水中，有絮狀沉淀生成， 柱層析(DCM/Me0H/TEA = 200/4/l)分離純化得類白色固體300mg，產(chǎn)率:60.7%，熔點：213-215。C。 1HNMR(DMS0-d6,400MHz)δppml·39(2H，m)，l·47-l·50(4H，m)，2·36(4H，m)，3·43(3H， s),3.59(2H,s) ,3.72(3H,s), 3.91 (3H,s), 6.29( lH,d,J = 8.4Hz) ,7.43(lH,d ,J = 8.4Hz), 7.49(lH,d,J = 8.4Hz) ,7.61( lH,d,J = 8.4Hz), 7.71( lH,d,J = 8.4Hz) ,7.74( lH,d,J = 8.4Hz) ,8.09( lH,s) ,8.46( lH,s) ,9.32( lH,s) ；13CNMR(DMS0-d6,101MHz)5ppm 24.55, 26.04,29.83,53.40,53.84,54.25,63.45,101.13,109.55,109.96,112.75,120.19, 121.21,121.51,121.86,124.63,128.52,130.62,130.74,139.65,141.11,142.89,157.15； HRMS(ESI+)495·20596,Calcd for C26H31O4N4S 495.20605[M+H]+.
[0153] 實施例14
[0154] N-( 2,6-二甲氧基吡啶-3-基）-6-(吡咯-1-基亞甲基）-9-甲基-3-咔唑磺酰胺 (14g)
[0155] 室溫下，13c(425mg，1.0mmol)溶于約 10mL的THF中，將四氫吡咯（0.17mL，2.0mmol) 以及11(0丨？〇4(1.2111111〇1)加入上述溶液中，攪拌1.011后，再將氰基硼氫化鈉（似8!1 3^ 4.Ommol)分批投入到反應液中，繼續(xù)反應約1.0-2.Oh。將反應液倒入適量冰水中，有絮狀沉 淀生成，柱層析(DCM/Me0H= 30/1)分離純化得類白色固體200mg，產(chǎn)率:42 %，熔點：182-184 〇C〇1HNMR(DMS0-d6,400MHz)5ppml.71(4H,m),2.48(4H,m),3.43(3H,s),3.72(3H,s),3.75 (2H,s),3.91(3H,s),6.29(lH,d,J = 8.4Hz) ,7.43(lH,d,J = 8.4Hz),7.50(lH,dd,J = 8.4, 1.2Hz),7.60(lH,d ,J = 8.4Hz), 7.70( lH,d,J = 8.4Hz), 7.74( lH,dd,J = 8.4,1.2Hz), 8.11 (1H，s)，8 · 45 (1H，d，J= 1 · 2Hz)，9 · 31 (1H，s); 13C匪R(DMS〇-d6，100MHz) δρρπι23 · 55 X 2， 29.84,53.39,53.83,53.84X2,60.04,101.12,109.59,110.01,112.76,120.20,120.91， 120.95,121.53,121.92,124.65,128.30,130.78,139.64,141.11,142.92,157.16,160.64； HRMS(ESI+)481.19019,Calcd for C25H29O4N4S 481.19040[M+H]+.
[0156] 實施例15
[0157] N-(2,6_二甲氧基吡啶-3-基)-6-(2-氯乙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺（15a，中間 產(chǎn)物）
[0158] 131 (413mg，1 ·Ommol)，1-溴_2_氯乙燒(0 · 17mL,2·Ommol)溶于 10mL丙酮，再加入碳 酸鉀(276mg，2. Ommol)，油浴條件下加熱回流5h。將反應液濃縮后，加入適量的冰水，用乙酸 乙酯萃取三次，有機層用清水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，柱層析(PE/AcOEt =3/1)分離純化得目標化合物400mg，產(chǎn)率：74 · 5 %，熔點：118-120 °C。hNMlUDMSO-cU， 400MHz)5ppm3.29(3H,s),3.61(2H,t,6.0Hz),3.79(2H,t,6.0Hz),3.81(3H,s),3.88(3H, s),6.40(lH,d ,J = 8.4Hz), 7.05( lH,dd,J = 8.8,2.4Hz), 7.49( lH,d,J = 8.8Hz), 7.50( 1H, d ,J = 8.4Hz), 7.56( lH,d,J = 2.4Hz), 7.60( lH,dd,J = 8.8,1.8Hz), 7.65( lH,d,J = 8.8Hz), 8.33(lH，d，J=1.8Hz)，9.20(lH，s);13CMMR(DMS0-d6，101MHz)Spp m29.81，43.29,51.19， 53.43,54.07,101.62,105.97,109.42,110.84,113.70,116.70,120.80,121.63,122.91, 124.81,128.45,136.00,143.30,144.84,152.10,159.21,162.32；HRMS(ESI+)476.10407, Calcd for C22H23O5N3CIS 476.10415[M+H]+.
[0159] 實施例16
[0160] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(2-(4-嗎啉基)-乙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺 (15b)
[0161 ] 15a(475mg, 1 ·Ommol)溶于約15mL的DMF中，向反應液中加入鵬化鈉 （lOmmol)以及 嗎啉(0.87mL，lOmmol)，油浴80°C條件下加熱過夜。將反應液倒入適量的冰水中，用乙酸乙 酯萃取三次，有機層用清水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，柱層析(DCM/MeOH/ TEA = 50/1/1)分離純化得目標化合物 300mg，產(chǎn)率:55.6%，熔點：88-90°(：。1!1匪1?(0150-(16， 600MHz)5ppm2.25(4H,m),2.31(2H,t J = 6.4Hz),3.41(3H,s),3.43(4H,m),3.59(2H,t ,J = 6.4Hz),3.83(3H,s) ,3.88(3H,s),6.36(lH,d,J = 8.4Hz),7.06(lH,dd,J = 8.8Hz,2.4Hz), 7.45(lH,d,J = 8.4Hz) ,7.49(lH,d,J = 8.8Hz),7.57(lH,d,J = 2.4Hz) ,7.66(2H,m) ,8.36 (lH，s) ,9.20(1H，s);13C匪R(DMS0-d6，150MHz)Sppm29.80,46.34,53.44,53.56X2,54.01， 57.20,66.54X2,101.30,105.95,109.37,110.80,114.35,116.64,120.72,121.59, 122.92,124.86,128.96,135.98,143.17,144.49,152.05,159.54,161.99；HRMS(ESI+) 527.19568，Calcd for C26H31O6N4S 527.19588[M+H]+.
[0162] 實施例17
[0163] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(2-(N-甲基哌嗪-1-基)-乙氧基)-9-甲基-3-咔 唑磺酰胺(15c)
[0164] 15a(475mg, 1 .Ommol)溶于約15mL的DMF中，向反應液中加入鵬化鈉（lOmmol)以及 N-甲基哌嗪（1. lmL，lOmmol)，油浴80°C條件下加熱過夜。將反應液倒入適量的冰水中，用乙 酸乙酯萃取三次，有機層用清水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，柱層析(DCM/ Me0H/TEA = 50/l/l)分離純化得目標化合物300mg，產(chǎn)率：55.6%，熔點：84-86°C。 1MR (CDCl3,400MHz)Sppm2.07(3H，s)，2.21-2.25(4H，m)，2.30(2H，m)，3.33-3.37(4H，m)，3.41 (3H，s)，3.57(2H，m)，3.82(3H，s)，3.88(3H，s) ,6.35( lH，d，J = 8.4Hz)，7.05(lH，dd，J = 8.8,2.4Hz) ,7.42(lH,d,J = 8.4Hz) ,7.49(lH,d,J = 8.8Hz),7.57(lH,d,J = 2.4Hz) ,7.66 (2H，m)，8.35(lH，s)，9.20(lH，s);13CNMR(DMS0-d 6，101MHz)Sppm29.79,46.16,46.65,52.96 X 2,53.43,53.99,55.06X2,56.84,101.29,105.96,109.36,110.78,114.40,116.63, 120.71,121.59,122.92,124.86,128.98,135.98,143.17,144.42,152.04,159.55,161.95; HRMS(ESI+)540.22742,Calcd for C21H228O5N3S 540.22752[M+H]+.
[0165] 實施例18
[0166] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(2-(哌啶-1-基)-乙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰 胺(15d)
[0167] 15a(475mg, 1 .Ommol)溶于約15mL的DMF中，向反應液中加入鵬化鈉（lOmmol)以及 哌啶(0.99mL，lOmmol )，油浴80°C條件下加熱過夜。將反應液倒入適量的冰水中，用乙酸乙 酯萃取三次，有機層用清水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，柱層析(DCM/MeOH/ TEA = 50/1/1)分離純化得目標化合物 300mg，產(chǎn)率:55.6%，熔點：93-95°(：。1!1匪1?(0150-(16， 400MHz)5ppml.30(2H,m),1.36(4H,m),2.22(4H,m),2.29(2H,m),3.41(3H,s),2.31(2H,m), 3.82(3H,s),3.89(3H,s),6.36(lH,d ,J = 8.4Hz), 7.06( lH,dd,J = 8.8Hz, 2. OHz), 7.41( 1H, d,J = 8.4Hz) ,7.50(lH,d,J = 8.8Hz) ,7.57(lH,d,J = 2.0Hz) ,7.66(2H,s) ,8.35(lH,s), 9.21 (1H, s) ； 13CNMR(DMS〇-d6,101MHz)5ppm 24.32,25.89 X 2,29.80,46.75,53.43,54.01, 54.38X2,57.57,101.28,105.95,109.37,110.80,114.41,116.63,120.72,121.58, 122.93,124.87,128.98,135.98,143.18,144.47,152.06,159.53,161.97；HRMS(ESI+) 525.21637,Calcd for C27H33O5N4S 525.21662[M+H]+.
[0168] 實施例19
[0169] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(2-(吡咯-1-基)-乙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰 胺(15e)
[0170] 15a(475mg, 1 .Ommol)溶于約15mL的DMF中，向反應液中加入鵬化鈉（lOmmol)以及 四氫吡咯(〇.85mL，lOmmol)，油浴80°C條件下加熱過夜。將反應液倒入適量的冰水中，用乙 酸乙酯萃取三次，有機層用清水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，柱層析(DCM/ Me0H/TEA = 50/l/l)分離純化得目標化合物300mg，產(chǎn)率：55.6%，熔點 AS-lOiTCc/HNMR (DMS0-d6,400MHz)5ppml.60(4H,m),2.36(4H,m),2.43(2H,t,6.0Hz),3.40(3H,s),3.58 (2H,t,6.0Hz) ,3.82(3H,s) ,3.86(3H,s),6.37(lH,d,J = 8.4Hz) ,7.06(lH,dd,J = 8.8Hz, 2.0Hz),7.43(lH,d,J = 8.4Hz),7.50(lH,d,J = 8.8Hz),7.57(lH,d,J = 2.0Hz) ,7.66(2H, s)，8.35(lH，s)，9.21(lH，s) ;13C匪R(DMS〇-d6,101ΜΗζ)δρρπι 23·56Χ2,29·79,48·30, 53.45,53.89X2,54.03,54.55,101.39,105.94,109.38,110.81,114.20,116.64,120.73， 121.58,122.93,124.85,128.91,135.98,143.19,144.49,152.07,159.50,162.05；HRMS (ESI+)511.20088,Calcd for C26H31O5N4S 511.20097[M+H]+.
[0171] 實施例20
[0172] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(2-(哌嗪-1-基)_乙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰 胺（15f)
[0173] 15a(475mg, 1 .Ommol)溶于約15mL的DMF中，向反應液中加入鵬化鈉（lOmmol)以及 哌嗪(860mg，lOmmol )，油浴80°C條件下加熱過夜。將反應液倒入適量的冰水中，用乙酸乙酯 萃取三次，有機層用清水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，柱層析(DCM/MeOH/TEA = 50/1/1)分離純化得目標化合物 300mg，產(chǎn)率：55.6%，熔點：130-132°(：。1顯]\?(0150-(16， 400MHz)5ppm2.27(4H,m),2.31(2H,t J = 6.4Hz),2.66(4H,m),3.40(3H,s),3.57(2H,t ,J = 6.4Hz) ,3.82(3H,s) ,3.88(3H,s) ,6.36( 1H, d ,J = 8.4Hz), 7.05( 1H, dd, J = 8.8,2.4Hz), 7.44(lH,d ,J = 8.4Hz), 7.49( lH,d,J = 8.8Hz), 7.56( lH,d,J = 2.4Hz), 7.64-7.66(2H,m), 8.34(lH，s) ,9.22(lH，s);13CNMR(DMS0-d6，101MHz)Spp m29·33,44.59X2,46.00,52.35X2， 52.97,53.55,56.69,100.85,105.48,108.91,110.35,113.87,116.18,120.24,121.12， 122.44,124.38,128.46,135.51,142.71,144.07,151.60,159.05,161.53；HRMS(ESI + ) 526.21179,Calcd for C26H32O5N5S 526.21187[M+H]+.
[0174] 實施例21
[0175] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(2-(4-(吡咯-1-基）哌啶-1-基)_乙氧基)-9-甲 基-3-咔唑磺酰胺（15g)
[0176] 15a(475mg, 1 .Ommol)溶于約15mL的DMF中，向反應液中加入鵬化鈉（lOmmol)以及 4_吡咯烷-1-基哌啶（1.54g，lOmmol)，油浴80°C條件下加熱過夜。將反應液倒入適量的冰水 中，用乙酸乙酯萃取三次，有機層用清水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，柱層析 (DCM/Me0H/TEA = 50/l/l)分離純化得目標化合物300mg，產(chǎn)率：55.6%，熔點：123-125°C。 ^NMRCDMSO-de,400MHz)5ppm 1.17-1.23(2H,m),1.61-1.62(4H,m),1.65(2H,m),1.79-1.84 (4H,m),2.06(lH,s),2.27(2H,m),2.37(4H,m),3.41(3H,s),3.57(2H,m),3.82(3H,s),3.88 (3H,s),6.36(lH,d ,J = 8.4Hz), 7.05( lH,dd,J = 8.8,2.4Hz), 7.42( lH,d,J = 8.4Hz), 7.48 (lH,d,J = 8.8Hz) ,7.56(lH,d,J = 2.4Hz) ,7.64-7.66(2H,m) ,8.35(lH,s) ,9.25(lH,s)； 13CNMR(DMS〇-d6,101MHz) 5ppm23.33 X 2,29.79 X 2,31.27,45.63,46.88,51.17 X 2,52.27, 53.45,54.01X2,61.40,101.29,105.92,109.38,110.79,114.35,116.63,120.71,121.61, 122.93,124.86,129.02,135.98,143.18,144.46,152.07,159.56,161.98；HRMS(ESI+) 594.27466,Calcd for C31H40O5N5S 594.27447[M+H]+.
[0177] 實施例22
[0178] N-(2,6_二甲氧基吡啶-3-基)-6-(3-氯丙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺（16a，中間 產(chǎn)物）
[0179] 131 (413mg，1 ·Ommol)，1-溴_3_氯丙烷(0 · 20mL,2·Ommol)溶于 10mL丙酮，再加入碳 酸鉀(276mg，2. Ommol)，油浴條件下加熱回流5h。將反應液濃縮后，加入適量的冰水，用乙酸 乙酯萃取三次，有機層用清水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，柱層析(PE/AcOEt = 4/1)分離純化得目標化合物410mg，產(chǎn)率：72 · 6 %，熔點：148-150 °C。hNMlUDMSO-cU， 400MHz)5ppml.78(2H,m),3.44(3H,s),3.60(2H,t,J = 6.4Hz),3.66(2H,t,J = 6.4Hz) ,3.83 (3H,s),3.89(3H,s),6.37(lH,d,J = 8.4Hz) ,7.06(lH,dd,J = 8.8,2.4Hz),7.41(lH,d,J = 8.4Hz),7.50(lH,d,J = 8.8Hz),7.56(lH,d,J = 2.4Hz),7.63(lH,dd,J = 8.8,2.0Hz),7.68 (lH,d,J = 8.8Hz) , 8.32 (lH,d,J = 2.0Hz) ,9.21( lH,s) ；13CNMR(DMS〇-d6,151MHz )δ ppm29.81,31.86,42.82,47.14,53.56,54.06,101.64,105.91,109.50,110.85,114.12, 116.71,120.77,121.63,122.90,124.82,128.40,136.00,143.25,143.95,152.10,159.71, 162.14；HRMS(ESI+)490.11980,Calcd for C23H25O5N3CIS 490.11980[M+H]+.
[0180] 實施例23
[0181] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(3-(4-嗎啉基)-丙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺 (16b)
[0182] 16a(489mg，1 · Ommol)溶于約15mL的CH3CN或DMF中，向上述溶液加入嗎啉（0 · 87mL， lOmmol)，油浴條件下加熱回流5h。將反應液倒入適量的冰水中，用乙酸乙酯萃取三次，有機 層用清水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，柱層析(DCM/M e0H/TEA = 200/2/l)分 離純化得目標化合物290mg，產(chǎn)率：53 · 7 %，熔點：85-87 °C?！㎞MI^CDCh，400MHz) δρρπι? · 45 (2H，m)，2· 19(4H，m)，2.24(2H，t，J = 6.0Hz)，3.44(4H，m) ,3.46(3H，s)，3.49(2H，t，J = 6.0Hz) ,3.83(3H,s) ,3.88(3H,s) ,6.38( 1H, d ,J = 8.4Hz), 7.06( 1H, dd, J = 8.4,2.0Hz), 7.43(lH,d ,J = 8.4Hz) ,7.50( lH,d,J = 8.8Hz) ,7.55( lH,d,J = 2.0Hz) ,7.64( lH,dd,J = 8.4,1.2Hz) ,7.67( lH,d,J = 8.8Hz) ,7.95( lH,s) ,8.33( lH,d,J=l ,2Hz) ,9.21( lH,s)； 13C匪R(DMS〇-d6，101MHz )δρρπι25 · 57，29 · 80，47 · 54，53 · 50，53 · 59，54 · 04，55 · 44，66 · 55 , 101.50，105.86，109.46，110.85，114.24，116.68，120.76，121.57，122.89，124.86，128.68， 135.99,143.19,144.06,152.09,159.70,162.02；HRMS(ESI+)541.21143,Calcd for C27H33O6N4S 541.21253[M+H] + .
[0183] 實施例24
[0184] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(3-(N-甲基哌嗪-1-基)-丙氧基)-9-甲基-3-咔 唑磺酰胺(16c)
[0185] 16a(489mg，1 · Ommol)溶于約15mL的CH3CN或DMF中，向上述溶液加入N-甲基哌嗪 (1. lmL，lOmmol)，油浴條件下加熱回流3h。將反應液倒入適量的冰水中，用乙酸乙酯萃取三 次，有機層用清水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，柱層析(DCM/MeOH/TEA = 200/ 2/3)分離純化得目標化合物280mg，產(chǎn)率：50.6 %，熔點：96-98°C。hNMlUCDCls，400MHz) δ ppml.43(2H，m)，2.07(3H，s)，2.17(4H，m)，2.19(4H，m)，2.22(2H，t，J=6.8Hz)，3.46(3H, s) ,3.47(2H,t J = 6.8Hz),3.83(3H,s),3.88(3H,s),6.37(lH,d,J = 8.4Hz),7.06(lH,dd,J = 8.4,2.2Hz),7.42(lH,d,J = 8.4Hz),7.49(lH,d,J = 8.8Hz),7.55(lH,d,J = 2.2Hz) ,7.64 (lH,dd ,J = 8.8,1.2Hz), 7.67( lH,d,J = 8.8Hz), 8.32( lH,d,J=1.2Hz), 9.24( 1H,s)；13CNMR (DMSO-de,101MHz)5ppm25.95,29.80,46.16,47.55,52.93 X 2,53.49,54.04,54.98,55.14 X2,101.48,105.88,109.46,110.82,114.26,116.67,120.78,121.57,122.90,124.85, 128.67,135.98,143.19,144.04,152.10,159.69,161.99；HRMS(ESI+)554.24298,Calcd for C28H36O5N5S 554.24317[M+H] + .
[0186] 實施例25
[0187] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(3-(哌啶-1-基)_丙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰 胺（16d)
[0188] 16a(489mg，1 · Ommol)溶于約15mL的CH3CN或DMF中，向上述溶液加入哌啶（0 · 99mL， lOmmol)，油浴條件下加熱回流3h。將反應液倒入適量的冰水中，用乙酸乙酯萃取三次，有機 層用清水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，柱層析(DCM/Me0H/TEA = 200/2/3)分 離純化得目標化合物280mg，產(chǎn)率：50 · 6 %，熔點，125-127 °C。hMOKDMSO-cU，400MHz) δ ppml.39(8H，m)，2.18(6H，m)，3.45(3H，s)，3.48(2H，m)，3.83(3H，s)，3.88(3H，s)，6.38(lH， d ,J = 8.4Hz), 7.06( lH,dd,J = 8.8,2.4Hz), 7.42( lH,d,J = 8.4Hz), 7.49( lH,d,J = 8.8Hz), 7.54(lH,d,J = 2.4Hz),7.63(lH,dd,J = 8.8,2.4Hz),7.67(lH,d,J = 8.8Hz) ,8.32(lH,d,J = 2.4Hz) ,9.20(lH，s);13CNMR(CDCl3，101MHz)Sppm 23.87,25.11 X2,25.33,29.49,47.77， 53.09,53.82,54.41,56.29X2,101.24,106.22,107.97,109.68,113.46,116.23,120.95， 121.89,123.16,125.08,128.93,136.43,143.20,143.72,150.56,159.47,162.30；HRMS (ESI+)539.23197,Calcd for C28H35O5N4S 539.23227[M+H]+.
[0189] 實施例26
[0190] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(3-(吡咯-1-基)-丙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰 胺(16e)
[0191] 16&(48911^，1.〇111111〇1)溶于約1511^的(：!13〇~或01^中，向上述溶液加入四氫吡咯 (0.85mL，lOmmol)，油浴條件下加熱回流4h。將反應液倒入適量的冰水中，用乙酸乙酯萃取 三次，有機層用清水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，柱層析(DCM/Me0H/TEA = 100/1/1)分離純化得目標化合物29011^，產(chǎn)率：55.3%，熔點：88-90°(：。 1顯]\〇?(0130-(16， 400MHz)5ppml.45(2H,m),1.58(4H,m),2.26(4H,m),2.34(2H,t,J=6.4Hz),3.45(3H,s), 3.51(2H,t J = 6.4Hz),3.84(3H,s),3.88(3H,s) ,6.38(lH,d,J = 8.4Hz) ,7.06(lH,dd,J = 8.4,2.4Hz),7.41(lH,d,J = 8.4Hz) ,7.50(lH,d,J = 8.4Hz),7.55(lH,d,J = 2.4Hz) ,7.63 (lH,dd ,J = 8.4,1.6Hz), 7.67( lH,d,J = 8.4Hz), 8.32( lH,d,J=1.6Hz), 9.21( 1H,s)；13CNMR (DMSO-de,101MHz)5ppm23.47 X 2,27.91,29.79,47.79,53.04,53.47,53.87 X 2,54.04, 101.49,105.88,109.44,110.83,114.16,116.66,120.72,121.57,122.90,124.84,128.71, 135.98,143.19,144.08,152.08,159.70,162.02；HRMS(ESI+)525.21619,Calcd for C27H33O5N4S 525.21662[M+H] + .
[0192] 實施例26
[0193] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(3-(哌嗪-1-基)-丙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰 胺（16f)
[0194] 16a(489mg, 1 .Ommol)溶于約15mL的CH3CN或DMF中，向上述溶液加入哌嗪（860mg, lOmmol)，油浴條件下加熱回流3h。將反應液倒入適量的冰水中，用乙酸乙酯萃取三次，有機 層用清水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，柱層析(DCM/Me0H/TEA= 100/1/1)分 離純化得目標化合物280mg，產(chǎn)率：51 · 9 %，熔點：118-120 °C。^MOKDMSO-cU，400MHz) δ ppml.40-1.47(2H，m)，2.12(4H，m)，2.20(2H，m)，2.57(4H，m)，3.46(3H，s)，3.50(2H，m)， 3.84(3H，s)，3.89(3H，s)，6.31(lH，d，J = 8.4Hz)，7.06(lH，dd，J = 8.8Hz，2.2Hz)，7.42(lH， d,J = 8.4Hz) ,7.50( lH,d,J = 8.8Hz) ,7.55( lH,d,J = 2.2Hz) ,7.64( lH,dd,J = 8.8Hz, 1 ·6Ηζ)，7.67(lH，d，J = 8.8Hz)，8.33(lH，d，J=1.6Hz)，9.24(lH，s) ;13C匪R(DMS〇-d6， 101MHz)5ppm25.75,29.80,45.82X2,47.63,53.48,54.04,54.19X2,55.75,101.48, 105.86,109.44,110.83,114.27,116.67,120.73,121.58,122.89,124.85,128.70,135.98, 143.19,144.05,152.09,159.68,162.00；HRMS(ESI+)540.22751,Calcd for C27H34O5N5S 540.22752[M+H]+.
[0195] 實施例27
[0196] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(3-(4-(吡咯-1-基）哌啶-1-基)-丙氧基)-9-甲 基-3-咔唑磺酰胺（16g)
[0197] 16&(48911^，1.〇111111〇1)溶于約1511^的013〇~或01^中，向上述溶液加入4-吡咯烷-1-基哌啶（1.54g，lOmmol)，油浴條件下加熱回流3h。將反應液倒入適量的冰水中，用乙酸乙酯 萃取三次，有機層用清水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，柱層析(DCM/MeOH/TEA = 100/3/3)分離純化得目標化合物280mg，產(chǎn)率:46.1 %，熔點：110-1 WCc/HNMI^DMSO-ds， 400MHz)5ppm 1.20(2H,m),1.42(2H,m),1.62-1.66(6H,m),1.69-1.76(2H,m),1.80(lH,m), 2.19(2H,m),2.38(4H,m),2.58(2H,m),3.47(2H,m),3.48(3H,s),3.84(3H,s),3.89(3H,s), 6.38(lH,d,J = 8.4Hz),7.06(lH,dd,J = 8.8Hz,2.0Hz),7.44(lH,d,J = 8.4Hz) ,7.50(lH,d, J = 8.8Hz),7.55(lH,d ,J = 2.0Hz), 7.67(2H,s) ,8.34( lH,s) ,9.25( lH,s) ；13CNMR(DMS〇-d6, 101MHz)5ppm 23.35X2,26.15,29.79,31.54,X2 47.62,51.21X2,52.27,53.50,54.03, 55.10X2,61.64,101.49,105.87,109.46,110.81,114.25,116.65,120.78,121.58, 122.91,124.86,128.69,135.98,143.19,144.04,152.11,159.71,161.99；HRMS(ESI+) 608.28839,Calcd for C32H42O5N5S 608.28839[M+H]+.
[0198] 最后應說明的是：以上各實施例僅用以說明本發(fā)明的技術方案，而非對其限制;盡 管參照前述各實施例對本發(fā)明進行了詳細的說明，本領域的普通技術人員應當理解:其依 然可以對前述各實施例所記載的技術方案進行修改，或者對其中部分或者全部技術特征進 行等同替換；而這些修改或者替換，并不使相應技術方案的本質(zhì)脫離本發(fā)明各實施例技術 方案的范圍。
【主權項】
1. 一種咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽，其特征在于，具有如下通式(1):其中，Ri 選自于-CHO、-MlOH、-0M2、-CH2-NH-M3、-C00M2 或-0-CH2-NH-M3，且 Ml 為低級亞烷 基、M2為低級烷基、M3為與-NH-形成五元或六元環(huán)的烴基； R2選自于氫、低級烷基、低級烷氧基、芐基、羥基、巰基、酯基、?；蝓０坊?. 根據(jù)權利要求1所述的咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽，其特征在于，所述M3與-NH-形 成的五元或六元環(huán)為嗎啉環(huán)、哌嗪環(huán)、哌啶環(huán)或吡咯環(huán)。3. 根據(jù)權利要求1所述的咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽，其特征在于，所述R1為6位或7 位的取代基。4. 根據(jù)權利要求1或3所述的咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽，其特征在于，所述R1選自 醛基、芐醇基、低級烷氧基羰基、嗎啉基低級亞烷基、N-低級烷基哌嗪基、哌嗪基低級亞烷 基、吡咯基低級亞烷基、N-低級烷基哌嗪基低級烷氧基、吡咯基低級烷氧基、哌嗪基低級烷 氧基、啦略基呢陡基低級烷氧基、嗎琳基低級烷氧基、N -低級烷基呢嘆基低級烷氧基。5. 根據(jù)權利要求2或3所述的咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽，其特征在于，所述R2為氫、 甲基或乙基。6. 根據(jù)權利要求1所述的咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽，其特征在于，所述咔唑磺酰胺 衍生物選自于： N- (2，6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-醛基-9-甲基-3-咔唑磺酰胺； N- (2，6-二甲氧基吡啶-3-基)-7-醛基-9-甲基-3-咔唑磺酰胺； N- (2，6-二甲氧基吡啶-3-基)-7-芐醇-9-甲基-3-咔唑磺酰胺； N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-7-甲氧羰基-9-甲基-3-咔唑磺酰胺； N- (2，6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-芐醇-9-甲基-3-咔唑磺酰胺； N-(2，6_二甲氧基吡啶-3-基)-6-(4-嗎啉基亞甲基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺； N-(2，6_二甲氧基吡啶-3-基)-7-(4-嗎啉基亞甲基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺； N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基）-6-( (N-甲基哌嗪-1-基）亞甲基）-9-甲基-3-咔唑磺酰 胺； N-(2，6_二甲氧基吡啶-3-基）-7-( (N-甲基哌嗪-1-基）亞甲基）-9-甲基-3-咔唑磺酰 胺； N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(哌嗪-1-基亞甲基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺； N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(哌啶-1-基亞甲基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺； N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(吡咯-1-基亞甲基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺； N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(2-(4-嗎啉基)-乙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺； N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(2-(N-甲基哌嗪-1-基)-乙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺 酰胺； N-(2，6_二甲氧基吡啶-3-基)-6-(2-(哌啶-1-基)-乙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺； N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(2-(吡咯-1-基)-乙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺； N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(2-(哌嗪-1-基)-乙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺； N-(2，6_二甲氧基吡啶-3-基)-6-(2-(4-(吡咯-1-基)哌啶-1-基)-乙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺； N- (2，6-二甲氧基吡啶-3-基)-6- (3- (4-嗎啉基)-丙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺； N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(3-(N-甲基哌嗪-1-基)-丙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺 酰胺； N-(2，6_二甲氧基吡啶-3-基)-6-(3-(哌啶-1-基)-丙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺； N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-6-(3-(吡咯-1-基)-丙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺； N- (2，6-二甲氧基吡啶-3-基)-6- (3-(哌嗪-1 -基)-丙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺;或 者 N-(2，6_二甲氧基吡啶-3-基)-6-(3-(4-(吡咯-1-基)哌啶-1-基)-丙氧基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺。7. 權利要求1-6任一項所述咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽作為微管蛋白抑制劑的應 用。8. 權利要求1-6任一項所述咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽在制備抗腫瘤藥物中的應 用。9. 一種抗腫瘤藥物組合物，其包括治療有效量的權利要求1-5任一項所述的味唑磺酰 胺衍生物或其藥用鹽和藥學上可接受的藥用輔料。10. 權利要求1-6任一項所述的咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽的制備方法，其特征在 于，所述方法至少包括： 利用化合物（1)與2,6_二甲氧基-3-氨基吡啶反應制備通式（1)的化合物的過程，反應 如下所示：11. 根據(jù)權利要求9所述的咔唑磺酰胺衍生物或其藥用鹽的制備方法，其特征在于，所 述方法還包括： 當R1為羥甲基、甲氧基、芐胺類基團或其鹽、醚烷胺類基團或其鹽時，將所述反應式(2) 產(chǎn)物中的醛基轉(zhuǎn)化為相應基團以制備具有通式(1)結(jié)構(gòu)的咔唑磺酰胺， 其中R2選自于氫、低級烷基、低級烷氧基、芐基、羥基、巰基、酯基、酰基或酰胺基。
【文檔編號】A61K31/496GK105949174SQ201610324234
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2016年5月16日
【發(fā)明人】胡來興, 孫連奇, 武燕彬, 劉永華, 陳曉芳
【申請人】中國醫(yī)學科學院醫(yī)藥生物技術研究所