藍萼甲素的葡萄糖衍生物及其制備方法和應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥發(fā)明領域，具體涉及藍萼甲素（glaucocalyxinA，GLA)的葡萄糖 衍生物及其制備方法和應用。
【背景技術】
[0002] 藍萼甲素（glaucocalyxinA，GLA)，化學名稱為：（50，7a，90，IOa)-7, 14-二 羥基貝殼杉-16-烯-3, 15-二酮；又名leukameninF，分子式為C20H2804,分子量：332. 43， CAS登記號：79498-31-0,密度：1. 22g/cm3,熔點：513. 4°C，易溶于甲醇、乙醇，其結構式為 式III所示。
[0003]
【主權項】
1. 一種藍萼甲素的葡萄糖衍生物，該類衍生物具有式I或式II所示結構：
其中，&為氫或甲氧基，R2各自獨立的為氫或乙?；?，n為0或1。
2. 根據(jù)權利要求1所述的衍生物，其特征在于，所述衍生物為式Ia-Ic:
3. 根據(jù)權利要求1所述的衍生物，其特征在于，所述衍生物為式Ila-IIc所示化合物：
4. 一種制備權利要求1-3任一項所述的衍生物的方法，其特征在于，該方法包括以下 步驟： 步驟1，全乙?；宕咸烟呛腿阴；B氮葡萄糖的制備：以葡萄糖為原料，通過乙 酰化、溴代、疊氮化反應得到全乙?；宕咸烟呛腿阴；B氮葡萄糖； 步驟2,含末端炔基或羧基的苯甲醛衍生物的制備：以取代羥基苯甲醛為原料，通過與 3_溴丙炔發(fā)生親核取代反應，得到含末端炔基的苯甲醛衍生物，或與氯乙酸發(fā)生親核取代 反應，得到含羧基的苯甲醛衍生物； 步驟3,取代苯甲醛乙酰葡萄糖苷的制備：以步驟1制備的全乙酰化疊氮葡萄糖和步驟 2制備的含末端炔基的苯甲醛衍生物為原料，通過click反應，得到含三氮唑基團的取代苯 甲醛乙酰葡萄糖苷； 或，以步驟1制備的全乙酰化溴代葡萄糖和步驟2制備的含羧基的苯甲醛衍生物或 取代羥基苯甲醛為原料，通過親核取代反應，得到重要的中間產(chǎn)物，取代苯甲醛乙酰葡萄糖 苷； 步驟4,藍萼甲素葡萄糖衍生物的制備：以步驟3制備的重要中間產(chǎn)物取代苯甲醛乙 酰葡萄糖苷和藍萼甲素為原料，通過縮合反應，得到目標產(chǎn)物藍萼甲素的葡萄糖衍生物 Ia_Ic、IIa-IIc〇
5. 根據(jù)權利要求4所述的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟： 步驟1，全乙?；宕咸烟呛腿阴；B氮葡萄糖的制備：葡萄糖與乙酸鈉按摩爾 比為1:1. 0-1:2. 0混勾，在乙酸酐中加熱回流2-3h，反應結束后冷卻，加入冰水析出白色固 體，過濾，用5-6倍量的蒸餾水洗滌，干燥，得到全乙酰化葡萄糖；所得全乙?；咸烟侨苡?二氯甲燒，滴加溴化氫-乙酸溶液，室溫反應20-30h，之后加入冰水結束反應，二氯甲燒萃 取，有機層依次用蒸餾水、飽和碳酸氫鈉、食鹽水洗滌，干燥、減壓濃縮，得到全乙?；宕?葡萄糖；所得全乙酰化溴代葡萄糖溶于有機溶劑，加入疊氮化鈉，60-90°C反應5-12h，冷卻 至室溫，加入冰水析出固體，過濾，干燥，得全乙?；B氮葡萄糖； 步驟2,含末端炔基或羧基的苯甲醛衍生物的制備：：取代羥基苯甲醛與3-溴丙炔按 摩爾比為1:1-1:2于有機溶劑中攪拌溶解，加入0. 6-1摩爾當量的無水碳酸鉀，催化量的碘 化鉀，40-60°C反應6-10小時，反應結束后加入反應液等體積的蒸餾水，乙酸乙酯萃取，萃 取液無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮，硅膠柱層析分離純化，石油醚-乙酸乙酯體系洗脫， 得到含末端炔基的苯甲醛衍生物； 取代羥基苯甲醛置于5%氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)pH值為8-9,逐滴加入1. 4-1. 6倍量的氯 乙酸的飽和碳酸鉀溶液，再加入催化量的碘化鉀，加熱回流至溶液呈橘黃色后繼續(xù)反應2-4 小時，停止反應，體系冷卻至室溫，濃鹽酸調(diào)節(jié)溶液pH值為1-2,沉淀析出，抽濾，5-6倍量的 蒸餾水洗滌多次，所得固體乙醇-水重結晶，真空干燥后，得到含羧基的苯甲醛衍生物； 步驟3,取代苯甲醛乙酰葡萄糖苷的制備：步驟1中所得全乙?；B氮葡萄糖與步驟2 中所得含末端炔基的苯甲醛衍生物以摩爾比為1:1. 0-1:1. 5溶于有機溶劑，冰浴條件下加 入催化量的硫酸銅、L-抗壞血酸鈉，室溫條件下反應0-5h，加入1. 5-2倍反應液體積的蒸餾 水，乙酸乙酯萃取，依次用蒸餾水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮，柱層 析分離純化，石油醚-乙酸乙酯體系洗脫，得含三氮唑基團的取代苯甲醛乙酰葡萄糖苷； 步驟4,藍萼甲素葡萄糖衍生物的制備：步驟3中所得苯甲醛乙酰葡萄糖苷與藍萼甲素 以摩爾比為1:0. 5 - 1:1. 5溶于有機溶劑，酸性條件下反應1 - 5h，加入二氯甲烷萃取，依次 用飽和碳酸氫鈉、飽和食鹽水進行洗滌，無水MgS04干燥，過濾，濃縮，柱層析分離純化，石油 醚/乙酸乙酯體系洗脫，得到終產(chǎn)物la-Ic、Ila-lie。
6. 根據(jù)權利要求5所述的方法，其特征在于，所述步驟1中：所述的有機溶劑為四氫呋 喃、N，N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜、乙腈、1，4-二氧六環(huán)、二氯甲烷或氯仿； 所述步驟2中：所述的有機溶劑為四氫呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜、乙腈或 1，4-二氧六環(huán)。
7. 根據(jù)權利要求5所述的方法，其特征在于，所述步驟3中，所述的有機溶劑為四氫呋 喃、N，N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜、乙腈、1，4-二氧六環(huán)、正丁醇、正丁醇-水、二氯甲烷、氯 仿或乙腈。
8. 根據(jù)權利要求5所述的方法，其特征在于，所述步驟4中，所述酸性條件為無機酸、有 機酸或非質(zhì)子酸。
9. 含權利要求1-3任一項所述的衍生物的制劑，其特征在于，所述制劑由該衍生物與 藥學上可接受的載體組成。
10. 權利要求1-3任一項所述的衍生物或權利要求9所述的制劑在制備治療腫瘤的藥 物中的應用，所述腫瘤優(yōu)選為肝癌、宮頸癌、白血病、絨毛膜癌和肺癌。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種藍萼甲素的葡萄糖衍生物，該類衍生物具有式I或式II所示結構。其中，R1為氫或甲氧基，R2為氫或乙?；?，n為0或1。本發(fā)明還涉及所述葡萄糖衍生物的制備方法和應用，經(jīng)細胞毒活性評價實驗，結果發(fā)現(xiàn)藍萼甲素的葡萄糖衍生物具有較強的人腫瘤細胞增殖抑制活性，活性優(yōu)于母體化合物藍萼甲素。
【IPC分類】A61K31-7048, C07H1-00, A61P35-02, A61P35-00, A61K31-7056, C07H19-056, C07H13-04, C07H15-26
【公開號】CN104558077
【申請?zhí)枴緾N201510027426
【發(fā)明人】白素平, 李婷, 尹志奎, 黃鋒, 劉兆敏, 海廣范, 陳亮輝, 任茜茜, 周慧超, 張荒荒
【申請人】新鄉(xiāng)醫(yī)學院
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2015年1月20日