專利名稱：南方紅豆杉中紫杉醇生物酶解法提取工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于從植物中提取活性成分技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及南方紅 豆杉中紫杉醇生物酶解法提取工藝。
技術(shù)背景紫杉醇具有良好的抗癌活性，尤其對(duì)晚期、轉(zhuǎn)移性卵巢癌、乳 腺癌、肺癌有十分顯著的療效，對(duì)宮頸癌、食管癌、胃癌、膀胱癌、 惡性黑色素瘤、惡性淋巴瘤亦有療效。目前提取紅豆杉紫杉醇的技 術(shù)主要有化學(xué)法(包括溶劑浸泡、酸降解、堿降解等方法。這類方 法的缺點(diǎn)是往往導(dǎo)致有效成分變性，產(chǎn)品中的有害殘留較高且難以 去除)、物理法(使用低溫、冷凍(脆化)、超聲波、微波等物理作 用破壞靈芝孢子壁，缺點(diǎn)是有效物質(zhì)很難提取充分，且設(shè)備昂貴)、 機(jī)械法(通過(guò)碾壓、擠壓、噴射粉碎、氣流粉碎、撞擊等機(jī)械作用 破壞細(xì)胞壁，缺點(diǎn)同物理法一樣，但設(shè)備造價(jià)較低)。由于紅豆杉細(xì)胞組織中具有一層堅(jiān)硬的細(xì)胞壁外殼，且紫杉醇 通常狀態(tài)下表現(xiàn)為脂溶性物質(zhì)，因此釆用常規(guī)方法難以使植物細(xì)胞 充分破壁，且必須使用有機(jī)溶劑，普遍存在提取時(shí)間長(zhǎng)、收率低、 產(chǎn)品含有機(jī)物殘留。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種南方紅豆杉中紫杉醇生物酶解法提 取工藝，該方法對(duì)紫杉醇提取充分、提取效率高、工藝簡(jiǎn)單、成本 低、無(wú)環(huán)境污染。本發(fā)明的提取方法特征是以南方紅豆杉枝葉為原料，以類酵母菌的D426為酶解微生物，在32-36。C條件下進(jìn)行酶解，再經(jīng)過(guò)瞬間 冷凍、高速分離、噴霧干燥，得到高含量紫杉醇。上述酶解過(guò)程中的酶解微生物是以其活性菌體粉加入的，其制 備方法為將類酵母菌的D426置于菌種培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)菌種，菌種 培養(yǎng)基為肉湯瓊脂，而后由石臘油封存，3個(gè)月后再移植封存，加 大培養(yǎng)基溶液，使其擴(kuò)群，然后取其浮生藻凍干成活性菌體粉。本發(fā)明通過(guò)選用特定的微生物菌株對(duì)紅豆杉進(jìn)行酶解，使植物 細(xì)胞充分破壁，并對(duì)其分子結(jié)構(gòu)中的憎水基進(jìn)行有效的包容，在不 改變其他官能團(tuán)的前提下，使其具有親水性質(zhì)，因而能夠以水為溶 劑在酶解后直接進(jìn)行提取，解決了分子破壁和憎水性的技術(shù)難題。 與現(xiàn)有技術(shù)相比， 一級(jí)提取率高達(dá)96%、無(wú)有機(jī)溶劑殘留、無(wú)環(huán)境 污染。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1稱取清洗后紅豆杉的枝葉1000公斤，經(jīng)打漿榨汁，摻入150 克微生物活性菌體粉，攪拌均勻并在溫度為32t:條件下靜置5天， 瞬間低溫濃縮至25公斤，然后經(jīng)過(guò)高速離心分離、噴霧干燥獲得 粉狀干物質(zhì)755. 6克，按照江西德宇集團(tuán)企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(Q/JDY01-2007 ) 方法，測(cè)得其紫杉醇的含量為1.63%。實(shí)施例2稱取清洗后紅豆杉的枝葉1000公斤，經(jīng)打漿榨汁，摻入150 克微生物活性菌體粉，攪拌均勻并在溫度為34。C條件下靜置5天， 瞬間低溫濃縮至25公斤，然后經(jīng)過(guò)高速離心分離、噴霧干燥獲得 粉狀干物質(zhì)798. 4克，按照江西德宇集團(tuán)企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(Q/JDY01-2007 ) 方法，測(cè)得其紫杉醇的含量為1.53%。實(shí)施例3稱取清洗后紅豆杉的枝葉1000公斤，經(jīng)打漿榨汁，摻入150 克微生物活性菌體粉，攪拌均勻并在溫度為"。C條件下靜置5天， 瞬間低溫濃縮至25公斤，然后經(jīng)過(guò)高速離心分離、噴霧干燥獲得 粉狀干物質(zhì)853. 6克，按照江西德宇集團(tuán)企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(Q/JDYOl-MO7 ) 方法，測(cè)得其紫杉醇的含量為1.42%。
權(quán)利要求
1、一種南方紅豆杉中紫杉醇生物酶解法提取工藝，其特征是以南方紅豆杉枝葉為原料，以類酵母菌的D426為酶解微生物，在32-36℃條件下進(jìn)行酶解，再經(jīng)過(guò)瞬間冷凍、高速分離、噴霧干燥，得到高含量紫杉醇。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種南方紅豆杉中紫杉醇生物酶解法提取工藝，其特征是以南方紅豆杉枝葉為原料，以類酵母菌的D426為酶解微生物，在32-36℃條件下進(jìn)行酶解，再經(jīng)過(guò)瞬間冷凍、高速分離、噴霧干燥，得到高含量紫杉醇。本發(fā)明通過(guò)選定特定微生物菌株對(duì)紅豆杉枝葉進(jìn)行酶解，解決了分子破壁和憎水性的技術(shù)難題，一級(jí)提取率高達(dá)96％、無(wú)有機(jī)溶劑殘留、無(wú)環(huán)境污染。
文檔編號(hào)C12R1/645GK101245360SQ200810086379
公開(kāi)日2008年8月20日 申請(qǐng)日期2008年3月24日 優(yōu)先權(quán)日2008年3月24日
發(fā)明者劉浩元, 李曉濱, 詹周榮 申請(qǐng)人:江西德宇集團(tuán)