專(zhuān)利名稱(chēng)：抗菌化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及碳代青霉烯類(lèi)化合物，特別是那些含有羧基取代噻吩基的這類(lèi)化合物。本發(fā)明進(jìn)一步涉及它們的制備方法，在它們的制備過(guò)程中的中間體，它們作為治療藥劑的應(yīng)用以及含有它們的藥物組合物。本發(fā)明的化合物是抗菌素并且可用來(lái)治療那些通常用抗菌素治療的任何疾病，例如用來(lái)治療哺乳動(dòng)物包括人類(lèi)的細(xì)菌感染。
碳代青霉烯類(lèi)化合物是1974年首次由發(fā)酵介質(zhì)中析離的并被發(fā)現(xiàn)具有廣譜抗菌活性。自從這一發(fā)現(xiàn)之后，為制造新的碳代青霉烯衍生物進(jìn)行了大量研究并發(fā)表了數(shù)百篇專(zhuān)利和科學(xué)論文。
第一個(gè)，也是迄今唯一的市售碳代青霉烯化合物稱(chēng)為imipenem(N-甲酰亞胺基thiemamycin(6-(1-羥乙基)-3-[[2-[(亞胺基甲基)氨基)乙基]硫基]-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸)。這一化合物具有廣譜抗菌活性。
本發(fā)明提供具有廣譜抗菌活性，包括對(duì)革蘭氏陽(yáng)性和陰性菌、需氧和厭氧細(xì)菌在內(nèi)的化合物，它們對(duì)β-內(nèi)酰胺酶具有良好的穩(wěn)定性。此外本發(fā)明的代表性化合物還呈現(xiàn)令人滿(mǎn)意的藥物動(dòng)力學(xué)特性。
這里涉及的碳代青霉烯衍生物是按照一般接受的半系統(tǒng)命名法則
按此，本發(fā)明提供具有下式(Ⅰ)的化合物
其中R1是1-羥乙基，1-氟乙基或羥甲基;
R2是氫或C1-4烷基;
R3是氫或C1-4烷基;
并且其中的噻吩環(huán)可進(jìn)一步任意地被一個(gè)或兩個(gè)選自下列的基團(tuán)所取代鹵素，氰基，C1-4烷基、硝基、羥基、羧基、C1-4烷氧基、三氟甲基、C1-4烷氧羰基、氨基、C1-4烷基氨基，二-C1-4烷基氨基、磺酸、C1-4烷S(O)n-基(其中的n值為0-2)、C1-4烷酰胺基、C1-4烷酰(N-C1-4烷基)氨基、氨基甲?；1-4烷基氨基甲?；?、二-C1-4烷基氨基甲酰基和N-C1-4烷磺酰胺基;或者被連接在噻吩環(huán)的相鄰兩個(gè)碳原子上的四亞甲基所取代;本發(fā)明也提供上述化合物的藥物上可接受的鹽或在體內(nèi)可水解的酯。
術(shù)語(yǔ)烷基包括所有直鏈和支鏈的結(jié)構(gòu)，例如，C1-4烷基包括正丁基和2-甲基丙基。
最好R1是1-羥乙基。
R2是氫或C1-4烷基，例如甲基，乙基，正丙基，1-甲基乙基和正丁基。
最好R2是氫或甲基，特別是R2是甲基。
R3是氫或C1-4烷基，例如甲基，乙基，正丙基，1-甲基乙基和正丁基。
最好R3是氫或甲基，特別是R3是氫。
噻吩環(huán)上合適的取代基包括，例如鹵素氟、氯、溴和碘;
C1-4烷基甲基、乙基、丙基、1-甲基乙基、丁基和2-甲基丙基;
C1-4烷氧基甲氧基、乙氧基、丙氧基、1-甲基乙氧基、丁氧基和2-甲基丙氧基;
C1-4烷基氨基甲?；谆被柞；?、乙基氨基甲?；捅被柞；?
二-C1-4烷基氨基甲?；谆被柞；?，二乙基氨基甲?；?
C1-4烷基氨基甲胺基，乙胺基，丙胺基;
二-C1-4烷基氨基二甲胺基，二乙胺基，甲基乙胺基;
C1-4烷基S(O)n-甲硫基，甲基亞磺?；图谆酋；?
C1-4烷酰胺基乙酰胺基，丙酰胺基;
C1-4烷氧羰基甲氧羰基，乙氧羰基，丙氧羰基;
C1-4烷酰(N-C1-4烷基)氨基N-甲基乙酰胺基和N-乙基乙酰胺基;
N-C1-4烷磺酰胺基N-甲烷磺酰胺基和N-乙烷磺酰胺基;
最好是，當(dāng)噻吩環(huán)被任意地取代時(shí)，這任意的取代基是選自鹵素，氰基，C1-4烷基，硝基，羧基，羥基，C1-4烷氧基，氨基甲?；被?，三氟甲基和四亞甲基。
尤其優(yōu)選的是，噻吩環(huán)沒(méi)有被進(jìn)一步取代或只被一個(gè)羥基、甲基或四亞甲基所進(jìn)一步取代。
本發(fā)明包括所有那些具有式(Ⅰ)的差向異構(gòu)體，非對(duì)映異構(gòu)體和互變異構(gòu)體形式，其中在5-位上的絕對(duì)立體化學(xué)構(gòu)型如在式(Ⅰ)中說(shuō)明。當(dāng)一個(gè)鍵用一個(gè)楔形表示時(shí)，它是指在三維空間中這鍵是指向紙平面外，而當(dāng)一個(gè)鍵用影線(xiàn)表示時(shí)，它是指在三維空間中這鍵是指向紙平面內(nèi)，式(Ⅰ)化合物還有一些別的立體化學(xué)中心，即在R1基團(tuán)中(當(dāng)R1是1-羥乙基或1-氟乙基時(shí));在6位;在1位(當(dāng)R2是C1-4烷基時(shí));以及在吡咯烷環(huán)的2′位和4′位
優(yōu)選的化合物是那些其中β-內(nèi)酰胺上的質(zhì)子彼此具有反式構(gòu)型的化合物。當(dāng)R1是1-羥乙基或1-氟乙基時(shí)，最好是8位取代基具有R構(gòu)型，這樣，具有式(Ⅲ)的化合物和它的藥物上的可接受的鹽以及在體內(nèi)可水解的酯是一類(lèi)經(jīng)優(yōu)選的化合物
式中R2，R3和噻吩環(huán)上的任意取代基的定義與前面相同。
當(dāng)R2是C1-4烷基，例如甲基時(shí)，最好是化合物是以1R構(gòu)型的形式存在。
優(yōu)選的化合物是那些吡咯烷環(huán)的2′位和4′位具有下述立體化學(xué)絕對(duì)構(gòu)型的化合物
合適的一類(lèi)本發(fā)明的化合物是具有下列式(Ⅳ)的化合物和它的藥物上可接受的鹽以及在體內(nèi)可水解的酯
其中R3以及噻吩環(huán)上任意取代基的定義與前面式(Ⅰ)中的相同。
另一方面，合適的一類(lèi)化合物是那些式(Ⅳ)化合物，其中的R3是氫、甲基或乙基;并且在噻吩環(huán)上的任意取代基與式(Ⅰ)中定義的相同。
還有另一類(lèi)合適的具有式(Ⅳ)的化合物，其中的噻吩環(huán)進(jìn)一步被一個(gè)或兩個(gè)選自下列的取代基所取代甲基，乙基，羥基，羧基，氰基，氟，氯，溴，氨基甲?；趸?，甲氧基，乙氧基和丙氧基;或者被連接在噻吩環(huán)上相鄰碳原子上的四亞甲基所取代;R3的定義與式(Ⅰ)中的限定相同。
本發(fā)明的一類(lèi)具體的化合物是這樣的式(Ⅳ)化合物，其中R3是氫或甲基;噻吩環(huán)任意地進(jìn)一步被一個(gè)選自甲基、乙基，羥基，羧基，氰基，氯，溴，硝基，甲氧基，乙氧基和四亞甲基的取代基所取代。
本發(fā)明的一類(lèi)優(yōu)選的化合物是這樣的式(Ⅳ)化合物，其中R3是氫;
噻吩環(huán)進(jìn)一步被一個(gè)選自甲基、羥基、氯、四亞甲基和羧基的取代基所取代;
本發(fā)明的一類(lèi)更為優(yōu)選的化合物是這樣的式(Ⅳ)化合物，其中R3是氫;
噻吩環(huán)或者是沒(méi)有被進(jìn)一步取代，或者是被一個(gè)選自甲基或羥基的取代基所取代，或者被四亞甲基所取代。
具體的本發(fā)明化合物是，例如，下面這些式(Ⅳ)化合物(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2(2-(2-羧基-3-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(4-羧基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-2-(4，5，6，7)-四氫苯并[b]噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-甲基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-3-羥基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;以及它們的藥物上可接受的鹽類(lèi)和在體內(nèi)可水解的酯類(lèi)。
合適的藥物上可接受的鹽類(lèi)包括與酸加成的鹽類(lèi)諸如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、檸檬酸鹽、馬來(lái)酸鹽以及與磷酸和硫酸形成的鹽。另一方面，合適的鹽類(lèi)也可以是與堿形成的鹽諸如堿金屬鹽例如鈉鹽或鉀鹽，堿土金屬鹽例如鈣鹽或鎂鹽，與有機(jī)胺形成的鹽例如與三乙胺，嗎啉、N-甲基哌啶，N-乙基哌啶，普魯卡因，二芐胺，N，N-二芐基乙胺形成的鹽，或與氨基酸例如賴(lài)氨酸形成的鹽。
為避免疑慮，依賴(lài)于羧酸官能基的數(shù)目和所說(shuō)的陽(yáng)離子的價(jià)數(shù)，可以有一種，兩種，三種或四種形成鹽的陽(yáng)離子。
優(yōu)選的藥物上可接受的鹽是鈉鹽和鉀鹽。但在制備過(guò)程中為使鹽的析離變得容易，一些在選擇的溶劑中較少溶解的鹽類(lèi)可以更合適，而不管它是否是藥物上可接受的鹽。
在體內(nèi)可水解的酯類(lèi)是那些藥物上可接受的酯類(lèi)，它在人體內(nèi)可水解產(chǎn)生母體的羥基和羧基化合物。這類(lèi)酯可通過(guò)把待試驗(yàn)的化合物給試驗(yàn)動(dòng)物給藥，例如靜脈注射，然后檢驗(yàn)試驗(yàn)動(dòng)物的體液來(lái)鑒定。合適的與羥基形成體內(nèi)可水解酯的基團(tuán)包括乙酰基、丙?；⑿挛祯；珻1-4烷氧羰基例如乙氧羰基和苯乙?；：线m的與羧基形成體內(nèi)可水解酯的基團(tuán)包括C1-6烷氧甲基酯例如甲氧甲基;C1-6烷酰氧甲基酯例如新戊酰氧甲基;C3-8環(huán)烷氧羰氧C1-6烷基例如1-環(huán)己基氧羰氧乙基;1，3-二氧雜環(huán)戊-2-烯酮基甲基酯例如5-甲基-1，3-二氧雜環(huán)戊-2-烯-酮基甲基;2-苯并[c]呋喃酮酯和C1-6烷氧羰氧乙基酯例如1-甲氧羰氧乙基等，并且可在本發(fā)明的化合物中的任何一個(gè)羧基上成酯。
為了把式(Ⅰ)化合物或它的藥物上可接受的鹽或體內(nèi)可水解的酯用于哺乳動(dòng)物包括人類(lèi)的治療，特別是治療感染，通常是按照標(biāo)準(zhǔn)的藥物實(shí)踐的做法把它配制成藥物組合物。
這樣，本發(fā)明的另一個(gè)特點(diǎn)是提供一種藥物組合物，它包含式(Ⅰ)化合物或它的一種藥物上可接受的鹽或在體內(nèi)可水解的酯以及一種藥物上可接受的載體。
本發(fā)明的藥物組合物可以標(biāo)準(zhǔn)方式給需要治療的疾病患者用藥，例如通過(guò)口服、經(jīng)腸道或不經(jīng)腸道用藥。為這種目的本發(fā)明的化合物可用本專(zhuān)業(yè)已知的方法配制成，例如，片劑、膠囊、水溶液、油溶液或懸浮液、乳液，可分散的粉劑、栓劑以及消毒的可注射的水溶液或油溶液或懸浮液。
本發(fā)明的化合物可配制成充在小瓶中的干粉，它可以是只包含本發(fā)明的化合物，也可以是與輔劑混在一起的干粉混合物。例如一種本發(fā)明的酸性化合物可以與一種堿金屬碳酸鹽或碳酸氫鹽干燥混合。本發(fā)明化合物單獨(dú)地或與標(biāo)準(zhǔn)的賦形劑在一起配成冷凍干燥制劑也是可能的。標(biāo)準(zhǔn)的賦形劑包括結(jié)構(gòu)成形劑、冷凍防護(hù)劑和pH調(diào)節(jié)劑，諸如甘露醇、山梨醇、乳糖、葡萄糖、氯化鈉、糊精、蔗糖、麥芽糖、明膠、小牛血清白蛋白(BSA)、甘氨酸、甘露糖，核糖，聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)，纖維素衍生物，谷氨酸，肌醇，谷氨酸鉀，赤蘚醇，絲氨酸以及別的氨基酸和緩沖劑，例如磷酸氫二鈉和檸檬酸鉀。
除本發(fā)明的化合物以外，本發(fā)明的藥物組合物也可包含，(或一同給藥)一種或多種已知的其它臨床使用的抗菌劑(例如別的β-內(nèi)酰胺類(lèi)或氨基葡糖苷)，β-內(nèi)酰胺酶抑制劑(例如棒酸)，腎小管阻滯劑(例如丙磺舒)，以及代謝酶的抑制劑(例如脫氫肽(水解)酶的抑制劑，例如Z-2-酰胺基-3-取代的丙烯酸鹽諸如cilastatin)以及N-?；陌被嶂T如betamipron(也可參看本發(fā)明的合適的藥物組合物是那種適合于以單位劑型口服的組合物，例如包含100毫克至1克本發(fā)明化合物的片劑或膠囊。
一種優(yōu)選的本發(fā)明的藥物組合物是那種適宜于靜脈注射，皮下注射或肌內(nèi)注射的組合物，例如含有1至50%W/W本發(fā)明化合物的可注射組合物。
組合物的具體實(shí)例，是以1%在水中的溶液冷凍干燥后構(gòu)成的，并可通過(guò)加入0.9%氯化鈉水溶液而做成所需要的濃度，它的含量最好是在1毫克-10毫克/毫升之間，如下所示組合物1實(shí)例1的化合物 50毫克組合物2實(shí)例1的化合物 50毫克甘氨酸 31毫克組合物的進(jìn)一步的具體實(shí)例和上面相似，但是用實(shí)例2至7中的任何一種化合物替換實(shí)例1的化合物。
本發(fā)明的藥物組合物通常是給人類(lèi)施藥，用來(lái)防治細(xì)菌引起的感染，施藥方法與imipenem所用的一般方法相同，但考慮到本發(fā)明的化合物相對(duì)于imipenem臨床使用的藥物動(dòng)力學(xué)，應(yīng)藉助劑量水平來(lái)留有適當(dāng)?shù)挠嗟亍＿@樣，每位患者一天可通過(guò)靜脈注射、皮下注射或肌內(nèi)注射接受0.05至5克，最好是0.1至2.5克本發(fā)明化合物。組合物每天1-4次給藥，最好是一天1或2次。靜脈、皮下或肌內(nèi)給藥可藉助注射進(jìn)行。另外，靜脈注射劑量也可通過(guò)在一定時(shí)間內(nèi)的連續(xù)輸注來(lái)給出。此外，每位患者每天接受的口服劑量與每日的非經(jīng)腸道給藥的劑量接近相等。即合適的每日口服劑量也是0.05至5克本發(fā)明化合物，組合物每天1至4次給藥。
發(fā)明化合物，組合物每天1至4次給藥。
本發(fā)明進(jìn)一步的特點(diǎn)是提供一種制備式(Ⅰ)化合物或它的藥物上可接受的鹽或在體內(nèi)可水解的酯的方法，這方法包括把具有下式(Ⅴ)的化合物進(jìn)行脫保護(hù)基的反應(yīng)
其中的噻吩環(huán)可任意地被進(jìn)一步取代，如式(Ⅰ)中那樣。式(Ⅴ)中的R2定義與前面相同;R10是R3基團(tuán)或氨基保護(hù)基;R13是R1基團(tuán)，保護(hù)好的羥甲基或1-(保護(hù)的羥基)乙基;R11是氫或一個(gè)羧基保護(hù)基;R12是氫或氨基保護(hù)基，R18是羧基或保護(hù)的羧基，并且其中噻吩環(huán)上任意地取代基也被選擇性地保護(hù);其中至少存在一個(gè)保護(hù)基;此后如果必需;
(ⅰ)形成藥物上可接受的鹽(ⅱ)酯化以形成體內(nèi)可水解的酯。
保護(hù)基可一般選自文獻(xiàn)中已敘述的或?qū)κ炀毜幕瘜W(xué)家所熟知的、對(duì)于所述要保護(hù)的基團(tuán)是合適的任何一種基團(tuán)，并且可用通常的方法引入。
保護(hù)基也可用文獻(xiàn)中已敘述的或?qū)κ炀毜幕瘜W(xué)家是熟知的、對(duì)于所述要脫去的保護(hù)基合適的任何一種方便的方法來(lái)脫去，在選擇這類(lèi)方法時(shí)應(yīng)力圖在有效除去保護(hù)基的同時(shí)把對(duì)分子中其它部分的干擾減至最小。
具有式(Ⅴ)的化合物是新的，并形成了本發(fā)明的另一特點(diǎn)。
為方便起見(jiàn)下面給出了保護(hù)基的具體實(shí)例，其中“低級(jí)的”是指有關(guān)基團(tuán)中最好只有1-4個(gè)碳原子。應(yīng)當(dāng)理解這些實(shí)例不是詳盡無(wú)遺的。同樣，下面所給出的除去保護(hù)基的方法的具體實(shí)例也不是詳盡無(wú)遺的。沒(méi)有具體敘述的使用保護(hù)基和脫去保護(hù)基的方法當(dāng)然也在本發(fā)明的范圍以?xún)?nèi)。
羧基保護(hù)基可以是一種能形成酯的脂肪或芳香脂肪醇的基，或能形成酯的硅醇(所說(shuō)的醇或硅醇最好是含有1-20個(gè)碳原子)羧基保護(hù)基的實(shí)例包括直鏈或帶叉鏈的(1-12C)烷基(例如異丙基或叔丁基);低級(jí)烷氧基低級(jí)烷基(例如甲氧基甲基、乙氧基甲基、異丁氧基甲基);低級(jí)脂肪酰氧基低級(jí)烷基，(例如乙酰氧基甲基，丙酰氧基甲基、丁酰氧基甲基，新戊酰氧基甲基);低級(jí)烷氧羰氧基低級(jí)烷基(例如1-甲氧羰氧基乙基、1-乙氧羰氧基乙基);芳基低級(jí)烷基(例如對(duì)甲氧基芐基、鄰硝基芐基、對(duì)硝基芐基、二苯甲基和2-苯并[c]呋喃酮基);三(低級(jí)烷基)甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基;三(低級(jí)烷基)甲硅烷基低級(jí)烷基(例如三甲基甲硅烷基乙基);二芳基(低級(jí)烷基)甲硅烷基(例如叔丁基二苯基甲硅烷基);和(2-6C)烯基(例如烯丙基和乙烯基乙基)。
具體的適合于除去羧基保護(hù)基的方法包括例如，酸-、堿-、金屬-、或酶催化水解，對(duì)于諸如對(duì)硝基芐氧羰基這類(lèi)基團(tuán)可用氫化，對(duì)于鄰硝基芐氧羰基這類(lèi)基團(tuán)可用光解。
羥基保護(hù)基的實(shí)例包括低級(jí)烯基(例如烯丙基);低級(jí)烷酰基(例如乙?；?;低級(jí)烷氧羰基(例如叔丁氧羰基);低級(jí)烯氧羰基(諸如烯丙基氧羰基);芳基低級(jí)烷氧羰基(例如苯甲酰氧羰基，對(duì)甲氧基芐氧羰基、鄰硝基芐氧羰基、對(duì)硝基芐氧羰基;三低級(jí)烷基甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基);二芳基(低級(jí)烷基)甲硅烷基(例如叔丁基二苯基甲硅烷基)和芳基低級(jí)烷基(例如芐基)等。
氨基保護(hù)基的實(shí)例包括甲?；?、芳烷基、(例如芐基和取代的芐基，如對(duì)甲氧基芐基、硝基芐基、2，4-二甲氧基芐基和三苯甲基);二-茴香基甲基和呋喃甲基;低級(jí)烷氧羰基(例如叔丁氧羰基);低級(jí)烯氧羰基(例如烯丙基氧羰基);芳基低級(jí)烷氧羰基(例如芐氧羰基，對(duì)甲氧基芐氧羰基，鄰硝基芐氧羰基，對(duì)硝基芐氧羰基);三烷基甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基和叔丁基二甲基甲硅烷基);二芳基(低級(jí)烷基)甲硅烷基(例如叔丁基二苯基甲硅烷基);亞烷基(例如亞甲基);亞芐基和取代的亞芐基。
適當(dāng)?shù)某チu基和氨基保護(hù)基的方法包括，例如，酸-，堿-，金屬-或酶催化水解，對(duì)于諸如對(duì)-硝基芐氧羰基這類(lèi)基團(tuán)可用氫化，對(duì)于諸如鄰硝基芐氧羰基這類(lèi)基團(tuán)可用光解。
在式(Ⅰ)化合物中經(jīng)優(yōu)選的羧基和羥基保護(hù)基是烯丙基和對(duì)硝基芐基。經(jīng)優(yōu)選的除去烯丙基的方法，是在DMF中或一種偶極非質(zhì)子溶劑和四氫呋喃組成的混合物中，諸如二甲基亞砜/四氫呋喃或1，3-二甲基-2-氧雜-四氫嘧啶/四氫呋喃、或一種醇/四氫呋喃混合物諸如異丙醇/四氫呋喃或乙醇/四氫呋喃中，最好是在室溫用四(三苯基膦)鈀和Meldrum氏酸進(jìn)行鈀催化脫保護(hù)基。另外，在二氯甲烷中可用甲基苯胺代替Meldrum氏酸。在這些反應(yīng)條件下可通過(guò)加入鈉鹽，諸如2-乙基己酸鈉，使產(chǎn)物的鈉鹽沉淀而析離。
一種優(yōu)選的除去對(duì)硝基芐基的方法是用鈀催化劑進(jìn)行氫化。
本發(fā)明的另一個(gè)方面是通過(guò)下面的方法制備式(Ⅰ)和式(Ⅴ)化合物a)把式(Ⅵ)和式(Ⅶ)化合物進(jìn)行反應(yīng)
其中R2、R10、R11、R12、R13和R18的定義與前面相同，噻吩環(huán)上任意的取代基的定義也與前面相同，L是一個(gè)離去基團(tuán)，b)把具有下式(Ⅷ)的化合物環(huán)化
其中R2，R10，R11，R12，R13和R18的定義與前面相同，噻吩環(huán)上任意的取代基的定義也與前面相同，R14，R15，R16可獨(dú)立地選自C1-6烷氧基，芳氧基，二-C1-6烷基氨基和二芳基氨基或R14-R16中的任意兩個(gè)代表鄰-亞苯基二氧基，或者R14-R16中一個(gè)是C1-4烷基，烯丙基，芐基或苯基，而另外兩個(gè)基團(tuán)可獨(dú)立地選自C1-4烷基、三氟甲基或苯基，其中的任何一個(gè)苯基可任意地被C1-3烷基或C1-3烷氧基所取代;并且其中任何官能團(tuán)都可選擇性地保護(hù);然后，如果必需(ⅰ)脫去任何存在的保護(hù)基;
(ⅱ)形成藥物上可接受的鹽;
(ⅲ)酯化以形成在體內(nèi)可水解的酯。
適當(dāng)?shù)刈龇ㄊ窃谑?Ⅵ)化合物中L是羥基的活潑酯諸如磺酸酯(例如C1-6烷磺酰氧基，三氟甲烷磺酰氧基，苯磺酰氧基，甲苯磺酰氧基)，磷酸酯[例如二芳基磷酸酯，如二苯基磷酸酯)或者L是一個(gè)鹵化物(例如氯化物)。另一種可供選擇的L是砜類(lèi)，例如-SOCH＝CH-NHCOCH3，它可容易地被置換。
最好是L是二苯基磷酸酯(-O-P(O)(OPh)2)。
式(Ⅵ)化合物以及它們的制備在有關(guān)碳代青霉烯的文獻(xiàn)中是眾所周知的，例如可參看EP-A-126587，EP-A-160391，EP-A-243686和EP-A-343499。
式(Ⅵ)和式(Ⅶ)化合物之間的反應(yīng)，典型地是在一種堿，諸如一種有機(jī)胺例如二異丙基乙胺或一種無(wú)機(jī)堿例如一種堿金屬碳酸鹽諸如碳酸鉀存在的條件下完成的。反應(yīng)可方便地在-25℃和室溫之間，合適地是在4℃完成。反應(yīng)一般是在一種有機(jī)溶劑諸如乙腈或二甲基甲酰胺中完成的，反應(yīng)一般是按類(lèi)似于文獻(xiàn)中對(duì)類(lèi)似的反應(yīng)所敘述的方法來(lái)完成的。
具有式(Ⅶ)的化合物是新的并形成本發(fā)明的另一個(gè)方面。
式(Ⅶ)化合物可通過(guò)把下列式(Ⅸ)化合物脫去保護(hù)基而制得
其中R10，R12和R18的定義與前相同，噻吩環(huán)上的任意取代基的定義也與前相同，R17是一個(gè)保護(hù)基，例如C1-6烷?；?，C1-6烷氧羰基或苯甲酰基。最好是R17是乙?；褪宥⊙豸驶Ｊ?Ⅸ)化合物可通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)的脫保護(hù)基的方法而轉(zhuǎn)化為式(Ⅶ)化合物，例如乙?；赏ㄟ^(guò)在水醇溶液中，或烯醇例如烯丙醇，或四氫呋喃中進(jìn)行堿性水解而除去，
具有式(Ⅸ)的化合物是新的，并且形成了本發(fā)明的另一個(gè)方面。
式(Ⅸ)化合物可通過(guò)直接形成的式(Ⅹ)化合物的活潑衍生物與式(Ⅺ)化合物進(jìn)行反應(yīng)而制得
其中R10，R12和R17和R18的定義與前相同，噻吩環(huán)上的任意取代基的定義也與前相同。式(Ⅹ)化合物的活化衍生物包括相應(yīng)于式(Ⅹ)的硫代羧酸的酰鹵、酸酐和‘活化’酯，諸如1H-苯并[1，2，3]-三唑-1-基酯，五氟苯基酯和2，4，5-三氯苯基酯，或苯并咪唑-2-基酯。式(Ⅹ)和式(Ⅺ)化合物的反應(yīng)是在標(biāo)準(zhǔn)方法的條件下完成的，例如在室溫，在磺酰氯存在的條件下完成。
式(Ⅹ)和式(Ⅺ)化合物可通過(guò)熟練的化學(xué)家所熟知的標(biāo)準(zhǔn)方法來(lái)制備，諸如那些在后面實(shí)例中敘述的方法，在EP-A-126587中敘述的方法或和這些方法類(lèi)似或相似的方法。
適當(dāng)?shù)厥?，在?Ⅷ)化合物中R14，R15和R16可獨(dú)立地選自C1-6烷氧基諸如甲氧基、乙氧基、異丙氧基、正丙氧基或正丁氧基;芳氧基諸如任意取代的苯氧基，二-C1-6烷基氨基諸如二甲氨基或二乙氨基;二芳基氨在諸如二苯基氨基，或者R14-R16中的任何兩個(gè)基團(tuán)代表鄰-亞苯基二氧基。最好是R14-R16每個(gè)都有相同的意義并且都是C1-6烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、異丙氧基、正丁氧基或是苯氧基。
式(Ⅷ)化合物可在本專(zhuān)業(yè)已知的通常的反應(yīng)條件下環(huán)化而形成式(Ⅴ)化合物。典型的反應(yīng)條件是在60-150℃的溫度范圍內(nèi)，在一種基本是惰性的有機(jī)溶劑諸如甲苯，二甲苯或乙酸乙酯中加熱。典型地，反應(yīng)是在氮?dú)獗Ｗo(hù)下完成的，并且是在游離基消除劑例如氫醌存在的條件下進(jìn)行反應(yīng)的。
式(Ⅷ)化合物可以直接形成并環(huán)化。式(Ⅷ)化合物可通過(guò)把式(Ⅻ)化合物與(ⅩⅢ)化合物反應(yīng)而方便地制得
其中R2，R10-R16和R18的定義與前面相同，并且噻吩環(huán)的任意取代基的定義也與前面相同。合適地是，式(ⅩⅢ)化合物是亞磷酸酯或是這類(lèi)化合物的官能團(tuán)等價(jià)物。
式(Ⅻ)和式(ⅩⅢ)化合物之間的反應(yīng)可在一種有機(jī)溶劑諸如甲苯、二甲苯、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、乙腈或二甲基甲酰胺中方便地完成。典型地，反應(yīng)是在升高的溫度例如60℃～150℃進(jìn)行的。
式(Ⅻ)化合物可通過(guò)一些本專(zhuān)業(yè)已知的方法來(lái)制備。例如式(Ⅻ)化合物可通過(guò)把具有式(ⅩⅣ)的化合物進(jìn)行?；磻?yīng)來(lái)制備
式中R2，R10、R12、R13和R18的定義與前相同，并且噻吩環(huán)上任意取代基的定義也與前相同。酰化試劑是具有式(ⅩⅤ)的化合物
其中R11的定義與前面相同。
式(ⅩⅣ)化合物可以通過(guò)把具有式(ⅩⅥ)的化合物與式(Ⅶ)化合物反應(yīng)而制得
其中R2和R13的定義與前面相同。式(ⅩⅥ)化合物在本專(zhuān)業(yè)內(nèi)是已知的并且可以與式(Ⅶ)化合物在普通的本專(zhuān)業(yè)已知的?；椒ǖ臈l件下進(jìn)行反應(yīng)。
式(Ⅶ)、(Ⅻ)和(ⅩⅣ)化合物是新的，并由此而形成本發(fā)明的另一個(gè)特點(diǎn)。
下面的生物試驗(yàn)方法，數(shù)據(jù)和實(shí)例是用來(lái)解釋本發(fā)明的。
抗菌活性本發(fā)明的藥物上可接受的碳代青霉烯類(lèi)化合物是具有廣譜活性的有用的抗菌劑，它在體外對(duì)標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室微生物，包括革蘭氏陰性和革蘭氏陽(yáng)性菌都呈現(xiàn)出抗菌活性，這可用來(lái)篩分出對(duì)致病的細(xì)菌有活性的藥物。一個(gè)具體化合物的抗菌譜和藥效可在一種標(biāo)準(zhǔn)的試驗(yàn)體系中測(cè)定。特別是本發(fā)明的碳代青霉烯類(lèi)化合物顯示出對(duì)β-內(nèi)酰胺酶的良好穩(wěn)定性并且在哺乳動(dòng)物中具有特別好的排除半衰期，一般這些化合物顯示出超過(guò)imipenem的有意義的改進(jìn)。
本發(fā)明化合物的抗菌性能用普通的試驗(yàn)在體內(nèi)也可被證實(shí)。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)碳代青霉烯化合物對(duì)于溫血?jiǎng)游镆话闶窍鄬?duì)無(wú)毒性的，這一通則對(duì)于本發(fā)明的化合物也是適用的。當(dāng)把本發(fā)明的代表性化合物以超過(guò)為防止細(xì)菌感染所需要的劑量給大鼠施藥時(shí)，并未觀(guān)察到明顯的中毒癥狀或由于施用的化合物引起的不良效果。
用診斷靈敏度試驗(yàn)，在一種標(biāo)準(zhǔn)的體外試驗(yàn)系統(tǒng)中為本發(fā)明的有代表性的化合物取得了下面的試驗(yàn)結(jié)果，抗菌活性是借助最小抑菌濃度(MIC)來(lái)表示的，后者可用接種規(guī)模為104CFU/斑點(diǎn)通過(guò)瓊脂稀釋技術(shù)來(lái)測(cè)定。
最小抑菌濃度(MIC)(μg/ml)生物體 實(shí)例1化合物牛津金色鏈霉菌 0.125Oxford大腸埃希氏桿菌 0.008DCO摩氏變形菌 0.008I+001陰溝腸桿菌 0.008P-99脆弱桿菌 0.125AMP S
在以下作為本發(fā)明范圍的有代表性的實(shí)例中(a)除非特別說(shuō)明，NMR譜是在200MHz或400MHz的儀器上做的;
(b)烯丙氧基是指丙烯-1-基氧基-OCH2CH＝CH2;
(c)THF指四氫呋喃;
(d)DMF指二甲基甲酰胺(e)DMSO指二甲基亞砜(f)溶劑的蒸發(fā)是在減壓下進(jìn)行的;
(g)HPLC是指高壓液相色譜;
(h)溫度是用攝氏溫標(biāo)(i)TFA指三氟醋酸;
(j)tlc指薄層色譜。
實(shí)例1(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸(二鉀鹽)把4-硝基芐基(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-羧基-4-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸鹽(二異丙基乙胺鹽)(等價(jià)于250毫克游離酸，0.31mM)在水(10毫升)和碳酸氫鉀(65毫克，0.629mM)中形成的溶液在鈀/炭(10%)(200毫克)催化劑存在的條件下，在大氣壓下進(jìn)行氫化。用HPLC跟蹤反應(yīng)的進(jìn)行。在反應(yīng)終了后過(guò)濾除去催化劑，殘余的溶液用制備性的HPLC提純(Nucleosiol C-18，10μM，直徑2.4厘米;長(zhǎng)度25cm)。用水作洗脫劑，含有所需化合物的餾分經(jīng)濃縮和冷凍干燥即給出標(biāo)題化合物(65毫克，37%)。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ1.15(2d，2H);1.75(m，1H);2.65(m，1H);2.82(m，1H);3.2(dd，1H);3.3-3.5(m，2H);3.65(m，1H);3.85-4.05(m，2H);4.15(dd，1H);7.72(s，1H);7.78(s，1H).
原料的制備方法如下4-硝基-2-噻吩羧酸把2-噻吩羧酸(6.4克，50mM)懸浮于醋酐(15毫升)中，在攪拌下于1小時(shí)內(nèi)往其中慢慢滴加發(fā)煙硝酸(16毫升)在冰醋酸中(25毫升)的溶液，同時(shí)保持反應(yīng)混合物的溫度在30℃以下。反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)，產(chǎn)物經(jīng)過(guò)HP20SS樹(shù)脂柱層析(470毫升)提純，用甲醇/(水+1%醋酸)0/100→50/50作為洗脫劑。即得到純凈的標(biāo)題化合物(1.3克)以及4-和5-硝基噻吩-2-羧酸的混合物(4.4克)。
NMR(CDCl3)δ8.35(d，1H);8.5(d，1H)4-氨基-2-噻吩羧酸把4-硝基-2-噻吩羧酸(1克，5.7毫摩爾)在攪拌下加到SnCl.2H2O(3.25克，14.4毫摩爾)在濃鹽酸(10毫升)中所形成的溶液中?；旌衔镌谑覝?cái)嚢?小時(shí)后在HP20SS樹(shù)脂上進(jìn)行層析提純，用水作為洗脫液，即給出標(biāo)題化合物(0.59克，71%)。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ7.6(S，2H)(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-羧基-4-噻吩基氨基甲?；?-吡咯烷-4-基硫代醋酸酯在室溫，把(2S，4S)-4-乙酰硫基-2-羧基-1-(4-硝基芐氧羰基)吡咯烷(1.5克，4.08毫摩爾)溶解于亞硫酰氯中(10毫升)?；旌衔镌谑覝?cái)嚢?小時(shí)，蒸出亞硫酰氯，殘余的油狀物溶于二氯甲烷/甲苯中(10毫升，1∶1)然后蒸去溶劑、殘余的油狀物真空干燥1小時(shí)后溶解于二氯甲烷中(25毫升)。在0℃把這溶液加到由4-氨基-2-噻吩羧酸(0.58克，4.08毫摩爾)，三甲基甲硅基氯(1毫升，8.2毫摩爾)和二異丙基乙胺(3毫升，17.25毫摩爾)在二氯甲烷(40毫升)中所形成的溶液中。反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?2小時(shí)，蒸發(fā)溶劑，殘余物溶解在DMF中并在HP20SS樹(shù)脂上進(jìn)行層析，用乙腈/水/醋酸(40∶60∶1)洗脫，然后濃縮并冷凍干燥，即得到標(biāo)題化合物(0.84克，42%)。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ1.92(m，1H)，2.32(s，3H)，2.76(m，1H)，3.35(m，1H);3.9-4.2(m，2H);4.42(m，1H);5.0-5.35(m，2H);7.45(d，1H);7.65(d，1H);7.76(s，2H);7.96(d，1H);8.22(d，1H).
(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-羧基-4-噻吩基氨基甲?；?-吡咯烷-4-基硫醇把(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基-2-(2-羧基-4-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代醋酸酯(0.475克，0.963毫摩爾)溶于二噁烷/水(1∶1)組成的混合物(20毫升)中并用1M NaOH水溶液(2.5毫升，2.4毫摩爾)處理，反應(yīng)用HPLC監(jiān)測(cè)。1小時(shí)后，用6M鹽酸水溶液在0℃把反應(yīng)液的pH調(diào)節(jié)到3。然后把反應(yīng)混合物蒸發(fā)并在真空下干燥1小時(shí)。
(1R，5R，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-羧基-4-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸4-硝基芐基酯(二異丙基乙胺鹽)
把(1R，5R，6R，8R)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-2-二苯基膦酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸4-硝基芐基酯(0.575克，0.968毫摩爾)在DMF(5毫升)中形成的溶液加到(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(羧基-4-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇在DMF(5毫升)中所形成的溶液中。往反應(yīng)混合物中加入二異丙基乙胺(0.505毫升，2.9毫摩爾)，三正丁基膦(0.24毫升，0.968毫摩爾)和水(20微升，0.968毫摩爾)，并在4℃攪拌14小時(shí)。標(biāo)題化合物可在HP20SS樹(shù)脂(100毫升)上進(jìn)行層析來(lái)提純，用乙腈/水(30∶70)作為洗脫劑。蒸發(fā)并冷凍干燥即給出標(biāo)題化合物(0.375克，49%)。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ1.15(t，15H);1.25(2d，6H);1.95(m，1H);2.81(m，1H);3.15(q，2H);3.3(m，1H);3.42(m，1H);3.5-3.7(m，3H);3.9-4.2(m，3H);4.2-4.35(m，1H);4.35-4.55(m，1H);5.15-5.45(m，4H);7.35-8.05(m，8H);8.15(s，1H);8.18(s，1H).
實(shí)例2(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-3-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸(二鉀鹽)把(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-羧基-3-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯二異丙基乙胺鹽(等價(jià)于0.49克游離酸，0.7毫摩爾)在THF(25毫升)中形成的溶液用三苯基膦(20毫克，0.076毫摩爾)，己酸鉀(0.46M在乙酸乙酯中的溶液，3.2毫升，1.47毫摩爾)，己酸(0.235毫升，1.47毫摩爾)和四(三苯基膦)鈀(70毫克)在室溫處理1小時(shí)。然后往反應(yīng)混合物中加入乙酸乙酯并通過(guò)過(guò)濾來(lái)收集沉淀。把沉淀用乙酸乙酯洗滌后干燥(0.45克，87%)。粗產(chǎn)物被溶解于水(10毫升)中并在大氣壓下用鈀/炭催化劑(10%，0.35克)進(jìn)行氫化。用分析用的HPLC跟蹤脫保護(hù)基的過(guò)程。當(dāng)反應(yīng)終了(通常約0.5至1小時(shí))時(shí)，濾出催化劑，濾液濃縮后經(jīng)制備性色譜提純(Nucleosil C-18)，用水作洗脫劑，把洗脫液中需要的餾份濃縮并冷凍干燥后，即給出標(biāo)題化合物(0.13克，38%)。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ1.15(2d，6H);1.75(m，1H);2.5-2.7(m，2H);3.18(dd，1H);3.2-3.65(m，3H);3.9-4.05(m，2H);4.15(dd，1H);7.55(d，1H);7.98(d，1H).
(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-羧基-3-噻吩基氨基甲?；?-吡咯烷-4-基硫代醋酸酯這標(biāo)題化合物是用類(lèi)似于實(shí)例1的方法，由3-硝基-2-噻吩羧酸制備的，只是不必甲硅烷基化。氨基酸可用二異丙基乙胺增溶，使溶解于二氯甲烷中。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4，TFA-d)δ2.15(m，1H);2.27(s，3H);2.85(m，1H);3.4(m，1H);3.85-4.3(m，2H);4.53(dd，1H);5.22(d，2H);7.5(d，2H)，7.75(d，1H);7.92(d，1H);8.05(d，2H).
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-羧基-3-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(二異丙基乙胺鹽)這標(biāo)題化合物是用類(lèi)似于實(shí)例1的方法，由(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-羧基-3-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇和(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-2-二苯基膦酰氧基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯制備的。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ1.15(s，15H);1.3(2d，6H);2.05(m，1H);2.88(m，1H);3.15(q，2H);3.25(dd，1H);3.32-3.58(m，2H);3.62(qi，2H);3.9-4.05(m，2H);4.05-4.3(m，2H);4.4-4.65(m，3H);5.0-5.4(m，4H);5.85(m，1H);7.45(d，1H);7.64(d，1H)，7.7(d，1H);7.85-8.02(m，2H);8.25(d，1H).
實(shí)例3(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-4-羧基-2-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸(二鉀鹽)。
這標(biāo)題化合物是用相似于實(shí)例2的方法，由(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(4-烯丙氧羰基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙酯二異丙基乙胺鹽制備的NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ1.16(2xd，6H);1.67(m，1H);2.55(m，1H);2.64(m，1H);3.2(dd，1H);3.39-3.43(m，2H);3.60(m，1H);3.93-3.97(m，2H);4.15(dd，1H);7.15(s，1H);7.67(s，1H).
2-硝基-4-噻吩羧酸烯丙基酯在室溫，在碳酸鉀(4克，28.9毫摩爾)存在的條件下把2-硝基-4-噻吩羧酸(2.5克，14.45毫摩爾)懸浮于DMF(25毫升)中。往這溶液中加入烯丙基溴(5毫升，57.8基摩爾)并把混合物在室溫?cái)嚢柽^(guò)夜?；旌衔镉盟♂?zhuān)⒂靡宜嵋阴ヌ崛　饪s后，殘余物通過(guò)硅膠層析提純，用乙酸乙酯/石油醚作為洗脫劑(10∶30)，即給出標(biāo)題化合物(2.45克，77%)。
NMR(CDCl3)δ4.78(m，1H);4.80(m，1H);5.25(m，1H);5.45(d，1H);6.0(m，1H);8.25(d，1H);8.75(d，1H).
2-氨基-4-噻吩羧酸烯丙基酯在0℃把2-硝基-4-噻吩羧酸烯丙基酯懸浮于濃HCl中(25毫升)。加入SnCl2·2H2O(7.44克，32.36毫摩爾)并在室溫?cái)嚢?小時(shí)后用NaOH把pH值調(diào)節(jié)到10，用乙酸乙酯提取并通過(guò)快速硅膠色譜提純，用乙酸乙酯/石油醚(25∶75)作為洗脫劑，即給出標(biāo)題化合物(1.15克，55%)。
NMR(CDCl3)δ3.75(m，2H);4.65(m，1H);4.72(m，1H);5.2(m，1H);5.35(d，1H);6.(m，1H);6.57(d，1H);7.35(d，1H).
(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(4-烯丙氧羰基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代醋酸酯(二異丙基乙胺鹽)這標(biāo)題化合物是用類(lèi)似于實(shí)例1的方法，由2-氨基-4-噻吩羧酸烯丙基酯制備的，不同之處是像實(shí)例2中所敘述的那樣用二異丙基乙胺增溶，把2-氨基-4-噻吩羧酸烯丙基酯溶解于二氯甲烷中。
NMR(DMSO-d6)δ1.9(m，1H);2.35(s，3H);2.75(m，1H);3.25(m，1H);3.85-4.25(m，2H);4.5(m，1H);4.65-4.85(m，2H);5.05-5.5(m，4H);6.0(m，1H)，6.9-8.4(m，6H).
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(4-烯丙氧羰基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
這標(biāo)題化合物是用相似于實(shí)例2的方法，由(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(4-烯丙氧羰基-2-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代醋酸酯制備的。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ1.15(2d，6H);1.9(m，1H);2.8(m，1H);3.25(dd，1H);3.35(m，1H);3.55(m，1H);3.9-4.05(m，2H);4.2(m，1H);4.4-4.75(m，5H);5.0-5.4(m，6H);5.8-6.1(m，1H);7.4-8.3(m，6H).
實(shí)例4(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-2-(4，5，6，7)-四氫苯并[b]-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基-硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸(二鉀鹽)。
這標(biāo)題化合物是用類(lèi)似于實(shí)例2的方法，由(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-2-(4，5，6，7)-四氫苯并[b]噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯二異丙基乙胺鹽制備的。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ1.15(2d，6H);1.60-1.85(m，4H);2.4-2.85(m，6H);3.18(dd，1H);3.3-3.65(m，3H);3.88-4.1(m，2H);4.15(dd，1H).
(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-2-(4，5，6，7)-四氫苯并[b]噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代醋酸酯這標(biāo)題化合物是用類(lèi)似于實(shí)例2的方法，由2-氨基-3-羧基-4，5，6，7-四氫苯并[b]噻吩制備的。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ1.62-1.82(m，4H);2.15(m，1H);2.5-2.9(m，5H);3.45(m，1H);3.95-4.25(m，2H);4.6(dd，1H);5.15(d，1H);5.37(d，1H);7.5(d，2H);8.05(d，2H).
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-2-(4，5，6，7)-四氫苯并[b]噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羧乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(二異丙基乙胺鹽)。
這標(biāo)題化合物是用類(lèi)似于實(shí)例1的方法，由(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-2-二苯基膦酰氧基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯和(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-2-(4，5，6，7)-四氫苯并[b]噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇制備的。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ1.15(2d，6H);1.7(s，4H);2.05(m，1H);2.65(s，4H);3.25(dd，1H);3.3-4.75(m，10H);4.9-5.45(m，4H);5.75(m，1H);7.1-8.35(m，4H).
實(shí)例5(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-甲基-2-噻吩基氨基甲?；?-吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羧乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸(二鉀鹽)。
這標(biāo)題化合物是用類(lèi)似于實(shí)例2的方法，由(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-4-甲基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-羧酸烯丙基酯二異丙基乙胺鹽制備的。
NMR(DMSO-d6+AcOD d4)1.15(2d，6H);1.7(m，1H);2.32(s，3H);2.52(m，1H);2.67(m，1H);3.18(dd，1H);3.19(m，1H);3.50(m，2H);3.95(m，1H);4.02(m，1H);4.15(dd，1H);6.55(s，1H).
(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-乙氧羰基-4-甲基-2-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代醋酸酯。
這標(biāo)題化合物是用類(lèi)似于實(shí)例2的方法，由2-氨基-4-甲基-3-噻吩羧酸乙酯制備的，不同之處是在二異丙基乙胺存在的條件下把2-氨基-4-甲基-3-噻吩羧酸乙酯溶解于二氯甲烷中。
NMR(CDCl3)δ1.35(m，3H);2.2(m，1H);2.35(2s，6H);2.82(m，1H);3.52(m，1H);4.0(m 1H);4.12-4.4(m，3H);4.4-4.7(m，1H);4.9-5.5(m，2H);6.42(s，1H);7.2-8.3(m，4H).
(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-4-甲基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇在60℃把(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-乙氧羰基-4-甲基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代醋酸酯(0.86克，1.6毫摩爾)在二烷(10毫升)和水(5毫升)中用1MNaOH(5毫升4.8毫摩爾)處理3小時(shí)。反應(yīng)混合物在0℃用6MHCl中和至pH值為6。濾出沉出的白色固體，用水洗并在真空下干燥。
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-4-甲基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(二異丙基乙胺鹽)。
這標(biāo)題化合物是用類(lèi)似于實(shí)例1的方法，由(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-2-二苯基膦酰氧基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯和(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-4-甲基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇制備的。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)1.15(m，6H);2.05(m，1H);2.15(m，3H);2.9(m，1H);3.12(dd，1H);3.4-3.6(m，2H);3.9-4.15(m，2H);4.42(m，2H);4.6(m，3H);5.0-5.4(m，4H);5.6-6.05(m，1H);6.62(m，1H);7.2-8.3(m，4H).
實(shí)例6(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸，二鉀鹽往(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-烯丙氧羰基-5-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸-4-硝基芐酯(1克，1.2毫摩爾)在二氯甲烷(5毫升)和乙酸乙酯(5毫升)的混合物中所形成的溶液中加入三苯基膦(32毫克，0.12毫摩爾)，四(三苯基膦)鈀(48毫克，0.04基摩爾)以及2-乙基己酸鉀在乙酸乙酯中形成的0.4M溶液(3.5毫升，1.38基摩爾)。反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)，用乙酸乙酯稀釋?zhuān)瑸V出沉淀用醚洗并在真空下干燥。把粗品酸溶解于含有碳酸氫鉀(132毫克，1.32毫摩爾)的水(30毫升)溶液中并與10%鈀炭催化劑(0.5克)混合?；旌衔镌跉錃鈮合聰嚢?小時(shí)。濾出催化劑，棄去有機(jī)相，水溶液相經(jīng)部分濃縮后用反相層析提純(Nucleosil C1810μ，3.5×20厘米)，用水做洗脫劑，冷凍干燥后即給出標(biāo)題化合物(183毫克，27%)。
NMR(DMSO-d6，AcOD-d4)δ1.15(d，3H);1.17(d，3H);1.75(m，1H);2.63(m，1H);2.76(m，1H);3.20(dd，1H);3.34-3.43(m，2H);3.64(m，1H);3.94-4.02(m，2H);4.15(dd，1H);6.87(d，1H);7.49(d，1H).
MS(FAB+Ve)482(M+H)+;520(M+K)+。
原料可用下面的方法制備5-硝基-2-噻吩羧酸這標(biāo)題化合物是按前面實(shí)例1中所敘述的那樣由2-噻吩羧酸作起始原料制得的，同時(shí)還得到4-硝基-2-噻吩羧酸。
NMR(CDCl3)δ7.65(d，1H);7.88(d，1H).
5-硝基噻吩羧酸烯丙基酯往5-硝基-2-噻吩羧酸(20克，0.11摩爾)在DMF(140毫升)的溶液中相繼地加入烯丙基溴(40毫升，0.46摩爾)和三乙胺(64毫升，0.46摩爾)，同時(shí)冷卻以使反應(yīng)混合物的溫度維持在30℃以下。加完試劑后，反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后用乙酸乙酯稀釋?zhuān)瑸V出沉淀出來(lái)的固體，濾液用水洗，用飽和氯化鈉水溶液洗，在MgSO4上干燥后濃縮。殘余物在硅膠柱上層析提純，用CH2Cl2-石油醚(3∶7)的混合物作為洗脫劑，即給出標(biāo)題化合物，為一白色固體(8.8克，38%)。
NMR(CDCl3)δ4.84(d，2H);5.36-5.45(m，2H);6.00(m，1H);7.71(d，1H);7.88(d，1H).
5-氨基-2-噻吩羧酸烯丙酯在冷卻下，往5-硝基-2-噻吩羧酸烯丙基酯(3.2克，15克摩爾)在濃鹽酸(35毫升)的溶液中加入SnCl2·H2O(10.1克，45毫摩爾)，混合物在室溫?cái)嚢?.5小時(shí)，用乙酸乙酯稀釋?zhuān)?N NaOH堿化至pH10。有機(jī)相用水洗，用飽和氯化鈉水溶液洗，用MgSO4干燥后濃縮。殘余物通過(guò)硅膠層析提純，用乙酸乙酯和石油醚(3∶7)的混合物作洗脫劑，即給出標(biāo)題化合物，為一黃色油狀物(1.94克，72%)NMR(CDCl3)δ4.34(br s，2H);4.73(d，2H);5.23(d，1H);5.36(d，1H);5.99(m，1H);6.09(d，1H);7.48(d，1H).
(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-烯丙氧羰基-5-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代醋酸酯。
往(2S，4S)-4-乙酰硫基-2-羧基-1-(4-硝基芐氧羰基)吡咯烷(3.79克，10.3毫摩爾)在CH2Cl2(12毫升)中形成的溶液中加入亞硫酰氯(3.75毫升，51.5毫摩爾)和DMF(0.055毫升)?；旌衔镌谑覝?cái)嚢?6小時(shí)，濃縮，把殘余的油狀物溶于CH2Cl2-甲苯中，再重新蒸發(fā)。殘余物在真空下干燥并被溶解于CH2Cl2(25毫升)中。把這溶液冷至0℃并往其中加入N-二異丙基乙胺(2.05毫升，11.8毫摩爾)和5-氨基-2-噻吩羧酸烯丙基酯(1.9克，10.3毫摩爾)的溶液。在室溫反應(yīng)15分鐘后蒸去溶劑，殘余物溶于水和乙酸乙酯的混合物中。有機(jī)層用MgSO4干燥，并蒸發(fā)至干。殘余物通過(guò)硅膠層析提純，用CH2Cl2-醚(9∶1)的混合物作洗脫液，即給出標(biāo)題化合物，為一黃色泡沫狀物(4.68克，85%)。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ2.33(s，3H);2.80(m，1H);3.38(m，1H);4.00-4.15(m，2H);4.52(m，2H);4.77(d，2H);5.02-5.42(m，4H);6.00(m，1H);6.77(m，1H);7.45(m，1H);7.60-7.68(m，2H);7.95(m，1H);8.23(m，1H).
(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-烯丙氧羰基-5-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫醇在0℃，往(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-烯丙氧羰基-5-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代醋酸酯(1.06克，2毫摩爾)在二氯甲烷(2毫升)中所形成的溶液中加入乙醇(4毫升)，接著加入5N甲胺在乙醇中的溶液(0.8毫升，4毫摩爾)。反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?.5小時(shí)。然后用6N HCl酸化至pH4。往溶液中加入乙酸乙酯，有機(jī)相用水和氯化鈉水溶液洗，用MgSO4干燥并蒸發(fā)，即給出標(biāo)題化合物，為一黃色泡沫狀物(0.96克，97%)，NMR(DMSO-d6-TFA)δ1.87(m，1H);2.73(m，1H);3.29(m，1H);3.44(m，1H);4.01(m，1H);4.42(m，1H);4.72(br s，2H)，5.02-5.40(m，4H);6.01(m，1H);7.76(m，1H);7.43(d，1H);7.61-7.68(m，2H);7.93(d，1H);8.25(d，1H).
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-烯丙氧羰基-5-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸-4-硝基芐基酯往(1R，5S，6S，8R)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-2-二苯基膦酰氧基-碳代青霉烯-3-羧酸-4-硝基芐酯(940毫克，1.9毫摩爾)在乙腈(10毫升)中所形成的溶液中相繼地加入N-二異丙基乙胺(0.33毫升，1.9毫摩爾)，(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-烯丙氧羰基-5-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇(1克，1.9毫摩爾)在三-正丁基膦(0.095毫升，0.38毫摩爾)和水中形成的混合物，反應(yīng)混合物在4℃保持過(guò)夜，蒸發(fā)至干，殘余物通過(guò)硅膠柱層析提純，用CH2Cl2-CH3CN(7∶3)的混合物作洗脫劑，即給出標(biāo)題化合物，為一黃色泡沫狀物(1.03克，72%)。
NMR(DMSO-d6-AcOD-d4)δ1.17(d，3H);1.19(d，3H);1.95(m，1H);2.83(m，1H);3.30-3.62(m，3H);3.96-4.30(m，4H);4.47-4.60(dt，1H);4.73(br s，2H);5.03-5.44(m，6H);6.00(m，1H);6.77(dd，1H);7.44(d，1H);7.61(dd，1H);7.67(d，1H);7.7(d，2H);7.94(d，1H);8.21(d，1H);8.24(d，2H).
實(shí)例7(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(5-羧基-3-羥基-2-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羥酸把(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(-5-羧基-3-羥基-2-噻吩基氨基甲酰基)-吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸鈉(92毫克，0.13毫摩爾)在水(5毫升)碳酸氫鈉中形成的溶液(把pH值調(diào)節(jié)到7.5)在Pd/C催化劑(10%)(45%毫克)存在下在大氣壓力下氫化。用分析用HPLC監(jiān)測(cè)，反應(yīng)約進(jìn)行45分鐘。濾出催化劑，把水溶液濃縮，通過(guò)制備性HPLC提純(Nucleosil C-18)，用水洗脫。把適當(dāng)?shù)酿s份冷凍干燥即給出標(biāo)題化合物(30毫克，42%)。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ1.15(m，6H);1.7(m，1H);2.65(m，2H);3.2(dd，1H);3.45(m，2H);3.6(m，1H);3.95(dq，1H);4.05(t，1H);4.15(dd，1H);7.18(s，1H).
原料可按下法制備3-叔丁氧基-2-乙氧羰基-5-噻吩羧酸叔丁酯把3-羥基-5-羧基-2-噻吩羧酸乙酯(25克，0.115摩爾)在干燥的CH2Cl2(200毫升)中所形成的溶液在室溫用二異丙基一叔丁基異脲(175毫升)滴加處理。這將引起放熱并使混合物熱至回流。然后把反應(yīng)混合物攪拌12小時(shí)，過(guò)濾除去固體，并把CH2Cl2蒸發(fā)。殘余的油狀物進(jìn)行硅膠層析，用石油醚∶乙醚(90∶10)洗脫，即給出兩種產(chǎn)物的混合物(28.5克)。這兩種產(chǎn)物通過(guò)快速層析分離，用CH2Cl2∶石油醚(1∶1)洗脫，即給出標(biāo)題化合物(12.6克，33%)。
NMR(DMSO-d6)δ1.29(t，3H);1.36(s，9H);1.53(s，9H);4.25(q，2H);7.41(s，1H).
3-叔丁氧基-2-羧基-5-噻吩羧酸叔丁酯把3-叔丁氧基-2-乙氧羰基-5-噻吩羧酸叔丁酯(11.5克，35毫摩爾)在二烷中與NaOH(2N)(34.5毫升，70毫摩爾)所形成的溶液在50℃加熱1.45小時(shí)。混合物冷卻至0℃，用HCl(2N)中和，蒸去溶劑，殘余物與濃的Na2CO3水溶液(400毫升)以及醚(200毫升)一起研制，回收水溶液相，冷卻至0℃，用HCl(5N)酸化，用醚提取。干燥后把醚相濃縮，用快速硅膠柱層析提純，即得到標(biāo)題化合物(3.45克)。
NMR(CDCl3)δ1.55(s，9H);1.58(s，9H);7.5(s，1H).
2-疊氮羰基-3-叔丁氧基-5-噻吩羧酸叔丁酯在0℃，把2-羧基-3-叔丁氧基-5-噻吩羧酸叔丁酯(3克，0.01摩爾)在干燥丙酮(100毫升)中形成的溶液用三乙胺(1.7毫升，0.012摩爾)滴加處理。把混合物在0℃攪拌15分鐘并滴加氯甲酸乙酯(1.25毫升，0.013摩爾)，30分鐘之后，在0℃慢慢加入疊氮化鈉(1.1克，0.017摩爾)在水(5毫升)中的溶液。在室溫?cái)嚢?小時(shí)后，把反應(yīng)混合物過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。油狀的殘余物被溶解于CH2Cl2中，溶液用水洗(兩次)，用MgSO4干燥，蒸發(fā)溶劑即給出標(biāo)題化合物(3.25克，100%)。
NMR(DMSO-d6)δ1.50(s，9H);1.60(s，9H);7.45(s，1H).
2-烯丙氧羰基氨基-3-叔丁氧基-5-噻吩羧酸叔丁酯把2-疊氮羰基-3-叔丁氧基-5-噻吩羧酸叔丁酯(1.5克，4.6毫摩爾)在烯丙醇(0.5毫升，7.3毫摩爾)和干燥甲苯(15毫升)中所形成的溶液在100℃加熱30分鐘，直到氮?dú)獾姆懦鐾Ｖ?。將混合物蒸發(fā)，殘余物通過(guò)快速硅膠柱層析提純，用石油醚∶乙醚(4∶1)作為洗脫液，即給出標(biāo)題化合物(1.64克，100%)。
NMR(CDCl3)δ1.28(s，9H);1.49(s，9H);4.66(m，2H);5.25-5.37(m，2H);6.0(m，1H);7.25(m，1H).
2-氨基-3-叔丁氧基-5-噻吩羧酸叔丁酯把2-烯丙氧羰基氨基-3-叔丁氧基-5-噻吩羧酸叔丁酯(1.64克，4.62毫摩爾)在無(wú)水THF(50毫升)中形成的溶液用PPh3(240毫克，0.923毫摩爾)，雙甲酮(1.3克，9.23毫摩爾)和Pd(PPh3)4(300毫克，0.277毫摩爾)處理。30分鐘后，蒸發(fā)溶劑，殘余物通過(guò)快速硅膠柱層析提純，用石油醚∶乙醚(80∶20)作洗脫劑，即給出標(biāo)題化合物(975毫克，98%)。
NMR(DMSO-d6)δ1.24(s，9H);1.45(s，9H);6.0(s，2H);7.08(s，1H).
(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-叔丁氧基-5-叔丁氧羰基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代醋酸酯把(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-4-乙酰硫基-2-羧基吡咯烷(1.5克，4毫摩爾)溶解于干燥CH2Cl2中(15毫升)并用亞硫酰氯(1.5毫升，20毫摩爾)和催化量的DMF(20毫升)處理?；旌衔镌谑覝?cái)嚢?2小時(shí)，蒸發(fā)溶劑，殘余的油狀物在真空下干燥2小時(shí)，溶解于CH2Cl2(15毫升)中，并在0℃加到2-氨基-3-叔丁氧基-5-噻吩甲酸叔丁酯(1.1克，4毫摩爾)在CH2Cl2(15毫升)和二異丙基乙胺(0.85毫升，4.9毫摩爾)中所形成的溶液中?；旌衔飻嚢?0分鐘，蒸發(fā)溶劑，殘余物通過(guò)快速硅膠柱層析提純，用石油醚∶乙醚(20∶80)作洗脫劑，即給出標(biāo)題化合物(2.17克，85%)。
NMR(CDCl3)δ1.56(s，9H);1.58(s，9H);2.32(s，3H);2.55(m，1H);2.74(m，1H);3.38(m，1H);4.01(m，1H);4.15(m，1H);4.63(m，1H);5.3(m，2H);7.39(s，1H);7.52(m，2H);8.22(m，2H).
(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羥基-5-羧基-2-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫醇。
把(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-叔丁氧基-5-叔丁氧羰基-2-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代醋酸酯(1克，1.6毫摩爾)溶解于CH2Cl2(2毫升)和干燥的乙醇(5毫升)中，并用甲胺(4.24M)在乙醇中的溶液(1.15毫升，4.83毫摩爾)處理，反應(yīng)的進(jìn)行程通過(guò)tlc監(jiān)測(cè)。1.5小時(shí)后，把混合物蒸發(fā)，殘余物溶解于CH2Cl2(5毫升)中并在室溫用TFA(5毫升)處理1.5小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，殘余物與醚一起研制即得標(biāo)題化合物(1.1克，100%)。
NMR(DMSO-d6)δ1.8(m，1H);2.7(m，1H);3.4(m，1H);4.00(m，2H);4.62(m，1H);5.00-5.26(m，2H);7.16(m，1H)，7.45(m，1H)，7.65(m，1H);7.94(m，1H);8.23(m，1H).
(1R，5R，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基-2-(3-羥基-5-羧基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥2基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯在氬氣保護(hù)下把(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-2-二苯基膦酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(800毫克，1.6毫摩爾)在DMF(8毫升)中所形成的溶液在室溫用(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羥基-5-羧基-2-噻吩基氨基甲?；?-吡咯烷-4-基硫醇(752毫克，1.6毫摩爾)，二異丙基乙胺(0.835毫升，4.8毫摩爾)，三丁基膦(200微升，0.8毫摩爾)和水(5毫升，0.8毫摩爾)處理12小時(shí)。然后把混合物在HP20SS柱上進(jìn)行層析提純，用乙腈，水進(jìn)行梯度洗脫，即得到標(biāo)題化合物(286毫克，25%)。
NMR(DMSOd6+AcOD-d4)δ1.1-1.3(m，6H);1.85(m，1H);2.75(m，1H);3.25(dd，1H);3.3(m，1H);3.5-3.7(m，1H);3.7-4.3(m，4H);4.5-4.8(m，3H);4.9-5.5(m，4H);5.9(m，1H);7.17(m，1H);7.46(m，1H);7.66(m，1H);7.96(m，1H);8.73(m，1H).
(1R，5R，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羥基-5-羧基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸。
在氬氣保護(hù)下，把(1R，5R，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羥基-5-羧基-2-噻吩基氨基甲?；?-吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(240毫克，0.335毫摩爾)在DMF(4毫升)中形成的溶液用Pd(PPh3)4(30毫克，0.026毫摩爾)和Meldrum氏酸(48毫克，0.335毫摩爾)處理?；旌衔镌谑覝?cái)嚢?小時(shí)，蒸去溶劑，殘余物溶于水中，用NaHCO3把pH值調(diào)節(jié)到7.5，再經(jīng)C18(Nucleosil)色譜提純，用水乙腈(梯度)洗脫，即給出標(biāo)題化合物(92毫克，39%)。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)1.15(m，6H);1.85(m，1H);2.5(m，1H)(underDMSO);2.77(m，1H);3.19(dd，1H);3.25-3.5(m，1H);3.8-4.2(m，3H);4.6(m，1H);4.7(m，1H);5.0-5.3(m，2H);7.15(s，1H);7.46(m，1H);7.67(m，1H);7.97(m，1H);8.24(m，1H).
權(quán)利要求
1.一種具有式(Ⅰ)的化合物
或它的藥物上可接受的鹽或在體內(nèi)可水解的酯；其中R1是1-羥乙基，1-氟乙基或羥甲基；R2是氫或C1-4烷基R3是氫或C1-4烷基并且其中的噻吩環(huán)可進(jìn)一步任意地被一個(gè)或兩個(gè)選自下列的基團(tuán)所取代鹵素、氰基、C1-4烷基、硝基、羥基、羧基、C1-4烷氧基，三氟甲基、C1-4烷氧羰基、氨基、C1-4烷基氨基、二-C1-4烷基氨基、磺酸、C1-4烷S(O)n-基，(其中的n值為0-2)C1-4烷酰胺基、C1-4烷酰-(N-C1-4烷基)氨基、氨基甲酰基、C1-4烷基氨基甲?；?、二-C1-4烷基氨基甲酰基和N-C1-4烷磺酰胺基；或者被連接在噻吩環(huán)的相鄰兩個(gè)碳原子上的四亞甲基所取代。
2.一種權(quán)利要求1的化合物，其中的R1是1-羥乙基。
3.一種權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的化合物，其中的R2是氫或甲基。
4.一種權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的化合物，其中的R2是甲基。
5.一種權(quán)利要求1-4中任意一項(xiàng)中的化合物，其中的R3是氫。
6.一種權(quán)利要求1-4中任意一項(xiàng)中的具有下式(Ⅳ)的化合物
其中R3和噻吩環(huán)上的任意取代基的定義與權(quán)利要求1中的相同。
7.一種權(quán)利要求6中的化合物，在其中的噻吩環(huán)上可任意地被鹵素、氰基、C1-4烷基、硝基、羧基、羥基、C1-4烷氧基、氨基甲?；?、氨基、三氟甲基或四亞甲基所取代。
8.一種權(quán)利要求6或7中的化合物，其中的R3是氫，并且噻吩環(huán)或者是未被進(jìn)一步取代，或者是被一個(gè)選自甲基或羥基或四亞甲基的取代基所取代。
9.一種權(quán)利要求1的化合物，它們是(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-3-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(4-羧基-2-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-2-(4，5，6，7)-四氫苯并[b]噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(3-羧基-4-甲基-2-噻吩基氨基甲?；?-吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-3-羥基-2-噻吩基氨基甲?；?-吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸;以及它們的藥物上可接受的鹽類(lèi)。
10.一種含有權(quán)利要求1至9的任何一項(xiàng)中的化合物的藥物組合物和一種藥物上可接受的載體。
11.一種通過(guò)給需要治療的患者服用抗菌有效劑量的式(Ⅰ)化合物來(lái)治療感染的方法。
12.一種制備權(quán)利要求1的化合物的方法，它包括把具有下式(Ⅴ)的化合物進(jìn)行脫保護(hù)基的反應(yīng)
其中R2的定義與權(quán)利要求1中的相同;R10是一個(gè)R3基團(tuán)(定義與權(quán)利要求1中的相同)或一個(gè)氨基保護(hù)基;R13是一個(gè)R1基團(tuán)(定義與權(quán)利要求1中的相同)，保護(hù)的羥甲基或1-(保護(hù)的羥基)乙基;R11是氫或一個(gè)羧基保護(hù)基;R12是氫或一個(gè)氨基保護(hù)基，R18是羧基或一個(gè)保護(hù)的羧基，并且其中在噻吩環(huán)上的任意取代基的定義與權(quán)利要求1中的相同，并且是選擇性地保護(hù)的;其中至少存在一個(gè)保護(hù)基;如果必需，還可進(jìn)行下述后處理(ⅰ)形成藥物上可接受的鹽，(ⅱ)進(jìn)行酯化以形成一種在體內(nèi)可水解的酯。
13.一種如在權(quán)利要求12中定義的具有式(Ⅴ)的化合物。
14.一種制備權(quán)利要求1的化合物或權(quán)利要求12中式(Ⅴ)所定義的化合物的方法，它包括a)把具有下式(Ⅵ)和(Ⅶ)的化合物進(jìn)行反應(yīng)
其中R2，R10，R11，R12，R13和R18的定義與權(quán)利要求12中的相同，噻吩環(huán)上任意的取代基的定義與權(quán)利要求12中的相同，并且L是一個(gè)離去基團(tuán)，或者b)把具有下式Ⅷ的化合物進(jìn)行環(huán)化反應(yīng)
其中R2，R10，R11，R12，R13和R18的定義與權(quán)利要求12中的相同，噻吩環(huán)上任意的取代基的定義與權(quán)利要求12中的相同，并且R14，R15和R16是獨(dú)立地選自C1-6烷氧基，芳氧基，二-C1-6烷基氨基、二芳基氨基;或者R14-R16中的任意兩個(gè)代表鄰一亞苯基二氧基，或R14-R16中的一個(gè)是C1-4烷基，烯丙基，芐基或苯基，而另外兩個(gè)基團(tuán)是獨(dú)立地選自C1-4烷基，三氟甲基或苯基，其中任意一個(gè)苯基上還可任意地取代著C1-3烷基或C1-3烷氧基;并且其中任何一個(gè)官能團(tuán)都可任意地被保護(hù)，如果必需，還可進(jìn)行下述后處理(ⅰ)除去保護(hù)基;(ⅱ)形成藥物上可接受的鹽;(ⅲ)酯化以形成在體內(nèi)可水解的酯。
15.一種如權(quán)利要求1中所定義的式(Ⅰ)化合物，是以非藥物上可接受的鹽的形式存在。
16.一種權(quán)利要求14中定義的具有式(Ⅶ)或式(Ⅷ)的化合物。
17.一種具有下式(Ⅸ)，(Ⅻ)或(ⅩⅣ)的化合物
其中R2，R10-R13，R18的定義與權(quán)利要求12中的相同，并且R17是保護(hù)基。
全文摘要
本發(fā)明是關(guān)于青霉烯類(lèi)抗生素，并提供一種具有上式(I)的化合物，及其可接受的鹽或在體內(nèi)可水解的酯。本發(fā)明也敘述了它們的制備方法，在它們的制備過(guò)程中涉及到的中間體，它們作為治療藥劑的應(yīng)用以及包含它們的藥物組合物。
文檔編號(hào)C07F9/568GK1077957SQ93102800
公開(kāi)日1993年11月3日 申請(qǐng)日期1993年3月26日 優(yōu)先權(quán)日1992年3月26日
發(fā)明者F·H·容 申請(qǐng)人:曾尼卡有限公司, 曾尼卡制藥有限公司