專利名稱：4-取代烷基卡巴潘尼姆類抗菌素的制作方法
專利說明 本發(fā)明涉及具有抗菌活性的，在4位帶有取代烷基的新的卡巴潘尼姆(Carbapenem)類抗菌素以及它們的無毒的可藥用的鹽。因此，本發(fā)明的卡巴潘尼姆抗菌素及其藥物組合物可用于治療人類以及其它動物的細(xì)菌感染;它可以單獨(dú)使用，也可結(jié)合其它抗菌素(514類，210亞類)一起使用。本發(fā)明也提供了這類卡巴潘尼姆抗菌素的制備方法以及一些新的中間體。
用于這一類化合物的術(shù)語既可以用基于來源名稱“卡巴潘尼姆(Carbapenem)”的俗名系統(tǒng)，也可以用化學(xué)文摘(Chemical Abstract)上的系統(tǒng)命名法。在本發(fā)明中，位置的標(biāo)志數(shù)是按照化學(xué)文摘的體系，例如，3-R3，4-R2，6-R1-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸，如下式所示
在這里作為一類化合物使用的術(shù)語“卡巴潘尼姆”，是可以和名稱7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸互相交換地使用的。但是在所有的例子中，位置的數(shù)字標(biāo)志都是按照化學(xué)文摘所應(yīng)用的體系，如上式所解釋的那樣。
在這一領(lǐng)域已知有許多卡巴潘尼姆類抗菌素。這類抗菌素中典型的有沙納霉素(thienamycin)(美國專利號3，950，357，1976年4月13日頒布)，它首次是由發(fā)酵析離的，并呈現(xiàn)廣譜抗菌活性。Imipenem(美國專利號4，194，047，1980年3月18日頒布)是后來發(fā)展的沙納霉素的化學(xué)上更穩(wěn)定的衍生物。但是，由于它在人體中被腎脫氫肽酶(DHP)快速地分解，因此臨床使用受到限制。為此，imipenem在臨床應(yīng)用時(shí)要和一種DHP抑制劑一起服用。

雖然imipenem具有廣譜抗菌活性，但仍然需求更有效的卡巴潘尼姆類抗菌素，它們在治療感染疾病過程中在化學(xué)方面和生物方面都比imipenem更穩(wěn)定。尋求改進(jìn)的卡巴潘尼姆類抗菌素的努力一直在繼續(xù)著，這表現(xiàn)在這一領(lǐng)域中大量被授予和公開的專利文獻(xiàn)中。以下的公開和專利是最近期在卡巴潘尼姆領(lǐng)域進(jìn)展的代表。
1981年6月10日公布的歐洲專利公開EP-30，032公開了大量具有下式的卡巴潘尼姆類化合物
其中的R1，R2，R6，R7和R8獨(dú)立地選自尤其是由氫(R1和R2不是氫)，取代和未取代的具有1至10個(gè)碳原子的烷基、烯基和炔基構(gòu)成的一組基團(tuán)。該一般公開中除要求R1和R2不是氫以外，并沒有提供不同的取代基R1，R2，R6，R7和R8之間的區(qū)別。
1982年2月3日公布的歐洲專利公開EP-45，198中描述了一系列具有下式的卡巴潘尼姆類化合物
其中R1是烷基，芳基，烷硫基，芳硫基或酰氨基烷硫基;R2和R3獨(dú)立地選自烷氧羰基或氰基或式COR1的基團(tuán);R3還可以是烷基或芳基。該公開中提到4位有兩個(gè)取代基，其中至少有一個(gè)不是烷基。
1983年2月16日公布的歐洲專利公開EP-71，908中公開了一系列具有下式的卡巴潘尼姆化合物
其中R6和R7，R9和R10是不必區(qū)分的取代基團(tuán)，并且這兩個(gè)基團(tuán)是相同的取代基團(tuán)。雖然在第57頁中有R9和R10的優(yōu)選的取代基的列表，可是在實(shí)施例中卻只舉出了甲基。
1985年11月6日公布的歐洲專利公開EP-160，391中敘述了一系列具有下式的卡巴潘尼姆類化合物
其中R1和R2是相同的或不同的基團(tuán)，各自代表氫原子(條件是R1和R2不都代表氫原子)，鹵原子，C2-C7烷氧羰基，取代或未取代的C1-10烷基，C2-C6鏈烯基，C2-C6炔基，C1-C6烷氧基，C1-C6烷硫基，C3-C8環(huán)烷基，C6-C10碳環(huán)芳基，芳烷基，芳烯基或芳炔基，特別是其中被各種取代基所取代的基團(tuán)，或者R1和R2和它們所連接的碳原子一起，形成C3-C8脂環(huán)。但在實(shí)施例中列舉的R1和R2取代基僅限于那些R1和R2是甲基，甲氧基，氟和1，1-二甲基等基團(tuán)。
1985年11月13日公布的歐洲專利公開EP-160，876公開了一系列具有下式的卡巴潘尼姆類化合物
其中R9是鹵素，OR，OSO2R，

，SH，SR，

SO2R，NH2，NHR，N(R)2，

其中的R是氫，C1-6烷基，C2-6鏈烯基，C2-6炔基，苯基，具有7-12個(gè)碳原子的苯基烷基，具有3-6個(gè)碳原子的環(huán)烷基，具有3-6個(gè)碳原子在環(huán)上，并有1-6個(gè)碳原子在烷基部份的環(huán)烷基，雜環(huán)基類(包括雜環(huán)基，雜環(huán)基烷基，雜芳基和雜芳基烷基;其中在雜環(huán)基中還列有許多取代基。幸虧，在第29頁上提供了有代表性的R9取代基的表，它指明R9是通過鹵素，硫，氧，氮和磷而連接到卡巴潘尼姆環(huán)上的。
1986年2月5日公布的歐洲專利公開EP-170，019公開了一系列在4位被醚基取代并具有下式的卡巴潘尼姆類化合物
其中R1是低級烷基，芳基或芳基-低級烷基，R3和R4是通常存在于卡巴潘尼姆化合物中的取代基。實(shí)施例中所列舉的取代基是那些R1是甲基，乙基，異戊基和苯基等基團(tuán)。但是，1987年10月4日至7日召開的關(guān)于抗菌劑和化學(xué)治療的27屆國際科學(xué)會議摘要759中，EP-170，019發(fā)明者之一的E.Goetschi公開了一些1β-烷氧基卡巴潘尼姆類化合物，其中Ro 19-8928被具體地列舉出來，它的R1是羥乙基。
這樣，本發(fā)明的目的是提供一類新的抗菌素，它具有抗菌活性并可用于治療人類及其它動物的感染性疾病。本發(fā)明的進(jìn)一步的目的是提供制備這類抗菌素及它們的無毒的可藥用的鹽類和衍生物的化學(xué)方法和中間體，以及含有這類抗菌素的藥物組合物和在需要時(shí)給人類或動物服用這類抗菌素和組合物的治療方法。
本發(fā)明提供新的具有下式的4-取代烷基-卡巴潘尼姆抗菌素或其無毒的可藥用的鹽
其中R1，R2，R3，R4，A和B將在下面給予定義，這類化合物是微生物的強(qiáng)有力的抑制劑，并可在人類和其它動物的感染疾病的治療中用作抗菌劑。本發(fā)明也包括含有所說的卡巴潘尼姆抗菌素的藥物組合物，以及包括服用所說的卡巴潘尼姆抗菌素或其藥物組合物的治療方法。本發(fā)明也提供有用的中間體，它們的制備方法，以及制備具有上式Ⅰ的化合物的方法。
本發(fā)明提供新的4-取代烷基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸類化合物或其無毒的可藥用的鹽，它們是可用于治療人類和其它動物的感染性疾病的抗菌劑，具有下式Ⅰ結(jié)構(gòu)
其中 R1是氫，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2NH2，

A為未取代的或羥基取代的直鏈或支鏈C1-10亞烷基或間插有選自氧、硫和氮的雜原子的直鏈或支鏈C1-10亞烷基; R2是羥基，鹵素，C1-4烷氧基，氰基，疊氮基，季銨基，-NR5R6，

，氮雜環(huán)丁烷基或選自通過其碳原子來連接的雜芳基和雜脂環(huán)基的5或6員雜環(huán)基; B是一個(gè)直鏈或支鏈的C1-6亞烷基，或者當(dāng)R3通過它的碳原子連接到硫原子上時(shí)它就代表一個(gè)直接的化學(xué)鍵; R3是一個(gè)有機(jī)基團(tuán)的殘基; R4是氫，一個(gè)可除去的羧基保護(hù)基或是一個(gè)生理上可水解的酯基; R5和R6各自獨(dú)立地是氫，C1-6烷基，C1-4烷氧基，羥乙基，疊氮基乙基，氨基乙基，并且當(dāng)R5是氫或C1-4烷基時(shí)，R6是羥基，C1-4烷氧基，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，取代的C1-4烷基(其中所說的烷基取代基選自羥基，疊氮基，氨基，胍基，氰基，羧基，亞胺甲基和苯基)或一種氨基酸或肽的?；鶜埢?或者R5，R6和它們所連接的氮原子一起是一個(gè)未取代的或取代的雜環(huán)基，它具有1至2個(gè)環(huán)，每個(gè)環(huán)上可以有多至4個(gè)雜原子，這些雜原子可獨(dú)立地選自氧、氮和硫，其中所說的取代基選自C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羥基，鹵素，氨基，氰基，羧基，亞胺甲基，脲基，氨基甲?；?，C1-4烷氨基和氨基(C1-4)烷基; W是一個(gè)直接的鍵，氧，硫或NR10; Y是氧或NR10; Z是氫，羥基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，-NR7R8，氨基(C1-4)烷基，疊氮基(C1-4)烷基或羥基(C1-4)烷基; R7和R8各自獨(dú)立地是氫，C1-4烷基，羥基，芐氧基或鏈烷酰基; R10是氫，C1-4烷基，C1-4烷基氨基或二(C1-4)烷基氨基。
本發(fā)明也提供制備式Ⅰ化合物的立體選擇性方法以及在制備式Ⅰ化合物過程中涉及的新的中間體。
術(shù)語“C1-2烷基”，“C1-4烷基”，“C1-6烷基”和“C1-4烷氧基”在這里和在權(quán)利要求中應(yīng)用時(shí)(除非在文中另外指明)意指直鏈或支鏈的烷基或烷氧基，諸如甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，異丁基，叔丁基，戊基，己基等。優(yōu)選的是，這些基團(tuán)含有1至4個(gè)碳原子，更好是它們含有1至2個(gè)碳原子。術(shù)語“低級”是用來指1至6個(gè)碳原子，除非另外指明。在這里和在權(quán)利要求中應(yīng)用的術(shù)語“C3-6環(huán)烷基”意指一個(gè)碳環(huán)環(huán)系，諸如環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)庚基和環(huán)己基。在這里和在權(quán)利要求中應(yīng)用的術(shù)語“C5-6環(huán)烷烯”意指一個(gè)環(huán)系，它含有不飽和鍵，比如環(huán)戊烯和環(huán)己烯等。對“A”和“B”來說，在這里和在權(quán)利要求中應(yīng)用的術(shù)語“直鏈或支鏈的C1-10亞烷基”和“直鏈或支鏈的C1-6亞烷基”各自意指直鏈或支鏈的亞烷基，諸如亞甲基，亞乙基，亞丙基，甲基亞乙基，亞丁基，甲基亞丙基，乙基亞乙基，二甲基亞乙基，亞戊基，甲基亞丁基，乙基亞丙基，亞己基，甲基亞戊基，亞庚基等等。對于“A”來說，在這里和在權(quán)利要求中應(yīng)用的術(shù)語“羥基取代的直鏈或支鏈的C1-10亞烷基”意指被羥基取代的直鏈或支鏈的亞烷基，諸如2-羥基亞乙基，2或3-羥基亞丙基，2，3或4-羥基亞丁基，2或3-羥基-甲基亞丁基，2，3，4或5-羥基亞戊基等等。對“A”來說，在這里和在權(quán)利要求中應(yīng)用的術(shù)語“間插有選自氧，硫或氮的雜原子的直鏈或支鏈亞烷基”意指直鏈或支鏈的亞烷基，在其中含有氧，硫或氮原子，諸如-(CH2)-1-6O-(CH2)2-6-，-(CH2)1-6-S-(CH2)2-6-，-(CH2)1-6-NH-(CH2)2-6-，-(CH2)1-6-NCH3-(CH2)2-6-等等。除非另外專門指明，在這里和在權(quán)利要求中所用的術(shù)語“鹵素”是指包括溴，氯，碘和氟，而術(shù)語“鹵化物”則指溴化物，氯化物和碘化物陰離子。在這里和在權(quán)利要求中所用的術(shù)語“季銨基”意指一個(gè)季銨基，它可以是非環(huán)狀的，環(huán)狀的或二者的結(jié)合，并可包含一個(gè)或多個(gè)另外的選自氮、硫和氧的雜原子。合適的非環(huán)狀的，環(huán)狀的和結(jié)合的非環(huán)狀/環(huán)狀季銨基是那些在這里以及1984年12月4日公布的美國專利4，486，586中用-N≡Q定義的那些季銨基，該專利在此引入作為參考。
非環(huán)狀季銨基的實(shí)例是具有

的基團(tuán)，其中的R′，R″和R

可以相同或不同，并且可以是，例如，(低級)烷基，(低級)鏈烯基或取代的(低級)烷基。環(huán)狀季銨基的實(shí)例有完全不飽和的單環(huán)雜環(huán)環(huán)系以及雙環(huán)雜環(huán)環(huán)系(其中至少有一個(gè)含氮的環(huán)系是完全飽和的)。合適的環(huán)狀環(huán)系有，例如，吡啶基，嘧啶基，吡嗪基，噻唑基，噻二唑基，喹啉基，異喹啉基，噻唑并〔4，5-c〕-吡啶基等等，這些基團(tuán)均以其氮原子連接形成季銨基。結(jié)合的非環(huán)狀/環(huán)狀的季銨基的實(shí)例包括，例如，1-甲基吡咯烷基，1-甲基六氫吡啶基，1-甲基嗎啉基，1-甲基哌嗪基，1-甲基咪唑烷基和1-甲基異二氫吲哚基，這些基團(tuán)均以其氮原子連接形成季銨基。
術(shù)語“氨基酸或肽的?；鶜埢币庵柑烊淮嬖诘陌被峄蛴伤鼈冄苌碾牡孽；鶜埢?。合適的氨基酸是那些在這里述及的和別的已知的氨基酸，諸如丙氨酸，甘氨酸，精氨酸，半胱氨酸，異亮氨酸，亮氨酸，賴氨酸，蛋氨酸，苯丙氨酸，脯氨酸，蘇氨酸等等。合適的肽是那些含有天然存在的氨基酸的肽。但是，本專業(yè)的熟練技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)了解，非天然的氨基酸例如那些D構(gòu)型的氨基酸可以連接到天然存在的L-構(gòu)型的?；鶜埢陌被嵘?。最好是，合適的肽是天然存在的氨基酸所組成的二肽，諸如甘氨酰甘氨酸，甘氨酰亮氨酸，丙氨酰丙氨酸，丙氨酰苯丙氨酸，丙氨酰甘氨酸等等。本專業(yè)熟練的技術(shù)人員也應(yīng)當(dāng)理解，其中R2含有天然存在的氨基酸或肽的?；鶜埢氖舰袼镜目ò团四崮奉惢衔锟梢宰鳛橐环N在體內(nèi)有活性的前體藥物，即氨基酸殘基可在宿主體內(nèi)被肽酶所水解，產(chǎn)生所需的活性更高的卡巴潘尼姆類抗菌素形式。含有氨基酸或肽的?；鶜埢谋景l(fā)明的化合物在體內(nèi)的活性比在體外更高。在這里和在權(quán)利要求中應(yīng)用的術(shù)語“無毒的可藥用的鹽”是用來指那些無毒的酸鹽和堿鹽，以及兩性離子物種的鹽。與堿形成的鹽包括無機(jī)金屬鹽諸如鈉，鉀，鈣，鎂和銨鹽，以及與無毒的胺類如三烷基胺，吡啶，甲基吡啶，二芐基胺，乙醇胺，N-甲基嗎啉和其它用來與羧酸形成羧酸鹽的胺類所形成的鹽。與酸形成的鹽包括無機(jī)酸鹽諸如鹽酸鹽，氫溴酸鹽，氫碘酸鹽，硫酸鹽，磷酸鹽等等，以及有機(jī)酸鹽諸如甲酸鹽，乙酸鹽，馬來酸鹽，檸檬酸鹽，琥珀酸鹽，抗壞血酸鹽，乳酸鹽，富馬酸鹽和酒石酸鹽等已用來與堿性的胺形成鹽的酸鹽。因?yàn)槭舰窕衔镌谒腞1，R2和R3取代基中也可以有酸性或堿性基團(tuán)，所以“無毒的可藥用的鹽”也包括這些官能團(tuán)與適當(dāng)?shù)乃峄驂A的加成鹽，諸如鹽酸鹽，磷酸鹽，鈉鹽，鉀鹽，銨鹽，氯化物，乙酸鹽以及上述酸性基團(tuán)或堿性基團(tuán)的其它鹽類。除非另外專門指出，這里和權(quán)利要求中所用的術(shù)語“生理上可水解的酯基”是用來指生理上可接受并在生理?xiàng)l件下可被水解的酯基，諸如C1-6烷基，芐基，4-甲氧基芐基，(低級)鏈烷酰氧(低級)烷基，如乙酰氧基甲基，丙酰氧基甲基或新戊酰氧基甲基，(低級)烷氧羰氧(低級)烷基，如甲氧羰氧甲基，乙氧羰氧甲基或2-甲氧羰氧乙基，(5-甲基-2-氧代-1，3-二氮雜環(huán)戊-4-基)甲基等等。
在本發(fā)明中被用來封閉或保護(hù)羧酸官能團(tuán)的羧基保護(hù)基是那些本專業(yè)熟練技術(shù)人員所熟知的保護(hù)基，并且最好是，所說的保護(hù)基如果需要，可用不會導(dǎo)致分子的其它部分出現(xiàn)任何明顯破壞的方法，把它除去。例如應(yīng)用化學(xué)或酶水解的方法，在溫和反應(yīng)條件下用化學(xué)還原劑處理的方法，用紫外光照射的方法或催化氫化的方法等。這類容易除去的羧基保護(hù)基的實(shí)例包括C1-6烷基，2，2，2-三氯乙基，甲硅烷基諸如三甲基硅基和叔丁基二甲基硅基，苯基，環(huán)上取代的苯基如4-氯苯基，甲苯基和叔丁基苯基，苯基(低級)烷基，環(huán)上取代的苯基(低級)烷基如芐基，4-甲氧基芐基，4-硝基芐基，二苯甲基和三苯甲基，甲氧基甲基，2，2，2-三氯乙氧羰基，芐氧基甲基，(低級)鏈烷酰氧(低級)烷基諸如乙酰氧甲基，丙酰氧甲基，(低級)鏈烯基如乙烯基和烯丙基，未取代的或取代的苯基(C1-4)烷氧羰基諸如芐氧羰基和4-硝基芐氧羰基，以及(C2-4)鏈烯氧羰基諸如烯丙氧羰基。特別好的羧基保護(hù)基是芐基，4-硝基芐基，2-硝基芐基，2，4-二甲氧基芐基，4-甲氧基芐基等等，更好是烯丙基或取代的烯丙基。其它合適的保護(hù)基已在Theodora W.Greene著的“有機(jī)合成中的保護(hù)基”(“Protective Groups in Organic Syuthesis”)一書(Johm Wiley Sons出版，1981)第五章羧基的保護(hù)基中公開，該文獻(xiàn)作為參考引入本發(fā)明。
在本發(fā)明中可被用來封閉或保護(hù)氨基的氨基保護(hù)基，也是本專業(yè)熟練技術(shù)人員所熟知的。常規(guī)的氨基保護(hù)基的實(shí)例已在J.W.Barton所著的“有機(jī)化學(xué)中的保護(hù)基”(“Protective Groups in Organic Chemistry”，J.F.W.McOmie編，Plenum Press出版，New York，N.Y.，1973)第二章以及R.A.Boissonnas發(fā)表在“有機(jī)化學(xué)進(jìn)展”(Advances in Organic Chemistry)3 159-190(1963)的論文中描述過。對于本專業(yè)熟練的技術(shù)人員，顯然知道所用的具體的氨基保護(hù)基并不是關(guān)鍵性的，人們只需選擇一個(gè)基團(tuán)，它在反應(yīng)過程的以后的步驟中是穩(wěn)定的，并且在保持敏感的β-內(nèi)酰胺核不變的條件下能被除去就可以了。
適當(dāng)?shù)陌被Ｗo(hù)基包括，例如，酰基如甲?；阴；腿〈囊阴；?如鹵代乙?；?，苯甲?；腿〈谋郊柞；?，烷氧羰基，鹵代烷氧羰基，鏈烯氧羰基，芳烷氧羰基，鹵代芳烷氧羰基，芐基和芐基衍生物，三苯甲基和三苯甲基衍生物，亞磺?；苌铮酋；苌铮；苌锶玎彵蕉柞啺被蜱牾啺被蛩鼈兊难苌?，以及與醛或酮形成的席夫堿類。合適的氨基保護(hù)基的具體實(shí)例包括甲?；阴；?，三氟乙?；?，三氯乙酰基，苯甲酰基，甲苯甲?；?，2，2，2-三氯乙氧羰基，異丙氧羰基，叔丁氧羰基，環(huán)戊基氧羰基，環(huán)己基氧羰基，芐氧羰基，2-硝基芐氧羰基，4-硝基芐氧羰基，4-甲氧基芐氧羰基，4-氯芐氧羰基，烯丙氧羰基，2-呋喃氧羰基，三甲基硅基乙氧羰基，N-苯基氨基甲酰基，芐基，4-硝基芐基，三苯甲基，苯磺?；?，對甲苯磺?；?，2-硝基苯亞磺?；?，苯基硫羰基，三甲基硅基，三乙基硅基，三苯基硅基，叔丁基二甲基硅基，甲基二苯基硅基和二?；被Ｗo(hù)基諸如鄰苯二甲酰亞氨基，琥珀酰亞氨基及它們的衍生物。
本發(fā)明的化合物有一些不對稱碳原子，因此可以一些立體化學(xué)的形式存在。本發(fā)明包括立體異構(gòu)體的混合物以及單個(gè)立體異構(gòu)體。優(yōu)選的其中R1不是氫的式Ⅰ化合物，在1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷的環(huán)結(jié)構(gòu)上應(yīng)具有4R，5S，6S的構(gòu)型，這和抗菌素沙納霉素的立體化學(xué)構(gòu)型是相同的。此外，取代基R1和A本身還可能含有不對稱碳原子。如果合適，R1取代基可以R或S的構(gòu)型存在。本發(fā)明既包括R1的R構(gòu)型，也包括它的S構(gòu)型，例如，1-羥基乙基，1-氟乙基和1-氨基乙基取代基的R和S異構(gòu)體。最好是，R1取代基是R構(gòu)型的，比如1R-羥基乙基和1R-氨基乙基。在取代基A的亞烷基上帶有支鏈的烷基取代基或羥基取代基時(shí)，式Ⅰ化合物將會有額外的不對稱碳原子。本發(fā)明包括式Ⅰ化合物的兩種異構(gòu)體，例如實(shí)例57，58和152的化合物。
在這里和在權(quán)利要求中定義R3時(shí)所用的術(shù)語“有機(jī)基團(tuán)的殘基”意指任何一種至少含有一個(gè)碳原子的有機(jī)殘基，諸如甲基。此外，有機(jī)基團(tuán)還包括但不限制于所有那些在這里解釋的以及在卡巴潘尼姆領(lǐng)域內(nèi)已知的3-取代基的那些有機(jī)基團(tuán)。適當(dāng)?shù)募句@化的含氮雜環(huán)己在1987年2月10日頒布的美國專利4，642，341和1987年2月17日頒布的美國專利4，644，061中被公開，這兩篇專利文獻(xiàn)在此作為參考引入。其它合適的基團(tuán)已在1988年5月17日頒布的美國專利4，745，188，特別是R8的定義中被公開，該文獻(xiàn)在此引入作為參考。別的適當(dāng)?shù)脑赗3中定義的有機(jī)基團(tuán)，已在1989年4月18日頒布的美國專利4，822，787，1989年6月20日頒布的美國專利4，840，946，1989年9月5日頒布的美國專利4，863，916，1989年12月19日頒布的美國專利4，888，344，1990年8月28日頒布的美國專利4，952，397和1990年10月9日頒布的美國專利4，962，103中被公開，這些專利文獻(xiàn)在此引入作為參考。
R3優(yōu)選為氫，C3-6環(huán)烷基或取代的C3-6環(huán)烷基，C5-6環(huán)烯基或取代的C5-6環(huán)烯基，苯基或取代的苯基，羥基，C1-4烷氧基，C1-4烷硫基，苯硫基或取代的苯硫基，鹵素，氰基，硝基，-NR7R8，

，或是一個(gè)選自雜芳環(huán)或雜環(huán)脂環(huán)的，未取代或取代的雜環(huán)基團(tuán)
它有1至2個(gè)環(huán)，在每個(gè)環(huán)中有4至7個(gè)環(huán)成員，并在每個(gè)環(huán)中可含有多至4個(gè)雜原子，這些雜原子獨(dú)立地選自氧，氮和硫;其中所說的雜環(huán)基團(tuán)可通過一個(gè)連接在所說雜環(huán)基團(tuán)的碳原子上的硫原子而被連接;其中所說的C3-6環(huán)烷基，C5-6環(huán)烯基，苯基和雜環(huán)取代基可以選自由下列基團(tuán)構(gòu)成的一組基團(tuán)一個(gè)或兩個(gè)C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羥基，鹵素，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，氰基，羧基，亞胺甲基，脲基，氨基甲?；?，氨基(C1-4)烷基，C1-4烷基氨基(C1-4)烷基，二(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基，C1-4烷氧羰基，C1-4烷氧羰基(C1-4)烷基，氨基(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基和C1-4烷基羰氧基，并且所說的雜環(huán)基還可以被

基所取代。
在R2的定義中，這里和權(quán)利要求中所用的術(shù)語“氮雜環(huán)丁烷基”意指未取代的或取代的，并且在式Ⅰ化合物的R2，R3，R5和R6的定義中，術(shù)語“雜環(huán)基”是未取代的或取代的，包括在這里作解釋用的雜環(huán)基，并且也包括，但不限制于呋喃基，噻吩基，噻唑基，咪唑基，咪唑啉基，噁唑基，噁二唑基，噻二唑基，三唑基，四唑基，異噁唑基，異噻唑基，吡咯基，3-吡咯烷-1-基吡喃基，四氫呋喃基，吡唑基，吡啶基，嘧啶基，四氫呋喃基，噠嗪基，吡嗪基，三嗪基，氮雜環(huán)丁烷基，吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，噻唑烷-5-基，嗎啉基，硫代嗎啉基，1，4-噻嗪-2-基，苯并噁唑基，吲哚基，苯并咪唑基，喹啉基，異喹啉基，喹喔啉基，喹唑啉基，6，7-二氫-5H-吡唑并〔1，2-a〕〔1，2，4〕三唑鎓-6-基，其中所說的R2，R3，R5和R6的氮雜環(huán)丁烷基和雜環(huán)取代基是選自包括一個(gè)或兩個(gè)下列基團(tuán)的一組基團(tuán)C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羥基，鹵素，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，氰基，羧基，亞胺甲基，脲基，氨基甲?；?，氨基(C1-4)烷基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基，C1-4烷氧羰基，C1-4烷氧羰基(C1-4)烷基，C1-4烷基羰氧基和

基。
其中的R4是氫，陰離子電荷或生理上可水解的酯基的式Ⅰ化合物和其無毒的可藥用鹽一起，可用作抗菌劑。式Ⅰ的其余化合物是有價(jià)值的中間體，可以轉(zhuǎn)化為上述有生物活性的化合物。
式Ⅰ的卡巴潘尼姆類化合物可以用各種方法來制備。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，式Ⅰ化合物優(yōu)選是由新的具有式Ⅱ的化合物來制備，
其中的R11是氫，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2O-P2，-CH2NH2，-CH2N-P4，
A是一個(gè)未取代的或被羥基取代的直鏈或支鏈的C1-10亞烷基或者間插有選自氧、硫和氮的雜原子的、直鏈或支鏈的C1-10亞烷基;P1是一個(gè)通常容易除去的羧基保護(hù)基;R12是羥基，鹵素，C1-4烷氧基，疊氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4，或一個(gè)任意的帶保護(hù)基的氮雜環(huán)丁烷基或選自雜環(huán)芳基和雜環(huán)脂環(huán)基的5或6員雜環(huán)基，它們通過它們的碳原子連接;P2和P3各自獨(dú)立地是一個(gè)常規(guī)的羥基保護(hù)基;P4是一個(gè)常規(guī)的氨基保護(hù)基。
在另一個(gè)具體實(shí)施方案中，式Ⅱ化合物可以由新的具有式Ⅲ的中間體來制備，
其中R11，A，R12和P1的定義同上，R18是氫或P4，而P4是一個(gè)通常的氨基保護(hù)基。
在另外一個(gè)具體實(shí)施方案中，式Ⅲ化合物可由新的具有式Ⅳ的中間體來制備，
其中R11，A，R12和R18的定義同上。
式Ⅳ化合物可通過各種方法制備，并且作為解釋，將制備較優(yōu)選的一類式Ⅳ化合物的具體實(shí)例的方法總結(jié)為通過反應(yīng)式1所解釋的反應(yīng)系列制備具有式Ⅳa的中間體化合物。
在這一反應(yīng)系列中，在步驟(A)中由硫醇Ⅴ制備的硫酯Ⅵ在步驟(B)中被轉(zhuǎn)化為甲硅烷基烯醇醚Ⅶ，無需分離，即在步驟(C)中通過在4位的離去基團(tuán)L的親核取代而被偶聯(lián)成氮雜環(huán)丁酮Ⅷ。得到的中間體Ⅸ(例舉的是β-異構(gòu)體的形式)然后在步驟(D)中被皂化產(chǎn)生相應(yīng)的羧酸Ⅳa。在反應(yīng)式1中解釋的反應(yīng)的一般過程和方法，已在由本發(fā)明者在1988年9月20日頒布的美國專利4，772，683中敘述過，該專利在此引入作為參考。
反應(yīng)式1
現(xiàn)在參看反應(yīng)式1，步驟(A)說明硫醇Ⅴ轉(zhuǎn)化為硫酯Ⅵ的酯化反應(yīng)。步驟(A)對于本專業(yè)熟練的技術(shù)人員是眾所周知的，它可用其中R是氫或甲基的2-吡啶甲硫醇和適當(dāng)?shù)慕?jīng)活化的羧基部分，像這里描述的那樣來進(jìn)行反應(yīng)，其中A和R12的定義同上。
步驟(B)說明硫酯Ⅵ與三氟甲磺酸三有機(jī)基硅基酯甲硅烷基化試劑之間反應(yīng)而形成甲硅烷基烯醇醚Ⅶ。步驟(B)的反應(yīng)是在一種惰性有機(jī)溶劑中，在一種有機(jī)堿存在的條件下進(jìn)行的?？梢詰?yīng)用的合適的惰性有機(jī)溶劑包括二氯甲烷，四氫呋喃，四氯化碳，環(huán)己烷，二噁烷，二甲氧基乙烷，乙醚和氯仿。反應(yīng)溫度可在大約-40℃至+30℃范圍內(nèi)。最方便地是，在冷卻條件下，最好在大約-15℃至0℃之間把反應(yīng)物進(jìn)行混合，然后讓它們逐漸溫?zé)岬绞覝亍?br> 三氟甲磺酸三有機(jī)基硅基酯甲硅烷基化試劑是眾所周知的，它包括三氟甲磺酸三甲基硅基酯，三氟甲磺酸三異丙基硅基酯，三氟甲磺酸三乙基硅基酯，三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯，三氟甲磺酸叔丁基二苯基硅基酯或三氟甲磺酸2，4，6-三(叔丁基苯氧基)二甲基硅基酯。用三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯已經(jīng)獲得優(yōu)良的結(jié)果。這樣，P將是所用的具體的三氟甲磺酸三有機(jī)基硅基酯甲硅烷基化試劑的三有機(jī)基硅基殘基。
合適的有機(jī)胺堿包括二異丙基乙胺，DBU(1，8-二氮雜雙環(huán)〔5.4.0〕十一-7-烯)，DBN(1，5-二氮雜雙環(huán)〔4.3.0〕壬-5-烯)，但特別優(yōu)選的是三(C1-C4)烷基胺諸如三甲胺，三乙胺，三丁胺和三丙胺。但是已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，在有一些情況下為進(jìn)行步驟(A)的反應(yīng)可能必需用更強(qiáng)的堿。
一般，有機(jī)堿和三氟甲磺酸三有機(jī)基硅基酯甲硅烷基化試劑存在的量比硫酯Ⅵ要過量差不多兩倍摩爾數(shù)，而有機(jī)堿又稍為比三氟甲磺酸三有機(jī)基硅基酯甲硅烷基化試劑過量一些。反應(yīng)時(shí)間一般在大約1小時(shí)至大約5小時(shí)之間變化，不過一般在大約3小時(shí)即可獲得最高的收率。最好是，反應(yīng)在惰性氣氛下進(jìn)行。
在步驟(C)中，甲硅烷基烯醇醚Ⅶ和4-位取代的氮雜環(huán)丁酮Ⅷ反應(yīng)而產(chǎn)生中間體Ⅸ。反應(yīng)是在一種路易斯酸催化劑存在的條件下在一種在路易斯酸催化劑存在時(shí)是惰性的溶劑中進(jìn)行的，并且最好是在惰性氣氛下進(jìn)行。
適當(dāng)?shù)纳厦嬗懻摰亩栊匀軇┳詈檬歉稍锏?，并且一般含有大約10%體積的總的反應(yīng)混合物。已發(fā)現(xiàn)，二氯甲烷能提供滿意的結(jié)果。
適當(dāng)?shù)穆芬姿顾岽呋瘎┌u化鋅，鹵化鋯和三氟化硼。已發(fā)現(xiàn)，氯化鋅能提供滿意的結(jié)果。
甲硅烷基烯醇醚Ⅶ被基團(tuán)“-A-R12”所取代，其中的A是一個(gè)未取代的或羥基取代的直鏈或支鏈的C1-10亞烷基，或一個(gè)帶有插入的，選自氧，硫和氮這類雜原子的直鏈或支鏈的C1-10亞烷基;R12是羥基，鹵素，C1-4烷氧基，疊氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4，或一個(gè)任意地經(jīng)保護(hù)的氮雜環(huán)丁烷基或選自雜環(huán)芳基或雜環(huán)脂環(huán)的5或6員雜環(huán)基，它們通過它們的碳原子而連接，其中P3是常規(guī)的羥基保護(hù)基，P4是常規(guī)的氨基保護(hù)基。
諸如式Ⅷ那樣的3，4-二取代氮雜環(huán)丁酮中間體，其中P2代表常規(guī)的羥基保護(hù)基而L代表常規(guī)的離去基團(tuán)，本身是已知的，并且在卡巴潘尼姆或潘尼姆(penem)核的6位帶有(R)-羥乙基取代基的卡巴潘尼姆或潘尼姆類抗菌素的合成中是關(guān)鍵性的中間體。
具有式Ⅷ的化合物中的4位上的取代基被標(biāo)明為“L”，它代表一個(gè)離去基團(tuán)，在甲硅烷基烯醇醚Ⅶ的親核取代反應(yīng)中能夠被置換。這類離去基團(tuán)包括酰氧基(如，乙酰氧基，丙酰氧基或叔丁酰氧基)，鹵素(如氯)，芳基磺?；?如苯磺?；?，甲磺?；蛯妆交酋；Ｗ詈檬?，“L”是乙酰氧基，因?yàn)?-乙酰氧基氮雜環(huán)丁酮是容易得到的原料。
氮雜環(huán)丁酮Ⅷ中的羥基保護(hù)基“P2”和具有式Ⅶ的甲硅烷基烯醇醚的取代基“R12”中的羥基保護(hù)基“P3”可以相同，也可以是不同的。較好是，“P2”和“P3”是相同的，并且更好是，“P”，“P2”和“P3”都是相同的。
對于本專業(yè)熟練的技術(shù)人員是已知的羥基保護(hù)基是所希望的，因?yàn)樗鼈兡芊乐垢狈磻?yīng)的發(fā)生并在反應(yīng)系列的以后各步提供增加的收率。合適的羥基保護(hù)基可以是，例如，酰基諸如芐氧羰基，二苯甲氧羰基，三苯甲氧羰基，對硝基-芐氧羰基和2，2，2-三氯乙氧羰基;芳基烷基諸如芐基，二苯甲基，三苯甲基或?qū)ο趸S基;或三有機(jī)基硅基諸如三(C1-C6)烷基硅基(如三甲基硅基，三乙基硅基，三異丙基硅基，異丙基二甲基硅基，叔丁基二甲基硅基，甲基二異丙基硅基或甲基二叔丁基硅基)，三芳基硅基(如三苯基硅基，三(對二甲苯基)硅基)或三芳烷基硅基(如，三芐基硅基)。這些和別的合適的羥基保護(hù)基的實(shí)例以及它們的形成和除去的方法，在本專業(yè)領(lǐng)域中是已知的，例如，可參看T.W.Greene所著的“有機(jī)合成中的保護(hù)基”(“Protective Groups in Organic Synthesis”)中的第2章，John Wiley Sons，New York，1981出版。
為“P2”和“P3”選擇的羥基保護(hù)基最好是一種可在以后的反應(yīng)步驟中除去的保護(hù)基。最好應(yīng)用龐大的三有機(jī)基硅基，諸如三異丙基硅基，叔丁基二苯基硅基或叔丁基二甲基硅基等，因?yàn)樗鼈兲峁┝嘶臼橇Ⅲw控制的還原步驟。這類基團(tuán)可在很溫和的條件下容易地除去，比如用HCl甲醇溶液處理或用氟化物離子處理(如用氟化四正丁基銨/四氫呋喃)，它們可保持敏感的β-內(nèi)酰胺核不變。
反應(yīng)步驟(C)最好是在惰性氣氛下進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)溫度在大約-30℃至大約室溫之間。最好是，在冷卻條件下，即在大約-15℃至大約+5℃時(shí)加入反應(yīng)物，讓它們在大約0-5℃進(jìn)行反應(yīng)，然后，如果需要，允許它們逐漸溫?zé)嶂潦覝?。如果需要，反?yīng)可攪拌進(jìn)行多至30小時(shí)以達(dá)到最高的收率。
得到的中間體Ⅸ的β-異構(gòu)體，可通過通常的層析方法或高壓液相層析(HPLC)與相應(yīng)的α-異構(gòu)體分離，或更好是通過結(jié)晶法來分離。另外，β-異構(gòu)體可在中間體Ⅸ的皂化一步(如下面步驟(D)中討論的那樣，步驟(D)產(chǎn)生相應(yīng)的羧酸Ⅳa)中與α-異構(gòu)體分離，因?yàn)棣?異構(gòu)體當(dāng)β/α比例為大約2/1或更大時(shí)即率先結(jié)晶析出。
在步驟(D)中，式Ⅸ化合物被皂化而產(chǎn)生相應(yīng)的羧酸Ⅳa。皂化對本專業(yè)熟練的技術(shù)人員是眾所周知的，它可按下面的步驟進(jìn)行。首先將式Ⅸ化合物溶解在一種溶劑如四氫呋喃和含水的四氫呋喃中，然后在冷卻下，加入過量的無機(jī)堿如氫氧化鈉。也可以加入過氧化氫。較好是往皂化反應(yīng)中加入過氧化氫，更好是，在加入無機(jī)堿之前就先加入過氧化氫。在大約0℃至大約室溫，反應(yīng)一般在1-2小時(shí)內(nèi)完成，在下一步用無機(jī)酸如鹽酸進(jìn)行酸化時(shí)就產(chǎn)生羧酸Ⅳa。
制備具有式Ⅲa的重氮基中間體的方法可以方便地總結(jié)于反應(yīng)式2中。簡單地說，在這個(gè)反應(yīng)系列中的步驟(E)中，氮雜環(huán)丁酮Ⅳa的羧酸部份被活化并被單羧基保護(hù)的丙二酸酯鎂鹽所置換，產(chǎn)生β-酮酯Ⅹ，然后它在步驟(F)中被重氮化而產(chǎn)生相應(yīng)的重氮基中間體Ⅲa。
反應(yīng)式2
現(xiàn)在參看反應(yīng)式2，在步驟(E)中，羧酸Ⅳa形成酮酯Ⅹ的反應(yīng)可方便地通過一個(gè)兩步過程來進(jìn)行。即先把羧酸部份用本專業(yè)熟練技術(shù)人員所熟知的普通羧酸活化基團(tuán)來活化，優(yōu)選地，用羰基二咪唑在一種惰性溶劑諸如四氫呋喃，二甲氧基乙烷，乙腈，苯和甲苯中并且最好是在苯或甲苯或乙腈-苯的混合物中進(jìn)行。反應(yīng)溫度可在大約-15℃至大約70℃，并且最好是在大約0℃-20℃之間的范圍內(nèi)。經(jīng)活化的羧基中間體可被析離，但最好是這中間體在惰性氣氛下就地在第二步中與丙二酸酯鎂鹽反應(yīng)，后者最好在應(yīng)用之前用迪安-斯達(dá)克分水器恒沸蒸餾進(jìn)行干燥以除去任何殘存的水份。最好是所用的丙二酸酯鎂鹽是一種丙二酸單烷基或單芳基酯的鎂鹽，諸如丙二酸單烯丙基酯或取代的烯丙基酯及丙二酸的單芐酯、2-硝基芐酯、4-硝基芐酯、4-甲氧基芐酯或2，4-二甲氧基芐酯的鎂鹽。
丙二酸酯鎂鹽與已活化的羧基部份的反應(yīng)，可在大約0℃至大約80℃的溫度下，在一種惰性有機(jī)溶劑，諸如四氫呋喃，二噁烷，二氯甲烷，乙腈，苯和甲苯中，最好是在苯或乙腈中進(jìn)行。最好是讓反應(yīng)在大約60℃進(jìn)行，直到反應(yīng)基本完全，這一般約需18小時(shí)。通常，丙二酸酯鎂鹽的用量最好是每當(dāng)量的羧酸Ⅳa用大約1.1至大約3.0摩爾當(dāng)量的過量丙二酸酯鎂鹽。這過量的丙二酸酯鎂鹽可一次加入反應(yīng)液中，或者，如果需要，也可以分步加入，直到反應(yīng)完成并達(dá)到最高的收率。
在步驟(F)中，酮酯Ⅹ被重氮化而產(chǎn)生相應(yīng)的重氮基中間體Ⅲa。重氮化反應(yīng)在本專業(yè)領(lǐng)域中是眾所周知的，它可以在一種惰性溶劑諸如乙腈，二氯甲烷，甲苯，苯等這類溶劑中進(jìn)行。最好是，反應(yīng)在乙腈中用一種疊氮化物諸如4-羧基苯磺?；B氮，對甲苯磺酰基疊氮，甲磺?；B氮等來進(jìn)行。反應(yīng)是在一種堿，諸如三乙胺，二乙胺，吡啶，二甲基吡啶等存在的條件下在大約0℃至50℃的溫度條件下，進(jìn)行大約1至30小時(shí)。
在反應(yīng)式3中，R12，A，P1和P2的定義和前面相同。一般，具有式Ⅲa的重氮化合物在步驟(G)中被直接環(huán)化形成具有式Ⅱa的雙環(huán)酮。另外，如果需要，具有式Ⅲa的重氮化合物也可在步驟(H)中，在環(huán)化成為具有式Ⅱb的雙環(huán)酮之前先脫去在6位的保護(hù)基。
反應(yīng)式3
在步驟(G)中把具有式Ⅲa的重氮化合物環(huán)化形成具有式Ⅱa的雙環(huán)化合物的反應(yīng)，可以在一種惰性有機(jī)溶劑諸如四氫呋喃，乙酸乙酯，苯，甲苯，己烷，環(huán)己烷等溶劑中進(jìn)行;反應(yīng)溫度為大約室溫至大約110℃;反應(yīng)時(shí)間15分鐘至約5小時(shí);反應(yīng)在一種催化劑存在下進(jìn)行，催化劑可用諸如雙(乙酰丙酮)化銅(Ⅱ)，硫酸銅，銅粉，醋酸銠〔Rh2(OAc)4〕，辛酸銠(Ⅱ)，Pd(OAc)2，Pb(OAc)4等等，最好是用醋酸銠(Ⅱ)或辛酸銠(Ⅱ)。另外，環(huán)化反應(yīng)也可以這樣進(jìn)行，即把具有式Ⅲa的化合物在一種溶劑諸如苯，乙醚等中，在大約0℃至大約室溫的溫度下，用一種通過Pyrex濾光片的光源(波長大于300nm)照射大約30分鐘至大約2小時(shí)。
在另一種反應(yīng)途徑中，其中P2優(yōu)選是三有機(jī)基硅基保護(hù)基、最好是叔丁基二甲基硅基的具有式Ⅲa的重氮化合物，在步驟(H)中通過下述方法脫去保護(hù)基，即把式Ⅲa化合物在一種溶劑諸如乙腈，甲醇，乙醇，四氫呋喃，二噁烷等中，在一種酸諸如鹽酸，硫酸或醋酸存在的條件下(最好用大約3當(dāng)量的1N鹽酸水溶液)，在大約-10℃至大約30℃進(jìn)行酸性水解。最好是，反應(yīng)在大約0℃至大約室溫下進(jìn)行大約6至18小時(shí)，更好是在室溫下進(jìn)行18小時(shí)。然后把具有式Ⅲb的重氮化合物在步驟(Ⅰ)中置于環(huán)化的反應(yīng)條件下，這條件和上面討論的步驟(G)相同，從而產(chǎn)生具有式Ⅱb的雙環(huán)酮。
按照反應(yīng)式4中解釋的反應(yīng)系列，由具有式Ⅱa或Ⅱb的雙環(huán)酮即可制得具有式Ⅰa的化合物，其中A，B，R3，R4和R12的定義與前面相同。本專業(yè)熟練的技術(shù)人員應(yīng)該認(rèn)識到，下述兩條反應(yīng)途徑都適合于制備式Ⅰa化合物，但是，反應(yīng)途徑的選擇將依賴于所用的原料諸如化合物Ⅱa或Ⅱb，以及取代基A，B，R3和R12的定義。這樣，步驟(J)和(K)是在卡巴潘尼姆核上的6位帶有羥基保護(hù)基時(shí)選用來進(jìn)行反應(yīng)的途徑，而步驟(J′)和(K′)則是6位不帶羥基保護(hù)基時(shí)進(jìn)行反應(yīng)的途徑。
反應(yīng)式4
現(xiàn)詳盡敘述反應(yīng)式4中的過程，步驟(J)和(J′)說明酮酯Ⅱa和Ⅱb的?；蚧罨?，步驟(J)和(J′)的反應(yīng)對于本專業(yè)熟練的技術(shù)人員是眾所周知的，它可以用適當(dāng)?shù)孽；噭﹣磉M(jìn)行以提供一種適合于步驟(K)和(K′)的置換反應(yīng)的離去基團(tuán)L1。
制備L1的合適的?；噭┛砂ㄋ狒?，諸如醋酸酐，甲磺酸酐，對甲苯磺酸酐，對硝基苯磺酸酐，2，4，6-三異丙基苯磺酸酐，三氟甲磺酸酐等等;或者酰鹵，諸如乙酰氯，丙酰氯，氯磷酸二乙酯，氯磷酸二苯酯，甲苯磺酰氯，對溴苯磺酰氯等等;或者其它的本專業(yè)領(lǐng)域中熟知的那些通過通常的步驟提供離去基團(tuán)L1的試劑。最好是，?；磻?yīng)用氯磷酸二苯酯進(jìn)行，它在中間體Ⅺ和Ⅻ的2位建立起二苯基磷酰氧基離去基團(tuán)。
一般來說，?；磻?yīng)步驟(J)或(J′)是在一種惰性有機(jī)溶劑諸如二氯甲烷，乙腈，二甲基甲酰胺，四氫呋喃等中，在一種堿諸如二異丙基乙胺，三乙胺，4-二甲氨基吡啶，咪唑，二甲基吡啶，N-甲基嗎啉，N-甲基哌啶，1，8-二氮雜雙環(huán)〔5.4.0〕十一-7-烯，1，5-二氮雜雙環(huán)〔4.3.0〕壬-5-烯等存在的條件下，在大約-20℃至大約40℃的溫度條件下進(jìn)行0.5至18小時(shí)，最好是在0℃至室溫反應(yīng)1至3小時(shí)。如果需要，中間體Ⅺ和Ⅻ可被析離，但是也可不經(jīng)析離和提純即方便地用于下一步反應(yīng)中。
在下一個(gè)步驟(K)和(K′)中，具有式Ⅺ和Ⅻ的中間體通過通常的置換反應(yīng)分別被轉(zhuǎn)化為中間體ⅩⅢ和ⅩⅣ。即，具有式Ⅺ或Ⅻ的中間體可以和至少等摩爾量的具有下式的硫醇試劑反應(yīng) HS-B-R3 其中B的定義和前面相同，R3是一個(gè)有機(jī)基團(tuán)的殘基，反應(yīng)是在一種惰性有機(jī)溶劑諸如二氯甲烷，二噁烷，四氫呋喃，乙腈，二甲基甲酰胺，二甲亞砜，六亞甲基磷酰胺等中，并且最好是在一種堿諸如二異丙基乙胺，三乙胺，4-二甲氨基吡啶，碳酸氫鈉，碳酸鉀等存在的條件下進(jìn)行的，溫度對于置換反應(yīng)不是關(guān)鍵性的，不過最好是在大約-40℃至30℃之間反應(yīng)30分鐘至24小時(shí)。最方便的是，反應(yīng)在大約0℃至5℃進(jìn)行2至4小時(shí)。在步驟(K′)的置換反應(yīng)中，在加入所說的硫醇試劑之前，可任意地先往反應(yīng)混合物中加入大約等摩爾量的三甲基硅基氯以便暫時(shí)地保護(hù)1R-羥乙基。在置換反應(yīng)完成之后，三甲基硅基保護(hù)基可按這里描述的除去P2保護(hù)基的方法容易地被除去，最好是在大約0℃至室溫的溫度下在四氫呋喃，四氫呋喃-水等這類溶劑中用醋酸處理大約1至4小時(shí)。
在步驟(L)中，具有式ⅩⅢ的化合物被脫去保護(hù)基，產(chǎn)生具有式ⅩⅣ的化合物。脫去保護(hù)基的反應(yīng)是用通常的方法進(jìn)行的，當(dāng)羥基保護(hù)基是三有機(jī)基硅基諸如叔丁基二甲基硅基時(shí)，脫保護(hù)基的反應(yīng)最好是在一種氟化四(低級)烷基銨諸如氟化四丁基銨存在的條件下進(jìn)行。雖然反應(yīng)條件不是關(guān)鍵性的，但最好是用大約三當(dāng)量的氟化銨衍生物及任意地在大約六當(dāng)量冰醋酸存在的條件下，在一種惰性有機(jī)溶劑諸如甲醇，乙醇，二噁烷，乙腈，二氯甲烷，四氫呋喃等溶劑或它們的混合物中進(jìn)行反應(yīng)。脫保護(hù)基反應(yīng)通常是在大約-40℃至30℃，最好是-15℃至0℃之間反應(yīng)大約4小時(shí)至一周，最好是反應(yīng)大約3天。
本專業(yè)熟練的技術(shù)人員應(yīng)該認(rèn)識到，最后脫保護(hù)基的一步，即步驟(M)，自然會隨著存在于取代基P1，R12和R13中的保護(hù)基而變化。脫保護(hù)基的步驟(M)是脫去具有式ⅩⅣ的中間體的羧基保護(hù)基P1，而產(chǎn)生具有式Ⅰa的化合物，其中R4是氫或一種無毒的藥物上可接受的陽離子，諸如鈉，鉀，銨以及這里敘述的別的鹽的陽離子，該反應(yīng)是用通常的方法諸如水解，化學(xué)還原或氫化來完成的。當(dāng)所用的保護(hù)基是可以被催化氫化除去的，諸如對硝基芐基，芐基，二苯甲基或2-萘甲基等時(shí)，則具有式ⅩⅣ的中間體可以在一種合適的包含緩沖溶液諸如磷酸鹽緩沖液，磷酸氫二鉀緩沖液，碳酸氫鈉，醋酸鹽緩沖液等的溶劑諸如水，二噁烷，四氫呋喃，乙醇，異丙醇，正丁醇或它們的混合物中，在一種氫化催化劑諸如鈀/碳，氫氧化鈀/碳，氧化鉑，鈀/硫酸鋇，阮內(nèi)鎳等存在的條件下，在0℃至50℃的溫度下，在1至4個(gè)大氣壓的氫氣壓下處理15分鐘至4小時(shí)。當(dāng)P1是諸如鄰-硝基芐基這類基團(tuán)時(shí)，也可用光解的方法來脫保護(hù)基。諸如2，2，2-三氯乙基這類保護(hù)基則可用溫和的鋅還原方法來除去。
當(dāng)羧基保護(hù)基P1是烯丙基時(shí)，它可以用一種含有鈀化合物的催化劑來除去，這種催化劑最好是鈀-配位體配合物，諸如四(三苯膦)鈀〔0〕，雙(二芐叉丙酮)鈀〔0〕，二〔1，2-雙(二苯膦基)乙烷〕鈀〔0〕，四(三苯基亞磷酸酯)鈀〔0〕等等。還原最好是在一種烯丙基清除劑存在的條件下進(jìn)行，例如一種胺，諸如N-甲基苯胺或嗎啉，一種活潑亞甲基化合物諸如苯甲?；宜狨セ?-甲基-3-氧代-戊酸，一種鏈烷酸或它的鹽諸如醋酸鈉，2-乙基己酸鈉等。
該反應(yīng)通常是在一種非還原性的溶劑諸如四氫呋喃，水，乙醇，二噁烷，乙腈，二氯甲烷，乙酸乙酯或它們的混合物中，在0℃至50℃的溫度下進(jìn)行大約15分鐘至4小時(shí)。最好是，催化還原反應(yīng)在乙酸乙酯或二氯甲烷中，在大約0℃，在含有大約1.1摩爾當(dāng)量的乙基-2-己酸鉀的四(三苯膦)鈀〔0〕存在的條件下進(jìn)行。相似地，其它常規(guī)的羧基保護(hù)基可用本專業(yè)熟練技術(shù)人員所熟知的方法除去。最后，如上所述，當(dāng)具有式Ⅰa的化合物中的R4是生理上可水解的酯基諸如乙酰氧基甲基，新戊酰氧基甲基和甲氧基甲基等基團(tuán)時(shí)，它可直接給主體服用而無需脫去保護(hù)基，因?yàn)檫@類酯基在生理?xiàng)l件下在體內(nèi)即可被水解。
如上所述，具有式ⅩⅣ的化合物可任意地包含另外的羥基保護(hù)基O-P3和/或氨基保護(hù)基N-P4，其中P3和P4的定義和前面相同。這樣，在反應(yīng)步驟(M)中可能，如果需要，還包含另外的除去所說的這類保護(hù)基的去保護(hù)基過程。該反應(yīng)可用通常的本身是已知的那些除去保護(hù)基的方法來進(jìn)行，諸如水解，還原等，也包括那些用于除去羧基保護(hù)基P1和羥基保護(hù)基P2的方法。
在特別的情況下，即當(dāng)式ⅩⅣ化合物中的R12是疊氮基時(shí)，可能希望在步驟(M)中脫保護(hù)基時(shí)把所說的疊氮基還原為氨基。該還原反應(yīng)可在pH值約為6-9的水溶液或緩沖水溶液中，最好是在水溶液中，在大約-10℃至30℃，最好是大約0-5℃的溫度條件下，在1至4個(gè)大氣壓的氫氣壓力下，在一種氫化催化劑諸如30%鈀/硅藻土，10%鈀/碳，氫氧化鈀/碳，氧化鉑，5%鈀/硫酸鋇，5%鈀/氧化鋁等存在的條件下，最好是用5%鈀/硫酸鋇和5%鈀/氧化鋁，進(jìn)行大約30分鐘至3小時(shí)，直到還原反應(yīng)完成。
本專業(yè)熟練的技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)了解，在步驟(M)中，羧基和/或羥基和/或氨基保護(hù)基在反應(yīng)過程中可以同時(shí)被脫去。另外，或者如果必需，保護(hù)基也可以選擇性地逐步脫去。無論如何，對本專業(yè)熟練的技術(shù)人員很明顯的是，除去保護(hù)基的次序?qū)⒁蕾囉诒Ｗo(hù)基的性質(zhì)和選擇，以及是否想要制備其中含有一些保護(hù)基諸如P1，P2，O-P3和N-P4的具有式ⅩⅣ或式Ⅰa的中間體，以便制備其它的式Ⅰ化合物。
在另外的具體實(shí)施方案中，式Ⅰ化合物可以由新的具有式ⅩⅥ的中間體來制備
其中A，B，R3和R11的定義和前面相同，P1是一個(gè)常規(guī)的容易除去的羧基保護(hù)基，L2是一個(gè)常規(guī)的離去基團(tuán)。
式ⅩⅥ化合物可用來制備式Ⅰ化合物，并且，作為說明，制備多種優(yōu)選的具體式Ⅰ化合物中的一種化合物的方法，在反應(yīng)式5中被用來說明化合物Ⅰb的制備。簡單地說，其中R12是O-P3的帶保護(hù)基的具有式ⅩⅢ的中間體，在步驟(N)中被選擇性地脫去保護(hù)基形成具有式ⅩⅤ的醇。位于卡巴潘尼姆ⅩⅤ的4位的醇基在步驟(O)中被轉(zhuǎn)化為具有式ⅩⅥa的帶有常規(guī)離去基團(tuán)“L2”的化合物，它對于在步驟(P)中被親核體置換而產(chǎn)生式ⅩⅧ化合物的反應(yīng)是敏感的。在步驟(L+M)中脫去保護(hù)基將產(chǎn)生化合物Ⅰb，其中A，B，R3和R4的定義和前面相同，R13是親核體殘基，其中R13可以是疊氮基，-NR5R6，

氰基，取代的烷氧基或取代的烷硫基，其中R5，R6，Y和Z的定義和前面相同。
反應(yīng)式5
現(xiàn)在參看反應(yīng)式5，步驟(N)說明由其中R12是O-P3，而P3是一個(gè)常規(guī)的羥基保護(hù)基的具有式ⅩⅢ的中間體除去羥基保護(hù)基的反應(yīng)。最好是，保護(hù)基P3是三有機(jī)基硅基保護(hù)基，并且最好是叔丁基二甲基硅基。步驟(N)的反應(yīng)是在一種惰性有機(jī)溶劑諸如四氫呋喃，二噁烷，乙酸乙酯，二甲氧基乙烷，二氯甲烷，四氯化碳，甲苯，環(huán)己烷等溶劑中，用大約1至10摩爾當(dāng)量的氟化四(低級)烷基銨，三氟化硼或氟化鉀以及任意地包含大約1至20摩爾當(dāng)量的低級烷基有機(jī)酸，芳香酸或雜環(huán)芳香酸，在大約-40℃至40℃的溫度下進(jìn)行大約1至60小時(shí)。最好是，反應(yīng)在四氫呋喃中用大約3當(dāng)量的氟化四丁基銨，在大約6當(dāng)量的醋酸存在的條件下，在-15℃至0℃的溫度下進(jìn)行大約18至24小時(shí)。
步驟(O)說明醇ⅩⅤ和一種適當(dāng)?shù)孽；噭┗蚧罨噭┲g進(jìn)行反應(yīng)，以形成帶有能被親核體置換的離去基團(tuán)“L2”的具有式ⅩⅥa的中間體。在步驟(O)中應(yīng)用的合適的?；噭┛梢院湍切┯糜诜磻?yīng)式4中的步驟(K)中制備離去基團(tuán)“L1”的試劑相同，也可以是用常規(guī)方法提供離去基團(tuán)的和專業(yè)中熟知的其它試劑。最好是，L2包括氯，溴，碘，氟磺?；?，-OSO2R14，和

，其中R14是低級烷基，三氟甲基，苯基或取代的苯基，R15是苯基或取代的苯基，其中所說的取代基可以是甲基，異丙基，氯，溴或硝基。
步驟(O)的反應(yīng)可以在一種惰性有機(jī)溶劑諸如四氫呋喃，二甲氧基乙烷，二噁烷，乙酸乙酯，二氯甲烷，氯仿，四氯化碳，甲苯，苯，環(huán)己烷等溶劑中，用一種?；蚧罨噭谝环N非親核性的堿諸如三乙胺，二異丙基乙胺，2，6-二甲基吡啶，1，8-二氮雜雙環(huán)〔5.4.0〕十一-7-烯，1，5-二氮雜雙環(huán)〔4.3.0〕壬-5-烯等存在的條件下，在大約-78℃至室溫的溫度下來進(jìn)行。最好是，反應(yīng)在二氯甲烷中，用大約1.2當(dāng)量的三氟甲磺酸酐，在大約1.5至2當(dāng)量二異丙基乙胺存在的條件下，在大約-78℃溫度下進(jìn)行，或是在四氫呋喃中，用三苯膦和偶氮二羧酸二乙酯的混合物，在大約-40℃的溫度下進(jìn)行。
所需的式ⅩⅦ化合物的制備是在步驟(P)中進(jìn)行的，它是通過把中間體ⅩⅥa的L2離去基團(tuán)用所需的含有氮，碳，氧，硫的親核體R13進(jìn)行親核置換反應(yīng)而制得的，其中R13最好是前面定義的那些基團(tuán)。具有式ⅩⅥa的中間體與至少一當(dāng)量，最好是過量的所需親核試劑，在一種惰性有機(jī)溶劑諸如二氯甲烷，四氫呋喃，氯仿，四氯化碳，二噁烷，乙酸乙酯，二甘醇二甲醚，二甲氧基乙烷，環(huán)己烷，甲苯等溶劑中，在從-78℃至大約30℃的寬溫度范圍內(nèi)，但最好是在大約-15℃至5℃的溫度下進(jìn)行反應(yīng)，直到反應(yīng)完成，這可用普通的檢測方法如薄層層析或高壓液相層析來監(jiān)測。
所需的具有式Ⅰb的卡巴潘尼姆類化合物的制備是通過用常規(guī)方法脫去中間體ⅩⅦ的保護(hù)基而完成的。適當(dāng)?shù)拿撊チu基，羧基和氨基上的保護(hù)基的方法就是那些以前在步驟(L)和(M)的過程中討論過的方法。
在另外一條反應(yīng)途徑中，式Ⅰc化合物可以從步驟(Q)中的式ⅩⅧ化合物來制備，如反應(yīng)式6所解釋的那樣，其中A，B，R3，R4和P2的定義和以前相同，R16是氫或C1-4烷基，R17是C1-4烷基或

一般，式ⅩⅧ化合物或它的鹽的氨基的衍生化反應(yīng)是在步驟(Q)中用適當(dāng)?shù)膩啺孵；噭；噭┗蛲榛噭﹣磉M(jìn)行的。反應(yīng)可以任意地用式ⅩⅧ化合物來進(jìn)行，其中的P2是一個(gè)常規(guī)的羥基保護(hù)基，R4是一個(gè)常規(guī)的羧基保護(hù)基。最好是，該反應(yīng)用不帶羥基保護(hù)基(即P2是氫)，并且R4是氫的式ⅩⅧ化合物或它的鹽來進(jìn)行。
合適的亞胺酰基化試劑包括甲亞胺酸酯和低級烷基亞胺酸酯，諸如甲亞胺酸甲酯，甲亞胺酸乙酯，甲亞胺酸芐酯，乙亞胺酸甲酯，丙亞胺酸乙酯，丁亞胺酸乙酯，戊亞胺酸乙酯和低級烷亞胺?；u，諸如甲亞胺?；?又稱氯甲亞胺)，乙亞胺?；?，丙亞胺?；龋啺孵；鹊鹊?。該反應(yīng)一般是在一種普通的溶劑諸如四氫呋喃，二噁烷，甲醇，乙醇，水，緩沖溶液或它們的混合物中，在大約-20℃至40℃的溫度下進(jìn)行大約10分鐘至18小時(shí)。最好是，反應(yīng)在磷酸鹽緩沖水溶液中，在稍為堿性的pH值條件下，在大約5℃進(jìn)行大約10至30分鐘。
制備式Ⅰc化合物的合適的?；噭┌｛u，酸酐，混合酸酐，活化酯，硫羥酸酯等，諸如乙酰氯，疊氮基乙酰氯，乙酸酐，異氰酸甲酯，異氰酸乙酯，N，N-二甲基氨基甲酰氯，N-保護(hù)的氨基酸活化酯，氨基亞氨基甲磺酸，甲基氨基亞氨基甲磺酸等等。該?；磻?yīng)可在各種溶劑體系中進(jìn)行，其中包括的溶劑有諸如四氫呋喃，二噁烷，乙腈，乙醇，甲醇，二甲基甲酰胺，水等以及它們的混合物。本專業(yè)熟練的技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)了解，當(dāng)必要時(shí)，本反應(yīng)可在一種堿或酸的受體存在的條件下進(jìn)行，諸如氧化鎂，碳酸鉀，碳酸氫鉀，吡啶，二甲基吡啶，2，6-二甲基吡啶，4-二甲氨基吡啶，三乙胺，N，N-二異丙基乙胺等等。最好是，反應(yīng)在一種含水有機(jī)混合物或緩沖水溶液中，在-20℃至50℃的溫度下進(jìn)行15分鐘至18小時(shí)。
合適的烷基化試劑是本專業(yè)領(lǐng)域中眾所周知的，包括低級鹵代烷或取代的(低級)鹵代烷，低級烷基或三氟甲基磺酸酯，甲醛，低級烷基或取代的(低級)烷基醛，芳香或雜環(huán)芳香醛，雜環(huán)烷基或取代的雜環(huán)烷基醛，其中所說的醛在還原劑諸如氰基硼氫化鈉，硼氫化鈉等存在的條件下起反應(yīng)。反應(yīng)可在多種溶劑體系中進(jìn)行，包括四氫呋喃，二噁烷，乙腈，乙醇，甲醇，二甲基甲酰胺和水等，以及它們的混合物。反應(yīng)溫度大約在-20℃至50℃，反應(yīng)時(shí)間15分鐘至20小時(shí)。最好是，當(dāng)烷基化試劑是甲醛時(shí)，反應(yīng)用37%的甲醛，在氰基硼氫化鈉存在下，在乙腈水溶液或緩沖水溶液中，在稍為酸性的條件下，在大約0-5℃進(jìn)行15分鐘至10小時(shí)。
如上所述，式ⅩⅧ化合物可任意地包含羥基保護(hù)基和/或羧基保護(hù)基。因而，反應(yīng)式6可包含另外的為除去所說的保護(hù)基的脫保護(hù)基步驟。合適的脫保護(hù)基步驟可用本身已知的方法來進(jìn)行，或者用前面已在步驟(L)和(M)中敘述過的除去保護(hù)基的步驟來進(jìn)行。
想要制備其中R2是

的式Ⅰ化合物時(shí)，還有另外一種反應(yīng)途徑，即最好是如這里所述的那樣或采用眾所周知的普通氧化方法，把式ⅩⅤ化合物通過受控的或分步的氧化反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的其中R2是-CHO的具有式Ⅰ的醛類或相應(yīng)的其中R2是-CO2H的具有式Ⅰ的羧酸類。此外，具有式Ⅰ的醛類或羧酸類可通過本專業(yè)熟練的技術(shù)人員所熟知的一般化學(xué)方法轉(zhuǎn)化為R2的別的衍生物，諸如肟，腈，腙，酯，酰胺，肽，以及它們的其它變種等。
在本發(fā)明中式Ⅰ化合物的制備是基于一些用于合成沙納霉素系列中的卡巴潘尼姆類化合物的可得到的β-內(nèi)酰胺中間體中的任何一種。作為說明，前面的那些反應(yīng)式解釋了一些式Ⅰ化合物的制備，其中的R1是β-內(nèi)酰胺環(huán)狀結(jié)構(gòu)的6位上的一個(gè)1-羥基乙基。
當(dāng)所要制備的式Ⅰ化合物中的R1是1-氨基乙基時(shí)，在反應(yīng)式7中給出了在氮雜雙環(huán)的環(huán)結(jié)構(gòu)的6位，通過1-疊氮乙基中間體把1-羥基乙基轉(zhuǎn)化為1-氨基乙基的方法，它可制得所需的具有1(S)和1(R)構(gòu)型的化合物。

該方法包括用普通的羥基，羧基和/或氨基保護(hù)基把別的對反應(yīng)敏感的取代基保護(hù)起來。然后使這合適的已保護(hù)的1-羥基乙基原料與三苯膦，疊氮酸及偶氮二羧酸二乙酯(DEAD)進(jìn)行反應(yīng)。得到的疊氮基取代了羥基并使構(gòu)型相對于1-羥基乙基原料發(fā)生反轉(zhuǎn)。這樣，例如由1(S)-OH原料產(chǎn)生1(R)-N3產(chǎn)物，而1(R)-OH原料則產(chǎn)生1(S)-N3產(chǎn)物。該方法最早是被D.F.Corbett等人所采用，并發(fā)表在J.Chem.Soc.Perkin Trans.I，3011(1982)和Tetrahedron Letters 24 No.49，5543-5546(1983)上。把適當(dāng)?shù)?-疊氮乙基中間體還原成相應(yīng)的1-氨基乙基產(chǎn)物最好是通過本專業(yè)領(lǐng)域眾所周知的方法來進(jìn)行，也可以用這里敘述的還原疊氮基的方法。最后，如果合適，可用眾所周知的普通程序和這里敘述的程序把保護(hù)基除去。
在所需的1(S)-或1(R)-構(gòu)型的羥乙基原料不容易得到，而只能得到具有相反構(gòu)型的有關(guān)原料的情況下，可應(yīng)用O.Mitsunobu在Synthesis，1-28(1981)或O.Mitsunobu等人在Bull.Chem.Soc.Japan 49 510(1976)所發(fā)表的方法，把后者轉(zhuǎn)化為前者。該方法和上面的方法類似，包括使羥基化合物與三苯膦，甲酸而不是疊氮酸，以及偶氮二羧酸二乙酯進(jìn)行反應(yīng)而產(chǎn)生具有相反構(gòu)型的甲酸酯，例如，由1(S)-OH產(chǎn)生1(R)-OCHO，由1(R)-OH產(chǎn)生1(S)-OCHO。然后把甲酸酯水解而產(chǎn)生所需的羥乙基原料。
當(dāng)所需制備的具有式Ⅰ的化合物中的R1是氨甲基時(shí)，上述把1-羥乙基轉(zhuǎn)化為1-氨乙基的方法也可以用來把R1是羥甲基的β-內(nèi)酰胺中間體轉(zhuǎn)化為R1是氨甲基的中間體。不過在這情況下沒有相對構(gòu)型的差別。
制備R1是1-氟乙基的式Ⅰ化合物，是通過使適當(dāng)?shù)囊驯Ｗo(hù)的1-羥乙基原料與二乙氨基三氟化硫(DAST)進(jìn)行反應(yīng)，得到的氟取代了羥基并使構(gòu)型相對于1-羥基乙基原料發(fā)生反轉(zhuǎn)。例如1(S)-OH原料產(chǎn)生1(R)-F產(chǎn)生，而1(R)-OH原料產(chǎn)生1(S)-F產(chǎn)物。當(dāng)所需的1(S)-或1(R)-構(gòu)型的羥乙基原料不容易得到，而只能得到具有相反構(gòu)型的有關(guān)原料時(shí)，可通過前面講過的方法把后者轉(zhuǎn)化為前者。該方法在“氟化卡巴潘尼姆類化合物的合成”(Synthesis of florinated Carbapenems)一文中被C.P.Mak和K.Wagner更充分地加以描述。單環(huán)和雙環(huán)β-內(nèi)酰胺與二乙氨基三氟化硫的反應(yīng)也可參看“β-內(nèi)酰胺抗菌素化學(xué)的最新進(jìn)展”一書(Recent Advances in the Chemistry of β-Lactam Antibiotics”，Eds.A.G.Brown and S.M.Roberts，Third International Symposium)第366-370頁(1984)?；始一瘜W(xué)協(xié)會，Burlington House，London出版，以及該文所引的參考文獻(xiàn)。更近期有T.Yoshioka等在Journal of Antibiotics，42，No.10，1520-1522(1989)所描述的DAST方法以及一種新的，用二乙氨基六氟丙烷和二乙氨基五氟丙烯的混合物的方法。這兩種方法都作為參考引入本發(fā)明。
制備其中R1是氫，C1-2烷基或羥甲基的式Ⅰ中間體的其它方法本身是已知的，并可在下列參考資料中找到，諸如S.Oida在“β-內(nèi)酰胺抗菌素的化學(xué)的最新進(jìn)展”(G.I.Gregory編，Second International Symposium，1980)中的文章“Penem，Symthetic approach to thienamycin analogs”，以及R.W.Ratcliffe和G.Alkers-Schonberg在“β-內(nèi)酰胺抗菌素的化學(xué)和生物學(xué)”(R.B.Morin和M.Gorman編，Vol 2，Acadmic Press，1982)一書中的文章“The Chemistry of Thienamycin and Other Carbapenem Antibiotics”，它們作為參考引入本發(fā)明。
為說明本發(fā)明的卡巴潘尼姆類化合物有力的抗菌活性和優(yōu)良的化學(xué)和生物穩(wěn)定性，一些本發(fā)明有代表性的實(shí)例化合物成員被作為說明的目的而列在表Ⅰ中，同時(shí)列出它們的體外活性(MIC)，化學(xué)穩(wěn)定性(T 1/2 )和生物穩(wěn)定性(DHPI)。
體外抗菌活性測定，是通過制備化合物在Mueller-Hinton瓊脂中的連續(xù)2倍稀釋液，并用適當(dāng)稀釋的18-24小時(shí)液體培養(yǎng)物對瓊脂表面或液體進(jìn)行接種進(jìn)行的。將瓊脂培養(yǎng)皿及試管在37℃培養(yǎng)17小時(shí)，把引起可見細(xì)菌生長抑制的最低濃度定作最小抑制濃度(MIC)。
在水溶液中，pH值為7.4，溫度37℃時(shí)的化學(xué)穩(wěn)定性，以用小時(shí)表示的半衰期(T 1/2 )來報(bào)告。這些數(shù)值是按Woodward等人在J.Amer.Chem.Soc.，102，2042(1980)中提出的方法來測定的。
還測定了對腎脫氫酶Ⅰ〔腎二肽酶(EC3.4.13.11)〕分解的生物穩(wěn)定性，這些值以相對于用imipenem觀測的值報(bào)告。純的豬腎二肽酶是按Hitchcock等人在J.Anal.Biochem.，163，219(1987)中所描述的方法來制備的，而人腎二肽酶是按Campbell等人在J.Biol.Chem.，259，14586-14590(1984)中所描述的方法制備的。
新鮮制備出卡巴潘尼姆(0.10mM)在緩沖的(50mM)4-嗎啉丙烷磺酸中的溶液，pH值為7.1。測量2.5毫升等分試樣的紫外/可見光譜，然后加入0.025ml 1M的NH2OH溶液去溶解β-內(nèi)酰胺鍵。用豬二肽酶在25℃，人二肽酶在37℃作用30分鐘后再測量溶液的光譜，以后每5-10分鐘間隔測量一次直到不再能觀測到吸光度的降低。用未經(jīng)酶解和已經(jīng)酶降解的β-內(nèi)酰胺之間的差譜來計(jì)算λmax和ε值。相似等分的卡巴潘尼姆溶液對豬二肽酶在25℃，對人二肽酶在37℃進(jìn)行保溫，并且測定在λmax處吸光度的變化率。然后加入酶以使每秒鐘吸光度的變化率至少為10-4吸光度單位。酶水解的速率經(jīng)自發(fā)水解項(xiàng)的校正之后，用ε轉(zhuǎn)化為nmol分鐘-1(毫升酶)-1，所有報(bào)告的速率都是相對于用imipenem試驗(yàn)時(shí)觀測到的值。
如表Ⅰ所示，本發(fā)明的化合物很不容易被腎脫氫肽酶(DHP)所降解。但是，如果需要或必需DHP抑制，則可將本發(fā)明的化合物與已知的DHP抑制劑諸如Cilastatin結(jié)合或使用。至然這類應(yīng)用只是供選擇用的，但它仍然是本發(fā)明的一部份。
表Ⅰ 有代表性化合物的生物活性和穩(wěn)定性 抗菌活性MICa(ug/mL) 實(shí)施例 肺炎雙 半衰期e 二肽酶水解f 編號 球菌b 大腸桿菌c綠膿桿菌d (T 1/2) (相對速率) 3 0.13 0.016 2 3.2 0.04g 19 0.06 0.004 1 117 0.05g 24 0.13 0.016 1 3.5 0.08g 32 0.25 0.004 0.25 76 36 0.13 0.008 0.25 3.8 0.02g 40 0.06 0.008 1.0 32.5 41 0.25 0.008 0.5 70 0.7h 44 0.03 0.03 8.0 89 47 0.5 0.03 1 2.5 0.3h 49 0.008 0.03 63 33.5 63 0.008 0.016 1 18 0.07h 73 0.03 0.008 0.25 37 91 0.5 0.016 4.0 150 92 2.0 0.06 2.0 247 94 0.06 0.008 8.0 88 100 0.25 0.008 2.0 180 117 0.13 0.13 0.25 33 120 0.03 0.13 0.25 23 121 0.13 0.004 1 136 124 0.016 0.03 2 21 126 0.016 0.008 2 47 127 0.06 0.13 1 31 130 0.13 0.13 0.06 16 131 0.25 0.13 2 46 表Ⅰ(續(xù)) 抗菌活性MICa(ug/mL) 實(shí)施例 肺炎雙 半衰期e 二肽酶水解f 編號 球菌b 大腸桿菌c綠膿桿菌d (T 1/2) (相對速率) 135 0.03 0.015 0.06 37 136 0.015 0.007 4 17 145 0.125 0.125 8 146 0.25 0.125 128 154 0.5 0.25 1 79 177 0.03 0.13 1 17 196 0.06 0.016 1 58 215 0.03 0.015 0.5 49 263 0.03 0.015 1 9.7 294 0.03 0.125 0.25 45 310 0.06 0.03 0.125 27 315 0.015 0.015 16 137.5 316 0.015 0.06 0.25 40.5 Imipenem 0.002 0.03 2 15 1g，h a)在Mueller-Hinton液體培養(yǎng)基中的最小抑制濃度 b)肺炎雙球菌，A9585 c)大腸桿菌，A15119 d)綠膿桿菌A9843 e)37℃，10-4M，pH7.4，半衰期，以小時(shí)表示 f)相對于Imipenem＝1時(shí)的被脫氫肽Ⅰ型酶降解的速率(數(shù)值愈小，對降解愈穩(wěn)定) g)用豬腎二肽酶的相對速率 h)用人腎二肽酶的相對速率 如其它β-內(nèi)酰胺抗菌素那樣，具有通式Ⅰ的化合物可用已知的方法轉(zhuǎn)化為可藥用的鹽類，對于本發(fā)明的目的，它們基本上和未成鹽的化合物等價(jià)。為此，例如，可把R4是負(fù)電荷的式Ⅰ化合物溶解于一種惰性溶劑中，然后加入等當(dāng)量的藥學(xué)上可接受的酸。希望得到的酸加成鹽可用常規(guī)方法諸如溶劑沉淀，冷凍干燥等方法來收回。當(dāng)在式Ⅰ化合物中存在別的堿性或酸性的官能團(tuán)時(shí)，也可用已知的方法相似地制備它們的可藥用的堿加成鹽和酸加成鹽。
R4是氫或負(fù)電荷的式Ⅰ化合物或其可藥用的鹽，可用常規(guī)方法轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的R4是生理上可水解的酯基的化合物，或者R4是常規(guī)的羧基保護(hù)基的式Ⅰ化合物可轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的R4是氫，負(fù)電荷或生理上可水解的酯基的化合物，或它們的可藥用的鹽。
具有通式Ⅰ的其中R4是氫，負(fù)電荷或生理上可水解的羧基保護(hù)基的新的卡巴潘尼姆衍生物，或它們的可藥用的鹽類，是對各種革蘭氏陽性和革蘭氏陰性細(xì)菌強(qiáng)有效的抗菌劑，它們可以用作，例如，促進(jìn)生長的動物飼料添加劑，食物的防腐劑，工業(yè)應(yīng)用中的殺菌劑，例如用于水基涂料和造紙廠白水中以抑制有害細(xì)菌的生長，以及用作消毒劑來消滅或抑制醫(yī)療或牙科設(shè)備上有害細(xì)菌的生長。但是，它們在治療被革蘭氏陽性和革蘭氏陰性細(xì)菌引起的人類和其它動物的感染疾病方面，是特別有用的。
本發(fā)明的藥物活性化合物可以單獨(dú)使用，也可配制成藥物組合物，其中除活性的卡巴潘尼姆成份以外，還含有可藥用的載體或稀釋劑。這類化合物可通過許多方法服用，主要包括口服，局部或非腸道給藥(靜脈注射或肌內(nèi)注射)。藥物組合物可制成固體形式，諸如膠囊，片劑，粉劑等，也可制成液體形式，諸如溶液，懸浮液或乳液。注射用組合物(即經(jīng)優(yōu)選的給藥途徑)可以制成含有單位劑量的安瓿或含多次劑量的容器，其中包含配制劑諸如懸浮劑，穩(wěn)定劑和分散劑等。組合物可制成隨時(shí)可用的形式，也可制成粉劑形式，在給藥時(shí)用適當(dāng)?shù)妮d體例如無菌水進(jìn)行配制。
服藥劑量在很大程度上依賴于所用的具體化合物，具體配制的組合物，給藥途徑，主體的性質(zhì)和狀況，以及被治療的具體部位和組織。優(yōu)選的具體用藥劑量和給藥途徑應(yīng)由醫(yī)生選擇。但是一般而言，給哺乳類動物非腸道或口服時(shí)，這類化合物的用量約為5至200mg/千克/體重/天。給藥一般是分幾次進(jìn)行，例如一天服2至4次。
下面給出解釋本發(fā)明具體實(shí)施方案的一些實(shí)施例，它是用作解釋的，而不是限制本發(fā)明的范圍。用于本發(fā)明中的縮寫是一些普通的縮寫，它對本專業(yè)熟練的技術(shù)人員是眾所周知的，其中的一些列舉在下面。
縮寫 TBDMS叔丁基二甲基硅基 TBDMS-OTf三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯 Pet-ether石油醚(沸程20-60℃) TsN3(TosN3)對甲苯磺?；B氮 DPCPClPO(OPh)2即氯磷酸二苯酯 DIPEAN，N-二異丙基乙胺 TMSCl三甲基硅基氯(氯代三甲基甲硅烷) DMAP4-N，N-二甲基氨基吡啶 TsNH2對甲苯磺酰胺 TBAF氟化四丁基銨 DEAD偶氮二羧酸二乙酯 HOBT1-羥基苯并三唑水合物 DCC1，3-二環(huán)己基碳二亞胺 HN3疊氮酸 在下面的實(shí)施例中，所有的溫度是指攝氏度數(shù)。熔點(diǎn)是在Gallenkamp型毛細(xì)管熔點(diǎn)儀上測定的，沸點(diǎn)是在某具體壓力(mmHg)下測定的，二者的溫度均未經(jīng)校正。質(zhì)子核磁共振譜(1H-NMR)是在Bruker AC-200上測定的，所有光譜都在所指出的溶劑中測定，化學(xué)位移用δ單位，由內(nèi)標(biāo)四甲基硅(TMS)起始往低場方向計(jì)數(shù)，質(zhì)子間的偶合常數(shù)以赫茲(Hz)計(jì)。分裂圖形指定如下s，單峰;d，雙峰;t，三重峰;q，四重峰;m，多重峰;br，寬峰;dd，雙二重峰;bd，寬的雙峰;dt，雙三重峰;bs，寬的單峰;dq，雙四重峰。紅外光譜(IR)是在一臺Perkin-Elmer 781型光譜計(jì)上測定的，由4000cm-1至400cm-1，用聚苯乙烯膜的1601cm-1特征峰進(jìn)行校正，并用倒易厘米(cm-1)報(bào)告峰的位置。相對強(qiáng)度用下面的符號指示s(強(qiáng))，m(中等)，w(弱)。比旋光度〔α〕25D是用Perkin-Elmer 41旋光儀，在所指出的溶劑中測定的。紫外光譜是在一臺Hewlett Packard 8451 A型二極管陳列光度計(jì)在所指出的溶劑和濃度條件下測定的。
分析用的薄板層析(TLC)是在預(yù)先涂布好的硅膠板(60F-254，0.25mm)上進(jìn)行的，用紫外光照射，碘蒸氣和/或下列試劑中的一種使斑點(diǎn)顯色而便于目測(a)磷鉬酸甲醇溶液(2%)并加熱;(b)試劑(a)再加2%硫酸鈷在5M H2SO4中的溶液，并加熱。柱層析，也稱為閃式柱層析，是在玻璃柱中用粉細(xì)的硅膠(40-63m硅膠-H)及稍高于大氣壓的條件下用所指出的溶劑完成的。制備性薄板層析是在預(yù)先涂布好的硅膠板(60F-254，2mm)上進(jìn)行的，用紫外光使斑點(diǎn)顯色。
反相分析用薄板層析是在Analtech公司生產(chǎn)的預(yù)先涂布好的反向F(250微米)板上進(jìn)行的，用紫外光或碘蒸氣使斑點(diǎn)顯色。
反相柱層析是在玻璃柱中用μ Bondapak C18(55-100m)prep 500完成的。高壓液相層析是在一臺Waters 501型高壓液相層析泵上用Varian 2550紫外檢測器和Varian 4290積分器完成的。層析柱的說明如下填充μ Bondapak C18，30厘米長，3.9毫米內(nèi)徑，顆粒大小10μ，流動相是CH3CN/0.01M K2HPO4水溶液，pH7.4。
所有溶劑的蒸發(fā)操作都是在減壓下完成的，像這里應(yīng)用的，術(shù)語己烷類是指各種異構(gòu)的C6烴類的混合物，如美國化學(xué)協(xié)會說明的那樣;石油醚是指30-60℃沸程餾份;術(shù)語“惰性”氣氛是指氬氣或氮?dú)夥?，除非另外指明?br> 實(shí)施例1 (4R，5S，6S)-4-(2″-氟乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
A.4-氟-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕丁酸酯
在冰浴冷卻下，向2-巰甲基吡啶(5.26g，4.2mmol)和吡啶(4.1ml，50mmol)在CH2Cl2(50ml)中的溶液中滴加4-氟丁酰氯(5.23g，4.2mmol，按照F.L.Pattison等人在J.Org.Chem.，21，887(1956)中的方法制得)。將混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，用乙酸乙酯(100ml)稀釋，用冷水(3×100ml)和鹽水(100ml)洗滌，干燥(MgSO4)。使混合物粗品(9g)通過硅膠(250g)墊，得到油狀的標(biāo)題化合物(7.6g，85%)。
IR(CH2Cl2)νmax1690cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3)δ8.55-8.51(1H，m，吡啶 -H)，7.67-7.58(1H，m，吡啶 -H)，7.35-7.31(1H，bd，J＝7.8Hz，吡啶 -H)，7.2-7.12(1H，m，吡啶 -H)，4.61，4.58，4.55，4.37，4.34，4.3(2H，dt，J＝5.8Hz，J＝47.1Hz，CH2-F)，4.27(2H，s，CH2-S)，2.74(2H，t，J＝7.2Hz，CH2C＝O)和2.2-1.92ppm(2H，m，CH2). B.4-氟-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕丁酸酯的烯醇硅烷醚
在冰浴冷卻下，向4-氟-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕丁酸酯(427mg，2.0mmol)和三乙胺(0.6ml，4mmol)在CH2Cl2(10ml)中的溶液中滴加三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯(0.7ml，3mmol)。撤去冰浴，將混合物攪拌5小時(shí)，用石油醚(50ml)稀釋，用冰水(3×25ml)和鹽水(25ml)洗滌，干燥(MgSO4)。用中性活性炭處理所得溶液，得到紅色油狀的標(biāo)題化合物(0.68g，100%)。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.56-8.52(1H，m，芳族 H)，7.67-7.58(1H，m，芳族 -H)，7.28-7.23(1H，m，芳族 H)，7.18-7.11(1H，m，芳族 -H)，5.02(0.4H，t，J＝7.5Hz，乙烯 H)，4.85(0.6H，t，J＝7.2Hz，乙烯 H)，4.40和4.16(d，2H，dt，J＝6.7Hz，J＝47.2Hz，CH2F)，4.28，4.05(0.8H，dt，J＝6.4Hz，J＝47.2Hz，CH2F)，4.05(0.8H，s，CH2-吡啶)，3.98(1.2H，s，CH2-吡啶)，2.5-2.2(2H，m，CH2)，0.98和0.97(9H，2s，叔丁基)，0.25和0.21ppm(6H，2s，二甲基). C.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-3″-氟丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
向在氬氣氛下用冰浴冷卻的新熔融過的ZnCl2(5.45g，40mmol)中加入在CH2Cl2(60ml)中的(3S，4R)-4-乙酰氧基-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(5.75g，20mmol)，然后滴加在CH2Cl2(20ml)中的步驟B制得的硅烷烯醇醚(14g，40mmol)。將混合物在5℃(冷室)攪拌20小時(shí)，然后倒入冷的飽和NaHCO3水溶液中，用乙酸乙酯(2×100ml)提取。將乙酸乙酯提取液用飽和NH4Cl和鹽水洗滌后，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑后，殘留物用石油醚研制，過濾，得到產(chǎn)物(4.0g，45%)。用乙酸乙酯重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物;m.p.＝114-115℃。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，1770和1680cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3)δ8.55-8.52(1H，m，芳族 -H)，7.68，7.59(1H，m，芳族 -H)，7.33-7.29(1H，bd，J＝7.8Hz，芳族 -H)，7.21-7.14(1H，m，芳族 -H)，5.86(1H，bs，NH)，5.71-4.29(2H，2 組 m，CH2F)，4.277(2H，s，CH2S)，4.22-4.11(1H，m，H-1′)，3.88(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝6.7Hz，H-4)，3.075-2.97(2H，m，H＝3和H-1″)，2.3-1.8(2H，2 組 m，CH2-2″)，1.01(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.855(9H，s，叔丁基)和0.048ppm(6H，s，二甲基); 分析計(jì)算值 C21H33N2O3SSiF C，57.24;H，7.55;N，6.36;S，7.28. 實(shí)測值 C，57.01;H，7.74;N，6.17;S，7.24. D.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-氟丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在冰浴冷卻下，用30%H2O2(45μl，0.5mmol)和1.0N NaOH水溶液(0.5ml，0.5mmol)處理(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-3″-氟丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(110mg，0.25mmol)在THF(5ml)中的溶液。撤去冰浴，將混合物攪拌1小時(shí)，然后用乙酸乙酯(20ml)稀釋。混合物用1N HCl水溶液(1×40ml)、水(3×20ml)和鹽水(1×20ml)洗滌，然后干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到固狀標(biāo)題化合物(82mg，100%)。
m.p.＝104-105℃(EtOAc); IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，1770，1750和1715cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.34(1H，bs，NH)，4.8-4.6和4.6-4.35(2H，2 組 m，CH2F)，4.35-4.1(1H，m，H-1′)，3.95(1H，dd，J＝1.9Hz，J＝6.0Hz，H-4)，3.15-3.12(1H，m，H-3)，2.95-2.8(1H，m，H＝1″)，2.3-1.8(2H，m，CH2)，1.18(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.87(9H，s，叔丁基)，0.072和0.063ppm(6H，2s，二甲基); 分析計(jì)算值 C15H28NO4SiF C，54.03;H，8.46;N，4.20. 實(shí)測值 C，53.75;H，8.55;N，4.05. E.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-氟乙基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在22℃下將(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-氟丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(0.75g，2.3mmol)在CH3CN(15ml)中的懸浮液用羰基二咪唑(0.39g，2.4mmol)處理并攪拌1小時(shí)。在22℃下將所得的?；溥蛴脽o水丙二酸單烯丙基酯鎂鹽(0.73g，2.4mmol)處理并攪拌50小時(shí)。將混合物用EtOAc(60ml)稀釋，用冷的1N HCl水溶液(1×60ml)、水(2×60ml)、飽和NaHCO3水溶液(1×60ml)、水(2×60ml)和鹽水(60ml)洗滌，然后干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑后，使殘留物通過硅膠(100g)墊(己烷→20%EtOAc/己烷)，得到油狀標(biāo)題化合物(96mg，10%)。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，1770，1715，1655和1630cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.01，6.00(1H，2 bs，NH)，6.0-5.8(1H，m，乙烯 H)，5.4-5.15(2H，m，乙烯 H)，5.14(0.5H，s，烯醇的乙烯基H)，4.7-4.6(2H，m，CH2-乙烯)，4.7-4.2(2H，2 組 m，CH2F)，4.21-4.13(1H，m，H-1′)，3.91(0.5H，dd，J＝2.1Hz，J＝4.4Hz，H4)，3.88(0.5H，dd，J＝2.1Hz，J＝6.9Hz，H-4)，3.60(1H，s，CH2CO)，3.26-3.17(0.5H，m，H-1″)，2.99(0.5H，dd，J＝2.2Hz，J＝4.4Hz，H-3)，2.95-2.92(0.5H，m，H-3)，2.55-2.35(0.5H，m，H-1″)，2.3-1.7(2H，m，CH2)，1.175和1.12(3H，2d，J＝6.28Hz和J＝6.34Hz，CH3)，0.86(9H，s，叔丁基)，0.067和0.055(6H，2s，二甲基). F.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-氟乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在冰浴冷卻下，用三乙胺(64ml，0.48mmol)和對甲苯磺?；B氮(95mg，0.48mmol)處理(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-氟乙基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(0.20g，0.48mmol)在CH3CN中的溶液。撤去冰浴，將混合物攪拌1小時(shí)。蒸發(fā)CH3CN，得到半固狀殘留物，用石油醚(10ml)研制。濾除固體，將溶液通過硅膠柱(6g，10%EtOAc-己烷)，得到標(biāo)題化合物(190mg，90%)。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，2150(N2)，1777，1715和1650cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-5.83(1H，m，乙烯 H)，5.90(1H，bs，NH)，5.40-5.28(2H，m，乙烯 H)，4.73-4.7(2H，m，CH2乙烯)4.7-4.4，4.4-4.2(2H，2 組 m，CH2-F)，4.3-4.1(2H，m，H-1′和H-1″)，3.90(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝5.2Hz，H-4)，3.06-3.03(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝3.5Hz，H-3)，2.2-2.0，2.0-1.8(2H，2 組 m，CH2)，1.18(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.86(9H，s，叔丁基)，0.061和0.051ppm(6H，2s，二甲基). G.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-氟乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在冰浴冷卻下，用1N HCl水溶液(0.78ml，0.78mmol)處理(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-氟乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(170mg，0.390mmol)在CH3CN(2ml)中的溶液。撤去冰浴，將混合物攪拌4小時(shí)。減壓下除去溶劑，用EtOAc(15ml)稀釋殘留物。有機(jī)相用0.1M NaHCO3水溶液(10ml)、水(10ml)和鹽水(10ml)洗滌，然后干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，使殘留物通過硅膠(5g)墊(1∶1乙酸乙酯∶己烷)，得到標(biāo)題化合物(130mg，100%)。
IR(CH2Cl2)νmax3680，3600(OH)，3400(NH)，2150(N2)，1765，1715和1650cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.04(1H，bs，NH)，6.0-5.8(1H，m，乙烯基 -H)，5.4-5.29(2H，m，乙烯基 -H)，4.75-4.71(2H，m，CH2-乙烯基)，4.7-4.5，4.5-4.3(2H，2 組 m，CH2F)，2.2-2.0(2H，m H-1′和H-1″)，3.88(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝6.5Hz，H-4)，2.98(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝7.2Hz，H-3)，2.34(1H，d，J＝3.6Hz，OH)，2.4-1.8(2H，2 組 m，CH2)，和1.31ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). H.(2R，4R，5R，6S)-4-(2″-氟乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
用Rh(OAc)2作為催化劑將(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-氟乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(150mg，0.46mmol)在25%己烷-乙酸乙酯(5ml)中的溶液回流2.5小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，得到標(biāo)題雙環(huán)酮(140mg，100%)。
IR(CH2Cl2)νmax3680，3600(OH)，1770，1745和1735cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.0-5.80(1H，m，乙烯基 -H)，5.4-5.26(2H，m，乙烯基 H)，4.79-4.68(1H，m，HCH-F)，4.69-4.65(2H，m，CH2-乙烯)，4.68(1H，s，H-2)，4.57-4.44(1H，m，HCHF)，4.37(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝8.6Hz，H-5)，4.38-4.24(1H，m，H-1′)，3.29(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝7.2Hz，H-6)，3.02-2.9(1H，m，H-4)，2.3-1.7(3H，2 組 of m和bs，CH2和OH)和1.39(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). I.(4R，5S，6S)-4-(2″-氟乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰浴冷卻下，將(2R，4R，5R，6S)-4-(2″-氟乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(0.14g，0.55mmol)在CH3CN(2ml)中的溶液用ClPO(OPh)2(0.11ml，0.50mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.098ml，0.55mmol)處理并攪拌2小時(shí)。然后將所得的烯醇磷酸酯用TMSCl(0.065ml，0.5mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.098ml，0.55mmol)處理，攪拌15分鐘，最后用2-吡啶甲基硫醇(63mg，0.55mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.098ml，0.55mmol)處理。將混合物攪拌3小時(shí)，用乙酸乙酯(20ml)稀釋，用H2O(3×10ml)洗滌，然后干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑后，使所得殘留物通過硅膠(10g)柱(1/1乙酸乙酯/己烷)。將所得的三甲基硅醚中間體(170mg)用THF(2ml)和水(1ml)稀釋，用AcOH(30μl，0.46mmol)處理，然后攪拌1小時(shí)。混合物用乙酸乙酯(20ml)稀釋，用1M NaHCO3水溶液(10ml)、水(10ml)和鹽水(10ml)洗滌，然后干燥(MgSO4)，得到油狀標(biāo)題物質(zhì)(0.125g，69%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600(OH)，1775和1715cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.53-8.51(1H，bd，芳族 H)，7.71-7.62(1H，m，芳族 H)，7.38，7.34(1H，bd，J＝7.8z，芳族 -H)，7.23-7.16(1H，m，芳族 -H)，6.0-5.85(1H，m，乙烯基 -H)，5.47-5.21(2H，m，乙烯基 H)，4.86-4.6(3H，m，CH2-乙烯基和HCHF)，4.52-4.44(1H，m，HCHF)，4.26-4.19，4.06，3.99(2H，ABq，J＝13.9Hz，CH2-吡啶)，4.28-4.18(2H，m，H-1′和H-5)，3.85-3.73(1H，m，H-4)，3.23(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.3Hz，H-6)，2.4-1.6(3H，m和bs，CH2和OH)和1.36ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). J.(4R，5S，6S)-4-(2″-氟乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
在冰浴冷卻下，用Pd(PPh3)4(10mg)和N-甲基苯胺(60μl，0.55mmol)處理(4R，5S，6S)-4-(2″-氟乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(125mg，0.320mmol)在THF(3ml)中的溶液。撤去冰浴，將混合物攪拌1.5小時(shí)?；旌衔镉肊tOAc(20ml)稀釋，用0.05M的磷酸鹽水溶液緩沖液(pH7.0，1×10ml和1×5ml)提取。合并水相，用乙酸乙酯(10ml)洗滌，然后通過μ-Bondapak C18柱(20g，H2O，2%，5%，7%，10%，CH3CN/H2O)，得到標(biāo)題化合物(50mg，40%)。
HPLC測得的純度99.23%，保留時(shí)間15.90分鐘(10%CH3CN/KH2PO4，0.01M，pH7.4); UV(H2O)λmax266(6300)，304(8700); IR(液體石蠟)νmax1750和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.47-8.45(1H，m，芳族 -H)，7.89-7.81(1H，m，芳族 -H)，7.53-7.49(1H，bd，J＝7.9Hz，芳族 H)，7.39-7.32(1H，m，芳族 -H)，4.8-4.6，4.55-4.35(2H，2 組 m，CH2-F)，4.24，4.17，4.10，4.03(2H，ABq，J＝13.8Hz，CH2- 吡啶)，4.3-4.17(1H，m，H-1′)，4.10(1H，dd，J＝9.5Hz，J＝2.6Hz，H-5)，3.43(1H，dd，J＝6.1Hz，J＝2.6Hz，H-6)，3.41-3.29(1H，m，H-4)和1.27ppm(1H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例2 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.4-疊氮基-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕丁酸酯
在冰浴冷卻下，將2-巰甲基吡啶(46.5g，0.372mol)在CH2Cl2中的溶液用吡啶(37.5ml，0.465mol)處理，接著滴加在CH2Cl2(100ml)中的4-疊氮基丁酰氯(54.9g，0.372mol)。將混合物在5℃下攪拌1小時(shí)，用EtOAc(2l)稀釋，用冷水(500ml)、1M NaHSO3水溶液(500ml)和水(500ml)洗滌后，再用1M NaHCO3水溶液、水(500ml)和鹽水洗滌。殘留物通過硅膠(900g)墊，得到油狀的標(biāo)題化合物(88.9g，91%)。
IR′(CH2Cl2)νmax2100(N3)，和1690cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.55-8.52(1H，m，芳族 H)，7.66-7.58(1H，m，芳族 H)，7.34-7.31(1H，bd，芳族 H)，7.19-7.12(1H，m，芳族 H)，4.26(2H，s，CH2-吡啶)，3.335(2H，t，J＝6.6Hz，CH2N3)，2.688(2H，t，J＝7.2Hz，CH2CO)和2.03-1.87ppm(2H，m，CH2). B.4-疊氮基-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕丁酸酯的叔丁基二甲基硅基烯醇醚
在冰浴冷卻下，將4-疊氮基-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕丁酸酯(191g，0.809mol)在CH2Cl2(1l)中的溶液用三乙胺(141ml，1.01mol)處理，接著滴加三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯(223ml，0.970mol)，然后在大約22℃下攪拌45分鐘。將混合物冷卻(冰浴)，以同樣的方式用三乙胺和三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯處理并攪拌45分鐘。重復(fù)該過程一次，將混合物攪拌1小時(shí)。將混合物冷卻(冰浴)，用冷的石油醚(2l)稀釋，用冷水(4×1l)、1M NaHCO3水溶液(5×1l)和水(1l)洗滌，然后干燥(MgSO4)。用活性炭處理有機(jī)相，過濾，得到標(biāo)題化合物(327g，100%)。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.56-8.53(1H，m，芳族 H)，7.67-7.59(1H，m，芳族 H)，7.28-7.25(1H，bd，芳族 H)，7.18-7.12(1H，m，芳族 H)，3.989(0.45H，t，J＝7.6Hz，乙烯 H)，4.828(0.55H，t，J＝7.2Hz，乙烯 H)，4.048(0.9H，s，CH2-吡啶)，3.978(1.1H，s，CH2-吡啶)，3.128(1.1H，t，J＝7.2Hz，CH2N3)，3.004(0.9H，t，J＝6.9Hz，CH2N3)，2.35-2.22(2H，m，CH2)，0.985，0.969(9H，2s，叔丁基)，0.251和0.215ppm(6H，2s，二甲基). C.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-3″-疊氮基丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
先在0℃(冰浴)和氬氣氛下向新熔融過的ZnCl2(38.6g，0.284mol)中加入在CH2Cl2(500ml)中的(3S，4R)-4-乙酰氧基-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(40.75g，0.142mol)，然后滴加步驟B制得的4-疊氮基-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕丁酸酯的叔丁基二甲基硅基烯醇醚(100g，0.248mol)在CH2Cl2(140ml)中的溶液。將混合物在冰浴中攪拌1小時(shí)，然后在5℃(冷室)下放置15小時(shí)。再將混合物在大約22℃下攪拌4小時(shí)，然后用飽和NH4Cl水溶液(700ml)稀釋，用EtOAc(2×1l)提取兩次。合并有機(jī)相，用水(3×500ml)和鹽水(500ml)洗滌，然后干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到殘留物。將殘留物用石油醚(200ml)稀釋，用標(biāo)題化合物接種，并在5℃(冷室)下結(jié)晶18小時(shí)。收集晶體，母液通過硅膠(500g)墊閃式層析〔8/2 CH2Cl2/己烷→50%EtOAc/CH2Cl2〕純化，共得到50.5g(74%)標(biāo)題化合物;m.p.＝95-6℃(石油醚)。
IR(CH2Cl2)νmax3400(NH)，2100(N3)，1770和1680cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.55-8.52(1H，m，芳族 H)，7.67-7.59(1H，m，芳族 H)，7.34-7.30(1H，bd，芳族 H)，7.21-7.14(1H，m，芳族 H)，5.93(1H，bs，NH)，4.278(2H，s，CH2-吡啶)，4.2-4.09(1H，m，H-1′)3.839(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝6.7Hz，H-4)，3.47-3.22(2H，m，CH2-N3)，3.053(1H，dd，J＝2.3Hz，J＝3.3Hz，H-3)，2.99-2.89(1H，m，H-1″)，2.09-1.97(1H，m，HCH)，1.79-1.65(1H，m，HCH)，1.009(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.852(9H，s，叔丁基)和0.044(6H，s，二甲基). D.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-疊氮基丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在冰浴冷卻下，將(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-3″-疊氮基丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(4.79g，10mmol)在THF(50ml)中的溶液用30%H2O2(2.58ml，30.0mmol)處理，然后滴加1N NaOH水溶液(30ml，30mmol)。撤去冰浴，將混合物攪拌1小時(shí)，然后再次冷卻(冰浴)。將反應(yīng)混合物用1N HCl水溶液(60ml，60mmol)酸化，用EtOAc(3×50ml)提取。合并有機(jī)提取液，用水(50ml)、1M NaHSO3水溶液、水(50ml)和鹽水(50ml)洗滌，然后干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到白色固狀的標(biāo)題化合物(3.64g，98%);m.p.＝138-139℃(乙醚，石油醚)。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，2100(N3)，1770，1740和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.57(1H，bs，NH)，4.23-4.18(1H，m，H-1′)，3.932(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝5.8Hz，H-4)，3.52-3.36(2H，m，CH2N3)，3.146(1H，dd，J＝1.8Hz，J＝3.7Hz，H-3)，2.85-2.74(1H，m，H-1″)，2.1-1.94(1H，m，HCH)，1.9-1.7(1H，m，HCH)，1.1830(3H，t，J＝6.3Hz，CH3)，0.868(9H，s，叔丁基)，0.072和0.059ppm(6H，2s，二甲基). E.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-疊氮基乙基)-3″-重疊基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在氮?dú)夥障?，?3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-疊氮基丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(3.56g，10mmol)在無水CH3CN中的懸浮液先用羰基二咪唑(1.94g，12mmol)處理并攪拌30分鐘。向該透明溶液中加入丙二酸單烯丙酯鎂鹽(3.73g，12mmol)，并將混合物在60℃下攪拌18小時(shí)。然后補(bǔ)加丙二酸酯鹽(923mg，3mmol)，并將混合物在60℃下再加熱4小時(shí)。重復(fù)該過程兩次，加熱時(shí)間分別為18小時(shí)和4小時(shí)。然后蒸發(fā)乙腈，殘留物溶于EtOAc(200ml)中，將該溶液用冷水(100ml)、1N HCl水溶液(100ml)、10%Na2CO3水溶液(100ml)和鹽水(100ml)洗滌，然后干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-4-〔(1″R)-1″-(2-疊氮基乙基)-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮粗品(4.2g，100%)。將一部分該粗品(1.85g，4.22mmol)置于CH3CN(19ml)中，冷卻(冰浴)，依次用三乙胺(0.6ml，4.3mmol)和對甲苯磺?；B氮(847mg，3.2mmol)處理，然后在大約22℃下攪拌3.5小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，殘留物通過硅膠(20g，CH2Cl2，10%EtOAc/CH2Cl2)柱，得到標(biāo)題化合物(1.21g，62%)，它摻雜有少量的對甲苯磺酰胺。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，2150(N2)，2100(N3)，1765，1715和1645cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.1-5.8(1H，m，乙烯 H)，5.87(1H，bs，NH)，5.41-5.29(2H，m，乙烯 H)，4.75-4.7(2H，m，CH2)，4.23-4.1(2H，m，H-1′和H-1″)，3.873(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝5.2Hz，H-4)，3.39-3.24(2H，m，CH2N3)，3.049(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝3.7Hz，H-3)，2.21-2.05(1H，m，HCH)，1.75-1.60(1H，m，HCH)，1.179(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.864(9H，s，叔丁基)，0.064和0.052ppm(6H，2s，二甲基). F.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-疊氮基乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在冰浴冷卻下，向(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-疊氮基乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(1.21g，2.61mmol)在EtOH(20ml)中的溶液中緩慢加入2N HCl水溶液(2.61ml，5.22mmol)。撤去冰浴，將混合物攪拌22小時(shí)，然后用1M NaHCO3水溶液中和至pH7。將混合物減壓下濃縮，殘留物溶于EtOAc(50ml)中，用水(20ml)、1M NaHCO3水溶液(20ml)和鹽水(20ml)洗滌，然后干燥(MgSO4)。殘留物通過硅膠(20g)柱(CH2Cl2→8/2 EtOAc/CH2Cl2)，得到標(biāo)題化合物(760mg，83%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600，3500(OH)，2150(N2)，2100(N3)，1765，1715和1645cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.25(1H，bs，NH)，6.04-5.8(1H，m，乙烯 H)，5.4-5.2(2H，m，乙烯 H)，4.9-4.8(2H，m，CH2)，4.17-4.01(2H，m，H-1′和H-1″)，3.844(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝6.1Hz，H-4)，3.42-3.2(2H，m，CH2N3)，3.017(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝6.7Hz，H-3)，2.5(1H，bs，OH)，2.2-2.0(1H，m，HCH)，1.85-1.7(1H，m，HCH)和1.286ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). G.(2R，4R，5R，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
將(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-疊氮基乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(350mg，1mmol)和Rh(OAc)2(6mg)在EtOAc(15ml)和己烷(5ml)中的溶液在80-85℃(浴溫)下加熱2小時(shí)。減壓下除去溶劑，得到油狀標(biāo)題化合物(340mg，100%)。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.05-5.9(1H，m，乙烯 H)，5.5-5.2(2H，m，乙烯 H)，4.77(1H，s，H-2)，4.48-4.6(2H，m，CH2)，4.329(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝8.7Hz，H-5)，4.3-4.1(1H，m，H-1′)，3.568(2H，t，J＝6.5Hz，CH2N3)，3.234(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝8.0Hz，H-6)，2.95-2.75(1H，m，H-4)，2.1-1.9(1H，m，HCH)，1.8-1.6(1H，m，HCH)和1.412ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). H.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-CH3OH浴冷卻下，將(2R，4R，5R，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(338mg，1mmol)在CH3CN(8ml)中的溶液用ClPO(OPh)2(0.23ml，1.1mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.19ml，1.1mmol)依次處理，然后攪拌45分鐘。將所得烯醇磷酸酯用三甲基硅基氯(0.14ml，1.1mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.19ml，1.1mmol)處理，然后再攪拌45分鐘。將所得的保護(hù)的烯醇磷酸酯用在CH3CN(1ml)中的2-吡啶甲基硫醇(250mg，2.0mmol)以及N，N-二異丙基乙胺(0.34ml，2.0mmol)處理，然后攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物用EtOAc(30ml)稀釋，用冷水(10ml)、1M NaHSO3水溶液(10ml)、水(10ml)、1M NaHCO3水溶液(10ml)、水(10ml)和鹽水(10ml)洗滌，然后干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑后，殘留物溶于冰浴冷卻的THF(10ml)中，用2N CH3CO2H水溶液(3ml，6mmol)處理，然后在冷卻下攪拌1小時(shí)，再在大約22℃下攪拌1.5小時(shí)。將混合物用乙酸乙酯(20ml)稀釋，用冷水(10ml)、1M NaHCO3水溶液(10ml)、水(10ml)和鹽水洗滌，然后干燥(MgSO4)。殘留物通過硅膠(15g)柱洗脫(CH2Cl2→60%EtOAc/CH2Cl2)，得到標(biāo)題化合物(175mg，38%)。
IR 3600，3500-3400(OH)，2100(N3)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)，δ8.54-8.51(1H，m，芳族 H)，7.7-7.6(1H，m，芳族 H)，7.38，7.34(1H，m，芳族 H)，7.25-7.15(1H，m，芳族 H)，6.1-5.8(1H，m，烯丙基H)，5.5(2H，m，烯丙基H)，4.8-4.55(2H，m，CH2-烯丙基)，4.294，4.225，4.072，4.002(2H，ABq，J＝14.0Hz，CH2-吡啶基)，4.3-4.1(1H，m，H-1′)，4.166(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.8-3.65(1H，m，H-4)，3.6-3.3(2H，m，CH2-N3)，3.162(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.7Hz，H-6)，2.2-2(1H，m，HCH)，1.95(1H，bs，OH)，1.9-1.6(1H，m，HCH)和1.382ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). I.(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(43mg，0.1mmol)在CH2Cl2中的溶液用(PPh3)4Pd(21mg，0.018mmol)處理，然后用N-甲基苯胺(0.03ml，0.26mmol)處理。將混合物在大約22℃下攪拌1小時(shí)，用乙醚(10ml)稀釋，然后用0.1M pH7.0磷酸鹽緩沖水溶液(2×1.5ml，0.15mmol)和水(2×1.5ml)提取。水相用乙醚(5ml)洗滌，用1M pH4.2磷酸鹽緩沖水溶液將pH調(diào)至pH5.9-6.0。然后用10%Pd/C(75mg)作催化劑將水層在45-50p.s.i.和5℃至15℃(反應(yīng)終止時(shí)的溫度)下氫化1小時(shí)。濾出催化劑，用pH6磷酸鹽緩沖液漂洗，在C18μBondapak(12g)反相柱上層析(2%CH3CN/H2O)純化，然后以相同的方式再重復(fù)一次純化，得到標(biāo)題化合物(6mg，16%)。
HPLC純度98.11%，保留時(shí)間＝6.08分鐘。(302nm，10%CH3CN，0.01M pH7.4磷酸鹽緩沖液); UV(H2O)λmax266(4600)，302(5300); IR(液體石蠟)νmax1755和1590cm-1C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.48-8.45(1H，m，芳族)，7.9-7.8(1H，m，ar芳族 H)，7.51，7.47(1H，bd，芳族 H)，7.4-7.33(1H，m，ar芳族 H)，4.22，4.15，4.09，4.02(2H，ABq，J＝14.5Hz，CH2-吡啶甲基)，4.3-4.14(1H，m，H-1′)，4.097(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝9.6Hz，H-5)，3.374(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝6.6Hz，H-6)，3.3-3.16(1H，m，H-4)，3.03(1H，t，J＝7.8Hz，CH2N)，2.2-2.05(1H，m HCH)，1.82-1.6(1H，m，HCH)和1.299ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例3 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-疊氮基乙基)-3″-重氮基-3″-對硝基芐氧羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
將(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-疊氮基丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(100mg，0.27mmol)在CH3CN(4ml)中的懸浮液用羰基二咪唑(52mg，0.32mmol)處理，并在大約22℃下攪拌0.5小時(shí)。加入丙二酸單對硝基芐基酯鎂鹽(200mg，0.400mmol)，并將混合物在60℃(浴溫)下加熱18小時(shí)。將混合物用EtOAc(20ml)稀釋，用1N HCl水溶液(10ml)、水(10ml)、10%K2CO3水溶液(10ml)和鹽水(10ml)洗滌，然后干燥(MgSO4)，得到(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-疊氮基乙基)-3″-對硝基芐氧羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮粗品(1.37g，92%)。將一部分該粗品(109mg，0.198mmol)溶于CH3CN(2ml)中，用三乙胺(0.030ml，0.22mmol)和對甲苯磺?；B氮(43mg，0.22mmol)依次處理，并在大約22℃下攪拌1.3小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，殘留物在制備型TLC板上層析(乙醚)，提取后，得到(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-疊氮基乙基)-3″-重氮基-3″-對硝基芐氧羰基-2″氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(Rf0.71，84mg)，其中污染有對甲苯磺?；B氮(65mg，57%校正收率)。將類似混合物(從另一反應(yīng)得到)(2.7g，4.7mmol)溶于冰浴冷卻的乙醇(40ml)中，用2N HCl水溶液(4.7ml，9.4mmol)滴加處理。撤去冰浴，將混合物攪拌23小時(shí)，然后，在冰浴冷卻下用1M NaHCO3水溶液(大約10ml)中和，再減壓濃縮。殘留物用EtOAc(100ml)稀釋，用冷的1M NaHCO3水溶液(200ml)、水(20ml)及鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物通過硅膠(30g)墊(CH2Cl2→80%EtOAc/CH2Cl2→EtOAc)，得到黃色固狀的標(biāo)題化合物(1.45g，67%)。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.3-8.23(2H，m，芳族 H)，7.56，7.52(2H，bd，J＝8.7Hz，芳族 H)，6.02(1H，bs，NH)，5.44，5.37，5.35，5.29(2H，Abq，J＝13.1Hz，CH2)，4.16-4.01(2H，m，H-1′和H-1″)，3.849(1H，dd，J＝2.2Hz，J＝6.0Hz，H-4)，3.43-3.25(2H，m，CH2N3)，3.041(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝6.9Hz，H-3)，2.3-2.0(1H，m，HCH)，2.130(1H，d，J＝4.1Hz，OH)，1.9-1.7(1H，m，HCH)和1.30ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸對硝基芐基酯
將(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-〔(2-疊氮基乙基)-3″-重氮基-3″-對硝基芐氧羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(856mg，1.86mmol)在3/1 EtOAc/己烷(40ml)中的溶液和Rh(OAc)2(20mg)在80-85℃(浴溫)下加熱1.5小時(shí)。除去溶劑，得到雙環(huán)酮粗品(2R，4R，5R，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸對硝基芐基酯(860mg，100%); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.2(2H，d，芳族 H)，7.5(2H，d，芳族 H)，5.4(1H，s，H-2)，5.3(2H，ABq的中心，CH2芳族)，4.3(1H，dd，H-5)，4.3-4.1(1H，m，H-1′)，3.5(2H，t，CH2N3)，3.3(1H，dd，H-6)，3.0-2.8(1H，m，H-4);2.1-1.9(1H，m，HCH)，1.9-1.7(1H，m，HCH)，1.43(3H，d，CH3). 在冰-CH3OH浴冷卻下，將酮粗品(860mg，1.86mmol)在CH3CN(20ml)中的溶液用氯磷酸二苯基酯(0.43ml，2.05mmol)處理，接著緩慢加入N，N-二異丙基乙胺(0.35ml，2.05mmol)和少許4-二甲氨基吡啶。將混合物攪拌30分鐘，然后依次加入三甲基硅基氯(0.26ml，2.05mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.35ml，2.05mmol)，繼續(xù)攪拌30多分鐘。將所得的O-三甲基硅基烯醇磷酸酯用在CH3CN(1ml)中的2-吡啶甲基硫醇(517mg，4.10mmol)處理，接著滴加N，N-二異丙基乙胺(0.70ml，0.41mmol)，然后攪拌1小時(shí)。將混合物用EtOAc(40ml)稀釋，用冷水(20ml)、pH7.4磷酸鹽緩沖液(20ml)和鹽水(20ml)洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑后，將殘留物溶于THF(100ml)中，冷卻至5℃(冰浴)，用2N CH3CO2H水溶液(5ml)處理，攪拌2小時(shí)。將混合物用乙酸乙酯(25ml)稀釋，用水、pH7.5磷酸鹽緩沖液(20ml)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物在硅膠(20g)柱上閃式層析(CH2Cl2→EtOAc)純化，得到標(biāo)題化合物(500mg，49%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600，3509，3400(OH)，2100(N3)，1775，1710(C＝O)和1525cm-1(NO2); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.54，8.52(1H，bd，芳族 H)，8.198(2H，d，J＝8.7Hz，p-NB 酯)，7.7-7.5(3H，m，和d，J＝8.7，芳族 H，p-NB 酯)，7.36-7.32(1H，bd，芳族 H)，7.24-7.17(1H，m，芳族 H)，5.517，5.448，5.230，5.161(2H，ABq，J＝14.8Hz，CH2-pNB)，4.305，4.236，4.087，4.018(2H，ABq，J＝13.9Hz，CH2-吡啶基)，4.3-4.2(1H，m，H-1′)，4.190，4.177(部分 dd，J＝2.6Hz，部分 H-5)，3.85-3.72(1H，m，H-4)，3.7-3.3(2H，m，CH2N3)，3.198(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝7.6Hz，H-6)，2.2-1.95(1H，m，H-CH)，1.9-1.6(1H，m，HCH)，1.64(1H，bs，OH)和1.399ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下，在50psi下，將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸對硝基芐基酯(55mg，0.1mmol)在乙醚THF(11，20ml)和水-0.05M pH7.0磷酸鹽緩沖液(7ml+3ml)兩相體系中的溶液用10%Pd/C(84mg)氫化5小時(shí)。濾出催化劑，有機(jī)層用水洗滌，合并水層，通過μBondapak C18反相柱;得到標(biāo)題化合物，其光譜數(shù)據(jù)與實(shí)施例2步驟Ⅰ制得的化合物相同。
實(shí)施例4 (4R，5S，6S)-4-〔3-(N-亞胺甲基)氨基乙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉(100mg，0.24mmol)在水(12ml)和0.1M pH6.0磷酸鹽緩沖液(7ml)中的溶液用10%Pd/C為催化劑氫化2小時(shí)。濾出催化劑，用1N和0.1N NaOH水溶液將水溶液(冰浴冷卻)的pH值調(diào)至8.5。將混合物用甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(410mg，2.4mmol)分批處理并用0.1N NaOH將pH值保持在8-8.3。將反應(yīng)混合物攪拌15分鐘，通過μBondapak C18柱(10g，H2O→1，2和3%CH3CN/H2O)，得到標(biāo)題化合物(30mg)。在同樣的物質(zhì)(C18，6g)上再次純化產(chǎn)物，得到純的標(biāo)題化合物(13mg，13%)。
HPLC純度92.6%(μBondapak C18，8%CH3CN/KH2PO40.01M pH7.4，保留時(shí)間＝7.095分鐘); UV(H2O)λmax304(6445)，266(5592); IR(液體石蠟)νmax1755，1595(C＝O)和1715cm-1(C＝N); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.47，8.45(1H，bd，芳族 H)，7.9-7.8(1H，m，芳族 H)，7.805(1H，s，C＝NH)，7.5-7.2(2H，m，芳族 H)，4.3-4.1(1H，m，H-1′)，4.217，4.141，4.078，4.008(2H，ABq，J＝15.2Hz，CH2-吡啶)，4.14-4.07(1H，隱藏 H-5)，3.5-3.1(4H，m，H-6，CH2N，H-4)，2.1-1.1(1H，m，HCH)，1.75-1.5(1H，m，HCH)和1.296ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 實(shí)施例5 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-羥基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
A.4-叔丁基二甲基硅氧基-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕丁酸酯
在冰浴冷卻下，將4-叔丁基二甲基硅氧基丁酸(2.7g，13mmol)和2-吡啶甲基硫醇(1.67g，13mmol)在CH2Cl2(40ml)中的溶液用1，3-二環(huán)己基碳化二亞胺(2.8g，13mmol)和1-羥基苯并三唑水合物(1.81g，13mmol)處理并在大約22℃下攪拌20小時(shí)。將混合物用乙酸乙酯稀釋，用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到殘留物，通過硅膠墊(EtOAc己烷，13)，得到標(biāo)題化合物(3.08g，71%)。
IR(凈態(tài))νmax1690cm-1C＝O; 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.54，8.52(1H，bd，芳族)，7.68，7.66，1.63，7.62，7.59，7.58(1H，dt，芳族)，7.36，7.32(1H，d，芳族)，7.26，7.19，7.166，7.16，7.15，7.13(1H，m，芳族)，4.25(2H，s，CH2)，3.62(2H，t，J＝6.1Hz，CH2)，2.68(2H，t，J＝7.5Hz，CH2)，1.90(2H，5線的中心;CH2)，0.87(9H，s，叔丁基)和0.019ppm(6H，s，二甲基). B.4-叔丁基二甲基硅氧基-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕丁酸酯的叔丁基二甲基硅氧基烯醇醚
在冰浴冷卻下，將S-(2-吡啶甲硫基)-4-叔丁基二甲基硅氧基丁酸酯(1.3g，4.0mmol)在CH2Cl2(15ml)中的溶液用三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯(1.1ml，6.0mmol)和三乙胺(1.14，8.00mmol)滴加處理，并在室溫(大約22℃)下攪拌3小時(shí)。將混合物用石油醚(60ml)稀釋，用冷水(3×50ml)和鹽水(50ml)洗滌，干燥(MgSO4)。溶液用活性炭處理，過濾，蒸發(fā)溶劑，得到油狀的標(biāo)題化合物(1.8g，100%)。
IR(凈態(tài))νmax1630cm-1烯; 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.54，8.53，8.52，8.51(1H，d，芳族 -H)，7.30-7.24(1H，m，芳族 -H)，7.16-7.10(1H，m，芳族 -H)，6.00(0.6H，t，J＝7.5Hz，烯 H)，4.89(0.4H，t，J＝7.1Hz，烯 H)，4.04(1.2H，s，CH2)，3.97(0.8H，s，CH2)，3.47(0.8H，t，J＝7.1Hz，CH2)，3.38(0.8H，t，J＝6.8Hz，CH2)，2.28-2.15(2H，m，CH2)，0.98，0.96(2s，9H，叔丁基)，0.864，0.861(9H，2s，叔丁基)，0.237，0.196(6H，2s，二甲基)，0.014和0.003ppm(6H，2s，二甲基). C.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-3″-叔丁基二甲基硅氧基丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在冰浴冷卻下和氬氣氛下，向新熔融過的ZnCl2(545mg，4mmol)中加入在CH2Cl2(10ml)中的(3S，4R)-4-乙酰氧基-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(575mg，2mmol)，接著滴加在CH2Cl2(5ml)中的步驟B制得的甲硅烷基烯醇醚(1.8g，4mmol)。將混合物在5℃下攪拌18小時(shí)，用乙酸乙酯(60ml)稀釋，用飽和NaHCO3水溶液(50ml)、飽和NH4Cl水溶液(50ml)和鹽水(50ml)洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑后，殘留物在硅膠柱(80g，15乙酸乙酯/己烷)上純化，得到固狀標(biāo)題化合物(500mg，45%)，m.p.＝103-105℃(己烷)。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，1765和1680cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.54-8.51(1H，m，芳族 H)，7.66-7.57(1H，m，芳族 H)，7.34(1H，d，J＝7.8Hz，芳族 H)，7.20-7.12(1H，m，芳族 H);5.99(1H，bs，NH)，4.24(2H，s，CH2)，4.2-4.09(1H，m，H-1′)，3.83(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝6.9Hz，H-4)，3.73-3.49(2H，m，CH2O)，3.04-2.94(2H，m，H-1″和H-3)，2.01-1.89(1H，m，H-2″)，1.80-1.64(1H，m，H-2″)，1.00 3H，d，J＝6.4Hz，CH3)，0.861，0.850(18H，2s，叔丁基)，0.040和0.004ppm(12H，2s，二甲基); 分析計(jì)算值 C27H47N2O4SSi2 C 58.76，H 8.58，N 5.08，S 5.81. 實(shí)測值 C 58.57，H 9.00，N 4.97，S 5.89. D.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-叔丁基二甲基硅氧基丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在冰浴冷卻下，將(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-3″-叔丁基二甲基硅氧基丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(480mg，0.87mmol)在THF(5ml)中的溶液用30%H2O2(0.15ml，1.7mmol)處理，接著滴加1N NaOH水溶液(1.7ml，1.7mmol)。撤去冰浴，將混合物攪拌90分鐘，然后用乙酸乙酯(30ml)稀釋，用1N HCl水溶液(25ml)、1N NaHSO3水溶液(25ml)、水和鹽水洗滌，干燥。蒸發(fā)溶劑后，得到白色固狀的標(biāo)題化合物(0.37g，96%);m.p.＝125-127℃(乙酸乙酯)。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，1765(β-內(nèi)酰胺)和1710cm-1(acid); 1H NMR(CDCl3)δ6.23(1H，bs，NH)，4.204(1H，m，H-1′)，2.94(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝5.9Hz，H-4)，3.72(2H，bt，J＝5.7Hz，CH2)，3.07(1H，dd，J＝1.7Hz，J＝4.1Hz，H-3)，2.84-2.74(1H，m，H-1″)，2.02-1.81(1H，m，HCH)，1.78-1.69(1H，m，HCH)，1.18(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.889，0.866(18H，2s，叔丁基)，和0.065ppm(12H，s，二甲基); 分析計(jì)算值 C21H42NO5Si2 C 56.71，H 9.52，N 3.15. 實(shí)測值 C 56.55，H 9.67，N 3.13. E.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
將(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-叔丁基二甲基硅氧基丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(7.5g，17mmol)在CH3CN(75ml)中的懸浮液用羰基二咪唑(2.92g，18.0mmol)處理并在22℃下攪拌1小時(shí)。然后將混合物用無水丙二酸單烷基酯鎂鹽(5.3g，17mmol)處理并在80℃(浴溫)加熱18小時(shí)。蒸發(fā)部分溶劑。濃縮液用EtOAc(250ml)稀釋，用1N HCl水溶液(100ml)、水(100ml)、飽和NaHCO3水溶液(100ml)、水和鹽水(100ml)洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物(15g)通過閃式硅膠(300g)柱(1∶3EtOAc/己烷)，得到標(biāo)題化合物(5.15g，57%)，為酮和烯醇形式的混合物。
IR(液體石蠟)νmax3150-3100(OH)，1760，1710，1650和1620cm-1(C＝O和烯醇); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-5.80(2H，2 bs和m，NH和烯丙基)，5.38-5.23(2H，m，烯丙基)，5.07(0.5H，s，烯醇的烯H)，4.67-4.60(2H，m，CH2)，4.24-4.12(1H，m，H-1′)，3.90(0.47H，dd，J＝2.2Hz，J＝5.6Hz，H-4)，3.83(0.53H，dd，J＝2.1Hz，J＝7.1Hz，H-4)，3.75-3.48(32H，m，CH2OSi和COCH2CO)，3.10(0.47H，m，H-1″)，2.94(1H，m，H-3)，2.55-2.40(0.45H，m，H-1″)，1.97-1.6(2H，2m，CH2)，1.17(1.3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，1.11(1.4H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.882，0.878，0.865(18H，3s，叔丁基)，0.064，0.056，0.049和0.031 ppm(12H，4s，二甲基); 分析計(jì)算值 C26H49NO6Si2 C 59.16，H 9.36，N 2.65. 實(shí)測值 C 59.11，H 9.36，N 2.60. F.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
將(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(0.60g，1.1mmol)在CH3CN(10ml)中的溶液用對甲苯磺?；B氮(240mg，1.2mmol)和三乙胺(160μl，1.1mmol)處理并在大約22℃下攪拌2小時(shí)。除去溶劑，殘留物用石油醚(20ml)研制，促使對甲苯磺酰胺沉淀。將黃色油狀物(0.61g)通過硅膠(25g，10%-20%EtOAc/己烷)，得到純的標(biāo)題化合物(420mg);m.p.＝53-55℃。
IR(CH2Cl2)νmax3400(NH)，3140(N2)，1765，1715和1050cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.02-5.8(2H，bs和m，NH，烯丙基)，5.4-5.27(2H，m，烯丙基)，4.72-4.68(2H，m，CH2)，4.23-4.13(2H，m，H-1′和H-1″)，3.87(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝5.5Hz，H-4)，3.67-3.52(2H，m，CH2O)，3.04(1H，bt，J＝4.0Hz，H-3)，2.10-2.01(1H，m，HCH)，1.66-1.57(1H，m，HCH)，1.165(3H，d，J＝6.4Hz，CH3)，0.862和0.849(18H，2s，叔丁基)，0.058，0.053，0.0005和0.0061 ppm(12H，4s，二甲基); 分析計(jì)算值 C26H47N3O6Si2 C 56.39，H 8.55，N 7.59. 實(shí)測值 C 56.44，H 8.80，N 7.50. G.(4R，5R，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
將(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(1.0g，1.8mmol)和辛酸銠(Ⅱ)(3mg)在75%己烷-EtOAc(10ml)中的溶液加熱回流3小時(shí)，蒸發(fā)后，以定量收率得到了油狀標(biāo)題化合物(1g，100%)。
IR(凈態(tài))νmax1765(C＝O)，1745(肩峰 C＝O)和1735cm-1(肩峰，C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ5.99-8.79(1H，m，烯丙基)，5.39(2H，m，烯丙基)，4.7-4.6(2H，m，CH2)，4.63(1H，s，H-2)，4.35-4.2(1H，m，H-1′)，4.25(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝8.4Hz，H-5)，3.8-3.6(2H，m，CH2-O)，3.21(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝5.8Hz，H-6)，2.99-2.87(1H，m，H-4)，2.0-1.58(2H，m，CH2)，1.28(3H，d，J＝6.2Hz，CH3)，0.886，0.879(18H，2s，叔丁基)，0.094，0.087，0.054和0.045 ppm(12H，4s，二甲基). H.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰浴冷卻下，將(4R，5R，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(0.92g，1.8mmol)在CH3CN(10ml)中的溶液用氯磷酸二苯基酯(0.4ml，2mmol)、N，N-二異丙基乙胺(0.36ml，2mmol)和二甲氨基吡啶(1mg)處理并在22℃下攪拌1小時(shí)。再次將混合物冷卻(冰浴)，用2-吡啶甲基硫醇(0.38g，3mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.6μl，3.2mmol)處理，然后在5℃下攪拌20小時(shí)。將反應(yīng)混合物用EtOAc(60ml)稀釋，用冷的NaHCO3、水(3×50ml)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑后，殘留物通過硅膠柱(16g，1∶9-1∶3EtOAc/己烷)，得到標(biāo)題化合物(0.63g，56%)。
IR(CH2Cl2)νmax1775和1710 cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.52-8.49(1H，m，芳族)，7.68-7.59(1H，m，芳族)，7.34-7.30(1H，d，芳族)，7.20-7.13(1H，m，芳族)，6.03-5.84(1H，m，烯丙基 H)，5.47-5.18(1H，m，烯丙基 H)，3.82-4.6(2H，m，CH2)，4.354，4.287(1H，部分 ABq，J＝13.5Hz，CH2-吡啶基)，4.28-4.14(1H，m，H-1′)，4.143，4.075(1H，部分 ABq，J＝13.5Hz，CH2-吡啶基)4.08(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝9.2Hz，H-5)，3.84-3.70(2H，m，CH2O)，3.65-3.51(1H，m，H-4)，3.100(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝6.9Hz，H-6)，2.12-1.69(1H，m，HCH)，1.56-1.56(1H，m，HCH)，1.284(3H，d，J＝6.1，CH3)，0.888，0.850(18H，2s，叔丁基)，0.081(6H，s，二甲基)，0.051和0.045 ppm(6H，2s，二甲基). I.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-羥基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰-CH3OH浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(230mg，0.36mmol)在THF(新蒸過的)(5ml)中的溶液先用乙酸(250μl，4.2mmol)處理，然后用氯化四丁銨在THF中的1M溶液(2.2ml，2.2mmol)滴加處理。將混合物在22℃下攪拌120小時(shí)，用EtOAc(20ml)稀釋，用冷的1M NaHCO3水溶液(15ml)、水(15ml)和鹽水(15ml)洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑后，殘留物在硅膠(10g)柱上純化(10%CH3CN/CH2Cl2，CH3CN，丙酮)，得到標(biāo)題化合物(60mg，41%)。
IR(CH2Cl)νmax3690，3610，3530(OH)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.5-8.47(1H，m，芳族 H)，7.75-7.66(1H，m，芳族 H)，7.42，7.38(1H，d，芳族 H)，7.23-7.19(1H，芳族 H)，6.05-5.86(1H，m，烯丙基 H)，5.48-5.21(2H，m，烯丙基 H)，4.87-4.60(2H，m，CH2)，4.343，4.273(1H 部分 ABq，J＝14.1Hz，CH2-吡啶基)，4.204(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.6Hz，H-5)，4.142，4.072(1H，部分 ABq，J＝14.1Hz，CH2-吡啶基)，4.27-4.14(1H，m，H-1′)，3.89-3.70(3H，m，CH2-O和H-4)，3.261(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.8Hz，H-6)，2.17-2.02(1H，m，HCH)，1.89-1.67(1H，m，HCH)，1.66(2H，bs，OH)和1.364 ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). J.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-羥基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
在冰浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-羥基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(60mg，0.15mmol)在新蒸過的THF(2ml)中的溶液用PPh3(5mg)、(PPh3)4Pd(5mg)和N-甲基苯胺(33μl，0.3mmol)處理。撤去冰浴，將混合物攪拌1小時(shí)，然后用EtOAc(8ml)稀釋，用0.1M pH7緩沖水溶液(4ml+2ml)提取兩次。合并水相，用EtOAc(5ml)洗滌，減壓抽吸并通過反相硅膠C18柱(10g，H2O→10%CH3CN/H2O)，冷凍干燥后，得到粉狀標(biāo)題化合物(25mg，43%)。
純度(HPLC)99.5%(10%CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4，C18μBondapak，保留時(shí)間4.49分鐘)。
IR(液體石蠟)νmax1750和1600cm-1(C＝O); UV(H2O)λmax266(5100)，306(6800); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.48-8.45(1H，m，芳族 H)，7.89-7.81(1H m，芳族 H)，7.53-7.49(1H，d，J＝7.9Hz，芳族 H)，7.39-7.33(1H，m，芳族 H)，4.25-4.186，4.103，4.033(2H，ABq，J＝13.8，CH2-吡啶基)，4.25-4.18(1H，m，H-1′)，4.0587，4.0457(部分 dd，J＝2.6，H-5)，3.74-3.61(1H，m，H-CH-O)，3.57-3.44(1H，m，HCH-O)，3.383(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝5.9Hz，H-6)，3.31-3.19(1H，m，H-4)，2.1-1.9(1H，m，HCH)，1.69-1.5(1H m，HCH)，和1.285 ppm(3H，d，J-6.4Hz，CH3). 實(shí)施例6 (4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-羥基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰浴冷卻下，將實(shí)施例5步驟H制得的(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(630mg，1.00mmol)在新蒸過的THF(10ml)中的溶液先用AcOH(0.35ml，6mmol)處理，然后用1M的氟化四丁銨THF溶液(3.0ml，3mmol)滴加處理。將混合物在5℃下攪拌20小時(shí)，用1M NaHCO3水溶液中和至pH7.0，用EtOAc(2×15ml)提取。有機(jī)液用1M NaHCO3水溶液(1×20ml)、水(3×20ml)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物(0.6g)通過閃式硅膠(20g)柱(11己烷EtOAc)，得到油狀標(biāo)題化合物(0.39g，75%)。
IR(CH2Cl2)νmax3680，3610(OH)，1770和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.479(1H，bd，J＝4.1Hz，芳族 H)，7.710(1H，dt，J＝7.7Hz，J＝1.78Hz，芳族 H)，7.40(1H，d，J＝8.8Hz，芳族 H)，7.26-7.19(1H，m，芳族 H)，6.04-5.85(1H，m，烯丙基-H)，5.48-5.20(2H，m，烯丙基 H)，4.83-4.61(2H，m，CH2)，4.387，4.317，4.178，4.109(2H，ABq，J＝14.0Hz，CH2-吡啶)，4.27-4.12(1H，m，H-1′)，4.122，4.075，4.063(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝9.4Hz，H-5)，3.93-3.82(2H，m，H-4和HCH-O)，3.65-3.55(2H，m，H-CH-O和OH)，3.130(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝7.0Hz，H-6)，2.2-2.0(1H，m，HCH)，1.9-1.6(1H，m，HCH)，1.279(3H，t，J＝7.1Hz，CH3)，0.889(9H，s，叔丁基)和0.076 ppm(6H，s，二甲基). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-羥基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.39g，0.75mmol)在THF(80ml)中的冷(-20℃)溶液用三苯膦(315mg，1.2mmol)、0.43M的疊氮酸在甲苯中的溶液(0.21ml，1.3mmol)和偶氮二羧酸二乙酯(0.21ml，1.3mmol)處理。將混合物在-20℃下攪拌30分鐘，用EtOAc(30ml)稀釋，用1M NaHCO3水溶液(1×20ml)、水(2×20ml)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物(大約1g)通過硅膠(50g)柱(1/3AcOEt/己烷)，得到標(biāo)題化合物(0.30g，74%)。
IR(CH2Cl2)νmax2105(N3)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.53-8.50(1H，m，芳族 H)，7.71-7.62(1H，m，芳族 H)，7.38，7.34(1H，d，芳族 H)，7.22-7.16(1H，m，al芳族 H)，6.03-5.84(1H，m，烯丙基 H)，5.46-5.20(2H，m，烯丙基 H)，4.83-4.59(2H，m，CH2)，4.306，4.237，4.096，4.628(2H，ABq，J＝13.7Hz，CH2吡啶基)，4.23-4.1(1H，m，H-1′)，4.076，4.063，4.016(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.4Hz，H-5)，3.75-3.6(1H，m，H-4)，3.6-3.45(1H，m，HCH-O)，3.45-3.25(1H，m，HCH-O)，3.071(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝7.8Hz，H-6)，2.13-1.95(1H，m，HCH)，1.8-1.5(1H，m，HCH)，1.302(3H，d，J＝6.0Hz，CH3)，0.892(9H，s，叔丁基)，0.086和0.081 ppm(6H，2s，二甲基). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.30g，0.55mmol)在新蒸過的THF(10ml)中的冷(-20℃)溶液用AcOH(0.2ml，3.3mmol)處理，然后用1M的氟化四丁銨THF溶液(1.7ml，1.7mmol)滴加處理。將混合物在5℃下攪拌90小時(shí)，用EtOAc(40ml)稀釋，用1M NaHCO3水溶液(1×30ml)、水(2×30ml)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物(0.3g)通過硅膠(10g)柱(11己烷EtOAc)，得到標(biāo)題化合物(0.21g，89%)。
IR(CH2Cl2)νmax3680-3600(OH)，2100(N3)1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.54-8.51(1H，m，芳族 H)，7.7-7.6(1H，m，芳族 H)，7.38，7.34(1H，m，芳族 H)，7.25-7.15(1H，m，a 芳族 H)，6.1-5.8(1H，m，烯丙基 H)，5.5(2H，m，烯丙基 H)，4.8-4.55(2H，m，CH2-烯丙基)，4.294，4.225，4.072，4.002(2H，ABq，J＝14.0Hz，CH2-吡啶基)，4.3-4.1(1H，m，H-1′)，4.166(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.8-3.65(1H，m，H-4)，3.6-3.3(2H，m，CH2-N3)，3.162(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.7Hz，H-6)，2.2-2(1H，m，HCH)，1.95(1H，bs，OH)，1.9-1.6(1H，m，HCH)1.382(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). D.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(74mg，0.17mmol)在CH2Cl2(3ml)中的冷(冰浴)溶液用Pd(PPh3)4(35mg)處理，接著加入N-甲基苯胺(0.5ml，0.45mmol)。將所得混合物在大約22℃下攪拌1小時(shí)，然后用0.1M pH7.1磷酸鹽緩沖水溶液(0.35mmol)和乙醚(10ml)稀釋。分相，水相用乙醚(2×10ml)洗滌，高真空下抽吸，通過C18μ-Bondapak反相柱(35g，4%-10%CH3CN/H2O)，冷凍干燥后，得到標(biāo)題化合物(55mg，41%)。
UV(H2O)λmax266(7800)，304(10500); 純度(HPLC)99.5%(304nm，10% CH3CN/KH2PO40.01M pH 7.4). IR(液體石蠟)νmax2100(N3)，1750和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.5-8.4(1H，m，芳族 H)，7.9-7.8(1H，m，芳族 H)，7.54，7.50(1H，dd，芳族 H)，7.4-7.3(1H，m，芳族 H)，4.27，4.20，4.11，4.04(2H，ABq，J＝14.2Hz，CH2-吡啶)，4.25-4.15(1H，m，H-1′)，4.067，4.054(部分 dd，J＝2.6Hz，部分 H-5)，3.52-3.17(4H，m，CH2N3，H-4和H-6)，3.389(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.3Hz，H-6)，2.1-1.9(1H，m，HCH)，1.75-1.5(1H，m，HCH)和1.297 ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例7 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.5-疊氮基-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-戊酸酯
在冰浴冷卻下，將2-吡啶甲基硫醇(20.2g，162mmol)在CH2Cl2(200ml)中的溶液用吡啶(16.3ml，203mmol)處理，接著滴加在CH2Cl2(50ml)中的5-疊氮基戊酰氯(27.0g，167mmol)。將混合物攪拌30分鐘，用乙醚(1l)稀釋，用冷水(500ml)、1M NaHSO4水溶液(2×500ml)、水(500ml)、1M NaHCO3水溶液(500ml)、水(500ml)和鹽水(500ml)洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到標(biāo)題化合物(40.8g，100%)。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.54，8.52(1H，bd，芳族 H)，7.6-7.5(1H，m，芳族 H)，7.35-7.31(1H，bd，芳族 H)，7.19-7.12(1H，m，芳族 H)，4.25(2H，s，CH2)，3.27(2H，t，J＝6.6Hz，CH2N3)，2.62(2H，t，J＝6.9Hz，CH2CO)，和1.8-1.5 ppm(4H，m，CH2CH2). B.5-疊氮基-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕戊酸酯的叔丁基二甲基硅基烯醇醚
在冰-MeOH浴冷卻下，將5-疊氮基-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕戊酸酯(44.0g，162mmol)在CH2Cl2(400ml)中的溶液先用三乙胺(50ml，356mmol)處理，然后用三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯(76.6ml，333mmol)滴加處理。撤去冷卻浴，將混合物攪拌2小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物用石油醚(1.5l)稀釋，用冷水(2×500ml)、1M NaHCO3水溶液(2×500ml)、水(2×500ml)和鹽水(500ml)洗滌，干燥(MgSO4)。然后將有機(jī)相用中性活性炭處理，過濾并蒸發(fā)溶劑后，得到標(biāo)題化合物(48.9g，83%)。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.56-8.53(1H，m，芳族 H)，7.67-7.57(1H，m，芳族 H)，7.28-7.23(1H，m，芳族 H)，7.18-7.11(1H，m，芳族 H)，4.96(0.5H，t，J＝7.6Hz，乙烯基 H)，4.80(0.5H，t，J＝7.3Hz，乙烯基 H)，4.030和3.955(2H，2s，CH2-吡啶基)，3.097和3.040(2H，2t，J＝7.0Hz，J＝7.3Hz，CH2)，2.06(2H，4線的中心，J＝7.1Hz，CH2乙烯基)，1.57-1.38(2H，m，CH2)，0.989，0.970(9H，2s，叔丁基)和0.243，0.205ppm(6H，2s，二甲基). C.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-4″-疊氮基丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在冰浴冷卻下，向新熔融過的ZnCl2(18.0g，133mmol)中先加入在CH2Cl2(200ml)中的(3S，4R)-4-乙酰氧基-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(19.0g，67.0mmol)，然后滴加步驟B制得的5-疊氮基-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-戊酸酯的叔丁基二甲基硅基烯醇醚(48.5g，133mmol)在CH2Cl2(100ml)中的溶液。將混合物在5℃(冷室)下攪拌1小時(shí)后放置過夜(18小時(shí))。將反應(yīng)混合物用石油醚(1.2l)和冰冷的水(500ml)稀釋。有機(jī)相用冷水(2×500ml)、1M NH4Cl水溶液(1×500ml)、水(500ml)、1M NaHCO3水溶液(2×500ml)、水(2×500ml)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物通過硅膠墊(400g，己烷，CH2Cl2，EtOAc)，得到油狀的標(biāo)題化合物(14.2g，44%)。
IR(CH2Cl2)νmax3400(NH)，2100(N3)，1770和1680cm-1(C＝O)， 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.55-8.51(1H，m，芳族 H)，7.68-7.59(1H，m，芳族 H)，7.35-7.30(1H，m，芳族 H)，7.21-7.14(1H，m，芳族 H)，5.89(1H，bs，NH)，4.27(2H，s，CH2-吡啶基)，4.20-4.10(1H，m，H-1′)，3.81(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝7.0Hz，H-4)，3.279(2H，bt，J＝6.3Hz，CH2N3)，3.048(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝3.2Hz，H-3)，2.9-1.7(1H，m，H-1″)，1.9-1.7(1H，m，HCH)，1.7-1.5(3H，m，HCH和CH2)，0.987(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.851(9H，s，叔丁基)和0.042ppm(6H，s，二甲基). D.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-4″-疊氮基丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在冰浴冷卻下，將(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-4″-疊氮基丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(14.0g，28.4mmol)在THF(140ml)中的溶液先用30%H2O2(9.8ml，714mmol)處理，接著滴加1M NaOH水溶液(85.2ml，85.2mmol)。撤去冰浴，將混合物攪拌0.5小時(shí)。然后用1N HCl水溶液(170ml，170mmol)酸化，用EtOAc(3×125ml)提取。合并乙酸乙酯提取液，用水(1×125ml)、1M NaHSO4水溶液(1×125ml)、水(2×125ml)和鹽水(1×125ml)洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，研制固體(己烷)，得到白色固狀的標(biāo)題化合物(8.3g，76%);m.p.＝147-148℃(乙醚)。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，2100(N3)，1765，1740和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.43(1H，bs，NH)，4.3-4.1(1H，m，H-1′)，3.89(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝6.1Hz，H-4)，3.337(2H，bt，J＝6.1Hz，CH2N3)，3.148(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝3.7Hz，H-3)，2.75-2.6(1H，m，H-1″)，1.9-1.5(4H，m，CH2CH2)，1.176(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.868(9H，s，叔丁基)，0.071和0.060ppm(6H，2s，二甲基). E.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-疊氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
將(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-4″-疊氮基丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(5.0g，13mmol)在CH3CN(50ml)中的懸浮液用羰基二咪唑(2.5g，15.6mmol)處理，然后攪拌30分鐘。向所得透明溶液(?；溥?中加入丙二酸單烯丙基酯鎂鹽(5.0g，16mmol)。將混合物在70℃(浴溫)下加熱18小時(shí)。補(bǔ)加丙二酸酯鹽(1.25g，4mmol)，再將混合物攪拌5小時(shí)。然后再補(bǔ)加丙二酸單烯丙基酯鎂鹽(1.25g，4mmol)，繼續(xù)加熱18小時(shí)。部分蒸發(fā)溶劑。殘留物溶于乙酸乙酯(100ml)中，用水(100ml)、1N HCl水溶液(100ml)、水(2×100ml)、10%K2CO3水溶液(100ml)、水(100ml)和鹽水(100ml)洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑后，殘留物溶于CH3CN(50ml)，在氮?dú)庀掠帽±鋮s至5℃，先用三乙胺(1.82ml，13.0mmol)處理，接著用在CH3CN(5ml)中的對甲苯磺?；B氮(2.56ml，13.0mmol)滴加處理，然后在室溫(22℃)下攪拌3小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，所得殘留物通過硅膠墊(100g，己烷→40%乙醚/己烷)，得到黃色油狀的標(biāo)題化合物(1.6g，25%)。
IR(CH2Cl2)νmax3400(NH)，2150(N2)，2100(N3)，1765，1715和1650cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.1-5.8(1H，m，乙烯基 H)，5.85(1H，bs，NH)，5.41-5.29(2H，m，乙烯基 H)，4.74-4.70(2H，m，烯丙基 CH2)，4.3-4.0(2H，m，H-1′和H-1″)，3.85(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝5.3Hz，H-4)，3.267(2H，m，CH2N3)，3.044(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝3.6Hz，H-3)，2.0-1.8(1H，m，HCH)，1.7-1.4(3H，m，CH2HCH)，1.172(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.863(9H，s，叔丁基)0.063和0.052(6H，2s，二甲基). F.(4R，5R，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(3″-疊氮基丙基)-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
將預(yù)先用氬氣清洗過(10分鐘)的(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-4-〔(1″R)-1″-(3-疊氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(1.45g，303mmol)在苯(50ml)中的溶液用Rh(OAc)2(40mg)作為催化劑加熱回流40分鐘。然后蒸發(fā)溶劑，得到油狀標(biāo)題化合物(1.45g，100%)。
IR(CH2Cl2)νmax2100(N3)，1770和1745cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.0-5.8(1H，m，乙烯基 H)，5.4-5.25(2H，m，乙烯基 H)，4.67(1H，s，H-2)，4.64(2H，m，CH2)，4.4-4.2(1H，m，H-1′)，4.255，1H，dd，J＝2.4Hz，J＝8.3Hz，H-5)，3.5-3.2(2H，m，CH2N3)，3.24(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝6.2Hz，H-6)，2.8-2.6(1H，m，H-4)，1.85-1.55(4H，m，CH2CH2CO)，1.304(3H，d，J＝6.2Hz，CH3)，0.886(9H，s，叔丁基)，0.102和0.090ppm(6H，2s，二甲基). G.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(1.45g，3.03mmol)在CH3CN(25ml)中的溶液先用氯磷酸二苯基酯(0.67ml，3.3mmol)處理，接著用N，N-二異丙基乙胺(0.55ml，3.3mmol)滴加處理，然后攪拌45分鐘。將所得的烯醇磷酸酯用2-吡啶甲基硫醇(2.90g，23.2mmol)處理后用N，N-二異丙基乙胺(3.86ml，23.2mmol)滴加處理。用冰浴代替冰-MeOH浴，將混合物攪拌2小時(shí)，然后用EtOAc(100ml)稀釋，用冷水(50ml)、冷的1M NaHSO3水溶液(3×50ml)、水(2×50ml)、冷的1M NaHCO3水溶液(2×50ml)、水(1×50ml)和鹽水(50ml)洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物通過硅膠柱(30g，己烷→40%EtOAc/己烷)，得到污染有起始硫醇的標(biāo)題產(chǎn)物。將該物質(zhì)用乙醚(50ml)稀釋，再用冷水(20ml)、1M NaHSO3水溶液(3×20ml)、H2O(2×20ml)、1M NaHCO3水溶液(2×20ml)、水(20ml)和鹽水(20ml)洗滌，干燥(MgSO4)，得到純的標(biāo)題化合物(1.45g，86%)。
IR(CH2Cl2)νmax2105(N3)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.5-8.4(1H，m，芳族 H)，7.8-7.6(1H，m，芳族 H)，7.4-7.39(1H，bd，芳族 H)，7.3-7.18(1H，m，芳族 H)，6.05-5.80(1H，m，乙烯基 H)，H-1′)，4.01(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.6-3.4(1H，m，5.5-5.2(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.6(2H，m，CH2)，4.287，4.217，4.083，4.013(2H，ABq，J＝14.0Hz，CH2-吡啶基)，4.21-4.08(1H，m，H-4)，3.4-3.2(2H，m，CH2N3)，3.145(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝7.5Hz，H-6)，2.0-1.4(4H，m，CH2CH2)，1.288(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.874(9H，s，叔丁基)，0.073和0.059(6H，2s，二甲基). H.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.5g，2.6mmol)和THF(30ml)溶液用CH3CO2H(0.9ml，15.6mmol)滴加處理后，用1M的氟化四丁銨的THF溶液(7.8ml，7.8mmol)處理。將混合物在所述溫度下攪拌1小時(shí)，接著在5℃下放置56小時(shí)，然后在室溫下攪拌24小時(shí)。將混合物冷卻至0℃，用1M NaHCO3水溶液(16ml)中和，水相用EtOAc/乙醚(1∶1)(2×100ml)提取。合并有機(jī)提取液，用冷的1M NaHCO3水溶液(50ml)、水(2×50ml)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物通過硅膠柱(30g，己烷/CH2Cl2→CH2Cl2/EtOAc→EtOAc)，得到標(biāo)題化合物(679mg，64%)和起始原料(160mg，11%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600，3500(OH)，2100(N3)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.51-8.49(1H，m，芳族 H)，7.7-7.6(1H，m，芳族 H)，7.41，7.37(1H，bd，芳族 H)，7.23-7.16(1H，m，芳族 H)，6.05-5.8(1H，m，乙烯基 H)，5.5-5.2(2H，m，乙烯基 H)，4.86-4.6(2H，m，乙烯基 CH2)，4.256，4.185，4.056，3.985(2H，ABq，J＝14.2Hz，CH2-吡啶基)，4.25-4.15(1H，m，H-1′)，1.121(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.6-3.45(1H，隱藏，H-4)，3.45-3.24(2H，m，CH2N3)，3.214(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.5Hz，H-6)，1.87(1H，bd，J＝6.5，OH)，2.0-1.5(4H，m，CH2CH2)，和1.37ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). I.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(133mg，0.3mmol)在CH2Cl2(10ml)中的溶液用(Ph3P)4Pd(63mg)和N-甲基苯胺(0.1ml，0.6mmol)處理。撤去冰浴，將混合物攪拌1小時(shí)，然后再用冰浴冷卻。將反應(yīng)混合物用乙醚(40ml)稀釋，用0.05M pH7.0磷酸鹽緩沖液(2×6ml)提取。合并水提取液，用乙醚(2×20ml)洗滌，用0.05M pH4.2磷酸鹽緩沖液酸化至pH5.8-5.9。水層用10%Pd/C(225mg)為催化劑在50 psi和5℃-15℃條件下氫化1小時(shí)。氫化結(jié)束時(shí)，除去催化劑，通過C18μBondapak柱(35g，H2O→4%CH3CN/H2O)，冷凍干燥，得到標(biāo)題化合物，將該化合物在C18μBondapak柱(15g)上再次純化，冷凍干燥(17mg，11%)。
純度(HPLC)97.5%(10%CH3CN/KH2PO40.01M pH 7.4，保留時(shí)間5.66分鐘，μBondapak C1810μ); UV(H2O)λmax304(9383)，266(6895); IR(液體石蠟)λmax1755和1590cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.48-8.45(1H，bd，芳族 H)，7.9-7.8(1H，m，芳族 H)，7.54，7.49(1H，bd，芳族 H)，7.4-7.3(1H，m，芳族 H)，4.3-4.1(1H，m，H-1′)，4.225，4.157，4.106，4.043(2H，ABq，J＝13.2Hz，CH2-吡啶)，4.056，4.043(部分 dd，J＝2.6Hz，H-5)，3.31(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝6.5Hz，H-6)，3.197(1H，bt，J＝9.4Hz，H-4)，3.0-2.85(2H，m，CH2N3)，1.9-1.55(3H，m，HCH和CH2)，1.55-1.2(1H，m，HCH)和1.295ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例8 (4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-亞胺甲基)氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在5℃(冰浴)下，用1M NaOH水溶液將如實(shí)施例7步驟Ⅰ所述的那樣由(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(150mg，0.338mmol)脫保護(hù)得到的氫解產(chǎn)物(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸粗品的pH值調(diào)至8.5。向該含水混合物中分批加入甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(583mg，3.41mmol)，同時(shí)用1M NaOH水溶液將pH值保持在8.3-8.4。加完時(shí)，將反應(yīng)混合物攪拌6分鐘，然后加到μBondapak C18反相柱上(40g，H2O→1，2，3，4和6%CH3CN/H2O)，得到標(biāo)題產(chǎn)物，再次在μBondapak C18反相柱上純化(H2O→2，3，4和6%CH3CN/H2O)。得到了白色蓬松的固狀標(biāo)題化合物純品(19mg，11%)。
純度98.9%(HPLC測得，10%CH3CN/K2PO40.01M，pH7.4，保留時(shí)間6.77分鐘，μBondapak C1810μ); UV(H2O)λmax304(7791)，266(5941); IR(液體石蠟)νmax1755，1690(C＝O)，和1715cm-1(C＝NH); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.45-8.42(1H，bd，芳族 H)，7.87-7.75(1H，m，芳族 H)，7.77(1H，bs，C＝NH)，7.51，7.47(1H，bd，芳族 H)，7.37，7.3(1H，m，芳族 H)，4.3-4.1(1H，m，H-1′)，4.198，4.134，4.072，4.001(2H，ABq，J＝13.5Hz，CH2吡啶)，4.045-4.07(1H，隱藏 H-5)，3.4-3.05(4H，m，CH2N，H-4，H-6)，1.8-1.4(3H，m，HCH和CH2)，1.4-1.15(1H，m，HCH)和1.259ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 實(shí)施例9 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(3″-羥基丙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
A.5-羥基戊酸鈉
在冰浴冷卻下，將戊內(nèi)酯(20g，0.20mol)在水(100ml)中的懸浮液用NaOH(8.0g，0.20mol)在水(100ml)中的溶液滴加處理。將混合物攪拌15分鐘，然后，撤去冷卻浴，繼續(xù)攪拌15分鐘。過濾混合物以除去固體物，將濾液冷凍干燥，得到白色固狀的標(biāo)題化合物(26.2g，94%)。
IR(液體石蠟)νmax3600-3100(OH)，和1560cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ3.61(2H，t，J＝6.1Hz，CH2OH)，2.20(2H，t，J＝7.0Hz，CH2CO2)和1.58，1.57，1.55ppm(4H，m，CH2CH2). B.5-(叔丁基二甲基硅氧基)戊酸叔丁基二甲基硅基酯
在冰浴冷卻下，向5-羥基戊酸鈉(25.0g，179mmol)在DMF(250ml)中的懸浮液中分批加入叔丁基二甲基硅基氯(80.8g，536mmol)，然后滴加三乙胺(32ml，232mmol)。撤去冰浴，將混合物在大約22℃攪拌2.5天。將反應(yīng)混合物用冰冷卻的水(700ml)稀釋，用乙醚(2×800ml)提取。合并有機(jī)提取液，用冷水(5×500ml)和鹽水(500ml)洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到油狀標(biāo)題化合物(70g，＞100%)。
IR(凈態(tài))νmax1720cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ3.61(2H，t，J＝6.0Hz，CH2O)，2.33(2H，t，J＝7.0Hz，CH2CO2)，2.8-2.5(4H，m，(CH2)2)，0.92，0.88(18H，2s，叔丁基)，0.25，0.09，和0.04ppm(12H，3s，CH3). C.5-(叔丁基二甲基硅氧基)戊酸
將5-(叔丁基二甲基硅氧基)戊酸叔丁基二甲基硅基酯(70g，得自178.6mmol羥基戊酸鈉)在MeOH(550ml)中的溶液用5N乙酸水溶液(50ml，250mmol)處理，然后攪拌1.5-2.0小時(shí)。除去溶劑，殘留物溶于CH2Cl2(1l)中，用冰冷的水(4×500ml)和鹽水(500ml)洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑后，殘留物(58g)溶于乙醚(600ml)中，用1M NaHCO3水溶液(3×200ml)提取。合并水提取液，用乙醚(3×200ml)洗滌，用5M乙酸水溶液酸化至pH5.0，然后用乙醚(4×200ml)提取。合并有機(jī)提取液，用冷水(4×200ml)和鹽水(200ml)洗滌，干燥(MgSO4)，得到油狀標(biāo)題化合物(25g，60%)。
IR(CH2Cl2)νmax3660-2500(OH)，1750-1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ3.63(2H，t，J＝6.0Hz，CH2O)，2.39(2H，t，J＝7.2Hz，CH2CO2)，1.78-1.49(4H，m，(CH2)2)，0.89(9H，s，叔丁基)和0847ppm(6H，s，CH3). D.5-(叔丁基二甲基硅氧基)-1-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕戊酸酯
在冰浴冷卻下，向5-(叔丁基二甲基硅氧基)戊酸(25.0g，108mmol)在CH2Cl2(350ml)中的溶液中加入2-吡啶甲基硫醇(13.5g，108mmol)、1，3-二環(huán)己基碳化二亞胺(22.2g，108mmol)和1-羥基苯并三唑水合物(14.6g，108mmol)。撤去冰浴，將混合物攪拌20小時(shí)，然后用乙酸乙酯(1l)稀釋，用冰冷的水(1l)、冰冷的1M NaHSO3水溶液(1l)、冰冷的水(1l)、1M NaHCO3水溶液(1l)、冰冷的水(2×1l)和鹽水(1l)洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑后，殘留物在硅膠閃式柱上純化(250g，己烷，5%，10%，15%EtOAc/己烷)，得到油狀標(biāo)題化合物(30.2g，83%)。
IR(CH2Cl2)νmax1690cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，

OO MHz)δ8.55-8.52(1H，m，吡啶 -H)，7.68-7.59(1H，m，吡啶 -H)，7.37-7.33(1H，bd，J＝7.7Hz，吡啶 -H)，7.20-7.14(1H，m，吡啶 -H)，4.26(2H，s，CH2S)，3.60(2H，t，J＝6.1Hz，CH2O)，2.61(2H，t，J＝7.1Hz，CH2CO2)，1.85-1.6(2H，m，CH2)，1.6-1.4(2H，m，CH2)，0.88(9H，s，叔丁基)和0.03(6H，s，CH3). E.5-(叔丁基二甲基硅氧基)-1-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕戊酸酯的叔丁基二甲基硅基烯醇醚
在冰-MeOH浴冷卻下，向5-(叔丁基二甲基硅氧基)-1-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕戊酸酯(30.2g，89.0mmol)在CH2Cl2(300ml)中的溶液中加入三乙胺(27ml，196mmol)，然后滴加三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯(41ml，178mmol)。撤去冷浴，將混合物攪拌2小時(shí)?；旌衔镉美涞氖兔?2.7l)稀釋，用冰冷的水(2×500ml)、冰冷的1M NaHCO3水溶液(1×500ml)、冰冷的水(2×500ml)和鹽水(500ml)洗滌，干燥。用中性活性炭處理有機(jī)溶液，過濾，得到紅色油狀的標(biāo)題化合物(33g，83%)，為45∶55比率的幾何異構(gòu)體。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.54-8.51(1H，m，吡啶 -H)，7.65-7.56(1H，m，吡啶 -H)，7.31-7.23(1H，m，吡啶 -H)，7.16-7.09(1H，m，吡啶 H)，5.02(0.55H，t，J＝7.6Hz，乙烯基 H)，4.87(0.45H，t，J＝7.2Hz，乙烯基 H)，4.03(1.1H，s，CH2S)，3.96(0.9H，s，CH2S)，3.55，3.52，3.49，3.46(2H，4 線，J＝6.4Hz，CH2O)，2.1-1.96(2H，m，CH2-乙烯)，1.52-1.29(2H，m，CH2)，0.985，0.977(9H，2s，叔丁基)，0.879，0.873(9H，2s，叔丁基)，0.236g，0.194g，0.02g和0.013ppm(12H，4s，CH3). F.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在氮?dú)夥蘸捅±鋮s下，向新熔融過的ZnCl2(10.0g，73.5mmol)中加入在CH2Cl2(100ml)中的(3S，4R)-4-乙酰氧基-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(10.5g，36.7mmol)，然后緩慢加入在CH2Cl2(50ml)中的步驟E制得的烯醇甲硅烷基醚(33.2g，73.3mmol)。將混合物在5℃下攪拌18.5小時(shí)，然后，用石油醚(1l)稀釋，倒到冰水(500ml)上。有機(jī)相用冷水(2×500ml)、1M NH4Cl水溶液(500ml)、水(500ml)、1M NaHCO3水溶液(500ml)、水(2×500ml)和鹽水(500ml)洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物通過硅膠墊(100g，CH2Cl2，3%，5%，8%，10%，20%EtOAc/CH2Cl2)，得到固狀標(biāo)題化合物(9.2g，44%);m.p.＝110-111℃(乙醚-石油醚1/4)。
IR(CH2Cl2)νmax3400(NH)，1770和1680cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.54-8.50(1H，m，吡啶 -H)，7.66-7.58(1H，m，吡啶 -H)，7.34，7.30(1H，bd，J＝7.5Hz，吡啶 -H)，7.2-7.13(1H，m，吡啶 -H)，5.85(1H，bs，NH)，4.25(2H，s，CH2S)，4.20-4.09(1H，m，H-1′)，3.82(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝7.1Hz，H-4)，3.61-3.55(2H，m，CH2O)，3.05-3.02(1H，m，H-3)，2.84-2.75(1H，m，H-1″)，1.9-1.4(4H，m，(CH2)2)，0.98(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.87，0.85(18H，2s，叔丁基)，0.04和0.023ppm(12H，2s，CH3). 分析計(jì)算值 C28H50N2O4SSi C，59.32;H，8.89;N，4.94. 實(shí)測值 C，59.35;H，9.03;N，4.95. G.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在冰浴冷卻下，將(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(7.30g，12.9mmol)在THF(70ml)中的溶液用30%(V/V)H2O2(4.45ml，51.0mmol)處理，接著滴加1M NaOH水溶液(38.7ml，38.7mmol)。撤去冰浴，將混合物攪拌30分鐘，然后再次用冰浴冷卻。加入1N HCl水溶液(77ml)，將混合物用EtOAc(3×50ml)提取。有機(jī)提取液用冰冷的水(2×50ml)、1M NaHSO3水溶液(2×50ml)、冰冷的水(3×50ml)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，得到白色固狀的標(biāo)題化合物(5.5g，92%);m.p.＝127-128℃(石油醚/乙醚1/2)。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，1755，1740和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.28(1H，bs，NH)，4.23-4.18(1H，m，H-1′)，3.89(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝6.3Hz，H-4)，3.7-3.55(2H，m，CH2O)，3.15-3.05(1H，m，H-3)，2.8-2.6(1H，m，H-1″)，1.8-1.5(4H，m，(CH2)2)，1.17(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.89，0.86(18H，2s，叔丁基)，0.064，0.057和0.051(12H，3s，CH3). 分析計(jì)算值 C28H45NO5Si2 C，57.47，H，9.86，N，3.05. 實(shí)測值 C，57.41，H，10.04，N，3.07. H.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3″-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
用迪安-斯達(dá)克冷凝器將丙二酸二烯丙酯鎂鹽(5.7g，18.1mmol)在苯(80ml)中的溶液加熱回流。除去頭20ml苯，并用裝有3

分子篩的滴液漏斗代替迪安-斯達(dá)克。繼續(xù)回流3小時(shí)，然后使該溶液冷卻。
在另一燒瓶中，將(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(5.50g，12.1mmol)在甲苯(100ml)中的溶液用羰基二咪唑(2.15g，13.3mmol)處理。將混合物攪拌2小時(shí)，蒸發(fā)溶劑，得到油狀物，在高真空下抽吸2小時(shí)。然后將該?；溥蛴帽?20ml)稀釋，加到丙二酸二烯丙酯鎂鹽的苯溶液。將混合物在67-70℃下加熱18小時(shí)，冷卻，用冷EtOAc稀釋，用冰冷的水(2×100ml)、HCl(100ml)、冰冷的水(2×100ml)、10%Na2CO3水溶液(1×100ml)、冰冷的水(1×100ml)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，用活性炭處理。蒸發(fā)溶劑，得到油狀標(biāo)題化合物(6.2g，95%)。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，1765和1715cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ12.03，12.02(0.5H，2s，烯醇 -H)，6.0-5.8(1H，m，乙烯基 -H)，5.87(1H，bs，NH)，5.38-5.24(2H，m，乙烯基 -H)，5.07(0.52H，s，烯醇形式的烯H)，4.65-4.61(2H，m，CH2-乙烯)，4.19-4.1(1H，m，H-1′)，3.89(0.5H，dd，J＝2.0Hz，J＝6.2Hz，H-4)，3.82(0.5H，dd，J＝2.0Hz，J＝7.4Hz，H-4)，3.64-3.4(2.5H，m，CH2O和H-1″)，2.97-2.91(1H，m，H-3)，2.3-2.1(0.5H，m，H-1″)，1.8-1.4(4H，m，(CH2)2)，1.17(1.5H，d，J＝6.2Hz，CH3)，1.11(1.5H，d，J＝6.4Hz，CH3)，0.88，0.86(18H，2s，叔丁基)，0.06和0.054ppm(12H，2s，CH3). I.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在冰浴冷卻下，將(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(6.20g，11.5mmol)在無水CH3CN(50ml)中的溶液用三乙胺(1.16ml，11.5mmol)處理，然后滴加在CH3CN(10ml)中的對甲苯磺?；B氮(2.27g，11.5mmol)。將混合物在大約22℃下攪拌3小時(shí)，減壓下除去溶劑。油狀殘留物用己烷研制，濾除固體。蒸發(fā)己烷后，殘留物通過硅膠墊(100g，己烷，20%，30%，40%乙醚/己烷)，得到黃色油狀的標(biāo)題化合物(4.88g，75.0%)。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，2150(N2)，1765，1715和1650cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-5.80(1H，m，乙烯基 -H)，5.84(1H，bs，NH)，5.4-5.28(2H，m，乙烯基 -H)，4.73-4.68(2H，m，乙烯基 -CH2)，4.23-4.12(1H，m，H-1′)，4.07-4.0(1H，m，H-1″)，3.88(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝5.5Hz，H-4)，3.59，3.56，3.54(2H，3 線，CH2O)，3.04(1H，t，J＝2.5Hz，H-3)，1.9-1.7(1H，m，H-C-H)，1.6-1.4(3H，m，HCH和CH2)，1.16(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.87，0.86(18H，2s，叔丁基)，0.056，0.050和0.027ppm(12H，3s，CH3). J.(2R，4R，5R，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(3″-叔丁基二甲基硅氧基丙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
將(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(3.8g，6.7mmol)在苯(300ml)中的溶液用氬氣清洗10分鐘。然后加入Rh(OAc)2(100mg)，將混合物加熱回流70分鐘。減壓下除去溶劑，得到油狀標(biāo)題化合物(3.9g，＞100%)。
IR(CH2Cl2)νmax1765和1745cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ5.99-5.79(1H，m，乙烯基 H)，5.39-5.20(2H，m，乙烯基 H)，4.66-4.60(2H，m，CH2-乙烯)，4.63(1H，s，H-2)，4.36，4.33，4.30，4.27(1H，5線外的4線，H-1′)，4.24(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝8.1Hz，H-5)，2.7-2.5(2H，m，CH2O)，3.31(1H，dd，J＝2.3Hz，J＝5.8Hz，H-6)，2.8-2.6(1H，m，H-4)，1.8-1.5(4H，m，(CH2)2)，1.29(3H，d，J＝6.2Hz，CH3)，0.881，0.878(18H，2s，叔丁基)，0.093，0.085和0.033ppm(12H，3s，CH3). K.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(3″-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷卻下，將(2R，4R，5R，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(3″-叔丁基二甲基硅氧基丙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(得自3.8g，6.7mmol相應(yīng)的重氮基化合物)在CH3CN(40ml)中的溶液用氯磷酸二苯基酯(1.52ml，7.37mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.03ml，7.37mmol)滴加處理。將混合物在-15℃～-10℃下攪拌1小時(shí)。將所得的烯醇磷酸酯在冷卻(-15℃)狀態(tài)下先用在CH3CN(10ml)中的2-吡啶甲基硫醇(1.68g，13.4mmol)處理，然后用N，N-二異丙基乙胺(2.36ml，13.4mmol)滴加處理。將混合物在-10℃～0℃下攪拌1小時(shí)，然后在5℃(冰浴)下攪拌1.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物用冷EtOAc(300ml)稀釋，用冷水(2×100ml)、冰冷的1M NaHSO3水溶液(3×100ml)、冰冷的水(2×100ml)、1M NaHCO3水溶液(2×100ml)、冰冷的水(2×100ml)和鹽水(100ml)洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物通過閃式硅膠柱(60g，己烷，5%，10%，15%，20%EtOAc/己烷)，得到油狀標(biāo)題化合物(3.2g，74%)。
IR(CH2Cl2)νmax1770和1715cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.50-8.48(1H，m，吡啶 -H)，7.7-7.6(1H，吡啶 -H)，7.41-7.36(1H，bd，J＝7.9，吡啶 -H)，7.21-7.15(1H，m，吡啶 -H，6.05-5.8(1H，m，乙烯基 H)，5.47-5.19(2H，m，乙烯基 -H)，4.9-4.6(2H，m，CH2-乙烯)，4.28，4.21，4.09，4.02(2H，ABq，J＝13.8Hz，CH2-吡啶甲基)，4.21-4.08(1H，m，H-1′)，4.01(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝9.3Hz，H-5)，3.7-3.5(2H，m，CH2-O)，3.5-3.4(1H，m，H-4)，3.27(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝7.3Hz，H-6)，1.9-1.4[4H，m，(CH2)2]，1.28(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.877，0.871(18H，2s，叔丁基)，0.066，0.057，0.036和0.029ppm(12H，4s，CH3). L.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(3″-羥基丙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(3″-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(3.20g，4.95mmol)在無水THF(60ml)中的溶液用CH3CO2H(1.72ml，30mmol)處理，然后滴加1M氟化四丁銨的THF溶液(15ml，15mmol)。將混合物在冷室(5℃)中保持30小時(shí)，然后在冰浴冷卻下用1M NaHCO3(30ml，30mmol)中和。將混合物用EtOAc(200ml)稀釋，水相用EtOAc(2×200ml)提取2次。將有機(jī)提取液用冰的1M NaHCO3水溶液(4×100ml)、冰冷的水(2×100ml)和鹽水(100ml)洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物通過閃式硅膠柱(75g，CH2Cl2，5%，10%，20%，30%，40%，60%EtOAc/CH2Cl2)，得到白色固狀的(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(3″-羥基丙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.5g，57%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600-3300(OH)，1770和1720cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.48-8.45(1H，m，吡啶 -H)，7.77-7.67(1H，m，吡啶 -H)，7.50-7.46(1H，d，J＝7.9Hz，吡啶 -H)，7.26-7.19(1H，m，吡啶 -H)，6.05-5.85(1H，m，乙烯基 -H)，5.47-5.20(2H，m，乙烯基-H)，4.84-4.61(2H，m，乙烯基 -CH2)，4.46，4.39，4.05，3.98(2H，ABq，J＝14.4Hz，CH2- 吡啶)，4.20，4.16，4.13(1H，35線外的3線，H-1′)，3.96(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.8-3.6(2H，m，CH2O)，3.5-3.3(1H，m，H-4)，3.22(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝7.3Hz，H-6)，1.9-1.6(4H，m，(CH2)2)，1.64(1H，bs，OH)，1.27(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.857(9H，s，叔丁基)，0.059和0.039(6H，2s，CH3). 用丙酮洗脫上述柱，得到了標(biāo)題化合物(411mg，20%)。
IR(CH2Cl2)νmax3700-3200(OH)，1770和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.49-8.46(1H，m，吡啶 -H)，7.75-7.66(1H，m，吡啶 -H)，7.48-7.45(1H，bd，J＝8.9Hz，吡啶 -H)，7.23-7.19(1H，m，吡啶 -H)，6.06-5.86(1H，m，乙烯基 -H)，5.48-5.21(1H，m 乙烯基-H)，4.88-4.60(2H，m，CH2- 乙烯基)，4.41，4.33，4.06，3.98(2H，ABq，J＝14.5Hz，CH2- 吡啶)，4.22-4.13(1H，m，H-1′)，4.11，4.09(部分 dd，J＝2.6Hz，部分 H-5)，3.8-3.6(2H，m，CH2O)，3.6-3.45(1H，m，H-4)，3.30(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝7.6Hz，H-6)，1.9-1.5(5H，m，(CH2)2和OH)，和1.35ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). M.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(3″-羥基丙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
在冰浴冷卻下，向(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(3″-羥基丙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(166mg，0.400mmol)在CH2Cl2(10ml)中的溶液中加入Pd(PPh3)4，然后滴加2-乙基己酸鉀(0.5M乙酸乙酯溶液1ml，0.5mmol)。將混合物攪拌15分鐘，用乙醚(25ml)稀釋，用冰冷的0.04M pH7.0緩沖水溶液(3×5ml)提取。水提取物用乙醚(2×25ml)洗滌后，通過C18μBondapak反相柱(40g，H2O，1%，2%，3%，5%CH3CN/H2O)，得到標(biāo)題化合物(120mg，75%)，為冷凍干燥粉末。
HPLC測得的純度為99.6%; UV(H2O)λmax306(11900)，266(8000); IR(液體石蠟)νmax1745和1590cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.47，8.45(1H，bd，J＝4.8Hz，吡啶 -H)，7.85(1H，bt，J＝7.8Hz，吡啶 -H)，7.52(1H，bd，J＝7.8Hz，吡啶 -H)，7.39-7.33(1H，m，吡啶 -H)，4.22，4.17，4.11，4.06(2H，ABq，J＝10.5Hz，CH2-吡啶)，4.3-4.0(2H，m，隱藏 H-1′和H-5)，3.57，3.54，3.51(2H，m，隱藏 H-1′和H-5)，3.57，3.54，3.51(2H，m，CH2O)，3.35(1H，dd，J＝2.3Hz，J＝6.0Hz，H-6)，3.21，3.17，3.12(1H，m，H-4)，2.8-2.2(4H，m，(CH2)2)和1.28ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 實(shí)施例10 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-甲基吡啶鎓-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸磷酸二氫鹽
將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鉀(如實(shí)施例6所制備)(0.300g，0.70mmol)在無水乙腈(3ml)中的懸浮液冷卻至-20℃，用98%甲酸(0.030ml，0.79mmol)處理。15分鐘后，用三氟甲磺酸甲酯(0.12ml，1.06mmol)處理該透明溶液，攪拌1.5小時(shí)。然后加入20ml 0.1M pH7.4磷酸鹽緩沖液使反應(yīng)混合物驟冷，減壓下蒸發(fā)乙腈。水相用40ml 0.1M pH6.0磷酸鹽緩沖液稀釋，在0℃和45psi氫壓下用30%Pd/硅藻土(0.40g)氫化1.5小時(shí)。通過硅藻土墊過濾催化劑，濾液在反相硅膠(μBondapak C18，3×15cm)上層析。用0-5%乙腈水溶液梯度洗脫，冷凍干燥后，得到白色非晶形固狀的標(biāo)題化合物(0.062g，19%)。1H-NMR測得，產(chǎn)物純度為80%。
HPLC純度97%(μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm)，洗脫劑10%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液，流速1.5ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間10.0分鐘。
UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax270nm(6，630)和300nm(sh，3480); IR(KBr)νmax1765β-內(nèi)酰胺的C＝O1635，1610和1585cm-1; 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.39Hz，CH3CHO)，1.7-2.3(m，2H，CH2-4)，3.1-3.3(m，2H，CH2NH2)，3.37(dτ，JH4，CH2＝10.1Hz，JH4，H5＝3.86Hz，1H，H-4)，3.53(dd，JH6，H5＝3.20Hz，JH6，H1′＝6.42Hz，1H，H-6)，4.2-4.4(m，H-5和H-1′重疊)，4.40(s，3H，吡啶鎓的CH3)，7.79(～d，J＝7.8Hz，1H，吡啶鎓的H-3)，7.92(m，1H，H-5)，8.44(m，1H，吡啶鎓的H-4)和8.78ppm(d，J＝5.5Hz，1H，吡啶鎓的H-6). 實(shí)施例11 (4R，5S，6S)-4-(2″-二甲氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(實(shí)施例2)(0.187g，0.51mmol)在冷水(3ml)中的溶液用CH3CN(2ml)稀釋，然后在0-5℃下用37%甲醛水溶液(0.21ml)處理。溶液的pH值(pH計(jì))為7.2。然后同時(shí)一次加入氰基硼氫化鈉(0.058g，0.93mmol)(pH8.5-9.0)，接著在2分鐘后加入冰乙酸(3滴，pH5.2-5.5)。將所得的均相混合物在0-5℃下攪拌30分鐘。然后加入20ml 0.1M pH6.0磷酸鹽緩沖液，減壓下(＜15℃)除去乙腈。殘留的水相在反相硅膠(μ-Bondapak C18，2.5×10cm)上用0-10%乙腈水溶液為洗脫劑進(jìn)行梯度層析。收集UV活性級分，冷凍干燥，用同樣的體系再次層析。得到了白色非晶形固狀標(biāo)題化合物0.117g(5.8%);〔α〕22D-4.0°(c1.0，H2O)。
HPLC純度88%(μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，流速2ml/分鐘，5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液，UV檢測器300nm，保留時(shí)間9.02分鐘。
UV(H2O，pH7.4 磷酸鹽 緩沖液)λmax266(7，039)和302nm(7，707); IR(KBr)νmax1762(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1595cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.30(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.2(m，2H，CH2-4)，2.86(s，6H，N(CH3)2)，3.15(m，3H，H-4和CH2N)，3.32(dd，JH6，H5＝2.91Hz，JH6，H1′＝6.75Hz，1H，H-6)，4.10(ABq，JAB＝14.06Hz，△ν＝25.4Hz，SCH2)，4.1-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO重疊)，7.38(m，1H，吡啶的H-3)，7.47(d，J＝7.87Hz，1H，吡啶的H-5)，7.86(m，1H，吡啶的H-4)和8.47ppm(d，J＝5.0Hz，1H，吡啶的H-2). 實(shí)施例12 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.6-(叔丁基二甲基硅氧基)己酸叔丁基二甲基硅基酯
如P.A.Aristoff等人在J.Org.Chem.，48，5341(1983)中所述的那樣，對ε-己內(nèi)酯(20.6g，0.18mol)進(jìn)行皂化，得到30.0g白色固狀的鈉鹽1H-NMR(200MHz，D2O)δ1.2-1.7(m，6H)，2.19(t，J＝7.32Hz，2H，CH2CO2Na和3.61ppm(t，J＝6.51Hz，2H，CH2OH)。
將所得鹽粗品懸于N，N-二甲基甲酰胺(250ml)中，冷卻至0-5℃，用叔丁基二甲基硅基氯(81.6g，0.54mol)處理，然后滴加三乙胺(32.6ml，0.23mol)。在22℃6小時(shí)后，濾出形成的固體，用石油醚(bp20-60℃)洗滌。用另外的石油醚(500ml)稀釋后，將濾液用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑后，減壓下蒸餾殘留物，得到60.8g(93%)透明油狀的標(biāo)題酯bp＝106-107℃/0.015托。
IR(NaCl，壓片)νmax1722cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.04和0.26(2s，2 x 6H，SiCH3)，0.88和0.92(2s，2 x 9H，叔丁基)，1.2-1.7ppm(m，6H，CH2-3，4和5). B.6-(叔丁基二甲基硅氧基)己酸
將步驟A制得的甲硅烷基酯(82.0g，0.227mol)在四氫呋喃(800ml)和水(800ml)的混合物中的溶液在22℃下用草酸(8.2g，0.09mol)處理，攪拌2小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物用EtOAc(1l)稀釋，用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到72g油狀物，為標(biāo)題酸與二硅氧烷的混合物。無需純化將該產(chǎn)物用于下一步反應(yīng)中。
IR(NaCl，壓片)νmax1715cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.41(s，SiCH3)，0.88(s，Si-叔丁基)，1.3-1.8(m，CH2-3，4和5)，2.3-2.4(m，CH2CO2H)和3.6-3.7ppm(m，CH2OSi). C.6-(叔丁基二甲基硅氧基)-(吡啶-2-基)甲硫基-己酸酯
在0-5℃下，將步驟B的6-(叔丁基二甲基硅氧基)己酸粗品(～0.227mol)在無水CH2Cl2(500ml)中的溶液用2-吡啶甲基硫醇(28.4g，0.227mol)、1-羥基苯并三唑水合物(34.8g，0.227mol)和1，3-二環(huán)己基碳化二亞胺(46.9g，0.227mol)處理。在22℃16小時(shí)后，濾出形成的固體，用EtOAc洗滌。濾液用水和鹽水洗滌，然后干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到油狀物，將之在硅膠(9×10cm)上層析，用甲苯和EtOAc的95∶5混合物洗脫，得到40.0g(50%)透明油狀的標(biāo)題硫酯。
IR(NaCl，壓片)νmax1695cm-1(硫酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.28(s，6H，SiCH3)，0.88(s，9H，t-Bu)，1.3-1.8(m，6H，CH2-3，4和5)，2.58(t，J＝7.5Hz，2H，CH2-2)，3.57(t，J＝6.2Hz，2H，CH2-6)，4.24(s，2H，吡啶甲基的CH2)，7.15(m，1H，吡啶的H-5)，7.33(d，J＝7.8Hz，1H，吡啶的H-3)，7.62(m，1H，吡啶的H-4)和8.52ppm(d，J＝8.5Hz，1H，吡啶的H-6) D.6-(叔丁基二甲基硅氧基)-1-(吡啶-2-基)甲硫基己酸酯的O-叔丁基二甲基硅基烯醇醚
在0-5℃下，將6-(叔丁基二甲基硅氧基)-1-(吡啶-2-基)甲硫基己酸酯(40.0g，0.113mol)在無水CH2Cl2(400ml)中的溶液用三乙胺(32ml，0.23mol)處理，接著滴加三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯(40ml，0.174mol)。然后將反應(yīng)混合物在22℃攪拌3小時(shí)。用石油醚(bp30-60℃，1l)稀釋后，有機(jī)相用水洗滌，干燥(MgSO4)，減壓蒸發(fā)。殘留的硬油狀物(53.0g)立即直接用于下一步的偶聯(lián)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)表明為E和Z異構(gòu)體的1∶1混合物;δ3.95和4.03(2 x s，SCH2)，4.85(t，J＝7.25Hz，C＝CH)和5.0ppm(t，J＝7.54Hz，C＝CH). E.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-5″-叔丁基二甲基硅氧基戊基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在0-5℃下向新熔融的ZnCl2(15.4g，0.113mol)在無水CH2Cl2(200ml)中的懸浮液中加入(3S，4R)-4-乙酰氧基-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(16.25g，0.056mol)。然后滴加步驟D中制得的甲硅烷基烯醇醚粗品(0.113mol)在無水CH2Cl2(200ml)中的溶液(～15分鐘)，所得混合物在0-5℃下攪拌18小時(shí)。將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋，用飽和氯化銨水溶液、飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到暗色殘留物，在硅膠(15×11cm)上用甲苯和EtOAc的1∶1混合物洗脫層析后，得到23g(70%)膠狀標(biāo)題化合物，將該產(chǎn)物照原樣用于下一步中。1H-NMR表明，β與α異構(gòu)體的比率為9∶1。將等份試樣用己烷結(jié)晶后，得到白色片狀的標(biāo)題化合物的β異構(gòu)體純品;m.p.＝82-83℃;〔α〕22D-9.0°(c1.0，CHCl3)。
UV(EtOH)λmax238(5，080)和264nm(4，600); IR(KBr)νmax1770(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1682cm-1(硫酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.02和0.04(2 x s，2 x 6H，SiCH3)，0.84和0.87(2 x s，2 x 9H，Si 叔丁基)，0.97(d，J＝6.31Hz，3H，CH3CHO)，1.2-2.0(m，6H，戊基的CH2-2，3，4)，2.8(m，1H，戊基的H-1)，3.03(m，1H，H-6)，3.56(t，J＝5.9Hz，2H，戊基的CH2-5)，3.80(dd，JH4，H3＝2.05Hz，JH4，H＝7.08Hz，1H，H-4)，4.14(m，1H，CH3CHO)，4.26(ABq，JAB＝14.0Hz，△ν＝7.3Hz，2H，SCH2)，5.88(寬s，1H，NH)，7.18(m，1H，吡啶的H-5)，7.33(d，J＝7.8Hz，1H，吡啶的H-3)，7.64(m，1H，吡啶的H-4)，和8.52ppm(d，J＝4.8Hz，1H，吡啶的H-6). 分析計(jì)算值 C29H51N2O4SSi2 C，60.06;H，8.86;N，4.83;S，5.53; 實(shí)測值 C，60.30;H，8.82;N，4.72;S，5.67. F.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-5″-叔丁基二甲基硅氧基戊基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在0-5℃下，將(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-5″-叔丁基二甲基硅氧基戊基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(23.0g，39.7mmol，β與α異構(gòu)體的大約9∶1混合物)在THF(200ml)中的溶液用30%H2O2(7.0ml，81.2mmol)處理，接著用80ml(80.0mmol)1M氫氧化鈉滴加處理。在22℃2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用EtOAc(500ml)稀釋，用1N HCl(100ml)酸化。有機(jī)相用1N亞硫酸氫鈉，(100ml)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到固體，經(jīng)EtOAc-己烷類重結(jié)晶，得到12.4g(66%)白色固狀標(biāo)題化合物m.p.＝136-138℃;〔α〕22D-3.6°(c1.0，CHCl3)。
IR(KBr)νmax1760(sh)，1715(酸的C＝O)和1690cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.04，0.05和0.06(3 x s，6H，3H和3H，SiCH3)，0.86和0.88(2 x s，2 x 9H，siτ-Bu)，1.16(d，J＝6.28Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.8(m，6H，戊基的CH2-2，3和4)，2.6(m，1H，戊基的H-1)，3.13(m，1H，H-3)，3.60(t，J＝5.82Hz，2H，戊基的CH2-5)，3.86(dd，JH4，H3＝1.92Hz，JH4，H＝6.46Hz，1H，H-4)，4.20(dq，JH1′，CH3＝6.28Hz，JH1，H3＝3.86Hz，1H，CH3CHO)，和6.32ppm(寬 s，1H，NH). 分析計(jì)算值 C23H47NO5Si2; C，58.31;H，10.00;N，2.96; 實(shí)測值 C，58.18;H，10.18;N，2.91. G.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(4-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在22℃下，將(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-5″-叔丁基二甲基硅氧基戊基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(4.70g，9.92mmol)在無水甲苯(125ml)中的懸浮液用1，1-羰基二咪唑(1.80g，11.1mmol)處理。5小時(shí)后，減壓下蒸發(fā)溶劑，殘留物溶于無水苯(15ml)中。將該溶液加到丙二酸單烯丙基酯鎂鹽(4.7g，15.3mmol)在無水苯(100ml)中的溶液中，將所得混合物在80℃下攪拌18小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋，用冷的1N HCl、飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到殘留物，在硅膠(6.5×11cm)上用甲苯和EtOAc的混合物(8∶2)洗脫后，得到3.48g(63%)白色固狀的標(biāo)題化合物。1H-NMR表明，該產(chǎn)物為乙酰乙酸酯的酮和烯醇形式的1∶1混合物。在-20℃下用石油醚(30-60℃)對固體物重結(jié)晶后，得到一些白色針狀的產(chǎn)物的烯醇形式純品mp＝72-73℃;〔α〕22D0°(c 1.0，CHCl3). UV(EtOH)λmax248nm(11，090); IR(KBr)νmax1761(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1718，1650和1625cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.03和0.05(2 x s，2 x 6H，SiCH3)，0.86和0.88(2 x s，2 x 9H，Sit-Bu)，1.10(d，J＝6.29Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.19(m，1H，氧代丙基的H-1)，2.90(m，1H，H-3)，3.59(t，J＝5.96Hz，丁基的CH2-4)，3.81(dd，JH4，H3＝2.03Hz，JH4，H1＝7.41Hz，1H，H-4)，4.18(dq，JH，CH3＝6.29Hz，JH，H3＝3.67Hz，CH3CHO)，4.63(m，2H，烯丙基的CH2)，5.06(s，1H，氧代丙基烯醇形式的H-3)，5.2-5.4(m，2H，烯丙基的CH)和5.8-6.1ppm(m，2H，烯丙基的CH和NH). 分析計(jì)算值 C28H53NO6Si2 C，60.50;H，9.61;N，2.52; 實(shí)測值 C，60.62;H，9.64;N，2.45. H.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-4-〔(1″R)-1″-(4-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在22℃下，將(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-4-〔(1″R)-1″-(4-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(3.4g，6.12mmol)在乙腈(50ml)中的溶液用對甲苯磺酰基疊氮(6.9mmol，2.3ml 3M CH3CN溶液)和三乙胺(0.85ml，6.1mmol)處理。1.5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用EtOAc(200ml)稀釋，用水、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到殘留物，將之用甲苯和EtOAc的混合物(9∶1，～30ml)研制。濾出晶狀對甲苯磺酰胺，濾液在硅膠(5×11cm)上層析，用甲苯和EtOAc的9∶1混合物洗脫，得到3.56g(100%)透明油狀的標(biāo)題化合物。
IR(NaCl，壓片)νmax2140(N2)，1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1720(酯的C＝O)和1650cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.03和0.05(2 x s，2 x 6H，SiCH3)，0.9(s，18H，Si t-Bu)，1.16(d，J＝6.29Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.04(m，1H，H-3)，3.57(t，J＝6.2Hz，1H，丁基的CH2-4)，3.85(dd，JH4，H3＝2.11Hz，JH4，H＝5.48Hz，1H，H-4)，4.05(m，1H，氧代丙基的H-1)，4.17(dq，JH，CH3＝6.29Hz，JH2，H3＝3.68Hz，1H，CH3CHO)，4.7(m，2H，烯丙基的CH2)，5.3-5.5(m，2H，烯丙基的CH)，和5.8-6.1ppm(m，2H，NH和烯丙基的CH). I.(4R，5R，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
在氮?dú)夥障?，?3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(4-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(3.50g，6.0mmol)在無水苯(350ml)中的溶液用辛酸銠(Ⅱ)(0.14g)處理，加熱回流45分鐘。蒸發(fā)溶劑，得到油狀雙環(huán)酮粗品，用于下一步反應(yīng)。
IR(NaCl，壓片)νmax1770(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1745cm-1(酮酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.03，0.08和0.09(3 x s，6H，3H和3H，SiCH3)，0.86(s，18H，SitBu)，1.1-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，1.28(d，J＝6.16Hz，3H，CH3CHO)，2.64(m，1H，H-4)，3.22 dd，JH6，H5＝2.36Hz，JH6，H1′＝5.54Hz，1H，H-6)，3.6(m，2H，CH2OSi)，4.24(dd，JH5，H6＝2.36Hz，JH5，H4＝8.03Hz，1H，H-5)，4.30(m，1H，CH3CHO)，4.61(s，1H，H-2)，4.64(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.4和5.8-6.0ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). J.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在0-5℃和氮?dú)夥障?，?分鐘時(shí)間向(4R，5R，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(6.0mmol)在無水CH3CN(35ml)中的溶液中同時(shí)加入氯磷酸二苯基酯(1.4ml，6.8mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.2ml，6.9mmol)。然后加入4-N，N-二甲基氨基吡啶(～3mg)，將所得混合物在同樣的溫度下攪拌1小時(shí)。加入2-吡啶甲基硫醇(1.5g，12.0mmol)和N，N-二異丙基乙胺后，將混合物在0-5℃下攪拌16小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到油狀物，在硅膠(5×10cm)上用甲苯和EtOAc的9∶1混合物洗脫層析后，得到2.95g(74%)油狀標(biāo)題化合物。
IR(NaCl壓片)νmax1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.04，0.05和0.06(3 x s，6H，3H和3H，SiCH3)，0.87和0.88(2 x s，2 x 9H，Sit-Bu)，1.2-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，1.26(d，J＝6.13Hz，3H，CH3CHO)，3.12(dd，JH6，H5＝2.48Hz，JH6，H1′＝6.68Hz，1H，H-6)，3.40(m，1H，H-4)，3.59(m，2H，丁基的CH2-4)，4.03(dd，JH5，H6＝2.48Hz，JH5，H4＝9.17Hz，1H，H-5)，4.13(ABq，JAB＝14.3Hz，△ν＝30.4Hz，2H，SCH2)，4.20(m，1H，CH3CHO)，4.72(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.8-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，7.20(m，1H，吡啶的H-5)，7.4(d，J＝7.9Hz，1H，吡啶的H-3)，7.67(m，1H，吡啶的H-4)和8.5ppm(m，1H，吡啶的H-6). K.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(4″-羥基丁基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在-10℃和氮?dú)夥障拢瑢?4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(2.95g，4.46mmol)在無水THF(70ml)中的溶液用冰乙酸(1.6ml，28.0mmol)處理，然后用13.4ml 1.0M的氟化四丁銨四氫呋喃溶液處理。將所得混合物在0℃下攪拌17小時(shí)后，用EtOAc稀釋，用冷的飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到油狀物，在硅膠(6×8cm)上用50→100%EtOAc甲苯溶液梯度洗脫，得到1.64g(67%)的透明油狀標(biāo)題化合物。
IR(NaCl，壓片)νmax1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.06和0.07(2s，2 x 3H，SiCH3)，0.87(s，9H，Si t-Bu)，1.28(d，J＝6.08Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.14(dd，JH6，H5＝2.54Hz，JH6，H1′＝7.19Hz，1H，H-6)，3.37(m，1H，H-4)3.65(m，2H，丁基的CH2-4)，4.02(dd，JH5，H6＝2.54Hz，JH5，H4＝9.37Hz，1H，H-5)，4.14(ABq，JAB＝13.8Hz，Δν＝33.2Hz，2H，SCH2)，4.2(m，1H，CH3CHO)，4.72(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2xm，2H和1H，烯丙基的CH)，7.2(m，1H，吡啶的H-5)，7.4(d，J＝7.9Hz，1H，吡啶的H-3)，7.68(m，1H，吡啶的H-4)和8.50ppm(1H，吡啶的H-6). L.(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在-20℃和氮?dú)夥障拢瑢?4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基〕-4-(4″-羥基丁基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.64g，3.0mmol)在無水THF(250ml)中的溶液用三苯膦(1.26g，4.8mmol)和8.5ml(5.1mmol)0.6M疊氮酸甲苯溶液處理。然后用5分鐘時(shí)間滴加偶氮二甲酸二乙酯(0.80ml，5.08mmol)。在-20℃下30分鐘后，加入EtOAc和飽和NaHCO3水溶液使反應(yīng)混合物驟冷。有機(jī)相用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓蒸發(fā)溶劑，得到油狀物，用甲苯(～25ml)研制。濾出肼二羧酸二乙酯結(jié)晶物，按同樣的方法用乙醚處理濾液，使三苯膦氧化物結(jié)晶。最后將殘留物在硅膠(5×9cm)上用甲苯和EtOAc的8∶2混合物為洗脫劑層析，蒸發(fā)UV活性級分，得到1.60g(93%)透明油狀的標(biāo)題化合物。
IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)，1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.06和0.07(2 x s，2 x 3H，SiCH3)，0.88(s，9H，Si t-Bu)，1.29(d，J＝6.07Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.10(dd，JH6，H5＝2.55Hz，JH6，H1′＝7.20Hz，1H，H-6)，3.29(t，J＝6.2Hz，2H，CH2N3)，3.42(m，1H，H-4)，4.02(dd，JH5，H6＝2.55Hz，JH5，H4＝9.36Hz，1H，H-5)，4.13(ABq，JAB＝14.0Hz，Δν＝31.9Hz，2H，SCH2)，4.19(m，1H，與SCH2重疊，CH3CHO)，4.72(m，2H，烯丙基的SCH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H，和1H，烯丙基的CH)，7.21(m，1H，吡啶的H-5)，7.41(d，J＝7.8Hz，1H，吡啶的H-3)，7.69(m，1H，吡啶的H-4)和8.50ppm(m，1H，吡啶的H-6). M.(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在5℃下，將(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.60g，2.80mmol)在無水THF(40ml)中的溶液用乙酸(1.0ml，17.5mmol)處理，然后用8.4ml(8.4mmol)1.0M氟化四丁銨四氫呋喃溶液處理。在5℃112小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到油狀物，在硅膠(4×11cm)上用甲苯和EtOAc的1∶1混合物洗脫，得到0.57g(36%)回收原料，然后用EtOAc洗脫層析，得到0.76g(59%，基于回收原料計(jì)算為92%)的油狀標(biāo)題化合物。
IR(NaCl，壓片)νmax2100(N2)，1772(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1708cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.28Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，和2和3)，1.84(d，J＝5.2Hz，1H，OH)，3.15(dd，JH6，H5＝2.64Hz JH6，H1′＝7.28Hz，1H，H-6)，3.31(t，J＝6.2Hz，2H，CH2N3)，3.48(m，1H，H-4)，4.13(dd，JH5，H6＝2.64Hz，JH5，H4＝9.43Hz，1H，H-5)，4.11(ABq，JAB＝14.16Hz，Δν＝33.3Hz，2H，SCH2)，4.2(m，1H，CH3CHO)，4.74(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(m，2H，烯丙基的CH)，7.2(m，1H，吡啶的H-5)，7.40(d，J＝7.9Hz，1H，H-吡啶的H-3)，7.67(m，1H，吡啶的H-4)和8.50ppm(m，1H，吡啶的H-6). N.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃下，將(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.76g，1.66mmol)在無水CH2Cl2中的溶液用四(三苯膦)鈀〔O〕(0.14g)和3.6ml(1.8mmol)0.5M2-乙基己酸鉀的EtOAc溶液處理。30分鐘后，將反應(yīng)混合物用乙醚(150ml)稀釋，用75ml 0.05M pH7.0磷酸鹽緩沖液提取三次。合并水提取液，用75ml 1M NaH2PO4稀釋(結(jié)果pH5.8)，然后在45psi和0-5℃下用30%Pd/硅藻土(0.8g)氫化1.5小時(shí)。濾出催化劑，濾液減壓(＜15℃)濃縮至大約50ml。殘留物在反相硅膠(μ-Bondapak C18，5×9cm)上用0-10%乙腈水溶液梯度洗脫進(jìn)行層析，冷凍干燥后，先得到0.125g(17%)的白色粉狀的(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(4″-羥基丁基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鉀。
終級分冷凍干燥后，得到0.273g(42%)的白色粉狀的標(biāo)題化合物。1H-NMR和HPLC表明，該產(chǎn)物含有7%的上述羥基丁基副產(chǎn)物。將一部分產(chǎn)物(0.175g)再次層析純化，得到0.152g(87%回收率)純標(biāo)題化合物〔α〕D0°(c1.0，H2O)。
HPLC純度94%(μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，洗脫劑5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液，流速1.5ml/分，UV檢測器306nm，保留時(shí)間8.92分鐘。
UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax266(6，490)和306nm(9，377); IR(KBr)νmax1758(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧基酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.29(d，J＝6.36Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.97(t，J＝7.6Hz，2H，CH2NH2)，3.16(m，1H，H-4)，3.29(dd，JH6，H5＝2.52Hz，JH6，H1′-6.35Hz，1H，H-6)，4.0-4.3(m，4H，H-5，CH3CHN和SCH2重疊)，7.37(m，1H，吡啶的H-5)，7.52(d，J＝7.9Hz，1H，吡啶的H-3)，7.86(m，1H，吡啶的H-4)，和8.47ppm(m，1H，吡啶的H-6). 實(shí)施例13 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(4″-羥基丁基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鉀
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(4″-羥基丁基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在-10℃和氮?dú)夥障拢瑢?4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(實(shí)施例12步驟J制得)(0.67g，1.01mmol)在無水四氫呋喃(15ml)中的溶液用乙酸(0.7ml，12.2mmol)處理，然后用6.0ml(6.0mmol)的1.0M氟化四丁銨在四氫呋喃中的溶液處理。在0-5℃下140小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，然后干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到油狀物，在硅膠(3×7cm)上進(jìn)行層析。先用CH3CN的EtOAc溶液進(jìn)行梯度洗脫，得到0.17g(30%)的單去保護(hù)的(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(4″-羥基丁基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯，為一油狀物，與實(shí)施例12步驟K的化合物相同。然后用乙腈洗脫得到了0.20g(45%)的油狀標(biāo)題化合物。
IR(NaCl，壓片)νmax3400(OH)，1770(β-內(nèi)酰胺C＝O)和1705cm-1(羧酸酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.37(d，J＝6.26Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.21(dd，JH6，H5＝2.65Hz，JH6，H1′＝8.09Hz，1H，H-6)，3.44(m，1H，H-4)3.68(～t，J＝5.0，2H，CH2OH)，4.1-4.2(m，與SCH2重疊 2H，H-5和CH3CHO)，4.14(ABq，JAB＝14.08Hz，Δν＝35.7Hz，2H，SCH2)，4.74(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，7.21(m，1H，吡啶的H-5)，7.42(d，J＝7.8Hz，1H，吡啶的H-3)，7.69(m，1H，吡啶的H-4)和8.5ppm(m，1H，吡啶的H-6). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(4″-羥基丁基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鉀
在22℃和氮?dú)夥障拢瑢?4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(4″-羥基丁基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.20g，0.46mmol)在無水二氯甲烷(10ml)中的溶液用三苯膦(0.020g)、四(三苯膦)鈀〔O〕〔0.020g〕和1.0ml(0.5mmol)的0.5M2-乙基己酸鉀乙酸乙酯溶液處理。20分鐘后，將反應(yīng)混合物用水(3×10ml)提取，合并的水提取液保持在減壓下以除去痕量的有機(jī)溶劑。在反相硅膠柱上層析(μ-Bondapak C-18，3.5×6.5cm，0-5%CH3CN水溶液洗脫)，冷凍干燥后，得到0.151g(75%)非晶形固狀的標(biāo)題化合物，〔α〕22D-4.1°(c1.0，H2O)。
HPLC純度99%，μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速2ml/分，UV檢測器304nm，保留時(shí)間10.0分鐘。
UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax266(7，243)和306nm(10，819); IR(KBr)νmax1750(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧酸酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.28(d，J＝6.33Hz，3H，CH3CHO)，1.1-1.7(m，6H，CH2CH2CH2CH2OH)3.13(m，1H，H-4)3.32(dd，JH6，H5＝2.50Hz，JH6，H1′＝5.93Hz，1H，H-6)，3.56(t，J＝6.3Hz，CH2OH)，4.14(ABq，JAB＝14.5Hz，Δν＝24.6Hz，2H，SCH2)，4.0-4.3(m與SCH2重疊，2H，H-5和CH3CHO)，7.37(m，1H，吡啶的H-5)，7.52(d，J＝7.9Hz，1H，吡啶的H-3)，7.86(m，1H，吡啶的H-4)和8.47ppm(d，J＝4.9Hz，1H，吡啶的H-6). 實(shí)施例14 (4R，5S，6S)-4-〔4″-(N-亞胺甲基)氨基丁基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0℃下，將(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.098g，0.25mmol)在25ml 0.04M pH7.0磷酸鹽緩沖液中的溶液用0.1M氫氧化鈉調(diào)至pH8.5。然后分小批(～10分鐘)加入甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(0.43g，2.5mmol)，同時(shí)用0.1M NaOH保持pH在8.3附近。在0-5℃下15分鐘后，用0.1M HCl將溶液的pH值調(diào)至7.0，用EtOAc洗滌水相。然后將水相保持在減壓下以除去痕量的有機(jī)溶劑，再在反相硅膠上層析(μ-Bondapak C-18，3.5×6.5cm，用0-5%乙腈水溶液進(jìn)行梯度洗脫)。冷凍干燥UV活性級分，得到0.076g(72%)白色非晶形粉狀標(biāo)題化合物，〔α〕22D+2.4°(c1.0，H2O)。
HPLC純度97.9%，μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，洗脫劑10%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液，流速1ml/分，UV檢測器306nm，保留時(shí)間8.68分鐘。
UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax266(6，680)和306nm(8，980); IR(KBr)νmax1758(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1715和1590(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.28(d，J＝6.31Hz，CH3CHO)，1.2-1.7(m，6H，CH2CH2CH2CH2NH)，3.16(～t，1H，H-4)，3.3(m，3H，H-6和CH2NHCH＝NH 重疊)，4.0-4.3(m，4H，H-5，CH3CHO和SCH2重疊)，7.37(m，1H，吡啶的H-5)，7.53(d，J＝7.9Hz，1H，H-吡啶的H-3)，7.79(s，1H，NH-CH＝NH)，7.86(m，1H，吡啶的H-4)和8.47ppm(d，J＝4.4Hz，1H，吡啶的H-6). 實(shí)施例15 (4R，5S，6S)-4-〔2″-(N-胍基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
用30%Pd/硅藻土(60mg)為催化劑，在40-50psi氫壓下，將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉(120mg，0.28mmol)〔用在實(shí)施例6步驟D中所述的一般方法處理實(shí)施例7步驟H的化合物得到〕在0.1M pH5.9的磷酸鹽緩沖水溶液(8.4ml，0.84mmol)中的溶液和水(8ml)置于帕爾氫化器中振蕩90分鐘，氫化溫度為5℃至15℃(反應(yīng)終止時(shí)的溫度)。濾除催化劑，用0.1N NaOH水溶液將水溶液的pH值調(diào)至8.5。在5℃(冰浴)下向該溶液中加入氨基亞氨基甲磺酸(360mg，3.0mmol)并加入0.10N NaOH水溶液將pH值保持在8-8.5。將該混合物攪拌30分鐘，然后用0.1N HCl水溶液中和至pH7.0。通過C18μBondapak(6g和3g)柱(H2O→15%CH3CN/H2O)兩次，得到標(biāo)題化合物(15mg，13%)。
HPLC純度100%(304nm，10%CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4)，保留時(shí)間7.3分鐘。
UV(H2O)λmax266(5830)，306(8250); IR(液體石蠟)νmax3500-3000(OH和NH2)，1755，1590(C＝O)，和1660，1630cm-1(C＝N); 1H NMR(D2O，200 MHz)δ8.47-8.45(1H，m，芳族 -H)，7.9-7.81(1H，m，芳族 -H)，7.54-7.50(1H，bd，J＝7.9Hz，芳族 -H)，7.40-7.34(1H，m，芳族 -H)，4.25-4.16(1H，m，H-1′)，4.22，4.17，4.10，4.03(2H，ABq，J＝14.4Hz，CH2吡啶)，4.06(0.5H，d，J＝2.3Hz，部分 H-5)，3.24(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.3Hz，H-6)，3.2-3.1(2H，m，CH2-N)，3.27-3.1(1H，m，隱藏 H-4)，1.7-1.1(4H，m，CH2CH2)和1.28(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 實(shí)施例16 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-甲基氨甲酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-甲基氨甲酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在氬氣氛下，向(4R，5S，6S)-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-4-(2″-羥基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.27g，0.52mmol)〔實(shí)施例6步驟A中制得〕在CH2Cl2(5ml)中的冷(0℃)溶液中加入異氰酸甲酯(0.31ml，5.23mmol)。在0-5℃將反應(yīng)混合物攪拌48小時(shí)，此時(shí)大約10%的起始原料未發(fā)生反應(yīng)。蒸發(fā)溶劑，得到泡沫體，在用CH2Cl2填充的硅膠柱(2.5×9cm)上用CH2Cl2/EtOAc(1∶1，梯度洗脫)洗脫進(jìn)行層析，得到標(biāo)題化合物(0.26g，87%)。
1H NMR(200MHz，CDCl37.24)δ0.02(s，3H，SiCH3)，0.04(s，3H，SiCH3)，0.82(s，9H，SiC(CH3)3，1.24(d，CH3，JCH3，1′＝6.14Hz)，1.69-1.85(m，1H，CH2)，2.05-2.18(m，1H，CH2)，2.79(d，NHCH3，J＝4.81Hz)，3.16(dd，H-6，J5，6＝2.33Hz，J6，1′＝6.74Hz)，3.47(t，H-4，J＝9.69Hz)，3.84-4.39(m，6H，CH2O，CHOH，H-5，SCH2)，4.57-4.83(m，OCH2，烯丙基)，5.18-5.46(m，＝CH2，烯丙基)，5.8-6.02(m，CH＝，烯丙基)，7.19(m，H-5，py，J4，5＝7.72Hz，J5，6＝4.77Hz)，7.48(d，H-3，py，J3，4＝7.82Hz)，7.69(dt，H-4，py，J4，6＝1.64Hz)，8.45(dd，H-6，py). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-甲基氨甲酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-4-(2″-甲基氨甲酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.25g，0.43mmol)在無水THF(5ml)中的冷(0℃)溶液用乙酸(0.15ml，2.6mmol)處理，然后用1M氟化四丁銨在THF中的溶液(1.3ml，1.3mmol)處理。將混合物在0℃-5℃攪拌120小時(shí)，此時(shí)大約一半起始原料未發(fā)生反應(yīng)。將混合物在0℃下用1M NaHCO3溶液(2.6ml，2.6mmol)中和，用EtOAc(3×50ml)提取。合并有機(jī)提取液，依次用冷的1M NaHCO3溶液、水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)溶劑，得到帶漿固體，在用CH2Cl2填充的硅膠(2.5×9cm)上層析，先用CH2Cl2和EtOAc的混合物洗脫(梯度洗脫)，然后用EtOAc洗脫，最后用CH3CN和CH2Cl2的混合物洗脫(1∶1，梯度洗脫)，得到白色粉狀的標(biāo)題化合物(0.1g，50%)。
1H NMR(200MHz，CDCl37.24)δ1.37(d，CH3，JCH3，1′＝6.25Hz)，1.66-1.84(m，1H，CH2)，2.11-2.27(m，1H，CH2)，2.78(d，NHCH3，J＝4.95Hz)，3.32(dd，H-6，J5，6＝2.52Hz，J6，1′＝8.47Hz)，3.45(t，H-4，J＝10.26Hz)，3.93-4.31(m，6H，CH2O，CHOH，H-5，SCH2)，4.59-4.87(m，OCH2，烯丙基)，5.19-5.48(m，＝CH2，烯丙基)，5.84-6.04(m，CH＝，烯丙基)，7.19(m，H-5，py，J4，5＝7.71Hz，J5，6＝5.31Hz)，7.41(d，H-3，py，J3，4＝7.85Hz)，7.66(dt，H-4，py，J4，6＝1.77Hz)，8.45(m，H-6，py，J3，6＝0.96Hz). C.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-甲基氨甲酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-甲基氨甲酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.094g，0.204mmol)在CH2Cl2(10ml)中的冷(0℃)溶液用Pd〔Ph3P〕4(0.03g，0.026mmol)處理，接著用0.5M的2-乙基己酸鈉乙酸乙酯溶液(0.45ml，0.224mmol)處理。將混合物在0℃攪拌2小時(shí)，然后用水(3×15ml)提取。合并的水相通過μ-Bondapak C-18反相硅膠柱(2.5×9cm)，用水和CH3CN的混合物(95∶5，梯度洗脫)洗脫標(biāo)題化合物，冷凍干燥后，得到白色蓬松的固體(0.062g，69%)。
HPLC純度99.7%，UV檢測設(shè)置在304nm處，μ-Bondapak C-18(4mm×30cm)，8%CH3CN在pH7.4磷酸鹽緩沖液中的溶液，流速1ml/分，保留時(shí)間9.04分鐘。
UV(pH7.4)λmax304(8778). IR(液體石蠟)νmax1750cm-1(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1710cm-1(NHCO). 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.305(d，CH3，JCH3，1′＝6.38Hz)，1.6-1.73(m，1H，CH2)，2.00-2.07(m，1H，CH2)，2.71(s，NCH3)，3.23(t，H-4，J＝9.7Hz)，3.48(dd，H-6，J5，6＝2.61Hz，J6，1′＝5.84Hz)，3.93-4.31(m，6H，CH2O，CHOH，H-5，SCH2)，7.39(dd，H-5，py，J5，6＝4.84Hz，J4，5＝7.74Hz)，7.52(d，H-3，py，J3，4＝7.84Hz)，7.89(dt，H-4，py，J4，6＝1.72Hz)，8.48(d，H-6，py). 實(shí)施例17 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在0-5℃和氮?dú)夥障?，?分鐘時(shí)間，向(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(6.87mmol，按照實(shí)施例12步驟Ⅰ從4.0g，6.87mmol重氮基前體制得)在無水CH3CN(40ml)中的溶液中同時(shí)加入氯磷酸二苯基酯(1.56ml，7.52mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.31ml，7.52mmol)。然后加入少許4-N，N-二甲基氨基吡啶晶粒，并將混合物攪拌1小時(shí)。然后將該溶液冷卻至-20℃，先用在乙腈(5ml)中的β-巰基丙腈〔L.Bauer和T.L.Welsh，J.Org.Chem.，26，1443(1961)〕(1.23g，14.1mmol)處理，再用N，N-二異丙基乙胺(1.31ml，7.52mmol)處理。使溶液的溫度升至0-5℃，將混合物攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到油狀物，在硅膠(5×9cm)上層析，用0-5%的乙酸乙酯甲苯溶液梯度洗脫，得到3.42g(80%)的油狀標(biāo)題化合物。
IR(NaCl，壓片)νmax2260(CN)，1778(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1715cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.04和0.08(2 x s，2 x6H，SiCH3)，0.88和0.89(2 x s，2 x 9H，Si tert-Bu)1.27(d，J＝6.14Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.5-3.2(m，6H，SCH2CH2CN，H-4和H-6重疊)，3.61(m，2H，CH2OSi)，4.1-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO重疊)，4.7(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(4″-羥基丁基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在0-5℃下，將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(3.42g，5.49mmol)在無水THF(75ml)中的溶液先用乙酸(1.9ml，33.2mmol)處理，接著用16.5ml(16.5mmol)的1.0M氟化四丁銨四氫呋喃溶液處理。在4℃下24小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到油狀物，在硅膠(5×11cm)上層析，用甲苯和EtOAc的混合物(1∶1→EtOAc)洗脫，得到1.67g(68%)油狀標(biāo)題產(chǎn)物。
IR(NaCl，壓片)νmax3500(OH)，2250(CN)，1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.08(s，6H，SiCH3)，0.88(s，9H，Sit-Bu)，1.29(d，J＝6.12Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.68(m，2H，CH2CN)，2.7-3.2(m，3H，H-4和SCH2)，3.21(dd，JH6，H5＝2.62Hz，JH6，H1＝6.78Hz，1H，H-6)，3.66(m，2H，CH2OH)，4.2(m，2H，H-5和CH3CHO重疊)，4.74(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). C.(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在-20℃下，將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(4″-羥基丁基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.67g，3.28mmol)在無水THF(250ml)中的溶液用三苯膦(1.38g，5.26mmol)和7.6ml(5.7mmol)0.75M的疊氮酸甲苯溶液處理。然后用5分鐘時(shí)間滴加偶氮二甲酸二乙酯(0.90ml，5.7mmol)，并將所得混合物在同樣的溫度下攪拌30分鐘。加入EtOAc和飽和碳酸氫鈉水溶液使反應(yīng)混合物驟冷。有機(jī)相用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，減壓濃縮。殘留油狀物用甲苯(25ml)研制，過濾除去肼二羧酸二乙酯結(jié)晶。用乙醚進(jìn)行類似的處理，除去三苯膦氧化物，濾液在硅膠(4.5×11cm)上層析，用甲苯和EtOAc的混合物(8∶2)洗脫，得到1.40g(80%)的油狀標(biāo)題化合物。
IR(NaCl，壓片)νmax2250(CN)，2100(N3)，1765(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.08(s，6H，SiCH3)，0.89(s，9H，t-Bu)，1.30(d，J＝6.12Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.68(m，2H，CH2CN)，2.9-3.2(m，3H，H-4和SCH2)，3.17(dd，JH6，H5＝2.58Hz，JH6，H1＝6.9Hz，H-6)，3.32(寬 t，J＝6.0Hz，2H，CH2N3)，4.1-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO 重疊)，4.74(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). D.(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在0-5℃下，將(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.40g，2.62mmol)在無水THF(40ml)中的溶液用乙酸(1.0ml，17.5mmol)處理，接著用8.4ml(8.4mmol)1.0M的氟化四丁銨四氫呋喃溶液處理。將該溶液在5℃下儲存10天。然后將反應(yīng)混合物用冷的乙酸乙酯稀釋，用飽和NaHCO3溶液和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到油狀物，在硅膠(4.5×11cm)上用乙酸乙酯的甲苯溶液(1∶1→EtOAc)梯度洗脫層析。
從頭餾分中得到0.23g(16%)回收起始原料。從接下來的餾分中得到0.78g(71%)油狀標(biāo)題化合物。
IR(NaCl，壓片)νmax3500(OH)，2250(CN)，2100(N3)，1770(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.40(d，J＝6.26Hz，3H，CH3CHO)，1.4-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，1.83(d，J＝5.1Hz，1H，OH)，2.9-3.3(m，3H，H-4 and SCH2)，3.22(dd，JH6，H5＝2.75Hz，JH6，H1′＝7.37Hz，1H，H-6)，3.34(寬 t，J＝6.0Hz，2H，CH2N3)，4.25(m 與H-5重疊 1H，CH3CHO)，4.28(dd，JH5，H6＝2.75Hz，JH5，H4＝9.58Hz，1H，H-5)，4.77(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). E.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃和氮?dú)夥障?，?4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.78g，1.86mmol)在無水CH2Cl2(50ml)中的溶液用四(三苯膦)鈀〔O〕(0.1g)和4.1ml(2.05mmol)的0.5M2-乙基己酸鉀乙酸乙酯溶液處理。30分鐘后，將反應(yīng)混合物用乙醚(150ml)稀釋，用0.05M pH 7.0磷酸鹽緩沖水溶液(3×75ml)提取。合并水相，用1M NaH2PO4將pH調(diào)至5.8，減壓下除去痕量有機(jī)溶劑。在0-5℃和45psi下用30%Pd/硅藻土將水溶液氫化2小時(shí)。然后將催化劑過濾到硅藻土墊上，用水洗滌。HPLC(μ-Bondapak C-18，5%CH3CN-H2O pH6.8磷酸鹽緩沖液洗脫)表明，得到的是4″-氨基丁基化合物(先洗脫下來)和4-羥基丁基化合物的70∶30混合物。
將該溶液在反相硅膠上快速層析(μ-Bondapak C-18，4×7cm，H2O-CH3CN 5%洗脫)，除去無機(jī)鹽。將UV活性級分冷凍干燥，在相同的柱上用5%CH3CN-H2O 0.01M pH6.8磷酸鹽緩沖液為洗脫劑層析。得到兩個(gè)主級分，再次在反相硅膠上脫鹽。將第一級分冷凍干燥，得到0.33g(50%)白色非晶形粉狀的標(biāo)題4″-氨基丁基化合物。HPLC和1H-NMR表明，該級分純度為大約90%，含有一些4″-羥基丁基化合物和其它雜質(zhì)。
第二級分給出0.102g(14%)的白色非晶形粉狀的4-羥基丁基化合物，HPLC和1H-NMR表明，純度為90%，用于實(shí)施例18。
將上述4″-氨基丁基化合物在反相柱(μ-Bondapak C-18，條件同上)上精細(xì)層析，得到純的標(biāo)題化合物〔α〕22D+60.4°(c1.0，H2O)。
HPLC純度98.5%，μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速1ml/分，UV檢測器306nm，保留時(shí)間5.25分鐘。
UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax300nm(10，267); IR(KBr)νmax2250(CN)，1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1690cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.38Hz，1H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.86(m，2H，CH2CN)，2.9-3.2(m，2H，SCH2)，3.02(t，J＝7.6Hz，2H，CH2NH2)，3.4(m，JH6，H5＝2.66Hz，2H，H-6和H-4重疊)，和4.3ppm(m，2H，H-5和CH3CHO重疊). 實(shí)施例18 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(4″-羥基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鉀
通過制備性HPLC(Zorbax ODS，Dupont，21.2mm×25cm，5% CH3CN-H2O pH6.8磷酸鉀緩沖液洗脫，UV檢測器)層析，然后在μ-Bondapak C-18上脫進(jìn)，對在實(shí)施例17步驟E中通過疊氮基前體氫化制得的含4″-羥基丁基化合物的粗級分(0.102g，90%純度)進(jìn)行純化。冷凍干燥，得到0.045g(45%回收率)的白色非晶形粉狀標(biāo)題化合物。
HPLC純度99%，μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，10% CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速0.6ml/分，UV檢測器306nm，保留時(shí)間6.93分鐘。
UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(7，364); IR(KBr)νmax2250(CN)，1750(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1600cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.41Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.86(m，2H，CH2CN)，2.8-3.3(m，2H，SCH2)，3.35(m，1H，H-4)，3.43(dd，JH6，H5＝2.59Hz，JH6，H1＝6.0Hz，1H，H-6)，3.62(t，J＝6.3Hz，2H，CH2OH)，和4.3ppm(m，2H，H-5和CH3CHO重疊). 實(shí)施例19 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔4″-(N-亞胺甲基)氨基丁基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.113g，0.32mmol)在30ml 0.04M pH7.0磷酸鹽緩沖液中的冷(0-5℃)溶液的pH值用0.1M NaOH調(diào)至8.5。然后分小批加入甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(0.54g，3.17mmol)，同時(shí)用0.1M NaOH保持pH值在8.0-8.5之間(大約10分鐘)。10分鐘后，用0.1N HCl將pH值調(diào)至7.0，用EtOAc洗滌反應(yīng)混合物。將水相保持在減壓下以除去痕量有機(jī)溶劑，然后在反相硅膠(μ-Bondapak C-18，3.5×7cm)上用0-10%乙腈水溶液梯度洗脫進(jìn)行層析，冷凍干燥后，得到0.106g(86%)白色非晶形粉狀的標(biāo)題化合物〔α〕22D+53.5°(c1.0，H2O)。
HPLC純度93%，μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，5% CH3CN-H2O pH 7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速1ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間7.74分鐘。
UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax300nm(10，481); IR(KBr)νmax2250(CN)，1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1715cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.34(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H;丁基的CH2-1，2和3)，2.8-2.9(m，2H，CH2CN)，2.9-3.3(m，2H，SCH2)，3.3-3.5(m，4H，H-4，H-6和CH2N)，4.3(m，2H，H-5和CH3CHO 重疊)，和7.81ppm(s，1H，CH＝N). 實(shí)施例20 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(4″-N，N-二甲基氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃下，將(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.054g，0.15mmol)在水(1ml)中的溶液用乙腈(1ml)稀釋，然后用37%甲醛水溶液(0.075ml，0.81mmol)處理，再用氰基硼氫化鈉(0.024g，0.38mmol)和1滴乙酸處理。15分鐘后，加入0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液使反應(yīng)混合物驟冷，并于減壓下除去有機(jī)溶劑。水相在反相硅膠(μ-Bondapak C-18，3.5×6.5cm)上層析，用0-6%乙腈水溶液梯度洗脫，冷凍干燥后，得到0.016g(27%)白色非晶形粉狀的標(biāo)題化合物。
HPLC純度96%，μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，5% CH3CN-H2O pH 7.0磷酸鹽緩沖液洗脫，流速1ml/分鐘，UV檢測器300nm，保留時(shí)間10.9分鐘。
UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax300nm(9，907); IR(KBr)νmax2250(弱 CN)，1759(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.87(s，6H，N(CH3)2)，2.87(m 與NCH3重疊，2H，CH2CN)，2.9-3.2(m，2H，SCH2)，3.15(～t 與SCH2重疊，2HCH2N(CH3)2)，3.38(dd，JH6，H5＝2.6Hz，JH6，H1＝6.25Hz，1H，H-6)，3.38(m與H-6重疊，1H，H-4)和4.27ppm(m，2H，H-5和CH3CHO). 實(shí)施例21 (4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
A.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-疊氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在冰浴冷卻下，向從實(shí)施例7步驟E得到的(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-疊氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(2.4g，5.0mmol)在EtOH(50ml)中的溶液中加入2N HCl水溶液(7ml)。撤去冰浴，將混合物攪拌20小時(shí)。用1M NaHCO3水溶液(15ml)將溶液的pH值調(diào)至7，減壓下除去乙醇。所得殘留物用EtOAc稀釋，用1M NaHCO3水溶液(18ml)、水(10ml)和鹽水(10ml)洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物通過閃式硅膠(40g)柱(5，10，20，40，60，80%EtOAc/CH2Cl2)，得到油狀標(biāo)題化合物(1.7g，93%)，該油狀物自動結(jié)晶。
IR(CH2Cl2)νmax3600，3500(OH)，3400(NH)，2150(N2)，2100(N3)，1765，1715和1650cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.04-5.84(1H，m，乙烯基 -H)，6.01(1H，bs，NH)，5.42-5.29(2H，m，乙烯基 -H)，4.75-4.63(2H，m，CH2乙烯基，4.19-4.01(1H，m，H-1′)，4.02-3.89(1H，m，H-1″)，3.83(1H，dd，J＝6.5Hz，J＝2.1Hz，H-4)，3.31-3.25(2H，m，CH2N3)，3.01(1H，dd，J＝1.9Hz，J＝6.9Hz，H-3)，2.23(1H，d，J＝3.9Hz，OH)，1.98-1.75(1H，m，HCH)，1.73-1.48(3H，m，CH2-HCH)和1.29ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). B.(2R，4R，5R，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
將(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-疊氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(1.46g，4.00mmol)和Rh(OAc)2(56mg)在苯(140ml)中的溶液加熱回流40分鐘。減壓下除去苯，得到油狀標(biāo)題化合物(1.5g，100%)。
IR(CH2Cl2)νmax3610(OH)，2100(N3)，1770和1745cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ5.96-5.8(1H，m，乙烯基 H)，5.39-5.25(2H，m，乙烯基 H)，4.75-4.64(2H，m，CH2-乙烯基)，4.66(1H，s，H-2)，4.35-4.26(1H，m，H-1′)，4.29(1H，dd，J＝2.2Hz，J＝8.1Hz，H-5)，3.45-3.25(2H，m，CH2N3)，3.29(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝7.7Hz，H-6)，2.8-2.6(1H，m，H-4)，1.9-1.5(4H，m，OH，CH2-CH2)和1.42ppm(3H，t，J＝6.2Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷卻下，將(2R，4R，5R，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(1.5g，4.00mmol)在CH3CN(30ml)中的溶液用氯磷酸二苯基酯(0.88ml，4.4mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.76ml，4.4mmol)滴加處理。將混合物攪拌45分鐘，依次加入三甲基硅基氯(0.57ml，4.4mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.76ml，4.4mmol)將所得烯醇磷酸酯甲硅烷基化。將混合物攪拌35分鐘，然后用2-巰基乙醇(624mg，8.00mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.39ml，8.00mmol)處理保護(hù)的烯醇磷酸酯。攪拌混合物，在5℃下放置24小時(shí)，然后用冷EtOAc(100ml)稀釋，用冷的1N HCl水溶液(1×50ml)、冰冷的水(2×50ml)、冷的1M NaHCO3溶液(1×50ml)、冰冷的水(2×50ml)和鹽水(50ml)洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，所得殘留物用THF(30ml，用Na/二苯酮蒸餾過)稀釋。然后，在-25℃(CH3CN/干冰浴)下，先用AcOH(1.3ml，24mmol)處理，再用1M氟化四丁銨四氫呋喃溶液(12.0ml，12mmol)滴加處理。將混合物攪拌20分鐘，然后用冷EtOAc(150ml)稀釋，用冰冷的1M NaHCO3水溶液(3×50ml)、冰冷的水(3×50ml)和鹽水(50ml)洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑后，將所得殘留物通過閃式硅膠(100g)柱(EtOAc-CH2Cl2，10%→100%)，得到半結(jié)晶油狀的標(biāo)題化合物(795mg，50%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600(OH)，2100(N3)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.04-5.90(1H，m，乙烯基 H)，5.50-5.23(2H，m，乙烯基 -H)，4.82-4.63(2H，m，CH2-乙烯基)，4.27-4.19(1H，m，H-1′)，4.22(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.9-3.75(2H，m，CH2O)，3.42-3.26(2H，m，CH2-N3和H-4)，3.24(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.3Hz，H-6)，3.08-2.8(2H，m，SCH2)，2.3-1.9(1H，bs，OH)，1.95-1.54(4H，m，CH2-CH2)和1.37ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). D.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
在冰浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(63mg，0.16mmol)在CH2Cl2(7ml)中的溶液用Pd(PPh3)4(12mg，0.012mmol)和0.5M2-乙基己酸鈉乙酸乙酯溶液(0.32ml，0.16mmol)處理。將混合物在5℃下攪拌40分鐘，然后用乙醚(30ml)稀釋，用冷的pH7.0緩沖液(3×3.5ml)和水(1×3ml)提取。合并水提取液，用乙醚(2×10ml)洗滌，通過μ-Bondapak C-18(15g)反相柱(H2O，1，2，3，4%CH3CN/H2O)，冷凍干燥后，得到標(biāo)題化合物(30mg，50%)。
HPLC純度98.6%(5%CH3CN/緩沖液pH7.40.014M)，保留時(shí)間8.87分鐘; UV(H2O)λmax304(10，770); IR(液體石蠟)νmax3600-3100(OH)，2100(N3)，1750和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.35-4.20(1H，m，H-1′)，4.22(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝9.3Hz，H-5)，3.8-3.7(2H，m，CH2O)，3.45-3.3(4H，CH2N3，H-6和H-1′)，3.11-2.8(2H，m，SCH2)，1.95-1.45(4H，m，CH2CH2)和1.33ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例22 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-疊氮基乙酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-4-(2″-疊氮基乙酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在0℃和氬氣氛下，向(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-4-(2″-羥基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.5g，0.96mmol)〔實(shí)施例6步驟A中制得〕在CH2Cl2(10ml)中的溶液中先加入吡啶(0.1ml，1.2mmol)，然后加入疊氮基乙酰氯(0.14g，1.2mmol)在CH2Cl2(2ml)中的溶液。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌30分鐘，然后用EtOAc(40ml)稀釋，用冷的pH7磷酸鹽緩沖液和鹽水依次洗滌。干燥(MgSO4)后，蒸發(fā)溶劑，得到糖漿狀物，在用CH2Cl2填充的硅膠(2.3×11cm)上層析，用CH2Cl2和EtOAc的混合物(8∶2，梯度洗脫)洗脫，得到糖漿狀標(biāo)題化合物(0.423g，73%)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.04(s，3H，SiCH3)，0.05(s，3H，SiCH3)，0.84(s，9H，SiC(CH3)3)，1.28(d，CH3，JCH3，1′＝6.12Hz)，1.70-1.87(m，1H，CH2)，2.16-2.33(m，1H，CH2)，3.16(dd，H-6，J5，6＝2.64Hz，J6.1′＝7.04Hz)，3.67(m，H-4，J＝2.1，8.03，10.63Hz)，3.98(s，CH2N3)3.83-4.43(重疊，6H，CH2O，CHOH，H-5，SCH2)4.57-4.82(m，OCH2烯丙基)，5.18-5.45(m，＝CH2，烯丙基)，5.82-6.01(m，CH＝，烯丙基)，7.17(m，H-5，py，J4，5＝7.68Hz，J5，6＝4.9Hz)，7.38(d，H-3，py，J3，4＝7.83Hz)，7.66(dt，H-4，py，J4，6＝1.8Hz)，8.45(m，H-6，py，J3，6＝0.8Hz). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-疊氮基乙酰氧基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-4-(2″-疊氮基乙酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.423g，0.7mmol)在無水THF(8ml)中的冷(0℃)溶液依次用乙酸(0.24ml，4.22mmol)和1M氟化四丁銨四氫呋喃溶液(2.11ml，2.11mmol)處理。將混合物在0-5℃攪拌120小時(shí)，此時(shí)，大約25%原料未發(fā)生反應(yīng)。在0℃下用1M NaHCO3溶液(4.3ml，4.22mmol)中和混合物，用EtOAc(3×50ml)提取。合并的有機(jī)相依次用冷的1M NaHCO3溶液、水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)溶劑，得到粘膠狀物，在用CH2Cl2填充的硅膠(2.5×12cm)上層析，用CH2Cl2和EtOAc的混合物(3∶7，梯度洗脫)洗脫，得到標(biāo)題化合物(0.23g，68%)。
1H NMR(200 MHz，CDCl37.24)δ1.38(d，CH3，JCH3，1′＝6.24Hz)，1.71-1.87(m，1H，CH2)，2.26-2.38(m，1H，CH2)，3.24(dd，H-6，J5，6＝2.82Hz，J6，1′＝8.08Hz)，3.7(m，H-4，J＝2.16，9.79Hz)，3.86-4.53(m，8H，CH2O，CH2N3，CHOH，H-5，SCH2)，4.57-4.85(m，OCH2，烯丙基)，5.19-5.45(m，＝CH2，烯丙基)，5.83-6.02(m，CH＝，烯丙基)，7.14-7.21(m，H-5，py，J3，5＝1.03Hz，J4，5＝7.71Hz，J5，6＝4.82Hz)，7.38(d，H-3，py，J3，6＝0.98Hz，J3，4＝7.86Hz)，7.65(dt，H-4，py，J3，4＝7.86Hz，J4，6＝1.81Hz)，8.46(m，H-6，py). C.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-疊氮基乙酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
在0℃和氬氣氛下，向(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-疊氮基乙酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.22g，0.46mmol)在CH2Cl2(10ml)中的溶液中依次加入Pd〔Ph3P〕4(0.08g，0.07mmol)和0.5M2-乙基己酸鈉乙酸乙酯溶液(1.01ml，0.5mmol)。將混合物在0℃下攪拌2小時(shí)，然后用水(3×15ml)提取。合并的水相通過μ-Bondapak C-18反相硅膠(2.5×10cm)柱，用水和CH3CN的混合物(9∶1，梯度洗脫)洗脫，冷凍干燥后，得到白色蓬松固狀的標(biāo)題化合物(0.1g，48%)。
1H NMR(200 MHz，D2O)δ1.31(d，CH3，JCH3，1′＝6.4Hz)，1.65-1.84(m，1H，CH2)，2.03-2.2(m，1H，CH2)，3.28(dt，H-4，J＝2.72，11.33Hz)，3.48(dd，H-6，J5，6＝2.64Hz，J6，1′＝6.03Hz)，4.13(s，2H，CH2N3)，4.05-4.35(m，6H，CH2O，CHOH，H-5，SCH2)，7.39(m，H-5，py，J4，5＝7.73Hz，J5，6＝4.92Hz)，7.51(d，H-3，py，J3，4＝7.83Hz)，7.87(dt，H-4，py，J4，6＝1.75Hz)，8.48(d，H-6，py). 實(shí)施例23 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-氨基乙酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0℃和40psi下，用5%Pd/BaSO4(0.04g)將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-疊氮基乙酰氧基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉(0.08g，0.17mmol)在0.5M pH7磷酸鈉緩沖液中的溶液氫化30分鐘。濾出催化劑，用水洗滌。合并的水溶液通過μ-Bondapak C-18反相硅膠(2.5×10cm)柱，用水和CH3CN的混合物(9∶1，梯度洗脫)洗脫化合物。經(jīng)證實(shí)所得的第一種化合物為酯裂解所產(chǎn)生的(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-羥基乙基)-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉。接著洗脫，冷凍干燥后，得到白色蓬松固狀的標(biāo)題化合物(0.035g，49%)。
HPLC純度93.1%(實(shí)際上＞98%)，UV檢測設(shè)置在304nm處，μ-Bondapak C-18(4mm×30cm);10%CH3CN的pH7.4磷酸鹽緩沖液溶液;流速1ml/分;保留時(shí)間5.37分鐘; UV(pH7.4)λmax304(8260). IR(液體石蠟)νmax1750cm-1(β-內(nèi)酰胺的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.29(d，CH3，JCH3，1′＝6.4Hz)，1.69-1.87(m，1H，CH2)，2.06-2.21(m，1H，CH2)，3.27(dt，H-4，J＝2.79，10.83Hz)，3.46(dd，H-6，J5，6＝2.7Hz，J6，1′＝6.33Hz)，3.89(s，2H，CH2NH2)，4.04-4.38(m，6H，CH2O，CHOH，H-5，SCH2)，7.36(m，H-5，py，J4，5＝7.73Hz，J5，6＝5.08Hz)，7.5(d，H-3，py，J3，4＝7.93Hz)，7.85(dt，H-4，py，J4，6＝1.77Hz，8.45(d，H-6 py). 實(shí)施例24 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在-15℃下，用5分鐘時(shí)間，將氯磷酸二苯基酯(1.4ml，6.75mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.2ml，6.9mmol)一起加到(4R，5R，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(6.46mmol，由3.0g(6.46mmol)的實(shí)施例2步驟E的重氮基前體制得)在無水CH3CN(50ml)中的溶液中。然后加入少許4-N，N-二甲基氨基吡啶晶粒，在30分鐘內(nèi)將混合物緩慢溫?zé)嶂?-5℃。然后滴加在CH3CN(5ml)中的N，N-二異丙基乙胺(1.4ml，8.0mmol)和3-巰甲基吡啶(1.54g，12.3mmol)。在0-5℃下1.5小時(shí)后，加入EtOAc和冷水使反應(yīng)混合物驟冷。有機(jī)相用1M NaHSO3、飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到油狀物，在硅膠(5×11cm)上層析，用0-20%乙酸乙酯甲苯溶液梯度洗脫，得到2.13g(60%)的油狀標(biāo)題化合物。
IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)，1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.07和0.08(2 x s，2 x 3H，SiCH3)，0.88(s，9H，Sit-Bu)，1.29(d，J＝6.12Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.2(m，2H，CH2-4)，3.06(dd，JH6，H5＝2.70Hz，JH6，H1＝7.74Hz，1H，H-6)，3.2-3.7(m，H，CH2N3和H-4)，4.05(dd與SCH2重疊，JH5，H6＝2.70Hz，JH5，H4＝9.54Hz，1H，H-5)，4.07(ABq，JAB＝15.6Hz，Δν＝15.2Hz，1H，SCH2)，4.17(m，1H，CH3CHO)，4.74(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.8-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，7.29(m，1H，吡啶的H-5)，7.79(m，1H，吡啶的H-4)，8.54(dd，J＝15.0Hz和J＝4.8Hz，1H，吡啶的H-6)和8.62ppm(d，J＝2.0Hz，1H，吡啶的H-2). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在0-5℃和氮?dú)夥障?，?4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(2.13g，3.92mmol)在無水THF(60ml)中的溶液用乙酸(1.35ml，23.6mmol)和12.0ml(12.0mmol)的1M氟化四丁銨四氫呋喃溶液處理。在5℃下5天后，將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋，用冷的飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到油狀物，在硅膠(4×12cm)上用50-100%的乙酸乙酯甲苯溶液梯度洗脫進(jìn)行層析。從先洗脫下來的級分得到0.33g(15%)的回收起始原料。從接著洗脫下來的級分得到0.90g(54%)透明油狀標(biāo)題化合物。
IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)，1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.23Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.2(m，2H，CH2-4)，3.12(dd，JH6，H5＝2.77Hz，JH6，H1＝7.89Hz，1H，H-6)，3.3-3.7(m，3H，CH2N3和H-4)，4.05(ABq，JAB＝13.4Hz，Δν＝23.0Hz，2H，SCH2)，4.1-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO重疊)，4.75(m，2H，烯丙基的CH2)，5.3-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，7.3(m，1H，吡啶的H-5)，7.72(m，1H，吡啶的H-4)，8.53(dd，J＝1.58Hz和J＝4.8Hz，1H，吡啶的H-6)和8.6ppm(d，J＝2.0Hz，1H，吡啶的H-2). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃和氮?dú)夥障?，用?三苯膦)鈀〔O〕(0.13g)和4.6ml(2.3mmol)的0.5M2-乙基己酸鉀的乙酸乙酯溶液處理(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.90g，2.09mmol)在無水CH2Cl2(50ml)中的溶液。15分鐘后，用乙醚(150ml)稀釋反應(yīng)混合物，用0.05M pH7.0磷酸鹽緩沖液(3×75ml)提取。合并水相，用1M NaH2PO4將pH值調(diào)至5.8，減壓下除去痕量有機(jī)溶劑。然后在0-5℃和45psi下用0.9g30%Pd/硅藻土將水溶液氫化1.2小時(shí)。濾出催化劑，濾液在反相硅膠(μ-Bondapak C-18，3.5×6.5cm)上層析，用0.5%乙腈水溶液梯度洗脫，冷凍干燥后，得到白色非晶形粉狀標(biāo)題物質(zhì)。在水(30ml)中結(jié)晶，得到0.137g很細(xì)的固狀標(biāo)題化合物。母液再次層析后，得到0.27g白色非晶形粉狀的標(biāo)題化合物(總收率0.397g，52%)。
HPLC純度94.5%，μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，8%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速1ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間5.35分鐘; UV(H2O，pH7.4磷酸鹽的緩沖液)λmax268(6，010)和302nm(7，740); IR(KBr)νmax1770β-內(nèi)酰胺的C＝O和1590cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.30(d，J＝6.29Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.2(m，2H，CH2-4)，3.04(寬 t，J＝8.3Hz，2H，CH2NH2)，3.20(m，1H，H-4)，3.38(dd，JH6，H5＝2.72Hz，JH6，H1＝6.45Hz，1H，H-6)，4.06(ABq，JAB＝13.6Hz，Δν＝24.3，2H，SCH2)，4.1-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO)，7.44(m，1H，吡啶的H-5)，7.85(d，J＝7.8Hz，1H，吡啶的H-4)，8.44(d，J＝4.9Hz，1H，吡啶的H-6)和8.50ppm(寬 s，1H，吡啶的H-2). 實(shí)施例25 (4R，5S，6S)-4-(2″-N，N-二甲基氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃下，用37%甲醛水溶液(0.23g，2.4mmol)、氰基硼氫化鈉(0.048g，0.72mmol)和2滴乙酸處理從實(shí)施例24得到的(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.150g，0.41mmol)在水(3ml)和乙腈(3ml)的混合物中的懸浮液。20分鐘后，用30ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液稀釋反應(yīng)混合物，減壓下除去痕量有機(jī)溶劑。水相在反相硅膠(μ-Bondapak C-18，4×9cm)上用0-5%乙腈水溶液為梯度洗脫劑層析兩次。UV活性級分冷凍干燥后，得到0.080g(～50%)白色非晶形粉末。HPLC表明，該產(chǎn)物為標(biāo)題二甲氨基化合物和N-甲基-N-氰甲基化合物(實(shí)施例26)的3∶1混合物。用制備性HPLC(μ-Bondapak C-18，10mm×30cm，5%CH3CN-H2O洗脫)純化，得到0.047g(29%)純的二甲氨基標(biāo)題化合物。
HPLC純度97%，μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，8%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速1ml/分，保留時(shí)間5.42分鐘。
UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax268nm(6592)和302nm(7，793); IR(KBr)νmax1765(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1605cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.30(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.2(m，2H，CH2-4)，2.87(s，6H，N(CH3)2)，3.15(m，3H，CH2N和H-4)，3.32(dd，JH6，H52.90Hz，JH6，H1＝6.80Hz，1H，H-6)，4.05(ABq，JAB＝14.1Hz，Δν＝29.7Hz，2H，SCH2)，4.12(dd，與SCH2部分重疊JH5，H6＝2.90Hz，1H，H-5)，4.22(m，1H，CH3CHO)，7.44(dd，J＝5.0Hz和J＝7.9Hz，1H，吡啶的H-5)，7.84(m，1H，吡啶的H-4)，8.44(dd，J＝1.5Hz，和J＝5.0Hz，1H，吡啶的H-6)和8.50ppm(d，J＝1.8Hz，1H，吡啶的H-2). 實(shí)施例26 (4R，5S，6S)-4-〔2″-(N-氰甲基-N-甲基氨基)乙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將如實(shí)施例25所述的那樣由(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸還原性烷基化制得的產(chǎn)物混合物用制備性HPLC(μ-Bondapak C-18)純化。冷凍干燥后，從具有較長保留時(shí)間的、混合物中的較少組分得到0.011g白色非晶形粉狀標(biāo)題化合物。
HPLC純度92%，μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，8%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速1ml/分，UV檢測器302nm，保留時(shí)間23.5分鐘; UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax268和304nm; IR(KBr)νmax1752(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1605cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.31(d，J＝6.36Hz，1H，CH3CHO)，1.4和1.9(2 x m，2 x 1H，CH2-4)，2.35(s，3H，N-CH3)，2.3-2.6(m，2H，CH2CH2N)，3.12(m，1H，H-4)，3.33(dd，JH6，H5＝2.68Hz，JH6，H1＝5.95Hz，1H，H-6)，3.70(s，2H，NCH2CN)，4.09(ABq，JAB＝14.14Hz，Δν＝29.5Hz，2H，SCH2)，4.12(dd與SCH2重疊，JH5，H6＝2.68Hz，1H，H-5)，4.24(m，1H，CH3CHO)，7.49(m，1H，吡啶的H-5)，7.92(d，J＝8.0Hz，1H，吡啶的H-4)，8.46(寬 d，J＝4.3Hz，1H，吡啶的H-6)和8.54ppm(寬 s，1H，吡啶的H-2). 實(shí)施例27 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在5℃下，用1.0M pH4.2 NaH2PO4緩沖液將如實(shí)施例21所述的那樣從相應(yīng)的烯丙酯(404mg，1.02mmol)得到的(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉的0.04M pH7.0磷酸鹽緩沖液溶液(50ml，2.0mmol)的pH值調(diào)至5.8-5.9。向該混合物中加入30%Pd/硅藻土(400mg)，于45-50psi氫壓下在帕爾氫化器上振蕩1.5小時(shí)，其初始溫度為5℃(冰浴)，最終溫度為15℃。濾出催化劑，溶液通過μ-Bondapak C18反相柱(60g，H2O)，得到不純的標(biāo)題物質(zhì)，其中污染有(4R，5S，6S)-4-(3″-羥基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉(實(shí)施例28)。將該不純物溶于0.01M pH6.0磷酸鹽緩沖液中，再次倒到μ-Bondapak C18柱(比例500/1)上。先用pH6.0緩沖液洗脫出兩倍于柱體積的洗脫液，然后用水洗脫，得到純的3-氨基丙基標(biāo)題化合物(95mg，28%)和3-羥基丙基衍生物(得自340mg，0.85mmol烯丙酯，45mg，17%，如實(shí)施例28所述)。
HPLC測得的標(biāo)題化合物純度88%(KH2PO40.01M，pH7.4)，保留時(shí)間5.54分鐘; UV(H2O)λmax302(9000); IR(液體石蠟)νmax3600-3100(OH)，1750和1585cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.33-4.2(1H，m，H-1′)，4.23(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.2Hz，H-5)，3.82-3.67(2H，m，CH2O)，3.43-3.34(1H，m，H-4)，3.36(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝6.6Hz，H6)，3.09-3.02(2H，m，CH2N)，3.06-2.79(2H，2 組 m，SCH2)，1.95-1.5(4H，m，CH2CH2)和1.33ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例28 (4R，5S，6S)-4-(3″-羥基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
在5℃下，用1.0M pH4.2 NaH2PO4緩沖液將如實(shí)施例21所述那樣從相應(yīng)的烯丙酯(404mg，1.02mmol)得到的(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉的0.04M pH7.0磷酸鹽緩沖液溶液(50ml，2.0mmol)的pH值調(diào)至5.8-5.9。向該混合物中加入30%Pd/硅藻土(400mg)，然后在帕爾氫化器上于45-50psi氫壓下振蕩1.5小時(shí)，其初始溫度為5℃(冰浴)，最終溫度為15℃。濾出催化劑，溶液通過μ-Bondapak C18，反相柱(60g，H2O)，得到不純的標(biāo)題物質(zhì)，其中污染有(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鹽(實(shí)施例27)。將該不純物溶于0.01M pH6.0磷酸鹽緩沖液中，再次倒到μ-Bondapak C18柱(比例500/1上。先用pH6.0緩沖液洗脫出兩倍柱體積的洗脫液，然后用水洗脫，得到實(shí)施例27的3-氨基丙基化合物(95mg，28%)和3-羥基丙基標(biāo)題化合物(得自340mg，0.85mmol的烯丙酯，45mg，17%)。
HPLC測得的標(biāo)題化合物的純度95.2%(KH2PO4，0.01M pH7.4)，保留時(shí)間7.9分鐘; UV(H2O)λmax302(10，300); IR(液體石蠟)νmax3600-3100(OH)，1740和1690cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.35-4.2(1H，m，H-1′)，4.23(1H，dd，J＝9.2Hz，J＝2.5Hz，H-5)，3.77(2H，m，SCH2CH2O)，3.65(2H，m，CH2O)，3.41(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝6.1Hz，H-6)，3.42-3.36(1H，m，H-4)，3.1-2.8(2H，2 se 組 m，SCH2)，2.0-1.4(4H，m，CH2CH2)和1.33ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例29 (4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
A.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將在實(shí)施例7步驟E中制得的(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-疊氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(2.0g，4.2mmol)和Rh(OAc)2在苯(80ml)中的溶液加熱回流20分鐘。減壓下除去苯，用CH3CN(80ml)稀釋所得的雙環(huán)酮。將所得溶液冷卻至-10℃(冰-MeOH浴)，用氯磷酸二苯基酯(1.0ml，4.6mmol)、N，N-二異丙基乙胺(0.84ml，4.6mmol)和4-二甲氨基吡啶(2.3mg)滴加處理。將混合物攪拌2小時(shí)，然后加入N，N-二異丙基乙胺(1.7ml，9.2mmol)，接著通入CH3SH氣流(10分鐘)。將混合物在5℃(冷室)下保持18小時(shí)，然后用冷的EtOAc(400ml)稀釋，用冷的1N HCl水溶液(400ml)、冰冷的水(200ml)、1M NaHCO3水溶液(2×400ml)、冰冷的水(3×400ml)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，所得殘留物(2g)通過閃式硅膠柱(100g，己烷→20%EtOAc/己烷)，得到油狀標(biāo)題化合物(1.0g，50%)。
IR(CH2Cl2)νmax2100(N3)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ5.97-5.89(1H，m，乙烯基 H)，5.48-5.21(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.6(2H，m，CH2-乙烯基)，4.3-4.15(1H，m，H-1′)，4.12(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.4Hz，H-5)，3.5-3.3(2H，m，CH2N3)，3.3-3.1(1H，m，H-4)，3.16(1H，dd，J＝7.4Hz，J-2.7Hz，H-6)，2.38(3H，s，CH3)，1.9-1.5(4H，m，CH2CH2)，1.31(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.88(9H，s，叔丁基)，0.086和0.078ppm(6H，2s，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.0g，2.1mmol)在THF(60ml)中的冷(-20℃)溶液先用冰AcOH(1.5ml，25.2mmol)處理，然后用1M氟化四丁銨四氫呋喃溶液(12.7ml，12.6mmol)處理。將反應(yīng)在5℃下保持100小時(shí)，然后用1M NaHCO3水溶液中和，用乙酸乙酯(200ml)稀釋，用冷的1M NaHCO3水溶液(1×50ml)、水(2×150ml)和鹽水(1×150ml)稀釋，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，所得殘留物(1.2g)通過閃式硅膠柱(1/1己烷/EtOH→EtOH)，得到標(biāo)題化合物(0.30g)和起始醚(0.42g)，在同樣的條件下用氟化四丁銨再次處理所述醚，得到標(biāo)題化合物(0.13g)，合計(jì)0.43g，56%。
IR(CH2Cl2)νmax3600(OH)，2100(N3)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.07-5.87(1H，m，乙烯基 H)，5.5-5.21(2H，m，乙烯基 -H)，4.87-4.62(2H，m，CH2-乙烯基)，4.3-4.18(1H，m，H-1′)，4.22(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.3Hz，H-5)，3.5-3.3(2H，m，CH2N3)，3.3-3.2(1H，m，H-4)，3.23(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝7.6Hz，H-6)，2.37(3H，s，SCH3)，1.9-1.55(4H，m，CH2CH2)，1.77(1H，d，J＝4.8Hz，OH)和1.39ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
在冰浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(50mg，0.14mmol)在CH2Cl2(2ml)中的溶液用Pd(PPh3)4(5mg)和0.5M2-乙基己酸鈉的乙酸乙酯溶液(0.3ml，0.15mmol)處理。用EtOAc(10ml)稀釋混合物，用0.05M磷酸鹽緩沖液(1×10ml，1×5ml)提取。合并水提取液，用乙醚洗滌，通過μ-Bondapak C18反相柱(20g，H2O→2%CH3CN/H2O)，得到標(biāo)題化合物(30mg，60%)。
HPLC純度97.2%(10%CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4)，保留時(shí)間7.56分鐘; UV(H2O)λmax304(8070); IR(液體石蠟)νmax3600-3100(OH)，2100(N3)，1745和1595cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.34-4.2(1H，m，H-1′)，4.22(1H，dd，J＝2.3Hz，J＝9.0Hz，H-5)，3.47-3.37(4H，m，H-6，H-4和CH2N3)，3.375(d，J＝2.3Hz，H-6的部分dd)，2.37(3H，s，CH3)，1.95-1.4(4H，m，CH2CH2)和1.35ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例30 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下，用1.0M pH4.2 NaH2PO4緩沖液將如實(shí)施例29所述的那樣從相應(yīng)的烯丙酯(0.12g，0.33mmol)制得的(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉的0.05M pH7.0磷酸鹽緩沖液溶液(25ml)的pH值調(diào)至5.8。然后將混合物在帕爾氫化器上于45-50psi氫壓和～10℃(初始溫度5℃)下用30%Pd/硅藻土(120mg)為催化劑振蕩90分鐘。濾除催化劑，溶液通過μ-Bondapak C18反相柱(50g，H2O→2%CH3CN/H2O)，得到兩種化合物的混合物(0.3g)。將冷凍干燥后的粉末再次通過反相柱(45g，150ml的0.05M pH6.0磷酸鹽緩沖液，H2O→2%CH3CN/H2O)，得到不純的3-氨基丙基衍生物(125mg)和實(shí)施例31的3-羥基丙基衍生物(20mg，20%)。將3-氨基丙基衍生物在反相柱上再次純化(45g，H2O→2%CH3CN/H2O)，得到純的標(biāo)題3-氨基丙基化合物(25mg，25%)。
HPLC純度96.5%(KH2PO4緩沖液0.01M，pH7.4)，保留時(shí)間7.50分鐘; UV(H2O)λmax304(8580); IR(液體石蠟)νmax3600-3100(OH，NH2)，1750和1580cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.3-4.2(1H，m，H-1′)，4.21(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝9.1Hz，H-5)，3.48-3.39(1H，m，H-4)，3.33(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝6.5Hz，H-6)，3.15-3.0(2H，m，CH2N)，2.34(3H，s，SCH3)，1.9-1.5(4H，m，CH2CH2)和1.33ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例31 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(3″-羥基丙基)-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
在冰浴冷卻下，用1.0M pH4.2 NaH2PO4緩沖液將如實(shí)施例29所述的那樣從相應(yīng)的烯丙酯(0.12g，0.33mmol)制得的(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉的0.05M pH7.0磷酸鹽緩沖液溶液(25ml)的pH值調(diào)至5.8。然后將混合物在帕爾氫化器上于45-50psi氫壓和～10℃(初始溫度5℃)下用30%Pd/硅藻土(120mg)為催化劑振蕩90分鐘。濾除催化劑，溶液通過μ-Bondapak C18反相柱(50g，H2O→2%CH3CN/H2O)，得到兩種化合物的混合物(0.3g)。將冷凍干燥后的粉末再次通過反相柱(45g，150ml的0.05M pH6.0磷酸鹽緩沖液，H2O→2%CH3CN/H2O)，得到實(shí)施例30的不純的3-氨基丙基衍生物(125mg)和純的3-羥基丙基標(biāo)題化合物(20mg，20%)。
HPLC純度97.5%(2%CH3CN/pH 7.4 0.01M磷酸鹽緩沖液)，保留時(shí)間7.79分鐘。
UV(H2O)λmax306(9700); IR(液體石蠟)νmax3500-3100(OH)，1740和1590cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.34-4.18(1H，m，H-1′)，4.21(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝9.3Hz，H-5)，3.69-3.63(2H，m，CH2O)，3.46-3.36(1H，m，H-4)，3.38(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝6.3Hz，H-6)，2.36(3H，s，SCH3)，1.95-1.4(4H，m，CH2CH2)和1.34ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例32 (4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-亞胺甲基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下，向(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(50mg，0.15mmol，實(shí)施例7中制得)在0.04M pH7.0磷酸鹽緩沖液(10ml，0.4mmol)中的溶液中加入0.1N NaOH水溶液，將其pH值調(diào)至8.2-8.4。向該溶液中分批加入甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(257mg，1.5mmol)，同時(shí)用0.1N NaOH水溶液將pH值保持在8.0-8.5。將混合物攪拌10分鐘，然后用0.1N HCl水溶液將pH值調(diào)至7.0。溶液通過μ-Bondapak C18柱(25g，H2O→2%，4%CH3CN/H2O)，冷凍干燥后，得到純的粉狀標(biāo)題化合物(33mg，62%)。
HPLC純度93.8%(2%CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4)，保留時(shí)間5.73分鐘; UV(H2O)λmax302(7651); IR(液體石蠟)νmax3600-3100(NH，OH)，1755，1585(C＝O)和1710cm-1(C＝NH); 1H NMR(D2O，200MHz)δ7.83，7.80(1H，2s，NCHN)，4.35-4.2(1.5H，m，H-1′)，4.21(0.5H，d，J＝2.2Hz，部分H-5)，3.8-3.7(2H，m，CH2O)，3.55-3.25(4H，m，CH2N，H-6，H-4)，3.1-2.8(2H，2，組 m，SCH2)，1.95-1.4(4H，m，CH2CH2)和1.32ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 實(shí)施例33 (4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-亞胺甲基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(31mg，0.10mmol，實(shí)施例30中制得)在0.05M pH7.0磷酸鹽緩沖液中的溶液的pH值用0.1N NaOH水溶液調(diào)至8.5。向該溶液中分批加入甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(172mg，1mmol)，同時(shí)用0.1N NaOH水溶液將pH值保持在8-8.3。將混合物攪拌15分鐘，然后將pH值調(diào)至7.0。水溶液通過μ-Bondapak C18柱(25g，H2O)，冷凍干燥后，得到粉狀標(biāo)題化合物(22mg，60%)。
HPLC純度97.8%(304nm，2%CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4)，保留時(shí)間8.33分鐘; UV(H2O)λmax306(12，200); IR(液體石蠟)νmax3600-3100(OH，NH2)，1750，1590(C＝O)和1710cm-1(C＝N); 1H NMR(D2O;200MHz)δ7.83，7.80(1H，2s，CH)，4.35-4.18(2H，m，H-1′和H-5)，3.45-3.35(3H，m，CH2N，H-4)，3.30(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝6.2Hz，H-6)，2.34(3H，s，SCH3)，1.9-1.45(4H，m，CH2CH2)和1.32ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例34 (4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-胍基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(50mg，0.17mmol，實(shí)施例30中制得)在0.05M pH7.0磷酸鹽緩沖液中的溶液的pH值用0.1N NaOH水溶液調(diào)至8。向該混合物中分批加入氨基亞氨基甲磺酸(211mg，1.70mmol)，同時(shí)用0.1N NaOH水溶液將pH值保持在7.8-8.0。將混合物攪拌1小時(shí)，然后用0.1N HCl水溶液將pH值調(diào)至7.0。溶液通過μ-Bondapak C18反相柱(25g，H2O)，冷凍干燥后，得到粉狀標(biāo)題化合物(17mg，40%). HPLC純度99.4%(304nm，2%CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4)，保留時(shí)間9.19分鐘; UV(H2O)λmax306(10，700); IR(液體石蠟)νmax3600-3100(NH2，OH)，1750，1680(C＝O)和1660cm-1(C＝N); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.3-4.17(1H，m，H-1′)，4.20(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝9.1Hz，H-5)，3.46-3.30(1H，m，H-4)，3.26(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝6.3Hz，H-6)，3.3-3.2(2H，m，CH2N)，2.34(3H，s，SCH3)，1.9-1.4(4H，m，CH2CH2)和1.32ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 實(shí)施例35 (4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-胍基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下，向(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(50mg，0.15mmol，實(shí)施例27中制得)在0.04M pH7.0磷酸鹽緩沖水溶液(10ml，0.4mmol)中的溶液中加入0.1N NaOH水溶液，將其pH值調(diào)至7.8-8.0。向該溶液中分批加入如H.S.Mosher等人在Tet.Lett.，29，(26)3183-86(1988)中所述的氨基亞氨基甲磺酸(186mg，1.5mmol)，并將pH值保持在7.6-7.8。在用0.1N NaOH水溶液將pH值保持恒定(7.6-7.8)的同時(shí)，將混合物攪拌1小時(shí)，然后用0.1N HCl水溶液將pH值調(diào)至7.08。溶液通過μ-Bondapak C18反相柱(25g，H2O→2%，4% CH3CN/H2O)，冷凍干燥后，得到粉狀標(biāo)題化合物(35mg，63%)。
HPLC純度99.1%(2%CH3CN/緩沖液0.01M，pH7.4)，保留時(shí)間7.5分鐘; UV(H2O)λmax304(7800); IR(液體石蠟)νmax3320，3180(NH，OH)，1750，1580(C＝O)和1665cm-1(C＝N); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.3-4.2(2H，m，H-1′和H-5)，3.77(2H，t，J＝6.2Hz，CH2O)，3.28(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝6.2Hz，H-6)，3.45-3.15(3H，m，H-4和CH2N)，3.15-2.8(2H，2 組 m，SCH2)，2.0-1.45(4H，m，CH2CH2)和1.32(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 實(shí)施例36 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5R，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在-15℃和氮?dú)夥障?，?分鐘時(shí)間，將氯磷酸二苯基酯(1.4ml，6.75mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.2ml，6.9mmol)同時(shí)加到(4R，5R，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(6.46mmol，由實(shí)施例2步驟E中制得的重氮基前體(3.0g，6.46mmol)環(huán)化制得)在無水乙腈(50ml)中的溶液中。然后加入少許4-N，N-二甲基氨基吡啶的晶粒，并在30分鐘內(nèi)將混合物的溫度緩慢溫?zé)嶂?-5℃。加入N，N-二異丙基乙胺(1.2ml，6.9mmol)及L.Bauer和T.L.Welsh在J.Org.Chem.，26，1443(1961)中所述的β-巰基丙腈(1.13g，13.0mmol)，并將混合物在0-5℃下攪拌2小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物用EtOAc(300ml)稀釋，用水、1M NaHSO3、飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到油狀物，在硅膠(5×11cm)上層析，用0-10%乙酸乙酯甲苯溶液梯度洗脫，得到棕色油狀的標(biāo)題化合物(3.3g，～100%)，其中含有一些聚合產(chǎn)物。該物質(zhì)照原樣用于下一步反應(yīng)中。
IR(NaCl，壓片)νmax2250(CN)，2100(N3)，1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.19(s，6H，SiCH3)，0.99(s，9H，Sit-Bu)1.41(d，J＝6.11Hz，3H，CH3CHO)，1.7-2.2(m，2H，CH2-4)，2.7-3.4(m，5H，SCH2CH2CN和H-6)，3.4-3.8(m，3H，CH2N3和H-4)，4.3(m，2H，H-5和CH3CHO)，4.85(m，2H，烯丙基的CH2)，5.3-5.6和5.9-6.2 ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-羧酸烯丙酯
在0-5℃和氮?dú)夥障?，將得自步驟A的(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯粗品(3.3g，6.4mmol)在無水THF(100ml)中的溶液先用乙酸(2.2ml，38.4mmol)處理，然后用20ml(20.0mmol)的1M氟化四丁銨四氫呋喃溶液處理。將該溶液在5℃下儲存8天。然后用EtOAc稀釋反應(yīng)混合物，用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到油狀物，在硅膠(5×11cm)上層析，用甲苯和EtOAc的1∶1混合物洗脫，得到透明油狀的標(biāo)題化合物(0.92g，36%，收率基于重氮基氮雜環(huán)丁酮計(jì)算)。
IR(NaCl，壓片)νmax3500(OH)，2250(CN)，2105(N3)，1775β-內(nèi)酰胺的C＝O和1710cm-1(羧酸酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.40(d，J＝6.23Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.1(m，2H，CH2-4)，2.7(m，2H，CH2CN)，2.9-3.3(m，3H，H-6和SCH2)，3.4-3.7(m，3H，H-4和CH2N3)，4.25(m與H-5重疊，1H，CH3CHO)，4.29(dd，JH5，H6＝2.80Hz，JH5，H4＝9.69Hz，1H，H-5)，4.77(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃和氮?dú)夥障?，?4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.92g，2.35mmol)在無水CH2Cl2(50ml)中的溶液用四(三苯膦)鈀〔O〕(0.13g)和5.2ml(2.6mmol)的0.5M2-乙基己酸鉀乙酸乙酯溶液處理。然后加入200ml 0.1M pH6.0磷酸鹽緩沖液，減壓蒸發(fā)有機(jī)溶液。將殘留的水相在0-5℃和45psi的氫壓下用2.0g 5% Pd/BaSO4氫化30分鐘。濾出催化劑，減壓下將濾液濃縮至一半體積。在反相硅膠(μ-Bondapak C-18，7.5×10.5cm)上用水為洗脫劑層析兩次后，將UV活性級分冷凍干燥，得到0.15g(20%)的白色非晶形粉狀的標(biāo)題化合物; HPLC純度99%，μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速1ml/分，UV檢測器304nm，保留時(shí)間4.67分鐘; UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax298nm(7，709); IR(KBr)νmax2250(CN)，1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.8-2.4(m，2H，CH2-4)，2.85(m，2H，CH2CN)，2.9-3.3(m，4H，SCH2和CH2NH2)，3.45(m，與H-6重疊，1H，H-4)，3.47(dd，JH6，H5＝2.90Hz，JH6，H1＝6.47Hz，1H，H-6)，和4.2-4.4ppm(m，2H，H-5和CH3CHO). 實(shí)施例37 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-(2，5-二氧代-1-吡咯烷氧基)乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔2″-(2，5-二氧代-1-吡咯烷氧基)乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0℃和氬氣氛下，向?qū)嵤├?步驟A中制得的(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-4-(2″-羥基乙基)-3-〔(吡啶-2基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.29g，0.56mmol)、N-羥基琥珀酰亞胺(0.07g，0.62mmol)和三苯膦(0.176g，0.67mmol)在無水THF(8ml)中的混合物中加入偶氮二甲酸二乙酯(0.117g，0.67mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，然后在室溫下再攪拌1小時(shí)。減壓下除去溶劑，殘留物在用CH2Cl2填充的硅膠(3×9cm)上層析，用CH2Cl2和EtOAc的混合物(4∶6，梯度洗脫)洗脫，得到混有大約1當(dāng)量Ph3P＝O的標(biāo)題化合物(0.465g)。
1H NMR(200MHz，CDCl37.24)δ0.04(s，6H，Si(CH3)2)，0.84(s，9H，SiC(CH3)3)，1.23(d，CH3，JCH3，1′＝6.07Hz)，1.73-1.95(m，1H，CH2)，2.19-2.33(m，1H，CH2)，2.67(s，4H，O＝C(CH2)2C＝O)，3.14(dd，H-6，J5，6＝2.56Hz，J6.1′＝6.4Hz)，3.81(m，H-4)，3.96-4.33(重疊，6H，CH2O，CHOH，H-5，SCH2)，4.59-4.81(m，OCH2，烯丙基)，5.17-5.44(m，＝CH2，烯丙基)，5.82-5.98(m，CH＝，烯丙基)，7.16(m，H-5，py，J4，5＝7.47Hz，J5，6＝4.91Hz)，8.49(d，H-6，py). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(2，5-二氧代-1-吡咯烷氧基)乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯。

在氬氣氛下，將得自步驟A的(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-4-〔2″-(2，5-二氧代-1-吡咯烷氧基)乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.46g，0.75mmol)在無水THF(8ml)中的冷(0℃)溶液先用乙酸(0.26ml，4.48mmol)處理，然后用1M的氟化四丁銨四氫呋喃溶液(2.24ml，2.24mmol)處理。將混合物在0～5℃之間攪拌120小時(shí)，然后在0℃下用1M NaHCO3溶液(4.52ml，4.48mmol)中和。混合物用EtOAc(3×50ml)提取，合并有機(jī)相，依次用冷的1M NaHCO3溶液、水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)溶劑，得到粘膠狀物，在用CH2Cl2填充的硅膠(3.5×9cm)上層析，先用CH2Cl2和EtOAc的混合物(50-100%EtOAc)洗脫，然后用CH3CN和EtOAc的混合物(1∶1梯度洗脫)洗脫，得到泡沫狀標(biāo)題化合物(0.18g，64.3%)。
1H NMR(200MHz，CDCl37.24)δ1.37(d，CH3，JCH3，1′＝6.25Hz)，1.71-1.9(m，1H，CH2)，2.31-2.44(m，1H，CH2)，2.7(s，4H，O＝C(CH2)2C＝O)，3.25(dd，H-6，J5，6＝2.73Hz，J6，1′＝8.77Hz)，3.91(m，H-4)，3.85-4.30(重疊，6H，CH2O，CHOH，H-5，SCH2)，4.58-4.86(m，OCH2，烯丙基)，5.19-5.46(m，＝CH2，烯丙基)，5.84-6.03(m，CH＝，烯丙基)，7.16(m，H-5，py，J3，5＝0.93Hz，J4，5＝7.67Hz，J5，6＝4.04Hz)，7.34(m，H-3，py，J3，4＝7.8Hz)，7.64(m，H-4，py，J4，6＝1.82Hz)，8.48(m，H-6，py). C.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(2，5-二氧代-1-吡咯烷氧基)乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在氬氣氛下，向(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(2，5-二氧代-1-吡咯烷氧基)乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.16g，0.32mmol)在CH2Cl2(10ml)中的冷(0℃)溶液中加入Pd〔Ph3P〕4(0.055g，0.048mmol)，然后加入0.5M2-乙基己酸鈉的乙酸乙酯溶液(0.64ml，0.32mmol)。將混合物在0℃下攪拌2小時(shí)，然后用水(3×15ml)提取。合并的水相通過μ-Bondapak C-18反相硅膠(3×11cm)柱。用水和CH3CN的混合物(9∶1，梯度洗脫)洗脫標(biāo)題化合物，冷凍干燥后，得到白色蓬松的固狀物(0.1g，64.9%); HPLC純度97.6%;UV檢測設(shè)置在304nm，μ-Bondapak C-18(4mm×30cm)，8%CH3CN的pH7.4磷酸鹽緩沖液，流速1ml/分，保留時(shí)間9.7分鐘; IR(液體石蠟)νmax1750cm-1(β-內(nèi)酰胺的C＝O)1720cm-1(酰胺C＝O). UV(pH7.4)λmax304(7756). 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.25(d，CH3，JCH3，1′＝6.39Hz)，1.75-1.91(m，1H，CH2)，2.11-2.25(m，1H，CH2)，2.82(s，4H，O＝C(CH2)2C＝O)，3.41-3.52(重疊，2H，H-4，H-6)，3.98-4.30(重疊，6H，CH2O，CHOH，H-5，SCH2)，7.41(dd，H-5，py，J3，4＝7.9Hz)，7.91(dt，H-4，py，J4，6＝1.68Hz)，8.48(d，H-6，py). 實(shí)施例38 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-疊氮基乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(3.7g，8.0mmol，如在實(shí)施例2步驟E中所制得)和Rh(OAc)2(150mg)在熱苯(300ml)中的溶液加熱回流1小時(shí)。過濾后，蒸發(fā)苯，得到(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯粗品，將該粗品溶于CH3CN(75ml)中，冷卻至-15℃(冰-MeOH浴)，用氯磷酸二苯酯(1.76ml，8.80mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.54ml，8.8mmol)滴加處理。將混合物攪拌1小時(shí)，所得的烯醇磷酸酯用在CH3CN(1.5ml)中的1，2，3-噻二唑-4-甲硫醇(1.16g，8.8mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.54ml，8.8mmol)滴加處理。將反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)，加入另外的硫醇(160mg，1.2mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.20ml，1.2mmol)。將混合物攪拌1小時(shí)，用冷的EtOAc(200ml)稀釋，用冷水(25ml)、1M NaHSO3水溶液(3×25ml)、H2O(25ml)、1N HCl水溶液(25ml)、1M NaHCO3水溶液(25ml)和鹽水(25ml)洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物通過閃式硅膠墊(125g，己烷→5%→25%乙酸乙酯/己烷)，得到標(biāo)題化合物(2.38g，61.5%)和一些烯醇磷酸酯(640mg，0.96mmol)。
IR(CH2Cl2)νmax2100(N3)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.44(1H，s，芳族 -H)，6.00-5.83(1H，m，乙烯基 -H)，5.46-5.20(2H，m，乙烯基 -H)，4.82-4.60(2H，烯丙基 CH2)，4.774，4.701，3.397，4.324(2H，ABq，J＝14.6Hz，CH2)，4.25-4.13(1H，m，H-1′)，4.113(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.6Hz，H-5)，3.69-3.55(2H，m，CH2-N3)，3.46-3.32(1H，m，H-4)，3.094(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.4Hz，H-6)，2.16-1.98，1.78-1.65(2H，2 組 m，CH2-4)，1.291(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.882(9H，s，叔丁基)和0.080ppm(6H，s，二甲基). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(2.38g，4.30mmol)在無水THF(40ml)中的溶液用乙酸(1.49ml，25.8mmol)處理，然后用1M氟化四丁銨四氫呋喃溶液(12.9ml，12.9mmol)滴加處理。將混合物在5℃下攪拌48小時(shí)。將之用EtOAc(150ml)稀釋，用水(2×25ml)、1M NaHCO3水溶液(2×25ml)、水(1×25ml)和鹽水(25ml)洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物通過閃式硅膠柱(50g，CH2Cl2/己烷1/1→EtOAc/CH2Cl25→60%)，得到油狀標(biāo)題化合物(814mg，43%); IR(CH2Cl2)νmax3600(OH)，2100(N3)，1780和，1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.46(1H，s，芳族 -H)，6.04-5.84(1H，m，乙烯基 -H)，5.47-5.21(2H，m，乙烯基-H)，4.87-4.59(2H，m，烯丙基 H)，4.799，4.725，4.353，4.278(2H，ABq，J＝15.0Hz，CH2-芳族)，4.216(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝6.7Hz，H-5)，4.72-4.18(1H，m，H-1′)，3.79-3.67(1H，m，H-4)，3.66-2.56，3.52-3.38(2H，2 組 m，CH2-N3)，3.176(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝7.9Hz，H6)，2.20-2.03，1.88-1.67(2H，2 組 m，CH2-4)，1.874(1H，d，J＝4.3Hz，OH)和1.495ppm(3H，d，J＝6.5Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(465mg，1.07mmol)在CH2Cl2(50ml)中的溶液用Pd(PPh3)4(22mg)和0.5M的2-乙基己酸鈉乙酸乙酯溶液(2.14ml，1.07mmol)處理。將混合物攪拌1小時(shí)，用乙醚(20ml)稀釋，用0.04M pH7.0磷酸鹽緩沖水溶液(4×5ml)提取。水提取液用乙醚(2×20ml)洗滌后，將pH值調(diào)至5.9。然后將水溶液在帕爾氫化器上于45-50psi氫壓下和5℃至15℃(反應(yīng)結(jié)束時(shí)溫度)溫度下用30%Pd/硅藻土為催化劑氫化1小時(shí)。濾除催化劑，用水(2×5ml)洗滌。水層通過μ-Bondapak C18反相柱(100g，H2O→1%→3%CH3CN/H2O)，冷凍干燥后，得到粉狀標(biāo)題化合物(163mg，41%)。
純度97.9%，HPLC(300nm); UV(H2O)λmax300(ε 9240); IR(Nujol)δ1770和1580cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.87(1H，s，芳族 H)，4.73，4.67，4.43，4.35(2H，ABq，J＝14.0Hz，CH2-芳族 C)，4.31-4.18(1H，m，H-1′)，4.157(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝9.7Hz，H-5)，3.417(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝6.5Hz，H-6)，3.38-3.26(1H，m，H-4)，3.17-3.02(2H，m，CH2-N)，2.25-2.07，1.86-1.65(2H，2 組 m，CH2-4)，和1.306ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例39 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯〔如實(shí)施例38步驟A那樣得自(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-疊氮基乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(2.55g，7.00mmol)〕在CH3CN(100ml)中的溶液用氯磷酸二苯基酯(1.63ml，7.70mmol)、N，N-二異丙基乙胺(1.40ml，7.7mmol)和4-二甲氨基吡啶(26mg)處理。將混合物攪拌1小時(shí)，所得的烯醇磷酸酯用三甲基硅基氯(1.0ml，7.7mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.4ml，7.7mmol)處理。將混合物攪拌15分鐘，加入N，N-二異丙基乙胺(2.8ml，15mmol)，接著通入CH3SH氣流10分鐘。使混合物在5℃下反應(yīng)44小時(shí)，然后用EtOAc(300ml)稀釋，用冰冷的1M NaHCO3水溶液(3×50ml)、冰冷的水(3×50ml)和鹽水(50ml)洗滌，干燥(MgSO4)。用THF(100ml)稀釋殘留物(3g)，用2N AcOH水溶液(17.5ml，35mmol)處理，然后在22℃下攪拌1小時(shí)。用EtOAc(300ml)稀釋混合物，用1M NaHCO3水溶液(2×100ml)、水(3×100ml)和鹽水(100ml)洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物(1.5g)通過硅膠墊(75g，己烷/EtOAc1/1→EtOAc)，得到油狀標(biāo)題化合物(530mg，21%)。
IR(凈態(tài))νmax3600-3200(OH)，2100(N3)，1770和1705cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.07-5.87(1H，m，乙烯基 H)，5.49-5.22(2H，m，乙烯基 -H)，4.88-4.63(2H，m，烯丙基 CH2)，4.30-4.19(1H，m，H-1′)，4.227(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.4Hz，H-5)，3.66-3.54(1H，m，H-4)，3.49-3.34(2H，m，CH2N)，3.142(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝7.9Hz，H-6)，2.394(3H，s，SCH3)，2.17-1.68(3H，m，和bs，OH和CH2-4)和1.391ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
在冰浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.53g，1.5mmol)在CH2Cl2(5ml)中的溶液用Pd(PPh3)4(50mg)和0.5M的2-乙基己酸鈉乙酸乙酯溶液(3.2ml，1.6mmol)處理。撤去冰浴，將混合物攪拌30分鐘。用乙酸乙酯(20ml)稀釋后，用水(2×10ml)提取。合并水相，用乙醚(20ml)洗滌，然后通過反相μ-Bondapak C18柱(50g，H2O→5%CH3CN/H2O)，冷凍干燥后，得到粉狀的標(biāo)題化合物(0.32g，64%)。
1H NMR(D2O，200MHz)δ4.33-4.19(1H，m，H-1′)，4.221(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.6Hz，H-5)，3.63-3.33(3H，m，H-4，CH2-N)，3.401(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.4Hz，H-6)，2.365(3H，s，SCH3)，2.13-1.95，1.89-1.70(2H，2 組 m，CH2-4)和1.334ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下和45-50psi氫壓下，用30%Pd/硅藻土(320mg)為催化劑，將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉(320mg，0.960mmol)在水(20ml)中的溶液在帕爾氫化器上振蕩90分鐘。濾除催化劑，水相通過μ-Bondapak C18柱三次，(50g，800g和80g，H2O)，冷凍干燥后，得到粉狀標(biāo)題化合物(82mg，30%)。
純度91.8%(HPLC，304nm); UV(H2O)λmax304(ε 8110); IR(液體石蠟)δ3600-3200(OH)，1750和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.34-4.21(1H，m，H-1′)，4.231(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝6.6Hz，H-5)，3.53-3.40(1H，m，H-4)，3.385(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝6.6Hz，H-6)，3.14-3.05(2H，m，CH2N)，2.34(3H，s，SCH3)，2.23-2.80(2H，2 組 m，CH2-4)和1.335ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 實(shí)施例40 (4R，5S，6S)-4-(2″-胍基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下，將得自實(shí)施例38的(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(160mg，0.432mmol)在0.04M pH7.4磷酸鹽緩沖水溶液中的溶液用0.1N NaOH水溶液處理(調(diào)節(jié)并保持pH在7.6-7.8)，并分批加入氨基亞氨甲磺酸(533mg，4.30mmol)處理之。將混合物攪拌45分鐘，用0.1N HCl水溶液將pH值調(diào)至6.9。將水性混合物通過μ-Bondapak C18反相柱(50g，H2O→1%-5%CH3CN/H2O)，冷凍干燥后，得到粉狀標(biāo)題化合物(93mg，52%)。
純度99.7%(HPLC，300nm); UV(H2O)λmax302(ε 8300); IR(Nujol)νmax3400-3100(OH)，1755(C＝O)，1665(C＝N)和1585cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.886(1H，s，芳族 -H)，4.651，4.577，4.421，4.347(2H，ABq，J＝14.9Hz，CH2-芳族)，4.3-4.17(1H，m，H-1′)，4.143(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.7Hz，H-5)，3.405(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.8Hz，H-6)，3.38-3.1(3H，m，H-4和CH2-N)，2.15-1.95，1.8-1.55(2H，2 組 m，CH2-4)和1.315(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例41 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷卻下，將在實(shí)施例21步驟B中制得的(2R，4R，5R，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(從(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-疊氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(2.16g，5.90mmol)制得)在CH3CN(40ml)中的溶液用氯磷酸二苯基酯(1.3ml，6.5mmol)、N，N-二異丙基乙胺(1.12ml，6.5mmol)和少量的4-二甲氨基吡啶滴加處理。將混合物攪拌45分鐘，通過順序加入三甲基硅基氯(0.84ml，6.5mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.12ml，6.50mmol)將所得的烯醇磷酸酯甲硅烷基化。將混合物攪拌30分鐘，用氰基乙硫醇(640mg，7.37mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.27ml，7.37mmol)處理產(chǎn)生的烯醇磷酸酯甲硅烷基醚。將混合物攪拌30分鐘，然后用冰浴代替冰-MeOH浴，繼續(xù)攪拌30分鐘。加入氰基乙硫醇(160mg，1.84mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.317ml，1.84mmol)，接著攪拌1小時(shí)。加入另外的氰基乙硫醇(160mg，1.84mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.317ml，1.84mmol)，攪拌30分鐘后，用EtOAc(100ml)稀釋混合物，用冰冷的水(3×40ml)、1M NaHSO4水溶液(3×40ml)、水(40ml)、1M NaHCO3水溶液(40ml)、水(40ml)和鹽水(40ml)洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑后，將所得殘留物溶于THF(40ml)中，用冰-MeOH浴冷卻至-15℃，先用乙酸(2ml，35.4mmol)處理，然后用1M氟化四丁銨的四氫呋喃溶液(17.7ml，17.7mmol)滴加處理。將混合物攪拌40分鐘，用EtOAc(100ml)稀釋，用冷的1N HCl水溶液(20ml)、水(2×20ml)、1M NaHCO3水溶液(20ml)、水(2×20ml)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物通過閃式硅膠柱(50g，CH2Cl2→10，20，40，60%EtOAc/CH2Cl2)，得到油狀標(biāo)題化合物(1.41g，59.0%); IR(CH2Cl2)νmax3600，3500(OH)，2100(N3)，1780和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.07-5.87(1H，m，乙烯基 H)，5.50-5.24(2H，m，乙烯基 H)，4.89-4.63(2H，m，烯丙基-CH2)，4.279(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝9.7Hz，H-5)，4.3-4.17(1H，m，H-1′)，3.52-3.36(2H，m，CH2N3)，3.30-3.2(1H，m，H-4)，3.277(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝7.6Hz，H-6)，3.22-2.93(2H，m，SCH2)，2.82-2.56(2H，m，CH2CN)，2.0-1.7(5H，m，OH，CH2CH2)和1.395ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(661mg，1.63mmol)在CH2Cl2(66ml)中的溶液用Pd(PPh3)4(132mg，0.110mmol)處理，然后用0.5M2-乙基己酸鈉溶液(3.3ml，1.7mmol)滴加處理。將混合物攪拌50分鐘，用乙醚(250ml)稀釋，用0.04M pH7磷酸鹽溶液(3×10ml)提取。合并水相，用乙醚(2×50ml)洗滌，用1M NaH2PO4緩沖水溶液將pH值降至5.9。向該混合物((4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-(2-氰基乙硫基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸的鈉鹽粗品)中加入30%Pd/硅藻土(660mg)，然后在5℃(冰浴，初始溫度，最終溫度為15℃)下和45-50psi氫壓下在帕爾氫化器上振蕩1小時(shí)。濾除催化劑，用水(2×10ml)洗滌。水溶液通過μ-Bondapak C18反相柱(165g，H2O→1%CH3CN)，得到3-氨基丙基標(biāo)題化合物和實(shí)施例42中所述的3-羥基丙基衍生物的74∶26混合物(363mg)。將該混合物再次通過反相柱(180g，pH6.0，0.01M磷酸鹽緩沖液)，得到兩種含磷酸鹽的衍生物。
通過反相層析除去3-氨基丙基化合物的鹽，得到了純的標(biāo)題化合物(182mg，33%)。
純度98.3%(HPLC 300nm); UV(H2O)λmax300(7900); IR(液體石蠟)νmax1755和1585cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.34-4.21(1H，m，H-1′)，4.268(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝6.8Hz，H-5)，3.408(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝6.5Hz，H-6)，3.47-3.38(1H，m，H-4)，3.23-2.91(4H，m，CH2NH2，CH2S)，2.89-2.80(2H，m，CH2CN)，1.92-1.50(4H，m，CH2CH2)和1.334ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 實(shí)施例42 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(3″-羥基丙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
在冰浴冷卻下，將得自實(shí)施例41步驟A的(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(3″-羥基丙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(661mg，1.63mmol)在CH2Cl2(66ml)中的溶液用Pd(PPh3)4(132mg，0.110mmol)處理，然后用0.5M2-乙基己酸鈉溶液(3.3ml，1.7mmol)滴加處理。將混合物攪拌50分鐘，用乙醚(250ml)稀釋，用0.04M pH7磷酸鹽溶液(3×10ml)提取。合并水提取液，用乙醚(2×50ml)洗滌，用1M NaH2PO4緩沖水溶液將pH值降至5.9。向該混合物((4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-(2-氰基乙硫基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸的鈉鹽粗品)中加入30%Pd/硅藻土(660mg)，然后在5℃(冰浴，初始溫度;最終溫度為15℃)下和45-50psi氫壓下在帕爾氫化器上振蕩1小時(shí)。濾除催化劑，用水(2×10ml)洗滌。水溶液通過μ-Bondapak C18反相柱(165g，H2O→1%CH3CN)，得到實(shí)施例41的3-氨基丙基化合物和3-羥基丙基標(biāo)題化合物的74∶26混合物(363mg)。將該混合物再次通過反相柱(180g，pH6.0，0.01M磷酸鹽緩沖液)，得到兩種含磷酸鹽的衍生物。
通過反相層析(H2O)除去3-羥基丙基化合物的鹽，冷凍干燥后，得到了粉狀標(biāo)題化合物(85mg，14%)。
純度92.5%(HPLC 300nm); IR(液體石蠟)νmax1745和1695cm-1(C＝O); UV(H2O)λmax302(9600); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.34-4.21(1H，m，H-1′);4.270(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝12.0Hz，H-5)，3.65，2H，bt，J＝6.0Hz，CH2O)，3.450(1H，dd，J＝2.5Az，J＝6.0Hz，H-6);3.45-3.35(1H，m，H-4)，3.25-3.06，3.03-2.9(2H，2 組 m，SCH2)，2.88-2.80(2H，m，CH2CN)，1.94-1.41(4H，m，CH2CH2)和1.331ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例43 (4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-亞胺甲基)氨基丙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下，向從實(shí)施例41中得到的(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(135mg，0.400mmol)在0.04M pH 7.0磷酸鹽緩沖水溶液(25ml)中的溶液中加入0.1N NaOH水溶液將pH調(diào)至8.2-8.4，分批加入甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(685mg，4.00mmol)，同時(shí)將水性混合物的pH值保持在8.0-8.4。將混合物攪拌10分鐘，然后用0.1N HCl水溶液將pH值降至7.0。將該溶液通過μ-Bondapak C18反相柱(30g，H2O→1%，2%CH3CN/H2O)兩次，冷凍干燥后，得到粉狀標(biāo)題化合物(99mg，69%)。
純度97.8%(HPLC 300nm); UV(H2O)λmax300(9350); IR(液體石蠟)νmax1760(C＝O)，1710(C＝N)和1590cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ7.83，7.81(1H，2s，CH)，4.725(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝6.1Hz，H-5)，4.31-4.20(1H，m，H-1′)，3.50-3.35(4H，m，H-4，H-6和CH2N)，3.22-3.08和3.02-2.91(2H，2 組 m，SCH2)，2.89-2.80(2H，m，CH2CN)，1.92-1.50(4H，m，CH2CH2)和1.323ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例44 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(3″-疊氮基丙基)-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯〔由實(shí)施例21步驟A中制得的(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-疊氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(4.0g，11mmol)與Rh(OAc)2(100mg)在苯(300ml)中加熱回流45分鐘制得〕在CH3CN(100ml)中的溶液用氯磷酸二苯基酯(2.6ml，12mmol)、N，N-二異丙基乙胺(2.2ml，12mmol)和4-N，N-二甲基氨基吡啶(20mg)滴加處理。將混合物攪拌1小時(shí)，然后用4-吡啶甲硫酯(2.07g，16.5mmol)和N，N-二異丙基乙胺(3.1ml，17mmol)處理，并在5℃下保持18小時(shí)。用乙酸乙酯(300ml)稀釋混合物，用冷的1M NaHCO3水溶液(1×100ml)、H2O(2×100ml)、1M NaHSO3水溶液(1×100ml)、水(2×100ml)和鹽水(100ml)洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物(5g)通過閃式硅膠墊(150g，己烷/EtOAc→CH3CN)，得到油狀標(biāo)題化合物(3.0g，62%)。
IR(CH2Cl2)νmax3680-3600(OH)，2100(N3)，1780和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.58-8.55(2H，m，芳族 -H)，7.29-7.20(2H，m 芳族 H)，6.06-5.86(1H，m，乙烯基 -H)，5.49-5.22(2H，m，乙烯基 -H)，4.89-4.63(2H，m，烯丙基 -CH2)，4.27-4.14(1H，m，H-1′)，4.109(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.6Hz，H-5)，4.10，4.03，3.98，3.91(2H，ABq，J＝14.2Hz，CH2- 芳族)，3.43-3.22(2H，m，CH2-N)，3.200(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.6Hz，H-6)，3.10-2.98(1H，m，H-4)，2.19(1H，bs，OH)，1.91-1.43(4H，m，CH2CH2-4)和1.360(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
在冰浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(3.0g，6.8mmol)在CH2Cl2(50ml)中的溶液用Pd(PPh3)4(150mg)和0.5M2-乙基己酸鈉的乙酸乙酯溶液(14ml，7mmol)處理。將混合物攪拌60分鐘，然后用己烷/乙醚(1/1)稀釋，用0.05M磷酸鹽緩沖水溶液(1×100ml和2×25ml)提取。合并水層，用乙醚(100ml)洗滌，然后通過μ-Bondapak C18柱(300g，H2O→5%CH3CN/H2O)，得到標(biāo)題化合物(0.8g，30%); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.50-8.46(2H，m，芳族 -H)，7.50-7.20(2H，m，芳族 -H)，4.28-4.15(1H，m，H-1′)，4.19，4.11，4.03，3.95(2H，ABq，J＝14.6Hz，CH2-芳族)，4.073(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.37-3.29(3H，m，H-6和CH2N)，3.16-3.06(1H，m，H-4)，1.8-1.38(4H，2 組 m，CH2CH2-4)和1.288ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在5℃(冰浴)和45-50psi氫壓下，用5%Pd/氧化鋁(540mg)為催化劑，將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉(270mg，0.60mmol)在水(55ml)中的冷溶液在帕爾氫化器上振蕩2.5小時(shí)。濾除催化劑，水溶液通過μ-Bondapak C18反相柱(50g，H2O→7%CH3CN/H2O)，冷凍干燥后，得到粉狀標(biāo)題化合物(127mg，53%); 純度97.2%(HPLC，300nm); UV(H2O)λmax262(ε 5210)，304(ε 7950); IR(液體石蠟)νmax3600-3100(OH)，1760和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.49-8.46(2H，m，芳族 -H)，7.52-7.24(2H，m，芳族 -H)，4.28-4.16(1H，m H-1′)，4.16，4.08，4.02，3.94(2H，ABq，J＝14.6Hz，CH2-芳族)，4.076(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.5Hz，H-6)，3.20-3.10(1H，m，H-4)，3.00-2.93(2H，m，CH2N)，1.80-1.38(4H，m，CH2CH2-4)和1.292ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例45 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.6-疊氮基己酰氯 在22℃下，用30分鐘時(shí)間，將草酰氯(88.0ml，1.0mmol)滴加到6-疊氮基己酸(151g，0.96mmol)〔M.Rothe和K.Gehrke，Makromol.Chem.，83，1(965);C.A.644934d〕在無水CH2Cl2(500ml)中的溶液中。2小時(shí)后，加入兩滴N，N-二甲基甲酰胺，將該溶液在22℃和氮?dú)夥障聰嚢?8小時(shí)。然后減壓下蒸發(fā)溶劑，得到透明油狀的酰氯粗品，將其照原樣用于下一步反應(yīng)。
IR(NaCL，壓片)νmax2100(N3)和1800cm-1(C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.3-1.9(m，6H，CH2-3，4和5)，2.9(t，J＝7Hz，2H，CH2-2)和3.3ppm(t，J＝6.5Hz，2H，CH2-6). B.6-(疊氮基)硫羥己酸2-吡啶甲基酯
將2-吡啶甲硫醇(130.6g，1.04mol)在無水CH2Cl2(1.3l)中的溶液冷卻至0-5℃，在1小時(shí)時(shí)間內(nèi)將吡啶(85ml，1.05mol)和6-疊氮基己酰氯(179g，1.02mol)在CH2Cl2(200ml)中的溶液滴加到上述溶液中。在0-5℃下保持另外1小時(shí)后，有機(jī)相用水、飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到244g(90%)透明油狀的硫酯，將其照原樣用于下一步反應(yīng)中。
IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)和1680cm-1(硫酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.3-1.8(m，6H，CH2-3，4，和5)，2.6(t，J＝7.34Hz，2H，CH2-2)，3.25(t，J＝6.7Hz，2H，CH2-6)，4.25(s，2H，SCH2)，7.16(m，1H，吡啶的H-5)，7.33(d，J＝7.8Hz，1H，吡啶的H-3)，7.62(m，1H，吡啶的H-4)和8.53ppm(m，1H，吡啶的H-6). C.6-(疊氮基)硫羥己酸2-吡啶甲基酯的O-叔丁基二甲基硅基醚
將6-(疊氮基)硫羥己酸2-吡啶甲基酯(244g，0.92mol)在1l無水CH2Cl2中的溶液冷卻至-10℃，先用三乙胺(260ml，1.86mol)處理，接著在40分鐘內(nèi)向其中滴加三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯(318ml，1.38mol)。將混合物的溫度升至22℃，攪拌3小時(shí)。然后用己烷類(1.5l)稀釋混合物，用冷水(2×1l)、飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。將溶液用活性炭(中性)處理，過濾，減壓濃縮。用己烷類(1.5l)提取殘留的黑色焦油狀物，蒸發(fā)提取液，得到315g(90%)黑色油狀的甲硅烷基烯醇醚粗品，將其照原樣用于偶聯(lián)步驟中，1H-NMR表明，該物質(zhì)為E和Z異構(gòu)體的1∶1混合物。
IR(NaCl，壓片)νmax2090(N3)，1625和1590cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.2和0.24(2 x s，6H，SiCH3)，0.97和0.98(2 x s，9H，Si t-Bu)，1.2-1.8(m，4H，CH2-4和5)，2.0(m，2H，CH2-CH＝C)，3.17(m，2H，CH2N3)，3.95和4.03(2 x s，2H，SCH2)，4.82和4.97(2 x t，1H，J＝7.26Hz，和J＝7.58Hz，2 x 1H，CH2-CH＝C)，7.14(m，1H，吡啶的H-5)，7.26(m，1H，吡啶的H-3)，7.6(m，1H，吡啶的H-4)和8.55ppm(m，1H，吡啶的H-6). D.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-5″-疊氮基戊基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
向新熔融的氯化鋅(151g，1.1mol)在無水二氯甲烷(2.6l)中的冷(0-5℃)懸浮液中先加入238g(0.83mol)(3S，4R)-4-乙酰氧基-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮，然后加入6-(疊氮基)硫羥己酸2-吡啶甲基酯的O-叔丁基二甲基硅基醚粗品(315g，0.83mol)在無水二氯甲烷中的溶液。將溶液的溫度緩慢升至22℃(～3小時(shí))，再將所得的均相混合物攪拌18小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物用水、飽和NH4Cl、飽和NaHCO3、水和鹽水依次洗滌。干燥(MgSO4)后，蒸發(fā)溶劑，得到494g暗色油狀物，將其照原樣用于下一步反應(yīng)中。1H-NMR分析表明，該粗產(chǎn)物為1′R和1′S-戊基化合物的8∶2混合物。在硅膠上用甲苯-EtOAc(1∶1)洗脫對一小部分產(chǎn)物進(jìn)行純化，得到純的白色晶狀的標(biāo)題化合物m.p.＝81-83℃(己烷類) UV(EtOH)λmax236(5576)和264nm(4，989); IR(KBr)νmax2100(N3)，1758(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1718(酯的C＝O)和1680cm-1(硫酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)，δ0.04(s，6H，SiCH3)，0.85(s，9H，Sit-Bu)，0.99(d，J＝6.32Hz，3H，CH3CHO)，1.2-2.0(m，6H，戊基的CH2-2，3和4)2.79(m，1H，戊基的H-1)，3.04(寬 s，1H，氮雜環(huán)丁酮的H-3)，3.23(t，J＝6.56Hz，2H，CH2N3)，3.80(dd，JH3，H4＝2.08Hz，JH3，H1＝6.97Hz，1H，氮雜環(huán)丁酮的H-3)，4.14(m，1H，CH3CHO)4.26(s，2H，SCH2)，5.85(寬 s，1H，NH)，7.18(m，1H，吡啶的H-5)，7.32(d，J＝7.8Hz，1H，吡啶的H-3)，7.62(m，1H，吡啶的H-4)和8.5ppm(m，1H，吡啶的H-6). 分析計(jì)算值 C23H37N5O3SSi C，56.18;H，7.58;N，14.24. 實(shí)測值 C，56.25;H，7.59;N，14.10. E.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-5″-疊氮基戊基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
將(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-5″-疊氮基戊基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(～400g，0.83mol)在3l四氫呋喃中的溶液冷卻至0℃，小心地分批加入30%過氧化氫(1l，11.6mol)進(jìn)行處理，然后用2小時(shí)時(shí)間滴加2.8l 1M NaOH。將溶液在0-5℃下再攪拌2小時(shí)，然后用3N HCl(～1l)酸化至pH2.0。將反應(yīng)混合物用EtOAc(2l和3×1l)提取，合并提取液用水、1M NaHSO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到暗色油狀物，將油狀物溶于己烷類(1l)中，用飽和NaHCO3(4×1l)提取。合并水相，冷卻至0-5℃，用3N HCl酸化至pH2。收集形成的白色沉淀，用水洗滌。將濕濾餅溶于CH2Cl2中，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)后得到114g粗產(chǎn)物。用乙酸乙酯和己烷類的混合物結(jié)晶，得到67.4g(21%)的純的白色片狀的標(biāo)題酸;m.p.＝132-133℃。
IR(KBr)νmax3280(NH)，2500(COOH)，2110(N3)，1760(sh)，1715和1690cm-1(酸和β-內(nèi)酰胺的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.06和0.07(2 x s，2 x 3H，SiCH3)，0.87(s，9H，Si t-Bu)，1.17(d，J＝6.29Hz，3H，CH3CHO)，1.4-1.8(m，6H，戊基的CH2-2，3和4)，2.64(m，1H，戊基的H-1)，3.14(m，1H，H-3)，3.29(t，J＝6.5Hz，2H，CH2N3)，3.87(dd，JH4，H3＝1.90Hz，JH4，H1＝6.22Hz，1H，H-4)，4.20(dq，JH，CH3＝6.29Hz，JH，H3＝4.04Hz，1H，CH3CHO)，和6.46ppm(s，1H，NH). 分析計(jì)算值 C17H32N4O4S C，53.10;H，8.39;N，14.57. 實(shí)測值 C，53.08;H，8.12;N，14.56. F.(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(4-疊氮基丁基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在22℃和氮?dú)夥障?，?，1-羰基二咪唑(31.1g，0.192mol)處理(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-5″-疊氮基戊基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(67.0g，0.174mol)在無水CH3CN(1.5l)中的懸浮液，并將所得混合物攪拌2小時(shí)。然后減壓濃縮所述溶液，得到油狀的咪唑烷粗品IR(NaCl，壓片)2100(N3)，1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1730(咪唑烷的C＝O)。
將咪唑烷粗品在無水CH3CN(200ml)中的溶液加到無水的丙二酸單烯丙酯鎂(87.0g，0.28mol)在苯(1.4l)中的溶液中，并將所得混合物在60-65℃下攪拌16小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，用乙酸乙酯(1l)稀釋，依次用冷水、0.1N HCl、飽和NaHCO3、水和鹽水洗滌。干燥(MgSO4)后蒸發(fā)溶劑，得到80.3g油狀酮酯粗品，將該粗品直接用于下一步反應(yīng)。在硅膠上對一小部分粗品進(jìn)行純化，得到透明油狀的純標(biāo)題化合物。1H-NMR表明，該產(chǎn)物為酮和烯醇形式的1∶1混合物。
IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)，1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1715cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.05和0.06(2 x s，6H，SiCH3)，0.86(s，9H，Si t-Bu)，1.10和1.17(2d，J＝6.33Hz，和J＝6.28Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.1-2.3(m，1H，丁基的H-1)，1.2-2.3(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.9和2.97(2 x m，1H，氮雜環(huán)丁酮的H-3)，3.27(寬 t，2H，CH2N3)，3.54(s，氧代丙基的酮形式的CH2-3)，3.83(兩個(gè)重疊 dd，1H，氮雜環(huán)丁酮的H-4)，4.17(m，1H，CH3CHO)，4.64(m，2H，烯丙基的CH2)，5.07(s，氧代丙基烯醇形式的CH-3)，5.2-5.4和5.8-6.0(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)和6.0ppm(寬 s，1H，NH). G.(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(4-疊氮基丁基)-3″-烯丙氧羰基-3″-重氮基-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
將(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(4-疊氮基丁基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮粗品(79g，0.169mol)在乙腈(400ml)中的溶液冷卻至0-5℃，用對甲苯磺酰基疊氮(40g，0.20mol)在乙腈(500ml)中的溶液處理。然后滴加三乙胺(28.3ml，0.20mmol)(5分鐘)，并將所得混合物攪拌2小時(shí)。減壓下濃縮溶劑，殘留物用乙醚和己烷類的1∶1混合物研制。濾集對甲苯磺酰胺結(jié)晶，蒸發(fā)濾液，得到油狀的標(biāo)題重氮基化合物(86g)。將該物質(zhì)直接用于甲硅烷基醚的斷裂反應(yīng)中。
在硅膠上對部分粗產(chǎn)物(30g)進(jìn)行純化(9×13cm，己烷類-EtOAc，9∶1→7∶3洗脫)，得到17.5g透明油狀的標(biāo)題重氮基氮雜環(huán)丁酮(相應(yīng)于從酸計(jì)算得到的59%收率(兩步))。
IR(NaCl，壓片)νmax2140(N2)，2100(N3)，1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1720(酯的C＝O)和1650cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.05和0.06(2 x s，2 x 3H，Si CH3)，0.86(s，9H，t-Bu)，1.17(d，J＝6.31Hz，3H，CH3CHO)，3.04(m，1H，氮雜環(huán)丁酮的H-3)，3.25(m，2H，CH2N3)，3.84(dd，JH4，H3＝2.09Hz，JH4，H1＝5.33Hz，1H，氮雜環(huán)丁酮的H-4)，4.07(m，1H，氧代丙基的H-1)，4.17(dq，JH，CH3＝6.31Hz，JH，H3＝3.94Hz，1H，CH3CHO)，4.72(m，2H，烯丙基的CH2)，5.3-5.4和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，和5.84ppm(s，1H，NH). H.(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(4-疊氮基丁基)-3″-烯丙氧基羰基-3″-重氮基-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在24℃下，用1N HCl(100ml)處理(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(4-疊氮基丁基)-3″-烯丙氧基羰基-3″-重氮基-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(17.5g，35.5mmol)在乙醇(300ml)中的溶液并在暗處攪拌16小時(shí)。用Na2CO3中和反應(yīng)混合物，減壓濃縮。用乙酸乙酯(500ml和250ml)提取殘留的水溶液，合并有機(jī)相，用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到固體，從乙醚-己烷類中結(jié)晶并將母液在硅膠上用乙酸乙酯純化后，得到11.8g(88%)白色針狀的標(biāo)題化合物m.p.＝73-74℃。
UV(EtOH)λmax260nm(8，365); IR(KBr)νmax3350(OH)，2160(N2)，2080(N3)，1738(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1716(酯的C＝O)和1650cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.30(d，J＝6.33Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.28(d，J＝3.8Hz，1H，OH)，3.0(dd，JH3，H4＝2.0Hz，JH3，H1＝6.97Hz，1H，氮雜環(huán)丁酮的H-3)，3.27(t，J＝6.58 Hz，2H，CH2N3)，3.8(dd，JH4，H3＝2.0Hz，JH4，H1＝6.55Hz，1H，H-4)，3.95(m，1H，氧代丙基的H-1)，4.15(m，1H，CH3CHO)，4.73(m，2H，烯丙基的CH2)，5.3-5.4和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)和6.0ppm(寬 s，1H，NH). 分析計(jì)算值 C16H22N6O5 C，50.79;H，5.86;N，22.21. 實(shí)測值 C，50.87;H，5.87;N，22.31. I.(2R，4R，5R，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
在氮?dú)夥障拢瑢?3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(4-疊氮基丁基)-3″-烯丙氧基羰基-3″-重氮基-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(1.88g，4.97mmol)在無水苯(60ml)中的溶液用辛酸銠(Ⅱ)二聚體(0.050g)處理，并加熱回流(浴溫90℃)20分鐘。然后減壓下蒸發(fā)溶劑，得到油狀的標(biāo)題雙環(huán)酮。
IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)，1762(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1745cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.41(d，J＝6.26Hz，3H，CH2CHO)，1.4-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.7(m，1H，H-4)，3.2-3.4(m，3H，H-6和CH2N3重疊)，4.28(dd，JH5，H6＝2.37Hz，JH5，H4＝8.15Hz，1H，H-5)，4.3(m，與H-5重疊，1H，CH3CHO)，4.65(s，1H，H-2)，4.65(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.4和5.8-6.0ppm(2 x m，2和1H，烯丙基的CH). J.(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(2R，4R，5R，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(4.97mmol)在無水CH3CN(30ml)中的溶液冷卻至0-5℃，用10分鐘時(shí)間同時(shí)滴加氯磷酸二苯基酯(1.40g，5.21mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.91ml，5.21mmol)。然后加入少許4-N，N-二甲基氨基吡啶晶粒，并將混合物攪拌1小時(shí)。加入另外的N，N-二異丙基乙胺(1.3ml，7.4mmol)，接著加入3-吡啶甲硫醇(0.93g，7.4mmol)。然后將反應(yīng)混合物在0-5℃下攪拌4小時(shí)，最后加入乙酸乙酯(300ml)和冷水驟冷反應(yīng)混合物。用pH7.0磷酸鹽緩沖液和鹽水洗滌有機(jī)相，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到油狀物。將油狀物在硅膠(3.5×10cm)上用乙酸乙酯洗脫層析，得到1.41g(62%)油狀標(biāo)題化合物。
IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)，1770(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1705m-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.26Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.1(m，1H，H-4)，3.16(dd，JH6，H5＝2.72Hz，JH6，H1＝7.33Hz，1H，H-6)，3.32(t，J＝6.0Hz，2H，CH2N3)，4.02(ABq，2H，SCH2)，4.14(dd，JH5，H6＝2.72Hz，JH5，H4＝9.56Hz，1H，H-5)，4.22(m，1H，CH3CHO)，4.75(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，7.3(m，1H，吡啶的H-5)，7.7(m，1H，吡啶的H-4)和8.5ppm(m，2H，吡啶的H-2和H-6). K.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在22℃和氮?dú)夥障?，用?三苯膦)鈀〔O〕(0.050g)和5.4ml(2.7mmol)0.5M2-乙基己酸鉀的乙酸乙酯溶液處理(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.12g，2.45mmol)在乙酸乙酯(40ml)中的溶液。20分鐘后，用冷水(3×20ml)提取反應(yīng)混合物，合并水相，將水相保持在減壓下以除去痕量有機(jī)溶劑。然后在0-5℃和45psi氫壓下用5%Pd/氧化鋁(1.2g)將水相氫化1.5小時(shí)(初始pH6.8，最終pH9.6)。加入20ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液后，濾出催化劑，濾液在反相硅膠(μ-Bondapak C18，3×14cm)上層析，用0-10%乙腈水溶液梯度洗脫，冷凍干燥后，得到0.489g(51%)的白色非晶形粉狀的標(biāo)題化合物〔α〕22D-3.5°(c1.0，H2O); HPLC純度98.7%，μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速1ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間9.6分鐘; UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax268(5740)和306nm(8810); IR(KBr)νmax1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1585cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.29(d，J＝6.33Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.96(t，J＝7.6Hz，2H，CH2N3)，3.15(m，1H，H-4)，3.29(dd，JH6，H5＝2.54Hz，JH6，H1＝6.36Hz，1H，H-6)，4.07(ABq，JAB＝14.2Hz，Δν＝24.3Hz，2H，SCH2)，4.07(與SCH2重疊，1H，H-5)，4.22(m，1H，CH3CHO)，7.44(dd，JH5，H6＝4.95Hz，JH5，H4＝7.9Hz，1H，吡啶的H-5)，7.88(m，1H，吡啶的H-4)，8.43(dd，JH6，H5＝4.95Hz，JH6，H4＝1.52Hz，1H，吡啶的H-6)和8.52ppm(d，JH2，H4＝1.75ppm，1H，吡啶的H-2). 實(shí)施例46 (4R，5S，6S)-4-(4″-N-亞胺甲基氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
用1M NaOH將得自實(shí)施例45的(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.175g，0.45mmol)在冷(0-5℃)水(15ml)中的溶液的pH值調(diào)至8.5。然后用10分鐘時(shí)間分小批加入甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(0.38g，2.2mmol)，同時(shí)用1M NaOH將pH值保持在8-8.5。在0-5℃下保持另外20分鐘后，加入20ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液，并用EtOAc(20ml)洗滌混合物。然后將水相保持在減壓狀態(tài)下以除去痕量有機(jī)溶劑。在反相硅膠(μ-Bondapak C18，2×14cm)上用0-5%的乙腈水溶液為梯度洗脫劑對水相層析兩次。對UV活性級分進(jìn)行冷凍干燥，得到0.120g(64%)白色非晶形固狀的標(biāo)題化合物〔α〕24D-3.2°(c0.5，H2O); HPLC純度99%，μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，10% CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速2ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間6.44分鐘。
UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax266(6，300)和304nm(9，600); IR(KBr)νmax1755β-內(nèi)酰胺的C＝O，1715和1590cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.28(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.2(m，3H，H-6和CH2NH2)，4.07(與SCH2重疊，1H，H-5)，4.07(ABq，JAB＝14.3Hz，Δν＝23.5Hz，2H，SCH2)，4.22(m，1H，CH3CHO)，7.44(m，1H，吡啶的H-5)，7.79(s，1H，CH＝NH)，7.89(m，1H，吡啶的H-4)，8.43(m，1H，吡啶的H-6)和8.52ppm(m，1H，吡啶的H-2). 實(shí)施例47 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-(3-氰基丙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在-15℃和氬氣氛下，用5分鐘時(shí)間將氯磷酸二苯酯(1.4ml，6.75mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.2ml，6.9mmol)同時(shí)滴加到(4R，5R，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(6.46mmol，由實(shí)施例2步驟E中制得的3.0g，6.46mmol重氮基前體環(huán)化制得)在無水乙腈(50ml)中的溶液中。然后加入少許4-N，N-二甲基氨基吡啶晶粒，并用30分鐘將混合物的溫度緩慢升至0-5℃。加入N，N-二異丙基乙胺(1.2ml，6.9mmol)和4-巰基丁腈(1.31g，13.0mmol)〔由4-乙酰硫基丁腈的四氫呋喃水溶液經(jīng)堿性水解得到(U.S.3，223，585)〕，并將混合物在0-5℃下攪拌4小時(shí)，然后在-15℃下攪拌過夜。用乙酸乙酯(300ml)稀釋反應(yīng)混合物，用水、1M NaHSO3、飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到油狀物。將油狀物在硅膠(5×15cm)上層析，用EtOAc/甲苯(1∶9)洗脫，得到2.62g(78%)的棕色油狀的標(biāo)題化合物。
IR(NaCl，壓片)νmax2250(CN)，2100(N3)，1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O). 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.10(s，6H，SiCH3)，0.90(s，9H，Si-t-Bu)1.31(d，3H，J＝6.11Hz，CH3CHO)，1.7-2.12(m，4H，CH2-4和CH2CH2-CN)，2.4-3.12(m，SH，CH2-S，CH2CN和H-6)，3.32-3.7(m，3H，CH2N3和H-4)，4.16(dd，J4-5＝9.6Hz，J5-6＝2.70Hz，1H，H-4)，4.21(dd，J6-8＝7.47Hz，J8-9＝6.2Hz，CH3CHO)，4.75(m，2H，烯丙基的CH2)，5.20-6.50和5.96(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在0-5℃和氬氣氛下，將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(2.48g，4.77mmol)在無水THF(75ml)中的溶液先用乙酸(1.64ml，28.6mmol)處理，然后用14.9ml(14.8mmol)的1M氟化四丁銨四氫呋喃溶液處理。將該溶液在5℃下儲存4.5天。然后用EtOAc稀釋反應(yīng)混合物，用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到油狀物。將油狀物在硅膠(5×15cm)上用甲苯/EtOAc(9∶11)洗脫層析，得到0.91g(37%，基于重氮基氮雜環(huán)丁酮計(jì)算的收率)黃色油狀的標(biāo)題化合物。
IR(NaCl，壓片)νmax3500(OH)，2250(CN)，2100(N3)，1775β-內(nèi)酰胺的C＝O和1705cm-1(羧酸酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.40(d，3H，J＝6.21Hz，CH3CHO)，1.6-2.15(m，4H，CH2CH2CN和CH2-4)，2.55(m，2H，CH2CN)，2.85-3.09(m，2H，SCH2)，3.18(dd，1H，J6-8＝7.84Hz，J5-6＝2.66Hz，H-6)，3.37-3.67(m，3H，H-4和CH2N3)，4.26(m，與H-5重疊，1H，CH3CHO)，4.26(dd，J4，5＝9.70Hz，J5-6＝2.61Hz，1H，H-5)，4.78(m，2H，烯丙基的CH2)，5.24-5.30和5.96(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
在0-5℃和氬氣氛下，用四(三苯膦)鈀〔O〕(123mg)和4.9ml(2.44mmol)0.5M2-乙基己酸鈉的乙酸乙酯溶液處理(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(900mg，2.22mmol)在無水CH2Cl2(47ml)中的溶液。然后加入190ml 0.1M磷酸鹽緩沖液，分離有機(jī)層。有機(jī)相再用50ml水提取兩次，合并水層，減壓除去有機(jī)溶劑。在反相硅膠(Bondapak C-18，7×10.5cm)上用0-7%乙腈水溶液梯度洗脫層析后，將UV活性級分冷凍干燥，得到580mg(66%)標(biāo)題化合物，其中混有少量的2-乙基己酸鈉。將該物質(zhì)直接用于下一步反應(yīng)。
IR(NaCl，壓片)νmax2250(CN)，2105(N3)，1750(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1600(羧酸鹽的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.31(d，J＝6.40Hz，3H，CH3CHO)，1.71-2.01(m，4H，CH2CH2CN和CH2-4)，2.73和2.74(2t，J＝6.94和J＝7.04，2H，CH2CN)，2.80-3.19(m，2H，SCH2)，3.35-3.67(m，4H，CH2N3，H-4和H-6)，4.29-4.42(m，2H，H-5和CH3CHO). D.(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃和45psi氫壓下，用250mg 5% Pd/氧化鋁將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉(250mg，0.64mmol)在水中的溶液氫化1小時(shí)。濾出催化劑，濾液在反相硅膠(Bondapak C-18，7×10.5cm)上用水為洗脫劑層析，將UV活性級分冷凍干燥，得到18mg(8%)的淺黃色非晶形固狀的標(biāo)題化合物(其中混有少量的2-乙基己酸鈉)和129mg(59%)的灰白色非晶形粉狀的純標(biāo)題化合物。
HPLC純度97%，μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，2% CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速1ml/分，UV檢測器302nm，保留時(shí)間5.24分鐘。
UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(5982); IR(KBr)νmax2250(CN)，1760β-內(nèi)酰胺的C＝O和1590cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.75-2.30(m，4H，CH2CH2CN和CH2-4)，2.63(t，J＝7.07 Hz，2H，CH2CN)，2.69-3.19(m，4H，SCH2和CH2NH2)，3.41(m，與H-6重疊，1H，H-4)，3.44(dd，J1′-6＝6.6Hz，J5-6＝2.85Hz，H-6)，4.21-4.33(m，2H，H-5和CH3CHO). 實(shí)施例48 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將如實(shí)施例2制得的(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-4-(2″-疊氮基乙基)-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(4.7g，10.76mmol)在CH3CN(50ml)中的冷(0℃)溶液先用氯磷酸二苯基酯(2.45ml，11.84mmol)處理，然后用N，N-二異丙基乙胺(2.06ml，11.84mmol)和4-N，N-二甲基氨基吡啶(10mg)處理。將混合物在0℃和氬氣氛下攪拌2小時(shí)，然后向溶液中鼓入氬氣泡10分鐘。將烯醇磷酸酯用在CH3CN(10ml)中的4-吡啶甲硫醇(2.02g，16.15mmol)處理，然后用N，N-二異丙基乙胺(2.81ml，16.15mmol)處理，再在0℃下攪拌3小時(shí)。用EtOAc(350ml)稀釋反應(yīng)混合物，依次用冷的1M NaHSO3、1M NaHCO3和鹽水洗滌。干燥(MgSO4)有機(jī)相，蒸發(fā)溶劑，得到糖漿狀物，在用CH2Cl2填充的硅膠柱(7.5×11cm)上用CH2Cl2和EtOAc的混合物(8∶2梯度)洗脫層析，得到糖漿狀標(biāo)題化合物(2.28g，39%)。
1H NMR(200MHz，CDCl37.24)δ0.04(s，3H，SiCH3)，0.06(s，3H，SiCH3)，0.86(s，9H，SiC(CH3)3)，1.27(d，CH3，JCH3，1′＝6.12Hz)，1.63-1.76(m，1H，CH2)，1.93-2.05(m，1H，CH2)，3.02(dd，H-6，J5，6＝2.68Hz，J6，1′＝7.91Hz)，3.18-3.67(重疊，3H，H-4，CH2N3)，3.9-4.17(重疊，4H，CHOH，H-5，SCH2)，4.6-4.85(m，OCH2，烯丙基)，5.2-5.47(m，＝CH2，烯丙基)，5.84-6.03(m，CH＝，烯丙基)，7.29(A of A2B2，H-3，5 py，J2，3＝5.98Hz)，8.56(B of A2B2，H-2，6 py). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在氬氣氛下，將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(2.26g，4.16mmol)在無水THF(35ml)中的冷(0℃)溶液先用乙酸(1.43ml，24.94mmol)處理，然后用1M氟化四丁銨四氫呋喃溶液(12.47ml，12.47mmol)處理。將混合物在0-5℃下攪拌120小時(shí)，然后在0℃下用1M NaHCO3溶液(25ml，25mmol)中和。將混合物用EtOAc(3×75ml)提取，合并有機(jī)相，依次用冷的1M NaHCO3溶液、H2O和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)溶劑后，得到粘性泡沫體。將該泡沫體在用CH2Cl2填充的硅膠(4.5×1l)上層析，先用CH2Cl2和EtOAc的混合物(50→100%EtOAc)洗脫，然后用CH3CN和EtOAc的混合物(1∶1梯度)洗脫，得到泡沫狀標(biāo)題化合物(1.23g，69%)。
1H NMR(200MHz，CDCl37.24)δ1.36(d，CH3，JCH3，1′＝6.23Hz)，1.64-1.79(m，1H，CH2)，1.94-2.09(m，1H，CH2)，3.09(dd，H-6，J5，6＝2.78Hz，J6，1′＝8.08Hz)，3.19-3.65(重疊，3H，H-4，CH2N3)，3.88-4.23(重疊，4H，CHOH，H-5，SCH2)，4.61-4.88(m，OCH2，烯丙基)，5.21-5.47(m，＝CH2，烯丙基)，5.85-6.04(m，CHO，烯丙基)，7.28(A of A2B2，2H，H-3，5，py，J2，3＝6.01Hz)，8.56(B of A2B2，2H，H-2，6;py). C.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
在氬氣氛下，向(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.23g，2.86mmol)在CH2Cl2(25ml)中的冷(0℃)溶液中先加入Pd〔Ph3P〕4(0.3g，0.26mmol)，接著加入0.5M2-乙基己酸鈉的乙酸乙酯溶液(5.73ml，2.86mmol)。將混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，然后用水(3×25ml)提取。合并水相，使之通過μ-Bondapak C-18反相硅膠柱(4.5×11cm)，用水和CH3CN的混合物(9∶1，梯度)洗脫標(biāo)題化合物，冷凍干燥后，得到蓬松固狀的標(biāo)題化合物(0.69g，58.5%)。
1H NMR(200MHz，D2O)δ1.29(d，CH3，JCH3，1′＝6.37Hz)，1.6-1.78(m，1H，CH2)，1.93-2.09(m，1H，CH2)，3.14-3.58(重疊，3H，H-4，CH2N3)，3.4(dd，H-6，J5，6＝2.64Hz，J6，1′＝6.22Hz)，3.96-4.28(重疊，4H，CHOH，H-5，SCH2)，7.5(A of A2B2，H-3，5，py，J2，3＝5.35Hz)，8.49(br s，B of A2B2，H-2，6，py). D.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0℃和45psi氫壓下，用5%Pd/氧化鋁(0.32g)將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉(0.16g，0.39mmol)在40ml 0.05M pH7磷酸鹽緩沖液中的溶液氫化1小時(shí)。除去催化劑后，使濾液通過μ-Bondapak C-18反相硅膠(4.5×11cm)。用水和CH3CN的混合物(95∶5，梯度)洗脫標(biāo)題化合物，冷凍干燥后，得到一蓬松固體(0.044g，31.4%)。
HPLC純度95.9%;UV檢測設(shè)置在302nm，μ-Bondapak C-18(4mm×30cm)，10% CH3CN的pH7.4磷酸鹽緩沖液溶液，流速1ml/分，保留時(shí)間7.24分鐘。
IR(液體石蠟)νmax1750cm-1(β-內(nèi)酰胺). 1H NMR(D2O，200MHz)δ1.31(d，CH3，JCH3，1′＝6.35Hz)，1.65-1.85(m，1H，CH2)，2.04-2.22(m，1H，CH2)，3.04(t，2H，CH2NH2)，3.19(dt，H-4，J4，5＝10.05，J＝3.44Hz)，3.4(dd，H-6，J5，6＝2.8Hz，J6，1′＝6.52Hz)，3.99，4.13(AB，SCH2，Jgem＝14.39Hz)，4.11(dd，H-5)，4.24(m，H-1′)，7.46(A of A2B2，H-3，5，py，J2，3＝6.1Hz)，8.49(B of A2B2，H-2-6，py). 實(shí)施例49 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(N-嗎啉基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷卻下，將(2R，4R，5R，6S)-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(得自相應(yīng)的(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(15.0g，27.0mmol))在CH3CN(160ml)中的溶液先用氯磷酸二苯基酯(6.2ml，30mmol)處理，然后用N，N-二異丙基乙胺(5.2ml，30mmol)和4-二甲氨基吡啶(20mg)滴加處理。將混合物攪拌1小時(shí)，用2-氰基乙硫醇(2.9g，33.8mmol)和N，N-二異丙基乙胺(5.8ml，33.8mmol)處理所得的烯醇磷酸酯。將混合物攪拌30分鐘，然后以30分鐘間隔用2-氰基乙硫醇(600mg，6.7mmol×2)和N，N-二異丙基乙胺(1.16ml，6.76mmol×2)處理兩次。將混合物用EtOAc(400ml)稀釋，用冰冷的水(3×100ml)、冰冷的1M NaHSO3水溶液(100ml)、冰冷的1N HCl水溶液(100ml)、水(100ml)、冷的1M NaHCO3水溶液(100ml)、冰冷的水(100ml×2)和鹽水(100ml)洗滌，干燥(MgSO4)。將混合物通過閃式硅膠墊(250g，己烷→15%EtOAc/己烷)，得到固狀的標(biāo)題化合物(11.5g，71.6%); IR(凈態(tài))νmax2250(C＝N)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.05-5.85(1H，m，乙烯基 H)，5.49-5.21(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.55(2H，m，烯丙基 CH2)，4.27-4.18(2H，m，H-1′和H-5)，4.195(部分 H-5，d，J＝2.6Hz)，3.89-3.75(1H，m，HCH-OSi)，3.60-3.45(2H，m，H-4和HCH-OSi)，3.35-3.22，3.12-2.93(2H，2 組 m，SCH2)，3.102(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝6.3Hz，H-6)，2.70-2.60(2H，m，CH2-CN)，2.04-1.90，1.80-1.60(2H，2 組 m，CH2-4)，1.267(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.907和0.887(18H，2s，叔丁基)，0.084和0.074ppm(12H，2s，二甲基). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-羥基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(2.0g，3.36mmol)在無水THF(20ml)中的溶液先用冰乙酸(2.2ml，40mmol)處理，接著用1M氟化四丁銨四氫呋喃溶液(20ml，20mmol)滴加處理。將混合物攪拌1小時(shí)，然后使之在5℃(冷室)下反應(yīng)18小時(shí)。將混合物倒入冰冷的飽和NaHCO3(50ml)中，用乙酸乙酯(4×25ml)提取。合并有機(jī)層，用冰冷的水(25ml)、冰冷的1M NaHCO3水溶液(2×25ml)、水(2×25ml)和鹽水(25ml)洗滌，干燥(MgSO4)。使混合物通過閃式硅膠墊(50g，CH2Cl2→10，20，30，40%EtOAc/CH2Cl2)，得到半固狀的標(biāo)題化合物(1.0g，62%)。
IR(凈態(tài))νmax3600-3200(OH)，2250(C＝N)，1770和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-5.86(1H，m，乙烯基 -H)，5.50-5.22(2H，m，乙烯基H)，4.80-4.66(2H，m，烯丙基CH2)，4.222(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.8Hz，H-5)，4.25-4.19(1H，m，H-1′)，3.95-3.82，3.75-3.65(2H，2 組 m，CH2O)，3.59-3.48(1H，m，H-4)，3.31-3.16，3.09-2.94(2H，2 組 m，S-CH2)，3.184(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝6.9Hz，H-6)，2.74-2.66(2H，m，CH2-CN)，2.15-1.95，1.90-1.70(2H，2 組 m，CH2-4)，1.56(1H，s，OH)，1.290(3H，d，J＝6.2Hz，CH3)，0.891(9H，s，叔丁基)和0.090ppm(6H，s，二甲基). C.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-(N-嗎啉基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在干冰-丙酮浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-羥基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(312mg，0.650mmol)在CH2Cl2(8ml)中的溶液用N，N-二異丙基乙胺(200μl，1.72mmol)處理，并用三氟甲磺酸酐(130μl，0.773mmol)滴加處理。將混合物攪拌30分鐘，然后加入嗎啉(350μl，4.01mmol)。撤去干冰浴，代之以冰浴。將混合物攪拌3小時(shí)，然后直接加到硅膠柱上層析(15g，己烷→己烷/EtOAc→CH3CN)，得到油狀標(biāo)題化合物(420mg，100%)。
IR(凈態(tài))νmax1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.04-5.84(1H，m，乙烯基 -H)，4.85-4.62(2H，m，烯丙基-CH2)，4.192(1H，dd，J＝2.2Hz，J＝11.8Hz，H-5)，4.29，4.26，4.20(1H，m，部分H-1′)，3.70(4H，bs，CH2OCH2)，3.35-3.16(3H，m，H-4，H-6，HCHS)，3.03-2.89(1H，m，HCHS)，2.72-2.55(2H，m，CH2CN)，2.52-2.22(6H，m，(CH2)3N)，1.98-1.86(1H，m，CH-4)，1.69-1.48(1H，m，CH-4)，1.279(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.877(9H，s，叔丁基)和0.076(6H，s，二甲基). D.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(N-嗎啉基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH冷卻下，將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-(N-嗎啉基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(420mg，764mmol)在THF(8ml)中的溶液先用乙酸(560μl，9.78mmol)處理，然后用1M氟化四丁銨四氫呋喃溶液(4.55ml，4.55mmol)滴加處理。將混合物攪拌30分鐘，然后將冰-MeOH浴換成冰浴。將混合物于冷室(5℃)中放置120小時(shí)。加入固狀NaHCO3(600mg)，將混合物攪拌30分鐘，然后用4塊制備性TLC板(2mm，CH3CN)層析，得到純的標(biāo)題化合物(325mg，97%，Rf＝0.2)，其中只混有一些四丁基銨鹽。
IR(液體石蠟)νmax3600-3200(OH)，1770和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.04-5.87(1H，m，乙烯基 H)，5.49-5.24(2H，m，乙烯基 H)，4.88-4.64(2H，m，烯丙基CH2)，4.276(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝9.8Hz，H-5)，4.3-4.1(1H，m，H-1′)，3.76-3.7(4H，bm，CH2OCH2)，3.45-3.31(1H，m，H-4)，3.269(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝8.0Hz，H-6)，3.25-3.16，3.03-2.90(2H，2 組 m，SCH2)，2.72-2.35(8H，CH2CN，(CH2)3N)，2.1-1.9和1.8-1.6(2H，2 組 m，CH2)和1.388ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). E.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-(N-嗎啉基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下，向(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(N-嗎啉基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(321mg，0.737mmol)在CH2Cl2(6ml)中的溶液中加入Pd(PPh3)4(14mg)和0.5M2-乙基己酸鉀溶液(1.5ml，0.75mmol)。撤去冰浴，將混合物攪拌1小時(shí)。加入另外的Pd(PPh3)4，繼續(xù)攪拌1小時(shí)。用乙醚稀釋后，用0.05M的pH7.0和pH7.4的緩沖水溶液提取。合并水提取液，用乙醚洗滌，通過反相μ-Bondapak C-18柱(H2O，2%→4%CH3CN/H2O)，冷凍干燥后，得到粉狀標(biāo)題化合物(179mg，61.4%)。
HPLC純度99.7%(300nm); UV(H2O)λmax300(7900); IR(液體石蠟)νmax1750和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4271(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.8Hz，H-5)，4.4-4.22(1H，m，H-1′)，3.84-3.80(4H，m，CH2OCH2)，3.424(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.3Hz，H-6)，3.43-3.33(1H，m，H-4)，3.21-3.08，3.01-2.90(2H，2 組 m，SCH2)，2.90-2.6(8H，m，CH2CN，(CH2)3N)，2.2-2.0，1.90-1.70(2H，2 組 m，CH2)和1.336(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 實(shí)施例50 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷卻下，將(2R，4R，5R，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(如實(shí)施例21中所述，從(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1′R)-1′-(3-疊氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(2.00g，5.49mmol)制得)在CH3CN(40ml)中的溶液用氯磷酸二苯基酯(1.2ml，6.0mmol)、N，N-二異丙基乙胺(1.03ml，6.00mmol)和少量4-N，N-二甲基氨基吡啶滴加處理。將混合物攪拌30分鐘，所得烯醇磷酸酯用氰基丙硫醇(693mg，6.86mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.19ml，6.90mmol)滴加處理。將混合物攪拌1小時(shí)，然后將冰-MeOH浴換成冰浴，再攪拌2小時(shí)。然后再加入氰基丙硫醇(280mg，2.74mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.480ml，2.74mmol)，接著在5℃(冷室)下攪拌18小時(shí)。加入另外的硫醇(280mg，2.74mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.480ml，2.74mmol)，繼續(xù)攪拌3小時(shí)。然后，將混合物用EtOAc(100ml)稀釋，用冷的1M NaHSO3水溶液(2×40ml)、水(40ml)、1N HCl水溶液(40ml)、水(40ml)、1M NaHCO3水溶液(40ml)、水(40ml)和鹽水(40ml)洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物通過閃式硅膠柱(75g，EtOAc/己烷1/3→EtOAc)，得到油狀標(biāo)題化合物(1.33g，59%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600-3500(OH)，2250(CN)，2100(N3)，1780和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.04-5.87(1H，m，乙烯基 -H)，5.50-5.23(2H，m，乙烯基-H)，4.89-4.63(2H，m，烯丙基CH2)，4.29-4.20(1H，m，H-1′)，4.248(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.50-3.35(2H，m，CH2-N3)，3.267(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.6Hz，H-6)，3.30-3.20(1H，m，H-4)，3.05-2.85(2H，m，SCH2)，2.59-2.51(2H，m，CH2CN)，2.06-1.93(2H，CH2CH2CH2CN)，1.93-1.57(4H，CH2-CH2-CH2N3)，1.76(1H，d，J＝3.7Hz，OH)和1.393ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(100mg，0.240mmol)在CH2Cl2(10ml)中的溶液先用Pd(PPh3)4(220mg，0.018mmol)處理，接著用0.5M2-乙基己酸鈉的乙酸乙酯溶液(0.48ml，0.24mmol)滴加處理。將混合物攪拌1.5小時(shí)，然后用乙醚(20ml)稀釋，用水(3×3ml)和0.05M pH8.0磷酸鹽緩沖液(3×3ml)提取。合并水提取液，用乙醚(2×5ml)洗滌，然后在5℃(冰浴)和45-50psi氫壓下用5%Pd/氧化鋁(100mg)為催化劑處理1.25小時(shí)。濾除催化劑，用水(2×2ml)洗滌，水溶液通過μ-Bondapak C18柱(25g，H2O→1%，2%CH3CN/H2O)，冷凍干燥后，得到白色粉狀的標(biāo)題化合物(65mg，77%)。
HPLC純度99.9%(300nm); UV(H2O)λmax302(ε 8000); IR(液體石蠟)νmax2250(CN)，1760和1595cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.34-4.32(2H，m，H-1′和H-5)，4.239，4.226(d，J＝2.6Hz，部分 H-5)，3.42-3.33(1H，m，H-4)，3.383(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.2Hz，H-6)，3.09-2.94(3H，m，CH2N和S-HCH)，2.85-2.74(1H，m，SHCH)，2.70-2.61(2H，m，CH2CN)，2.10-1.49(6H，m，CH2CH2CH2CN，CH2CH2)和1.334ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例51 (4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-亞胺甲基)氨基丙基〕-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(150mg，0.420mmol)在0.04M pH7.0磷酸鹽緩沖液(25ml)中的溶液先用0.1M氫氧化鈉水溶液處理(提高并維持pH值在8-8.4)，然后用甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(720mg，4.2mmol)分批處理。將混合物攪拌10分鐘，用0.1N HCl水溶液將溶液的pH值降至7.0。然后將混合物通過μ-Bondapak C18柱(兩次，30g和60g，H2O→1%，2%，3%，4%CH3CN/H2O)，冷凍干燥后，得到粉狀標(biāo)題化合物(117mg，73%); 純度(HPLC)94.4%(300nm); UV(H2O)λmax302(ε 9100); IR(液體石蠟)νmax2250(CN)，1755(C＝O)，1715(C＝N)和1590cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ7.83，7.81(1H，2s，CH)，4.34-4.22(2H，m，H-1′和H-4)，4.231(d，J＝2.9Hz，部分H-4)，3.49-3.32(4H，m，H-4，H-6和CH2N)，3.06-2.92，2.84-2.74(2H，2 組 m，SCH2)，2.70-2.61(2H，m，CH2CN)，2.10-1.47(6H，CH2CH2CH2CN，CH2-CH2)和1.323ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例52 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯
將(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙基酯(6.71mmol，按實(shí)施例45所述方法使1.54g，6.71mmol重氮基前體環(huán)化而制得)溶解在無水乙腈(40ml)中，于0-5℃，在氮?dú)夥罩?，?分鐘時(shí)間同時(shí)加入氯代磷酸二苯酯(1.53ml，7.4mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.3ml，7.5mmol)處理上述溶液。然后加入少量的4-N，N-二甲基氨基吡啶晶體，并將該混合物攪拌1小時(shí)。然后先加入N，N-二異丙基乙胺(1.75ml，10.0mmol)，再加入4-巰基丁腈(1.01g，10.0mmol)〔由4-乙酰硫基丁腈經(jīng)堿性水解制得(U.S.3，223，585)〕，并將該混合物在0-5℃下攪拌18小時(shí)。然后用乙酸乙酯(300ml)稀釋該反應(yīng)混合物，依次用水、飽和NaHCO3、pH7.0磷酸鹽緩沖液及鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，蒸除溶劑得到油狀物，后者經(jīng)硅膠(4.5×11cm)層析純化，用EtOAc甲苯(8∶2至1∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到2.14g(73%)標(biāo)題化合物，為油狀物 IR(NaCl，壓片)νmax2250(CN)，2100(N3)，1772(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.39(d，J＝6.25Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.1(m，8H，丁基的CH2-1，2和3以及氰丙硫基的CH2-2)，2.55(m，2H，CH2CN)，2.8-3.1(m，2H，SCH2)，3.2(dd，JH6，H5＝2.70Hz，JH6，H1＝7.22Hz，1H，H-6)，3.2(m，與H-6重疊，1H，H-4)，3.33(t，J＝6.1Hz，2H，CH2N3)，4.25(dd，JH5，H6＝2.70Hz，JH5，H4＝9.49Hz，1H，H-5)，4.75(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). B.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮丁基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯(1.86g，4.3mmol)溶解在無水EtOAc(80ml)中，于24℃和氮?dú)夥障?，用?三苯膦)鈀〔O〕(0.10g)和9.5ml(4.75mmol)0.5M2-乙基己酸鉀的EtOAc溶液處理上述溶液。30分鐘后，用水(2×75ml)提取該反應(yīng)混合物，合并水相，并將其在0-5℃，于45psi氫氣壓下用5%鈀/氧化鋁(2.4g)為催化劑氫化1小時(shí)。然后迅速加入40ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液(最初pH10.5，最后pH6.9)。濾出催化劑，濾液經(jīng)反相硅膠(μ-Bondapak C-18，3.5×11cm)層析兩次，用乙腈/水(5∶95)混合物作為洗脫劑。將有紫外吸收的級分冷凍干燥，得到0.839g(53%)標(biāo)題化合物，為白色非晶形固體。
純度(HPLC)99%(μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm)，5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液，流速為1ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間7.89分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(9，528); IR(KBr)νmax2250(CN)，1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.1(m，8H，丁基的CH2-1，2和3以及氰丙硫基的CH2-2)，2.64(t，J＝7.0，Hz，2H，CH2CN)，2.6-3.1(m，2H，SCH2)，3.0(t，J-7.6Hz，2H，CH2NH2)，3.3(m，與H-6重疊，1H，H-4)，3.35(dd，JH6，H5＝2.46Hz，JH6，H1＝6.39Hz，1H，H-6)，4.22(dd，JH5，H6＝2.46Hz，JH5，H4＝6.83Hz，1H，H-5)和4.26ppm(m，1H，CH3CHO). 實(shí)施例53 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯
將(4R，5R，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕-庚烷-2-羧酸烯丙基酯(5.28mmol，按實(shí)施例45所述使2.0g重氮基前體環(huán)化制得)溶解在無水乙腈(35ml)中，在0-5℃和氮?dú)夥障?，?分鐘時(shí)間同時(shí)加入氯代磷酸二苯酯(1.49g，5.5mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.97ml，5.5mmol)處理前述溶液。然后加入少量4-N，N-二甲基氨基吡啶晶體，將該溶液攪拌1小時(shí)。然后補(bǔ)加N，N-二異丙基乙胺(1.4ml，7.9mmol)，再加入4-吡啶甲基硫醇(1.0ml，7.9mmol)，將該混合物在0-5℃攪拌3小時(shí)，加入EtOAc(300ml)和0.2M pH7.0磷酸鹽緩沖液使該反應(yīng)混合物驟冷。用鹽水洗滌有機(jī)層，干燥(MgSO4)，濃縮。殘留物經(jīng)硅膠(3.5×13cm)層析純化，用EtOAc洗脫，得到1.89g(78%)標(biāo)題化合物，為透明油狀物 IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)，1770(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.37(d，J＝6.27Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.02(m，1H，H-4)，3.14(dd，JH6，H5＝2.65Hz，JH6，H1＝7.41Hz，1H，H-6)，3.31(t，J＝6.1Hz，CH2N3)，3.98(ABq，JAB＝14.22Hz，Δν＝15.7Hz，2H，SCH2)，4.21(m，1H，CH3CHO，4.76(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，7.27(～d，2H，吡啶的H-3)和8.57ppm(～d，2H，吡啶的H-2). B.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕-庚-2-烯-2-羧酸
于22℃，在氮?dú)夥障?，用?三苯膦)鈀〔O〕(0.1g)和8ml(4.0mmol)0.5M的2-乙基己酸鉀的EtOAc溶液處理(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕-庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯(1.80g，3.9mmol)在EtOAc(50ml)中的溶液。30分鐘后，用水(3×50ml)提取反應(yīng)混合物，合并水提取液，并用2.3g5%鈀/氧化鋁，于0-5℃，在45psi氫氣壓下將上述水提取液氫化1小時(shí)。然后加入50ml冷的0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液(最初pH為10.5，最終pH為6.7)，濾除催化劑。然后將濾液在反相硅膠(μ-Bondapak C-18，3×14cm)上進(jìn)行層析，用梯度為0-5%乙腈的水溶液進(jìn)行洗脫。
經(jīng)冷凍干燥后，第一級份給出0.050g(4%)(4R，5S，6S)-4-(4″-羥基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕-庚-2-烯-2-羧酸鹽(鈉鹽和鉀鹽的混合物)，為白色固體。
后續(xù)級份給出0.830g(54%)標(biāo)題化合物，為白色非晶形固體〔α〕22D-9.5°(c1.0，H2O); HPLC測定的純度97.8%(μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液，流速2ml/分，紫外檢測器300nm，保留時(shí)間7.42分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax262(5，195)和304nm(8，370); IR(KBr)νmax1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1600cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.29(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.94(t，J＝7.5Hz，CH2NH2)，3.10(m，1H，H-4)，3.28(dd，JH6，5＝2.53Hz，JH6，H1＝6.30Hz，1H，H-6)，4.05(m，3H，H-5和SCH2重疊)，4.21(m，1H，CH3CHO)，7.48(～d，2H，吡啶的H-3)，和8.49ppm(～d，2H，吡啶的H-2). 實(shí)施例54 (4R，5S，6S)-4-(4″-N-亞胺甲基氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕-庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕-庚-2-烯-2-羧酸(0.318g，0.81mmol)在冷(0-5℃)水(25ml)中的溶液用1N NaOH調(diào)至pH8.5。然后，用10分鐘時(shí)間分小批加入甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(0.70g，4.06mmol)，與此同時(shí)用1N NaOH將pH保持在8.5。在0-5℃下再反應(yīng)20分鐘后，加入20ml 0.2M pH為6.0的磷酸鹽溶液使反應(yīng)混合物驟冷。用EtOAc(20ml)洗滌該水溶液，然后使之在反相硅膠(μ-Bondapak C-18，3×15cm)上進(jìn)行層析，采用0.01M pH7.0磷酸鹽緩沖液和乙腈(0-10%)為洗脫劑。在相同的柱上用水和乙腈(10%)洗滌使有紫外吸收的級分脫鹽，冷凍干燥，得到0.153g(53%)標(biāo)題化合物，為白色非晶形固體;〔α〕24D-3.6°(c0.55，H2O); HPLC測定的純度97.5%(μ-Bondapak C-18，3.9mm/30cm，15%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液，流速1ml/分，紫外檢測器300nm，保留時(shí)間5.8分鐘; UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax262(5，476)和304nm(8，790); IR(KBr)νmax1750(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1715和1600(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.27(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.1-1.7(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.11(m，1H，H-4)，3.2-3.4(m，3H，H-6和CH2NH)，4.08(m與SCH2重疊，1H，H-5)，4.08(ABq，JAB＝14.75 Hz，△ν＝23.2 Hz，SCH2)，4.21(m，1H，CH3CHOH)，7.47(m，2H，吡啶的H-3)，7.78(s，1H，CH＝NH)和8.47ppm(m，2H，吡啶的H-2). 實(shí)施例55 (4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-亞胺甲基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下，用0.1N NaOH水溶液處理實(shí)施例44中所述的(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.16g，0.42mmol)在0.05M pH7.0磷酸鹽緩沖水溶液(30ml)中的溶液(提高并保持pH值在8.0左右)，分次加入甲亞胺酸芐酸鹽酸鹽(720mg，4.2mmol)。將該混合物攪拌30分鐘，用1M NaH2PO4水溶液中和至pH7.0，并使之通過μ-Bondapak C-18柱(H2O→5%CH3CN/H2O)兩次，得到標(biāo)題化合物(76mg，47%)，為凍干粉末; 純度96.7%(HPLC 304nm); UV(H2O)λmax262(ε 7120)，304(ε 10700); IR(液體石蠟)νmax3600-3100(OH，NH2)，1755(C＝O)，1710(C＝N)和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.48-8.44(2H，m，芳族 -H)，7.78-7.44(2H，m，芳族 H)，4.27-4.15(1H，m，H-1′)，4.14，4.07，4.00，3.93(2H，ABq，J＝Hz，CH2-芳族)，4.075(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.3Hz，H-5)，3.34-3.23(3H，m，H-5和CH2-N)，3.303，3.291(部分 H-6，d，J＝2.5Hz)，3.17-3.07(1H，m，H-4)，1.70-1.36(4H，m，CH2CH2-4)，和1.268ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 實(shí)施例56 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-4-(2″-羥基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-對硝基芐氧羰基氨基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕-庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯
將(4R，5R，6S)-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙基酯(5.41mmol，按實(shí)施例5方法使重氮基前體(3.0g，5.41mmol)環(huán)化而制得)溶解在無水乙腈(25ml)中，在0-5℃和氮?dú)夥障?，?分鐘時(shí)間同時(shí)加入氯代磷酸二苯酯(1.18ml，5.65mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.0ml，5.65mmol)處理該溶液。然后加入少量的4-N，N-二甲基氨基吡啶晶體，將該溶液攪拌90分鐘。補(bǔ)加N，N-二異丙基乙胺(1.42ml，8.1mmol)，然后加入2-巰基乙基氨甲酸對硝基芐基酯(2.10g，8.19mmol)〔I.Shinkai等人，Synthesis，924(1980)〕，將該混合物攪拌16小時(shí)，用EtOAc(400ml)稀釋，用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸除溶劑后，將殘留物在硅膠(3.5×10cm)上進(jìn)行層析，用梯度為5-10%乙酸乙酯的甲苯溶液進(jìn)行洗脫，得到1.75g(42%)標(biāo)題化合物，為油狀物 IR(NaCl，壓片)νmax1772(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1720cm-1(羧酸酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.04，0.05和0.08(3 x s，3H，3H和6H，SiCH3)，0.88(s，18H，Si t-Bu)，1.27(d，J＝6.14Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.1(m，2H，CH2CH2OTBDMS)，2.8-3.2(m，2H，SCH2)，3.10(dd，JH6，H5＝2.49Hz，JH6，H1＝6.34Hz，1H，H-6)，3.2-3.9(m，5H，H-4，CH2OTBDMS和CH2NH)，4.16(dd，JH5，H6＝2.49Hz，JH5，H4＝9.37Hz，1H，H-5)，4.23(m，1H，CH3CHO)，4.74(m，2H，烯丙基的CH2)，5.18(s，2H，對硝基芐基的CH2，5.2-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，7.5(d，J＝8.7Hz，2H，對硝基芐基的鄰位H)和8.22ppm(d，J＝8.7Hz，2H，對硝基芐基的間位H). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-羥基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-對硝基芐氧基羰基氨基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯
將(4R，5S，6S)-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧乙基〕-3-〔(2-對硝基芐氧羰基氨基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯(1.75g，2.29mmol)在無水四氫呋喃(20ml)中的溶液冷卻至0-5℃，在氮?dú)夥障?，先加入乙?1.6ml，27.5mmol)，再加入13ml(13.0mmol 1.0M 氟化四丁銨四氫呋喃溶液處理上述溶液。在5℃反應(yīng)120小時(shí)后，用乙酸乙酯(200ml)稀釋該反應(yīng)混合物，依次用水、飽和NaHCO3、0.2M pH7.0磷酸鹽緩沖液和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸除溶劑后所得殘留物在硅膠(3×11cm)上進(jìn)行層析，先用乙酸乙酯，再用乙酸乙酯/丙酮/乙腈(18∶1∶1)的混合物洗脫。
第一級分給出0.78g(50%)單去保護(hù)產(chǎn)物，(5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧乙基〕-4-(2″-羥基乙基)-3-〔(2-對硝基芐氧羰基氨基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯，為油狀物。
后續(xù)級分給出0.23g(19%)標(biāo)題化合物，為泡沫狀物。
IR(NaCl，壓片)νmax1770(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1725和1705cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.37(d，J＝6.23Hz，3H，CH3CHO)，1.7-2.1(m，2H，CH2CH2OH)，2.8-3.2(m，2H，SCH2)，3.26(dd，JH6，H5＝2.55Hz，JH6，H1＝7.77Hz，1H，H-6)，3.3-3.9(m，5H，H-4，CH2OH和CH2NH)，4.1-4.4(m，2H，H-5和CH3CHO重疊)，4.75(m，2H，烯丙基的CH2)，5.19(s，2H，對硝基芐基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，7.5(d，J＝8.7Hz，2H，對硝基芐基的鄰位H)和8.22ppm(d，J＝8.7Hz，對硝基芐基的間位H). C.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-4-(2″-羥基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕-庚-2-烯-2-羧酸
在22℃和氮?dú)夥障?，?Ph3P)4Pd(0.050g)和4ml(2.0mmol)0.5M2-乙基己酸鉀的乙酸乙酯溶液處理(4R，5S，6S)-4-(2″-羥基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-對硝基芐氧羰基氨基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯(0.99g，1.85mmol)在無水乙酸乙酯(40ml)中的溶液。30分鐘后，形成沉淀，將該反應(yīng)混合物冷卻至0-5℃，放置2小時(shí)。然后濾出固體，真空干燥，得到1.0g淺棕色固狀中間體鉀鹽。將該固體加到由冷卻的0.2M pH7.0磷酸鹽緩沖液(40ml)，四氫呋喃(20ml)和乙醚(20ml)組成的混合物中，于0-5℃和45psi氫氣壓下，用10%鈀/活性炭將上述混合物氫化1小時(shí)。濾除催化劑，將濾液在反相硅膠(μBondapak C18，3×14cm)上層析兩次，采用梯度為0-10%的乙腈水溶液進(jìn)行洗脫。將第一級分冷凍干燥得到0.150g(26%)標(biāo)題化合物，為白色非晶形固體。后續(xù)級分給出了0.450g部分還原的物質(zhì)。第一級分在水(1ml)中重結(jié)晶，得到0.096g標(biāo)題化合物，為小立方體 HPLC測得的純度99.8%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用2%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間6.24分鐘); UV(水，pH7.4，磷酸鹽緩沖液)λmax298nm(8，510); IR(KBr)νmax1758(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1638，1618和1580cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.42Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.2(m，2H，羥乙基的CH2-1)，2.9-3.8(m，7H，H-4，SCH2CH2NH2和CH2OH)，3.49(dd，JH6，H5＝2.72Hz，JH6，H1＝5.37Hz，1H，H-6)，和4.2-4.4ppm(m，2H，H-5和CH3CHO重疊). 實(shí)施例57 (4R，5S，6S)-4-〔(2″R或S)-氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸;異構(gòu)體A
A.4-疊氮基硫羥戊酸(吡啶-2-基)甲基酯
冷卻(5℃)下，將SOCl2(15ml)滴加到4-疊氮基戊酸(59.0g，412.2mmol)和N-甲基咪唑(33.84g，412.2mmol)在CH2Cl2(1200ml)中的溶液中。將該反應(yīng)混合物在5℃攪拌1小時(shí)，并在20℃攪拌2.5小時(shí)。在冰浴中再次冷卻該反應(yīng)混合物，此次滴加2-巰甲基吡啶(51.6g，412.2mmol)和N-甲基咪唑(37.2g，453.4mmol)在CH2Cl2(50ml)中的溶液，滴加時(shí)間為15分鐘。在5℃下攪拌15分鐘后，蒸除溶劑，并以乙酸乙酯(500ml)代替之。用水(250ml)洗滌該溶液。合并有機(jī)層，用NaHCO3洗滌。最后經(jīng)鹽水洗滌后，將該有機(jī)溶液干燥(MgSO4)，蒸發(fā)，得到97.23g(94.2%)標(biāo)題化合物。
IR(CH2Cl2)νmax2110cm-2(-N3)，1690cm-1(硫酯); 1H NMR(CDCl3)δ8.55-8.52(1H，m，吡啶 -H)，7.67-7.58(1H，m，吡啶 -H)，7.35-7.31(1H，m，吡啶 -H)，7.20-7.13(1H，m，吡啶 -H)，4.36(2H，s，CH2-S)，3.55-3.45(1H，m，CH-N3)，2.74-2.65(2H，m，CH2COS)，1.89-1.62(2H，m，CH2C-N3)，1.28(3H，d，J6.53Hz，CH3-). B.4-疊氮基-(吡啶-2-基)甲基戊酸酯的烯醇甲硅烷基醚 冷卻(5℃)下，用25分鐘時(shí)間，用三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯(205.3g，776.8mmol)對4-疊氮基硫羥戊酸(吡啶-2-基)甲基酯(97.2g，388.4mmol)和三乙胺(86.5g，854.5mmol)在CH2Cl2(1000ml)中的溶液進(jìn)行滴加處理。將冰浴耗盡，并將該溶液在20℃下攪拌15小時(shí)。然后蒸除溶劑，代之以石油醚(1000ml)。加入冷水(500ml)振蕩該溶液，并使該兩相通過Celite墊。棄去水層，依次用冷水、NaHCO3水溶液、冷水和鹽水洗滌該有機(jī)相。將有機(jī)溶液干燥(MgSO4)，用活性炭處理。經(jīng)Celite墊過濾后，將深色的濾液再用活性炭處理兩次，最后得到紅色溶液。蒸掉溶劑后，得到99.4g(70.2%)紅色油狀標(biāo)題化合物。
IR(CH2Cl2)νmax2110cm-1(-N3); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.57-8.53(1H，m，吡啶 -H)，7.67-7.58(1H，m，吡啶 -H)，7.30-7.25(1H，m，吡啶 -H)，7.18-7.11(1H，m，吡啶 -H)，5.00(0.32H，t，J7.65Hz，vinylic H)，4.85(0.68 H，t，J7.29Hz，乙烯基 -H)，4.05(0.64H，s，-SCH2)，3.98(1.36H，s，-SCH2-)，3.34(0.68H，m，CH-N3)，3.22(0.32H，m，CH-N3)，2.25-2.15(2H，m，-CH2-)，1.10(2.04H，d，J6.54Hz，H3C-)，1.08(0.96H，d，J6.53H，H3C-)，0.99(9H，2s，叔丁基)，0.25和0.22ppm(6H，2s，二甲基). C.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-3″-疊氮基丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在冷卻(5℃)下，向熔融過的ZnCl2(33.4g，245mmol)在CH2Cl2(500ml)中的懸浮液中依次加入(3S，4R)-4-乙酰氧基-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(70.42g，245mmol)和4-疊氮基硫羥戊酸(吡啶-2-基)甲基酯的叔丁基二甲基硅基烯醇醚(99.4g，272.6mmol)。使冰浴耗盡，同時(shí)將該混合物機(jī)械攪拌過夜(18小時(shí))。然后蒸除溶劑，并使粘稠殘留物在乙醚(500ml)和水(100ml)之間分配。棄去水相，依次用水、NaHCO3、水和鹽水洗滌該有機(jī)溶液。干燥有機(jī)相(MgSO4)，用活性炭處理，過濾，蒸發(fā)。將由此得到的紅色粘油(142.5g)經(jīng)層析純化(SiO2，CH2Cl2，含5%CH3CN的CH2Cl2和乙酸乙酯)，得到38.0g(32.5%)標(biāo)題化合物，為C-3異構(gòu)體的1∶1混合物。
IR(CH2Cl2)νmax3405(NH)，2115(-N3)，1765(β-內(nèi)酰胺)，1680cm-1(CO-S); 極性較小的異構(gòu)體A 1H NMR(CDCl3)δ8.56-8.52(1H，m，吡啶 -H)，7.68-7.60(1H，m，吡啶 -H)，7.33-7.26(1H，m，吡啶 -H)，7.21-7.15(1H，m，吡啶 -H)，5.83(1H，s，NH)，4.29(2H，s SCH2-)，4.15(1H，m，CH′)，3.80(1H，dd，J6.20，2.14Hz，H-4)，3.48(1H，m，CH-N3)，3.16-3.05(2H，m，H-3，H-1″)，1.96和1.44(2H，2m，-CH2″)，1.29(3H，d，J6.41，H3C-C-N3)，1.03(3H，d，J6.29，-CH3)，0.854(9H，s，叔丁基)，0.05(6H，s，Si(CH3)2). 極性較大的異構(gòu)體B 1H NMR(CDCl3)δ8.54-8.52(1H，m，吡啶 -H)，7.68-7.59(1H，m，吡啶 -H)，7.36-7.26(1H，m，吡啶 -H)，7.21-7.15(1H，m，吡啶 -H)，5.85(1H，s，NH)，4.28(2H，d，J5.25Hz，S-CH2)，4.17(1H，m，CH′)，3.89(1H，dd，J2.05，6.87Hz，H-4)，3.49(1H，m，CH-N3)，3.05(1H，m，H-3)，2.85(1H，m，H-1″)，2.05和1.57(2H，2m，CH2″)，1.28(3H，d，J6.47，H3CC-N3)，1.01(3H，d，J6.32，H3C)，0.85(9H，s，叔丁基)，0.05(6H，s，Si(CH3)2. D.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-疊氮基丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
將過氧化氫(30%，27ml，314mmol)加到冷卻至5℃的(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-3″-疊氮基丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(37.5g，78.5mmol)溶液中，然后滴加1N NaOH(235.5ml，235.5mmol)。在40分鐘內(nèi)于10℃以下完成加料。將該混合物再攪拌30分鐘，然后用濃鹽酸(30ml)酸化至pH～1.0。用乙酸乙酯提取該溶液。用鹽水將提取液洗滌兩次，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)。在石油醚中研制由此制得的固體，過濾收集之，得到24.0g(82.6%)標(biāo)題化合物;m.p.＝123-125℃(分解)。
IR(CH2Cl2)νmax2110(-N3)，1765(β-內(nèi)酰胺)，1740和1710cm-1(-CO2H). 極性較小的異構(gòu)體A 1H NMR(CDCl3)δ6.35(1H，s，NH)，4.20(1H，m，CH′)，3.89(1H，dd，J2.05，5.50Hz，H-4)，3.58(1H，m，CH-N3)，3.13(1H，m，H-3)，2.95(1H，m，H-1″)，1.88和1.48(2H，2m，-CH2)，1.34(3H，d，J6.45Hz，CH3-C-N3)，1.19(3H，d，J6.26 -CH3)，0.87(9H，s，叔丁基)，0.07(6H，2s，Si(CH3)2. 極性較大的異構(gòu)體B 1H NMR(CDCl3)δ6.42(1H，s，NH)，4.20(1H，m，CH′)，3.88(1H，dd，J1.94，6.42Hz，H-4)，3.55(1H，m，CH-N3)，3.15(1H，m，H-3)，2.74(1H，m，H-1″)，1.98和1.59(2H，2m，-CH2)，1.33(3H，d，J6.50Hz，H3CC-N3)，1.18(3H，d，J6.28，-CH3)，0.87(9H，s，叔丁基)，0.068(6H，2s，Si(CH3)2). E.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-疊氮基丙基)-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
將(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-疊氮基丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(3.48g，9.39mmol)和羰基二咪唑(1.70g，10.33mmol)在CH3CN中的混合物，于20℃下攪拌30分鐘，然后蒸發(fā)至干，剩下泡沫狀物質(zhì)。
在另一只燒瓶中，回流丙二酸單烯丙酯鎂鹽(4.37g，14mmol)在苯(75ml)中的懸浮液，并同時(shí)用迪安-斯達(dá)克井收集殘留的水?；亓?.5小時(shí)后，將該溶液冷卻至20℃，然后將其加到上述?；溥蛑小⒃摶旌衔镏糜陬A(yù)熱至70℃的油浴中，加熱18小時(shí)。然后用等體積的乙酸乙酯稀釋該混合物，依次用水、稀鹽酸、水、稀NaHCO3、水和鹽水洗滌。干燥有機(jī)相(MgSO4)，蒸發(fā)。粗產(chǎn)品經(jīng)層析純化(SiO2，先用CH2Cl2，然后用梯度為5-10%CH3CN的CH2Cl2溶液洗脫)，得到3.37g(79.3%)油狀標(biāo)題化合物，后者經(jīng)放置固化。
IR(CH2Cl2)νmax2115(-N3)，1765，1715cm-1(C＝O) 極性較小的異構(gòu)體A 1H NMR(CDCl3)δ4.6-6.0(5H，烯丙基類型)4.18(1H，m，H-1′)，3.80-3.85(1H，m，H-4)，3.62(1H，d，-CHC＝O)，3.46(1H，m，CH-N3)，3.27(0.6H，m，H-1″)，2.99和2.93(1H，m，H-3)，2.55(0.4H，m，H-1″)，1.93和1.41(2H，2m，-CH2C-N3)1.32和1.31(3H，2d，J6.45，6.40Hz，CH3CN3)，1.19和1.12(3H，2d，J6.27，6.29Hz，-CH3)，0.87(9H，s，叔丁基)，0.07和0.06(6H，2s，Si(CH3)2). 極性較大的異構(gòu)體B 1H NMR(CDCl3)δ4.6-6.0(5H，烯丙基類型)4.17(1H，m，H-1′)，3.84(1H，dd，J2.1，5.35Hz，H-4)，3.63(1H，d，CH2CO)3.48(1H，m，CHN3)，3.07(0.6H，m，H-1″)，2.93(1H，m，H-3)，2.0和1.6(2H，2m，CH2CN3)，1.27和1.32(3H，2d，J6.5Hz，CH3CN3)1.09和1.18(3H，2d，J6.25Hz，CH3)，0.87(9H，s，叔丁基)，0.06(6H，2s，Si(CH3)2). F.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-疊氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
將對甲苯磺酰氯(442mg，2.32mmol)、疊氮化鈉(154mg，2.37mmol)和氯化四丁銨(12mg)在CH3CN(15ml)中的混合物在20℃攪拌4小時(shí)。然后將該混合物冷卻至5℃，加入在極少量CH3CN中的(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-疊氮基丙基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(953mg，2.11mmol)，然后滴加三乙胺(235mg，2.32mmol)。將該反應(yīng)混合物在5℃攪拌1.5小時(shí)，然后蒸發(fā)。將殘留物溶于乙醚中，用水和鹽水洗滌。干燥有機(jī)相(MgSO4)，蒸發(fā)后剩下軟固體。該物質(zhì)在石油醚中研制，濾出不溶解的對甲苯磺酰胺(74.3%)。蒸發(fā)濾液，得到一黃色粘稠油狀物，后者經(jīng)層析(SiO2，先用CH2Cl2，再用含5%CH3CN的CH2Cl2洗脫)純化，得到825mg(81.7%)粘油狀標(biāo)題化合物。
IR(CH2Cl2)νmax2125(＝N2)，2118(-N3)，1765(β-內(nèi)酰胺)，1713cm-1(-CO2-); 極性較小的異構(gòu)體A 1H NMR(CDCl3)δ4.7-6.0(5H，烯丙基類型)4.31(1H，m，H-1″)，4.16(1H，m，H-1′)，3.81(1H，dd，J2.08，4.90Hz，H-4)，3.38(1H，m，CH-N3)，3.05(1H，m，H-3)，2.69和1.39(2H，2m，CH2-CN3)，1.28(3H，d，J6.42Hz，H3CCN3)，1.18(3H，d，J6.29Hz，-CH3)，0.86(9H，s，叔丁基)，0.064和0.052(6H，2s，Si(CH3)2). 極性較大的異構(gòu)體B 1H NMR(CDCl3)δ4.7-6.0(5H，烯丙基類型)4.15(2H，m，H-1′，H-1″)，3.84(1H，m，H-4)，3.45(1H，m，CH-N3)，3.05(1H，m，H-3)，2.10和1.5(2H，2m，CH2C-N3)，1.27(3H，d，J6.43Hz，CH3-CN3)，1.17(3H，d，J6.27Hz，-CH3)，0.87(9H，s，叔丁基)，0.064和0.053(6H，2S，Si(CH3)2). G.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-疊氮丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
冷卻(5℃)下，用4N HCl(0.52ml，1.72mmol)處理(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-疊氮丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(825mg，1.72mmol)在CH3CN(10ml)中的溶液。將該反應(yīng)混合物在5℃攪拌3.5小時(shí)，然后在20℃攪拌1小時(shí)。繼之加入飽和NaHCO3(3ml)使反應(yīng)驟冷。先用乙酸乙酯稀釋，然后用水和鹽水(2次)洗滌該混合物。干燥有機(jī)層(MgSO4)，蒸發(fā)。粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠層析純化，先用CH2Cl2，再用乙酸乙酯洗脫，得到554mg(88.4%)黃色油狀標(biāo)題化合物。未分離兩種異構(gòu)體化合物; IR(CH2Cl2)νmax3600(-OH)，3400(NH)，2145(＝N2)，2115(-N3)，1763(β-內(nèi)酰胺)，1713(C＝O). 1H NMR(CDCl3)δ4.7-6.0(5H，烯丙基類型)，4.12(2H，m，H-1′和H-1″)，3.81(1H，m，H-4)，3.45(1H，m CH-N3)，3.05(1H，m，H-3)，2.05和1.55(2H，2m，CH2CN3)，1.30(6H，幾個(gè)峰，2-CH3). H.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯
將辛酸銠二聚體(55mg)在C6H6(110ml)中的懸液放在預(yù)熱130℃的油浴中，回流30分鐘。然后加入(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-疊氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(2.0g，5.49mmol)。在劇烈回流下25分鐘后完成環(huán)化反應(yīng)。蒸除溶劑，代之以CH3CN(55ml)。用氯代磷酸二苯酯(1.6g，6mmol)，N，N-二異丙基乙胺(0.78g，6mmol)和催化量的4-N，N-二甲氨基吡啶處理上述溶液。在5℃反應(yīng)15分鐘后，反應(yīng)完成。用乙酸乙酯稀釋該反應(yīng)混合物，用水和鹽水洗滌。干燥(MgSO4)后，蒸發(fā)有機(jī)相，粗品經(jīng)層析(SiO2/Et2O)純化，得到1.63g(52.0%)磷酸烯醇酯。
將純化過的烯醇溶解在冷的(5℃)DMF(16ml)中，用2-吡啶甲基硫醇(465mg，3.72mmol)和N，N-二異丙基乙胺(481mg，3.72mmol)處理上述溶液。將該反應(yīng)混合物在5℃攪拌17小時(shí)，再在20℃攪拌24小時(shí)。然后用乙酸乙酯(100ml)稀釋該溶液，依次用冷鹽水(3×50ml)，10%NaHSO3(2×25ml)，水和鹽水洗滌。干燥(MgSO4)有機(jī)相，蒸發(fā)后留下棕色粘油。經(jīng)層析(SiO2/冷Et2O)純化、分離，得到標(biāo)題化合物的2個(gè)異構(gòu)體，470mg(37%)極性較小的異構(gòu)體A和325mg(25.6%)極性較大的異構(gòu)體B 極性較小的異構(gòu)體A IR(CH2Cl2)νmax3600(-OH)，2115(-N3)，1775(β-內(nèi)酰胺)，1710cm-1(-CO2-); 1H NMR(CDCl3)δ8.55(1H，m，Ar-H)，7.66(1H，m，Ar-H)，7.34(1H，m，Ar-H)，7.19(1H，m，Ar-H)，4.6-6.0(5H，烯丙基類型)，4.19(2H，ABq，J13.8Hz，S-CH2)，4.16-4.24(2H，m，H-1′，H-5)，3.87(1H，m，CH-N3)，3.65(1H，m，H-4)，3.05(1H，dd，J2.70，7.92Hz，H-6)，1.6-2.0(2H，2m，CH2CN3)，1.39(6H，d，J6.15Hz，2-CH3). 極性較大的異構(gòu)體B IR(CH2Cl2)νmax3600(-OH)，2115(-N3)，1772(β-內(nèi)酰胺)，1710cm-1(-CO2-); 1H NMR(CDCl3)δ8.51(1H，m，Ar-H)，7.64(1H，m，Ar-H)，7.37(1H，m，Ar-H)，7.21(1H，m，Ar-H)，4.6-6.10(5H，烯丙基類型)，4.22(1H，m，H-1′)，4.14(1H，dd，J2.66，9.60Hz，H-5)，4.11(2H，ABq，J14.18Hz，-SCH2)，3.75(1H，m，CH-N3)，3.62(1H，m，H-4)，3.32(1H，dd，J2.70，7.32，H-6)，1.6-2.0(2H，2m，-CH2C-N3)，1.39(3H，d，J6.42Hz，-CH3)，1.38(3H，d，J6.25Hz，-CH3). I.(4R，5S，6S)-4-〔(2″R或S)-疊氮基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉;異構(gòu)體A
在5℃下，用0.5M乙基己酸鈉(2.5ml，1.24mmol)和(PPh3)4Pd(131mg，0.113mmol)處理(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯(500mg，1.13mmol，步驟H中極性較小的異構(gòu)體A)在CH2Cl2(50ml)中的溶液。攪拌30分鐘后，用乙醚(100ml)稀釋該溶液，用0.04M緩沖液(pH7.0，3×15ml)提取。用乙醚洗滌水提取液，在反相SiO2(微粒形硅膠)上進(jìn)行層析，先用水，再用含5-15%CH3CN的水洗脫。合并適當(dāng)?shù)募壏?，冷凍干燥，得?80mg(38.9%)標(biāo)題化合物; 1H NMR(D2O)δ8.50(1H，m，Ar-H)，7.89(1H，m，Ar-H)，7.4-7.6(2H，2m，2 Ar-H)，4.26-4.06(2H，m，H-1′，H-5)，4.18(2H，ABq，J14.09，S-CH2)，3.6(1H，m，CH-N3)，3.35(2H，m，H-6，H-4)，1.8和1.56(2H，2m，CH2C-N3)，1.35(3H，d，J6.71Hz，-CH3)，1.32(3H，d，J6.65Hz，-CH3). J.(4R，5S，6S)-4-〔(2″R或S)-氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸;異構(gòu)體A
將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉(175mg，0.425mmol，步驟Ⅰ中極性較小的異構(gòu)體A)在0.05M磷酸鹽緩沖液(pH6.0，60ml)中的溶液，在30%Pd/硅藻土(350mg)存在下，于45psi氫氣壓下，在5℃進(jìn)行氫化。75分鐘后，補(bǔ)加催化劑(100mg)，然后再繼續(xù)還原30分鐘。濾出催化劑，將濾液在反相SiO2(微粒形硅膠)上層析，先用水，再用含5%CH3CN的水洗脫。將適宜的級分冷凍干燥，得到50mg(31.2%)標(biāo)題化合物;異構(gòu)體A; UV(H2O)λmax266(4093)，300(3945); IR(液體石蠟)νmax1755(β-內(nèi)酰胺)，1595cm-1(-CO2-); 1H NMR(D2O)δ8.46(1H，m，Ar-H)，7.84(1H，m，Ar-H)，7.46-7.29(2H，m，2 Ar-H)，4.24-4.01(4H，m，H-1′，H-5，-SCH2)，3.17-3.46(3H，m，H-4，H-6，CH-N-)，1.4-2.0(2H，2m，CH2C-N)，1.31(3H，d，J6.53Hz，-CH3)，1.29(3H，d，J6.31Hz，-CH3). 實(shí)施例58 (4R，5S，6S)-4-〔(2″S或R)-氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸;異構(gòu)體B
A.(4R，5S，6S)-4-〔(2″S或R)-疊氮基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉;異構(gòu)體B
在冷卻(5℃)下，用0.5M乙基己酸鈉(1.7ml，0.85mmol)和(PPh3)4Pd(88mg，0.08mmol)處理(4R，5S，6S)-4-〔(2″S或R)-疊氮基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶基-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(340mg，0.767mmol，由實(shí)施例57步驟H所得極性較大的異構(gòu)體B)在CH2Cl2(35ml)中的溶液。攪拌30分鐘后，用乙醚(70ml)稀釋該溶液，并用0.04M緩沖液(pH7.0，3×10ml)提取。用乙醚洗滌水提取液，并在反相SiO2(微粒形硅膠)上進(jìn)行層析，先用水，再用含5-15%CH3CN的水洗脫。合并適當(dāng)?shù)募壏?，冷凍干燥，得?40mg(44.4%)標(biāo)題化合物; 1H NMR(D2O)δ8.48(1H，m，Ar-H)，7.88(1H，m，Ar-H)，7.49(1H，m，Ar-H)，7.40(1H，m，Ar-H)，4.02-4.27(4H，m，H-1′，H-5，SCH2)，3.67(1H，m，CH-N3)，3.43(1H，dd，J2.5，5.84，H-6)，3.15(1H，m，H-4)，1.50-1.90(2H，2m，CH2C-N3)，1.28(6H，d，J6.35Hz，2-CH3). B.(4R，5S，6S)-4-〔(2″R或S)-氨基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶基-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸;異構(gòu)體B
在5℃，于40psi氫氣壓下，用30%Pd/硅藻土(270mg)將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶基-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉(135mg，0.328mmol，步驟A中極性較大的異構(gòu)體B)在0.05M磷酸鹽緩沖液(pH6.0，45ml)中的溶液氫化。65分鐘后，濾出催化劑，濾液在反相SiO2(微粒形硅膠)上進(jìn)行層析，先用水，再用含5%CH3CN的水洗脫。合并適當(dāng)?shù)募壏郑鋬龈稍?，得?0mg(48.5%)標(biāo)題化合物; UV(H2O)λmax268(8362)，302(9583); IR(液體石蠟)νmax1760(β-內(nèi)酰胺)，1595cm-1(-CO2-); 1H NMR(D2O)δ8.46(1H，m，Ar-H)，7.83(1H，m，Ar-H)，7.47(1H，m，Ar-H)，7.36(1H，m，Ar-H)，4.01-4.25(4H，m，H-1′，H-5，SCh2)，3.40(2H，m，-CH-N，dd，J2.95，6.66，H-6)，3.14(1H，m，H-4)，1.98和1.75(2H，2m，CH2-CN)，1.35(3H，d，J6.44Hz，-CH3)，1.29(3H，d，J6.37，-CH3). 實(shí)施例59 (4R，5S，6S)-3-〔(氰基丙基)硫基〕-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將實(shí)施例50所述的(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(150mg，0.420mmol)溶解在0.04M pH7.0磷酸鹽緩沖水溶液(25ml)中，在冰浴冷卻下，先用0.1M NaOH水溶液處理之(使pH上升并維持在7.6-7.8)，然后再用氨基亞氨基甲磺酸(520mg，4.20mmol)處理。將該混合物攪拌2小時(shí)，用0.1N鹽酸水溶液將pH調(diào)至7.1。使該混合物通過μ-Bondapak C18反相硅膠柱(45g，H2O→1%→8%CH3CN/H2O)。冷凍干燥后，得到粉末狀的標(biāo)題化合物(125mg，75%); 純度98.4%(HPLC 300 nm); UV(H2O)λmax302(ε＝8230); IR(液體石蠟)νmax2250(C＝N)，1750(C＝O)，1700(C＝N)和1585cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.33-4.21(1H，m，H-1′)，4.243(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.4Hz，H-4)，3.41-3.23(3H，m，H-4和CH2-N)，3.330(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝6.3Hz，H-6)，3.06-292，2.85-2.73(2H，2 組 m，SCH2)，2.71-2.60(2H，m，CH2CN)，2.06-1.49(6H，m，CH2CH2CH2CN和CH2CH2)和1.321ppm(3H，d，6.4Hz，CH3). 實(shí)施例60 (4R，5S，6S)-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.16g，0.42mmol)〔實(shí)施例44〕溶解在0.05M pH7.0磷酸鹽緩沖水溶液(30ml)中，在冰浴冷卻下，先用0.1N NaOH水溶液處理之(使pH升高，并維持在7.7-8.1)。然后用氨基亞氨基甲磺酸(525mg，4.2mmol)處理之。將該混合物攪拌90分鐘，用1.0M NaH2PO4水溶液中和至pH7.0，然后使之通過μ-Bondapak C18反相柱(30g，H2O→8% CH3CN/H2O)，冷凍干燥后，得到粉末狀的標(biāo)題化合物(85mg，57%); 純度95.2%(HPLC，304nm); UV(H2O)λmax304(ε 8，000)，262(ε 5200); IR(液體石蠟)νmax3500-3100(OH，NH)，1755(C＝O)，1660(C＝N)和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.49-8.46(2H，m，芳族 H)，7.49-7.46(2H，m，芳族 -H)，4.25-4.16(1H，m，H-1′)，4.16，4.09，4.01，3.94(2H，ABq，J＝14.4Hz，CH2-芳族)，4.058(部分 H-5，d，J＝2.4Hz)，3.261(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝6.02Hz，H-6)，3.20-3.07(3H，m，CH2N，H-4)，1.8-1.5，1.5-1.26(4H，2 組 m，CH2CH2-4)，和1.280ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例61 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(125mg，0.37mmol)〔按實(shí)施例41制備〕溶解在0.04M pH7.0磷酸鹽緩沖水溶液(25ml)中，在冰浴冷卻下，加入0.1N NaOH水溶液，然后分次加入氨基亞氨基甲磺酸(458mg，3.70mmol)，與此同時(shí)，將pH維持在7.6-7.8。將該混合物在5℃攪拌2.5小時(shí)，用0.1N HCl水溶液將pH調(diào)至7.05。使該溶液通過μ-Bondapak C18柱(38g，H2O，1，2，3，4，5%CH3CN/H2O)，冷凍干燥后，得到粉末狀的標(biāo)題化合物(98mg，70%); 純度98.8%(HPLC，300nm); UV(H2O)λmax300(ε 8990); IR(液體石蠟)νmax1755(C＝O)，1665(C＝N)和1585cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.34-4.21(1H，m，H-1′)，4.259(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.2Hz，H-5)，3.45-3.33(1H，m，H-4)，3.351(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝6.5Hz，H-6)，3.29-3.22(2H，m，CH2-N)，3.18-3.08，3.02-2.92(2H，2 組 m，SCH2)，2.91-2.80(2H，m，CH2CN)，1.92-1.44(4H，m，CH2CH2)和1.321ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 實(shí)施例62 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(5.28mmol，由2.0g，5.28mmol重氮基前體環(huán)化制得)溶解在無水乙腈(40ml)中，在0-5℃和氮?dú)夥障?，?分鐘時(shí)間同時(shí)加入氯磷酸二苯酯(1.2ml，5.8mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.0ml，5.8mmol)。然后加入少量的4-N，N-二甲基氨基吡啶晶體，并將該透明的混合物在同一溫度下攪拌1小時(shí)。補(bǔ)加N，N-二異丙基乙胺(1.8ml，10.6mmol)，繼之加入1-甲基-4-巰甲基-1，2，3-三唑(1.36g，10.5mmol)，將該混合物攪拌3小時(shí)。然后加入EtOAc(200ml)和冷水使反應(yīng)混合物驟冷。依次用1M NaHSO3，飽和NaHCO3和鹽水洗滌有機(jī)相，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑后，得到一油狀物，后者經(jīng)硅膠(5×10cm)層析純化，采用在甲苯中的EtOAc(1∶1至EtOAc)進(jìn)行梯度洗脫。蒸發(fā)UV活性級分，得到1.51g(62%)泡沫狀標(biāo)題化合物 IR(NaCl，壓片)νmax3400(寬，OH)2100(N3)，1770(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.37(d，J＝6.26Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，1.92(d，J＝1.9Hz，1H，OH)，3.17(dd，JH6，H5＝2.66Hz，JH6，H1＝7.09Hz，1H，H-6)，3.33(寬 t，J＝6.2Hz，2H，CH2N3)，3.52(寬 t，J＝9.0Hz，1H，H-4)，4.07(ABq，JAB＝14.75Hz，Δν＝54.4Hz，2H，SCH2)，4.08(s，3H，三唑的CH3-1)，4.2(m，2H，H-5和CH3CHO重疊)，4.74(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H和1H烯丙基的CH)和7.48ppm(s，1H，三唑的H-5). B.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.51g，3.27mmol)溶解在無水EtOAc(75ml)中，在22℃和氮?dú)夥障拢肞d(PPh3)4(0.075g)和7.2ml(3.6mmol)0.5M的2-乙基己酸鉀在EtOAc中的溶液處理之。45分鐘后，用水(2×75ml)提取該反應(yīng)混合物。合并水相，并將其置于真空條件下以除去痕量的有機(jī)溶劑，然后在0-5℃，45psi氫氣壓下，用1.7g5%Pd/氧化鋁氫化1小時(shí)(最終pH10.5)。然后加入25ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液，在硅藻土墊上濾出催化劑。減壓下將濾液濃縮至一半體積，然后在反相硅膠(μ-Bondapak C18，3.5×12cm)上進(jìn)行層析，用梯度為0-5%乙腈的水溶液進(jìn)行洗脫，經(jīng)冷凍干燥后，得到1.0g(76%)白色非晶形粉末狀標(biāo)題化合物 純度(HPLC)97%(μ-Bondapak C-18，3.9×30cm，用5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為6.07分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(9，098); IR(KBr)νmax1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1690cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.30(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.0(t，J＝7.6Hz，2H，CH2NH2)，3.23(寬 t，1H，H-4)，3.33(dd，JH6，H5＝2.52Hz，JH6，H1＝6.33Hz，1H，H-6)，4.08(s，3H，三唑的CH3-1)，4.09(ABq，JAB＝14.93Hz，Δν＝33.7Hz，2H，SCH2)，4.1(與SCH2重疊，1H，H-5)，4.24(m，1H，CH3CHO)和7.87ppm(s，1H，三唑的H-5). 實(shí)施例63 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(1-吡咯烷基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-(1-吡咯烷基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-羥基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(418mg，0.870mmol)溶解在CH2Cl2(10ml)中，在干冰-丙酮浴冷卻下，先用N，N-二異丙基乙胺(410μl，3.59mmol)處理，然后滴加三氟甲磺酸酐(209μl，1.24mmol)。將該混合物攪拌30分鐘，滴加吡咯烷(530μl，6.35mmol)。用冰-MeOH浴代替干冰-丙酮浴，并將該混合物攪拌2小時(shí)。將該反應(yīng)混合物放在四塊制備薄層層析板上進(jìn)行層析(2mm，EtOAc，Rf＝0.2)，得到油狀標(biāo)題化合物(355mg，75.5%)。
IR(凈態(tài))νmax1780和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.05-5.85(1H，m，乙烯基 -H)，5.49-5.72(2H，m，乙烯基H)，4.85-4.63(2H，m，烯丙基-CH2)，4.3-4.13(1H，m，H-1′)，4.193(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.4Hz，H-5)，3.224(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.5Hz，H-6)，3.37-3.19(2H，m，H-4和HCHS)，3.07-2.93(1H，m，HCHS)，2.72-2.5(8H，m，CH2CN和(CH2)3N)，2.1-1.8(6H，m，CH2-4和CH2-CH2)，1.587(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.892(9H，s，叔丁基)和0.088ppm(6H，s，二甲基). B.(4R，5S，6S)-3-〔(氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(1-吡咯烷基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-(1-吡咯烷基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(355mg，0.665mmol)溶解在THF(8ml)中，在冰-MeOH浴冷卻下，先用乙酸(500μl，8.73mmol)處理之，然后滴加1M氟化四丁銨在THF中的溶液(4.5ml，4.5mmol)。將該混合物攪拌30分鐘，然后在冷室(5℃)放置114小時(shí)。然后加入固體NaHCO3(1g)，并將該混合物攪拌30分鐘。將該混合物放在3塊制備TLC板上層析(2mm，用丙酮展開兩次)，得到污染有一些四丁銨鹽的標(biāo)題化合物(220mg，78.8%，Rf0.2); IR(凈態(tài))νmax3600-3200(OH)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.07-5.87(1H，m，乙烯基 H)，5.49-5.24(2H，m，乙烯基 H)，4.88-4.6(2H，m，烯丙基-CH2)，4.293(1H，dd，J＝3.2Hz，J＝10.4Hz，H-5)，4.17-4.02(1H，m，H-1′)，3.366(1H，dd，J＝3.2Hz，J＝9.2Hz，H-6)，3.2-2.8(9H，CH2S，(CH2)3N，H-4)，2.7-2.62(2H，m，CH2CN)，2.4-2.2(1H，m，HCH-4)，2.1-1.8(5H，m，CH2CH2，HCH-4)和1.404ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(1-吡咯烷基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下，將Pd(PPh3)4(20mg)和0.5M2-乙基己酸鉀在EtOAc中的溶液(1.1ml，0.55mmol)加到(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(1-吡咯烷基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(220mg，0.524mmol)在CH2Cl2(8ml)中的溶液中。將該混合物攪拌30分鐘后，用乙醚和0.05M pH7.0緩沖水溶液稀釋。再次用0.05M pH7.4緩沖液(3×3ml)提取有機(jī)層。合并水層，用乙醚(25ml)洗滌，并使之通過μ-Bondapak C18反相柱(25g，H2O，2-4% CH3CN-H2O)，冷凍干燥后，得到粉末狀的標(biāo)題化合物(145mg，73%); 純度(HPLC)97.2%(300nm); UV(H2O)λmax300(ε＝7500); IR(液體石蠟)νmax1760和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.33-4.24(1H，m，H-1′)，4.298(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝9.3Hz，H-5)，3.43(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝6.8Hz，H-6)，3.50-2.4(7H，m，(CH2)3N，H-4)，3.21-3.07，3.01-2.90(2H，2 組 m，CH2-S)，2.88-2.78(2H，m，CH2CN)，2.24-1.93(5H，m，CH2CH2和CH2-4)和1.336ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 實(shí)施例64 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氨甲?；一?硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-3-〔(2-氨甲?；一?硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在0-5℃和氮?dú)夥障?，?0分鐘時(shí)間同時(shí)加入氯磷酸二苯酯(1.20ml，5.8mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.0ml，5.74mmol)處理(4R，5R，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(5.28mmol，由實(shí)施例45所述的2.0g，5.28mmol重氮基前體環(huán)化制備)在無水CH3CN(40ml)中的溶液。然后加入少量的4-N，N-二甲氨基吡啶晶粒，并將該混合物攪拌1小時(shí)。補(bǔ)加N，N-二異丙基乙胺(0.92ml，5.3mmol)，再加入氯代三甲基硅烷(0.67ml，5.3mmol)，并將該混合物攪拌10分鐘。然后加入N，N-二異丙基乙胺(1.21ml，6.9mmol)，繼之加入3-巰基丙酰胺(0.73g，6.9mmol)〔按T.Endo等在“Chemistry Letters.443(1974)”和C.M.Buess等在“J.Am.Chem.Soc.，77，6613(1955)”中所述方法制備〕在N，N-二甲基甲酰胺(2ml)中的溶液，將該溶液在0-5℃攪拌18小時(shí)。加入EtOAc(300ml)和冷水使該反應(yīng)混合物驟冷。依次用飽和NaHCO3，0.2M pH7.0磷酸鹽緩沖液和鹽水洗滌有機(jī)相，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到一油狀物，將后者用四氫呋喃(20ml)和水(5ml)稀釋，并用乙酸(2ml)處理之。在22℃反應(yīng)1小時(shí)，并在5℃反應(yīng)18小時(shí)后，用EtOAc(300ml)稀釋該溶液，并按前述方法洗滌。經(jīng)干燥(MgSO4)并蒸除溶劑后，將殘留物在硅膠(5×10cm)上進(jìn)行層析，用梯度為0-10%乙醇的乙酸乙酯溶液進(jìn)行洗脫，蒸發(fā)UV活性級分，得到1.06g(46%)油狀標(biāo)題酯; IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)，1770(β-內(nèi)酰胺的C＝O)1710(肩峰，酯的C＝O)和1680cm-1(酰胺的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.27Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，疊氮基丁基的CH2-1，2，3)，2.05(d，J＝2.0Hz，1H，OH)，2.53(t，J＝7 Hz，2H，SCH2CH2CONH2)，3.0-3.3(m，4H，SCH2，H-6和H-4重疊，)，3.33(t，J＝6.1Hz，2H，CH2N3)，4.26(dd，JH5，H6＝2.61Hz，JH5，H4＝9.37Hz，1H，H-5)，4.26(與H-5重疊，1H，CH3CHO)，4.75(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，5.5和5.6ppm(2 寬 s，2 x 1H，CONH2). B.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氨甲?；一?硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在22℃，于氮?dú)夥障?，用Pd(PPh3)4(0.074g)和0.5M的2-乙基己酸鉀在EtOAc中的溶液(5.3ml，2.65mmol)處理(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-3-〔(2-氨甲?；一?硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.06g，2.42mmol)在EtOAc(50ml)中的溶液。30分鐘后，用水(2×50ml)提取該反應(yīng)混合物，合并水相，并將其置于真空條件下以除去痕量的有機(jī)溶劑。然后在0-5℃，在45psi氫氣壓下，用1.25g5%Pd/氧化鋁將上述水相氫化1小時(shí)。加入20ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液，濾出催化劑，并將濾液在反相硅膠(μ-Bondapak C-18，3.5×15cm)上層析兩次，用梯度為0-5%CH3CN的水溶液進(jìn)行洗脫，經(jīng)冷凍干燥后，得到0.36g(40%)白色非晶形粉末狀標(biāo)題化合物(HPLC純度為93%)。在相同的柱上再層析一次，用0.01M pH7.0磷酸鹽緩沖液代替水洗脫，然后使產(chǎn)物脫鹽，純度可達(dá)99% 純度(HPLC)99.5%(μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為0.7ml/分，UV檢測器304nm，保留時(shí)間為6.96分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(8，865); IR(KBr)νmax1750(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1670(內(nèi)酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.60(t，J＝6.4Hz，2H，CH2CONH2)，2.9-3.2(m，4H，SCH2和CH2NH2重疊)，3.4(m，2H，H-4和H-6)，4.23(dd，JH5，H6＝2.6Hz，JH5，H4＝9.15Hz，1H，H-5)和4.27ppm(m，1H，CH3CHO). 實(shí)施例65 (4R，5S，6S)-3-〔(2″-氰基乙基)硫基〕-4-(2-N-亞胺甲基氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.290g，0.89mmol)在冷(0-5℃)水(35ml)中的溶液用1M NaOH調(diào)到pH8.5，然后用10分鐘時(shí)間分小批量加入甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(0.76g，4.4mmol)處理之，其間將pH維持在8-8.5(1N NaOH)。20分鐘后，加入25ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液使反應(yīng)混合物驟冷，并用EtOAc洗滌。將水相置于真空條件下以除去痕量的有機(jī)溶劑，然后在反相硅膠(μ-Bondapak C-18，3.5×12cm)上進(jìn)行層析，先用0.01M pH7.0磷酸鹽緩沖液洗脫該柱。合并UV活性級分，冷凍干燥，在相同的柱上進(jìn)行脫鹽，用水洗脫。冷凍干燥后，得到白色非晶形粉末狀標(biāo)題化合物(0.120g，38%); 純度(HPLC)99%(μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，用1.5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為4.91分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax300nm(7，429); IR(KBr)νmax2250(弱CN)，1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)1610(亞胺甲基的C＝N)和1580cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.34(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，1.8-2.3(m，2H，氨基乙基的CH2-1)，2.8-3.2(m，4H，SCH2CH2CN)，3.45(與H-6重疊，1H，H-4)，3.47(dd，JH6，H5＝2.92Hz，JH6，H1＝6.87Hz，1H，H-6)，4.28(m，1H，CH3CHO)，4.32(dd，JH5，H6＝2.92Hz，JH5，H4＝6.68Hz，1H，H-5)，和7.85ppm(s，1H，CH＝NH). 實(shí)施例66 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷卻下，將(4R，5R，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(由(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-疊氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮制得，2.0g，5.49mmol)在CH3CN(40ml)中的溶液用氯磷酸二苯酯(1.3ml，6.0mmol)，N，N-二異丙基乙胺(0.98ml，6.0mmol)和少量的4-二甲氨基吡啶處理。將該混合物攪拌40分鐘，然后用2-氨甲酰氧基乙硫醇(1.33g，11.0mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.7ml，11.0mmol)處理所得到的磷酸烯醇酯。將該混合物在5℃攪拌24小時(shí)，然后再次用2-氨甲酰氧基乙硫醇(0.65ml，5.5mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.88ml，5.5mmol)處理之。再攪拌35小時(shí)后，用乙酸乙酯(200ml)稀釋該混合物，依次用冷水(2×50ml)，冷1M NaHSO3水溶液(2×50ml)，水(50ml)，1N HCl水溶液(50ml)，水(50ml)，1M NaHCO3水溶液(50ml)，水(50ml)和鹽水(50ml)洗滌，干燥(MgSO4)。使殘留物通過硅膠墊(25g，己烷→乙酸乙酯)，得到標(biāo)題化合物(1.29g，53%)，為黃色半結(jié)晶狀化合物; IR(CH2Cl2)νmax3680，3600，3540，3420(OH，NH2)，2100(N3)，1775，1740和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.04-5.87(1H，m，乙烯基-H)，5.50-5.22(2H，m，乙烯基 -H)，4.88-4.63(4H，m，NH2和烯丙基-CH2)，4.37-4.10(4H，m，H-1′，CH2O和H-4)，4.276(部分 H-4，d，J＝2.7Hz)，3.49-3.35(3H，m，CH2N3和H-4)，3.247(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.5Hz，H-6)，3.8-3.09，2.97-2.63(2H，2 組 m，SCH2)，1.96-1.55(3H，m，OH和CH2CH2)和1.388ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(520mg，1.18mmol)在CH2Cl2(50ml)中的溶液用Pd(PPh3)4(110mg，0.09mmol)處理，然后滴加0.5M2-乙基己酸鈉的乙酸乙酯溶液(2.36ml，1.18mmol)。將該混合物攪拌20分鐘，用乙醚(150ml)稀釋，用水(2×20ml)提取。合并水提取液，用乙醚(2×30ml)洗滌，并在帕爾氫化器中，在45-50psi氫氣壓下，于0℃，以5%Pd/氧化鋁(500mg)為催化劑，將上述反應(yīng)液振蕩1小時(shí)。用1M KH2PO4水溶液將上述溶液調(diào)至pH6.9。濾除催化劑，使該水溶液通過μBondapak C18反相柱(120g，H2O→1%→3%CH3CN/H2O)兩次，冷凍干燥后，得到粉末狀標(biāo)題化合物(155mg，35%); 純度99.0%(HPLC，300nm); UV(H2O)λmax302(ε 10600); IR(液體石蠟)νmax1755，1710和1585cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.34-4.21(4H，m，H-1′，H-5和CH2O)，3.47-3.35(1H，m，H-4)，3.356(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.5Hz，H-6)，3.21-2.88(4H，m，CH2N，SCH2)，2.0-1.4(4H，m，CH2CH2)和1.334ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 實(shí)施例67 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(4.69mmol，按實(shí)施例2所述方法將2.18g，4.69mmol重氮基前體環(huán)化制得)溶解在無水乙腈(36ml)中，于-15℃，在氬氣氛下，用氯磷酸二苯酯(1.02ml，4.9mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.87ml，5.0mmol)處理該溶液。加入少許4-N，N-二甲氨基吡啶晶體，并將該混合物在-15℃攪拌30分鐘，加入N，N-二異丙基乙胺(0.87ml，5.0mmol)和1-甲基-4-巰甲基-1，2，3-三唑(1.22g，9.4mmol)，并將該混合物在-15℃攪拌過夜。用EtOAc(250ml)稀釋該反應(yīng)混合物，并將它與來自0.54mmol重氮基前體起始的類似試驗(yàn)的混合物混合。依次用水，1M NaHSO3，飽和NaHCO3和鹽水洗滌所得溶液，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到一油狀物，將后者在硅膠(5×15cm)上層析，用EtOAc和甲苯的混合物(7∶13)洗脫，得到1.99g(69%)棕色油狀標(biāo)題化合物 IR(液體石蠟)νmax2105(N3)，1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.09(s，6H，SiCH3)，0.89(s，9H，Si-t-bu)，1.29(d，J＝6.14Hz，3H，CH3CHO)，1.72和2.04(2 x m，2 x 1H，CH2-4)，3.10(dd，J1′6＝7.19Hz，J5-6＝2.73Hz，1H，H-6)，3.30-3.64(m，2H，CH2N3)，3.65(ddd，J4-5＝J＝10.06Hz，J＝2.73Hz，1H，H-4)，4.01(d，Jgem＝14.62Hz，1H，CH2-S)，4.02-4.35(m，2H，H-5和CH3CHO)，4.08(s，3H，CH3-N)，4.26(d，Jgem＝14.58Hz，1H，CH2-S)，4.72(m，2H，烯丙基的CH2)，5.21-5.47和5.95(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，7.48(s，1H，三唑的CH). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.99g，3.63mmol)溶解在無水四氫呋喃(57ml)中，在0-5℃，于氬氣氛下，先用乙酸(1.25ml，21.8mmol)處理，然后加入11.3ml(11.3mmol)1M氟化四丁銨四氫呋喃溶液。將該溶液在5℃下放置10天。然后用EtOAc稀釋該反應(yīng)混合物，用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到一油狀物，后者經(jīng)硅膠(5×15cm)層析純化，用乙腈和EtOAc的混合物(3∶97)洗脫，得到1.09g(48%，按重氮基氮雜環(huán)丁酮計(jì)收率)淡黃色泡沫固體狀標(biāo)題化合物 IR(NaCl，壓片)νmax3490(OH)，2105(N3)，1780(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，和1710(酯的C＝O). 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.26Hz，3H，CH3CHO)，1.78和2.02-2.18(2 x m，2 x 1H，CH2-4)，2.07(d，J＝4.42Hz，1H，OH)，3.17(dd，J1′-6＝7.71Hz，J5-6＝2.76Hz，H-6)，3.39-3.65(m 2H，CH2N3)，3.74(ddd，J4-510，40Hz，J＝10.40 Hz，J＝2.42 Hz，H-4)，3.95(d，Jgem＝14.89Hz，1H，CH2-S)，4.08(s，3H，CH3-N)，4.14-4.27(m，1H，CH3CHO)，4.21(dd，J4-5＝9.54Hz，J5-6＝2.69Hz，H-5)，4.28(d，Jgem＝15.05Hz，1H，CH2-S)，4.73(m，2H，烯丙基的CH2)，5.22-5.48和5.94(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，7.48(s，1H，三唑的CH). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(495mg，1.14mmol)溶解在無水CH2Cl2(25ml)中，在0-5℃，在氬氣氛下，用Pd(PPh3)4(83mg)和2.5ml(1.25mmol)0.5M2-乙基己酸鈉的EtOAc溶液處理上述溶液。然后加入50ml水，分離有機(jī)層。用水(3×15ml)再提有機(jī)相，合并水層，并在減壓下除去有機(jī)溶劑。用419mg 5% Pd/氧化鋁，在45psi氫氣壓下，將殘留的水相氫化1小時(shí)。濾除催化劑，用1M NaH2PO4溶液(幾滴)中和濾液。將該混合物在反相硅膠(μ-Bondapak C-18，7×11cm)上層析，用梯度0-1%的乙腈水溶液進(jìn)行洗脫，然后將UV活性級分冷凍干燥，得到290mg(69%)標(biāo)題化合物，為淺黃色非晶形粉末; 純度(HPLC)97.3%(μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，用1.5% CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器302nm，保留時(shí)間為5.82分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(6091); IR(KBr)νmax1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1600(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200 Hz，D2O)δ1.31(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.80和2.17(2 x m，2 x 1H，CH2-4)，3.09(t，J＝8.33Hz，CH2N3)，3.32(ddd，J4-5＝J＝10.06Hz，J＝3.06Hz，1H，H-4)，3.41(dd，J7′-6＝6.56 Hz，J5-6＝2.79Hz，H-6)，3.95-4.28(m，4H，CH2-S，CH3CHO，H-5)，4.08(s，3H，CH3-N)，7.85(s，1H，三唑的C＝O). 實(shí)施例68 (4R，5S，6S)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-4-(4″-N-亞胺甲基氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
用1M NaOH將(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.411g，1.12mmol)在水(50ml)中的溶液調(diào)至pH8.5。然后用5分鐘時(shí)間分小批量加入甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(0.94g，5.4mmol)，其間，用1M NaOH將pH維持在8-8.5。20分鐘后，加入40ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液，用乙酸乙酯洗滌該溶液，并將水相置于減壓下除去痕量的有機(jī)溶劑。在0-5℃，將水相在反相硅膠(3.5×15cm，μ-Bondapak)上進(jìn)行層析，用梯度為0-10%的乙腈，在0.01M pH7.0磷酸鹽緩沖液中的溶液進(jìn)行洗脫。合并UV活性級分，減壓濃縮(t＜10℃)，在同樣的柱上，用水和乙腈(0-10%)洗脫去鹽。冷凍干燥后，得到白色非晶形粉末狀標(biāo)題化合物(0.224g，50%) 純度(HPLC)99%(μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，用8%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器304nm，保留時(shí)間為6.85分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax304nm(9，324); IR(KBr)νmax2250(CN)，1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1715(亞胺甲基的C＝N)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.31Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.1(m，8H，丁基的CH2-1，2和3及氰丙基的CH2-2)，2.64(t，J＝6.9Hz，2H，CH2CN)，2.7-3.1(m，2H，SCH2)，3.35(m，4H，CH2NH，H-4和H-6重疊)，4.2-4.4(m，2H，H-5和CH3CHO重疊)和7.79ppm(s，1H，CH＝NH). 實(shí)施例69 (4R，5S，6S)-4-(4″-N，N-二甲氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
用37%W/W甲醛(0.23ml，2.8mmol)和乙酸(0.2ml，3.5mmol)處理(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.221g，0.56mmol)在冷(0-5℃)水(5ml)中的溶液。結(jié)果pH為4.0。然后立即一次加入0.071g(1.1mmol)硼氫化鈉，繼之用2小時(shí)時(shí)間分小批量補(bǔ)加0.130g(2.1mmol)。然后加入20ml 0.2M pH7.0磷酸鹽緩沖液使反應(yīng)混合物驟冷，在反相硅膠(μ-Bondapak C18，2×15cm)上進(jìn)行層析。用梯度為0-5%的CH3CN-H2O進(jìn)行洗脫，經(jīng)冷凍干燥后，得到0.161g(68%)白色非晶形固體狀標(biāo)題化合物 純度(HPLC)94%(μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，用10%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1.5ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為8.19分鐘); UV(水，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax266(4980)和304nm(7.540); IR(KBr)νmax1758(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1582cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.29(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.86(s，6H，NCH3)，3.1(m，3H，CH2N和H-4)，3.29(dd，JH6，H5＝2.54Hz，JH6，H1＝6.35Hz，1H，H-6)，4.08(ABq，JAB＝14.9Hz，Δν＝24.2Hz，2H，SCH2)，4.08(與SCH2重疊，1H，H-5)，4.22(m，1H，CH3CHO)，7.45(dd，J＝4.9Hz，和J＝7.9Hz，1H，吡啶的H-5)，7.9(m，1H，吡啶的H-4)，8.44(dd，J＝1.5Hz，和J＝4.9Hz，1H，吡啶的H-6)和8.53ppm(d，J＝1.8Hz，1H，吡啶的H-2). 實(shí)施例70 (4R，5S，6S)-4-(4″-N-亞胺甲基氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃下，向(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.296g，0.75mmol)〔按實(shí)施例62制備〕在水(30ml)中的溶液中分次加入甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(0.65g，3.8mmol)，加料時(shí)間為10分鐘，與此同時(shí)用1M NaOH將pH維持在8-8.5。30分鐘后，加入0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液(25ml)，用乙酸乙酯洗滌所得混合物。將水相保持在真空條件下以除去痕量的有機(jī)溶劑，然后在反相硅膠(μ-Bondapak C-18，3.5×14cm)上進(jìn)行層析。先用梯度為0-8%在0.01M pH7磷酸鹽緩沖液中的CH3CN洗脫該柱。減壓下濃縮UV活性級分(T＜15℃)，然后再在同樣的柱上進(jìn)行層析，但是用水代替緩沖液。將UV活性級分冷凍干燥，得到0.21g(66%)白色非晶形粉末狀標(biāo)題化合物 純度(HPLC)98%(μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，用8%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，紫外檢測器304nm，保留時(shí)間為6.34分鐘; UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(8，586); IR(KBr)νmax1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)1715(亞胺甲基的C＝N)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.30(d，J＝6.36 Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.1-3.5(m，4H，H-4，H-6和丁基的CH2-4重疊)，4.08(s，3H，三唑的CH3-1)，4.09(ABq，JAB＝14.85Hz，△ν＝31.9Hz，2H，SCH2)，4.15(SCH2與CH3重疊，1H，H-5)，4.27(m，1H，CH3CHO)，7.8(寬 S，1H，CH＝NH)和7.87ppm(s，1H，三唑的H-5). 實(shí)施例71 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯
將(4R，5R，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙基酯(11.8mmol，將4.47g(11.8mmol)按實(shí)施例45所述制得的重氮基前體環(huán)化制得)在無水乙腈(50ml)中的溶液冷卻至0-5℃，并用5分鐘時(shí)間同時(shí)加入氯磷酸二苯酯(2.57ml，12.4mmol)和N，N-二異丙基乙胺(2.16ml，12.4mmol)處理之。1小時(shí)后，用5分鐘時(shí)間，依次滴加N，N-二異丙基乙胺(2.16ml，12.4mmol)和氯代三甲基甲硅烷(1.57ml，12.4mmol)。然后再加入N，N-二異丙基乙胺(2.16ml，12.4mmol)和2-巰基乙醇(1.84g，23.5mmol)，將該混合物在0-5℃攪拌16小時(shí)。然后用乙酸乙酯(500ml)稀釋該反應(yīng)混合物，用冷水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑后得到一油狀物，用四氫呋喃(100ml)和水(20ml)稀釋，在20℃下用乙酸(2ml)處理2小時(shí)。再次用乙酸乙酯稀釋該溶液，用飽和NaHCO3，0.2M pH7.0磷酸鹽緩沖液和鹽水洗滌。用無水MgSO4干燥后蒸掉溶劑，得到一油狀物，后者經(jīng)硅膠(4.5×10cm)層析，用甲苯/乙酸乙酯混合物(1∶1)洗脫，得到2.56g(52%)油狀標(biāo)題化合物 IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)，1765(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1705cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.29Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.8-3.2(m，2H，SCH2CH2OH)，3.18(dd，JH6，H5＝2.60Hz，JH6，H1＝7.18Hz，1H，H-6)，3.3(m，3H，CH2N3和H′-4重疊)，3.82(t，J＝6.0Hz，2H，SCH2CH2OH)，4.1-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO重疊)，4.75(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). B.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在22℃，于氮?dú)夥障?，用Pd(Ph3P)4(0.15g)和1.25g(6.9mmol)2-乙基己酸鉀處理(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯(2.56g，6.2mmol)在無水乙酸乙酯(60ml)中的溶液。2小時(shí)后，用冷水(3×50ml)提取該反應(yīng)混合物，合并水相，在反相硅膠(μ-Bondapak C18，3×13cm，用5%CH3CN-H2O洗脫)上進(jìn)行層析。然后，在0-5℃，于45psi氫氣壓下，在水(200ml)中，用2.0g 5%鈀/氧化鋁，將中間體鉀鹽(1.4g)氫化45分鐘。加入60ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液，然后濾出催化劑，將濾液在反相硅膠(μBondapak C18，3×13cm)上層析，用梯度為0-5%乙腈-水溶液洗脫，經(jīng)冷凍干燥后，得到0.689g(32%)白色非晶形固體狀標(biāo)題化合物〔α〕24D+74.0°(c1.0，H2O); 純度(HPLC)99%(μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，用pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，保留時(shí)間為9.68分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax304nm(7，616); IR(KBr)νmax1750(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1585cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)1.33(d，J＝6.38Hz，3H，CH3CHO)1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.8-3.1(m，2H，SCH2CH2OH)，3.02(t，J＝7.6Hz，2H，CH2NH2)，3.36(m，2H，H-4和H-6 重疊)，3.77(t，J＝6.2 Hz，2H，SCH2CH2OH)，4.22(dd，JH5，H6＝2.43Hz，1H，H-5)和4.26ppm(m，與H-5重疊，1H，CH3CHO). 實(shí)施例72 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(4″-胍基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.300g，0.85mmol)〔按實(shí)施例17制備〕在冷(0-5℃)水(20ml)中的溶液用1M NaOH調(diào)至pH8，然后用5分鐘分小批量加入氨基亞氨基甲磺酸(0.35g，2.8mmol)〔K.Kim等人，Tetrahedron Lett.，29，3183(1988)〕處理上述溶液。在加料期間用1M NaOH將pH維持在8-8.5，并將該pH維持2小時(shí)。然后加入10ml pH6.0 0.2M磷酸鹽緩沖液，將該溶液在反相硅膠(μ-Bondapak C18，2.5×14cm)上進(jìn)行層析。用梯度為0-5%的乙腈水溶液洗脫，冷凍干燥后，得到0.257g(77%)非晶形粉末狀標(biāo)題化合物〔α〕22D+45.5°(c1.0，H2O)。
純度(HPLC)99%(μ-Bondapak C-18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，紫外檢測器300nm，保留時(shí)間為11.1分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(8，676); IR(KBr)νmax2250(弱 CN)，1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)1665(胍基的C＝N)和1685cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.39Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.8-3.3(m，4H，SCH2CH2CN)，3.22(t，J＝6.5Hz，CH2NH)，3.36(dd，JH6，H5＝2.34Hz，JH6，H1＝6.22Hz，1H，H-6)，3.4(與H-6重疊，1H，H-4)和4.2-4.4ppm(m，2H，H-5和CH3CHO重疊). 實(shí)施例73 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-胍基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
向(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.185g，0.57mmol)〔按實(shí)施例36制備〕在冷(0-5℃)水(20ml)中的溶液中用5分鐘時(shí)間分小批量加入氨基亞氨基甲磺酸(0.35g，2.8mmol)〔K.Kim等人，Tetrahedron Lett.，29，3183(1988)〕，與此同時(shí)，用1M NaOH將pH維持在8-8.5。將pH維持在8-8.5之時(shí)反應(yīng)1小時(shí)，然后加入5ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液使反應(yīng)混合物驟冷。將該溶液在反相硅膠(μ-Bondapak C-18，2.5×14cm)上進(jìn)行層析，用梯度為0-2%乙腈/水進(jìn)行洗脫，將UV活性級分冷凍干燥，得到0.035g(17%)標(biāo)題化合物，為白色非晶形粉末 純度(HPLC)99%(μ-Bondapak C-18，3.9mm/30cm，用2%CH3CN/H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為5.98分鐘)。
UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax300nm(7，483); IR(KBr)νmax2255(弱 CN)，1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)1660(胍基的C＝N)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.34(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.7-2.3(m，2H，CH2胍基乙基的CH2-1)，2.7-3.4(m，7H，SCH2CH2CN，胍基乙基的CH2-2及H-4)，3.45(dd，JH6H5＝2.69Hz，JH6，H1＝6.8Hz，1H，H-6)和4.3ppm(m，2H，H-5和CH3CHO重疊). 實(shí)施例74 (4R，5S，6S)-4-(N-亞胺甲基-4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃下，用1M NaOH將(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.205g，0.59mmol)在水(20ml)中的溶液調(diào)至pH8.5。然后分小批量加入甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(0.39g，2.27mmol)(10分鐘)，與此同時(shí)用1M NaOH將pH維持在8-8.5。15分鐘后，加入10ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液使反應(yīng)混合物驟冷，用乙酸乙酯(20ml)洗滌。然后在反相硅膠(μBondapak C-18，2×14cm)上將水相層析，用梯度為0-2%乙腈在0.02M pH7.0磷酸鹽緩沖液中的溶液作為洗脫劑。合并UV活性級分，濃縮至50ml，在同樣的柱上用水代替緩沖液進(jìn)行脫鹽。UV活性級分經(jīng)冷凍干燥后得到0.154g(69%)白色非晶形固體狀標(biāo)題化合物〔α〕24D+67.0°(c1.0，H2O); 純度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用2%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為10.2分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax304nm(10，105); IR(KBr)νmax1750(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1715(亞胺甲基的C＝N)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.8-3.1(m，2H，SCH2CH2OH)，3.3-3.5(m，4H，H-4，H-6和CH2NH重疊)，3.77(t，J＝6.21Hz，2H，SCH2CH2OH)，4.21(dd，JH5，H6＝2.25Hz，1H，H-5)，4.26(m與H-5重疊，1H，CH3CHO)，和7.78ppm(寬 s，1H，CH＝NH). 實(shí)施例75 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5R，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(5.28mmol，將2.0g，5.28mmol按實(shí)施例45制得的重氮基前體環(huán)化制得)溶解在無水CH3CN(40ml)中，在0-5℃，氮?dú)夥障拢?分鐘時(shí)間同時(shí)加入氯磷酸二苯酯(1.2ml，5.8mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.0ml，5.8mmol)處理之。然后加入少許4-N，N-二甲氨基吡啶晶體，并將該混合物攪拌40分鐘。補(bǔ)加N，N-二異丙基乙胺(1.84ml，10.6mmol)，繼之加入在無水CH3CN(3ml)中的5-巰基甲基-1-N-甲基咪唑(1.35g，10.5mmol)。3小時(shí)后，用乙酸乙酯稀釋該反應(yīng)混合物，依次用水，飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸除溶劑后，殘留物在硅膠(4.5×10cm)上進(jìn)行層析，用乙酸乙酯，CH3CN和丙酮的混合物(8∶1∶1至4∶3∶3)洗脫。蒸發(fā)UV活性級分，得到1.86g(76%)油狀標(biāo)題化合物 IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)，1770(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.25Hz，3H，CH3CHO)，1.4-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.17(dd，JH5，H6＝2.72Hz，JH3，H4＝7.36Hz，1H，H-6)，3.2(m，1H，H-4)，3.32(t，J＝6.0 Hz，2H，CH2N3)，3.68(s，3H，咪唑的CH3-1)，4.02(ABq，JAB＝14.3Hz，Δν＝33.0Hz，2H，SCH2)，4.1-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO)，4.74(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，6.93(s，1H，咪唑的H-4)，和7.42ppm(s，1H，咪唑的H-2). B.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.86g，4.04mmol)溶解在乙酸乙酯(75ml)中，于22℃，在氮?dú)夥障?，用Pd(PPh3)4(0.075g)和8.9ml(4.45mmol)0.5M2-乙基己酸鉀在乙酸乙酯中的溶液處理之。45分鐘后，用水(2×75ml)提取該反應(yīng)混合物，合并水相，并將其置于真空條件下以除去痕量的有機(jī)溶劑。在0-5℃，45psi氫氣壓下，用5%鈀/氧化鋁(2.1g)將上述水溶液氫化1小時(shí)。然后加入30ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液，濾除催化劑。將濾液在反相硅膠(μ-Bondapak C18，3.5×11cm)上進(jìn)行層析，用梯度為0-8%乙腈水溶液作為洗脫劑。將UV活性級分冷凍干燥，得到0.528g(33%)標(biāo)題化合物，為白色非晶形粉末〔α〕22D-22.4°(c1.0，H2O); 純度(HPLC)97.3%(μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，用8%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器302nm，保留時(shí)間為5.88分鐘); UV(水，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(7，569); IR(KBr)νmax1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1585cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.31(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.99(t，J＝7.6Hz，2H，CH2NH2)，3.22(寬 t，1H，H-4)，3.33(dd，JH6，H5＝2.56Hz，JH6，H1＝6.34Hz，1H，H-6)，3.71(s，3H，咪唑的CH3-1)，4.07(ABq，JAB＝14.8 Hz，Δν＝38.45Hz，2H，SCH2)，4.13(dd與SCH2重疊，JH5，H6＝2.56Hz，1H，H-5)，4.24(m，1H，CH3CHO)，6.94(s，1H，咪唑的H-4)和7.66ppm(s，1H，咪唑的H-2). 實(shí)施例76 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氨甲?；一?硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(2-氨甲?；一?硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯
將由(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-疊氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(2.00g，5.49mmol)新鮮制備的(2R，4R，5R，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙基酯在CH3CN(50ml)中的溶液用冰-MeOH浴冷卻，用氯磷酸二苯酯(1.3ml，6.0mmol)，N，N-二異丙基乙胺(1.1ml，6.0mmol)和痕量4-二甲氨基吡啶(10mg)滴加處理之。將該混合物攪拌1小時(shí)，用在DMF(5ml)中的2-氨甲?；伊虼?1.16g，11.0mmol)和N，N-二異丙基乙胺(2.0ml，11mmol)處理之。將該混合物在冷室中攪拌20小時(shí)。然后再次用硫醇(580mg，5.5mmol)和N，N-二異丙基乙胺處理該混合物，并攪拌反應(yīng)72小時(shí)。用乙酸乙酯(200ml)稀釋，依次用水(2×100ml)，1M NaHCO3水溶液(1×100ml)，水(3×100ml)和鹽水(100ml)洗滌，干燥(MgSO4)。使殘留物(2.6g)通過閃式硅膠柱(75g，乙酸乙酯→丙酮)，得到油狀標(biāo)題化合物(0.84g，36%); IR(CH2Cl2)νmax3680，3600，3520，3410(OH和NH2)，2100N3，1775，1710，1690和1675cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-5.89(1H，m乙烯基)，5.7，5.6(2H，bd，NH2)，5.22(2H，m，乙烯基-H)，4.9-4.6(2H，m，烯丙基-CH2)，4.266(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝7.5Hz，H-5)，3.6-3.27(3H，m，CH2N3和H-4)，3.251(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.2Hz，H-6)，3.23-2.95(2H，m，SCH2)，2.6-2.45(2H，m，CH2CON)，2.25(1H，bs，OH)，1.95-1.5(4H，m，CH2-CH2-4)和1.373ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氨甲?；一?硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下，用Pd(PPh3)4處理(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(2-氨甲?；一?硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯(0.84g，2.0mmol)在CH2Cl2(20ml)中的溶液，然后滴加0.5M2-乙基己酸鈉的乙酸乙酯溶液(4.2ml，2.1mmol)。將該混合物攪拌45分鐘，然后用乙酸乙酯(75ml)稀釋，用冰冷的水(1×50ml和2×25ml)提取。合并水提取液，用乙醚洗滌，并在帕爾氫化器中，在5℃(冰浴)和45-50psi氫氣壓下，用5%Pd/氧化鋁(800mg)作為催化劑將上述溶液氫化90分鐘。用1M KH2PO4水溶液將上述溶液調(diào)至pH6.9。濾除催化劑，使水層通過μBondapak C18反相柱(160g，H2O→4%CH3CN/H2O)，經(jīng)冷凍干燥后，得到粉末狀標(biāo)題化合物(340mg，48%) 純度94.7%(304nm，HPLC); UV(H2O)λmax302(ε9260); IR(液體石蠟)νmax3600-3100(OH，NH2);1750-1665和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.35-4.21(1H，m，H-1′)，4.239(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝5.3Hz，H-5)，3.45-3.36(1H，m，H-4)，3.385(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝6.6Hz，H-6)，3.2-2.8(4H，m，CH2N和SCH2)，2.63-5.55(2H，m，CH2CO)，2.0-1.45(4H，m，(CH2)2-4)和1.331ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例77 (4R，5S，6S)-4-(4″-N-亞胺甲基氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃下，將(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.269g，0.68mmol)在水(30ml)中的溶液用1M NaOH調(diào)至pH8.5。然后分小批量加入甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(0.6g，3.49mmol)，其間用1M NaOH將pH維持在8-8.5。30分鐘后，加入25ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液使反應(yīng)混合物驟冷，用乙酸乙酯洗滌。然后將水相在反相硅膠(3.5×12cm)上層析，用梯度為0-8%在0.01M pH7.0磷酸鹽緩沖液中的乙腈溶液為洗脫劑。合并UV活性級分，濃縮，在相同的柱上通過用水和乙腈洗脫脫鹽。將UV活性級分冷凍干燥，得到白色非晶形粉末狀標(biāo)題化合物，0.180g(63%)〔α〕22D-23.1°(c1.0，水) 純度(HPLC)97.6%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用8%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器302nm，保留時(shí)間為9.45分鐘); IR(KBr)νmax1750(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1715(亞胺甲基的C＝N)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.30(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.2-3.5(m，4H，H-4，H-6和CH2N)，3.71(s，3H，咪唑的CH3-1)，4.08(ABq，JAB＝14.68Hz，Δν＝37.4Hz，2H，SCH2)，4.14(dd與SCH2重疊，JH5，6＝2.43Hz，JH5，H4＝9.38Hz，1H，H-5)，4.24(m，1H，CH3CHO)，6.93(s，1H，咪唑的H-4)，7.62(s，1H，咪唑的H-2)和7.79ppm(s，1H，CH＝NH). 實(shí)施例78 (4R，5S，6S)-4-(4″-胍基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.134g，0.34mmol)在15ml冷水(pH6.4)中的溶液用1M NaOH調(diào)至pH8.0。然后用5分鐘時(shí)間，分小批量加入0.170g(1.36mmol)氨基亞氨基甲磺酸〔K.Kim等人，Tet Lett.，29，3183(1988)〕，其間用1M NaOH將pH維持在8。然后以30分鐘的間隔，分三次補(bǔ)加氨基亞氨基甲磺酸(3×0.050g)，將所得混合物(含有一些不溶物)在0-5℃下攪拌3小時(shí)。在整個(gè)反應(yīng)過程中用1M NaOH將pH維持在8。然后加入15ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液，并將所得均相溶液在反相硅膠(μBondapak C18，2.5×14cm)上進(jìn)行層析，用含0-10%乙腈的水溶液進(jìn)行梯度洗脫，經(jīng)冷凍干燥后，得到0.103g(69%)白色非晶形粉末狀標(biāo)題化合物。該冷凍干燥物僅微溶于水 純度(HPLC)99%(μBondapak C-18，3.9mm×30cm，用10%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1.5ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為7.47分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax262(5，360)和304nm(8，765); IR(KBr)νmax1752(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1665(胍基的C＝N)，1600cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.27(d，J＝6.33Hz，3H，CH3CHO)，1.1-1.7(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.1(m，1H，H-4)，3.15(t，J＝6.4Hz，2H，CH2N)，3.26(dd，JH6，H5＝2.45Hz，JH6，H1＝6.06Hz，1H，H-6)，4.05(ABq，JAB＝14.76Hz，Δν＝22.9Hz，2H，SCH2)，4.05(與SCH2重疊，1H，H-5)，4.21(m，1H，CH3CHO)，7.47(d，J＝6.2Hz，2H，吡啶的H-3)和8.47ppm(d，J＝6.2Hz，2H，吡啶的H-2). 實(shí)施例79 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯
在0-5℃，在氮?dú)夥障?，用氯磷酸二苯?1.14ml，5.5mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.96ml，5.5mmol)處理(4R，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(5mmol，通過將重氮基前體環(huán)化制得)在無水CH3CN(75ml)中的溶液。然后加入少許4-N，N-二甲氨基吡啶晶體，將該混合物攪拌1小時(shí)。加入5-巰甲基-1-N-甲基咪唑(1g，7.5mmol)在無水CH3CN(1ml)中的溶液，然后加入N，N-二異丙基乙胺(1.3ml，7.5mmol)。3小時(shí)后，用EtOAc(150ml)稀釋反應(yīng)混合物，依次用水，飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸掉溶劑后，將殘留物在硅膠(3.5×6.5cm)上層析，先用CH3CN-EtOAc梯度(25∶75→100∶0)，然后用丙酮作為洗脫劑進(jìn)行洗脫。合并含有所期化合物的級分，減壓濃縮，得到1.29g(58%)油狀標(biāo)題化合物; IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)，1775β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.24Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，3.23(dd，JH5，H6＝2.69Hz，JH3，H4＝7.73Hz，1H，H-6)，3.3-3.4(m，3H，H-4和CH2-N3重疊)，3.70(s，3H，咪唑的CH3-1)，4.05(ABq，2H，SCH2)，4.1-4.3(m，2H，H-5 and CH3CHO)，4.75(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，6.94(s，1H，咪唑的H-4)，和7.45ppm(s，1H，咪唑的H-2). B.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃，在氮?dú)夥障拢肞d(PPh3)4(0.275g)和2-乙基己酸鈉(0.450g)處理(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.25g，2.8mmol)在乙酸乙酯(35ml)中的溶液。撤去冷卻浴，將該反應(yīng)混合物在22℃攪拌1小時(shí)。然后用水(3×60ml)提取反應(yīng)混合物，合并水相，并將其置于減壓下以除去痕量的有機(jī)溶劑。然后在0-5℃，50psi氫氣壓下，用5%Pd/氧化鋁(1.25g)將水相氫化3小時(shí)。濾除催化劑，用2N HCl將pH調(diào)至6.2。將所得濾液濃縮至約50ml，在反相硅膠(μ-Bondapak C18，3.5×14cm)上層析兩次，用梯度為0-5%的乙腈的水溶液進(jìn)行洗脫。將純的級分(用反相-TLC檢測)冷凍干燥，得到0.39g(38%)灰白色非晶形粉末狀標(biāo)題化合物。
純度(HPLC)97.8%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用8%CH3CN-H2O pH 7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為5.00分鐘); UV(H2O)λmax300nm(7396); IR(KBr)νmax1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1590cm-1羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.31(d，J＝6.36Hz，3H，CH2CHO)，1.3-1.9(m，3H，丙基的CH2-1，2)，2.99(t，J＝7.15，2H，CH2NH2)，3.25(寬 t，1H，H-4)，3.37(dd，JH6，H5＝2.66，JH6，H1＝6.46Hz，1H，H-6)，3.72(s，3H，咪唑的CH3-1)，4.08(ABq，2H，SCH2)，4.15-4.3(m與SCH2重疊，2H，H-5和CH3CHO)，6.96(s，1H，咪唑的H-4和7.67ppm(s，1H，咪唑的H-2). 實(shí)施例80 (4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-亞胺甲基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-N-甲基咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(300mg，0.789mmol)在水(40ml)中的溶液在冰浴中冷卻，用1N NaOH水溶液將該溶液調(diào)至pH 8。將甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(5當(dāng)量，3.94mmol，0.68g)分次加到該混合物中，用1N NaOH水溶液將pH保持在8-8.5。待加料結(jié)束后，將該反應(yīng)混合物攪拌15分鐘，然后用1N HCl水溶液將pH調(diào)至6.5，用乙酸乙酯(2×30ml)洗滌。不加熱在減壓下濃縮水相，在反相硅膠(μBondapak C18，3.5×13cm)上用0.01M pH6.0磷酸鹽緩沖液和梯度為0-3%CH3CN洗脫。將純的級分冷凍干燥，在反相柱上再次純化，以除去鹽(水→5%CH3CN-H2O)，冷凍干燥后，得到0.115g(36%)白色非晶形固體狀標(biāo)題化合物。
純度(HPLC)99.2%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，流速為1ml/分，用8%CH3CN-KH2PO40.01M pH7.4洗脫，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為6.30分鐘); UV(H2O)λmax800nm(ε＝7853); IR(KBr)νmax1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1715(C＝N和1590cm-1(羧酸根的C＝O; 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.30(d，J＝6.37Hz，CH3)，1.3-1.72(4H，m，CH2CH2)，3.19-3.40(3H，m，CH2N和H-6重疊)，3.71(3H，s，N-CH3)，4.08(ABq，J＝14.87Hz，Δν＝45.5Hz，2H，SCH2)，4.2(m，1H，CH3CHO)，6.95(s，1H，咪唑的H-4)，7.65(s，1H，咪唑的H-2和7.81(s，1H，CH＝NH). 實(shí)施例81 (4R，5S，6S)-4-(4″-N，N-二甲基氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃，用37%甲醛(0.2ml，約2.5mmol)，乙酸(0.052ml，0.9mmol)和氰基硼氫化鈉(0.056g，0.9mmol)處理(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.176g，0.45mmol)在水(8ml)中的溶液。最終混合物為pH4.2。HPLC監(jiān)測反應(yīng)完成。用5小時(shí)時(shí)間加入氰基硼氫化鈉(6×0.050g)和甲醛(2×0.1ml)，其間用乙酸將pH保持在4.5-5。然后加入15ml 0.2M pH7.0磷酸鹽緩沖液使該反應(yīng)混合物驟冷，用1M NaOH將溶液的pH調(diào)至6.5。經(jīng)HPLC測定，該產(chǎn)物是二甲基和N-甲基-N-氰甲基衍生物的混合物(74∶20)。將該溶液在反相硅膠(μBondapak C18，2.5×18cm)上層析兩次，用梯度為0-10%的乙腈的水溶液進(jìn)行洗脫。
將第一級分冷凍干燥，得到0.021gN-甲基-N-氰甲基化合物。
后續(xù)級分得到0.104g(55%)白色非晶形粉末狀標(biāo)題化合物〔α〕22D+4.0°(c0.5，水); 純度(HPLC)95%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用10% CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，保留時(shí)間為12.0分鐘); UV(水，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax262(6032)和304nm(9，937); IR(KBr)νmax1758(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1600cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.1-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，1.28(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，2.85(s，6H，NCH3)，2.9-3.2(m，3H，H-4和CH2N)，3.27(dd，JH6，H5＝2.54Hz，JH6，H1＝6.34Hz，1H，H-6)，4.06(ABq，JAB＝14.9Hz，Δν＝23.4Hz，2H，SCH2)，4.08(與SCH2重疊，1H，H-5)，4.21(m，1H，CH3CHO)，7.49(～d，2H，吡啶的H-3)和8.49ppm(～d，2H，吡啶的H-2). 實(shí)施例82 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(2R，4R，5R，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(由(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-疊氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(1.7g，4.7mmol)新鮮制備)溶解在CH3CN(50ml)中，在冰-甲醇浴冷卻下，用氯磷酸二苯酯(1.1ml，5mmol)，N，N-二異丙基乙胺(0.92ml，5.0mmol)和少量4-二甲氨基吡啶(5mg)處理上述溶液。將該混合物攪拌1小時(shí)，滴加4-巰甲基-1-甲基-1，2，3-三唑(1.21g，9.40mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.84ml，10.0mmol)處理上述磷酸烯醇酯。在5℃(冷室)攪拌20小時(shí)后，用乙酸乙酯(200ml)稀釋該反應(yīng)混合物，依次用冷的1M NaHCO3水溶液(2×100ml)，水(2×100ml)，1M NaHSO3水溶液(1×100ml)，水(2×100ml)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。使殘留物(3g)通過閃式硅膠墊(150g，1/1己烷/乙酸乙酯→乙酸乙酯)，得到油狀標(biāo)題化合物(1.0g，47%); IR(CH2Cl2)νmax3680，3600，3400(OH)，2100(N3)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ7.489(1H，s，芳族 -H)，6.02-5.87(1H，m，乙烯基-H)，5.47-5.20(2H，m，乙烯基-H)，4.85-4.59(2H，m，烯丙基 CH2)，4.274，4.199，3.961，3.886(2H，ABq，J＝15.1Hz，CH2-芳族)，4.25-4.12(1H，m，H-1′)，4.159(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.6Hz，H-5)，4.071(3H，s，N-Me)，3.64-3.53(1H，m，H-4)，3.49-3.36(2H，m，CH2-N3)，3.228(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.3Hz，H-6)，2.3(1H，bs，OH)，2.03-1.5(4H，m，(CH2)2-4)和1.357ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
用Pd(PPh3)4(100mg)處理冰浴冷卻下的(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.0g，2.2mmol)在CH2Cl2(50ml)中的溶液，然后滴加0.5M2-乙基己酸鈉在乙酸乙酯中的溶液(4.6ml，2.3mmol)。將該混合物攪拌1.5小時(shí)，用乙酸乙酯(150ml)稀釋，用水(1×75ml，2×30ml)提取。合并水提取液，用乙醚洗滌，并在帕爾氫化器中，在5℃(冰浴)和45-50psi氫氣壓下，用5%Pd/氧化鋁作催化劑，將上述溶液振蕩氫化1小時(shí)。補(bǔ)加催化劑(1g)，再振蕩氫化1.5小時(shí)，然后濾除催化劑。使該水溶液通過μBondapak C18反相柱(200g，水→5% CH3CN/H2O)，冷凍干燥后，得到粉末狀標(biāo)題化合物(500mg，59%) 純度97.2%(304nm，HPLC); UV(H2O)λmax302(ε8250); IR(液體石蠟)νmax3600-3100(OH)，1755和1585cm-1(C＝O); 1H nmr(D2O，200MHz)δ7.866(1H，s，芳族 H)，4.30-4.18(1H，m，H-1′)，4.216，4.143，4.034，3.959(2H，ABq，J＝14.7Hz，CH2- 芳族)，4.085(3H，s，N-CH3)，4.10-4.08(1H，m，隱藏 H-5)，3.356(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝6.5Hz，H-6)，3.33-3.20(1H，m，H-4)，3.07-3.00(2H，m，CH2N3)，1.95-1.40(4H，m，(CH2)2-4)和1.312ppm(3H，d J＝6.3Hz，CH3). 實(shí)施例83 (4R，5S，6S)-3-〔(2-乙酰氨基乙基)硫基〕-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
由污染有N-乙?；腚装返臍埩?-氨甲酰基乙硫醇按實(shí)施例77進(jìn)行反應(yīng)，制得了標(biāo)題化合物，并按常規(guī)方法分離之。冷凍干燥后，得到粉末狀標(biāo)題化合物; 純度95%(304nm，HPLC); UV(H2O)λmax302(ε＝7810); IR(液體石蠟)νmax3600-3100 OH，NH)，1755，1650和1600cm-1(C＝O); 1H nmr(D2O，200MHz)δ4.30-4.20(1H，m，H-1′)，4.230(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.3Hz，H-5)，3.5-3.3(4H，m，H-6，H-4和CH2-NAc)，3.1-2.95(3H，SHCH和CH2N)，1.9-1.7(1H，m，SHCH)，1.999(3H，s，NAc)，1.9-1.5(4H，m，(CH2)2-4)和1.332ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例84 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氨甲?；一?硫基〕-4-〔3″-(N-亞胺甲基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氨甲酰乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(180mg，0.500mmol)溶解在0.05M pH7.0磷酸鹽緩沖液(50ml)中，在冰浴冷卻下，先用0.1N NaOH水溶液處理之(上升pH，并維持在pH8.2左右)，然后分次加入甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(0.87g，5.0mmol)。將該混合物攪拌20分鐘，加入1M NaH2PO4水溶液將pH降至7.0。使該混合物通過μBondapak C18柱(3.6g，H2O→4%CH3CN/H2O)，冷凍干燥后，得到粉末狀標(biāo)題化合物(110mg，57%); 純度93.1%(HPLC，302mm); UV(H2O)λmax302(ε7550); IR(液體石蠟)νmax3600-3100(NH2，OH)，1750，1665和1590cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.34-4.22(2H，m，H-1′和H-5)，4.225(部分H-5，d，J＝2.6Hz)，3.49-3.34(4H，m，CH2N3，H-5和H-4)，3.351(部分 H6，d，J＝2.4Hz)，3.15-2.85(1H，2 組 m，SCH2)，2.71-2.51(2H，m，CH2CON)，2.0-1.46(4H，m，(CH22-4)和1.322ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例85 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(5.28mmol，將2.0g，5.28mmol重氮基前體環(huán)化制得)溶解在無水乙腈(40ml)中，在0-5℃，氮?dú)夥障?，?分鐘時(shí)間同時(shí)加入氯磷酸二苯酯(1.2ml，5.8mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.0ml，5.7mmol)處理之。然后加入少許4-N，N-二甲氨基吡啶晶體，并將該混合物攪拌1小時(shí)。冷卻至-20℃，先加入N，N-二異丙基乙胺(1.84ml，10.56mmol)，再加入在5ml乙腈中的4-巰甲基-1，2，3-噻二唑(1.45g，10.96mmol)處理之。1小時(shí)后，溫度緩慢地升至0℃，使該混合物在水和乙酸乙酯(400ml)之間分配。依次用1M NaHSO3，飽和NaHCO3和鹽水洗滌有機(jī)相，干燥(MgSO4)。蒸除溶劑得到一油狀物，后者在硅膠(5×11cm)上層析，用乙酸乙酯/甲苯(8∶2至1∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到1.95g(79%)油狀標(biāo)題化合物 IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)，1770(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1708cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.28Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.18(dd，JH6，H5＝2.70Hz，JH6，H1＝7.21Hz，1H，H-6)，3.34(t，J＝6.1Hz，2H，CH2N3)，3.46(寬 t，1H，H-4)，4.17(dd，JH5，H6＝2.70Hz，JH5，H4＝9.7Hz，1H，H-5)，4.22(m，1H，CH3CHO)，4.50(ABq，JAB＝14.95Hz，Δν＝73.5Hz，2H，SCH2)，4.74(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，和8.47ppm(s，1H，噻二唑的H-5). B.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.95g，4.2mmol)溶解在乙酸乙酯(75ml)中，于22℃，氮?dú)夥障?，用Pd(PPh3)4(0.075g)和9.2ml(4.6mmol)0.5M2-乙基己酸鉀在乙酸乙酯中的溶液處理該溶液。45分鐘后，用水(2×75ml)提取反應(yīng)混合物，合并水提取液，并將其置于減壓條件下以除去痕量有機(jī)溶劑。然后在0-5℃，45psi氫氣壓下，用2.1g5%Pd/氧化鋁，將上述水相氫化2小時(shí)。然后加入30ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液，濾除催化劑。將濾液在反相硅膠(μBondapak C18，3.5×15cm)上層析，用梯度為0-8%的乙腈水溶液為洗脫劑。
收集第一級分，冷凍干燥后得到0.17g白色固體狀(4R，5S，6S)-4-(4″-羥基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鹽(Na，K鹽)。后續(xù)級分得到0.576g(34%)白色非晶形固體狀標(biāo)題化合物 純度(HPLC)97.7%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用8%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為0.8ml/分，保留時(shí)間為6.75分鐘); UV(水，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax260(5470)和302nm(9，209); IR(KBr)νmax1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1585cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.29(d，J＝6.36Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，3.0(t，J＝7.6Hz，2H，CH2NH2)，3.21(寬 t，1H，H-4)，3.32(dd，JH6，5＝2.45Hz，JH6，H1＝6.25Hz，1H，H-6)，4.10(dd，JH5，H6＝2.45Hz，JH5，H4＝9.42Hz，1H，H-5)，4.23(m，1H，CH3CHO)，4.51(ABq，JAB＝14.94Hz，Δν＝40.2Hz，2H，SCH2)，和8.89ppm(s，1H，噻二唑的H-5). 實(shí)施例86 (4R，5S，6S)-4-(4″-N-亞胺甲基氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.250g，0.63mmol)溶解在水(30ml)中，在0-5℃下，用10分鐘時(shí)間分小批量加入甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(0.60g，3.5mmol)，其間用1M NaOH將pH維持在8-8.5之間。20分鐘后，加入25ml 0.2M pH6緩沖液，并用乙酸乙酯(20ml)洗滌該混合物。將水相置于真空條件下以除去痕量的有機(jī)溶劑，將該水溶液在反相硅膠(μBondapak C18，3.5×15cm)上層析。先用梯度為0-8%的乙腈在0.01M pH7.0磷酸鹽緩沖液中的溶液洗脫。合并UV活性級分，冷凍干燥，再次在相同的柱上層析，用水代替緩沖液洗脫。將UV活性級分冷凍干燥，得到0.21g(78%)白色非晶形固體狀標(biāo)題化合物;〔α〕22D-28.4°(c1.0，水); 純度(HPLC)98%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用8%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫;流速為1ml/分，UV檢測器302nm，保留時(shí)間為7.8分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax258(5，318)和302nm(8，795); IR(KBr)νmax1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1710(亞胺甲基的C＝N)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.29(d，J＝6.39Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)3.2-3.5(m，4H，H-6和丁基的CH2-4重疊)，4.10(dd，JH5，H6＝2.47Hz，JH5，H4＝9.43Hz，1H，H-5)，4.23(m，1H，CH3CHO)，4.51(ABq，JAB＝15.0Hz，Δν＝39.4Hz，2H，SCH2)，7.8(寬 s，1H，CH＝NH)，和8.9ppm(s，1H，噻二唑的H-5). 實(shí)施例87 (4R，5S，6S)-4-(4″-胍基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃，用1M NaOH將(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.150g，0.44mmol)在水(10ml)中的溶液調(diào)至pH8，然后用5分鐘時(shí)間分小批量加入氨基亞氨基甲磺酸(0.216g，1.74mmol)處理之。在整個(gè)加料過程中用1M NaOH將pH維持在8-8.5，然后再維持該pH值3小時(shí)。加入10ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液使該冷的反應(yīng)混合物驟冷，繼之在反相硅膠(μBondapak C18，2.5×16cm)上層析。用梯度為0-5%乙腈水溶液洗脫，將UV活性的級分冷凍干燥后得到0.115g(68%)標(biāo)題化合物 純度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9×30cm，用5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為7.19分鐘); UV(水，pH7.4 pl磷酸鹽緩沖液)λmax304nm(9，530); IR(KBr)νmax1750(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1665(胍基的C＝N)和1580cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.8-3.1(m，2H，SCH2)，3.22(t，J＝6.5Hz，2H，CH2NH2)，3.32(dd，JH6，H5＝2.45Hz，JH6，H1＝6.19Hz，1H，H-6)，3.35(與H-6重疊，1H，H-4)，3.77(t，J＝6.3Hz，2H，CH2OH)，4.21(dd，JH5，H6＝2.45Hz，JH5，H4＝9.34Hz，1H，H-5)，和4.27ppm(m，1H，CH3CHO). 實(shí)施例88 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-4-〔3″-(N-亞胺甲基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(150mg，0.4mmol)溶解在0.04M pH7.0磷酸鹽緩沖液中，在冰浴冷卻下，用0.1N NaOH水溶液處理(調(diào)整pH并維持在8.0-8.3)，然后分次加入甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(342mg，2.0mmol)。將該混合物攪拌15分鐘，然后用0.1N HCl水溶液將pH調(diào)至7.05。使該混合物通過μBondapak C18反相柱(37.5g，0.02M pH7.0磷酸鹽緩沖液→1%→2%→3%→4%CH3CN/磷酸鹽緩沖液)。將冷凍干燥的粉末再次通過相同的反相硅膠柱(H2O→1%→4%CH3CN/H2O)，得到純的標(biāo)題化合物(95mg，59%)，為冷凍干燥的粉末; 純度98.7%(300nm，HPLC); UV(H2O)λmax302(7520); IR(液體石蠟)νmax3600-3100(OH，NH2)，1750，1710和1585cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ7.830，7.807(1H，2s，CH＝N)，4.83-4.20(4H，m，H-1′，H4和CH2O);3.45-3.33(4H，m，CH2N，H-6，H-4)，3.19-3.05，2.98-2.85(2H，2 組 m，S-CH2)，1.95-1.51(4H，4-CH2CH2)和1.320ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例89 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯;異構(gòu)體B
用3-巰基丙腈(300mg，3.44mmol)和N，N-二異丙基乙胺(445mg，3.44mmol)處理冷卻(5℃)下的(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基丙基)-3-(二苯基磷酰基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.48g，2.6mmol)〔按實(shí)施例57，步驟H制備〕在DMF(15ml)中的溶液。待冰浴耗盡，在22℃攪拌該反應(yīng)混合物，總的攪拌時(shí)間為18小時(shí)。用乙酸乙酯(100ml)稀釋該溶液，用冷鹽水洗滌3次。干燥(MgSO4)有機(jī)層，蒸發(fā)，得到一混合物，后者在SiO2上層析，用乙醚洗脫。在所得產(chǎn)物異構(gòu)體A和B中，將極性較大的異構(gòu)體B純化，得到212mg(20.1%)標(biāo)題化合物; IR(CH2Cl2)νmax3600(-OH)，2115(-N3)，1778(β-內(nèi)酰胺)，1710(-CO2-) 1H NMR(CDCl3)δ4.6-6.10(5H，烯丙基類型)，4.21-4.32(2H，m，H-1′，4.28，dd，J;2.79，9.60Hz，H-5)，3.51-3.69(2H，m，CH-N3，H-4)，3.23和3.0(2H，2m，S-CH2)，3.06(1H，dd，J2.72，8.14Hz，H-6)，2.72(2H，m，CH2CN)，1.6-1.9(2H，m，CH2C-N3)，1.39(3H，d，J6.2Hz，-CH3)，1.38(3H，d，J6.38Hz，-CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉;異構(gòu)體B
將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(210mg，0.52mmol，步驟A中極性較大的異構(gòu)體B)溶解在CH2Cl2(20ml)中，冷卻至5℃，用0.5M乙基己酸鈉(1.14ml，0.57mmol)和(PPh3)4Pd(60mg，0.052mmol)處理上述溶液。在5℃攪拌30分鐘后，用乙醚(40ml)稀釋該溶液，并用0.04M緩沖液(pH7.0，3×8ml)提取之。合并水提取液，在反相SiO2(微粒形硅膠)上層析，先用水，再用含5%CH3CN的水洗脫。合并適宜的級分，冷凍干燥，得到63mg(31.3%)標(biāo)題化合物; 1H NMR(D2O)δ4.25-4.35(2H，m，H-1′，H-5)，3.54-3.69(2H，m，CH-N3，H-4)，3.42(1H，dd，J2.72，6.38Hz，H-6)，3.19和2.99(2H，2m，SCH2)，2.84-2.94(2H，m，CH2CN)，1.82(2H，m，CH2-CN3)，1.38(3H，d，J6.52Hz，-CH3)，1.34(3H，d，J6.47Hz，-CH3). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸;異構(gòu)體B
將由步驟B制得的(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉(63mg，0.163mmol)在0.05M磷酸鹽緩沖液(pH7.0，20ml)中的溶液在5℃，在30%Pd/硅藻土(270mg)存在下，于45psi氫氣壓下進(jìn)行氫化。60分鐘后;濾除催化劑，將濾液在反相SiO2(微粒形硅膠)上層析，先用水，再用含5%CH3CN的水洗脫。合并適宜的級分，冷凍干燥，得到12mg(21.7%)標(biāo)題化合物; UV(H2O)λmax296(6200); IR(液體石蠟)νmax1755(β-內(nèi)酰胺)，1585cm-1(-CO2-); 1H NMR(D2O)δ4.26-4.40(2H，m，H-5，H-1′)，3.43-3.69(3H，m，H-4，CH-N3，H-6)，2.8-3.16(4H，，m，SCH2CH2CN)，1.8-2.2(2H，m，CH2CN3)，1.43(3H，d，J6.62Hz，-CH3)，1.35(3H，d，J6.37Hz，-CH3). 實(shí)施例90 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(咪唑-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-(咪唑-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-羥基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(370mg，0.770mmol)溶解在CH2Cl2(10ml)中，在干冰-丙酮浴冷卻下，用N，N-二異丙基乙胺(462μl，2.65mmol)處理該溶液，然后滴加三氟甲磺酸酐(231μl，1.37mmol)。將該混合物攪拌30分鐘，加入咪唑(200mg，2.94mmol)。用冰-MeOH浴代替干冰-丙酮浴，并將該混合物攪拌3.5小時(shí)。然后用冷的乙酸乙酯稀釋該混合物，依次用水(3×20ml)，NaHCO3(20ml)，水(2×20ml)和鹽水洗滌，干燥，得到固體狀標(biāo)題化合物(350mg，85%); IR(凈態(tài))νmax1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ7.53(1H，s，芳族 -H)，7.14(1H，s，芳族 H)，6.99(1H，s，芳族 H)，5.97-5.88(1H，m，乙烯基-H)，5.48-5.23(2H，m乙烯基 -H)，4.80-4.69(2H，m，烯丙基-CH2)，4.255(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.6Hz，H-5)，4.35-4.2(2H，m，H-1′和HCH- 咪唑)，4.0-3.9(1H，m HCH-咪唑)，3.173(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.0Hz，H-6)，3.2-3.1(1H，m，H-4)，3.7-3.5(4H，SCH2CH2CN)，2.3-2.15，2.1-1.9(2H，2 組 m，CH2-4)，1.369(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.912(9H，s，叔丁基)，0.133和0.127ppm(6H，2s，CH3). B.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(咪唑-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-(咪唑-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(425mg，0.802mmol)溶解在四氫呋喃(20ml)中，在冰-MeOH浴冷卻下，先用乙酸(600μl，10.5mmol)處理，然后再滴加1M氟化四丁銨四氫呋喃溶液(4.5ml，4.5mmol)。將該混合物攪拌30分鐘，然后使之在5℃(冷室)下反應(yīng)114小時(shí)。加入固體NaHCO3(1g)，并將該混合物攪拌30分鐘(冰浴)。然后將其加到3塊制備性TLC(2mm，丙酮，Rf＝0.2)上，得到標(biāo)題化合物(120mg，36%)，該化合物污染有一些氟化四丁銨鹽; IR(凈態(tài))νmax3600-3100(OH)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ7.70(1H，s，芳族 -H)，7.17(1H，s，芳族 -H)，7.05(1H，s，芳族 H)，6.05-5.99(1H，m，乙烯基 H)，5.49-5.24(2H，m，乙烯基-H)，4.9-4.6(2H，m，烯丙基-CH2)，4.4-4.2(4H，m，H-5，H-1′和CH2-咪唑)，3.217(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝9.3Hz，H-6)，3.05-2.90(1H，m，H-4)，2.75-2.55(4H，m，SCH2CH2CN)，2.50-2.25，2.05-1.85(2H，2 組 m，CH2-4)，1.6(1H，bs，OH)和1.447ppm(3H，d，J＝6.1Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(咪唑-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將Pd(PPh3)4(20mg)和0.5M 2-乙基己酸鈉在乙酸乙酯中的溶液(1.0ml，0.50mmol)加到冰浴冷卻下的(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(咪唑-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(120mg，0.288mmol)在CH2Cl2(5ml)中的溶液中。將該混合物攪拌30分鐘，撤去冰浴。30分鐘后，再次將該混合物冷卻，再繼續(xù)攪拌30分鐘。用乙醚(30ml)和水(5ml)稀釋該混合物。分相，再次用水(2×5ml)和0.05M pH7.4磷酸鹽緩沖水溶液(3×5ml)提取有機(jī)層。合并水提取液，用乙醚洗滌，并使之通過反相μBondapak C18柱(20g，H2O→2%CH3CN/H2O)，得到污染有2-乙基己酸鈉鹽的物質(zhì)。使該粉末狀物質(zhì)通過相同的柱，但是用0.025M pH6.0磷酸鹽緩沖液洗脫，得到純的標(biāo)題化合物和磷酸鹽。通過相同的反相柱(H2O)除去鹽，得到純的標(biāo)題化合物(43mg，39.6%); 純度99.8%(HPLC 300nm); UV(H2O)λmax300(7800); IR νmax1750和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.00(1H，s，芳族 H)，7.36(1H，s，芳族 -H)，7.19(1H，s，芳族 H)，3.41-3.26(3H，m，H-5，H-1′ and HCH-咪唑)，4.25-4.05(1H，m，HCH-咪唑)，3.528(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.8Hz，H6)，3.25-3.10(1H，m，H-4)，2.74-2.66(4H，m，SCH2CH2CN)，2.4-2.25，2.25-2.0(2H，2 組 m，CH2-4)，和1.383ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例91 (4R，5S，6S)-4-(4″-N，N-二甲氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
用0.2ml 37%甲醛水溶液和乙酸(52μl，0.9mmol)處理冷卻至0-5℃的(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.175g，0.51mmol)在水(8ml)中的溶液。然后用1小時(shí)時(shí)間分小批量加入氰基硼氫化鈉(5×0.050g，總量為4.0mmol)(pH～5)。加入10ml 0.2M pH7.0磷酸鹽緩沖液使該反應(yīng)混合物驟冷。經(jīng)HPLC證實(shí)，該反應(yīng)混合物粗品是標(biāo)題化合物和4-(4″-N-甲基-N-氰甲基氨基丁基)化合物的混合物(7∶3)。然后將該溶液在反相硅膠(μBondapak C18，2.5×15cm)上層析，用梯度為0-5%乙腈在0.01M pH7.0磷酸鹽緩沖液中的溶液進(jìn)行洗脫。合并UV活性級分，濃縮，在相同的柱上，用水代替緩沖液進(jìn)行洗脫脫鹽。將適宜的級分冷凍干燥，得到0.077g(40%)白色非晶形粉末狀標(biāo)題化合物〔α〕24D+78.5°(c1.0，H2O); 純度(HPLC)98%(μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為6.68分鐘); UV(水，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax304nm(8，500); IR(KBr)νmax1750(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.84(s，6H，NCH3)，2.8-3.2(m 2H，SCH2)，3.11(t，J＝8.0Hz，2H，CH2N)，3.34(dd，JH6，H5＝2.40Hz，JH6，H1＝6.41Hz，1H，H-6)，3.35(與H-6重疊，1H，H-4)，3.77(t，J＝6.16Hz，CH2OH)，4.22(dd，JH5，H6＝2.40Hz，JH5，H4＝10.1Hz，1H，H-5)和4.26ppm(m，1H，CH3CHO). 實(shí)施例92 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5R，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(5.28mmol，由2.0g，5.28mmol重氮基前體制備)溶解在無水乙腈(40ml)中，在0-5℃，在氮?dú)夥障?，?分鐘時(shí)間同時(shí)加入氯磷酸二苯酯(1.2ml，5.79mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.0ml，5.74mmol)處理之。加入少許4-N，N-二甲氨基吡啶晶體，將該混合物攪拌40分鐘，再加入N，N-二異丙基乙胺(0.92ml，5.28mmol)，然后加入氯代三甲基甲硅烷(0.67ml，5.28mmol)，將該混合物攪拌5分鐘。然后用N，N-二異丙基乙胺(1.84ml，10.56mmol)處理該溶液，在該溶液中凝結(jié)出過量的甲硫醇(0.7g，15mmol)。將該反應(yīng)混合物在0-5℃攪拌48小時(shí)。加入乙酸乙酯(400ml)，然后依次用水，1M NaHSO3，1M NaHCO3和鹽水洗滌有機(jī)相，干燥(MgSO4)。減壓下濃縮該溶液，用四氫呋喃(20ml)和水(5ml)稀釋殘留物，在0-5℃下用乙酸(2ml)處理。將所得混合物在0-5℃儲存16小時(shí)。然后用乙酸乙酯稀釋，并如前述(飽和NaHCO3，鹽水，MgSO4)進(jìn)行后處理，將所得產(chǎn)物在硅膠(5×10cm)上層析。用乙酸乙酯/甲苯(2∶8至3∶7)進(jìn)行梯度洗脫，得到1.38g(69%)透明油狀標(biāo)題化合物 IR(NaCl3，壓片)νmax2100(N3)，1770(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1705cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.39(d，J＝6.26Hz，3H，CH3CHO)，1.4-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，1.90(d，J＝5.14Hz，1H，OH)，2.36(s，3H，SCH3)，3.16(dd，JH6，H5＝2.58Hz，JH6，H1＝7.38Hz，1H，H-6)，3.20(與H-6重疊，1H，H-4)，3.33(t，J＝6.2Hz，2H，CH2N3)，4.21(dd，JH5，H6＝2.58Hz，JH5，H4＝9.29Hz，1H，H-5)，4.25(與H-5重疊，1H，CH3CHO)，4.75(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). B.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.38g，3.63mmol)溶解在無水乙酸乙酯(75ml)中，在22℃，在氮?dú)夥障?，用Pd(PPh3)4(0.12g)和8ml(4.0mmol)0.5M2-乙基己酸鉀在乙酸乙酯中的溶液處理之。1.5小時(shí)后，用冷卻水(2×75ml)提取該反應(yīng)混合物，合并水提取液，并將其置于減壓條件下以除去痕量的有機(jī)溶劑。在0-5℃，45psi氫氣壓下，用2g 5%Pd/氧化鋁將上述水相氫化1.2小時(shí)。然后加入25ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液，濾出催化劑。將濾液在反相硅膠(μBondapak C18，3.5×15cm)上層析，用梯度為0-4%乙腈的水溶液進(jìn)行洗脫。將UV活性級分冷凍干燥，得到0.57g(50%)白色非晶形粉末狀標(biāo)題化合物〔α〕22D+97.2°(c1.0，水); 純度(HPLC)98.9%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為0.8ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為6.05分鐘); UV(水，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax306nm(9，475); IR(KBr)νmax1750(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1580cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.34(s，3H，SCH3)，3.01(t，J＝7.6Hz，2H，CH2NH2)，3.31(dd，JH6，H5＝2.36Hz，JH6，H1＝6.47Hz，1H，H-6)，3.39(寬 t，J＝9Hz，1H，H-4)，4.19(dd，JH5，H6＝2.36Hz，JH5，H4＝9.06Hz，1H，H-5)和4.26ppm(m，1H，CH3CHO). 實(shí)施例93 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(2R，4R，5R，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(由(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1′-(3-疊氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(1.7g，4.7mmol)新鮮制備)溶解在CH3CN(50ml)中，在冰-MeOH浴冷卻下，滴加氯磷酸二苯酯(1.1ml，5.0mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.92ml，5.0mmol)及少量4-N，N-二甲氨基吡啶(5mg)處理之。將該混合物攪拌1小時(shí)，然后用4-巰甲基-1，2，3-噻二唑(925mg，7.0mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.84ml，10.0mmol)處理該磷酸烯醇酯。將該混合物在5℃(冰浴)攪拌2小時(shí)，補(bǔ)加硫醇(0.46g，3.5mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.92ml，5mmol)。將該反應(yīng)混合物在5℃(冷室)下放置18小時(shí)，用乙酸乙酯(200ml)稀釋，依次用1M NaHCO3水溶液(100ml)，水(100ml)，1M NaHSO3水溶液(100ml)，水(100ml)和鹽水(100ml)洗滌，干燥(MgSO4)。使殘留物(4.0g)通過閃式硅膠柱(200g，己烷/EtOAc 1/1)，得到油狀標(biāo)題化合物(0.90g，43%); IR(CH2Cl2)νmax3680，3600(OH)，2100(N3)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.477(1H，s，芳族 -H)，6.02-5.85(1H，m，乙烯基 -H)，5.48-5.22(2H，m，乙烯基 H)，4.87-4.61(2H，m，烯丙基 -CH2)，4.771，4.696，4.337，4.260(2H，ABq，J＝15.2Hz，CH2- 芳族)，4.28-4.14(1H，m，H-1′)，4.162(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.6Hz，H-5)，3.60-3.27(3H，m，CH2N3和H-4)，3.245(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.5Hz，H-6)，2.04-1.50(4H，m，(CH2)2-4)，1.597(1H，bs，OH)和1.377ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚--2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.9g，2mmol)溶解在CH2Cl2(20ml)中，在冰浴冷卻下，先用Pd(PPh3)4(90mg)處理上述溶液，然后滴加0.5M2-乙基己酸鈉的乙酸乙酯溶液(4.1ml，2.05mmol)。將該混合物攪拌30分鐘，然后用乙酸乙酯/乙醚混合物(1∶1)稀釋，用0.05M pH7.0磷酸鹽緩沖水溶液(1×50ml和2×25ml)提取。合并水提取液，用乙醚洗滌，并使之通過μBondapak C18反相柱(180g，H2O→5%CH3CN/H2O)，經(jīng)冷凍干燥后，得到粉末狀羧酸鈉鹽(0.50g，61%); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.897(1H，s，芳族 -H)，4.679，4.605，4.447，4.372(2H，ABq，J＝15Hz，CH2-芳族ic)，4.299-4.173(1H，5 線，H-1′)，4.124(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.412，3.401(部分 H-6，d，J＝2.5Hz)，3.41-3.34(3H，m，H-6和CH2-N3)，3.31-3.20(1H m，H-4)，1.9-1.32(4H，m，(CH2)2-4)和1.300ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 在帕爾氫化器中，在0℃(冰浴)，45-50psi氫氣壓下，采用5%Pd/氧化鋁作為催化劑(500mg)將上述羧酸鈉(500mg，1.22mmol)在水(75ml)中的溶液振蕩1小時(shí)。補(bǔ)加催化劑(500mg)，在0℃下再氫化1小時(shí)。濾除催化劑，用1M NaH2PO4水溶液將pH(10-11)調(diào)至7.0。使該混合物通過μBondapak C18反相柱(100g，H2O→5%CH3CN/H2O)，冷凍干燥后，得到粉末狀標(biāo)題化合物(250mg，53%); 純度99.93%(304nm，HPLC); UV(H2O)λmax302(ε8050); IR(液體石蠟)νmax3600-3100(OH，NH2)，1755和1685cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.894(1H，s，芳族 H)，4.660，4.586，4.440，4.365(2H，ABq，J＝14.9Hz，CH2- 芳族)，4.302-4.174(1H，5 線，H-1′)，4.125(1H，dd，J＝2.6 Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.359(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.5Hz，H-6)，3.32-3.22(1H，m，H-4)，3.06-2.97(2H，m，CH2-N)，1.83-1.32(4H，m，(CH2)2-4和1.304ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例94 (4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-亞胺甲基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(175mg，0.460mmol)溶解在0.02M pH7.0磷酸鹽緩沖液(50ml)中，在冰浴冷卻下，用0.1N NaOH水溶液處理上述溶液(提高pH值并維持在約8.0±0.2)，然后加入甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(200mg，1.15mmol)。將該混合物攪拌30分鐘，然后用1M NaH2PO4水溶液將上述溶液的pH降至7.0。使該混合物通過μBondapak C18反相柱(20g，H2O→5%CH3CN/H2O)，冷凍干燥后，得到粉末狀標(biāo)題化合物(110mg，59%); 純度97.2%(302nm，HPLC); UV(H2O)λmax302(ε9260); IR(液體石蠟)νmax3600-3700(OH)，1750(C＝O)，1710(C＝N)和1585cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ7.867(1H，s，芳族 -H)，7.834，7.812(1H，2s，CH)，4.30-4.18(1H，m，H-1′)，4.212，4.137，4.031，3.957(2H，ABq，J＝14.9Hz，CH2-芳族)，4.159，4.112，4.099(1H，1s和1d，J＝2.6Hz，部分 H-5)，4.083(3H，s，N-CH3)，3.330(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝6.1Hz，H-6)，3.45-3.20(3H，m，H-4和CH2N)，1.9-1.32(4H，m，(CH2)2-4)和1.300ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例95 (4R，5S，6S)-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(170mg，0.460mmol)溶解在0.02M pH7.0磷酸鹽緩沖水溶液(50ml)中，在冰浴冷卻下，先用0.1N NaOH水溶液處理上述溶液(提高pH值，并維持在8.0±0.2)，然后加入氨基亞氨基甲磺酸(570mg，4.60mmol)。將該混合物攪拌90分鐘，然后用1M NaH2PO4水溶液將pH降至7.0。使該混合物通過μBondapak C18反相柱(20g，H2O→5%CH3CN/H2O)，冷凍干燥后，得到粉末狀標(biāo)題化合物(130mg，74%); 純度99.85%(302nm，HPLC); UV(H2O)λmax302(ε9150); IR(液體石蠟)νmax3600-3100(NH，OH)，1755(C＝O)，1670-1630(C＝N)和1590 cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ7.871(1H，s，芳族 H)，4.31-4.16(1H，5 線，H-1′)，4.211，4.135，4.037，3.962(2H，ABq，J＝15Hz，CH2-芳族)，4.063(3H，s，CH3-三唑)，4.155-4.06(1H，m，隱藏H-5)，3.318，3.306，3.267(部分 H-6，d+s)，3.32-3.22(3H，m，CH2-N和H-4)，1.9-1.30(4H，m，(CH2)2-4)和1.29ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例96 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氨甲酰氧基)乙硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-3-〔(2-氨甲酰氧基)乙硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(7.6mmol，由2.88g，7.6mmol重氮基前體制得)溶解在無水乙腈(35ml)中，在0-5℃，氮?dú)夥障?，?分鐘時(shí)間同時(shí)加入氯磷酸二苯酯(1.65ml，8.0mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.38ml，8.0mmol)處理上述溶液。加入少許4-N，N-二甲氨基吡啶晶體，并將該混合物攪拌30分鐘。然后補(bǔ)加N，N-二異丙基乙胺(1.38ml，8.0mmol)，繼之加入氯代三甲基甲硅烷(1.0ml，8.0mmol)，并將該混合物攪拌10分鐘。再補(bǔ)加N，N-二異丙基乙胺(1.38ml，8.0mmol)，然后加入在乙腈中的2-氨甲酰氧基乙硫醇(1.8g，15.2mmol)，將所得混合物在0-5℃攪拌18小時(shí)。然后加入冷的0.2M pH7.0磷酸鹽緩沖液(100ml)和乙酸乙酯(500ml)使該反應(yīng)混合物驟冷。用水和鹽水洗滌有機(jī)相，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到一油狀物，將后者溶解在四氫呋喃(50ml)和水(50ml)中，并在0-5℃下用乙酸(1.5ml)處理。然后用1小時(shí)時(shí)間使溫度升至22℃。用乙酸乙酯(400ml)稀釋該反應(yīng)混合物，按前述方法進(jìn)行后處理。蒸發(fā)溶劑后，將所得殘留物在硅膠(4×12cm)上層析兩次，第一次用甲苯/乙酸乙酯的混合物(1∶1)洗脫，然后用二氯甲烷/乙腈混合物(7∶3)洗脫。蒸發(fā)UV活性級分，得到1.71g(49%)油狀標(biāo)題化合物 IR(NaCl，壓片)νmax2，100(N3)，1770(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1720(寬峰，酯和氨甲酰基的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.39(d，J＝6.25Hz，3H，CH3CHO)，1.4-1.8(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.8-3.2(m，5H，SCH2，CH2N3和H-4)，3.18(dd，JH6，H5＝2.62Hz，JH6，H5＝7.17Hz，1H，H-6)，4.1-4.4(m，4H，H-5，CH3CHO和CH2OCONH2o 重疊)，4.6-4.9(m，4H，烯丙基的CH2和OCONH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2m，2H和1H，烯丙基的CH). B.(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氨甲酰氧基)乙硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-3-〔(2-氨甲酰氧基)乙硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.71g，3.77mmol)溶解在無水乙酸乙酯(50ml)中，在22℃，氮?dú)夥障?，先用Pd(PPh3)4(0.100g)處理，然后再加入8ml(4.0mmol)0.5M 2-乙基己酸鉀在乙酸乙酯中的溶液。然后用水(3×50ml)提取反應(yīng)混合物，合并水提取液，在反相硅膠(μBondapak C18，3×13cm)上層析。用梯度為0-5%乙腈的水溶液進(jìn)行洗脫，經(jīng)冷凍干燥后得到1.0g(59%)中間體鉀鹽，為白色固體。
然后將該鉀鹽溶解在冷水(150ml)中，在0-5℃，于45psi氫氣壓下，用1.5g 5%Pd/氧化鋁將上述溶液氫化1小時(shí)。然后加入20ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液，濾出催化劑，將濾液在反相硅膠(μBondapak C18，3×15cm)上層析，用梯度為0-5%乙腈水溶液進(jìn)行洗脫，經(jīng)冷凍干燥后，得到0.722g(83%，49%合并收率)白色非晶形粉末狀標(biāo)題化合物〔α〕22D+74.6°(c1.0，H2O); 純度(HPLC)96.4%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為0.8ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為5.56分鐘); UV(水，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(9，219); IR(KBr)νmax1750(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1720(氨甲酸根的C＝O)和1585cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.9-3.2(m，4H，SCH2和CH2NH2)，3.36(dd，JH6，H5＝2.51Hz，JH6，H1＝6.27Hz，1H，H-6)，3.4(m，與H-6重疊，1H，H-4)和4.2-4.4ppm(m，4H，H-5，CH3CHO和CH2OCONH2). 實(shí)施例97 (4R，5S，6S)-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(120mg，0.31mmol)溶解在0.025 M pH7.0磷酸鹽緩沖水溶液(30ml)中，在冰浴冷卻下，先用0.1M NaOH水溶液處理之(提高pH，并將pH維持在8.1±0.2)，然后分次加入氨基亞氨基甲磺酸(390mg，3.10mmol)。將該混合物攪拌1.5小時(shí)，用1M NaH2PO4水溶液將pH降至7.0。使該混合物通過μBondapak C18反相柱(20g，水→3%CH3CN/H2O，冷凍干燥后，得到粉末狀標(biāo)題化合物(90mg，68%); 純度98.5%(302nm，HPLC); UV(H2O)λmax302(ε8400); IR(液體石蠟)νmax3600-3100(OH，NH3)，1750(C＝O)，1770-1730(C＝N)和1680cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ8.896(1H，s，芳族 H)，4.654，4.580，4.446，4.371(2H，ABq，J＝15Hz，CH2- 芳族)，4.29-4.17(1H，5 線，H-1′)，4.124(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.298(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝6.5Hz，H-6)，3.30-3.10(3H，m，CH2-N和H-4)，1.90-1.30(4H，m，(CH2)2-4)和1.291ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例98 (4R，5S，6S)-4-(4″-N-亞胺甲基氨基丁基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.196g，0.506mmol)在冷水(15ml)中的溶液用1M NaOH調(diào)至pH8.0，然后在0-5℃下，用10分鐘時(shí)間分小批量加入甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(0.26g，1.5mmol)處理上述溶液。在整個(gè)加料過程中，用1M NaOH將pH維持在8-8.5。20分鐘后，加入10ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液，用乙酸乙酯洗滌該反應(yīng)混合物。然后將水相先在反相硅膠(μBondapak C18，2.5×15cm)上層析，用梯度為0-5%的乙腈在0.02M pH7.0磷酸鹽緩沖液中的溶液作為洗脫劑。合并UV活性級分，濃縮(T＜5℃)，在相同的柱上用水代替緩沖液作為洗脫劑去鹽。將適宜的級分冷凍干燥，得到0.136g(65%)白色非晶形粉末狀標(biāo)題化合物〔α〕22D+72.0°(c1.0，水); 純度(HPLC)98.8%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為6.12分鐘); UV(水，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(9，228); IR(KBr)νmax1750(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1715cm-1(氨甲酸根的C＝O和亞胺甲基)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.31(d，J＝6.32Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.8-3.2(m，2H，SCH2)，3.3-3.5(m，4H，H-4，H-6和CH2NH)，4.2-4.4(m，3H，CH2OCONH2，H-5和CH3CHO)和7.79ppm(寬 s，1H，CHNH). 實(shí)施例99 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，3-咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，3-咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(5.10mmol，將2.37g，5.10mmol重氮基前體環(huán)化制得)溶解在無水乙腈(39ml)中，在-15℃，氬氣氛下，用氯磷酸二苯酯(1.10ml，5.3mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.95ml，5.3mmol)處理之。加入少許4-N，N-二甲氨基吡啶晶體，并將該混合物在-15℃攪拌30分鐘。加入N，N-二異丙基乙胺(0.95ml，5.4mmol)和1-甲基-5-巰甲基-1，3-咪唑(1.31g，10.2mmol)，并將該混合物在0℃攪拌3小時(shí)。用乙酸乙酯(272ml)稀釋該反應(yīng)混合物，依次用水、1M NaHSO3、飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到油狀物，在硅膠上層析純化，用EtOAc∶CH3CN∶丙酮(12∶87∶1)洗脫，得到1.5g(54%)黃色油狀標(biāo)題化合物 IR(CH2Cl2)λmax2100(N3)，1775β-內(nèi)酰胺的C＝O和1710(酯的C＝O). 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.09(s，6H，SiCH3)，0.90(s，9H，Si-t-bu)，1.31(d，J＝6.1Hz，3H，CH3CHO)，1.7和2.0(2 x m，2 x 1H，CH2-4)，3.08(dd，J1′6＝7.17Hz，J5-6＝2.76Hz，1H，H-6)，3.3-3.6(m，2H，CH2N3)，3.69(s，3H，CH3-N)，3.9-4.2(m，4H)，4.7(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和6.0(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)，6.99和7.46(2xS，2H，咪唑基). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，3-咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，3-咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.50g，2.74mmol)溶解在無水四氫呋喃(43ml)中，在0-5℃，于氬氣氛下，用乙酸(0.94ml，16.4mmol)處理該溶液，然后加入8.5ml(8.5mmol)1M氟化四丁銨四氫呋喃溶液。將該溶液在5℃放置8.5天。然后用乙酸乙酯稀釋該反應(yīng)混合物，用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到一油狀物，后者在硅膠(4.5×15cm)上層析，用丙酮洗脫，得到1.87g(73%)標(biāo)題化合物，為淺黃色泡沫狀固體; IR(NaCl，壓片)νmax3200(寬，OH)，2105(N3)，1780(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，和1710(酯的C＝O). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，3-咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，3-咪唑-5-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(558mg，1.29mmol)溶解在無水CH2Cl2(29ml)中，在0-5℃，在氬氣氛下，用Pd(PPh3)4(112mg)和2.84ml(1.42mmol)0.5M2-乙基己酸鈉在EtOAc中的溶液處理上述溶液。加入39ml水，分離有機(jī)層，用2×22ml水再提有機(jī)相，合并水層，蒸發(fā)以除去有機(jī)溶劑。用396mg 5% Pd/氧化鋁，在45psi氫氣壓下，將上述殘留的水相氫化1小時(shí)。濾出催化劑，用1M NaH2PO4溶液(幾滴)中和濾液。將該混合物在反相硅膠(Bondapak C18，7×11cm)上層析，用梯度為0-1%的乙腈水溶液洗脫，然后將UV活性級分冷凍干燥，得到130mg標(biāo)題化合物，為淺黃色非晶形粉末; UV(水，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(6000); IR(KBr)νmax1765(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1625(羧酸根的C＝O); 1HNMR(200Hz，D2O)δ1.32(d，J＝6.3Hz，3H，CH3CHO)，1.7和2.1(2 x m，2 x 1H，CH2-4)，3.05(t，J＝9.0Hz，CH2NH2)，3.23(m，1H，H-4)，3.41(dd，J7′-6＝6.5Hz，J5-6＝2.7Hz，H-6)，3.7(s，3H，CH3-N)，3.9-4.3(m，4H，CH2-S，CH3CHO，H-5)，6.93和7.63(2 x s，2H，咪唑基). 實(shí)施例100 (4R，5S，6S)-4-(4″-胍基丁基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
用1M NaOH將(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.172g，0.44mmol)在冷水(0-5℃，13ml)中的溶液調(diào)至pH8.5。用10分鐘時(shí)間，分小批量加入氨基亞氨基甲磺酸(0.275g，2.21mmol)，與此同時(shí)，將pH維持在8-8.5之間。在0-5℃反應(yīng)45分鐘后，加入15ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液使該反應(yīng)混合物驟冷，在反相硅膠(μBondapak C18，2.5×15cm)上層析。用梯度為0-5%的乙腈水溶液洗脫，經(jīng)冷凍干燥后，得到0.149g(78%)白色非晶形固體狀標(biāo)題化合物 純度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用10%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為0.8ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為6.0分鐘); UV(水，pH7.4 磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(9，371); IR(KBr)νmax1750(sh，(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1730(寬峰，氨甲酸根的C＝O)，1670(胍的C＝N)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.32Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.8-3.2(m，2H，SCH2)，3.22(t，J＝6.5Hz，CH2N)，3.34(dd，JH6，H5＝2.55Hz，JH6，H1＝6.10Hz，1H，H-6)，3.36(m，與H-6重疊，1H，H-4)和4.2-4.4ppm(m，4H，CH2O，H-5和CH3CHO). 實(shí)施例101 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-二甲氨基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-二甲氨基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-羥基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(384mg，0.801mmol)溶解在CH2Cl2(20ml)中，在干冰-丙酮浴冷卻下，用N，N-二異丙基乙胺(480μl，4.20mmol)處理該溶液，然后滴加三氟甲磺酸酐(208μl，1.24mmol)。將該混合物攪拌30分鐘，并在該混合物中通入HN(CH3)2氣流，通氣時(shí)間為20秒。用冰-MeOH浴代替干冰-丙酮浴。將該混合物攪拌3小時(shí)(用TLC跟蹤反應(yīng))，然后用冰冷卻的乙酸乙酯(100ml)稀釋，用冰冷卻的水(4×50ml)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，得到油狀標(biāo)題化合物(390mg，96%); IR(凈態(tài))νmax2250(C≡N)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-4.85(1H，m，乙烯基 -H)，5.49-5.22(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.6(2H，m，烯丙基-CH2)，4.30-4.17(1H，m，H-1′)，4.205(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.7Hz，H-5)，3.40-3.20(2H，m H-4和HCH-N)，3.254(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝7.0Hz，H-6)，3.15-2.95(2H，m，SCH2)，2.72-2.63(2H，m，CH2CN)，2.5-2.30(1H，m，HCH-N)，2.254(6H，s，N(CH3)2)，2.05-1.80(1H，m，HCH-4)，1.7-1.4(1H，m，HCH-4)，1.290(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.890(9H，s，叔丁基)和0.086ppm(6H，s，d二甲基). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-二甲氨基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
用乙酸(600μl，10.5mmol)處理在冰-MeOH浴冷卻下的(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-二甲氨基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(390mg，0.768mmol)在四氫呋喃(10ml)中的溶液，然后滴加1M氟化四丁銨在四氫呋喃中的溶液(6.0ml，6.0mmol)。將該混合物攪拌1小時(shí)，然后在冷室中放置144小時(shí)。用乙酸乙酯(100ml)稀釋該混合物，依次用冰冷卻的1M NaHCO3水溶液(2×100ml)和冷鹽水(2×100ml)洗滌，干燥(MgSO4)，得到油狀標(biāo)題化合物粗品(270mg，89%); IR(凈態(tài))νmax3600-3200(OH)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.05-1.90(1H，m，乙烯基 H)，5.50-5.24(2H，m，乙烯基 -H)，4.9-4.6(2H，m，烯丙基-H)，4.294，4.279(部分 H-5，d，J＝2.9Hz)，4.29-4.15(1H，m，H-1′)，3.45-3.9(3H，m，H-4和SCH2)，3.302(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝7.9Hz，H-6)，2.8-2.6(4H，m，CH2-N和CH2CN)，2.264(6H，s，N(CH3)2)，2.0-1.6(3H，m，CH2-4和OH)和1.377ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-二甲氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
用Pd(PPh3)4(30mg)和0.5M2-乙基己酸鈉在乙酸乙酯中的溶液(1.44ml，0.720mmol)處理在冰浴冷卻下的(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-二甲氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯粗品(270mg，0.69mmol)在CH2Cl2(5ml)中的溶液。將該混合物攪拌45分鐘，然后用1/1乙酸乙酯/乙醚混合物(20ml)稀釋，用0.02M pH7.0磷酸鹽緩沖液(1×20ml，2×10ml)提取。合并水提取液，用乙醚洗滌，并使之通過μBondapak C18反相柱(40g，0.02M pH7.0磷酸鹽緩沖液→3%CH3CN/H2O)層析兩次，冷凍干燥后，得到粉末狀標(biāo)題化合物(70mg，30%); 純度99.5%(298nm，HPLC); UV(H2O)λmax298(ε6960); IR(液體石蠟)νmax3600-31200(OH)，2250(C≡N)，1750和1590cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.33-4.21(1H，m，H-1′)，4.289(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝9.3Hz，H-5)，3.429(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝6.6Hz，H-6)，3.48-3.35(H，m，H-4)，3.21-2.76(6H，SCH2，CH2-N，CH2CN)2.758(6H，s，N(CH3)2)，2.27-2.14和1.98-1.80(2H，2 組 m，CH2-4)和1.339ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例102 (4R，5S，6S)-4-(4″-胍基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.226g，0.72mmol)在冷水(0-5℃，20ml)中的溶液用1M NaOH調(diào)至pH8.5，然后用5分鐘時(shí)間分小批量加入氨基亞氨基甲磺酸(0.40g，3.22mmol)。在整個(gè)加料過程中用1M NaOH將pH維持在8-8.5，并將該pH再維持2小時(shí)。然后加入20ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液使該反應(yīng)混合物驟冷，在反相硅膠(μBondapak C18，3.5×15cm)上層析，用梯度為0-5%的乙腈水溶液洗脫，經(jīng)冷凍干燥后，得到0.169g(66%)白色非晶形粉末狀標(biāo)題化合物; 純度(HPLC)99.8%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，5% CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液，流速為1.5ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為5.77分鐘); UV(水，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax306nm(9，411); IR(KBr)νmax1750(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1665(胍的C＝N)和1580cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.34(s，3H，SCH3)，3.22(t，J＝6.5Hz，2H，CH2N)，3.28(dd，JH6，H5＝2.39Hz，JH6，H1＝6.26Hz，1H，H-6)，3.38(寬 t，1H，H-4)，4.19(dd，JH5，H6＝2.39Hz，JH5，H4＝9.04Hz，1H，H5)和4.27ppm(m，1H，CH3CHO). 實(shí)施例103 (4R，5S，6S)-4-(4″-N-亞胺甲基氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.210g，0.67mmol)在水(30ml)中的溶液，在0-5℃下，用1N NaOH調(diào)至pH8.5。然后用10分鐘時(shí)間，分小批量加入甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(0.60g，3.5mmol)，其間，用1N NaOH將pH維持在8-8.5之間。在0-5℃反應(yīng)另外20分鐘后，加入25ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液使該反應(yīng)混合物驟冷，用乙酸乙酯(20ml)洗滌。然后將水相置于真空條件下以除去痕量的有機(jī)溶劑，在反相硅膠(μBondapak C18，3.5×14cm)上層析，用梯度為0-5%乙腈在0.01M pH7.0磷酸鹽緩沖液中的溶液作為洗脫劑。合并UV活性級分，減壓濃縮(T＜5℃)，再次進(jìn)行層析，用水代替緩沖液作為洗脫劑。將適宜的級分冷凍干燥，得到0.123g(54%)白色非晶形粉末狀標(biāo)題化合物;〔α〕22D+110.3°(c1.0，水); 純度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用3%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1.5ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為6.48分鐘); UV(水，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax306nm(10，187); IR(KBr)νmax1750(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1715(亞胺甲基的C＝N)和1580cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.27Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.34(s，3H，SCH3)，3.3-3.5(m，4H，H-6，H-4和CH2NH)，4.18(dd，JH5，H6＝1.92Hz，JH5，H4＝9.0Hz，1H，H-5)，4.26(m，1H，CH3CHO)和7.8ppm(寬 s，1H，CH＝NH). 實(shí)施例104 (4R，5S，6S)-4-(4″-N，N-二甲氨基丁基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在0-5℃下，用0.25ml(3.0mmol)37%甲醛水溶液和2ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液處理(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.230g，0.59mmol)在水(10ml)中的溶液。然后立即一次加入0.074g(1.18mmol)氰基硼氫化鈉，并將所得混合物在0-5℃攪拌1小時(shí)。經(jīng)HPLC(μBondapak C18)證實(shí)，該產(chǎn)物是標(biāo)題二甲基衍生物和N-甲基-N-氰甲基衍生物的51∶45混合物。將該反應(yīng)混合物粗品先在反相硅膠(μBondapak C18，2×15cm)上層析，用梯度為0-5%乙腈在0.02M pH7.0磷酸鹽緩沖液中的溶液作為洗脫劑。合并第一級分，在相同的柱上層析脫鹽，用水代替緩沖液作為洗脫劑，經(jīng)冷凍干燥后，得到0.081g(33%)白色非晶形固體狀標(biāo)題化合物; 純度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為6.11分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302(9，036); IR(KBr)νmax1750(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1725(氨甲酸根的C＝O)和1595cm-1(c 羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.3-2.0(m，6H，丁基的CH2-1，2和3)，2.84(s，6H，NCH3)，2.8-3.2(m，2H，SCH2)，3.10(t與SCH2重疊，J＝7.9Hz，2H，CH2N)，3.36(dd，JH6，H5＝2.30Hz，1H，H-6)，3.37(m，與H-6重疊，1H，H-4)，和4.2-4.4ppm(m，4H，H-5，CH3CHO和CH2OCONH2重疊). 實(shí)施例105 (4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛縮二甲腙)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在干冰-丙酮浴冷卻下，用DMSO(250μl，3.19mmol)在CH2Cl2(1ml)中的溶液滴加處理草酰氯(150μl，1.65mmol)在CH2Cl2(5ml)中的溶液。將該混合物攪拌5分鐘，然后滴加(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-羥基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(420mg，0.875mmol)在CH2Cl2(4ml)中的溶液。將該混合物攪拌15-20分鐘，加入三乙胺(1.5ml，10.8mmol)。將該溶液再攪拌10分鐘，然后使之溫?zé)嶂潦覝?約10分鐘)。用水(25ml)和CH2Cl2(40ml)稀釋，用CH2Cl2(4×20ml)提取水層。合并有機(jī)層，依次用冰冷卻的5%HCl水溶液(2×20ml)、冰冷卻的水(2×20ml)、冰冷卻的5%NaHCO3(2×20ml)、冰冷卻的水(2×20ml)和鹽水(20ml)洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到油狀標(biāo)題化合物(402mg，96%); IR(凈態(tài))νmax2250(C≡N)，1775，1720和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ9.849(1H，s，CHO)，6.01-5.87(1H，m，乙烯基-H)，5.49-5.22(2H，m，乙烯基 -H)，4.80-4.60(2H，m，烯丙基-CH2)，4.371(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.8Hz，H-5)，4.28-4.18(1H，6 線，H-1′)，3.763(1H，dt，J＝3.5Hz，J＝10.2Hz，H-4)，3.2-2.77(5H，m，H-6，SCH2和CH2CHO)，2.70-2.63(2H，m，CH2CN)，1.161(3H，d，J＝6.2Hz，CH3)，0.883(9H，s，叔丁基)和0.068ppm(6H，s，二甲基). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛縮二甲基腙)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
用二甲基肼(150μl，1.97mmol)處理在冰浴冷卻下的(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(402mg，0.840mmol)在無水乙醇(8ml)中的溶液。使該混合物在5℃(冷室)反應(yīng)24小時(shí)，然后蒸除溶劑，留下油狀標(biāo)題化合物(463mg，100%); IR(凈態(tài))νmax2250(C≡N)，1775，1710(C＝O)和1550cm-1(C≡N); 1H NMR(CDCl3，200MHz)，δ6.474(1H，bt，J＝4.2Hz，CH＝N)，6.04-5.85(1H，m，乙烯基 H)，5.48-5.21(2H，m，乙烯基 H)，4.85-4.70(2H，m，烯丙基 -H)，4.298(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.4Hz，H-5)，4.28-4.22(1H，m，H-1′)，3.64-3.55(1H，m，H-4)，3.319(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝3.9Hz，H-6)，3.25-2.92(2H，m，SCH2)，2.754(6H，s，N(CH3)2)，2.73-2.60(3H，m，CH2CN和HCH-4)，2.55-2.3(1H，m，HCH-4)1.148(3H，d，J＝6.2Hz，CH3)，0.0878(9H，s，叔丁基)和0.066，0.060ppm(6H，2s，二甲基). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛縮二甲基腙)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛縮二甲基腙)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(460mg，0.883mmol)溶解在四氫呋喃(15ml)中，在冰-甲醇浴冷卻下，用乙酸(700μl，12.2mmol)處理之，然后滴加1M氟化四丁銨在四氫呋喃中的溶液(6.0ml，6.0mmol)。將該混合物攪拌30分鐘，然后使之在5℃(冷室)反應(yīng)430小時(shí)。用冰冷卻的乙酸乙酯(100ml)稀釋，依次用冷的5%NaHCO3水溶液(4×20ml)、水(2×20ml)和鹽水(20ml)洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到油狀標(biāo)題化合物(335mg，93%); IR(凈態(tài))νmax3600-3200(OH)，2250(C≡N)，1775，1710(C＝O)和1550cm-1(C＝N); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.602(1H，bt，J＝4.8Hz，CH-N)，6.05-5.90(1H，m，乙烯基 H)，5.51-5.24(1H，m，乙烯基 H)，4.90-4.64(2H，m，烯丙基 CH2)，4.311(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝9.8Hz，H-5)，4.20-4.00(1H，m，H-1′)，3.73-3.60(1H，m，H-4)，3.307(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝8.0Hz，H-6)，3.18-2.90(2H，m，SCH2)，2.773(6H，s，N(CH3)2)，2.87-2.63(3H，m，CH2CN和HCH-4)，2.56-2.40(1H，m，HCH-4)，1.59(1H，bs，OH)和1.310ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). D.(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛縮二甲基腙)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
用Pd(PPh3)4(35mg)處理冰浴冷卻下的(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛縮二甲基腙)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(335mg，0.820mmol)在CH2Cl2(5ml)中的溶液，然后滴加0.5 M2-乙基己酸鈉在乙酸乙酯中的溶液(1.72ml，0.860mmol)。將該混合物攪拌30分鐘，然后用1/1乙酸乙酯/乙醚溶液稀釋，用0.02M pH7.0磷酸鹽緩沖液(1×30ml，2×10ml)提取。合并水提取液，用乙醚洗滌，并使之通過μBondapak C18反相柱(40g，0.02M磷酸鹽緩沖液→5%CH3CN/緩沖液和40g，H2O→5%CH3CN/H2O)層析兩次，冷凍干燥后，得到粉末狀標(biāo)題化合物(100mg，33%); 純度97.9%(302nm，HPLC); UV(H2O)νmax240(ε7440)，302(ε8150); IR(液體石蠟)νmax3600-3100(OH)，2250(C≡N)，1750和1590(C＝O)和1560cm-1(C＝N); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.425(1H，dt，J＝5.4Hz，CH＝N)，4.288(1H，dd，J＝2.62Hz，J＝9.5Hz，H-5)，4.30-4.17(1H，m，H-1′)，3.79-3.67(1H，，H-4)，3.518(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝5.8Hz，H-6)，3.30-3.13，3.05-2.90(2H，2 組 m，SCH2)，2.90-2.80(2H，m，CH2CN)，2.90-2.50(2H，m，CH2-4)，2.691[6H，s，N(CH3)2]和1.274ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例106 (4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
用冰乙酸(350ml，6.1mmol)處理冰-MeOH浴冷卻下的(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(200mg，0.418mmol)在四氫呋喃(8ml)中的溶液，然后滴加1M氟化四丁銨在四氫呋喃中的溶液(3.0ml，3.0mmol)。將該混合物攪拌30分鐘，然后使之在5℃(冷室)反應(yīng)500小時(shí)。用冰冷卻的乙酸乙酯(50ml)稀釋，依次用冰冷卻的飽和NaHCO3(4×20ml)和鹽水(20ml)洗滌，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)溶劑得到一油狀物，然后在制備性硅膠板上層析(EtOAc，Rf＝0.5)，得到油狀標(biāo)題化合物(40mg，26%); IR(凈態(tài))νmax3600-330(OH)，2250(CN)，1775和1720cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ9.869(1H，s，CHO)，6.04-5.87和5.49-5.25(3H，m，乙烯 H)，4.89-4.65(2H，m，CH2-乙烯)，3.416(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝9.9Hz，H-5)，4.24-4.13(1H，5 線，H-1′)，3.84-3.71(1H，6 線，H-4)，3.19-2.81(3H，m，H-6，CH2S和CH2O)，2.75-2.63(2H，m，CH2-CN)，1.57(1H，bs，OH)和1.298ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
用Pd(PPh3)4(10mg)處理在冰浴冷卻下的(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(40mg，0.11mmol)在二氯甲烷(2ml)中的溶液，然后加入N-甲基苯胺(20μl，過量)。將該混合物攪拌30分鐘，然后用乙醚(20ml)稀釋，用0.05M pH7.4磷酸鹽緩沖液(4×5ml)提取。合并水提液，用乙醚洗滌，并使之通過反相μBondapak C18柱(9g，H2O)層析，冷凍干燥后，得到粉末狀標(biāo)題化合物(10mg，26%); IR(液體石蠟)νmax3600-3100(OH)，2250(CN)，1755，1720和1600(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ9.789(0.5H，s，CHO)，5.244，5.226，5.208，5.189(0.5H，4 線，CH(OH)2)，4.409(0.5H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.7Hz，H-5)，4.36-4.20(1H，m，H-1′)，3.92-3.84(0.5H，6 線，J＝3.7Hz，10.2Hz，H-4)，3.556(0.5H，dd，J＝2.6Hz，J＝5.8Hz，H-6)，3.56-3.46(0.5H，m，H-4)，3.27-2.80(5.5H，m，0.5 H-6，SCH2，CH2CN和1H CH2CHO)，2.15-1.90(1H，m，CH2CH(OH)2)，1.336(1.5H，d，J＝6.4Hz，CH3)和1.248ppm(1.5H，d，J＝6.5Hz，CH3). 實(shí)施例107 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基)-4-(鈉氧羰基甲基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
A.(4R，5S，6S)-4-(烯丙氧羰基甲基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
用重鉻酸吡啶鎓(2.0g，5.7mmol)處理在冰浴冷卻下的(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(300mg，0.627mmol)在二甲基甲酰胺(10ml)中的溶液，并將該反應(yīng)物在5℃(冷室)攪拌24小時(shí)。用水(100ml)稀釋該混合物，用乙酸乙酯(5×20ml)提取水相。合并乙酸乙酯提取液，依次用水(2×50ml)、冰冷卻的1%HCl(50ml)、水(3×50ml)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑得到一殘留物，將后者溶解在二氯甲烷/DMF(1∶1)混合物(10ml)中。依次用烯丙醇(1ml)、1-羥基苯并三唑(135mg，1.00mmol)和1，3-二環(huán)己基碳化二亞胺(206mg，1.00mmol)處理上述溶液，并將該反應(yīng)物在約22℃攪拌72小時(shí)。合并乙酸乙酯提取液，依次用水(3×20ml)、冰冷卻的1N HCl水溶液(20ml)、水(2×20ml)、1M NaHCO3水溶液(20ml)、水(3×20ml)和鹽水(20ml)洗滌，干燥(MgSO4)。將蒸除溶劑后所得殘留物用兩塊制備性硅膠板層析(2mm，EtOAc，Rf＝0.9)，得到油狀標(biāo)題化合物(100mg，29.8%); IR(凈態(tài))νmax2250(C≡N)，1780，1735和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MH)δ6.03-5.81，5.48-5.22(6H，m，乙烯基 H)，4.82-4.58(4H，2 組 m，CH2-乙烯)，3.370(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.6Hz，H-5)，4.30-4.19(1H，6 線，H-1′)，3.7(1H，ABX的X部分，J＝3.4Hz，H-4)，3.24-3.11，3.04-2.90(2H，2 組 m，SCH2)，3.128(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝4.2Hz，H-6)，2.877，2.860，2.792，2.774(1H，ABX的AB部分，J＝3.4Hz，J＝17.1Hz)，2.601，2.545，2.516，2.460(1H，ABX的AB部分，J＝17.1Hz，J＝11.3Hz，CH2-4)，2.72-2.63(2H，m，CH2CN)，1.147(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.879(9H，s，叔丁基)，0.068和0.063ppm(6H，2 s，二甲基). B.(4R，5S，6S)-4-(烯丙氧羰基甲基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
用冰乙酸(120μl，2.09mmol)處理在冰-甲醇浴冷卻下的(4R，5S，6S)-4-(烯丙氧羰基甲基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(100mg，0.187mmol)在THF(3ml)中的溶液，然后滴加1M氟化四丁銨在THF中的溶液(1.3ml，1.3mmol)。將該混合物攪拌30分鐘，然后使之在5℃(冷室)反應(yīng)430小時(shí)。用冰冷卻的乙酸乙酯(40ml)稀釋該混合物，依次用冰冷卻的飽和NaHCO3水溶液(4×20ml)、水(2×20ml)和鹽水(20ml)洗滌，干燥(MgSO4)。蒸掉溶劑得到一殘留物，將后者在制備性硅膠板層析(2mm，EtOAc，Rf＝0.75)，得到油狀標(biāo)題化合物(23mg，29%)，放置固化; IR(凈態(tài))νmax3600-3300(OH)，2250(C≡N)，1775，1730和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.04-5.83，5.50-5.24(6H，2 組 m，乙烯基-H)，4.89-4.61(4H，2 組 m，CH2-乙烯)，4.395(1H，dd，J＝3.0Hz，J＝9.8Hz，H-5)，4.30-4.10(1H，m，H-1′)，3.803-3.678(1H，ABX的X部分，J＝3.4Hz，H-4)，3.173(1H，dd，J＝3.1Hz，J＝6.9Hz，H-6)，3.20-3.133，3.09-2.9(2.5H，2 組 m，SCH2和隱藏 d of ABq)，2.884，2.867(AB的一部分，J＝3.4Hz，CH2-4)，2.688(2H，t，J＝7.2Hz，CH2CN)，2.649，2.589，2.562，2.503(1H，ABX的AB部分，J＝11.9Hz，J＝17.5Hz，CH2-4)，1.974(1H，d，J＝4.6Hz，OH)和1.300ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(鈉氧羰基甲基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
依次用Pd(PPh3)4(11mg)和N-甲基苯胺(30μl，0.22mmol)處理冰浴冷卻下的(4R，5S，6S)-4-(烯丙氧羰基甲基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(23mg，0.055mmol)在CH2Cl2(3ml)中的溶液。將該混合物攪拌20分鐘，然后用乙醚(10ml)稀釋，用0.1M pH7.0磷酸鹽緩沖液(5×2ml)提取。合并水提取液，用乙醚洗滌，然后通過反相μBondapak C18柱(5g，H2O→1%CH3CN)層析，冷凍干燥后，得到粉末狀標(biāo)題化合物(10mg，50%); IR(液體石蠟)νmax3600-3200(OH)，2250(C≡N)，1755和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.328(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝9.5Hz，H-5)，4.297-4.22(1H，m，H-1′)，3.778-3.653(1H，ABX的X部分，J＝3.7Hz，H-4)，3.419)1H，dd，J＝2.8Hz，J＝4.2Hz，H-6).3.30-3.15，3.01-2.90(2H，2 組 m，SCH2)，2.90-2.81(≈2.5H，m，SCH2CN和ABX的B部分的1d)，2.760-2.742(0.77H，d，J＝3.7Hz，ABX的B部分，CH2CO2)，2.346，2.286，2.262和2.203(1H，ABX的A部分，J＝11.8Hz，J＝16.7Hz，CH2CO2)和1.241ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例108 (4R，5S，6S)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-羥基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5R，6S)-3-二苯基磷酰氧基-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
用辛酸銠(Ⅱ)二聚物(0.2g)處理(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1R)-1-(2-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3-烯丙氧羰基-3-重氮基-2-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(6.93g，12.5mmol)在無水苯(150ml)中的溶液，加熱回流(浴溫為90-95℃)1小時(shí)。減壓下蒸除溶劑，將殘留物溶解在乙腈(80ml)中，冷卻至0-5℃。然后用5分鐘時(shí)間同時(shí)加入N，N-二異丙基乙胺(2.40ml，13.78mmol)和氯磷酸二苯酯(2.85ml，13.75mmol)。加入少許4-N，N-二甲氨基吡啶晶體，并將該混合物攪拌1小時(shí)。然后用乙酸乙酯(500ml)稀釋該反應(yīng)混合物，依次用冷水、0.2M pH7.0磷酸鹽緩沖液和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸除溶劑，得到一油狀物，后者在硅膠(5×12cm)上進(jìn)行層析。用甲苯和乙酸乙酯的混合物(95∶5)洗脫，得到5.77g(61%)透明油狀標(biāo)題化合物; IR(NaCl，壓片)νmax1788β-內(nèi)酰胺的C＝O和1730cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ-0.01，0.06和0.07(3 x s，6H，3H和3H，SiCH3)，0.83和0.87(2 x s，2 x 9H，Si叔-Bu)，1.27(d，J＝6.14Hz，3H，CH3CHO)，1.5-1.8和1.9-2.1(m，2H，CH2-4)，3.25(dd，JH6，H5＝2.77Hz，JH6，H1＝6.92Hz，1H，H-6)，3.3-3.7(m，3H，H-4和CH2CH2OSi)，4.12(dd，JH5，H6＝2.77Hz，JH5，H4＝10.35Hz，1H，H-5)，4.20(m，1H，CH3CHO)，4.64(寬 d，J＝5.1Hz，2H，烯丙基的CH2)，5.1-5.4和5.7-6.0(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)和7.1-7.4ppm(m，10H，芳族). B.(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-3-二苯基磷酰氧基-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.24g，1.63mmol)的無水乙腈(20ml)溶液冷卻至0-5℃，依次用N，N-二異丙基乙胺(0.57ml，3.27mmol)和在乙腈(3ml)中的(2S，4S)-1-N-烯丙氧羰基-2-二甲氨基羰基-4-巰基吡咯烷(0.84g，3.27mmol)〔按歐洲專利申請Ep-126，587中所述常規(guī)方法制得〕處理上述溶液。然后將該反應(yīng)混合物在0-5℃攪拌16小時(shí)。用乙酸乙酯(200ml)稀釋該溶液，依次用水、0.2M磷酸鹽緩沖液pH7.0和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸除溶劑，得到一油狀物，后者在硅膠(2.5×20cm)上層析，用甲苯和乙酸乙酯的混合物(1∶1)洗脫，得到0.80g(64%)油狀標(biāo)題化合物; IR(NaCl，壓片)νmax1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)1710(酯的C＝O)和1660cm-1(酰胺的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.03，0.05和0.09(3 x s，3H，3H和6H，SiCH3)，0.87和0.89(2 x s，2 x 9H，Sit-But)，1.26(d，J＝6.25Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.1(m，3H，CH2-4和吡咯烷的H-3)，2.6(m，1H，吡咯烷的H-3)，2.95，1.97，3.03和3.08(4s，共 6H，CON(CH3)2，3.05(與NCH3重疊，1H，H-6)，3.4-3.6和3.7-3.9(2 x m，3H和2H，H-4，CH2OSi和吡咯烷的H-5)，4.0-4.2(m，1H，吡咯烷的H-4)，4.2-4.4(m，2H，H-5和CH3CHO)，4.5-4.9(m，5H，烯丙基的CH2和吡咯烷的H-2)，5.1-5.5和5.8-6.1ppm(2 x m，4H和2H，烯丙基的CH). C.(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲基氨基羰基〕吡咯烷硫基-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-羥基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲基氨基羰基〕吡咯烷硫基-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.70g，0.91mmol)在無水四氫呋喃(10ml)中的溶液，在0-5℃下滴加乙酸(0.62ml，11.0mmol)處理，然后滴加5.5ml(5.5mmol)1M的氟化四丁銨的四氫呋喃溶液。將該混合物在10℃下放置144小時(shí)。然后用乙酸乙酯(200ml)稀釋該溶液，依次用冷的飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸除溶劑，得到一油狀物，后者在硅膠(2.5×12cm)上層析。先用乙酸乙酯洗脫，得到0.30g(50%)單去保護(hù)的(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲基氨基羰基〕吡咯烷硫基-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-羥基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯〔見實(shí)施例109，方法B，步驟A〕。
然后用乙酸乙酯、丙酮和乙腈的混合物(6∶2∶2)洗脫，得到0.179g(36%)油狀標(biāo)題卡巴潘尼姆，該產(chǎn)物污染有一些四丁銨鹽，可直接用于下一步反應(yīng) IR(NaCl，壓片)νmax3400(OH)，1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1710(酯的C＝O)和1650cm-1(酰胺的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.33(d，J＝6.33;Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.0(m，3H，CH2-4和吡咯烷的H-3)，2.9(m，1H，吡咯烷的H-3)，2.95，2.97，3.03和3.09(4 x s，共6H，NCH3)，3.4～5.0(寬，16H)，5.2-5.5和6.8-6.1ppm(4H和2H，烯丙基的CH). D.(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔-2(S)-2-二甲基氨基羰基〕吡咯烷硫基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-羥基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基-2(S)-2-二甲基氨基羰基〕吡咯烷硫基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-羥基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.33g，0.613mmol)溶解在二氯甲烷(10ml)中，在22℃，于氮?dú)夥障?，用Pd(PPh3)4(0.030g)和N-甲基苯胺(0.26ml，2.45mmol)處理上述溶液。1小時(shí)后，過濾收集形成的固體，減壓下干燥，得到0.164g(65%)粉末狀標(biāo)題化合物粗品。該固體在反相硅膠(μ-Bondapak C-18，2.5×14cm)上層析，用梯度為(0-5%)的乙腈水溶液洗脫。將UV活性級分冷凍干燥，得到0.122g(44%)白色非晶形粉末狀標(biāo)題化合物〔α〕22D＝-58.5°(c1.0，H2O); 純度(HPLC)94.7%(μBondapak C-18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為5.9分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(8，680); IR(KBr)νmax1750(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1650，1660(酰胺的C＝O)和1600cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，1.7-2.2(m，3H，羥基乙基的CH2-1和吡咯烷的H-3)，3.0(m與NCH3重疊，1H，吡咯烷的H-3)，3.0和3.07(2 x s，2 x 3H，NCH3)，3.3-3.9(m，5H，H-4，CH2CH2OH和吡咯烷的H-5)，3.48(dd，JH6，H5＝2.73Hz，JH6，H1＝5.91Hz，1H，H-6)，3.95(m，1H，吡咯烷的H-4)，4.2-4.4(m，2H，H-5和CH3CHO重疊)，和4.83ppm(t，J＝5.8Hz，1H，吡咯烷的H-2). 實(shí)施例109 (4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-((4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
方法A A.(4R，5R，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-二苯基磷酰氧基-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(3S，4S)-4-〔(1R)-1-(2-疊氮基乙基)-3-烯丙氧羰基-3-重氮基-2-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(4.0g，8.6mmol)溶解在無水苯(125ml)中，在氮?dú)夥障?，用辛酸?Ⅱ)二聚體(0.075g)處理上述溶液，然后加熱回流(浴溫為90℃)30分鐘。減壓下除去溶劑，并將中間體二環(huán)酮溶解在無水乙腈(60ml)中，冷卻至0-5℃。然后，用5分鐘時(shí)間同時(shí)加入氯磷酸二苯酯(2.0ml，9.65mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.68ml，9.64mmol)處理上述溶液。繼之加入少許4-N，N-二甲氨基吡啶晶體，并將該混合物在0-5℃攪拌45分鐘。然后用乙酸乙酯(500ml)稀釋該反應(yīng)混合物，依次用冷水、0.2M pH7.0磷酸鹽緩沖液和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑后，將殘留物在硅膠(5×10cm)上層析，用梯度為0-5%乙酸乙酯在甲苯中的溶液洗脫，得到3.84g(66%)油狀標(biāo)題化合物; IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)，1788(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1730cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.07和0.08(2s，6H，SiCH3)，0.87(s，9H，Si-tBu)，1.28(d，J＝6.18Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.2(m，2H，CH2-4)，3.18(dd，JH6，H5＝2.95Hz，JH6，H1＝7.38Hz，1H，H-6)，3.1-3.5(m，3H，CH2OH和H-4)，4.12(dd，JH5，H6＝2.95Hz，JH5，H4＝10.54Hz，1H，H-5)，4.19(m，1H，CH3CHO)，4.65(m，2H，烯丙基的CH2)，5.1-5.5和5.8-6.0(2m，2H和1H，烯丙基的CH)，和7.2-7.5(m，10H，芳族). B.(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基｝-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-二苯基磷酰氧基-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(3.84g，5.74mmol)在無水乙腈(40ml)中的溶液冷卻至0-5℃，在氮?dú)夥障?，用N，N-二異丙基乙胺(2.0ml，11.6mmol)處理之，然后加入(2S，4S)-1-N-烯丙氧羰基-2-二甲氨基羰基-4-巰基吡咯烷〔按Ep-126，587所述通法制得〕(3.0g，11.6mmol)在乙腈(7ml)中的溶液。在0-5℃反應(yīng)17小時(shí)后，用乙酸乙酯(500ml)稀釋該反應(yīng)混合物，依次用冷水、飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。將在減壓下蒸除溶劑后所得殘留物在硅膠(5×10cm)上層析，用甲苯和乙酸乙酯的混合物(1∶1)作為洗脫劑，得到2.47g(64%)白色泡沫狀標(biāo)題化合物 IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)，1780(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1710(酯的C＝O)和1660cm-1酰胺的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.1(s，6H，SiCH3)，0.9(s，9H，Si-tBu)，1.31(d，J＝6.03Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.1(m，3H，吡咯烷的H-3和CH2-4)，2.6-2.8(m，1H，吡咯烷的H-3)，2.96，2.98，3.05和3.11(4s，共 6H，NCH3)，3.1(與NCH3重疊，1H，H-6)，3.3-3.8(m，5H，吡咯烷的CH2-5，CH2N3和H-4)，4.1(m，1H，吡咯烷的H-4)，4.1-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO)，4.5-4.9(m，5H，烯丙基的CH2和吡咯烷的H-2)，5.1-5.5和5.8-6.1ppm(2 x m，4H和2H，烯丙基的CH). 方法B A.(4R，5S，6S)-4-(2″-羥基乙基)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(2.64g，3.44mmol)〔按實(shí)施例108，步驟B制備〕溶解在無水四氫呋喃(50ml)中，在0-5℃，氮?dú)夥障?，先用乙?1.2ml，21.0mmol)處理上述溶液，然后加入10.3ml(10.3mmol)1M氟化四丁銨在四氫呋喃中的溶液。在10℃反應(yīng)16小時(shí)后，用乙酸乙酯(400ml)稀釋該反應(yīng)混合物，用冷的飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑，得到一油狀物，將后者在硅膠(4×8cm)上層析，用乙酸乙酯洗脫，得到1.82g(81%)油狀標(biāo)題卡巴潘尼姆 IR(NaCl，壓片)νmax3450(OH)，1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1705(酯的C＝O)和1650cm-1(酰胺的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.09(s，6H，SiCH3)，0.89(s，9H，Si-tBu)，1.29(d，J＝6.1Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.1(m，3H，CH2CH2OH和吡咯烷的H-3)，2.6-2.8(m，1H，吡咯烷的H-3)，2.96，2.98，3.05和3.09(4s，共 6H，CON(CH3)2)，3.17(寬 dd，JH6，H5＝2.5Hz，JH6，H1＝6.1Hz，1H，H-6)，3.46(t，2H，吡咯烷的H-5和H-4重疊)，3.6-3.9(m，3H，CH2CH2OH和吡咯烷的H-5)，4.1(m，1H，吡咯烷的H-4)，4.15-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO)，4.5-4.9(m，5H，烯丙基的CH2和吡咯烷的H-2)，5.1-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，4H和2H，烯丙基的CH). B.(4R，5S，6S)-3-((4S)-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-3-((4S)-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-4-(2″-羥基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.82g，2.79mmol)溶解在無水四氫呋喃(200ml)中，在-20℃，氮?dú)夥障?，用三苯?1.17g，4.46mmol)和6.5ml(4.81mmol)0.74M疊氮酸在甲苯中的溶液處理上述溶液。然后滴加偶氮二甲酸二乙酯(0.75ml，4.76mmol)，并將所得混合物攪拌30分鐘。然后用乙酸乙酯(500ml)稀釋該反應(yīng)混合物，用冷的飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。然后在減壓下濃縮除去溶劑，得到一糊狀物，在0-5℃下將后者與甲苯(25ml)一起研制，過濾除去肼二甲酸二乙酯晶體。濃縮濾液，以相同的方式用乙醚(25ml)處理，除去三苯膦氧化物。然后將濾液在硅膠(4×11cm)上層析，用甲苯和乙酸乙酯的混合物(1∶1)作為洗脫劑，得到2.3g油狀標(biāo)題化合物，該化合物污染有三苯膦氧化物。該產(chǎn)物的紅外和1H NMR譜與方法A所得產(chǎn)物的光譜相同。
C.(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(2.47g，3.65mmol)在無水四氫呋喃(50ml)中的溶液冷卻至0-5℃，在氮?dú)夥障孪扔靡宜?1.25ml，21.8mmol)處理，然后加入11.0ml(11.0mmol)1M氟化四丁銨在四氫呋喃中的溶液。將該溶液在10℃放置7天。用乙酸乙酯(500ml)稀釋該反應(yīng)混合物，用冷的飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑，得到一油狀物，后者在硅膠(4×11cm)上層析，用梯度為50→100%乙酸乙酯在甲苯中的溶液洗脫，得到1.43g(70%)白色泡沫狀標(biāo)題化合物 IR(NaCl，壓片)νmax2105(N3)，1780(β-內(nèi)酰胺的C＝O)1710(酯的C＝O)和1650cm-1(酰胺的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.39(d，J＝6.17Hz，3H，CH3CHO)，1.7-2.2(m，3H，吡咯烷的H-3和CH2-4)，2.6-2.8(m，1H，吡咯烷的H-3)，2.96，2.98，3.06和3.10(4 x s，總數(shù) 6H，NCH3)，3.15與NCH3重疊，1H，H-6)，3.3-3.7(m，5H，吡咯烷的CH2-5，H-4和CH2N3)，4-4.2(m，1H，吡咯烷的CH-4)，4.2-4.4(m，2H，H-5 and CH3CHO)，4.5-4.9(m，5H，烯丙基的CH2和吡咯烷的H-2)，5.1-5.5和5.7-6.1ppm(2 x m，4H，和2H，烯丙基的CH). D.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-((4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基-(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.18g，2.1mmol)溶解在無水二氯甲烷(40ml)中，在22℃，在氮?dú)夥障?，先用Pd(PPh3)4(0.1g)處理該溶液，然后加入0.91ml(8.4mmol)N-甲基苯胺。1小時(shí)后，用冷水(3×40ml)提取有機(jī)相，合并水提取液，并將其置于減壓條件下以除去痕量的有機(jī)溶劑。然后將水相在反相硅膠(μ-Bondapak C18，3.5×15cm)上層析，用梯度為0-15%乙腈在水中的溶液為洗脫劑。將UV活性級分冷凍干燥后，得到0.50g(54%)白色非晶形粉末狀標(biāo)題卡巴潘尼姆〔α〕22D-56.2°(c1.0，H2O); 純度(HPLC)96%(μBondapak C-18，3.9mm×30cm，15%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液，流速為1ml/分，UV檢測器302nm，保留時(shí)間為7.6分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(8，420); IR(KBr)νmax2100(N3)，1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1655(酰胺的C＝O)和1600cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.36Hz，3H，CH3CHO)，1.7-2.3(m，3H，吡咯烷的H-3和CH2-4)，3.0和3.07(2 x s，2 x 3H，NCH3)，3.1(m，1H，吡咯烷的H-3)，3.3-3.7(m，5H，吡咯烷的H-5，H-4，H-6和CH2N3)，3.77(dd，Jgem＝12.15Hz，JH5，H4＝6.32Hz，吡咯烷的H-5)，4.0(m，1H，吡咯烷的H-4)，4.27(m，1H，CH3CHO)4.30(dd與CH3CHO重疊，JH5，H6＝2.7Hz，H-5)和4.9ppm(與HOD重疊，吡咯烷的H-2). 實(shí)施例110 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-2-二甲基氨基羰基〕吡咯烷硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-2-二甲基氨基羰基〕吡咯烷硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.70g，1.60mmol)溶解在冷水(140ml)中，在0-5℃，45psi氫氣壓下，用1.9g 5%Pd/氧化鋁將上述溶液氫化1小時(shí)。然后加入0.18ml(3.2mmol)乙酸(pH由8.1降至4.2)，在硅藻土墊上濾出催化劑。在反相硅膠柱(μBondapak C18，2.5×13cm)上層析濾液，用水作為洗脫劑。合并UV活性級分，冷凍干燥，再用相同的柱進(jìn)行第二次層析，將合適的級分冷凍干燥，得到0.35g(47%)白色非晶形粉末狀標(biāo)題卡巴潘尼姆〔α〕22D＝-47.8°(c1.0，H2O); 純度(HPLC)98.8%(μBondapak C18，3.4mm×30cm，5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液，流速為1ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為11.3分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax300nm(8，130); IR(KBr)νmax1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1660(酰胺的C＝O)和1600cm-1(寬，羧酸根的C＝O). 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.35(d，J＝6.35 Hz，3H，CH3CHO)，1.8-2.4(m，3H，吡咯烷的H-3和CH2-4)，1.94(s，CH3CO2H)，3.02和3.09(2s，2 x 3H，CON(CH3)2)，2.9-3.2(m與NCH3重疊，3H，吡咯烷的H-3和CH2NH2)，3.25-3.5(m，2H，吡咯烷的H-5和H-4)，3.51(dd，JH6，H5＝2.89Hz，JH6，H1＝6.44Hz，1H，H-6)，3.6-3.75(m，1H，吡咯烷的H-5)，3.98(m，1H，吡咯烷的H-4)，4.3(m，1H，CH3CHO)，4.34(dd與CH3CHO重疊，JH5，H6＝2.89Hz，JH5，H4＝9.70Hz，1H，H-5)和4.74ppm(t，J＝8.6Hz，1H，吡咯烷的H-2). 實(shí)施例111 (4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基)-(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(2R，4R，5R，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(8.23mmol，將3.0g，8.23mmol重氮基前體環(huán)化制得)溶解在無水乙腈(60ml)中，在0-5℃，于氮?dú)夥障拢?分鐘時(shí)間同時(shí)加入氯磷酸二苯酯(1.9ml，9.18mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.6ml，9.18mmol)處理上述溶液。然后加入少許4-N，N-二甲氨基吡啶晶體，并將該溶液攪拌1小時(shí)。補(bǔ)加N，N-二異丙基乙胺(2.0ml，11.5mmol)，繼之加入(2S，4S1-N-烯丙氧羰基-2-二甲氨基羰基-4-巰基吡咯烷(3.0g，11.65mmol))在乙腈(7ml)中的溶液，將所得混合物在0-5℃下攪拌18小時(shí)。加入乙酸乙酯(500ml)使該反應(yīng)混合物驟冷，依次用冷水、飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑，得到一油狀物，后者在硅膠(6.5×12cm)上層析，用乙酸乙酯/甲苯(1∶1至EtOAc)進(jìn)行梯度洗脫，得到白色泡沫狀標(biāo)題化合物(1.59g，33%); IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)，1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1705(酯的C＝O)和1650cm-1(酰胺的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.37和1.39(2d，J＝6.1Hz，和J＝6.18Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.0(m，5H，吡咯烷的H-3)，CH2-1和丙基的2)，2.6-2.8(m，1H，吡咯烷的H-3)，2.96，2.97，3.05和3.1(4s，共 6H，CON(CH3)2)，3.1-3.7(m，6H，吡咯烷的CH2-5，CH2N3，H-4和H-6)，4.0(m，1H，吡咯烷的H-4)，4.1-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO)，4.5-4.9(m，5H，吡咯烷的H-2和烯丙基的CH2)，5.1-5.5和5.8-6.1ppm(2m，4H和2H，烯丙基的CH). B.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-((4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔1-N-烯丙氧羰基)-(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.59g，2.76mmol)溶解在無水二氯甲烷(50ml)中，在22℃，氮?dú)夥障?，先用Pd(PPh3)4(0.12g)處理上述溶液，然后加入1.2ml(11.1mmol)N-甲基苯胺。3小時(shí)后，用水(3×50ml)提取反應(yīng)混合物，合并水相，并將其置于減壓條件下以除去痕量的有機(jī)溶劑。將水相在反相硅膠(μBondapak C18，3.5×15cm)上層析，用梯度為0-15%的乙腈在水中的溶液洗脫，經(jīng)冷凍干燥后，得到0.60g(48%)白色非晶形粉末狀標(biāo)題卡巴潘尼姆〔α〕22D＝-47.7°(c1.0，H2O); 純度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用15%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1.5ml/分，UV檢測器302nm，保留時(shí)間為9分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(9，737); IR(KBr)νmax2100(N3)，1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1655(酰胺的C＝O)和1600cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.39Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.0(m，5H，丙基的CH2-1和2及吡咯烷的H-3)，2.99和3.07(2s，2 x 3H，CON(CH3)2)，2.9-3.1(與CON(CH3)2重疊CH3)2，1H，H-3吡咯烷的H-3)，3.2-3.5(m，5H，吡咯烷的H-5，H-4，H-6和CH2N3)，3.63(dd，Jgem12.25Hz，JH5，H4＝6.16Hz，1H，吡咯烷的H-5)，3.93(m，1H，吡咯烷的H-4)，4.2-4.4(m，2H，H-5和CH3CHO重疊)和4.65ppm(t，J＝8.5Hz，1H，吡咯烷的H-2). 實(shí)施例112 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-((4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸半磷酸氫鹽
將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-((4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.51g，1.13mmol)在冷水(100ml)中的溶液，在45psi氫氣壓下，在0-5℃，用0.5g5%鈀/氧化鋁氫化1小時(shí)。然后加入50ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液，在硅藻土(Celite)墊上濾除催化劑。將濾液在反相硅膠(μ-Bondapak C18，3.5×14cm)上層析，用梯度為0-10%乙腈在0.02M pH7.0磷酸鹽緩沖液中的溶液作為洗脫劑。將UV活性級分合并在相似的柱(2.5×14cm)上用水代替緩沖液作為洗脫鹽。將UV活性級分冷凍干燥，得到0.25g(46%)白色非晶形粉末狀標(biāo)題卡巴潘尼姆;〔α〕22D-67.6°(c1.0，H2O); 純度(HPLC)99%(μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，用8%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為0.8ml/分，UV檢測器302nm，保留時(shí)間為5.68分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(10，400); IR(KBr)νmax1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1645(酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.33Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.0(m，5H，吡咯烷的H-3及丙基的CH2-1和2)，2.73(m，1H，吡咯烷的H-3)，2.97和3.07(2s，2 x 3H，CON(CH3)2)，3-3.2(與NCH3重疊，4H，吡咯烷的CH2-5和CH2NH2)，3.34(寬 t，1H，H-4)，3.38(dd，JH6，H5＝2.59Hz，JH6，H1＝6.27Hz，1H，H-6)，3.73(m，1H，吡咯烷的H-4)，4.10(dd 收縮成 t，J＝8.0Hz，1H，吡咯烷的H-2)和4.2-4.4ppm(m，2H，CH3CHO和H-5重疊). 實(shí)施例113 (4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸半磷酸氫鹽
將(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸半磷酸氫鹽(0.14g，0.33mmol)在水(15ml)中的溶液在0-5℃下用1N NaOH調(diào)至pH8-8.5，然后用5分鐘時(shí)間分小批量加入氨基亞氨基甲磺酸(0.22g，1.77mmol)處理之。在加料期間及加料完成后2小時(shí)內(nèi)，將該反應(yīng)混合物的pH維持在8-8.5。然后加入15ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液，并將所得溶液在反相硅膠(μBondapak C18，2.5×14cm)上層析。用梯度為0-15%乙腈在水中的溶液洗脫，經(jīng)冷凍干燥后，得到0.068g(45%)白色非晶形粉末狀標(biāo)題化合物 純度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用8%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器302nm，保留時(shí)間為7.2分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(10，800); IR(KBr)νmax1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1640(酰胺的C＝O)和1590cm-1(sh，羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.38Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.0(m，5H，吡咯烷的H-3及丙基的CH2-1和2)，2.75(m，1H，吡咯烷的H-3)，2.97和3.08(2s，2 x 3H，NCH3)，3.1-3.4(m，5H，吡咯烷的CH2-5，丙基的CH2N-3和H-4)，3.33(dd，JH6，H5＝2.55Hz，JH6，H1＝6.21Hz，1H，H-6)，3.75(m，1H，吡咯烷的H-4)，4.16(AMX系統(tǒng)的X部分，JAX＝8.8Hz，JMX＝7.4Hz，1H，吡咯烷的H-2)，4.25(dd與CH3CHO重疊JH5，H6＝2.55Hz，1H，H-5)和4.27ppm(m，1H，CH3CHO). 實(shí)施例114 (4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-3-〔(2-烯丙氧羰基氨基乙基)硫基〕-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(2R，4R，5R，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(10.0mmol，將4.64g，10.0mmol重氮基前體環(huán)化制得)溶解在無水乙腈(75ml)中，在0-5℃，氮?dú)夥障?，?分鐘時(shí)間同時(shí)加入氯磷酸二苯酯(2.3ml，11.1mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.9ml，10.9mmol)處理上述溶液。然后加入少許4-N，N-二甲氨基吡啶晶體，將所得混合物在0-5℃攪拌30分鐘。然后先向該溶液中補(bǔ)加N，N-二異丙基乙胺(6.0ml，34.5mmol)，再加入2-巰基乙基氨甲酸烯丙酯(見實(shí)施例116，步驟A)(5.1g，33.4mmol)在乙腈(5ml)中的溶液，將所得混合物在0-5℃攪拌20小時(shí)。然后用乙酸乙酯(500ml)稀釋該溶液，依次用水、飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。將減壓蒸除溶劑后得到的殘留物在硅膠(5×10cm)上層析，用梯度為0-10%乙酸乙酯在甲苯中的溶液為洗脫劑。蒸發(fā)合適的級分，得到淺黃色油狀標(biāo)題化合物(4.37g，75%)。經(jīng)TLC和1H NMR測定，該物質(zhì)污染有一部分雜質(zhì)(二硫化物)，將其直接用于下一步反應(yīng)。
IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)，1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1720cm-1(寬，酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.09(s，6H，SiCH3)，0.89(s，9H，Si-tBu)，1.30(d，J＝6.05Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.0(m，2H，CH2-4)，2.8-3.6(m，8H，SCH2CH2N，CH2N3，H-4和H-6)，4.1-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO)，4.5-4.9(m，4H，烯丙基的CH2)，5.1-5.5和5.8-6.1ppm(2m，6H，和2H，烯丙基的CH和NH)。
B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-烯丙氧羰基氨基乙基)硫基〕-4-(2″-疊氮基乙基)-7-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-烯丙氧羰基氨基乙基)硫基〕-4-(2″-疊氮基乙基)-7-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(4.37g，7.54mmol)溶解在無水四氫呋喃(120ml)中，在0-5℃，氮?dú)夥障?，先用乙?2.7ml，47.5mmol)處理該溶液，然后用5分鐘時(shí)間滴加24ml(24.0mmol)氟化四丁銨在四氫呋喃中的溶液。將該溶液在10℃放置7天。用乙酸乙酯(500ml)稀釋該反應(yīng)混合物，用飽和碳酸氫鈉(2×)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑，得到一油狀物，后者在硅膠(6.5×11cm)上層析，用乙酸乙酯/甲苯(7∶3至1∶1)進(jìn)行梯度洗脫。蒸發(fā)UV活性級分，得到1.17g(33%)透明油狀標(biāo)題化合物 IR(NaCl)νmax3480(OH)，2100(N3)，1770(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.39(d，J＝6.24Hz，3H，CH3CHO)，1.7-2.1(m，2H，CH2-4)，2.7-3.15(m，2H，SCH2)，3.18(dd，JH6，H5＝2.66Hz，JH6，H1＝7.97Hz，1H，H-6)，3.2-3.7(m，5H，CH2NH，CH2N3和H-4)，4.23(m，與H-5重疊，1H，CH3CHO)，4.25(dd，JH5，H6＝2.66Hz，JH5，H4＝9.57Hz，1H，H-5)，4.57和4.75(2m，2 x 2H，烯丙基的CH2)，5.1-5.5和5.8-6.1ppm(2m，6H和2H，烯丙基的CH和NH). C.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-3-〔(2-烯丙氧羰基氨基乙基)硫基〕-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.17g，2.5mmol)溶解在無水二氯甲烷(30ml)中，在22℃，氮?dú)夥障?，先用Pd(PPh3)4(0.072g)處理上述溶液，然后加入N-甲基苯胺(1.6ml，14.8mmol)。將該溶液攪拌3小時(shí)，同時(shí)出現(xiàn)沉淀。用冷水(3×35ml)提取該反應(yīng)混合物，合并水相，并將其置于減壓條件下以除去痕量的有機(jī)溶劑。將該溶液在反相硅膠(μBondapak C18，2.5×14cm)上層析，用乙腈水溶液進(jìn)行梯度洗脫。將UV活性級分冷凍干燥，得到白色非晶形固體狀標(biāo)題卡巴潘尼姆〔α〕22D+21.5°(c1.0，H2O); 純度(HPLC)99.2%(μBondapak C18(3.9mm×30cm)，用10%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器302nm，保留時(shí)間為7.68分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax298nm(7401nm); IR(KBr)νmax2100(N3)，1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1590cm-1(寬，羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.38Hz，3H，CH3CHO)，1.7-2.2(m，2H，CH2-4)，2.9-3.7(寬 m，7H，SCH2CH2NH2，CH2N3和H-4)，3.50(dd，JH6，H5＝2.67Hz，JH6，H1＝6.24Hz，1H，H-6)和4.2-4.4ppm(m，2H，H-5和CH3CHO重疊). 實(shí)施例115 (4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.30g，0.88mmol)溶解在冷水(90ml)中，在0-5℃，45psi氫氣壓下，用1.2g5%Pd/氧化鋁將上述溶液氫化50分鐘。然后加入0.1ml(1.6mmol)乙酸(pH由9.3變?yōu)?.3)，在硅藻土(Celite)墊上濾除催化劑。將濾液在反相硅膠(2.5×14cm)上層析，用0.005M乙酸水溶液作為洗脫劑。產(chǎn)物隨溶劑前沿從柱中很快洗出。合并UV活性級分，冷凍干燥，在相同柱上進(jìn)行第二次層析。冷凍干燥，得到0.22g(66%)白色非晶形粉末狀標(biāo)題卡巴潘尼姆。經(jīng)UV和1H NMR測定，該產(chǎn)物的純度為60%，它含有一些乙酸的無機(jī)鹽(基于疊氮基前體的UV吸收強(qiáng)度7400); 純度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為0.9ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為5.7分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax296nm(4，446); IR(KBr)νmax1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1570cm-1(寬，羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J-6.36Hz，3H，CH3CHO)，1.9(s，CH3CO2H)，1.8-2.4(m，2H，CH2-4)，2.8-3.45(m，7H，SCH2CH2NH2，H-4和CH2NH2)，3.49(dd，JH6，H5＝2.84Hz，JH6，H4＝6.42Hz，1H，H-6)，4.2-4.4ppm(m，2H，H-5和CH3CHO). 實(shí)施例116 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕--7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.2-巰基乙基氨甲酸烯丙酯 將2-氨基乙硫醇鹽酸鹽(4.4g，38.7mmol)在無水乙腈(30ml)中的懸浮液冷卻至0-5℃，在氮?dú)夥障掠肗，N-二異丙基乙胺(16.0ml，91.8mmol)處理。5分鐘后，立即一次加入氯代三甲基硅烷(6.56ml，51.7mmol)，并將該混合物攪拌15分鐘。然后先滴加氯甲酸烯丙酯(4.24ml，40.0mmol)，再滴加N，N-二異丙基乙胺(6.9ml，29.6mmol)(10分鐘)，將所得混合物在0-5℃攪拌30分鐘，然后在22℃攪拌2小時(shí)。加入水(100ml)，用二氯甲烷(2×100ml)提取反應(yīng)混合物。合并有機(jī)相，依次用1N鹽酸(20ml)、0.2M pH7.0磷酸鹽緩沖液和鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑，得到6.5g硫醇粗品，為透明油狀物，后者直接用于下一步偶合步驟。標(biāo)題化合物的制備基于I.Shinkai等人在Synthesis，924(1980)中所述的方法。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.36(t，J＝8.53Hz，1H，SH)，2.66(m，2H，SCH2)，3.37(m，2H，CH2N)，4.57(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2(寬，1H，NH)，5.2-5.4和5.8-6.1ppm(2m，2H和1H，烯丙基的CH). B.(4R，5S，6S)-3-〔(2-烯丙氧羰基氨基乙基)硫基〕-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5R，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(11.0mmol，將4.0g，11.0mmol重氮基前體環(huán)化制得)在無水乙腈(50ml)中的溶液冷卻至0-5℃，用5分鐘時(shí)間同時(shí)滴入氯磷酸二苯酯(2.3ml，11.5mmol)和N，N-二異丙基乙胺(2.3ml，11.5mmol)處理上述溶液。然后加入少許4-N，N-二甲氨基吡啶晶體，并將該溶液攪拌1小時(shí)。然后先滴加N，N-二異丙基乙胺(2.3ml，11.5mmol)，再滴加氯代三甲硅烷(1.46ml，11.5mmol)，并將所得混合物攪拌15分鐘，由此將羥基甲硅烷基化。補(bǔ)加N，N-二異丙基乙胺(3.8ml，21.9mmol)，并加入2-巰基乙基氨甲酸烯丙酯(3.53g，21.9mmol)，將該混合物在0-5℃攪拌16小時(shí)。加入乙酸乙酯(400ml)和水使該反應(yīng)混合物驟冷。依次用2%冷的檸檬酸水溶液、0.2M pH7.0磷酸鹽緩沖液和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸除溶劑，將殘留物溶解在四氫呋喃(100ml)和水(50ml)的混合物中，并且在0-5℃下用乙酸(5ml)處理。在0-5℃反應(yīng)1小時(shí)，在22℃反應(yīng)2小時(shí)后，用乙酸乙酯(400ml)稀釋該反應(yīng)混合物，依次用冷的飽和NaHCO3、0.2M pH7.0磷酸鹽緩沖液和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸除溶劑，將所得油狀物在硅膠(4×12cm)上層析，用乙酸乙酯/甲苯(8∶7至1∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到3.19g(61%)油狀標(biāo)題化合物 IR(NaCl，壓片)νmax3400(OH)，2100(N3)，1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1705cm-1(寬，酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.39(d，J＝6.25Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，2.7-3.2(m，2H，SCH2)，3.24(dd，JH6，H5＝2.63Hz，JH6，H1＝7.46Hz，1H，H-6)，3.2-3.6(m，5H，CH2N3，CH2N和H-4)，4.24(dd，JH5，H6＝2.63Hz，JH5，H4＝9.43Hz，1H，H-5)，4.24(與H-5重疊，1H，CH3CHO)，4.56和4.75ppm(2m，2 x 2H，烯丙基的CH2)，5.1-5.5(m，5H，烯丙基的CH和NH)和5.8-6.1ppm(m，2H，烯丙基的CH). C.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-3-〔(2-烯丙氧羰基氨基乙基)硫基〕-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(3.19g，6.65mmol)溶解在無水二氯甲烷(80ml)中，在22℃，氮?dú)夥障?，用Pd(PPh3)4(0.19g)和N-甲基苯胺(4.3ml，40.0mmol)處理上述溶液。3小時(shí)后，用冷水(200ml)稀釋含有膠樣沉淀的反應(yīng)混合物，用2N鹽酸將pH調(diào)至3.8，以使氨基酸溶解。收集冷卻的水相，用二氯甲烷洗滌，用1N NaOH將pH調(diào)至6.5，然后將其置于減壓條件下以除去痕量的有機(jī)溶劑。將該溶液在反相硅膠(μBondapak C18，3×15cm)上層析，用梯度為0-10%的乙腈水溶液為洗脫劑。將UV活性級分冷凍干燥，得到1.28g(54%)白色非晶形粉末狀標(biāo)題化合物〔α〕22D+32.6°(c1.0，H2O); 純度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用10%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為13.3分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax298nm(8，425); IR(KBr)νmax2100(N3)，1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，2.8-3.5(m，5H，SCH2CH2NH2和H-4)，3.42(t，J＝6.2Hz，3H，CH2N3)，3.47(dd，JH6，H5＝2.70Hz，JH6，H1＝5.98Hz，1H，H-6)，4.26(dd，JH5，H6＝2.70Hz，JH5，H4＝9.35Hz，1H，H-5)和4.28ppm(m與H-5重疊，1H，CH3CHO). 實(shí)施例117 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
將(4R，5S，6S)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-4-(3″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.292g，0.82mmol)溶解在水(90ml)中，在0-5℃，45psi氫氣壓下，用1.2g5%Pd/氧化鋁將上述溶液氫化1小時(shí)。然后加入0.1ml(1.64mmol)乙酸，經(jīng)硅藻土墊濾除催化劑。然后在反相硅膠(μBondapak C18，3×12cm)上層析濾液，用0.005M乙酸水溶液作為洗脫劑。合并UV活性級分，冷凍干燥，得到0.264g(82%)白色非晶形固體狀標(biāo)題化合物〔α〕22D+37.0°(c1.0，H2O); 純度(HPLC)98%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為0.8ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為4.9分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax298nm(7，517); IR(KBr)νmax1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1570cm-1(寬，羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，1.92(s，CH3CO2H)，2.8-3.4(m，7H，SCH2CH2NH2，丙基的CH2NH2-3和H-4)，3.43(dd，JH6，H5＝2.73Hz，JH6，H1＝6.37Hz，1H，H-6)，4.2-4.3ppm(m，2H，H-5和CH3CHO重疊). 實(shí)施例118 (4R，5S，6S)-3-〔(2-N-亞胺甲基氨基乙基)硫基〕-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
用1M NaOH將(4R，5S，6S)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.460g，1.29mmol)在冷水(25ml)中的懸浮液調(diào)至pH8.5，然后在0-5℃，用10分鐘時(shí)間分小批量加入甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(0.78g，4.52mmol)處理上述懸浮液。在整個(gè)加料期和其后的25分鐘內(nèi)，用1M NaOH將pH維持在8-8.5。然后加入20ml 0.2M pH6磷酸鹽緩沖液，用乙酸乙酯(20ml)洗滌該反應(yīng)混合物。將水相置于減壓條件下以除去痕量的有機(jī)溶劑，然后在反相硅膠(μBondapak C18，2.5×11cm)上層析。用梯度為0-15%乙腈在0.01M磷酸鹽緩沖液中的溶液洗脫。合并UV活性級分，減壓(T＜20℃)濃縮，在相同的柱上用水代替緩沖液作為洗脫劑脫鹽。將合適的級分冷凍干燥，得到0.240g(48%)白色非晶形粉末狀標(biāo)題化合物〔α〕22D+16.0°(c1.0，H2O); 純度(HPLC)99.4%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用20%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為0.8ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為6.06分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(9，768); IR(KBr)νmax2100(N3)，1955(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1715(亞胺甲基的CN)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.0(m，4H，丁基的CH2-1和2)，2.8-3.3(m，2H，SCH2)，3.3-3.8(m，6H，H-6，H-4，CH2N3和CH2NH)，4.2-4.4(m，2H，H-5和CH3CHO重疊)，7.76和7.83ppm(2S，1H，NHCH＝NH). 實(shí)施例119 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-N-亞胺甲基氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(2-N-亞胺甲基氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.180g，0.47mmol)在冷水(70ml)中的溶液，在0-5℃，45psi氫氣壓下，用1.2g5%Pd/氧化鋁氫化1小時(shí)。然后加入乙酸(0.045ml，0.79mmol)，在硅藻土墊上濾除催化劑。然后在反相硅膠(μBondapak C18，3×10cm)上層析濾液，用0.005M乙酸作為洗脫劑。將UV活性級分冷凍干燥，得到0.136g(69%)白色非晶形固體狀標(biāo)題化合物〔α〕22D+17.5°(c1.0，H2O); 純度(HPLC)94%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為7.57分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax300nm(6，900); IR(KBr)νmax1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1720(亞胺甲基的CN)和1570cm-1(寬，羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.36Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，1.92(s，3H，CH3CO2H)，3.04(t，J＝7.0Hz，2H，CH2NH2)，3.42(dd，JH6，H5＝2.64Hz，JH6，H1＝6.31Hz，1H，H-6)，2.8-3.7(m，5H，SCH2，CH2NHCH＝NH和H-4)，4.26(dd，與CH3CHO重疊，JH5，H6＝2.64Hz，1H，H-5)，4.28(m，1H，CH3CHO)，7.74和7.83ppm(2S，1H，NHCH＝NH). 實(shí)施例120 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
A.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-三乙基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-甲醇浴冷卻下，用氯磷酸二苯酯(0.6ml，3.0mmol)緩慢處理(2R，4R，5R，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯〔由(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-疊氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(1.0g，2.75mmol)制備〕溶液，然后滴加二異丙基乙胺(0.52ml，3.0mmol)。將該混合物攪拌1小時(shí)，隨后加入氯化三乙基甲硅烷(0.5ml，3mmol)和二異丙基乙胺(0.52ml，3.0mmol)。將該混合物在-15℃攪拌30分鐘，然后用在CH3CN(0.5ml)中的2-巰基乙醇(430mg，5.5mmol)和二異丙基乙胺(0.95ml，5.5mmol)處理所得甲硅烷基化的烯醇磷酸酯。將該混合物在5-8℃(冷室)下攪拌19小時(shí)，用乙酸乙酯(50ml)稀釋，用冰冷的水(2×20ml)，1M NaHSO3水溶液(3×20ml)，水(20ml)，1N HCl水溶液(20ml)，水(2×20ml)，1M NaHCO3水溶液(20ml)，水(20ml)和鹽水(20ml)洗滌，干燥(MgSO4)。使殘留物通過閃式硅膠柱(50g，0-50%乙酸乙酯/己烷)，得到油狀標(biāo)題化合物(883mg，63%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600(OH)，2100(N3)，1775(C＝Oβ-內(nèi)酰胺)和1710cm-1(C＝O酯); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.05-5.8(1H，m，乙烯基H)，5.49-5.2(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.6(2H，m，烯丙基CH2)，4.30-4.16(1H，m，H-1′)，4.145(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.6Hz，H-5)，3.803(2H，t，J＝5.9Hz，CH2O，3.40-3.28(2H，m，CH2N3)，3.24-3.28(1H，m，H-1′)，3.192(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝7.5Hz，H-6)，3.15-2.87(2H，m，SCH2)，1.89-1.75(1H，m，部分 CH2-4)，1.7-1.45(3H，m，CH2-CH2at4)，1.552(1H，bs，OH)，1.316(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.998，0.957和0.920(9H，3 線，CH3)，0.662，0.659，0.623，0.584，0.546和0.539ppm(6H，6 線，CH2). B.(4R，5S，6S)-3-〔2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-三乙基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-三乙基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(883mg，1.73mmol)溶解在二氯甲烷(20ml)中，在干冰-丙酮浴冷卻下，先用二異丙基乙胺(0.80ml，4.5mmol)處理上述溶液，然后滴加三氟甲磺酸酐(0.35ml，2.1mmol)。將該混合物攪拌20分鐘，并向其中加入在二氯甲烷(1ml)中的吡咯烷(0.90ml，10.4mmol)。在-78℃(干冰-丙酮)下繼續(xù)攪拌30分鐘，然后在-15℃(冰-甲醇浴)攪拌30分鐘。用乙酸乙酯(100ml)和石油醚(20ml)稀釋該反應(yīng)混合物，依次用冰冷的水(10×25ml)和鹽水(25ml)洗滌，干燥(MgSO4)，并將蒸除溶劑后的殘留物通過閃式硅膠墊(45g，33→100%乙酸乙酯/己烷，10→40%丙酮/乙酸乙酯)得到油狀標(biāo)題化合物(510mg，52%)。
IR(CH2Cl2)νmax2100(N3)，1775(C＝O β-內(nèi)酰胺)和1710cm-1(C＝O 酯); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-5.9(1H，m，乙烯基 H)，5.49-5.21(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.6(2H，m，烯丙基CH2)，4.30-4.14(1H，m，H-1′)，4.121(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.6Hz，H-5)，3.4-3.30(2H，m，CH2N3)，3.23-3.14(1H，m，H-4)，3.169(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝7.6Hz，H-6)，2.98-2.88，2.75-2.63(2H，2組m，SCH2)，2.63-2.45(6H，m，CH2N)，1.9-1.5(8H，m，CH2CH2-4和CH2CH2吡咯烷)，1.317(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.0993，0.952，0.916(9H，3 線，CH3)，0.697，0.658，0.655，0.619，0.579，0.542和0.535ppm(6H，7 線，SiCH2). C.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-6-〔(1′R)-1′-三乙基硅乙基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(500mg，0.77mmol)溶解在無水四氫呋喃(5ml)中，在冰-甲醇冷卻下，先用冰乙酸(0.290ml，5.28mmol)處理該溶液，然后滴加1M氟化四丁銨在四氫呋喃中的溶液(2.64ml，2.64mmol)。將該混合物在-20℃放置20小時(shí)，然后用乙酸乙酯(25ml)稀釋，用冰冷的1M NaHCO3水溶液(3×10ml)和鹽水(10ml)洗滌，干燥(MgSO4)。將蒸除溶劑后所得的殘留物(370mg，94%)直接用于下一步反應(yīng)。
IR(CH2Cl2)νmax3600(OH)，2100(N3)，1775(C＝Oβ-內(nèi)酰胺)和1710cm-1(C＝O 酯); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.04-5.90(1H，m，乙烯基 H)，5.49-5.22(2H，m，乙烯基 H)，4.82-4.62(2H，m，烯丙基 H)，4.27-4.18(1H，m，H-1′)，4.217(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.7Hz，H-5)，3.45-3.25(3H，m，CH2N3和H-4)，3.233(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.6Hz，H-6)，2.99-2.82，2.76-2.65(2H，2組m，SCH2)，2.65-2.4(6H，m，CH2N)，1.95-1.50(9H，m，CH2CH2-4，OH和CH2CH2吡咯烷)和1.388ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). D.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
先用Pd(PPh3)4處理(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(360mg，0.80mmol)在二氯甲烷(20ml)中的冷卻(冰浴)溶液，然后滴加N-甲基苯胺(0.17ml，1.6mmol)。將該混合物攪拌15分鐘，然后加入0.1M pH7.0磷酸鹽緩沖水溶液(50ml，5mmol)和乙醚(50ml)。再次用0.1M pH7.0緩沖液(2×15ml)和水(15ml)提取有機(jī)相。合并水提取液，用乙醚(2×25ml)洗滌，使之通過μBondapak C18反相柱(50g，0→30%CH3CN/H2O)，經(jīng)冷凍干燥后，得到粉末狀標(biāo)題化合物(200mg，58%)。
純度(HPLC)99.9%(保留時(shí)間為7.751分鐘，μBondapak C18，10μ，15%CH3CN/KH2PO4，0.01M，pH7.4); UV(水)λmax296(7170); IR(液體石蠟)νmax3500-3100(OH)，2100(N3)，1755(C＝Oβ-內(nèi)酰胺)和1600cm-1(C＝O 羧酸根); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.35-4.20(1H，m，H-1′)，4.263(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.4Hz，H-5)，3.475(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.1Hz，H-6)，3.46-3.39(2H，m，CH2N)，3.10-2.9(1H，m，1H of SCH2)，2.10-1.85(5H，m，CH2CH2吡咯烷和1H of CH2-4)，1.80-1.45(3H，m，CH2CH2-4)和1.331ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). E.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(150mg，0.34mmol)溶解在水(30ml)中，在冰浴冷卻下，在45-50psi氫氣壓下，在帕爾氫化器中，用5%Pd/氧化鋁(750mg)為催化劑，將上述溶液振蕩1小時(shí)。除去催化劑，用水(2×25ml)洗滌，用1M乙酸水溶液將該溶液(pH9.5)調(diào)至pH4.6。使該水溶液通過μBondapak C18反相柱兩次(45g和35g，0.005M乙酸水溶液，1%→2%CH3CN/0.005乙酸水溶液)，冷凍干燥后，得到淡黃色粉末狀標(biāo)題化合物(138mg，67%)。
純度(HPLC)99.5%(保留時(shí)間為7.338分鐘，μBondapak C18，10μ，10%CH3CN/KH2PO4，0.01M，pH7.4); UV(H2O)λmax296(8426); IR(液體石蠟)νmax3500-3100(OH，NH2)，1755(C＝Oβ-內(nèi)酰胺)和1590cm-1(C＝O 羧酸根); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.33-4.20(2H，m，H-1′和H-5)，3.412(1H，dd，J＝2.6 Hz，J＝6.4Hz，H-6)，3.5-3.1(1H，m，CH2N，H-4，SCH2的1H)，3.09，3.051，3.016(2H，3 線，CH2N)，3.10-2.95(1H，m，SCH2的1H)，2.09(4H，bs，CH2CH2吡咯烷)，1.92(2H，s，CH3CO2)，2.0-1.45(4H，m，CH2CH2-4)和1.331ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例121 (4R，5S，6S)-4-(4″-氨基戊基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.7-疊氮基庚酸 將7-溴庚酸(50.0g，0.24mmol)加到氫氧化鈉(9.6g，0.24mmol)在75ml水中的溶液中。然后加入疊氮化鈉(20.9g，0.32mmol)，將所得混合物加熱回流17小時(shí)。然后將該溶液冷卻至0-5℃，用2N硫酸酸化至pH2.0，用乙醚(3×200ml)提取。合并有機(jī)提取液，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，減壓蒸發(fā)，得到40.9g(100%)油狀標(biāo)題酸。1H NMR表明該粗產(chǎn)物含有6%(摩爾)起始物溴代酸，該粗產(chǎn)物直接用于制備酰氯。
IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)和1710cm-1(酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.3-1.8(m，8H，CH2-3，4，5和6)，2.36(t，J＝7.35Hz，2H，CH2-2)和3.26ppm(t，J＝6.77Hz，2H，CH2-7). B.7-疊氮基庚酰氯 在22℃下，用10分鐘時(shí)間滴加草酰氯(22.0ml，0.25mol)處理得自步驟A的7-疊氮基庚酸(40.9g，0.24mol)在無水二氯甲烷(200ml)中的溶液。1小時(shí)后，加入兩滴N，N-二甲基甲酰胺，將該混合物再攪拌1小時(shí)，減壓下蒸發(fā)溶劑，得到油狀酰氯粗品，后者直接用于下一步反應(yīng) IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)和1800cm-1(酰氯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.3-1.9(m，8H，CH2-3，4，5和6)，2.9(t，J＝7.18Hz，2H，CH2-2)和3.27ppm(t，J＝6.7Hz，2H，CH2-7). C.7-疊氮基硫羥己酸2-吡啶甲基酯
將2-吡啶甲硫醇(30.0g，0.24mol)溶解在無水二氯甲烷(400ml)中，在0-5℃，氬氣氛下，用吡啶(21.0ml，0.26mol)處理上述溶液，然后用10分鐘時(shí)間滴加7-疊氮基庚酰氯(45.5g，0.24mol)在二氯甲烷(100ml)中的溶液。30分鐘后，用冷的飽和NaHCO3和鹽水洗滌反應(yīng)混合物，干燥(MgSO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑，得到透明油狀的硫酯粗品。在硅膠墊(9×11cm)上過濾，用甲苯/乙酸乙酯混合物(8∶2)洗脫，得到透明油狀標(biāo)題硫酯(60.3g，90%) IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)和1690cm-1(硫酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.2-1.8(m，8H，CH2-3，4，5和6)，2.59(t，J＝7.4Hz，2H，CH2-2)，3.24(t，J＝6.79Hz，2H，CH2-7)，4.25(s，2H，SCH2)，7.15(m，1H，吡啶的H-5)，7.33(d，J＝7.8Hz，1H，吡啶的H-3)，7.62(m，1H，吡啶的H-4)和8.53ppm(m，1H，吡啶的H-6). D.7-疊氮基硫羥庚酸2-吡啶甲基酯的O-叔丁基二甲基硅基烯醇醚
將7-疊氮基硫羥庚酸2-吡啶甲基酯(60.0g，0.215mol)在無水二氯甲烷(250ml)中的溶液冷卻至-10℃，并用三乙胺(60.0ml，0.43mmol)處理之。然后用40分鐘時(shí)間滴加74ml(0.32mol)三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯。使混合物的溫度升至20℃，并將該溶液攪拌3小時(shí)。然后用己烷類(600ml)稀釋反應(yīng)混合物，依次用冷水(3×)，飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到暗色油狀甲硅烷基烯醇醚粗品，后者直接用于下一步反應(yīng)。1H NMR表明它是E和Z異構(gòu)體的1∶1混合物 IR(NaCl，壓片)νmax2100cm-1(N3); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.2和0.23(2 x s，6H，SiCH3)，0.96和0.98(2 x s，9H，Sit-Bu)，1.2-2.1(m，CH2-4，5和6)，3.2(m，4H，CH2-3和7)，3.95和4.03(2 x s，2H，SCH2)，4.84和4.99(2 x t，J＝7.22Hz和J＝7.6Hz，1H，CH-2)，7.14(m，1H，吡啶的H-5)，7.28(m，1H，吡啶的H-3)，7.61(m，1H，吡啶的H-4)和8.53ppm(m，1H，吡啶的H-6). E.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-6″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-6″-疊氮基己基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
將新熔融過的氯化鋅(38g，0.28mol)在無水二氯甲烷(600ml)中的懸浮液冷卻至0-5℃，加入60.0g(0.208mmol)(3S，4R)-4-乙酰氧基-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮，然后加入7-疊氮基硫羥庚酸2-吡啶甲基酯的O-叔丁基二甲基硅基烯醇醚粗品(0.215mol)在二氯甲烷(125ml)中的溶液。然后將該混合物在22℃攪拌18小時(shí)。依次用水，飽和氯化銨，飽和NaHCO3和鹽水洗滌該混合物，干燥(MgSO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑，得到131g暗色油狀硫酯粗品，后者直接用于下一步反應(yīng)。1H NMR和HPLC分析該混合物表明它是己基1-位差向異構(gòu)體(85∶15)的混合物(異構(gòu)體比例為β∶α85∶15)。取一部分(4g)在硅膠(4×20cm，甲苯-乙酸乙酯1∶1洗脫)層析，得到油狀標(biāo)題化合物純品，跟隨其后的是β和α差向異構(gòu)體的混合級分(0.25g)。純的β差向異構(gòu)體具有下述特征常數(shù) IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)，1761(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1685cm-1(硫酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.04(s，6H，SiCH3)，0.85(s，9H，Si t-Bu)，0.99(d，J＝6.32Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.9(m，8H，己基的CH2-2，3，4和5)，2.9(m，1H，己基的H-1)，3.03(m，1H，H-3)，3.22(t，J＝6.73Hz，2H，CH2N3)，3.79(dd，JH4，H3＝2.07Hz，JH4，H1＝7.01Hz，1H，H-4)，4.14(qd，JH，CH3＝6.32Hz，JH，H3＝3.60Hz，1H，CH3CHO)，5.86(寬 s，1H，NH)，7.18(m，1H，吡啶的H-5)，7.32(d，J＝7.8Hz，1H，吡啶的H-3)，7.63(m，1H，吡啶的H-4)和8.54ppm(m，1H，H 吡啶的H-6). F.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-6″-疊氮基己基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
將得自步驟E的硫酯粗品(～0.2mmol)在四氫呋喃(700ml)中的溶液冷卻至0-5℃，用150ml(1.74mol)30%過氧化氫滴加處理(滴加時(shí)間為15分鐘)。然后用1小時(shí)時(shí)間滴加700ml 1N NaOH(2.7mol)。使該混合物在18℃進(jìn)行反應(yīng)，并將該溶液再攪拌1小時(shí)。然后用己烷類(700ml)稀釋該混合物，收集水相，冷卻至0-5℃，用濃鹽酸酸化至pH2.0。然后用乙酸乙酯(500ml，200ml)提取該水溶液。合并有機(jī)相，依次用水，1M亞硫酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸除溶劑使之形成糊狀物，然后用己烷類(200ml)研制。濾出固體，得到16.1g(按乙酰氧基氮雜環(huán)丁酮計(jì)算收率為19%)白色固體狀標(biāo)題酸。1H NMR表明無任何α異構(gòu)體存在。用乙酸乙酯和己烷類混合物重結(jié)晶，得到白色片狀物，m.p.＝145-147℃(分解);〔α〕24D-7.1°(c1.0，CHCl3). IR(KBr)νmax2100(N3)和1715和1690(寬C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.06 and 0.07(2 x s，2 x 3H，SiCH3)，0.87(s，9H，Si t-Bu)，1.17(d，J＝6.31Hz，3H，CH3CHO)1.2-1.8(m，8H，己基的CH2-2，3，4和5)，2.65(m，1H，己基的H-1)，3.13(寬 dd，1H，H-3)，3.26(t，J＝6.7Hz，2H，CH2N3)，3.86(dd，JH4，H3＝1.98Hz，JH4，H1＝6.92Hz，1H，H-4)，4.20(dq，JH，CH3＝6.31Hz，JH，H3＝4.0Hz，1H，CH3CHO)，和6.34ppm(s，1H，NH). 分析計(jì)算值C18H34N4O4Si C 54.24，H 8.60，N 14.06; 實(shí)測值C 54.18，H 8.54，N 13.91. G.(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(5-疊氮基戊基)-3″-烯丙氧羰基)-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在22℃，氮?dú)夥障拢?，1-羰基二咪唑(6.7g，41.3mmol)處理(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-6″-疊氮基己基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(15.0g，37.6mmol)在無水乙腈(350ml)中的懸浮液。將所得混合物攪拌2小時(shí)，減壓下蒸發(fā)溶劑，得到油狀?；溥虼制? IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)，1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1735cm-1(酰基咪唑的C＝O). 然后將?；跓o水乙腈(50ml)中的咪唑粗品加到丙二酸單烯丙基酯鎂鹽(19.0g，61.2mmol)在苯(300ml)中的溶液中，并將所得混合物在65℃下加熱28小時(shí)。用乙酸乙酯(500ml)稀釋冷卻的反應(yīng)物，依次用水，冷的1N鹽酸，飽和NaHCO3和鹽水洗滌。用MgSO4干燥后，蒸發(fā)溶劑，得到油狀標(biāo)題化合物粗品(～20g)，后者直接用于下一步反應(yīng)。取一小部分在硅膠上層析(甲苯/乙酸乙酯8∶2洗脫)，得到油狀標(biāo)題化合物 IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)，1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1715，1650和1630cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)酮式和烯醇式的混合物，比例為1∶1;δ0.05和0.07(2s，6H，SiCH3)，0.87(s，9H，Si t-Bu)，1.1和1.17(2d，J＝6.31Hz，和J＝6.33Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.8(m，8H，戊基的CH2-1，2，3和4)，2.2(m，氧代丙基的H-1，烯醇式)，2.9-3.0(m，氧代丙基的H-3和H-1，酮式)，3.26(t，J＝6.7Hz，CH2N3)，3.54(s，氧代丙基的CH2-3，酮式)，3.8(m，1H，H-4)，4.2(m，1H，CH3CHO)，4.8(m，2H，烯丙基的CH2)，5.07(s，1H，氧代丙基的H-3，烯醇式)，5.2-5.4和5.9-6.1(2m，2H和1H，烯丙基的CH)和5.9ppm(寬 s，1H，NH). H.(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(5-疊氮基戊基)-3″-烯丙氧羰基-3″-重氮基-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
將(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(5-疊氮基戊基)-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮粗品(37.6mmol)溶解在乙腈(100ml)中，在0-5℃，先用對甲苯磺?；B氮(9.1g，46.1mmol)在乙腈(115ml)中的溶液處理，再用三乙胺(6.5ml，46.0mmol)處理上述溶液。然后將該反應(yīng)混合物在22℃攪拌30分鐘。減壓下蒸發(fā)溶劑，用乙醚和己烷類(1∶1)混合物研制殘留物。濾集對甲苯磺酰胺粗品。將濾液減壓濃縮，得到油狀標(biāo)題化合物。該產(chǎn)物直接用于下一步反應(yīng)。取一部分產(chǎn)物在硅膠上層析，用甲苯和乙酸乙酯的混合物(9∶1)洗脫，得到純的油狀標(biāo)題化合物 IR(NaCl，壓片)νmax2140(N2)，2100(N3)，1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1720和1650cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.05和0.06(2 x s，6H，SiCH3)，0.86(s，9H，Si t-Bu)，1.17(d，J＝6.3Hz，3H，CH3CHO)，1.2-2.0(m，8H，戊基的CH2-1，2，3和4)，3.03(寬 dd，1H，H-3)，3.24(t，J＝6.7Hz，2H，CH2N3)，3.84(dd，JH4，H3＝2.07Hz，JH4，H-1＝5.37Hz，1H，H-4)，4.1(m，1H，氧代丙基的H-1)，4.17(dq，JH，CH3＝6.3Hz，JH，H3＝3.86Hz，1H，CH3CHO)，4.72(m，2H，烯丙基的CH2)，5.3-5.4和5.9-6.1(2m，2H和1H，烯丙基的CH)和5.84ppm(寬 s，1H，NH). I.(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(5-疊氮基戊基)-3″-烯丙氧羰基-3″-重氮基-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在5℃下，用100ml 1N鹽酸水溶液處理(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(5-疊氮基戊基)-3″-烯丙氧羰基-3″-重氮基-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮粗品(37.6mmol)在乙醇(250ml)中的溶液。65小時(shí)后，用NaHCO3將該反應(yīng)混合物調(diào)至pH6，減壓下除去乙醇。用乙酸乙酯(500ml)稀釋殘留物，依次用水，0.2M pH7磷酸鹽緩沖液和鹽水洗滌有機(jī)相。干燥(MgSO4)后，減壓下蒸發(fā)溶劑，將殘留物在硅膠(9×12cm)上層析，用乙酸乙酯/甲苯(1∶1)至純乙酸乙酯進(jìn)行梯度洗脫。將合適的級分蒸發(fā)，得到8.95g(從羧酸起三步收率為61%)固體狀標(biāo)題氮雜環(huán)丁酮。用乙醚和己烷類混合物重結(jié)晶，得到白色棱晶體m.p.＝65-66℃;〔α〕22D-31.2°(c1.0，CHCl3)。
UV(EtOH)λmax260nm(8，440); IR(KBr)νmax2158(N2)，2100(N3)，1730和1712(β-內(nèi)酰胺和酯的C＝O)和1650cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.29(d，J＝6.3Hz，3H，CH3CHO)，1.2-1.9(m，8H，戊基的CH2-1，2，3和4)，2.31(d，J＝3.75Hz，1H，OH)，2.99(dd，JH3，H4＝2.0Hz，JH3，H1＝6.93Hz，1H，H-3)，3.25(t，J＝6.7Hz，2H，CH2N3)，3.82(dd，JH4，H3＝2.0Hz，JH4，H1＝6.63Hz，1H，H-4)，3.95(m，1H，疊氮基戊基的H-1)，4.11(m，1H，CH3CHO)，4.73(m，2H，烯丙基的CH2)，5.3-5.4和5.9-6.1(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH)和6.0ppm(b 寬 s，1H，NH). 分析計(jì)算值C17H24N6O5 C 52.09，H 6.16，N 21.42; 實(shí)測值C 51.85，H 6.04，N 21.33. J.(2R，4R，5R，6S)-4-(4″-疊氮基戊基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
在氬氣氛下，用辛酸銠(Ⅱ)二聚體(0.050g)處理(3S，4R)-4-〔(1″R)-1″-(5-疊氮基戊基)-3″-烯丙氧羰基-3″-重氮基-2″-氧代丙基〕-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(2.50g，6.37mmol)在無水苯(80ml)中的溶液，加熱回流(浴溫為95℃)20分鐘。然后減壓下蒸除溶劑，得到油狀標(biāo)題雙環(huán)化合物粗品，后者直接用于下一步反應(yīng) IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)，1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1745cm-1(sh，酮酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.4(d，J＝6.30Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.0(m，8H，戊基的CH2-1，2，3和4)，2.7(m，1H，H-4)，3.2-3.4(m，3H，H-6和CH2N3)，4.26(dd，JH5，H6＝2.32Hz，JH5，H4＝8.06Hz，1H，H-5)，4.28(m，1H，CH3CHO)，4.64(s，1H，H-2)，4.66(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.4和5.8-6.0ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). K.(4R，5S，6S)-4-(4″-疊氮基乙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(2R，4R，5R，6S)-4-(4″-疊氮基戊基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(6.37mmol)溶解在無水乙腈(40ml)中，在0-5℃，氬氣氛下，用10分鐘時(shí)間同時(shí)用氯磷酸二苯酯(1.45ml，7.0mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.22ml，7.0mmol)處理上述溶液。然后加入少許4-N，N-二甲氨基吡啶晶體，并將該混合物攪拌45分鐘。補(bǔ)加N，N-二異丙基乙胺(2.22ml，12.7mmol)，隨后加入在乙腈(3ml)中的β-巰基丙腈(1.11g，12.7mmol)，并將該混合物攪拌1小時(shí)。用乙酸乙酯稀釋該反應(yīng)混合物，依次用水，飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到一油狀物，后者在硅膠(5×10cm)上層析，用乙酸乙酯/甲苯(8∶2至7∶3)進(jìn)行梯度洗脫，得到2.52g(91%)透明油狀標(biāo)題化合物。
IR(NaCl，壓片)νmax2258(CN)，2100(N3)，1770(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.28Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，8H，戊基的CH2-1，2，3和4)，1.89(d，J＝4.6Hz，1H，OH)，2.7(～dt，，2H，CH2CN)，2.9-3.2(m，2H，SCH2)，3.19(dd，JH6，H5＝2.65Hz，JH6，H1＝7.34Hz，1H，H-6)，3.2(與H-6重疊，1H，H-4)，3.30(t，J＝6.5Hz，1H，CH2N3)，4.24(與H-5重疊，1H，CH3CHO)，4.26(dd，JH5，H6＝2.65Hz，JH5，H4＝9.52Hz，1H，H-5)，4.76(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). L.(4R，5S，6S)-4-(5″-氨基戊基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在22℃，于氬氣氛下，先用Pd(PPh3)4(0.13g)處理(4R，5S，6S)-4-(5″-疊氮基戊基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(2.52g，5.8mmol)在無水乙腈(125ml)中的溶液，然后加入12.8ml(6.4mmol)0.5M 2-乙基己酸鉀在乙酸乙酯中的溶液。45分鐘后，用水(125ml)提取該反應(yīng)混合物，將水相置于真空條件下以除去痕量的有機(jī)溶劑。然后在0-5℃，在45psi氫氣壓下，用4.0g5%Pd/氧化鋁將上述水溶液氫化1小時(shí)(開始pH為7，最后pH為11)。然后加入50ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液，濾出催化劑。減壓下將濾液濃縮至一半體積(T＜10℃)，然后在反相硅膠(μBondapak C18，3.5×14cm)上層析，用梯度為0-5%的乙腈水溶液為洗脫劑。將UV活性級分冷凍干燥，得到1.06g(49%)白色非晶形固體狀標(biāo)題卡巴潘尼姆(經(jīng)冷凍干燥后);〔α〕22D＝+52.1°(c1.0，H2O)。
純度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器306nm，保留時(shí)間。
UV(水，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(9，055); IR(KBr)νmax2255(CN)，1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，8H，戊基的CH2-1，2，3和4)，2.8-3.2(m，4H，SCH2CH2CN)，3.0(t，J＝7.4Hz，2H，CH2NH2)，3.36(與H-6重疊，1H，H-4)，3.38(dd，JH6，H5＝2.53Hz，JH6，H1＝6.30Hz，1H，H-6)，4.25(dd與CH3CHO重疊，JH5，H6＝2.53Hz，1H，H-5)和4.27ppm(m，1H，CH3CHO). 實(shí)施例122 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-4-(2″-氨基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-4-(2″-疊氮基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-4-(2″-疊氮基乙基)-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(0.47g，1.08mmol)溶解在CH3CN(10ml)中，冷卻(0℃)下，先用氯磷酸二苯酯(0.25ml，1.18mmol)處理上述溶液，然后再用N，N-二異丙基乙胺(0.21ml，1.18mmol)和4-N，N-二甲基氨基吡啶(2mg)處理之。將該混合物在氬氣氛下，在0℃攪拌2小時(shí)，然后再向該溶液通入氬氣15分鐘。先用在CH3CN(2ml)中的2-巰基乙醇(0.15ml，2.15mmol)處理烯醇磷酸酯，然后再用N，N-二異丙基乙胺(0.38ml，2.15mmol)處理，在0℃攪拌1小時(shí)，然后在冷卻(5℃)下放置16小時(shí)。用EtOAc(50ml)稀釋該反應(yīng)混合物，依次用冷水，1M NaHSO3，水，1N HCl，水，1M NaHCO2和鹽水洗滌。干燥(MgSO4)有機(jī)相，蒸除溶劑后，將所得糖漿狀物在用CH2Cl2填充的SiO2(3.5×11cm)上層析，用CH2Cl2和EtOAc的混合物(8∶2)進(jìn)行梯度洗脫，得到漿狀標(biāo)題化合物(0.35g，65.5%); 1H NMR(200MHz，CDCl37.24)δ0.06(s，6H，Si(CH3)2)，0.87(S，9H，SiC(CH3)3，1.35(d，3H，CH3，J＝6.3Hz，)，2.85-3.9(重疊，8H，CH2OH，CH2N3，H-4，H-6，SCH2)，4.22(中心 m，2H，H-5，H-1′)，4.6-4.9(m，2H，OCH2，烯丙基)，5.2-5.5(m，2H，＝CH2，烯丙基)，5.86-6.05(m 1H，CH＝烯丙基). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-4-(2″-疊氮基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-4-(2″-疊氮基乙基)〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙基酯(0.33g，0.66mmol)溶解在無水四氫呋喃(5ml)中，冷卻至0℃，在氬氣氛下，先用乙酸(0.23ml，4mmol)處理，然后加入1M氟化四丁銨在四氫呋喃中的溶液(1.99ml，1.99mmol)。將該混合物在0至5℃之間攪拌168小時(shí)，然后在0℃用1M NaHCO3溶液(4ml，4mmol)中和之。用EtOAc(3×50ml)提取該混合物，合并有機(jī)相，依次用冷的NaHCO3，水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，蒸除溶劑，得到一膠粘的泡沫狀物，后者在用CH2Cl2填充的SiO2(3.5×8cm)上層析，用CH2Cl2和EtOAc的混合物(0∶100)進(jìn)行梯度洗脫，得到泡沫狀標(biāo)題化合物(0.09g，35.4%); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.37(d，3H，CH3，J＝6.26Hz)，2.82-3.17(m，2H，SCH2)，3.15(m，1H，H-6)，3.34-3.64(重疊，3H，CH2N3，H-4)，3.82(t，2H，CH2OH，J＝5.43Hz)，4.22(m，1H，H-1′)，4.22(dd，1H，H-5，J4，5＝9.64Hz，J5，6＝2.78Hz)，4.62-4.87(m，2H，OCH2，烯丙基)，5.21-5.49(m，2H，＝CH2烯丙基)，5.86-6.05(m，1H，CH＝，烯丙基). C.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-4-(2″-氨基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在氬氣氛下，將Pd(PPh3)4(0.04g，0.035mmol)加到冷卻至0℃的(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-4-(2″-疊氮基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.09g，0.24mmol)在CH2Cl2(10ml)中的溶液中，然后加入0.5M2-乙基己酸鈉在EtOAc中的溶液(0.52ml，0.26mmol)。將該混合物在0℃攪拌1小時(shí)，加入乙醚(50ml)，用水(3×25ml)提取。合并水提取液，加入0.05M pH7.0磷酸鹽緩沖液(10ml)。在0℃，40psi氫氣壓下，用0.3g5%鈀/氧化鋁將上述溶液氫化2小時(shí)。濾出催化劑，用水洗滌，合并濾液，并使之通過μBondapak C18反相SiO2柱(3.5×9cm)。將相應(yīng)于產(chǎn)物的級分冷凍干燥，得到一固體，后者再次在μBondapak C18反相SiO2柱(3.5×9cm)上層析。用水洗脫化合物，冷凍干燥后，得到一淡黃色蓬松固體(0.021g，28.2%)。
純度(HPLC)93.9%(在μBondapak C18柱上(4mm×30cm)在302nm處UV檢測;pH6.8磷酸鹽緩沖液;流速為1ml/分，保留時(shí)間為3.89分鐘); UV λmax302nm. IR(液體石蠟)νmax1750cm-1(β-內(nèi)酰胺的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，3H，CH3，J＝6.37Hz)，1.82-1.98;2.1-2.27(m，2H，CH2)，2.79-3.23(重疊，4H，CH2NH2，SCH2)，3.44(中心 m，2H，H-4，H-6)，3.76(m，2H，CH2OH，J＝6.24Hz)，4.26(dd，1H，H-5，J4，5＝9.14Hz，J5，6＝2.56Hz)，4.28(m，1H，H-1′). 實(shí)施例123 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(1-N-甲基吡啶鎓)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鹽
將(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(1-吡咯烷基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.150g，0.39mmol)〔按實(shí)施例63制備〕溶解在水(8ml)，乙腈(4ml)和二噁烷(5ml)的混合物中，在0-5℃，用1N NaOH將其調(diào)至pH9.5。然后立即一次加入硫酸二甲酯(0.22ml)，將pH在9-9.5維持35分鐘。然后加入20ml 0.2M pH6.0磷酸鹽緩沖液，并將該溶液置于減壓條件下以除去有機(jī)溶劑。水相在反相硅膠(μBondapak C18，2.5×13cm)上層析兩次，用梯度為0-5%乙腈水溶液為洗脫劑。將UV活性級分冷凍干燥，得到0.056g(36%)白色非晶形固體狀標(biāo)題吡咯鎓鹽化合物〔α〕22D＝+57.0°(c1.0，H2O); 純度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為6.24分鐘); UV(水，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax298nm(6，660); IR(KBr)νmax2250(CN)，1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1600cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.34(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，2.0-2.4(m，6H，乙基的CH2-1和吡咯烷的CH2-3，3′)，2.8-3.2(m，4H，SCH2CH2CN)，3.11(s，3H，NCH3)，3.4-3.7(m，8H，H-4，H-6，乙基的CH2-2和吡咯烷的CH2-2，2′)，4.28(m，1H，CH3CHO)和4.31ppm(dd，JH5，H6＝3.01Hz，JH5，H4＝9.0Hz，1H，H-5). 實(shí)施例124 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-〔N，N-(2-氰基乙基)甲氨基〕乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-〔N，N-(2-氰基乙基)甲氨基〕乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-羥基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(400mg，0.830mmol)溶解在二氯甲烷(10ml)中，在干冰-丙酮冷卻下，先用N，N-二異丙基乙胺(0.380ml，2.16mmol)處理上述溶液，然后滴加三氟甲磺酸酐(0.17ml，1.0mmol)。將該混合物攪拌25分鐘，用在二氯甲烷(0.5ml)中的N-甲基-β-氨基丙腈(0.23ml，2.5mmol)處理，然后在-15℃(用冰-甲醇浴代替干冰浴)攪拌3小時(shí)。將該混合物在冷室(5℃)放置18小時(shí)，然后用乙酸乙酯(20ml)稀釋，依次用冰冷的1M NaHCO3水溶液(5ml)，冰冷的水(5ml)和鹽水(5ml)洗滌，干燥(MgSO4)。使殘留物通過閃式硅膠墊(15g，30→80%乙酸乙酯/己烷)，得到淡黃色油狀標(biāo)題化合物(315mg，69%)。
IR(CH2CL2)νmax2250(CN)，1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1715cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-5.86(1H，m，乙烯基 H)，5.486-5.224(2H，m，乙烯基 H)，4.851-4.666(2H，m，烯丙基 CH2)，4.29-4.18(1H，m，H-1′)，4.197，4.184(d，J＝2.6Hz，部分 H-5)，3.541-3.450(1H，m，H-4)，3.380-3.242，3.069-2.929(2H，2組m，SCH2)，3.110(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝7.0Hz，H-6)，2.807-2.315(8H，m，CH2N和CH2CN)，2.315(3H，s，NCH3)，2.04-1.87，1.70-1.55(2H，2組m，CH2-4)，1.30(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.895(9H，s，叔丁基)和0.096ppm(6H，s，二甲基). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-〔N，N-(2-氰基乙基)甲氨基〕乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-〔N，N-(2-氰基乙基)甲氨基〕乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(305mg，0.560mmol)溶解在四氫呋喃(5ml)中，在冰-甲醇浴冷卻下，用冰乙酸(0.18ml，3.4mmol)處理，然后滴加1M氟化四丁銨在四氫呋喃中的溶液(1.68ml，1.68mmol)。將該混合物在冷室中放置8天，然后用乙酸乙酯(25ml)稀釋，依次用冰冷的1M NaHCO3水溶液(3×5ml)，水(2×5ml)和鹽水(5ml)洗滌，干燥(MgSO4)。使殘留物通過閃式硅膠墊(6g，40%→100%乙酸乙酯/己烷，1/1乙酸乙酯/丙酮)，得到油狀標(biāo)題化合物(195mg，80%); IR(CH2Cl2)νmax3600，3500(OH)，2250(CN)，1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.04-5.85(1H，m，乙烯基 H)，5.494-5.238(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.70(2H，m，烯丙基 H)，4.282(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.6Hz，H-5)，4.29-4.13(1H，m，H-1′)，3.80-3.70(1H，m，H-4)，3.35-3.20，3.05-2.90(2H，2組m，SCH2)，3.152(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝8.8Hz，H-6)，2.8-2.6(4H，m，CH2CN)，2.6-2.45(2H，m，CH2N)，2.1-1.9，1.7-1.5(2H，2組m，CH2-4)，1.60(1H，bs，OH)和1.404ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-〔N，N-(2-氰基乙基)甲氨基〕乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下，先用Pd(PPh3)4(42mg，0.034mmol)處理(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-〔N，N-(2-氰基乙基)甲氨基〕乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(195mg，0.45mmol)在二氯甲烷(12ml)中的溶液，然后滴加0.5M2-乙基己酸鉀在乙酸乙酯中的溶液(0.90ml，0.45mmol)。將該混合物攪拌30分鐘，用乙醚稀釋，用0.04M磷酸鹽緩沖液(3×15ml)和水(2×15ml)提取。合并水提取液，用乙醚(2×10ml)洗滌，使之通過μBondapak C18反相柱(150g，0→3%CH3CN/H2O)，冷凍干燥后，得到粉末狀標(biāo)題化合物(127mg，72%); 純度經(jīng)HPLC測定為99.2%(保留時(shí)間7.89分鐘，μBondapak C18，10μ，5%CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4); UV(H2O)λmax300(7887); IR(液體石蠟)νmax3600-3100(OH)，2250(CN)，1745(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1595cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.35-3.25(2H，m，H-1′ and H-5)，3.404(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝6.3Hz，H-6)，3.42-3.30(1H，m，H-4)，3.25-3.1，3.03-2.9(2H，2組m，SCH2)，2.87-2.81(4H，m，CH2N)，2.75-2.65，2.62-2.54(4H，2組3線，CH2CN)，2.328(3H，s，N-CH3)，2.15-1.95，1.8-1.6(2H，2組m，CH2-4)和1.341ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 實(shí)施例125 (4R，5S，6S)-4-〔2″-(1-N-氮雜環(huán)烷基)乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(2R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯〔27.2mmol，將15.08g，27.2mmol重氮基前體環(huán)化制得〕溶解在無水乙腈(200ml)中，在0-5℃，氮?dú)夥障?，?分鐘時(shí)間同時(shí)加入氯磷酸二苯酯(6.3ml，30.4mmol)和N，N-二異丙基乙胺(5.0ml，28.7mmol)處理上述溶液。然后加入少許4-N，N-二甲氨基吡啶晶體，并將該混合物攪拌1小時(shí)。再滴加N，N-二異丙基乙胺(9.5ml，54.5mmol)，然后滴加在乙腈(10ml)中的β-巰基丙腈(4.6g，53.8mmol)，將所得混合物攪拌30分鐘。
然后用乙酸乙酯(1升)稀釋反應(yīng)混合物，依次用冷水，飽和NaHCO3，0.2M pH7.0磷酸鹽緩沖液和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸除溶劑，將殘留物在硅膠(7.5×11cm)上層析，用梯度為0-5%乙酸乙酯甲苯溶液洗脫。蒸發(fā)UV活性級分，得到11.19g(69%)油狀標(biāo)題物質(zhì)，后者經(jīng)放置固化。用己烷類重結(jié)晶，得到長的針狀結(jié)晶的標(biāo)題化合物m.p.＝95℃;〔α〕22D＝+48.9°(c1.0，CHCl3); UV(EtOH)λmax318nm(11，930); IR(KBr)νmax1770(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1700cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.08和0.09(2s，3H和9H，SiCH3)，0.89和0.91(2s，2 x 9H，Si-tBu)，1.27(d，J＝6.15Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.1(m，2H，CH2-4)，2.67(～t，2H，Ch2CN)，2.9-3.1和3.2-3.4(2m，2H，SCH2)，3.10(dd，JH6，H5＝2.52Hz，JH6，H1＝6.26Hz，1H，H-6)，3.45-3.65和3.75-3.9(2m，2H和1H，H-4和CH2OSi)，4.21(dd與CH3CHO重疊，JH5，H6＝2.52Hz，1H，H-5)，4.24(m，1H，CH3CHO)，4.74(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2m，2H和1H烯丙基的CH). 分析計(jì)算值C29H50N2O5SSi2 C 58.55，H 8.47，N 4.71，S 5.39; 實(shí)測值C 58.45，H 8.37，N 4.73，S 5.24. B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-羥基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(11.19g，18.8mmol)溶解在四氫呋喃(250ml)中，在0-5℃，在氮?dú)夥障?，先用乙?6.5ml，0.113mol)，再用56ml(56.0mmol)1.0M氟化四丁銨在四氫呋喃中的溶液處理上述溶液。然后將該溶液在10℃放置18小時(shí)。用乙酸乙酯(1升)稀釋該反應(yīng)混合物，用冷的飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸除溶劑，得到一油狀物，后者在硅膠(7.5×12cm)上層析，用乙酸乙酯/甲苯(3∶7至1∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到6.80g(75%)粘稠玻璃狀標(biāo)題化合物 IR(NaCl，壓片)νmax3500(OH)，2260(CN)，1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.09(s，6H，SiCH3)，0.89(s，9H，Si-tBu)，1.29(d，J＝6.13Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.1(m，2H，CH2-4)，2.70(～t，2H，CH2CN)，2.95-3.1和3.2-3.4(2m，2H，SCH2)，3.18(dd，JH6，H5＝2.63Hz，JH6，H1＝7.02Hz，1H，H-6)，3.54(寬 t，1H，H-4)，3.6-4.0(m，2H，CH2OH)，4.15-4.3(m，2H，H-5和CH3CHO重疊)，4.75(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2m，2H和1H，烯丙基的CH). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-(1-N-氮雜環(huán)丁烷基)乙基〕-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-羥基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.07g，2.22mmol)在無水二氯甲烷(18ml)中的溶液冷卻至-78℃，在氮?dú)夥障?，先用N，N-二異丙基乙胺(0.57ml，3.27mmol)處理，再用5分鐘時(shí)間用三氟甲磺酸酐(0.39ml，2.31mmol)滴加處理。在-78℃反應(yīng)30分鐘后，補(bǔ)加N，N-二異丙基乙胺(0.57ml，3.27mmol)，然后用5分鐘時(shí)間滴加氮雜環(huán)丁烷(0.18ml，2.67mmol)。將該反應(yīng)混合物在-78℃攪拌30分鐘，然后用30分鐘時(shí)間慢慢地溫?zé)嶂?20℃，并在該溫度攪拌1小時(shí)。繼之，加入冷的乙酸乙酯(200ml)和水(20ml)的混合物使該反應(yīng)混合物驟冷。用鹽水(2×20ml)洗滌有機(jī)相，干燥(MgSO4)，減壓下蒸發(fā)。將殘留物在硅膠(3.5×12cm)上層析，用丙酮作為洗脫劑。蒸發(fā)UV活性級分，得到0.639g(55%)油狀標(biāo)題化合物。經(jīng)TLC和1H NMR測定，該物質(zhì)含有25%氮雜環(huán)丁烷使β-內(nèi)酰胺開環(huán)而產(chǎn)生的產(chǎn)物。
IR(NaCl，壓片)νmax2255(CN)，1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1712(酯的C＝O)，和1645(開環(huán)產(chǎn)物的酰胺); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.08(s，6H，SiCH3)，0.88(s，9H，Si-tBu)，1.29(d，J＝6.13Hz，3H，CH3CHO)，1.4-1.8(m，2H，CH2-4)，2.07(m，2H氮雜環(huán)丁烷的CH2-3)，2.69(～t，2H，CH2CN)，2.9-3.5(寬 m，10H，氮雜環(huán)丁烷的CH2-2和4，乙基的CH2-2，H-4和H-6和SCH2)，4.15(dd，JH5，H6＝2.55Hz，JH5，H4＝9.45Hz，1H，H-5)，4.17(m，1H，CH3CHO)，4.73(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2m，2H和1H，烯丙基的CH). D.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(1-N-氮雜環(huán)丁烷基)乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔2″-(1-N-氮雜環(huán)丁烷基)乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.639g，1.23mmol)在無水四氫呋喃(8ml)中的溶液冷卻到-15℃，在氮?dú)夥障?，先用乙?0.42ml，3.7mmol)，再用3.7ml(3.7mmol)1M氟化四丁銨在四氫呋喃中的溶液處理上述溶液。然后將該溶液在0℃攪拌140小時(shí)。繼之加入1.2g NaHCO3固體粉末，將該混合物攪拌10分鐘。然后將有機(jī)相在硅膠(3.5×3.5cm)上層析，用丙酮和二甲基甲酰胺的混合物(9∶1)作為洗脫劑。將合適的級分蒸發(fā)，得到0.39g(78%)油狀標(biāo)題物質(zhì)。經(jīng)1H NMR測定，該物質(zhì)的純度約為50%，含有一些N，N-二甲基甲酰胺和一部分四丁銨鹽。該產(chǎn)物直接用于下一步反應(yīng)。
IR(NaCl，壓片)νmax2250(CN)，1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.39(d，J＝6.31Hz，3H，CH3CHO)，1.7(m，2H，CH2-4)，2.27(m，2H，氮雜環(huán)丁烷的CH2-3)，2.67(～t，2H，CH2CN)，2.9-3.2(m，2H，SCH2)，3.2-3.4(m，4H，H-4，H-6和乙基的CH2-2)，3.58(t，J＝7.6Hz，氮雜環(huán)丁烷的CH2-2和4)，4.10(dq，JH，CH3＝6.31Hz，JH，H6＝8.86Hz，1H，CH3CHO)，4.28(dd，JH5，H6＝3.12Hz，JH5，H4＝10.26Hz，1H，H-5)，4.75(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2m，2H和1H，烯丙基的CH). E.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(1-N-氮雜環(huán)丁烷基)乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(1-N-氮雜環(huán)丁烷基)乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯粗品(0.39g，0.96mmol)溶解在乙酸乙酯(15ml)中，在22℃，于氮?dú)夥障?，用Pd(PPh3)4(0.050g)和3ml(1.5mmol)0.5M2-乙基己酸鉀在乙酸乙酯中的溶液處理上述溶液。30分鐘后，用水(30ml和20ml)提取該反應(yīng)混合物，合并提取液，并將其置于減壓條件下以除去痕量的有機(jī)溶劑。然后加入8ml 0.2M pH6的磷酸鹽緩沖液，并將該溶液在反相硅膠(μBondapak C18，3×13cm)上層析，用梯度為0-5%的乙腈水溶液作為洗脫劑。合并UV活性的級分，冷凍干燥，再次在相同的柱上層析。最后冷凍干燥后，得到0.065g(19%)白色非晶形粉末狀標(biāo)題卡巴潘尼姆 純度(HPLC)99.4%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為6.41分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax298nm(8，422); IR(KBr)νmax2250(CN)，1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1600cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.38Hz，3H，CH3CHO)，1.7-2.2(m，2H，CH2-4)，2.52(m，2H，氮雜環(huán)丁烷的CH2-3)，2.85(m，2H，CH2CN)，2.85-3.2(m，2H，SCH2)，3.2-3.5(m，3H，乙基的CH2-2和H-4)，3.41(dd與乙基的CH2-2重疊，JH6，H5＝2.70Hz，JH6，H1＝6.86Hz，1H，H-6)，4.17(m，4H，氮雜環(huán)丁烷的CH2-2和4)，和4.2-4.35ppm(m，2H，H-5和CH3CHO). 實(shí)施例126 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基〕-4-〔2″-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基〕-4-〔2″-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.0g，2.08mmol)在無水二氯甲烷(20ml)中的溶液冷卻至-78℃，在氮?dú)夥障拢扔肗，N-二異丙基乙胺(0.54ml，3.1mmol)處理，再用5分鐘時(shí)間用三氟甲磺酸酐(0.4ml，2.38mmol)滴加處理。在-78℃反應(yīng)20分鐘后，滴加1-甲基哌嗪(1.0ml，9.01mmol)，使所得溶液緩慢地溫?zé)嶂?20℃，并在該溫度下攪拌1.5小時(shí)。然后加入冷的乙酸乙酯(200ml)和水使反應(yīng)驟冷。用水和鹽水洗滌有機(jī)相，干燥(MgSO4)。減壓下蒸除溶劑，得到1.4g透明油狀物，該油狀物直接用于下一步反應(yīng)。經(jīng)1H NMR測定，該產(chǎn)物污染有一部分1-甲基哌嗪; IR(NaCl，壓片)νmax2260(CN)，1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.08(s，6H，SiCH3)，0.88(2，9H，Si-tBut)，1.28(d，J＝6.05Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.0(m，2H，CH2-4)，2.3(s，3H，NCH3)，2.3-2.6(m，10H，乙基的CH2-2和哌嗪的CH2)，2.6-2.8(m，2H，CH2CN)，2.9-3.1和3.2-3.4(m，2H，SCH2)，3.19(dd，JH6，H5＝2.37Hz，JH6，H1＝6.6Hz，1H，H-6)，3.3(m，1H，H-4)，4.19(dd與CH3CHO重疊，JH5，H6＝2.37Hz，1H，H-5)，4.22(m，1H，CH3CHO)，4.73(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基〕-4-〔2″-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基〕-4-〔2″-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.17g，2.08mmol)在無水四氫呋喃(50ml)中的溶液冷卻至-20℃，在氮?dú)夥障?，先滴加乙?1.55ml，27.1mmol)，再滴加14.6ml(14.6mmol)1M氟化四丁銨在四氫呋喃中的溶液。然后將該溶液在10℃放置7天。繼之用乙酸乙酯(300ml)稀釋該反應(yīng)混合物，用冷的飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑，得到1.45g卡巴潘尼姆粗品。在硅膠(3.5×6cm)上層析，用丙酮和N，N-二甲基甲酰胺的混合物(9∶1)洗脫，得到0.57g(61%，兩步收率)油狀標(biāo)題卡巴潘尼姆。經(jīng)1H NMR測定，該物質(zhì)含有1當(dāng)量的N，N-二甲基甲酰胺。
IR(NaCl，壓片)νmax2250(CN)，1770(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.24Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.0(m，2H，CH2-4)，2.29(s，3H，NCH3)，2.3-2.8(m，12H，哌嗪的CH2，乙基的CH2-2和CH2CN)，2.9-3.1和3.2-3.4(m，2H，SCH2)，3.24(dd與SCH2重疊，JH6，H5＝2.7Hz，JH6，H1＝6.9Hz，1H，H-6)，3.42(m，1H，H-4)，4.23(m，1H，CH3CHO)，4.28(dd，JH5，H6＝2.7Hz，JH5，H4＝9.5Hz，1H，H-5)，4.76(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1ppm(2 x m，2H和1H，烯丙基的CH). C.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.57g，1.27mmol)溶解在無水乙酸乙酯(25ml)中，在22℃，在氮?dú)夥障?，先用Pd(PPh3)4(0.075g)，再用2.8ml(1.4mmol)0.5M2-乙基己酸鉀在乙酸乙酯中的溶液處理上述溶液。45分鐘后，依次用50ml 0.1M pH6.0磷酸鹽緩沖液和25ml水提取該反應(yīng)混合物。合并水相，并將其置于減壓條件下以除去痕量的有機(jī)溶劑，然后在反相硅膠(μBondapak C18，2.5×14cm)上層析兩次。用梯度為0-5%乙腈水溶液洗脫，經(jīng)冷凍干燥后，得到0.28g(54%)白色非晶形粉末狀標(biāo)題卡巴潘尼姆〔α〕22D＝+35.3°(c1.0，H2O)。
純度(HPLC)97%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用10%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器302nm，保留時(shí)間為6.6分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax300nm(8，390); IR(KBr)νmax2250(CN)，1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1595cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.39Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.2(m，2H，CH2-4)，2.75(s，3H，NCH3)，2.6-3.3(m，12H，哌嗪的CH2，SCH2和4-乙基的CH2-2)，3.3-3.5(m，2H，H-4和H-6重疊)和4.2-4.4ppm(m，2H，H-5和CH3CHO). 實(shí)施例127 (4R，5S，6S)-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-(〔2-(1-吡咯烷基)乙基〕硫基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
用0.1N NaOH水溶液處理在冰浴冷卻下的(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-(〔2-(1-吡咯烷基)乙基〕硫基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(將相應(yīng)的疊氮衍生物(115mg，0.270mmol)水解而制得)在0.05M磷酸鹽緩沖液(15ml)中的溶液，使pH升高，并在分次加入氨基亞氨基甲磺酸(170mg，1.30mmol)期間將pH維持在8.0-8.2。將該混合物攪拌3小時(shí)(將pH維持在8-8.2)，然后用0.1M NaH2PO4水溶液中和。使之通過μBondapak C18反相柱(20g，0.005M乙酸水溶液，1→2%CH3CN/0.005乙酸水溶液)，經(jīng)冷凍干燥后，得到白色粉末狀標(biāo)題化合物(75mg，57%)。
純度98.7%(HPLC測定，保留時(shí)間＝8.86分鐘，μBondapak C18，10μ，20%CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4); UV(水)λmax296(6723); IR(液體石蠟)νmax3400-3100(OH，NH2)，1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1670，1635(C＝N)，和1485cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)，δ4.35-4.23(1H，m，H-1′)，4.264(1H，dd，J＝3.1Hz，J＝9.8Hz，H-5)，3.399，3.384(d，J＝3.1Hz，部分 H-6)，3.40-3.138(11H，m，H-4(CH2-NH，S-CH2CH2N，CH2-N-CH2和部分 H-6)，2.12-2.05(4H，(CH2)2吡咯烷)，1.919(1.5H，s，CH3CO2)，1.95-1.4(2組m，CH2CH2，4位)和1.320ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例128 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-N，N-二甲氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
A.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(2-N，N-二甲氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(2-N，N-二甲氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-三乙基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(3.29g，6.45mmol)溶解在CH2Cl2(60ml)中，在干冰-丙酮浴冷卻下，先向其中加入N，N-二異丙基乙胺(2.90ml，16.8mmol)，然后滴加三氟甲磺酸酐(1.29ml，7.7mmol)。攪拌20分鐘后，向反應(yīng)混合物通入二甲胺氣流，通氣持續(xù)1.5分鐘。將該混合物在-78℃攪拌15分鐘，在-15℃(冰-甲醇)攪拌30分鐘，然后用冰冷的乙酸乙酯(250ml)和乙醚(50ml)稀釋，用冰冷的水(10×50ml)和鹽水(50ml)洗滌，干燥(MgSO4)。將蒸除溶劑后的殘留物溶解在無水四氫呋喃(30ml)中，冷卻至-15℃(冰-甲醇)，然后用冰乙酸(2.1ml，38.7mmol)和1M氟化四丁銨的四氫呋喃溶液(19.4ml，19.4mmol)處理之，在-20℃下放置18小時(shí)。用冰冷的乙酸乙酯(150ml)稀釋該混合物，用冷的1M NaHCO3水溶液(3×75ml)和鹽水(75ml)洗滌，干燥(MgSO4)。使殘留物通過閃式硅膠柱(75g，50-100%乙酸乙酯/己烷，10%→100%丙酮/乙酸乙酯，15%甲醇/丙酮)，得到黃色油狀標(biāo)題化合物(605mg，22%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600，330(OH)，2100(N3)，1775和1610cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.1-5.9(1H，m，乙烯基 H)，5.5-5.2(2H，m，乙烯基 H)，4.88-4.62(2H，m，烯丙基 CH2)，4.247(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.5Hz)，4.3-4.2(1H，m，H-1′)，3.43-3.2(3H，m，H-1′，CH2N3)，3.244(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.4Hz，H-6)，3.1-2.8(2H，m，SCH3)，2.65-2.56(2H，m，CH2N)，2.335(6H，s，N(CH3)2)，2.0-1.56(5H，m，CH2-CH2-4，OH)和1.391ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). B.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(2-N，N-二甲氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(2-N，N-二甲氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(588mg，1.39mmol)溶解在CH2Cl2(35ml)中，在冰浴冷卻下，先用Pd(PPh3)4(123mg，0.1mmol)處理該溶液，然后滴加N-甲基苯胺(0.3ml，2.78mmol)。將該混合物攪拌25分鐘。然后加入0.1M pH7.0磷酸鹽緩沖液(80ml)和乙醚(150ml)。分相，用0.01M pH7.0磷酸鹽緩沖液(2×30ml)提取有機(jī)相。合并水相，用乙醚(2×50ml)洗滌，并使之通過μBondapak C18反相柱(75g，水，2%→30%CH3CN/H2O)，經(jīng)冷凍干燥后得到淺黃色粉末狀標(biāo)題化合物(399mg，75%)。
IR(液體石蠟)νmax3500-3100(OH)，2100(N3)，1750和1590cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.264(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.3Hz，H-5)，4.34-4.2(1H，m，H-1′)，3.475(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.0Hz，H-6)，3.5-3.2(3H，m，CH2N3和H-1′)，3.2-2.95(4H，m，SCH2和CH2N)，2.0-1.8，1.8-1.47(4H，2 組 m，H-CH-4和HCHCH2-4)和1.33ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-N，N-二甲氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(2-N，N-二甲氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(250mg，0.65mmol)在水(50ml)中的溶液在帕爾氫化器中，在45-50psi氫氣壓下，用5%Pd/氧化鋁作催化劑，振蕩氫化1小時(shí)。補(bǔ)加催化劑(600mg)，再繼續(xù)氫化1小時(shí)。濾除催化劑，用水(3×5ml)洗滌。用1M乙酸水溶液將該含水混合物的pH調(diào)至4.5，然后使之通過μBondapak C18反相柱(75g，0.005M冰冷的乙酸水溶液，1%CH3CN/0.005M乙酸水溶液)，經(jīng)冷凍干燥后，得到淺黃色固體狀標(biāo)題化合物(215mg，79%)。
純度96.1%(HPLC測定，保留時(shí)間＝5.83分鐘，μBondapak C18，10μ，10%CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4); UV(水)λmax296(8142); IR(液體石蠟)νmax3400-3100(OH，NH2)，1755和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.273(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.9Hz，H-5)，4.4-4.2(1H，m，H-1′)，3.458(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝6.2Hz，H-6)，3.4-3.2(3H，m，CH2N和H-4)，3.2-3.0(4H，m，SCH2和CH2N)，2.91(6H，s，(N(CH3)2)，1.92(2.5H，s，CH3CO2H)，2.0-1.4(4H，m，CH2CH2-4)和1.330(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例129 (4R，5S，6S)-4-(2″-胍基乙基)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷基硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
將(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷基硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽(0.24g，0.51mmol)在25ml冷(0-5℃)水中的溶液用1M NaOH調(diào)至pH8-8.5。分小批量加入氨基亞氨基甲磺酸(0.38g，3.06mmol)(5分鐘)，在加料期間用1M NaOH將pH維持在8-8.5，并在加料完成后再將該pH維持2小時(shí)。然后用乙酸將pH調(diào)至5，并將所得溶液在反相硅膠(μBondapak C18，2.5×15cm)上層析。用梯度為0-20%乙腈在0.005M乙酸水溶液中的溶液洗脫，經(jīng)冷凍干燥后，得到0.063g(24%)白色非晶形固體狀標(biāo)題卡巴潘尼姆 純度(HPLC)94%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為1ml/分，UV檢測器302nm，保留時(shí)間為15.6分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax300nm(8，011); IR(KBr)νmax1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1660(酰胺的C＝O)和1600(羧酸根的C＝O); 1HNMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.32Hz，3H，CH3CHO)1.7-2.2(m，3H，吡咯烷的H-3和CH2-4)，1.92(s，CH3CO2H)，3.0 and 3.07(2S，2 x 3H，CON(CH3)2)，3-3.1(m與NCH3重疊，1H，吡咯烷的H-3)，3.2-3.6(m，5H，吡咯烷的H-5，H-4，H-6和乙基的CH2NH)，3.65(dd，Jgem＝12.2Hz，JH5，H4＝5.85Hz，1H，吡咯烷的H-5)，3.9(m，1H，吡咯烷的H-4)，4.28(m與H-5重疊，1H，CH3CHO)，4.31(dd，JH5，H6＝2.75Hz，JH5，H4＝9.8Hz，1H，H-5)和4.70ppm(t，J＝8.5Hz，1H，吡咯烷的H-2). 實(shí)施例130 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(N，N-二甲基脒基甲基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(N，N-二甲基脒基甲基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.270g，0.68mmol)在冷水(80ml)中的溶液在0-5℃，45psi氫氣壓下，用1.2g 5%Pd/氧化鋁氫化1小時(shí)。然后加入乙酸(0.08ml，1.4mmol)(pH由9降至4)，濾除催化劑。將該濾液在反相硅膠(μBondapak C18，3×12cm)上層析，用梯度為0-20%乙腈在0.01M乙酸水溶液中的溶液洗脫。將UV活性級分冷凍干燥，得到0.200g白色非晶形粉末，經(jīng)1H NMR測定為標(biāo)題化合物和乙脒乙酸鹽的等摩爾混合物。將該混合物溶解在乙醇(1ml)中，加入乙醚(3ml)使之沉淀。將所得固體(0.088g)在與上述相同的柱上層析，得到0.080g(27%)純的標(biāo)題化合物，為白色非晶形粉末 純度(HPLC)96%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用3%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為2ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為9.3分鐘); UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax292nm(5，872); IR(KBr)νmax1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1645(sh)和1575cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.38Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，1.91(s，3H，CH3CO2H)，3-3.4(m，3H，H-4和CH2NH2)，3.12和3.29(2s，2 x 3H，N(CH3)2)，3.50(dd，JH6，H5＝2.92Hz，JH6，H1＝6.32Hz，1H，H-6)，3.84(s，部分交換SCH2)，和4.2-4.4ppm(m，2H，H-5和CH3CHO重疊). 實(shí)施例131 (4R，5S，6S)-4-〔2″-(2-氨基乙基硫基)乙基〕-3-〔(2-氰基乙硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-4-〔2″-(2-烯丙氧羰基氨基乙基硫基)乙基〕-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-羥基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(350mg，0.73mmol)溶解在二氯甲烷(7ml)中，在干冰-丙酮浴冷卻下，先用二異丙基乙胺(0.34ml，1.9mmol)處理上述溶液，然后滴加三氟甲磺酸酐(0.14ml，0.88mmol)。將該混合物攪拌25分鐘，用在二氯甲烷(1ml)中的N-烯丙氧羰基半胱胺(354mg，2.2mmol)滴加處理，然后在-15℃(用冰-甲醇浴代替干冰浴)攪拌0.5小時(shí)。再次用在二氯甲烷(0.5ml)中的硫醇(177mg，1.1mmol)和二異丙基乙胺(0.13ml，0.73mmol)處理上述混合物，然后再攪拌30分鐘。用乙酸乙酯(30ml)稀釋，依次用冰冷的1M NaHSO3水溶液(2×10ml)，水(10ml)，1M NaHCO3水溶液(2×10ml)，水(10ml)和鹽水(10ml)洗滌，干燥(MgSO4)。使殘留物通過閃式硅膠柱(35g，10%→50%乙酸乙酯/己烷)，得到標(biāo)題化合物(321mg，70%)。
IR(CH2Cl2)νmax3450(NH)，2250(CN)，1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1720cm-1(酯和氨甲?；腃＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-5.82(2H，m，乙烯基 H)，5.48-5.19(4H，m，乙烯基 H)，5.1(1H，bs，NH)，4.9-4.63(2H，m，烯丙基 CH2)，4.583-4.55(2H，m，烯丙基 CH2)，4.3-4.13(1H，m，H-1′)，4.158(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.55-3.33(3H，m，CH2N和H-4)，3.33-3.19，3.05-2.9(2H，2 組 m，SCH23位)，3.11(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.9Hz，H-6)，2.9-2.63(6H，2 組 m，CH2CN和CH2S)，2.1-1.96，1.96-1.75(2H，2 組 m，CH2-4)，1.300(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.884(9H，s，叔丁基)和0.090ppm(6H，s，二甲基). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(2-烯丙氧羰基氨基乙基硫基)乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔2″-(2-烯丙氧羰基氨基乙基硫基)乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(310mg，0.500mmol)溶解在四氫呋喃(7ml)中，在冰-甲醇浴冷卻下，先用冰乙酸(0.16ml，3.0mmol)處理上述溶液，然后滴加1M氟化四丁銨在四氫呋喃中的溶液(1.5ml，1.5mmol)。將該混合物在冷室(5℃)放置15天，然后用乙酸乙酯(30ml)稀釋，依次用冰冷的1M NaHCO3水溶液(3×15ml)，水(2×15ml)和鹽水(15ml)洗滌，干燥(MgSO4)。使殘留物通過閃式硅膠柱(15g，40→100%乙酸乙酯/己烷)，得到黃色油狀標(biāo)題化合物(155mg，60%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600(OH)，3450(NH)，2250(CN)，1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1715cm-1(酯和氨甲酰基的C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.05-5.8(2H，m，乙烯基 H)，5.50-5.20(4H，m，乙烯基 H)，5.05(1H，bt，NH)，4.82-4.65(2H，m，烯丙基 CH2)，4.586，4.559(2H，d，J＝5.5Hz，烯丙基CH2)，4.206(d，J＝2.7Hz，部分 H-5)，4.22-4.05(1H，m，H-1′)，3.7-3.5(1H，m H-4)，3.5-3.3，3.3-3.1，3.1-2.8，2.8-2.6(11H，H-6，CH2N，SCH2，CH2CN)，2.1-1.6(3H，m，CH2-4和OH)和1.427ppm(3H，d，J＝6.1Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-4-〔2″-(2-氨基乙基硫基)乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-〔2″-(2-烯丙氧羰基氨基乙基硫基)乙基-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(150mg，0.29mmol)溶解在二氯甲烷(8ml)中，在冰浴冷卻下，先用Pd(PPh3)4(53mg，0.040mmol)處理上述溶液，然后滴加N-甲基苯胺(0.15ml，1.2mmol)。將該混合物攪拌20分鐘，然后用乙醚(30ml)和0.1M pH7.0磷酸鹽緩沖水溶液(15ml)稀釋。用0.1M緩沖液(2×7ml)和水(7ml)再次提取有機(jī)層。
用乙酸乙酯(2×20ml)洗滌水提取液，使之通過μBondapak C18反相柱(45g，水，1→6%CH3CN/水)，冷凍干燥后，得到粉末狀標(biāo)題化合物(31mg，28%)。
純度經(jīng)HPLC測定為98.0%(保留時(shí)間為6.26分鐘;μBondapak C18，10μ，5%CH3CN/KH2PO4，0.01M，pH7.4); UV(水)λmax300(10，964); IR(液體石蠟)νmax3500-3100(OH，NH2)，2250(CN)，1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1590cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.32-4.20(1H，m，H-1′)，4.244(d，J＝2.7Hz，部分 H-5)，3.608-3.494(1H，m，H-4)，3.407(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.6Hz，H-6)，3.278-3.04(3H，m，CH2N和部分 SCH23位)，3.03-2.71(6H，m，SCH2at 3，SCH2和CH2CN)，3.70-2.49(1H，m，部分 SCH2)，2.10-1.95，1.95-1.75(2H，2 組 m，CH2-4)和1.322ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例132 (4R，5S，6S)-4-(2″-胍基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.0g，2.0mmol)溶解在無水CH2Cl2(20ml)中，在干冰-丙酮冷卻下，先用二異丙基乙胺(0.92ml，5.2mmol)處理該溶液，然后滴加三氟甲磺酸酐(0.40ml，2.4mmol)。將該混合物攪拌30分鐘，向其中滴加吡咯烷(1.0ml，12mmol)，然后將其在-15℃冰-MeOH)攪拌15分鐘。用1∶1 EtOAc/石油醚混合物(100ml)稀釋上述混合物，用冰冷的水(10×25ml)洗滌。將有機(jī)部分干燥(MgSO4)，使之通過閃式硅膠墊(60g，20%→100%EtOAc/己烷，20%丙酮/EtOAc)，得到油狀標(biāo)題化合物(640mg，58%)。
IR(CH2Cl2)νmax2100(N3)，1775和1720cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.1-5.8(1H，m，乙烯基 H)，5.5-5.2(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.55(2H，m，烯丙基CH2)，4.3-4.1(1H，m，H-1′)，4.12(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.7-3.5(1H，m，H-4)，3.4-3.2(2H，m，CH2N3)，3.07(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝7.9Hz，H-6)，3.04-2.76(2H，2 組 m，SCH2)，2.76-2.5(6H，m，CH2N)，2.15-1.95(1H，m HCH)，1.9-1.6(5H，m，(CH2)2和H-CH)，1.313(3H，d，J＝6.2Hz，CH3)，0.895(9H，s，叔丁基)和0.094ppm(6H，s，二甲基). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(620mg，1.1mmol)溶解在無水四氫呋喃(8ml)中，在冰-甲醇浴冷卻下，先用乙酸(0.36ml，6.6mmol)處理上述溶液，然后滴加1M氟化四丁銨的四氫呋喃溶液(3.3ml，3.3mmol)。將該混合物攪拌15分鐘，然后在5℃(冰浴)下攪拌1小時(shí)，并將其在冷室(5-8℃)放置12天。
用乙酸乙酯(30ml)稀釋該混合物，用1M NaHCO3飽和水溶液(4×5ml)和鹽水(5ml)洗滌，干燥(MgSO4)。使殘留物通過閃式硅膠墊(5g，乙酸乙酯/己烷50→100%;丙酮/乙酸乙酯20%→100%)，得到油狀標(biāo)題化合物(200mg，42%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600(OH)，2100(N3)，1775和1620cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.05-5.95(1H，m，乙烯基 H)，5.5-5.2(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.6(2H，m，烯丙基 CH2)，4.3-4.2(1.5H，m，H-1′和隱藏部分 H-5)，4.208(d，J＝2.7Hz，部分 H-5)，3.63-3.53(1H，m，H-4)，3.49-3.35(2H，m，CH2N3)，3.155(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.9Hz，H-6)，3.09-2.6(4H，SCH2CH2-吡咯烷)，2.56(4H，bs，CH2NCH2)，2.2-1.7(6H，m，CH2-4和CH2CH2吡咯烷)和1.395ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-胍基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(160mg，0.370mmol)溶解在CH2Cl2(12ml)中，在冰浴冷卻下，先用Pd(PPh3)4(30mg，0.02mmol)處理上述溶液，然后滴加0.5M2-乙基己酸鉀的乙酸乙酯溶液(0.74ml，0.37mmol)。將該混合物攪拌15分鐘，然后用乙醚(70ml)稀釋，用0.04M pH7.0磷酸鹽緩沖水溶液(3×15ml)和水(1×15ml)提取。合并水提取液，用乙醚(2×30ml)洗滌，用1M NaH2PO4緩沖水溶液將pH調(diào)至5.9(冰浴)。在帕爾氫化器上，在45-50psi氫氣壓下，在5℃(冰浴)，用30%Pd/硅藻土(160mg)為催化劑將該水性混合物振蕩1小時(shí)。補(bǔ)加催化劑(100mg)，再氫化30分鐘。濾除催化劑，用水(2×5ml)洗滌。用0.5M NaOH水溶液將上述水溶液(冰浴)的pH調(diào)至8.0，分批加入氨基亞氨基甲磺酸(360mg，2.96mmol，8當(dāng)量)，其間，用NaOH溶液將pH維持在7.8-8.0。將該反應(yīng)混合物攪拌3小時(shí)(冰浴)，然后用1M乙酸水溶液將pH調(diào)至7.0。使該水性混合物通過μBondapak C18反相柱(60g)，用0.005M乙酸水溶液(1%→2%CH3CN)穩(wěn)定并洗脫該柱，經(jīng)冷凍干燥后，得到粉末狀標(biāo)題化合物(45mg，26%)。
純度97.5%(由HPLC測定，保留時(shí)間為7.17分鐘，μBondapak C18，10μ，10% CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4); UV(水)λmax294(5427); IR(液體石蠟)νmax3400-3100(NH)，1765，1000(C＝O)和1675-1630cm-1(C＝N); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.35-4.2(1H，m，H-1′)，4.292(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.502(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝6.6Hz，H-6)，3.8-3.0(9H，m，H-4，SCH2CH2N，CH2NCH2吡咯烷)，2.2-1.95(5H，CH2CH2吡咯烷，H-CH 4位)，1.95-1.7(1H，m，HC-H 4位)，1.91(1.5Hz，s，CH3CO)和1.328ppm(3H，d，J＝6.3Hz，CH3). 實(shí)施例133 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(3S)-3-吡咯烷基硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(3S)-N-烯丙氧羰基-3-巰基吡咯烷
先用吡啶(0.532g，6.72mmol)，再用三氟甲磺酸酐(1.90g，6.72mmol)處理(3R)-N-烯丙氧羰基-3-羥基吡咯烷(1.0g，5.84mmol)在CH2Cl2中的冷(5℃)溶液。攪拌15分鐘后，蒸除溶劑，在乙醚中研制殘留物，過濾。將三氟甲磺酸酯粗品重新溶解在冷(5℃)的CH3CN中，然后在該溶液中通入H2S氣泡的同時(shí)，滴加三乙胺(0.71g，7mmol)。在15分鐘內(nèi)形成硫醇。蒸除溶劑，粗產(chǎn)物經(jīng)層析(SiO2/5%CH3CN的CH2Cl2溶液)純化，得到0.787g(71.9%)標(biāo)題化合物。
IR(CH2Cl2)νmax1700(-CO2-)，1650cm-1(＞＝＜). 1H NMR(CDCl3)δ4.50-6.10(5H，烯丙基類型)，3.70-3.90(1H，m，CH-S-)3.20-3.70[4H，m，-(CH2-)2N]，2.20-2.40和1.70-2.00(2H，2m，2 H-4)，1.70(1H，d，J＝6.57，-SH). B.(4R，5S，6S)-3-〔(3S)-N-(烯丙氧羰基)-3-吡咯烷硫基〕-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
先用(3S)-N-烯丙氧羰基-3-巰基吡咯烷(0.79g，4.2mmol)，再用二異丙基乙胺(0.54g，4.2mmol)處理(4R，5S，6S)-3-(二苯基膦?；?-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(由1.09g，3mmol重氮基酮制備)在CH3CN中的冷(5℃)溶液。將該反應(yīng)混合物在5℃攪拌18小時(shí)，然后用EtOAc稀釋，依次用鹽水，稀鹽酸，稀碳酸氫鈉，最后再用鹽水洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，蒸發(fā)。粗產(chǎn)品經(jīng)層析(SiO2/15% CH3CN的CH2Cl2溶液)純化，得到441mg(29.1%)標(biāo)題化合物。
IR(CH2Cl2)νmax3610(-OH)，2105(-N3)，1775(β-內(nèi)酰胺)，1700(-CO2-)，1650cm-1(＞＝＜). 1H NMR(CDCl3)δ4.50-6.10(10H，2 烯丙基類型)，4.15-4.25(2H，m，H-5，H-1′)，3.70-3.90(2H，m，H-4，-CHS-)，3.0-3.90(7H，m CH2-N3，H-6，＞CH2)2)N-)，1.50-2.40(6H，m，2H-1″，2H-2″，吡咯烷的2H-4)，1.40(3H，d，J＝6.23，-CH2′). C.(4R，5S，6S)-3-〔(3S)-3-吡咯烷基硫基〕-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-3-〔(3S)-N-(烯丙氧羰基)-3-吡咯烷基硫基〕-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.15g，0.3mmol)，三苯膦(0.03g)和N-甲基苯胺(0.127g，1.19mmol)在EtOAc(10ml)中的溶液在冰浴中冷卻，并用Pd(PPh3)4(0.03g)處理該溶液。撤去冰浴，將該反應(yīng)混合物在20℃攪拌30分鐘。補(bǔ)加Pd(PPh3)4(0.035g)，該反應(yīng)在45分鐘內(nèi)完成。然后用冷水提取該反應(yīng)混合物，將水提取液在反相硅膠(微粒形硅膠)上層析。用0-20%CH3CN的水溶液洗脫。將合適的級分冷凍干燥，得到0.028g(24.5%)白色泡沫狀標(biāo)題化合物。
IR(液體石蠟)νmax2100(-N3)，1765(β-內(nèi)酰胺)，1595cm-1(-CO2-). 1H NMR(D2O)δ4.15-4.35(2H，m，H-5，H-1′)，3.97(1H，m，-CH-S-)，3.20-3.70(8H，m，H-4，H-6，CH2-N3，-CH2)2N)，2.40-2.60和1.25-2.20(6H，m，2 H-1″，2H-2″，吡咯烷的2H-4)，1.31(3H，d，J＝6.35，-CH3′). D.(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(3S)-3-吡咯烷硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(3S)-3-吡咯烷硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.042g，0.11mmol)溶解在水(15ml)中，在冷卻(5℃)下和43psi下，在5%Pd/Al2O3(0.04g)存在下，將上述溶液氫化1小時(shí)。然后濾除催化劑，加入1M NaH2PO4將濾液調(diào)至pH6.3。將該水溶液在反相硅膠(微粒形硅膠)上層析，用冷水洗脫。將合適的級分冷凍干燥，得到不純凈的白色固體。進(jìn)行第二次層析，用0.6ml乙酸/1升水洗脫，得到0.025g(54.7%)純的標(biāo)題化合物，為乙酸鹽。
IR(液體石蠟)νmax1755cm-1(β-內(nèi)酰胺); 1H NMR(D2O)δ4.20-4.40(2H，m，H-5，H-1′)，3.99(1H，m，-CH-S)，3.15-3.70(6H，m，H-6，H-4，-CH2)2N)，3.05(2H，m，CH2-N)，2.30-2.60和1.50-2.15(6H，m，2H-1″，2H-2″，吡咯烷的2H-4)，1.33(3H，d，J6.33-CH3′)，1.92(3H，s，乙酸). 實(shí)施例134 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-胍基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
在0-5℃，45psi氫氣壓下，用5%Pd/Al2O3將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基乙基)-3-〔(2-胍基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.300g，0.76mmol)在冷水(150ml)中的懸浮液氫化1小時(shí)。加入0.1ml(1.6mmol)乙酸，然后濾除催化劑，將濾液在反相硅膠(μBondapak C18，2.5×15cm)上層析兩次，用0.005M乙酸作為洗脫劑。將UV活性級分冷凍干燥，得到0.23g(70%)標(biāo)題卡巴潘尼姆，為白色非晶形固體〔α〕22D+32.2°(c1.0，水)。
純度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用水pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為0.8ml/分，UV檢測器302nm，保留時(shí)間為8.27分鐘); UV(水，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(6，390); IR(KBr)νmax1750(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1680，1630和1580cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，1.92(s，CH3CO2H)，2.8-3.4(m，4H，SCH2和CH2NH2)，3.37(m，與H-6重疊，1H，H-4)，3.40(dd，JH6，H5＝2.6Hz，JH6，H1＝6.4Hz，1H，H-6)，3.48(t，J＝5.8Hz，2H，CH2NH-C(NH)NH2)，4.25(dd，與CH3CHO重疊，JH5，H6＝2.6Hz，1H，H-5)和4.28ppm(m，1H，CH3CHO). 實(shí)施例135 (4R，5S，6S)-4-(2″-胍基乙基)-3-〔(2-胍基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
用1M NaOH水溶液將(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽(0.270g，0.73mmol)〔按實(shí)施例115制備〕在冷水(50ml)中的溶液調(diào)至pH8.5，然后在0-5℃，用5分鐘時(shí)間分小批量加入氨基亞氨基甲磺酸(0.80g，6.44mmol)處理上述溶液，其間用堿將pH維持在8-8.5。2.5小時(shí)后，用乙酸將pH調(diào)至4.5，并將該溶液在反相硅膠(μBondapak C18，2.5×15cm)上層析兩次，用水作為洗脫劑。將UV活性級分冷凍干燥，得到0.080g(23%)白色非晶形固體狀標(biāo)題卡巴潘尼姆。
純度(HPLC)99%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用0.01M磷酸鹽緩沖液洗脫，流速2ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為6.75分鐘); UV(水，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(7，250); IR(KBr)νmax1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1670，1640和1570cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.34Hz，3H，CH3CHO)，1.7-2.2(m，2H，乙基的CH2-1)，1.92(s，CH3CO2H)，2.7-3.2(m，2H，SCH2)，3.2-3.7(m，6H，H-4，H-6，乙基的CH2-2和SCH2CH2N)，和4.2-4.4ppm(m，2H，H-5和CH3CHO). 實(shí)施例136 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(1-吡啶鎓)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鹽
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-羥基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.481g，1mmol)〔由實(shí)施例125制備〕在無水二氯甲烷(10ml)中的溶液冷卻至-78℃，在氬氣氛下，先用N，N-二異丙基乙胺(0.262ml，1.5mmol)處理，然后滴加三氟甲磺酸酐(0.194ml，11.5mmol)(3分鐘)。在-78℃反應(yīng)20分鐘后，加入吡啶(0.324ml，4mmol)。將該反應(yīng)混合物在-20℃放置18小時(shí)，然后在不加熱的情況下減壓濃縮。將殘留物溶解在無水四氫呋喃(20ml)中，冷卻至-15℃，在氬氣氛下先用乙酸(0.76ml)，再用6ml(6mmol)1M氟化四丁銨的四氫呋喃溶液處理。將該溶液在0℃放置96小時(shí)，然后先加入Pd(PPh3)4(0.090g)，再加入N，N-二異丙基乙胺(0.350ml，2mmol)。將所得反應(yīng)混合物在0℃，氬氣氛下攪拌3小時(shí)，然后用冷水(30ml)提取反應(yīng)混合物。用1N NaOH將水相調(diào)至pH6.5，然后用乙醚洗滌提取液，并將其置于減壓下以除去痕量的有機(jī)溶劑。將該溶液過濾，然后在反相硅膠(μBondapak C18，3.5×14cm)上層析，用水為洗脫劑。合并UV活性級分，冷凍干燥，在相同的柱上進(jìn)行第二次層析，用梯度為0-1%乙腈水溶液洗脫。最后冷凍干燥后，得到0.310g白色非晶形粉末，后者在冷甲醇(20ml)中結(jié)晶，得到純的晶狀標(biāo)題卡巴潘尼姆(0.262g，68%)。
純度(HPLC)99.96%(μBondapak C18，3.9mm×30cm，用2%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速為0.8ml/分，UV檢測器300nm，保留時(shí)間為9.97分鐘); UV(水，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax298nm(8101)，260nm(7531); IR(KBr)νmax2250(CN，1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1600cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.37(d，J＝6.35，3H，CH3CHO)，2.2-2.6(m，2H，CH2-4)，2.8(m，2H，CH2CN)，2.9-3.1(m，2H，SCH2)，3.45(m，1H，H-4)，3.56(dd，JH6，H5＝2.97Hz，JH6，H1＝7.04Hz，1H，H-6)，4.20-4.40(m，2H，H-5和CH3CHO)，4.81m，與HOD信號重疊，2H，N+-CH2)，8.11(m，2H，吡啶鎓上的H-3和H-5)，8.59(m，1H，吡啶鎓上的H-4)，8.91(m，吡啶鎓上的H-2和H-6). 實(shí)施例137 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-(β-氯-L-丙氨酰-β-氯-L-丙氨酰)氨基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-氨基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.475g，1.46mmol)在0.2M pH7.0磷酸鹽緩沖液(15ml)中的溶液冷卻至0℃，同時(shí)向該溶液中通入氬氣氣泡。用1N NaOH將pH調(diào)至10.2，然后在劇烈攪拌下一次加入在二噁烷(1.5ml)中的β-氯-L-丙氨酸的N-羧酸酐(0.22g，1.46mmol)。在pH降至7.2時(shí)，再將其調(diào)至10.2，放置1小時(shí)。用1N HCl將pH調(diào)至6.0，使反應(yīng)停止。在0℃，向該溶液通入氬氣氣泡30分鐘，同時(shí)無論何時(shí)pH超過6.0，便將其調(diào)回pH6。使該反應(yīng)混合物粗品通過μBondapak C18反相硅膠柱(4.5×10.5cm)。將屬于產(chǎn)物的合適級分合并，冷凍干燥，得到一固體，后者在μBondapak C18反相硅膠(4.5×10.5cm)上再次層析。用水和CH2CN的混合物(94∶6，梯度洗脫)洗脫出與單肽衍生物間隔很近的極性稍小的標(biāo)題化合物，冷凍干燥后得到微黃色蓬松固體狀標(biāo)題化合物(0.049g，6.8%)。
經(jīng)HPLC測定，純度為92.2%，UV檢測，設(shè)定在300nm處，μBondapak C18(4mm×30cm)，10%CH3CN pH6.8磷酸鹽緩沖溶液，流速為1ml/分，保留時(shí)間為8.31分鐘; UVλmax300nm; IR(液體石蠟)νmax1750cm-1(C＝O，β-內(nèi)酰胺). 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.37(d，3H，CH3，J＝6.4Hz)，1.66-1.77;2.06-2.16(m，2H，CH2)，2.83-2.89(m，2H，CH2CN)，2.91-3.04;3.08-3.21(m，2H，SCH2)，3.32-3.41(m，3H，CH2NH，H-4)，3.58(dd，1H，H-6，J6，1′＝5.88Hz)，3.78-4.08(m，4H，CβH2)，4.17(t，1H，CαH，Jα，β＝4.61Hz)，4.27(dd，1H，H-5，J4，5＝7.92Hz，J5，6＝2.48Hz)，4.31(m，1H，H-1′)，4.76(t，1H，CαH，Jα，β＝5.37Hz). 實(shí)施例138 (4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(2-氟乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氟乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰浴冷卻和充分?jǐn)嚢柘拢?0分鐘時(shí)間，向三氟硫化二乙基銨(DAST，1.05ml，8.06mmol)在CH2Cl2(20ml)中的溶液中滴加(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯在CH2Cl2(80ml)中的溶液。將混合物攪拌15分鐘，然后用冰冷的水(100ml)驟冷，最后用乙酸乙酯/乙醚的1/1混合物和水(400ml)稀釋。水相用乙酸乙酯/乙醚(1/1，300ml)提取，合并有機(jī)提取液，用冰冷的水(2×250ml)、冰冷的1N HCl水溶液、水、1M NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物通過閃式硅膠墊(180g，己烷，5-25%乙酸乙酯/己烷)，得到黃色油狀的標(biāo)題化合物(1.54g，38%) IR(CH2Cl2)νmax2100(N3)，1775和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.05-5.85(1H，m，乙烯基 H)，5.49-5.22(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.4(4H，m，烯丙基 CH2和CH2F)，4.3-4.13(1H，m，H-1′)，4.145(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.7-3.55(1H，m，H-4)，3.46-3.3(2H，m，CH2N3)，3.4-3.15，3.05-2.8(2H，2 組 m，SCH2)，3.088(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.7Hz，H-6)，2.13-1.95，1.85-1.65(2H，2 組 m，CH2-4)，1.309(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.897(9H，S，叔丁基)和0.095ppm(6H，s，二甲基). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(2-氟乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氟乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(457mg，0.92mmol)在四氫呋喃(8ml)中的溶液先用冰乙酸(0.3ml，5.5mmol)處理，然后用1M氟化四丁銨四氫呋喃溶液(2.75ml，2.75mmol)滴加處理。將混合物攪拌10分鐘，然后在冷室(5-8℃)中放置9天。再用乙酸乙酯(50ml)稀釋，用冰冷的1M NaHCO3水溶液(4×25ml)、水(2×25ml)和鹽水(25ml)洗滌，干燥(MgSO4)。通過閃式硅膠柱(15g，己烷，乙酸乙酯/己烷10%-15%)，得到油狀標(biāo)題化合物(240mg，68%)。
IR(CH2Cl2)νmax3400(OH)，3100(N3)，1778和1612cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-5.9(1H，m，乙烯基 H)，5.5-5.2(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.35(4H，m，烯丙基CH2和CH2-F)，4.3-4.15(1H，m，H-1′)，4.248(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.7-3.5(1H，m，H-4)，3.5-3.3(2H，m，CH2N3)，3.3-2.8(2H，2 組 m，SCH2)，3.160(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝8.0Hz，H-6)，2.15-1.95，1.84-1.65(2H，2 組 m，CH2-4)，1.834(1H，d，J＝5.1Hz，OH)和1.395ppm(3H，d，J＝Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(2-氟乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
在冰浴冷卻下，向(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(2-氟乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(585mg，1.52mmol)在CH2Cl2(20ml)中的溶液中加入Pd(PPh3)4(142mg，0.114mmol)，并滴加0.5M的2-乙基己酸鈉乙酸乙酯溶液(3.0ml，1.50mmol)。將混合物攪拌20分鐘，用乙醚(80ml)稀釋，用水(4×15ml)提取。合并水提取液，用水(2×20ml)洗滌后，通過μ-Bondapak C18反相柱(200g，1%-10%CH3CN/水)，冷凍干燥后，得到灰白色固狀的標(biāo)題化合物(40.2mg，72%)。
純度97.8%，用HPLC法測得(保留時(shí)間＝14.85分鐘，μBondapak C18，10μ，5% CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4); UV(H2O)λmax302(9184); IR(液體石蠟)νmax3350(OH)，2100(N3)，1750和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.83-4.75，4.6-4.5(2H，2 組 m，CH2F)，4.35-4.2(1H，m，H-1′)，4.210(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝9.0Hz，H-5)，3.65-2.9(6H，m，H-4，SCH2，CH2N3，H-6)，2.17-2.0，1.9-1.7(2H，2 組 m，CH2-4)和1.331ppm(3H，d，J＝Hz，CH3). 實(shí)施例139 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(4-哌啶基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在5℃和45psi下，在5%Pd/Al2O3(0.08g)存在下，將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(4-哌啶基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.08g，0.20mmol)在水(40ml)中的溶液氫化1小時(shí)。然后濾出催化劑，加入乙酸將濾液的pH值降至5.0。將該酸化后的溶液在反相硅膠(微粒形硅膠)上層析，用15%CH3CN水溶液洗脫。將適當(dāng)?shù)募壏掷鋬龈稍?，得?.066g(76.8%)標(biāo)題化合物的乙酸鹽。
IR(液體石蠟)νmax1760(β-內(nèi)酰胺)，1580cm-1(-CO2-). 1H NMR(D2O)δ4.20-4.40(2H，m，H-5，H-1′)，3.25-3.60[5H，m，H-6，(2H-2，哌啶的2H-6)]，2.95-3.15(4H，m，CH2-N，H-4，哌啶的H-4)，1.50-2.40[8H，m，2H-1″，2H-2″，(2H-3，哌啶的2H-5)]，1.93(3H，s，乙酸)，1.34(3H，d，J＝6.30，-CH3′). 實(shí)施例140 (4R，5S，6S)-3-〔(N，N-二甲基脒基甲基)硫基〕-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
將(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(N，N-二甲基脒基甲基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.203g，0.47mmol)在冷水(0-5℃，30ml)中的溶液用1M氫氧化鈉水溶液調(diào)至pH8.5，然后在保持pH8-8.5的同時(shí)，用5分鐘時(shí)間分小批加入氨基亞氨基甲磺酸(0.230g，1.85mmol)進(jìn)行處理。2小時(shí)后，用冰乙酸將pH值調(diào)至4.8，將溶液在反相硅膠(μ-Bondapak C18，2.5×13.5cm)上用0.01M乙酸水溶液洗脫層析。將UV活性級分冷凍干燥，得到非晶形固狀的標(biāo)題卡巴潘尼姆(0.090g，40%)。
HPLC純度98%，μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，5% CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速1ml/分鐘，UV檢測器292nm，保留時(shí)間7.52分鐘; UV(水，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax292nm(6，340); IR(KBr)νmax1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1680，1650和1580cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.36Hz，3H，CH3CHO)，1.4-1.9(m，4H，丙基的CH2-1和2)，1.92(s，CH3CO2H)，3.12 and 3.29(2s，2 x 3H，NCH3)，3.1-3.4(m，3H，H-4和丙基的CH2-3)，3.44(dd，JH6，H5＝2.83Hz，JH6，H1＝5.97Hz，1H，H-6)，3.86(s，2H，SCH2)和4.2-4.4ppm(m，2H，H-5和CH3CHO重疊). 實(shí)施例141 (4R，5S，6S)-3-〔(2-N，N-二甲基氨基乙基)硫基〕-4-(2″-胍基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-N，N-二甲基氨基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷卻下，將從(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-疊氮基乙基-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(4.64g，10mmol)制得的烯醇磷酸酯在乙腈(45ml)中的溶液用在CH3CN(2ml)中的N，N-二甲基氨基乙硫醇(1.05g，10.0mmol)緩慢處理，并用二異丙基乙胺(1.92ml，11.0mmol)滴加處理。在-10℃→0℃下將混合物攪拌1.5小時(shí)，然后再次用冰-MeOH浴冷卻，再次用在CH3CN(1ml)中的硫醇(520mg，5mmol)及二異丙基乙胺(0.96ml，5.5mmol)處理。將混合物在-15℃下攪拌0.5小時(shí)，并在冰箱(-20℃)中放置18小時(shí)。用乙酸乙酯/乙醚(1∶1混合物，500ml)稀釋，用冰冷的水(5×100ml)和鹽水(100ml)洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物通過閃式硅膠柱(100g，50→100%乙酸乙酯/己烷，10%丙酮/乙酸乙酯)，得到標(biāo)題化合物(4.0g，76%)，其中摻雜有開環(huán)的β-內(nèi)酰胺副產(chǎn)物。
IR(CH2Cl2)νmax2100N3，1775和1715cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.1-5.8(1H，m，乙烯基 H)，5.5-5.1(2H，m，乙烯基 3H)，4.9-4.6(2H，m，烯丙基 -CH2)，4.3-4.1(1H，m，H-1′)，4.2-4.15(1H，dd，H-5)，3.7-3.5(1H，m，H-4)，3.5-3.3(2H，m，CH2-N3)，3.071(1H，dd，J＝3.0Hz，J＝7.1Hz，H-6)，3.1-2.85(2H，m，SCH2)，2.7-2.4(2H，m CH2-N)，2.28(6H，s，N(CH3)2)，2.1-1.6(2H，m，CH2-4)，1.314(3H，d，J＝6.1Hz，CH3)，0.897(9H，s，叔丁基)和0.069ppm(6H，s，二甲基). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(2-N，N-二甲基氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-N，N-二甲基氨基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(4.0g，7.6mmol，37%純度)在四氫呋喃中的溶液先用冰乙酸(2.5ml，45.6mmol)處理，并用1M的氟化四丁銨四氫呋喃溶液(22.8ml，22.8mmol)滴加處理。將混合物在5℃下放置11天，然后用乙酸乙酯(400ml)稀釋，用冰冷的1M NaHCO3水溶液(2×25ml)、冰冷的水(3×25ml)和鹽水(25ml)洗滌，干燥。殘留物通過閃式硅膠柱(60g，10→100%丙酮/乙酸乙酯)，得到黃色油狀的標(biāo)題化合物(473mg，41%)。
IR(CH2Cl2)νmax3610，3450(OH)，2110(N3)，1780和1610cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.1-5.9(1H，m，乙烯基 H)，5.49-5.22(2H，m，乙烯基 H)，4.9-4.6(2H，m，烯丙基 CH2)，4.235(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.3Hz，H-5)，4.33-4.2(1H，m H-1′)，3.7-3.5(1H，m，H-4)，3.47-3.3(2H，m，CH2N3)，3.150(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝7.9Hz，H-6)，3.1-2.9(2H，m，SCH2)，2.7-2.4(2H，m，CH2N)，2.284(6H，s，N(CH3)2)，1.95-1.7(3H，m，OH，CH2-4)和1.400ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(2-N，N-二甲基氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下，向(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(2-N，N-二甲基氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(470mg，1.14mmol)在CH2Cl2(17ml)中的溶液中加入Pd(PPh3)4(105mg，0.086mmol)和0.5M的2-乙基己酸鉀乙酸乙酯溶液(2.28ml，1.14mmol)。將混合物攪拌15分鐘，用乙醚(100ml)稀釋，用冰冷的水(4×20ml)提取。合并水提取液，用乙醚(2×40ml)洗滌，然后通過μ-Bondapak C18反相柱(67.5g，水，1%→10%CH3CN/H2O)，冷凍干燥后，得到黃色粉狀的標(biāo)題化合物(200mg，46%). IR(液體石蠟)νmax3400-3100(OH)，2100(N3)，1755和1600cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.280(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝6.8Hz，H-5)，4.32-4.2(1H，m，H-1′)，3.67-3.54(1H，m，H-4)，3.481(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝6.1Hz，H-6)，3.5-3.34(2H，m，CH2N3)，3.2-2.92(4H，m，SCH2和CH2N)，2.60(6H，s，N(CH3)2)，2.18-2.02，1.91-1.75(2H，2 組 m，CH2-4)和1.329ppm(3H，d，J＝6.1Hz，CH3). D.(4R，5S，6S)-3-〔(2-N，N-二甲基氨基乙基)硫基〕-4-(2″-胍基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
在冰浴冷卻下，用1M NaH2PO4水溶液將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(2-N，N-二甲基氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(190mg，0.514mmol)的0.04M pH7.0磷酸鹽緩沖水溶液(67ml)的pH值調(diào)至5.9。在冰浴冷卻下和45-50psi氫壓下，用30%Pd/硅藻土(270mg)為催化劑，將混合物在帕爾氫化器上振蕩1小時(shí)。補(bǔ)加Pd/硅藻土(270mg)，繼續(xù)氫化1小時(shí)。濾除催化劑，用水(2×10ml)洗滌。在冰浴冷卻下，用1N NaOH水溶液將水溶液的pH值調(diào)至7.8-8.0。分批加入氨基亞氨基甲磺酸(354mg，2.87mmol)，并用1N NaOH水溶液將pH值保持在7.8-8.0。將反應(yīng)混合物攪拌1.5小時(shí)，然后補(bǔ)加氨基亞氨基甲磺酸(124mg，1mmol)。將pH值保持在7.8-8.0，再攪拌1小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束時(shí)，用1.0M乙酸水溶液將pH值調(diào)至7.0，使混合物通過μ-Bondapak C18反相柱(130g，冰冷的0.005M乙酸水溶液，1%CH3CN/0.005M AcOH)，冷凍干燥后，得到灰白色粉狀的標(biāo)題化合物(60mg，26%)。
純度96.9%，由HPLC法測得(保留時(shí)間＝6.02分鐘，μBondapak C18，10μ，3% CH3CN/KH2PO40.01M，pH7.4); UV(H2O)λmax296(6089); IR(液體石蠟)νmax3400-3100(NH，OH)，1760，1600-1540(C＝O)，1680-1620cm-1(C＝N); 1H NMR(D2O，200NH2)δ4.33，4.32(d，J＝2.9Hz，部分 H-5)，4.33-4.2(m，H-1′和部分 H-5)，3.51(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝6.6Hz，H-6)，3.41-3.21(5H，m，CH2-胍，CH2N，H-4)，3.20-2.96(2H，m，SCH2)，2.91(6H，s，NCH3)，2.24-2.03，1.9-1.55(2H，2 組 m，CH2-4)，1.925(2，2H，s，CH3CO2)和1.33ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例142 (4R，5S，6S)-3-〔(N，N-二甲基脒基甲基)硫基〕-4-(3″-N-亞氨甲基氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
用1M氫氧化鈉水溶液將(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(N，N-二甲基脒基甲基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽(0.204g，0.474mmol)在冷水(30ml，0-5℃)中的溶液的pH值調(diào)至8.5，然后在用1M氫氧化鈉溶液保持pH值在8-8.5的同時(shí)，用5分鐘時(shí)間分小批加入甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(0.40g，2.3mmol)進(jìn)行處理。15分鐘后，用濃乙酸將pH值調(diào)至5，用乙酸乙酯(25ml)洗滌反應(yīng)混合物。將水相保持在減壓下以除去痕量的有機(jī)溶液，然后于4℃下在反相硅膠(μ-Bondapak C18，2.5×14cm)上層析兩次。用0.01M乙酸水溶液洗脫，冷凍干燥后，得到白色非晶形粉狀的標(biāo)題化合物(0.088g，41%)。
HPLC純度97%，μ-Bondapak C18，3.9mm/30cm，洗脫劑3%CH3CN-水，pH7.4磷酸鹽緩沖液，流速0.8ml/分鐘，UV檢測器292nm，保留時(shí)間5.8分鐘; UV(水，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax292nm(7，200); IR(KBr)νmax1750(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1715，1645和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.32Hz，3H，CH3CHO)，1.4-1.9(m，4H，丙基的CH2-1和2)，1.92(s，CH3CO2H)，3.12 and 3.28(2 x s，2 x 3H，NCH3)，3.0-3.6(m，4H，H-4，H-6和丙基的CH2-3)，3.84(s，2H，SCH2)，4.2-4.4(m，2H，H-5和CH3CHO重疊)和7.81ppm(s，1H，CH＝NH). 實(shí)施例143 (4R，5S，6S)-4-(3″-N-亞氨甲基氨基丙基)-3-〔(2-胍基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
用1M氫氧化鈉水溶液將(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-胍基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽(0.300g，0.695mmol)在冷水(30ml，0-5℃)中的溶液的pH值調(diào)至8.5，然后用5分鐘時(shí)間分小批加入甲亞胺酸芐酯鹽酸鹽(0.60g，3.5mmol)進(jìn)行處理。在加入過程中用1M氫氧化鈉將pH值保持在8-8.5，加完后再保持15分鐘。然后用濃乙酸將pH值調(diào)至5，用乙酸乙酯(2ml)洗滌反應(yīng)混合物。將水相保持在減壓下除去微量有機(jī)溶劑，然后于4℃下在反相硅膠(μ-Bondapak C18，2.5×15cm)上層析。用0.01M乙酸水溶液洗脫，冷凍干燥后，得到0.190g(59%)的白色非晶形固狀的標(biāo)題卡巴潘尼姆〔α〕22D+26.6°(c1.0，水)。
HPLC純度97%，μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，洗脫劑2%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液，流速1ml/分鐘，UV檢測器300nm，保留時(shí)間6.1分鐘。
UV(水，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(8，677); IR(KBr)νmax1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1710，1670，1620和1580cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.33Hz，3H，CH3CHO)，1.4-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，1.93(s，CH3CO2H)，2.8-3.2(m，2H，SCH2)，3.3-3.5(m，6H，H-4，H-6，丙基的CH2-3和SCH2CH2N)，4.2-4.4(m，2H，H-5和CH3CHO)和7.8ppm(s，1H，CH＝NH). 實(shí)施例144 (4R，5S，6S)-3-〔(2-胍基乙基)硫基〕-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
用1N氫氧化鈉水溶液將(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-胍基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽(0.300g，0.695mmol)在冷水(30ml，0-5℃)中的溶液的pH值調(diào)至8.5，用5分鐘時(shí)間分小批加入氨基亞氨基甲磺酸(0.43g，3.46mmol)進(jìn)行處理。在整個(gè)加入過程中用1M氫氧化鈉將pH值保持在8.0-8.5，然后再保持2小時(shí)。用冰乙酸將pH值調(diào)至5，然后將溶液在反相硅膠(μ-Bondapak C18，2.5×15cm)上層析。用0.01M乙酸水溶液洗脫，冷凍干燥后，得到0.213g(64%)白色非晶形固狀的標(biāo)題卡巴潘尼姆〔α〕22D+11.3°(c1.0，水)。
HPLC純度99%，μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，洗脫劑2%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液，流速1ml/分鐘，UV檢測器300nm，保留時(shí)間10.4分鐘。
UV(水，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax302nm(10，260); IR(KBr)νmax1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1670，1630和1580cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.32(d，J＝6.38Hz，3H，CH3CH3CHO)，1.4-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，1.92(s，CH3CO2H)，2.8-3.2(m，2H，SCH2)，3.2-3.6(m，6H，H-4，H-6，丙基的CH2-3和SCH2CH2N)，4.23(dd，JH5，H6＝2.49Hz，JH5，H4＝9.2Hz，1H，H-5)和4.27ppm(m與H-5重疊，1H，CH3CHO). 實(shí)施例145 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-(L-丙氨?；?氨基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-氨基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.512g，1.57mmol)在0.2M pH7.0磷酸鹽緩沖液(15ml)中的溶液冷卻至0℃，同時(shí)向溶液中鼓入氬氣泡。用1N NaOH將pH值調(diào)至10.2，在劇烈攪拌條件下，將在二噁烷(1.5ml)中的L-丙氨酸的N-羧酸酐(0.181g，1.57mmol)一次性地加入其中。當(dāng)pH值降至7.2時(shí)，將pH值重新調(diào)至10.2，放置1小時(shí)。用1N HCl將pH值調(diào)至6.0停止反應(yīng)。在0℃下向溶液中鼓入氬氣泡30分鐘，同時(shí)重新將pH值調(diào)至6.0(如果pH值升至高于6.0時(shí))。使反應(yīng)混合物粗品通過μ-Bondapak C18反相硅膠柱(4.5×11.5cm)。合并適當(dāng)?shù)暮a(chǎn)物級分，冷凍干燥后得到固體物，將其在μ-Bondapak C18反相硅膠(4.5×11cm)上重新層析。用水和CH3CN的混合物(97∶3，梯度洗脫)洗脫極性稍大的標(biāo)題化合物，將其與非常接近的二肽衍生物分離，冷凍干燥后，得到黃色蓬松固狀的產(chǎn)物(0.099g，15.9%)。
HPLC純度96.5%，UV檢測設(shè)置在300nm，μ-Bondapak C18(4mm×30cm)，5%CH3CN的pH6.8磷酸鹽緩沖液溶液，流速0.6ml/分鐘，保留時(shí)間7.25分鐘。
UVλmax300; IR(液體石蠟)νmax1750cm-1(C＝O，β-內(nèi)酰胺). 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.38(d，3H，CH3，J＝6.4Hz，)，1.47(d，3H，CH3，J＝7.0Hz)，1.52-1.77;1.97-2.11(m，2H，CH2)，2.82-2.89(重疊，2H，CH2CN)，2.91-3.17(重疊，2H，SCH2)，3.27-3.43(重疊，3H，CH2N，H-4)，3.59(dd，1H，H-6，J5，6＝2.66Hz，J6，1′＝6.06Hz)，3.91(q，1H，CαH，Jα，CH3＝7.02Hz)，4.74-4.96(重疊，2H，H-5，H-1′). 實(shí)施例146 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-(L-丙氨酰-L-丙氨?；?氨基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在向溶液中鼓入氬氣泡的同時(shí)，將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-氨基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.512g，1.57mmol)在0.2M pH7.0磷酸鹽緩沖液(15ml)中的溶液冷卻至0℃。用1N NaOH將pH值調(diào)至10.2，在劇烈攪拌下，將在二噁烷(1.5ml)中的L-丙氨酸的N-羧酸酐(0.181g，1.57mmol)一次性地加入其中。當(dāng)pH值降至7.2時(shí)，將pH值重新調(diào)至10.2，放置1小時(shí)。用1N HCl將pH值調(diào)至6.0停止反應(yīng)。在0℃下向溶液中鼓入氬氣泡，其間，只要pH值升至6.0以上就將其重新調(diào)至6.0。使反應(yīng)混合物粗品通過μ-Bondapak C18反相硅膠柱(4.5×11.5cm)。合并適當(dāng)?shù)暮a(chǎn)物級分，冷凍干燥后，得到固體物，在μ-Bondapak C18反相硅膠(4.5×11cm)上重新層析。用水和CH3CN混合物(96∶4，梯度)洗脫極性較小的標(biāo)題化合物，將其與非常接近的單肽衍生物分離，冷凍干燥后，得到黃色蓬松固體(0.069g，9.4%)。
HPLC純度96.6%，UV檢測設(shè)置在300nm，μ-Bondapak C18(4mm×30cm)，5%CH3CN的pH6.8磷酸鹽緩沖液溶液，流速0.6ml/分鐘，保留時(shí)間9.1分鐘。
UVλmax300nm. IR(液體石蠟)νmax1750cm-1(C＝O，β-內(nèi)酰胺); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.37(d，3H，CH3，J＝6.45Hz)，1.42(d，3H，CH3，J＝7.39Hz)，1.46(d，3H，CH3，J＝8.85Hz)，1.59-1.75;1.99-2.14(m，2H，CH2)，2.84-2.89(重疊，2H，CH2CN)，2.92-3.22(重疊，2H，SCH2)，3.3-3.42(重疊，3H，CH2N，H-4)，3.59(dd，1H，H-6，J5，6＝2.56Hz，J6，1′＝5.88Hz)，3.9(br，1H，CαH)，4.25-4.34(重疊，3H，H-5，H-1′，CαH). 實(shí)施例147 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(3-氮雜環(huán)丁烷基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在45psi壓力下，用5%Pd/Al2O3(0.235g)為催化劑將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(3-氮雜環(huán)丁烷基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.235g，0.64mmol)在水(75ml)中的冷(5℃)溶液氫化。1小時(shí)后，用一些新催化劑(0.235g)代替用過的催化劑，再氫化1小時(shí)。此時(shí)，過濾反應(yīng)混合物，用AcOH酸化至pH5.7，最后在反相硅膠(微粒形硅膠)上用水洗脫進(jìn)行層析。冷凍干燥后，將所得物質(zhì)再層析兩次，得到了純度很高的標(biāo)題化合物(0.045g，17.5%)。
IR(液體石蠟)νmax1750cm-1(β-內(nèi)酰胺); 1H NMR(D2O)δ4.00-4.15和4.50-4.70(4H，2m，氮雜環(huán)丁烷的2H-2和2H-4)，4.15-4.20(3H，m，H-5，H-1′，CH-S)，3.47(1H，dd，J＝2.72，J＝6.33，H-6)，3.00-3.25(3H，m，CH2-N，H-4)，1.50-1.95(4H，m，2H-1″，2H-2″)，1.38(3H，d，J＝6.34，-CH3′). 實(shí)施例148 (4R，5S，6S)-4-(2″-羥基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鉀
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(9.03mmol，由5.00g，9.03mmol的重氮基前體環(huán)化得到)在無水乙腈(60ml)中的溶液冷卻至0-5℃，在氮?dú)夥障?，?分鐘時(shí)間同時(shí)加入氯磷酸二苯基酯(2.1ml，10.1mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.7ml，9.8mmol)進(jìn)行處理。然后加入少量4-N，N-二甲基氨基吡啶，將混合物攪拌1小時(shí)。然后將溶液冷卻至-20℃，再用另外的N，N-二異丙基乙胺(2.3ml，13.2mmol)，和在乙腈(10ml)中的1.22g(10.7mmol)4(5)-(巰甲基)咪唑依次處理。在-20℃下3小時(shí)和0℃下1小時(shí)后，用乙酸乙酯(500ml)稀釋反應(yīng)混合物，用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，然后減壓下蒸發(fā)。殘留物在硅膠(5×10cm)上層析。用甲苯和乙酸乙酯的混合物(8∶2)洗脫，先得到5.0g(73%)回收的烯醇磷酸酯。然后用乙酸乙酯洗脫，得到1.35g(24%)的油狀標(biāo)題化合物。1H-NMR表明，該產(chǎn)物含有25%的開環(huán)產(chǎn)物，該開環(huán)產(chǎn)物是由硫醇引起的β-內(nèi)酰胺的裂解產(chǎn)生的。
IR(NaCl，壓片)νmax1772(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1708cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.5(SiCH3)，0.9(Si-t-Bu)，1.27(d，J＝6.13H，CH3CHO)，1.6-2.2(m，CH2CH2OSi)，3.09(dd，JH8，H6＝2.45Hz，JH6，H1＝6.63Hz，H-6)，3.5-4.3(m，H-4，H-5，SCH2，CH3CHO，CH2CH2OSi)，4.7(m，烯丙基的CH2)，5.1-5.5和5.8-6.1(2m，烯丙基的CH)，6.9(s，咪唑的H-5)和7.6ppm(s，咪唑的H-2). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-羥基乙基)-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(2.65g，4.26mmol)在四氫呋喃(60ml)中的溶液冷卻至0-5℃，用冰乙酸(3.0ml，52.4mmol)和26ml(26.0mmol)的1.0M氟化四丁銨四氫呋喃溶液依次處理。然后將溶液在5℃下保存12天。用乙酸乙酯(300ml)稀釋反應(yīng)混合物，用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥。減壓下蒸發(fā)溶劑，得到油狀物。將油狀物在硅膠墊(5×5cm)上層析，用0-20%甲醇乙酸乙酯溶液梯度洗脫。所得產(chǎn)物(0.37g，20%)含有一些四丁銨鹽，將該產(chǎn)物直接用于脫保護(hù)反應(yīng)中。
IR(NaCl，壓片)νmax1765(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1700cm-1(酯的C＝O). C.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-羥基乙基)-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鉀
在22℃和氮?dú)夥障拢瑢?4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-羥基乙基)-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.37g，0.94mmol)在無水二氯甲烷(20ml)中的溶液用四(三苯膦)鈀〔O〕和2.1ml(1.25mmol)的0.5M2-乙基己酸鉀乙酸乙酯溶液處理。1.2小時(shí)后，用水(2×50ml)提取反應(yīng)混合物，合并水提取液，在反相硅膠(μ-Bondapak C18，3×15cm)上用水為洗脫劑層析兩次。將UV活性級分冷凍干燥后，得到0.081g(22%)白色非晶形固狀的標(biāo)題卡巴潘尼姆。
HPLC純度100%，μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，pH7.0磷酸鹽緩沖液洗脫，流速1.5ml/分鐘，UV檢測器300nm，保留時(shí)間9.04分鐘; UV(水，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax304nm(10，153); IR(KBr)νmax1750(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.30(d，J＝6.37Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.1(2M，2H，CH2CH2OH)3.3-3.5(m，2H，H-6和H-4重疊)，3.5-3.8(m，2H，CH2CH2OH)，4.03(ABq，JAB＝14.6Hz，Δν＝37.0Hz，2H，SCH2)，4.13(dd與SCH2重疊，JH5，H6＝2.53Hz，JH5，H4＝9.60Hz，1H，H-5)，4.24(m，1H，CH3CHO)，7.10(s，1H，咪唑的H-5)和7.79ppm(s，1H，咪唑的H-2). 實(shí)施例149 (4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(3R)-3-吡咯烷硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(3R)-N-烯丙氧基羰基-3-羥基吡咯烷
將3(R)-羥基吡咯烷鹽酸鹽(8.0g，64.7mmol)溶于冷(5℃)1N NaOH(130ml，130mmol)中，用氯甲酸烯丙酯(9.4g，77.7mmol)在丙酮(80ml)中的溶液滴加處理。加完后將混合物攪拌15分鐘，然后蒸發(fā)掉大部分丙酮。然后用乙酸乙酯提取水溶液。將有機(jī)提取液用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)。通過層析(SiO2/Et2O，然后EtOAc和CH3CN)純化氨甲酸酯粗品，得到6.28g(56.7%)可流動的油狀標(biāo)題化合物。
IR(CH2Cl2)νmax3603，3440(-OH)，1697(-CO2)，1650(＞＝＜). 1H NMR(CDCl3)δ4.8-6.1(5H，烯丙基類型)，4.48(1H，寬 s，H-3)，3.40-3.60(4H，m，2H-2，2H-5)，1.80-2.10(3H，m，2H-4，-OH). B.(3S)-N-烯丙氧基羰基-3-羥基吡咯烷
用吡啶(1.15g，14.5mmol)和三氟甲磺酸酐(4.09g，14.5mmol)處理(3R)-N-烯丙氧基羰基-3-羥基吡咯烷(2.16g，12.62mmol)在CH2Cl2中的冷(5℃)溶液。攪拌15分鐘后，蒸發(fā)溶劑，殘留物在乙醚中研制后過濾。然后蒸發(fā)濾液，將三氟甲磺酸酯粗品溶于冷(5℃)CH2Cl2中，用預(yù)先形成的甲酸(0.87g，18.93mmol)和三乙胺(1.9g，18.93mmol)的CH2Cl2溶液處理。撤去冰浴，將溶液在室溫下攪拌45分鐘。然后用冷水和鹽水洗滌反應(yīng)混合物。干燥(MgSO4)后，蒸發(fā)溶劑，甲酸酯粗品通過層析(SiO2;10%CH3CN的CH2Cl2溶液)純化，得到2.13g(84.7%)產(chǎn)物。將該純化物質(zhì)溶于冷(5℃)四氫呋喃中，滴加1N NaOH(11ml，11mmol)。攪拌10分鐘后，用HCl中和反應(yīng)混合物，用EtOAc稀釋，用冷水和鹽水洗滌。蒸發(fā)溶劑后，產(chǎn)物用層析法(SiO2/EtOAc)純化，得到1.51g(82.5%)標(biāo)題化合物。
IR(CH2Cl2)νmax3605，3440(-OH)，1695(-CO-2)，1650cm-1(＞＝＜). 1H NMR(CDCl3)δ4.40-6.10(5H，烯丙基類型)，4.50(1H，m，H-3)，3.40-3.70(4H，m，2H-2，2H-5)，1.90-2.10(2H，m，2H-4).[α]20D+26.9(130mg/100mL，MeOH). C.(3R)-N-烯丙氧基羰基-3-巰基吡咯烷
將(3S)-N-烯丙氧基羰基-3-羥基吡咯烷(1.51g，8.82mmol)在CH2Cl2中的冷(5℃)溶液用吡啶(0.80g，10.14mmol)處理，接著用三氟甲磺酸酐(2.86g，10.14mmol)處理。攪拌15分鐘后，蒸發(fā)溶劑，殘留物在乙醚中研制，過濾后，蒸發(fā)濾液。將三氟甲磺酸酯粗品重新溶于冷(5℃)CH3CN中，并在鼓入H2S氣泡的同時(shí)，向溶液中滴加三乙胺(1.07g，10.58mmol)。30分鐘后起始原料消失。然后蒸發(fā)溶劑，硫醇粗品經(jīng)層析(SiO2/CH2Cl2)純化，得到1.25g(75.7%)標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ4.60-6.10(5H，烯丙基類型)，3.20-3.90(5H，m，H-3，2H-2，2H-5)，2.20-2.40(1H，m，H-5)，1.80-2.00(1H，m，H-5)，1.71(1H，d，J＝6.65，SH). D.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(3R)-N-(烯丙氧基羰基)-3-吡咯烷硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-(二苯基膦?；?-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.85g，3.25mmol)在DMF(35ml)中的冷(5℃)溶液用(3R)-N-烯丙氧基羰基-3-巰基吡咯烷(1.25g，6.68mmol)處理，然后用二異丙基乙胺(0.863g，6.68mmol)處理。撤去冰浴，在室溫下攪拌15小時(shí)后，將溶液用乙醚(90ml)稀釋，用冷鹽水洗滌三次。干燥(MgSO4)后，蒸發(fā)有機(jī)液，卡巴潘尼姆粗品經(jīng)層析(SiO2;30%CH3CN的CH2Cl2溶液)純化，得到1.27g(77.1%)標(biāo)題化合物。
IR(CH2Cl2)νmax3610(-OH)，2105(-N3)，1778(β-內(nèi)酰胺)，1700(-CO-2)，1650cm-1(＞＝＜). 1H NMR(CDCl3)δ4.5-6.10(10H，2 烯丙基類型)，4.15-4.30(2H，m，H-5，H-1′)，3.70-3.90(2H，m，H-4，CH-S-)，3.10-3.70(7H，m，H-6，-CH2N3，-(CH2)2N-)，1.40-2.40(6H，m，2H-1″，2H-2″，吡咯烷的2H-4)，1.40(3H，d，J＝6.23，-CH3′). E.(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(3R)-3-吡咯烷硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(3R)-N-(烯丙氧基羰基)-3-吡咯烷硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.932g，1.84mmol)在EtOAc(50ml)中的冷(5℃)溶液用0.5M乙基己酸鈉(11.04ml，5.52mmol)和(PPh3)4Pd(0.90g)處理。將溶液在5℃下攪拌20小時(shí)，然后用EtOAc稀釋，用冷水提取。用AcOH將水提取液酸化至pH～7.0，在反相硅膠(微粒形硅膠)上層析。用0-25%CH3CN水溶液洗脫，得到15mg(2.1%)標(biāo)題化合物?！卜蛛x出的主產(chǎn)物是相應(yīng)的單去保護(hù)的酯，(31%)〕。
1H NMR(D2O)δ4.20-4.40(2H，m，H-5，H-1′)，3.95(1H，m，-CH-S)，2.96-3.42(1H，m，H-4)，3.1-3.42(7H，m，H-6，-CH2N3，-(CH2)2N-)，1.50-2.50(6H，m，2H-1″，2H-2″，吡咯烷的2H-4)，1.33(3H，d，J-6.37，-CH3′). 實(shí)施例150 (4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(3R)-3-吡咯烷硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在5℃和60psi氫壓下，在5%Pd/Al2O3(60mg)存在下，將(4R，5S，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-3-〔(3R)-3-吡咯烷硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸(0.54g，0.142mmol)在冷水(15ml)中的溶液氫化1小時(shí)。然后濾出催化劑，用乙酸將濾液酸化至pH5.5。將該酸化后的溶液在反相硅膠(微粒形硅膠)上層析，得到30mg(50.9%)乙酸鹽形式的標(biāo)題化合物。
IR(液體石蠟)νmax1750cm-1(β-內(nèi)酰胺)，1590(-CO-12). 1H NMR(D2O)δ4.20-4.40(2H，m，H-5，H-1′)，3.90-4.10(1H，m，-CH-S)，3.60-3.70(1H，m，H-4)，3.20-3.50(5H，m，H-6，(-CH2)2N-)，3.05(2H，m，CH2-N-)，1.50-2.60(6H，m，2H-1″，2H-2″，吡咯烷的2H-4)，1.33(3H，s，J＝6.40，-CH13)，1.92(3H，s，乙酸). 實(shí)施例151 (4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鉀
A.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5R，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(10.7mmol，由5.0g，10.7mmol重氮基前體環(huán)化制得)在無水乙腈(75ml)中的溶液冷卻至0-5℃，在5分鐘內(nèi)同時(shí)滴加氯磷酸二苯基酯(2.45ml，11.8mmol)和N，N-二異丙基乙胺(2.06ml，11.8mmol)進(jìn)行處理。然后加入少量的4-N，N-二甲基氨基吡啶，將混合物攪拌1小時(shí)。然后將混合物冷卻至-20℃，用另外的N，N-二異丙基乙胺(2.06ml，11.8mmol)和4(5)-(巰甲基)咪唑(1.50g，13.1mmol)在乙腈(10ml)中的溶液依次處理。將該溶液緩慢溫?zé)嶂?-5℃，攪拌3小時(shí)。然后用乙酸乙酯(300ml)稀釋反應(yīng)混合物，用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓蒸發(fā)溶劑，殘留物在硅膠(5×10cm)上層析。先用甲苯和乙酸乙酯的混合物(8∶2)洗脫，得到3.38g(47%)烯醇磷酸酯中間體。用乙酸乙酯進(jìn)一步洗脫，得到1.45g(25%)油狀標(biāo)題化合物。
IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)和1765cm-1(β-內(nèi)酰胺的C＝O). B.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(1.45g，2.72mmol)在四氫呋喃(40ml)中的溶液冷卻至0-5℃，用乙酸(1.0ml，17.5mmol)處理后，用8.2ml(8.2mmol)的1.0M氟化四丁銨四氫呋喃溶液處理。在0-5℃下14天后，將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(400ml)稀釋，用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑，殘留物在硅膠(4×6cm)上層析。用0-20%甲醇乙酸乙酯溶液梯度洗脫，得到0.34g(30%)油狀標(biāo)題化合物。
IR(NaCl，壓片)νmax2100(N3)，1765(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1700cm-1(酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.38(d，J＝6.25Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.1(m，CH2CH2N3)，3.15(dd，JH6，H5＝2.63Hz，JH6，H1＝7.72Hz，1H，H-6)，3.3-3.7(m，3H，H-4和CH2CH2N3重疊)，4.06(ABq，JAB＝14.6Hz，Δν＝45.2Hz，2H，SCH2)，4.1-4.4(m，2H，H-5和CH3CHO 重疊)，4.6-4.9(m，2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.9-6.1(2m，2H，和1H，烯丙基的CH)，6.98(s，1H，咪唑的H-5)和7.59ppm(s，1H，咪唑的H-2). C.(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鉀
在25℃和氮?dú)夥障?，?4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(咪唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.304g，0.81mmol)在二氯甲烷(20ml)中的溶液用四(三苯膦)鈀〔O〕(0.040g)和1.8ml(0.9mmol)的0.5M2-乙基己酸鉀乙酸乙酯溶液處理。1.2小時(shí)后，用水(2×50ml)提取反應(yīng)混合物，合并提取液，在反相硅膠(μ-Bondapak C18，2.5×15cm)上層析，用0-5%乙腈在0.01M pH7.0磷酸鹽緩沖液中的溶液梯度洗脫。收集UV活性級分，濃縮，在同樣的柱上用水代替緩沖液為洗脫劑進(jìn)行脫鹽。冷凍干燥適當(dāng)?shù)募壏?，得?.047g(14%)的白色非晶形固狀的標(biāo)題卡巴潘尼姆。
HPLC純度99%，μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，10%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速1ml/分鐘，UV檢測器302nm，保留時(shí)間6.83分鐘。
UV(水，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax304nm(8，380); IR(KBr)νmax2100(N3)，1745(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1600cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.31(d，J＝6.40Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.1(m，2H，CH2CH2N3)，3.2-3.6(m，4H，H-6，H-4和CH2CH2N3重疊)，4.03(ABq，JAB＝14.52Hz，Δν＝33.6Hz，2H，SCH2)，4.14(dd，JH5，H6＝2.42 Hz，JH5，H4＝9.48Hz，1H，H-5)，4.24(m，1H，CH3CHO)，7.09(s，1H，咪唑的H-5)和7.72ppm(s，1H，咪唑的H-2). 實(shí)施例152 (4R，5S，6S)-4-〔3″-氨基-(2″R或S)-2″-羥基丙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔1′R-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(吡啶-2-基)甲硫基-5-疊氮基-4-(叔丁基二甲基硅氧基)戊酸酯
在冰浴冷卻下，向由P.A.Bartlett等人在J.Am，Chem.Soc.，100，3950(1978)中所述的那樣碘內(nèi)酯化得到的5-疊氮基-4-(叔丁基二甲基硅氧基)戊酸(38g，0.14mmol)在二甲基甲酰胺(250ml)中的溶液中加入2-吡啶甲硫醇(17.5g，0.140mol)、1，3-二環(huán)己基碳化二亞胺(30g，0.15mol)和1-羥基苯并三唑(10g，0.074mol)。將混合物在冷室(5-8℃)中攪拌60小時(shí)，用水(1l)稀釋，用乙醚(5×250ml)提取。合并乙醚提取液，用水(5×250ml)和鹽水(200ml)洗滌，干燥，通過閃式硅膠墊(500g，己烷，5→30%乙酸乙酯/己烷)，得到油狀標(biāo)題化合物(30g)。
IR(壓片)νmax2100(N3)和1690cm-1(C＝O). 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.558-8.525(1H，m，吡啶 H-6)，7.672＝7.586(1H，m，吡啶 H-4)，7.336(1H，d，J＝7.9Hz，吡啶 H-3)，7.199-7.131(1H，m，吡啶 H-5)，4.257(2H，s，CH2S，3.834(1H，5線的中心，J＝5.41-2，CHO)，3.197(2H，ABX的中心，J＝4.5Hz，J＝5.4Hz，J＝12.5Hz，CH2N3)，2.659(2H，t，J＝7.6Hz，CH2CO)，2.01-1.786(2H，m，CH2)，0.893(9H，s，叔丁基)，0.094和0.061ppm(6H，2s，二甲基). B.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-4″-疊氮基-(3″R和S)-3″-叔丁基二甲基硅氧基)丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在冰-MeOH浴冷卻下，將(吡啶-2-基)甲硫基-5-疊氮基-4-(叔丁基二甲基硅氧基)戊酸酯(30g，78.9mmol)在二氯甲烷(500ml)中的溶液用三乙胺(35ml，0.25mol)處理，并用三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯(46ml，0.20mmol)滴加處理。加完后，將混合物在5-8℃下放置18小時(shí)，然后用己烷(1l)稀釋，用水(5×500ml)和鹽水(500ml)洗滌，干燥(MgSO4)，用活性炭處理。將紅色油狀的殘留物(20g，51%，0.040mmol)加到在冰浴冷卻下的新熔融過的氯化鋅(13g，0.096mol)和(3S，4R)-4-乙酰氧基-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(20g，0.069mol)在二氯甲烷(250ml)中的混合物中。將所得混合物在冷室中放置18小時(shí)，用乙醚(1l)稀釋，用飽和NH4Cl水溶液(3×250ml)、水(3×250ml)、冰冷的飽和NaHCO3水溶液、水(250ml)和鹽水(250ml)洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物通過閃式硅膠柱(500g，己烷→50%乙酸乙酯/己烷)，得到分離的非對映異構(gòu)體形式的標(biāo)題化合物(30g各異構(gòu)體，合并收率24%)。
異構(gòu)體1 Rf＝0.33(己烷/乙酸乙酯1/1); IR(壓片)νmax3300-3200(NH)，2700(N3)，1765和1680cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.54-8.51(1H，m，吡啶 H6)，7.64-7.58(1H，m，吡啶 H-4)，7.314(1H，d，J＝7.8Hz，吡啶 H-3)，7.21-7.14(1H，m，吡啶 H-5)，5.845(1H，bs，NH)，4.280，4.269(2H，2 線，部分 ABq，CH2S)，4.2-4.05(1H，m，CHO)，3.832(1H，dd，J＝2.05Hz，J＝6.0Hz，H-4)，3.83-3.70(1H，m，CHO)，3.227(2H，ABX，J＝4.6Hz，J＝5.1Hz，J＝12.5Hz，CH2N3)，3.08-2.95(2H，m，H-3和H-1″)，2.15-1.98，1.67-1.55(2H，m，CH2-1″)，1.025(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.883，0.868(18H，2s，叔丁基)，0.070和0.047ppm(3H和5H，2s，二甲基). 異構(gòu)體2 Rf＝0.42(己烷/乙酸乙酯1/1); IR(壓片)νmax3250(NH)，2100(N3)，1765和1685cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.55-8.52(1H，m，吡啶 H-6)，7.67-7.58(1H，m，吡啶 H-4)，7.32(1H，d，J＝7.8Hz，吡啶 H-3)，7.21-7.14(1H，m，吡啶 H-5)，5.90(1H，bs，NH)，4.336，4.267，4.245，4.174(2H，ABq，J＝14.0Hz，CH2S)，4.20-4.13(1H，m，CHO)，3.794(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝6.9Hz，H-4)，3.82-3.75(1H，m，CHO)，3.207(2H，ABX，J＝3.8Hz，J＝5.2Hz，J＝12.8Hz，CH2S)，3.048(1H，bt，J＝2.5Hz，H-3)，2.86-2.75(1H，m，H-1″)，2.10-1.96，1.85-1.70(2H，2 組 m，CH2-4)，1.050(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.883，0.857(18H，2s，叔丁基)和0.047ppm(12H，s，二甲基). C.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-4″-重氮基-(3″R或S)-3″-叔丁基二甲基硅氧基丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在冰浴冷卻下，將(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(吡啶-2-基)甲硫基羰基-4″-疊氮基-(3″R或S)-3″-叔丁基二甲基硅氧基)丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(2.38g，3.9mmol)在四氫呋喃(25ml)中的溶液用30%H2O2水溶液(1.3ml，15.6mmol)處理，接著緩慢加入1M NaOH水溶液(11.7ml，11.7mmol)。將混合物攪拌30分鐘，然后用1N HCl水溶液(14ml)酸化，用乙酸乙酯(3×30ml)提取。合并有機(jī)提取液，用水(2×20ml)、1M NaHSO3水溶液(2×20ml)、水(30ml)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，得到油狀標(biāo)題化合物(1.8g，92%)。
IR(CH2Cl)νmax3400(NH)，2100(N3)，1765，1740和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.329(1H，bs，NH)，4.23-4.14(1H，m，CHO)，3.867(1H，dd，J-2.2Hz，J＝6.4Hz，H-4)，3.26(2H，ABX的中心，J＝4.2Hz，J＝4.7Hz，J＝12.7Hz，CH2N3)，3.13(1H，m的中心，H-3)，2.70-2.60(1H，m，H-1″)，2.04-1.7(2H，m，CH2-1″)，1.171(3H，d，J＝6.3Hz，CH3)，0.898，0.869(18H，2s，叔丁基)，0.109，0.099，0.070和0.062ppm(12H，4s，CH3). D.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(4-疊氮基-(3R或S)-3-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
將(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-4″-疊氮基-(3″R或S)-3″-叔丁基二甲基硅氧基丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(1.8g，3.6mmol)在甲苯(25ml)中的溶液用羰基二咪唑(642mg，3.96mmol)處理，然后攪拌1.5小時(shí)。除去溶劑，殘留物再次溶于甲苯中。再次除去溶劑，殘留物在高真空下干燥。向所得?；溥蛑屑尤氡釂蜗┍ユV鹽(4.5g，14.4mmol)在苯(40ml)中的預(yù)先干燥過的溶液(在3

和4

分子篩上加熱2.5小時(shí))中。將混合物加熱1.6小時(shí)(浴溫75℃)，用乙醚和乙酸乙酯的1∶1混合物稀釋，用冰冷的水(2×40ml)、冰冷的1N HCl水溶液(40ml)、水(2×40ml)和鹽水(40ml)洗滌，干燥(MgSO4)，得到標(biāo)題化合物粗品(2.29g，＞100%)，將該粗品直接用于下一步反應(yīng)中。
IR(CH2Cl2)νmax3420(NH)，2120(N3)，1770(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1720，1660和1630cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ12.113(0.5H，bs，OH enol)，6.03-5.80(1H，m，乙烯基 H)5.927(1H，bs，NH)，5.387-5.253(2H，m，乙烯基 H)，5.058(2.6H，s，烯醇的烯H enol)，4.665-4.616(2H，m，烯丙基 H)，4.24-4.12，3.883-3.764(2H，m，H-4和H-1′)，3.775，3.764(d，J＝2.1Hz，部分 H-4)，3.680，3.600，3.592，3.513(2H，ABq，J＝15.9Hz，乙酰乙酸酯的CH2)，3.357-3.269(1H，m，部分 CH2N3)，3.187-3.01(2H，m，H-1″和部分CH2N3)，2.955(0.5H，dd，J＝2.1Hz，J＝4.1Hz，H-3)，2.905(0.5H，dt，J＝2.6Hz，部分 H-3)，2.256-2.146，2.065-1.91，1.836-1.6(2H，3 組 m，CH2-4)，1.180(1.4H，d，J＝6.2Hz，CH3)，1.086(1.6H，d，J＝6.3Hz，CH3))，0.896和0.866(18H，2s，叔丁基)，0.108，0.091，0.087，0.069和0.056ppm(12H，5s，二甲基). E.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(4-疊氮基-(3R或S)-3-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在冰浴冷卻下，將(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(4-疊氮基-(3R或S)-3-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-3″-烯丙氧基羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(2.2g，3.6mmol)在CH3CN(22ml)中的溶液先用三乙胺(0.51ml，3.6mmol)處理，然后用甲苯磺?；B氮(709mg，3.6mmol)在CH3CN(3ml)中的溶液滴加處理。將混合物攪拌1.5小時(shí)，然后減壓下蒸發(fā)溶劑。殘留物用己烷研制，濾除甲苯磺酰胺固體，用己烷洗滌。蒸發(fā)己烷后，殘留物通過閃式硅膠柱(60g，己烷，10%→40%乙醚/己烷)，得到油狀標(biāo)題化合物。
IR(CH2Cl2)νmax3410(NH)，2150(N2)，2100(N3)，1765(β-內(nèi)酰胺的C＝O)1715和1650cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-5.832(1H，m，乙烯基 H)，5.862(1H，bs，NH)，5.40-5.29(2H，m，乙烯基 H)，4.72-4.689(2H，m，CH2烯丙基)，4.215-4.07(2H，m，CHO和H-1′)，3.805-3.71(1H，m，H-1″)，3.189(2H，ABX，J＝3.9Hz，J＝5.5Hz，J＝12.7Hz，CH2N3)，3.023(1H，bt，J＝2.5Hz，H-3)，2.175-2.03，1.73-1.57(2H，2 組 m，CH2-1″)，1.162(3H，d，J＝6.4Hz，CH3)，0.891，0.865(18H，2s，叔丁基)，0.094，0.062和0.053ppm(12H，3s，二甲基). F.(4R，5R，6S)-4-〔3″-疊氮基-(2″R或S)-2″-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
在Rh(OAc)2(17mg)存在下，將(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-〔4-疊氮基-(3R或S)-3-叔丁基二甲基硅氧基丙基〕-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(690mg，1.1mmol)在苯(20ml)中的溶液加熱回流45分鐘。加入另外的催化劑(17mg)，再加熱30分鐘。濾除催化劑，減壓下除去苯，得到油狀標(biāo)題化合物(700mg，100%)。
IR(CH2Cl2)νmax2110(N3)，1770和1745cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.0-5.79(1H，m，乙烯基 H)，5.38-5.24(2H，m，乙烯基 H)，4.72-4.88(2H，m，烯丙基 CH2)，4.633(1H，s，CH-2)，4.58-4.28(1H，m，H-1′)，4.325(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝8.4Hz，H-5)，3.91-3.82(1H，m，CHO)，3.40-3.2(2H，m，CH2N3)，3.246(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝4.3Hz，H-6)，2.839(1H，bq，J＝7.9Hz，H-4)，1.84-1.72(2H，m，CH2-4)，1.270(3H，d，J＝6.2Hz，CH3)，0.897(18H，s，叔丁基)，0.112，0.099，0.092和0.083ppm(12H，4s，二甲基). G.(4R，5S，6S)-4-〔3″-疊氮基-(2″R或S)-2″-叔丁基二甲基硅氧基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-〔3″-疊氮基-(2″R或S)-2″-叔丁基二甲基硅氧基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(得自690mg，1.1mmol重氮基前體)在CH3CN(8ml)中的溶液用氯磷酸二苯基酯(0.26ml，1.32mmol)、二異丙基乙胺(0.23ml，1.32mmol)和少量4-N，N-二甲基氨基吡啶(20mg)滴加處理。將混合物攪拌1小時(shí)，然后在1小時(shí)內(nèi)依次加入兩份氰乙硫醇(130mg，1.5mmol和52mg，0.60mmol)和二異丙基乙胺(0.26ml，1.50mmol)和0.10ml，0.60mmol)。將混合物攪拌1.5小時(shí)，用乙酸乙酯(25ml)稀釋，用冰冷的水(3×10ml)、1M NaHSO3水溶液(3×10ml)、水(2×10ml)、1N HCl水溶液(10ml)、水(2×10ml)、1M NaHCO3水溶液(10ml)、水(10ml)和鹽水(10ml)洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物通過閃式硅膠柱(25g，石油醚，10→40%乙醚/石油醚)，得到油狀標(biāo)題化合物(442mg，62%)。
IR(CH2Cl2)νmax2250(CN)，2110(N3)，1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.03-5.84(1H，m，乙烯基 H)，5.48-5.20(2H，m 乙烯基 H)，4.85-4.6(2H，m，烯丙基 CH2)，4.38-4.3(1H，m H-1′)，4.284(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.5Hz，H-5)，3.65-3.50(1H，m，CHO)，3.47-2.93(5H，m，H-4，CH2N3，SCH2)，3.205(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝6.4Hz，H-6)，2.699，2.664，2.632(2H，m，CH2CN)，1.90-1.75(2H，m，CH2-4)，1.245(3H，d，J＝6.2Hz，CH3)，0.935和0.898(18H，2s，叔丁基)，0.143和0.091(12H，2s，二甲基). H.(4R，5S，6S)-4-〔3″-疊氮基-(2″R或S)-2″-羥基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在冰-MeOH浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-〔3″-疊氮基-(2″R或S)-2″-叔丁基二甲基硅氧基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(440mg，0.68mmol)在四氫呋喃(6ml)中的溶液用冰乙酸(0.94ml，17mmol)處理，并用1M氟化四丁銨四氫呋喃溶液(6.8ml，6.8mmol)滴加處理。將混合物在8℃下攪拌15天，然后用乙酸乙酯(40ml)稀釋，用冰冷的水(4×10ml)、1M NaHCO3水溶液(2×10ml)、水(10ml)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。殘留物在制備性硅膠板上層析(乙酸乙酯/己烷4/1)，得到油狀標(biāo)題化合物(185mg，65%)。
IR(CH2Cl2)νmax3600，3450(OH)，2250(CN)，2110(N3)，1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1710cm-1(C＝O); 1H NMR(CDCl3，200MHz)δ6.04-5.87(1H，m，乙烯基 H)，5.493-4.24(2H，m，乙烯基 H)，4.88-4.64(2H，m，烯丙基 H)，4.294(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.7Hz，H-5)，4.3-4.17(1H，m，H-1′)，3.9-3.67(2H，m，CHO和H-4)，3.382，3.353(2H，2 線，CH2N3)，3.35-3.23(1H，m，SCH2質(zhì)子之一)，3.159(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝8.0Hz，H-6)，3.05-2.91(1H，m，SCH2質(zhì)子之一)，3.91(1H，bs，OH)，2.81-2.63(2H，m，CH2CN)，2.377(1H，bs，OH)，1.94-1.64(2H，m，CH2-4)和1.388ppm(3H，d，J＝6.2Hz，CH3). I.(4R，5S，6S)-4-〔3″-疊氮基-(2″R或S)-2″-羥基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉
在冰浴冷卻下，將(4R，5S，6S)-4-〔3″-疊氮基-(2″R或S)-2″-羥基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(180mg，0.43mmol)在CH2Cl2(7ml)中的溶液用Pd(PPh3)4處理，并用N-甲基苯胺(0.11ml，0.86mmol)滴加處理。將混合物攪拌30分鐘，然后用0.1M pH7.0磷酸鹽緩沖液水溶液(10ml)和乙醚(20ml)稀釋。用另外的pH7.0緩沖液(2×5ml)和水(5ml)提取有機(jī)液。合并水相，用乙醚洗滌，通過μ-Bondapak C18反相柱(50g，水→2%CH3CN/水)，冷凍干燥后，得到粉狀標(biāo)題化合物(105mg，61%)。
IR(液體石蠟)νmax3500-3100(OH)，2100(N3)，1745(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1595cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.343，4.33(d，J＝2.5Hz，部分 H-5)，4.35-4.21(2H，m，H-1′和H-5)，3.9-3.8(1H，m，CHO)，3.679-3.583(1H，m，H-4)，3.435，3.422(部分 H-6，d，J＝2.5Hz)，3.48-3.31(3H，m，H-6和CH2N3)，3.257-3.134，3.087-2.91(2H，2 組 m，SCH2)，2.91-2.83(2H，m，CH2CN)，1.99-1.876，1.783-1.655(2H，2 組 m，CH2-4)和1.321ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). J.(4R，5S，6S)-4-〔3″-氨基-(2″R或S)-2″-羥基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在冰浴冷卻下和45-50psi氫壓下，用5%Pd/氧化鋁為催化劑，將(4R，5S，6S)-4-〔3″-疊氮基-(2″R或S)-2″-羥基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸鈉(105mg，0.26mmol)在水(20ml)中的溶液在帕爾氫化器上振蕩1小時(shí)。濾除催化劑，用水(2×2ml)洗滌。用0.1M NaH2PO4水溶液將反應(yīng)混合物水溶液的pH值調(diào)至7.05。中和后的溶液通過μ-Bondapak C18反相柱(50g，水)，冷凍干燥后，得到白色粉狀的標(biāo)題化合物(65mg，43%)。
純度98.2%，用HPLC測得(保留時(shí)間5.92分鐘，μBondapak C18，10μ，KH2PO40.01M，pH7.4); UV(水)λmax300(8008); IR(液體石蠟)νmax3600-3100(OH，NH2)，2250(CN)，1750(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1590cm-1(C＝O); 1H NMR(D2O，200MHz)δ4.312(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝9.7Hz，H-5)，4.32-4.207(1H，m，H-1′)，3.948-3.849(1H，m CHO)，3.68-3.575(1H，m，H-4)，3.380(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝6.6Hz，H-6)，3.235，3.219，3.169，3.154(1H，部分 ABX，J＝3.1Hz，J＝13.2Hz，CH2N3)，3.23-3.11(1H，m，SCH2質(zhì)子之一)，3.008-2.95(2H，m，部分 CH2CN和部分 SCH2)，2.88-2.82(2H，m，CH2CN)，2.002-1.699(2H，m，CH2-4)和1.328ppm(3H，d，J＝6.4Hz，CH3). 實(shí)施例153 (4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-芐硫基-4-〔2″-(N-芐基-N-甲基)氨基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-3-芐硫基-4-〔2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-4-〔2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(4.75g，9.03mmol)在CH3CN(50ml)中的冷(0℃)溶液用ClPO(OPh)2(2.06ml，9.93mmol)處理，接著用N，N-二異丙基乙胺(1.73ml，9.93mmol)和4-N，N-二甲基氨基吡啶(10mg)處理。將混合物在0℃和氬氣下攪拌2.5小時(shí)，然后向溶液中鼓入氬氣泡10分鐘。再依次用苯甲硫醇(2.54ml，21.58mmol)和N，N-二異丙基乙胺(3.8ml，21.68mmol)處理烯醇磷酸酯，并在0℃下攪拌20小時(shí)。將反應(yīng)混合物用EtOAc(300ml)稀釋，用冷的1M NaHSO3、水和鹽水依次洗滌，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)溶劑，得到糖漿狀物，在用己烷填充的硅膠(9×10cm)上層析，用己烷和EtOAc的混合物(85∶15，梯度)洗脫，得到泡沫狀標(biāo)題化合物(4.35g，76.2%)。
1H NMR(200MHz，CDCl37.24)δ0.05(s，12H，Si(CH3)2)，0.857，0.86(2s，18H，SiC(CH3)2)，1.26(d，3H，CH3)，1.62-1.78;1.98.2.12(m，2H，CH2)，3.05(dd，1H，H-6，J6，1′＝6.93Hz)，3.45-3.6(m，1H，H-4)，3.53-3.8(中心 m，2H，CH2O)，4.03(dd，1H，H-5，J5，6＝2.38Hz，J4，5＝9.21Hz)，4.1(緊湊的AB，2H，SCH2)，4.18(m，1H，H-1′)，4.59-4.82(m，2H，OCH2，烯丙基)，5.17-5.46(m，2H，＝CH2，烯丙基)，5.83-6.02(m，1H，CH＝，烯丙基)，7.16-7.34(m，5H，苯基). B.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-3-芐硫基-4-(2″-羥基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在氬氣氛下，將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-3-芐硫基-4-〔2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(4.35g，6.88mmol)在無水四氫呋喃(65ml)中的冷(0℃)溶液依次用乙酸(2.36ml，41.26mmol)和1M氟化四丁銨四氫呋喃溶液(20.63ml，20.63mmol)處理。將混合物在0℃下攪拌5小時(shí)，在-20℃下放置18小時(shí)，然后在0℃下用1M NaHCO3溶液(42ml，42mmol)中和。將混合物用EtOAc(3×75ml)提取，合并有機(jī)相，依次用冷的1M NaHCO3、水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)溶劑，得到泡沫體，在用CH2Cl2填充的硅膠(7.5×8cm)上層析，用CH2Cl2和CH3CN的混合物(8∶2，梯度)洗脫，得到泡沫狀標(biāo)題化合物(2.49g，69.9%)。
1H NMR(200MHz，CDCl3，7.24)δ0.04，0.05(2 s，6H，Si(CH3)2)，0.86(s，9H，SiC(CH3)2)，1.26(d，3H，CH3)，1.63-1.8;1.98-2.14(m，2H，CH2)，3.12(dd，1H，H-6，J6，1′＝7.46Hz)，3.45(m，1H，H-4，J＝2.19，9.45，11.5Hz)，3.63，3.82(m的中心，2H，CH2O)，4.01(dd，1H，H-5，J5，6＝2.59Hz，J4，5＝9.45Hz)，4.03-4.13(AB，2H，SCH2，J＝13.26Hz)，4.155(m，1H，H-1′)，4.59-4.84(m，2H，OCH2，烯丙基)，5.18-5.46(m，2H，＝CH2烯丙基)，5.83-6.03(m，1H，CH＝，烯丙基)，7.19-7.38(m，5H，苯基). C.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-3-芐硫基-4-〔2″-(N-芐基-N-甲基)氨基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在氬氣氛下，將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-(叔丁基二甲基硅氧基乙基)〕-3-芐硫基-4-〔2″-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.5g，0.97mmol)在無水CH2Cl2(15ml)中的溶液冷卻至-78℃，依次用二異丙基乙胺(0.185ml，1.06mmol)和(CF3SO2)2O(0.18ml，1.06mmol)處理。在-78℃下1小時(shí)后，加入N-芐基-N-甲基胺(0.75ml，5.8mmol)，并將混合物在-78℃下攪拌1小時(shí)，在0℃下攪拌5小時(shí)，然后在5℃下放置16小時(shí)。將反應(yīng)混合物用EtOAc(200ml)稀釋，用冷水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)溶劑，得到糖漿狀物，在用CH2Cl2填充的硅膠(4.5×13cm)上層析。用CH2Cl2和EtOAc的混合物(7∶3，梯度)洗脫標(biāo)題化合物，得到糖漿狀物(0.4g，66.7%)。
1H NMR(200MHz，CDCl37.24)δ0.036，0.045(2 s，6H，Si(CH3)2)，0.86(s，9H，SiC(CH3)3)，1.07(d，3H，CH3，J＝6.16Hz)，2.26(s，3H，NCH3)，3.18(m，1H，H-4，J＝1.94，9.27，11.37Hz)，3.44-3.56(AB，2H，NCH2，JAB＝13.15Hz)，3.94(dd，1H，H-5，J5，6＝2.47Hz，J4，5＝9.32Hz)，4.0-4.1(AB，2H，SCH2，JAB＝13.21Hz)，4.14(m，1H，H-1′)，4.7-4.8(m，2H，OCH2，烯丙基)，5.19-5.48(m 2H，＝CH2，烯丙基)，5.85-6.04(m，1H，CH＝，烯丙基)，7.19-7.78(m，10H，苯基). D.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-芐硫基-4-〔2″-(N-芐基-N-甲基)氨基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在氬氣氛下，將(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3-芐硫基-4-〔2″-(N-芐基-N-甲基)氨基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.4g，0.65mmol)在無水四氫呋喃(8ml)中的冷(0℃)溶液依次用HOAc(0.22ml，3.89mmol)和1M氟化四丁銨四氫呋喃溶液(1.95ml，1.95mmol)處理。將混合物在0-5℃下攪拌168小時(shí)，然后在0℃下用1M NaHCO3溶液(3.9ml，3.9mmol)中和。將混合物用EtOAc(3×80ml)提取，合并有機(jī)提取液，依次用冷的1M NaHCO3、水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)溶劑，得到膠狀物，在用CH2Cl2填充的硅膠(3.2×12cm)上層析。先用CH2Cl2和EtOAc的混合物(100∶0→0∶100，梯度)洗脫，最后用EtOAc和丙酮的混合物(8∶2，梯度)洗脫標(biāo)題化合物，得到泡沫體(0.093g，28.3%)。
1H NMR(200MHz，CDCl37.24)δ1.13(d，3H，CH3，J＝6.28Hz)，1.94-2.39(m，2H，CH2N)，2.34(s，3H，NCH3)，2.9(dd，1H，H-6，J6，1′＝7.77Hz)，3.23(m，1H，H-4)，3.44，3.52(AB，2H，NCH2，JAB＝13.1Hz)，3.77(dd，1H，H-5，J4，5＝9.56Hz，J5，6＝2.57Hz)，3.88(m，1H，H-1′)，3.98-4.09(AB，2H，SCH2，JAB＝13.59Hz)，4.59-4.86(m，2H，OCH2，烯丙基)，5.19-5.45(m，2H，＝CH2，烯丙基)，5.84-6.03(m，1H，CH＝，烯丙基)，7.24-7.32(m，10H，苯基). E.(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-芐硫基-4-〔2″-(N-芐基-N-甲基)氨基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在氬氣氛下，向(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-芐硫基-4-〔2″-(N-芐基-N-甲基)氨基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.093g，0.18mmol)在CH2Cl2(5ml)中的冷(0℃)溶液中加入Pd〔Ph3P〕4(0.026g，0.023mmol)，然后加入0.5M2-乙基己酸鹽的乙酸乙酯溶液(0.37ml，0.18mmol)。將混合物在0℃下攪拌50分鐘，用乙醚(50ml)稀釋，用0.1M pH7.0磷酸鹽緩沖液(3×10ml)提取。合并水提取液，通過μ-Bondapak C18反相硅膠(3.2×7cm)。用水和CH3CN的混合物(7∶3，梯度)洗脫標(biāo)題化合物，得到蓬松固體(0.067g，78.2%)。
純度99.9%，HPLC，UV檢測設(shè)置在λmax304nm，μ-Bondapak C18(4mm×30cm)，pH6.8磷酸鹽緩沖液，流速1ml/分鐘，保留時(shí)間7.22分鐘。
UVλmax304nm. IR(液體石蠟)νmax1750cm-1β-內(nèi)酰胺的C＝O 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.12(d，3H，CH3，J＝6.35Hz)，1.38，1.94(中心 m，2H，CH2)，2.38(s，3H，NCH3)，2.47(中心 m，2H，CH2CN)，3.04(m，重疊，1H，H-6)，3.05(m，重疊，1H，H-4)，3.72(緊湊的AB，2H，NCH2)，4.05(dd，1H，H-5)，3.96，4.09(AB，2H，SCH2，JAB＝13.8Hz)，4.11(m，1H，H-1′)，7.35-7.54(m，10H，苯基). 實(shí)施例154 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(3-N-甲基氨基丙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
A.5-N-烯丙氧羰基-N-甲基氨基戊酸
將1-甲基-2-哌啶酮(13.0g，0.115mmol)和100ml 6N鹽酸的混合物加熱回流8小時(shí)。蒸發(fā)溶劑至干，并將殘留的如M.Maeda等人在Chem.Pharm.Bull.，32，4157(1984)中所述的氨基酸用冷水(0-5℃，100ml)稀釋。用固體碳酸鈉將pH值調(diào)至8.5，在保持pH值在8-8.5的同時(shí)，滴加氯甲酸烯丙酯(12.2ml，0.115mmol)。在0℃下30分鐘和22℃下30分鐘后，用乙醚洗滌反應(yīng)混合物，用濃鹽酸將水相的pH值調(diào)至3。水溶液用乙醚(3×200ml)提取，合并有機(jī)液，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到22.9g(93%)油狀標(biāo)題化合物。
IR(NaCl，壓片)νmax1740，1710和1680cm-1(sh); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.5-1.7(m，4H，CH2-3和4)，2.35-2.45(m，2H，CH2-2)，2.90(s，3H，NCH3)，3.25-3.35(m，2H，CH2N)，4.55-4.6(m，2H，烯丙基的CH2)，5.15-5.35和5.85-6.05ppm(2m，2H和1H，烯丙基的CH). B.5-N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基戊酰氯
在22℃下，將5-N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基戊酸(35.26g，0.164mol)在無水二氯甲烷(175ml)中的溶液用草酰氯(15.7ml，0.180mol)滴加處理。10分鐘后，加入4滴N，N-二甲基甲酰胺，并將反應(yīng)混合物攪拌2小時(shí)，同時(shí)氣體的放出緩慢停止。減壓下蒸發(fā)溶劑和過量的試劑，殘留的酰氯直接用于下一步反應(yīng)。
IR(NaCl，壓片)νmax1800(酰氯的C＝O)，1740(sh)，1705和1670cm-1(sh); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.5-1.8(m，4H，CH2-3和4)，2.90(s，3H，NCH3)，2.9-3.0(m，2H，CH2-2)，3.29(t，2H，CH2N)，4.55-4.6(m，2H，烯丙基的CH2)，5.15-5.35和5.8-6.0ppm(2m，2H和1H，烯丙基的CH). C.2-吡啶甲基-5-(N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)硫醇-戊酸酯
在0℃和氮?dú)夥障?，?-吡啶甲硫醇(20.5g，0.164mol)在無水二氯甲烷(350ml)中的溶液先用吡啶(16.0ml，0.197mol)處理，接著用10分鐘時(shí)間用5-N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基戊酰氯(46.0g，0.164mol)在二氯甲烷(75ml)中的溶液滴加處理。在0-5℃下1.5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑，得到油狀物，用甲苯和乙酸乙酯的混合物(1∶1)為洗脫劑通過硅膠墊(7.5×12cm)過濾。蒸發(fā)UV活性級分，得到48.4g(92%)的透明油狀標(biāo)題化合物。
IR(NaCl，壓片)νmax1700和1690(sh)cm-1; 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.5-1.7(m，4H，CH2-3和4)，2.61(t，J＝7.0Hz，2H，CH2-2)，2.87(s，3H，NCH3)，3.26(t，J＝6.6Hz，2H，CH2-5)，4.24(s，2H，CH2Pyr)，4.55-4.6(m，2H，烯丙基的CH2)，5.15-5.3和5.9-6.05(2 m，2H和1H，烯丙基的H)，7.1-7.2(m，1H，吡啶的H-5)，7.33(d，J＝7.8Hz，1H，吡啶的H-3)，7.62(m，1H，吡啶的H-4)和8.5-8.55ppm(m，1H，吡啶的H-6). D.2-吡啶甲基-5-(N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)硫醇戊酸酯的叔丁基二甲基硅基烯醇醚
將2-吡啶甲基-5-(N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)硫醇戊酸酯(51.3g，0.159mol)在無水二氯甲烷(225ml)中的溶液冷卻至-10℃，先用三乙胺(44ml，0.315mol)處理，接著在40分鐘內(nèi)用三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯(56ml，0.243mol)滴加處理。溫?zé)嶂?2℃后，將溶液攪拌3小時(shí)。然后用己烷(1l)稀釋反應(yīng)混合物，用冷水(3×300ml)洗滌。合并水洗液，用己烷(300ml)提取，合并有機(jī)提取液，用鹽水洗滌后干燥(MgSO4)。用活性炭處理，然后減壓下蒸發(fā)溶劑，得到暗色油狀的甲硅烷基烯醇醚粗品，將其直接用于下一步反應(yīng)中。1H-NMR表明，該產(chǎn)物為E和Z異構(gòu)體的1∶1混合物。
IR(NaCl，壓片)νmax1705cm-1氨甲酸酯的C＝O 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ2.83和2.85(2s，NCH3)，3.96和4.03(2s，CH2Pyr)，4.85(t，J＝5Hz，CH＝CSO)和5.0ppm(寬 t，CH＝CSO). E.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1R)-1-(2-吡啶基)甲硫基羰基-4-(N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在22℃下，向新熔融的氯化鋅(35.0g，0.256mol)在無水二氯甲烷(400ml)中的懸浮液中加入固狀4R-乙酰氧基-3S-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(36.5g，0.127mol)，然后加入甲硅烷基烯醇醚粗品(0.159mol)在無水二氯甲烷(50ml)中的溶液。將混合物在22℃下攪拌18小時(shí)。然后用水、飽和氯化銨、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌混合物，干燥(MgSO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑，得到油狀物，在硅膠(15×12cm)上層析。用50-100%乙酸乙酯甲苯溶液梯度洗脫，得到34.16g(49%)油狀標(biāo)題化合物。1H-NMR表明，該產(chǎn)物為β和α-異構(gòu)體的84∶16混合物。
IR(NaCl，壓片)νmax1765(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1705(sh)和1685cm-1(氨甲酸酯和硫酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3，主要異構(gòu)體，β)δ0.04(s，6H，SiCH3)，0.85(s，9H，Si-t-Bu)，0.97(d，J＝6.33Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.8(m，4H，丁基的CH2-2和3)，2.83(s，3H，NCH3)，2.83(m與NCH3重疊，1H，丁基的H-1)，3.03(寬 t，1H，H-3)，3.1-3.4(m，2H，CH2N)，3.79(dd，JH4，H3＝1.96Hz，JH4，H1＝7.16Hz，1H，H-4)，4.1-4.25(m，1H，CH3CHO)，4.26(s，2H，CH2Pyr)，4.55-4.6(m，2H，烯丙基的CH2)，5.15-5.35(m，2H，烯丙基的CH)，5.85-6.1(m，2H，NH和烯丙基的CH)，7.15-7.20(m，1H，吡啶的H-5)，7.32(d，J＝7.78Hz，1H，吡啶的H-3)，7.55-7.65(m，1H，吡啶的H-4)和8.5-8.55ppm(m，1H，吡啶的H-6). F.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1R)-1-羧基-4-(N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮的咪唑酰胺
在22℃和氮?dú)夥障拢瑢?3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1R)-1-羧基-4-(N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(13.56g，31.6mmol)在無水乙腈(300ml)中的溶液用1，1-羰基二咪唑(5.64g，34.8mmol)處理。3小時(shí)后，減壓下蒸發(fā)溶劑，咪唑酰胺粗品直接用于下一步反應(yīng)中。
IR(NaCl，壓片)νmax1760，1740和1700cm-1. G.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1R)-1-羧基-4-(N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在0-5℃下，將(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1R)-1-(2-吡啶基)甲硫基羰基-4-(N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(32.16g，58.5mmol)在無水四氫呋喃(250ml)中的溶液先用30%過氧化氫(20ml，0.23mol)滴加處理(加入時(shí)間5分鐘)，然后用64ml(64.0mmol)的1N NaOH水溶液滴加處理(加入時(shí)間20分鐘)。將反應(yīng)混合物在22℃下攪拌1小時(shí)。然后加入己烷(500ml)，并再將混合物攪拌10分鐘。收集形成的水相，有機(jī)相用100ml 0.1N氫氧化鈉溶液提取。合并水提取液，冷卻至0-5℃，用濃鹽酸酸化至pH2，用乙酸乙酯(2×350ml)提取。合并有機(jī)提取液，用1M亞硫酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑，得到13.56g(52%)泡沫狀標(biāo)題酸粗品。1H-NMR表明，該產(chǎn)物為β和α-異構(gòu)體的8∶2混合物。
IR(NaCl，壓片)νmax1740(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1700(寬，氨甲酸酯和酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.05和0.06(2s，6H，SiCH3)，0.86(s，9H，Si-t-Bu)，1.15(d，J＝6.30Hz，3H，CH3CHO)，1.4-1.8(m，4H，丙基的CH2-2和3)，2.6-2.7(m，1H，丁基的H-1)，2.89(s，3H，NCH3)，3.12(寬 t，1H，H-3)，3.2-3.5(m，2H，CH2N)，3.86(dd，JH4，H3＝1.84Hz，JH4，H1＝6.38Hz，1H，H-4)，4.19(dq，JH，CH3＝6.30，JH，H3＝3.8Hz，1H，CH3CHO)，4.55-4.6(m，2H，烯丙基的CH2)，5.15-5.35和5.8-6.05(2m，2H和1H，烯丙基的CH)和6.53ppm(寬 s，1H，NH). H.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-｛(1R)-1-〔(3-N-烯丙氧羰基-N-甲基氨基)丙基〕-3-烯丙氧羰基-2-氧代丙基｝氮雜環(huán)丁烷-2-酮
將咪唑粗品(31.6mmol)在無水乙腈(50ml)中的溶液加到丙二酸單烯丙酯鎂鹽(16.0g，51.5mmol)在無水苯(300ml)中的混合物中，并將所得混合物在65℃下保持16小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻后，用乙酸乙酯(500ml)稀釋，用冷的1N鹽酸水溶液、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌。干燥(MgSO4)后，減壓下蒸發(fā)有機(jī)相，殘留油狀物直接用于下一步反應(yīng)。將一小部分在硅膠上層析(洗脫劑為甲苯-乙酸乙酯9∶1→1∶1)，得到油狀標(biāo)題化合物。1H-NMR表明，該油狀物為酮和烯醇形式的1∶1混合物。
IR(NaCl，壓片)νmax1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1705cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.05和0.06(2s，SiCH3)，0.86(s，Si-t-Bu)，1.09和1.16(2d，J＝6.31Hz，J＝6.29Hz，CH3CHO)，1.3-1.8(m，丁基的CH2-1和2)，2.1(m，H-氧代丙基酮形式的H-1)，2.88(s，NCH3)，2.8-3.1(m，H-3)，3.2-3.3(m，CH2N)，3.55(s，氧代丙基酮形式的CH2-3)，3.82(2 dd 重疊，H-4)，4.1(m，1H，CH3CHO)，4.57和4.63(2m，烯丙基的CH2)，5.08(s，氧代丙基烯醇式的CH-3)，5.15-5.4(m，烯丙基的CH)和5.8-6.1ppm(m，烯丙基的CH和NH). I.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-｛(1R)-1-〔(3-N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)丙基〕-3-烯丙氧基羰基-3-重氮基-2-氧代丙基｝氮雜環(huán)丁烷-2-酮
將(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-｛(1R)-1-〔(3-N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)丙基〕-3-烯丙氧基羰基-2-氧代丙基｝氮雜環(huán)丁烷-2-酮(得自上步的粗品，31.6mmol)在乙腈(100ml)中的溶液冷卻至0-5℃，用對甲苯磺?；B氮(6.45g，32.7mmol)在乙腈(35ml)中的溶液處理。然后用5分鐘時(shí)間滴加N，N-二異丙基乙胺(4.6ml，33.0mmol)，并將所得混合物在22℃攪拌45分鐘。減壓下蒸發(fā)溶劑，殘留物用乙醚和己烷的混合物(1∶1，100ml)研制。濾集結(jié)晶狀對甲苯磺酰胺，用乙醚和己烷的1∶1混合物洗滌。減壓下蒸發(fā)濾液和洗液，得到重氮基氮雜環(huán)丁烷粗品，將其直接用于下一步反應(yīng)。將一小部分在硅膠上純化(洗脫劑、甲苯-乙酸乙酯1∶1)，得到油狀標(biāo)題化合物。
IR(NaCl，壓片)νmax2140(N2)，1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1710和1650cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.05和0.06(2s，6H，SiCH3)，0.86(s，9H，Si-t-Bu)，1.15(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.3-1.9(m，4H，丙基的CH2-1和2)，2.87(s，3H，NCH3)，3.03(m，1H，H-3)，3.23(寬 t，J＝6.7Hz，CH2N)，3.84(dd，JH4，H3＝2.09Hz，JH4，H1＝5.51Hz，1H，H-4)，4.0-4.15(m，1H，氧代丙基的H-1)，4.15-4.25(m，1H，CH3CHO)，4.5-4.6和4.7-4.8(2m，2 x 2H，烯丙基的CH2)，5.1-5.3(m，4H，烯丙基的CH)和5.8-6.1ppm(m，3H，烯丙基的CH和NH). J.(3S，4R)-4-｛(1R)-1-〔(3-N-烯丙氧羰基-N-甲基氨基)丙基〕-3-烯丙氧基羰基-3-重氮基-2-氧代丙基｝-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
將(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-｛(1R)-1-〔(3-N-烯丙氧羰基-N-甲基氨基)丙基〕-3-烯丙氧基羰基-3-重氮基-2-氧代丙基｝-氮雜環(huán)丁烷-2-酮(31.6mmol，得自上步的粗品)在乙醇(175ml)中的溶液冷卻至0-5℃，用1N HCl水溶液(100ml)處理。在5℃下18小時(shí)后，用固體碳酸氫鈉將pH值調(diào)至6，減壓下蒸掉乙醇。殘留物用乙酸乙酯(300ml)稀釋，有機(jī)相用0.2M pH7.0磷酸鹽緩沖液和鹽水洗滌。干燥(MgSO4)后，減壓下蒸發(fā)溶劑，殘留物在硅膠(9×11cm)上層析。用甲苯和乙酸乙酯的混合物(1∶1)洗脫，得到5.92g(從酸開始5步的收率為43%)的油狀標(biāo)題化合物。
IR(NaCl，壓片)νmax3450 and 3280(寬 OH和NH)，2140(N2)，1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1700(寬)和1645cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.29(d，J＝6.33Hz，1H，CH3HO)，1.4-1.8(m，4H，丙基的CH2-1和2)，2.88(s，3H，NCH3)，2.9(寬，1H，H-3)，3.1-3.4(m，2H，CH2N)，3.80(dd，JH4，H3＝1.98Hz，JH4，H1＝6.95Hz，1H，H-4)，3.9-4.0(m，1H，氧代丙基的H-1)，4.1(m，1H，CH3CHO)，4.55-4.6和4.7-4.75(2m，2 x 2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.45和5.9-6.1(2m，4H和2H，烯丙基的CH)和6.6ppm(寬 s，NH). K.(2R，4R，5R，6S)-4-〔(3″-N-烯丙氧羰基-N-甲基氨基)丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
將(3S，4R)-4-｛(1R)-1-〔(3-N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)丙基〕-3-烯丙氧基羰基-3-重氮基-2-氧代丙基｝-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(2.00g，4.58mmol)在無水苯(80ml)中的溶液在辛酸銠二聚體(0.050g)存在下加熱回流30分鐘，減壓下蒸發(fā)溶劑，將標(biāo)題雙環(huán)狀產(chǎn)物直接用于下一步反應(yīng)中。
IR(NaCl，壓片)νmax3450(OH)，1762(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1645(sh)和1690cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.43(寬 d，J＝6.1Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，2.9(m，1H，丙基的H-4)，2.92(s，3H，NCH3)，3.1-3.4(m，3H，H-6和CH2N)，4.1-4.3(m，1H，CH3CHO)，4.3 寬 dd，1H，H-5)，4.56和4.66(2m，2 x 2H，烯丙基的CH2)，5.15-5.4和5.8-6.15ppm(2m，4H和2H，烯丙基的CH). L.(4R，5S，6S)-4-〔(3″-N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)丙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在0-5℃和氮?dú)夥障?，?分鐘時(shí)間，向步驟K中制得的雙環(huán)酮粗品(4.58mmol)在無水乙腈(40ml)中的溶液中同時(shí)加入氯磷酸二苯基酯(1.04ml，5.02mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.88ml，5.06mmol)。加入少量4-N，N-二甲基氨基吡啶，將混合物攪拌45分鐘。然后再依次加入另外的N，N-二異丙基乙胺(0.80ml，4.60mmol)和β-巰基丙腈(0.40g，4.60mmol)在乙腈(2ml)中的溶液，將所得混合物攪拌1小時(shí)。用乙酸乙酯(300ml)稀釋反應(yīng)混合物，用冷水、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑，得到油狀物，在硅膠(5×10cm)上層析。用乙酸乙酯/甲苯(1∶1→EtOAc)梯度洗脫，得到1.45g(67%)油狀標(biāo)題化合物。
IR(NaCl，壓片)νmax3450(OH)，2250(CN)，1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1700cm-1(酯和氨甲酸酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.44(寬 d，J＝6.0 Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，2.67(寬 t，2H，SCH2CH2CN)，2.94(s，3H，NCH3)，2.9-3.5(m，4H，H-6，H-4和CH2N)，4.06(m，1H，CH3CHO)，4.28(dd，JH5，H6＝2.78Hz，JH5，H4＝9.79Hz，1H，H-5)，4.57和4.76(2m，2 x 2H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.8-6.1ppm(2m，4H和2H，烯丙基的CH). M.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(3″-N-甲基氨基丙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸
在22℃和氮?dú)夥障?，?4R，5S，6S)-4-〔(3″-N-烯丙氧基羰基-N-甲基氨基)丙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.760g，1.59mmol)在無水二氯甲烷(25ml)中的溶液用N-甲基苯胺(1.0ml，9.23mmol)處理，然后用四(三苯膦)鈀〔O〕(0.060g)處理。3小時(shí)后，用水(2×25ml)和0.05M pH6.0磷酸鹽緩沖液(35ml)提取反應(yīng)混合物。合并水提取液，用0-10%乙腈水溶液為梯度洗脫劑在反相硅膠(3×13cm)上層析。冷凍干燥第一個(gè)級分，得到白色非晶形固狀的標(biāo)題化合物(0.156g，27%)，〔α〕22D+57.9°(c1.0，H2O)。
HPLC純度99.7%，μ-Bondapak C18，3.9mm×30cm，洗脫劑5%CH3CN-H2O pH7.4磷酸鹽緩沖液，流速0.7ml/分鐘，UV檢測器302nm，保留時(shí)間6.37分鐘。
UV(水pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax300nm(9，050); IR(KBr)νmax2250(CN)，1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1590cm-1(羧酸根的C＝O); 1H NMR(200MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.5-2.0(m，4H，丙基的CH2-1和2)，2.72(s，3H，CH3N)，2.75-2.9(m，2H，SCH2CH2CN)，2.9-3.25(m，2H，CH2N)，3.40(dd，JH6，H5＝2.61Hz，JH6，H1＝6.53Hz，1H，H-6)，3.42(m與H-6重疊，1H，H-4)和4.2-4.35ppm(m，2H，H-5和CH3CHO重疊). 實(shí)施例155 用適當(dāng)?shù)闹虚g體和巰基化合物重復(fù)前文和實(shí)施例的一般步驟，由此制得下式化合物或其鹽






實(shí)施例156 用適當(dāng)?shù)闹虚g體和巰基化合物，重復(fù)前文和實(shí)施例的一般步驟，由此制得下式化合物或其鹽






實(shí)施例157 (4R，5S，6S)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(2″S)-(2″-吡咯烷基)甲基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
A.(S)-1-烯丙氧羰基-2-(羥甲基)吡咯烷
在0-5℃下，用45分鐘時(shí)間，用氯甲酸烯丙酯(1.2當(dāng)量，0.06mol，6.6ml)在丙酮(60ml)中的溶液滴加處理(S)-2-(羥甲基)吡咯烷(5.05g，0.05mol)在冷的1.0N氫氧化鈉溶液(1當(dāng)量，50ml)中的溶液。15分鐘后，蒸發(fā)丙酮，殘留物用乙酸乙酯(2×75ml)提取。合并有機(jī)相，用水、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑，用Kugelrohr裝置蒸餾(0.1mmHg，80-100℃)，得到8.5g(92%)粉紅色油狀的標(biāo)題氨甲酸酯 IR(NaCl)νmax3425(OH)，1690cm-1(氨甲酸酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.5-2.1(m，4H，CH2-3和CH2-4)，3.3-3.6(2 x m，2H，CH2-OH)，3.6-3.7(m，2H，N-CH2)，3.9-4.1(m，1H，CH-2)，4.5-4.6(m，2H，烯丙基的CH2)，5.15-5.35和5.8-6.0ppm(2m，2H和1H，烯丙基的CH). B.(S)-1-烯丙氧基羰基-2-甲酰基-吡咯烷
在氬氣氛下，將草酰氯(4ml，44mmol)在無水二氯甲烷(96ml)中的溶液冷卻至-60℃，用二甲基亞砜(6.8ml，88mmol)在二氯甲烷(16ml)中的無水溶液滴加處理(大約5分鐘)。將反應(yīng)混合物攪拌2分鐘，用6分鐘時(shí)間滴加(S)-1-烯丙氧基羰基-2-(羥甲基)-吡咯烷(7.4g，40mmol)在無水二氯甲烷(40ml)中的溶液，然后再攪拌15分鐘。加入三乙胺(28ml，200mmol)，將反應(yīng)混合物攪拌5分鐘，然后溫?zé)嶂潦覝?大約60分鐘)。加入冷水(200ml)，用乙醚(2×200ml)提取反應(yīng)混合物。合并有機(jī)層，用稀的1N HCl(200ml)、水、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑，得到6.2g(85%)油狀標(biāo)題醛 IR(NaCl，壓片)νmax1735(甲酰基的C＝O)和1700cm-1(氨甲酸酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.8-2.3(m，4H，CH2-3和CH2-4)，3.4-3.7(m，2H，CH2-N)，4.1-4.4(m，1H，H-2)，4.5-4.7(m，2H，烯丙基的CH2)，5.1-5.4和5.8-6.1(2m，2H和1H，烯丙基的CH)，9.51和9.57ppm(2d，1H，CHO，J＝2.4Hz和J＝1.65Hz). C.3-〔(2′S)-2′-(1′-烯丙氧基羰基吡咯烷基)〕丙烯酸乙酯
在氬氣氛下，將(S)-1-烯丙氧基羰基-2-甲?；量┩?6.2g，33.84mmol)在無水甲醇(30ml)中的溶液冷卻至0-5℃，然后用(乙酯基亞甲基)三苯基正膦(1.2當(dāng)量，14.2g，40.6mmol)分批處理。將反應(yīng)混合物在0℃攪拌2小時(shí)，在25℃下攪拌2小時(shí)，然后蒸發(fā)甲醇。殘留物用無水乙醚(100ml)稀釋，濾出固體，用乙醚洗滌，將濾液蒸發(fā)至干。通過閃式層析(硅膠230-400目，6.5×11cm，甲苯-EtOAc100∶0→80∶20梯度洗脫)純化殘留物，得到7.83g(91.4%)油狀標(biāo)題烯丙酯 [α]24D＝-38.6°(C1.1，CHCl3); IR(NaCl，壓片)νmax1700-1720(寬，氨甲酸酯和酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.27(t，J＝7.17Hz，3H，酯的CH3)，1.6-2.4(m，4H，CH2-3和CH2-4)，3.4-3.7(m，2H，CH2N)，4.17(q，J＝7.06Hz，2H，酯的CH2)，4.5-4.6(m，3H，烯丙基的CH2和CH-2)，5.1-7.2ppm(一組 m，5H，烯丙基的CH和丙烯酸酯的CH). D.3-〔(2″S)-2′-(1′-烯丙氧基羰基吡咯烷基)〕丙酸甲酯
在氬氣氛下，將3-〔(2′S)-2′-(1′-烯丙氧基羰基吡咯烷基)〕烯丙酸乙酯(7.7g，30.4mmol)和鎂屑(7.4g，304mmol)在無水甲醇(250ml)中的混合物攪拌4小時(shí)。放熱反應(yīng)發(fā)生并且內(nèi)溫升高，直至甲醇回流。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，小心地加入1N HCl，直到固體物完全溶解，殘留物用乙醚提取，然后用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑，得到6.8g(92.7%)透明油狀的標(biāo)題酯，其純度適用于下一步反應(yīng)。將其中一部分用Kugelrohr裝置蒸餾(50μm，100℃) [α]24D＝-47.1°(C＝0.94，CHCl3); IR(NaCl，壓片)νmax1735(酯的C＝O)和1700cm-1(氨甲酸酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.5-2.4(m，8H，吡咯烷的CH2-3′和CH2-4′和-CH2CH2CO2CH3)，3.3-3.6(m，2H，CH2-N)，3.66(s，3H，酯的CH3)，3.9-4.0(m，1H，吡咯烷的CH-2)，4.5-4.6(m，2H，烯丙基的CH2)，5.15-5.35和5.8-6.0ppm(2m，2H和1H，烯丙基的CH). E.3-〔(2′S)-2′-(1′-烯丙氧基羰基吡咯烷基)〕丙酸
在室溫下，將3-〔(2′S)-2′-(1′-烯丙氧基羰基吡咯烷基)〕丙酸甲酯(6.5g，26.9mmol)在甲醇(27ml)中的溶液用3N氫氧化鈉溶液(1.3當(dāng)量，11.7ml)滴加處理。45分鐘后，減壓下蒸發(fā)掉大部分甲醇，殘留物用乙醚(25ml)洗滌。用1N HCl溶液將水相酸化至pH1.8，然后用乙醚(2×25ml)提取。合并有機(jī)相，用鹽水洗滌后干燥(MgSO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑，得到5.55g(90.8%)透明油狀的標(biāo)題酸 [α]24D＝-36.5°(Cl，CHCl3); IR(NaCl，壓片)νmax1650-1740cm-1(寬，酸和氨甲酸酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.6-2.1和2.35-2.45(2m，8H，吡咯烷的CH2-3′和CH2-4′和-CH2-CH2CO2H)，3.35-3.5(m，2H，CH2-N)，3.9-4.0(m，1H，吡咯烷的CH-2′)，4.55-4.6(m，2H，烯丙基的CH2)，5.17-5.35和5.84-6.04(2m，2H和1H，烯丙基的CH). F.3-〔(2′S)-2′-(1′-烯丙氧基羰基吡咯烷基)〕丙酰氯
將3-〔(2′S)-2′-(1′-烯丙氧基羰基吡咯烷基)〕丙酸(5.5g，24.42mmol)在無水二氯甲烷(13ml)中的溶液用草酰氯(2.4ml，2.7mmol)滴加處理。加入一滴N，N-二甲基甲酰胺，將所得混合物在22℃下攪拌18小時(shí)。減壓下蒸發(fā)溶劑，得到橙色油狀的酰氯粗品，將其直接用于下一步反應(yīng)中 IR(NaCl，壓片)νmax1800(酰氯的C＝O)和1695cm-1(氨甲酸酯的C＝O). G.3-〔(2″S)-2″-(1″-烯丙氧基羰基吡咯烷基)〕硫羥丙酸2′-吡咯甲基酯
將2-吡啶甲硫醇(2.9g，23.2mmol)在無水二氯甲烷(25ml)中的溶液冷卻至0-5℃，在氬氣氛下用吡啶(2.4ml，29.3mmol)處理，接著滴加3-〔(2″S)-2′-(1′-烯丙氧基羰基吡咯烷基)〕丙酰氯粗品(大約24.42mmol)在無水二氯甲烷(5ml)中的溶液。2小時(shí)后，用乙醚(100ml)稀釋反應(yīng)混合物，用冷水(2×50ml)、飽和碳酸氫鈉(50ml)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑，得到油狀物，在硅膠(230-400目，4×11cm)上層析。用甲苯/乙酸乙酯(100∶0→70∶30)梯度洗脫，得到7.36g(94%)黃色油狀的標(biāo)題硫酯 IR(NaCl，壓片)νmax1695cm-1(寬，C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.6-2.1(m，6H，吡咯烷的CH2-3″和CH2-4″和CH2-3)，2.5-2.7(m，2H，CH2-2)，3.3-3.5(m，2H，CH2-N)，3.8-4.0(m，1H，吡咯烷的CH-2″)，4.24(s，2H，S-CH2)，4.5-4.6(m，2H，烯丙基的CH2)，5.15-5.35和5.8-6.1(2m，2H和1H，烯丙基的CH)，7.12-7.19(m，1H，吡啶的H-5)，7.33(d，J＝7.81Hz，1H，吡啶的H-3)，7.6-7.7(m，1H，吡啶的H-4)和8.52ppm(寬 d，J＝4.4Hz，吡啶的H-6). H.3-〔(2″S)-2″-(1″-烯丙氧基羰基吡咯烷基)〕硫羥丙酸2′-吡啶甲基酯叔丁基二甲基硅基烯醇醚
將3-〔(2″S)-2″-(1″-烯丙氧基羰基吡咯烷基)〕硫羥丙酸2′-吡啶甲基酯(5.06g，22.27mmol)在無水二氯甲烷(30ml)中的溶液冷卻至-10℃，在氬氣氛下用三乙胺(7.8ml，55.7mmol)處理，接著在30分鐘內(nèi)用三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅基酯(10.2ml，44.54mmol)滴加處理。然后將暗色溶液在22℃下攪拌3小時(shí)。然后用己烷(100ml)稀釋反應(yīng)混合物，用冷水(3×100ml)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑，得到暗色油狀的標(biāo)題物質(zhì)粗品，將其直接用于下一步中 IR(NaCl，壓片)νmax1680-1700(寬，氨甲酸酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ3.95(寬 s，SCH2)和4.8和4.95ppm(2m，CH＝CSO). I.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1R)-1-(2-吡啶基)甲硫基羰基-2-(N-烯丙氧基羰基-(2″S)-2″-吡咯烷基)乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在5℃和氬氣氛下，向新熔融過的氯化鋅(2.44g，17.9mmol)在無水二氯甲烷(45ml)中的懸浮液中加入4R-乙酰氧基-3S-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮固體(14.9mmol，4.3g)，接著加入在步驟H中制得的甲硅烷基烯醇醚粗品(22mmol)在無水二氯甲烷(10ml)中的溶液。將所得混合物緩慢溫?zé)嶂?2℃，攪拌18小時(shí)。然后用冷的飽和氯化銨、冷水、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌反應(yīng)混合物。干燥(MgSO4)并減壓蒸發(fā)溶劑后，得到了紅色油狀殘留物，在硅膠(5.2×11cm)上用乙酸乙酯/甲苯(0∶100→100∶0)梯度洗脫層析。得到透明的紅色油狀的標(biāo)題化合物(2g，24%)。1H-NMR表明，該產(chǎn)物為純的β-異構(gòu)體 IR(NaCl，壓片)1765(內(nèi)酰胺的C＝O)和1680-1700cm-1(寬，氨甲酸酯的C＝O和硫酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.04(s，6H，SiCH3)，0.85(s，9H，Si-t-Bu)，0.94(d，J＝5.8Hz，CH3CHO)，1.6-2.2和2.6-2.8(寬 m，6H，B-CH2和吡咯烷基的CH2-3′和CH2-4′)，2.95(m，1H，H-3)，3.2-3.5(m，2H，吡咯烷基的N-CH2-5′)，3.8(m，2H，H-4和吡咯烷基的CH-2″)，4-4.2(m，1H，CH3CHO)，4.6(m，2H，5-CH2)，5.1-5.4(m，2H，烯丙基的CH2)，5.8-6.0(m，1H，烯丙基的CH)，7.1-7.4(m，3H，吡啶的H-3和H-5以及烯丙基的CH)，7.6(m，1H，吡啶的H-4)和8.54(m，1H，吡啶的H-6). J.(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1R)-1-羧基-2-(N-烯丙氧基羰基-(2″S)-2″-吡咯烷基)乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
將(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1R)-1-(2-吡啶基)甲硫基羰基-2-(N-烯丙氧基羰基-(2″S)-2″-吡咯烷基)乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(2g，3.56mmol)在四氫呋喃(12ml)中的溶液冷卻至5℃，用30%H2O2(1.2ml)緩慢處理。然后滴加1.0M氫氧化鈉水溶液，再將反應(yīng)混合物攪拌30分鐘。用己烷類稀釋反應(yīng)混合物，收集水相。用冷水再次提取有機(jī)相，合并水提取液，用己烷類洗滌，冷卻至0-5℃，用1.0N鹽酸酸化至pH2。用乙酸乙酯(2×)提取該溶液，合并有機(jī)提取液，用1M亞硫酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。干燥(MgSO4)后，減壓下蒸發(fā)溶劑，得到1.388g酸粗品，為半固體狀殘留物。用乙酸乙酯和己烷類的混合物結(jié)晶，得到白色固狀的標(biāo)題酸m.p.＝153-154℃; [α]24D＝-2°(C＝0.2，CHCl3); IR(KBr)νmax1740(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1705(氨甲酸酯的C＝O)和1665cm-1羧酸的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.05和0.06(2s，3H，SiCH3)，0.86(s，9H，Si-t-Bu)，1.23(d，J＝6.26Hz，3H，CH3CHO)1.6-2.2(m，5H，吡咯烷基的CH2-3′和CH2-4′以及β-CH2的一個(gè)H)，2.65(m，1H，β-CH2的一個(gè)H)，2.80(m，1H，H-3)，3.5(m，2H，吡咯烷基的N-CH2)，3.9(m，1H，H-4)，4.15(m，2H，吡咯烷基的CH和CH3CHO)，4.6(m，2H，烯丙基的CH2)，5.3(m，2H，烯丙基的CH)，5.9-6.0(m，1H，烯丙基的CH)，6.1(寬 s，1H，NH)，分析計(jì)算值C22H38N2O6SiC 58.12;H 8.42;N 6.16實(shí)測值C 57.52;H 8.33;N 6.04. K.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-｛(1R)-1-〔(N-烯丙氧基羰基-(2″R)-2″-吡咯烷基)甲基〕-3-烯丙氧基羰基-2-氧代丙基｝氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在22℃和氬氣氛下，將(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1R)-1-羧基-2-(N-烯丙氧基羰基-(2″S)-2″-吡咯烷基)乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(1.1g，2.42mmol)在無水乙腈(21ml)中的溶液用1，1-羰基二咪唑(0.450g，2.75mmol)處理，并將所得混合物攪拌2小時(shí)。減壓下蒸發(fā)溶劑，得到N-?；溥虼制罚缓髮⒃摯制啡苡跓o水乙腈(3ml)中，并將之加到丙二酸單烯丙基酯鎂鹽(1.3g，4mmol)在無水苯(20ml)中的混合物中，并將所得混合物在65℃下加熱18小時(shí)。用乙酸乙酯稀釋混合物，用0.1N HCl、冷水、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到油狀標(biāo)題物質(zhì)粗品，放置固化，將其直接用于下一步中。1H NMR表明，該產(chǎn)物為酮和烯醇形式的1∶1混合物 IR(NaCl 壓片)νmax1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1700cm-1(寬，氨甲酸烯丙酯和烯丙酯) 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.09和1.17ppm，2d，J＝6.22Hz和6.30Hz，CH3CHO). L.(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-｛(1R)-1-〔(N-烯丙氧基羰基-(2″R)-2″-吡咯烷基)甲基〕-3-烯丙氧基羰基-3-重氮基-2-氧代丙基｝氮雜環(huán)丁烷-2-酮
在0-5℃下，將(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-｛(1R)-1-〔(N-烯丙氧基羰基-(2″R)-2″-吡咯烷基)甲基〕-3-烯丙氧基羰基-2-氧代丙基｝氮雜環(huán)丁烷-2-酮(2.3mmol)在無水乙腈(5ml)中的溶液用對甲苯磺酰基疊氮(0.54g，2.76mmol)在乙腈(7ml)中的溶液處理。加入三乙胺(0.38ml，2.76mmol)，并將溶液在22℃攪拌2小時(shí)。然后減壓下蒸發(fā)溶劑，殘留物用乙醚和己烷的1∶1冷(0℃)混合物(30ml)研制。收集晶狀對甲苯磺酰胺，用乙醚和己烷類的混合物洗滌。合并濾液和洗液，減壓下蒸發(fā)，得到1.57g油狀標(biāo)題物質(zhì)粗品，將其直接用于下一步中。TLC(甲苯∶乙酸乙酯，1∶1)(硅膠)RF＝0.49。
M.(3S，4R)-4-｛(1R)-1-〔(N-烯丙氧基羰基-(2″S)-2″-吡咯烷基)甲基〕-3-烯丙氧基羰基-3-重氮基-2-氧代丙基｝-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮
將(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-｛(1R)-1-〔(N-烯丙氧基羰基-(2″S)-2″-吡咯烷基)甲基〕-3-烯丙氧基羰基-3-重氮基-2-氧代丙基｝氮雜環(huán)丁烷-2-酮粗品(大約2.3mmol)在乙醇(22ml)中的溶液冷卻至0-5℃，用1N HCl水溶液(12ml)處理。在5℃下18小時(shí)后，用碳酸氫鈉固體將pH值調(diào)至8，殘留物用乙酸乙酯稀釋，用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，殘留物在硅膠(2.2×11cm)上層析，先用乙酸乙酯∶甲苯(10∶90)→乙酸乙酯梯度洗脫，然后用CH3CN洗脫，得到0.75g(74%，從酸開始的三步收率)米色泡沫狀的標(biāo)題物質(zhì) IR(NaCl，壓片)νmax2140(＝N2)，1755(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1710和1690cm-1烯丙酯的C＝O; 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.32(d，J＝6.27Hz，3H，CH3CHO)，1.6-2.1(m，6H，吡咯烷基的CH2CH2CH2N和吡咯烷基的CH2)，2.77(寬 s，1H，OH)，3.01(d，1H，J＝7.44Hz，H-3)，3.3-3.4(m，2H，吡咯烷基的CH2-N)，3.8-4.2(m，4H，吡咯烷基的N-CH，CH3CHO，H-4，氧代丙基的H-1)，4.4-4.8(2m，4H，烯丙基的CH2)，5.2-5.5和5.8-6.0(2m，4H和2H，烯丙基的CH)和6.5ppm(m，1H，NH). N.(2R，4R，5R，6S)-4-〔(N-烯丙氧基羰基-(2″S)-2″-吡咯烷基)甲基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯
在氬氣氛下，將(3S，4R)-4-｛(1R)-1-｛(N-烯丙氧基羰基-(2″S)-2″-吡咯烷基)甲基〕-3-烯丙氧基羰基-3-重氮基-2-氧代丙基｝-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮(0.421g，1.0mmol)在無水苯(18ml)中的溶液用辛酸銠二聚體(15mg)處理，并加熱回流20分鐘。減壓下蒸發(fā)溶劑，得到油狀的雙環(huán)酮，將其直接用于下一步中 IR(NaCl，壓片)νmax1765(β-內(nèi)酰胺的C＝O)，1740(Sh)和1670cm-1; 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.47(d，3H，J＝6.05Hz，CH3CHO)，1.5-2.1(m，6H，吡咯烷基的CH2CH2CH2N和吡咯烷基的CH2)，2.5-2.7(m，1H，H4)，3.2-3.7(m，吡咯烷基的CH2-N和H-6)，3.9-4.3(m，2H，吡咯烷基的N-CH，CH3CHO)，4.41(dd，JH5，H6＝2.84，JH5，H4＝9.0Hz，1H，H-5)，4.5-4.7(m，4H，烯丙基的CH2)，5.2-5.4和5.9-6.0(2m，4H和2H，烯丙基的CH). O.(4R，5S，6S)-4-〔(N-烯丙氧基羰基-(2″S)-2″-吡咯烷基)甲基〕-3-〔N-烯丙氧基羰基-(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯
在0-5℃和氬氣氛下，用1分鐘時(shí)間，向(2R，4R，5R，6S)-4-〔(N-烯丙氧基羰基-(2″S)-2″-吡咯烷基)甲基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯(0.785mmol，由0.330g，0.785mmol重氮基前體環(huán)化制得)在無水乙腈(10ml)中的溶液中同時(shí)滴加氯磷酸二苯基酯(0.18ml，0.863mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.15ml，0.863mmol)。加入少量4-N，N-二甲基氨基吡啶，將混合物攪拌1.5小時(shí)。然后加入三甲基硅基氯(0.110ml，0.863mmol)，再加入N，N-二異丙基乙胺(0.150ml，0.863mmol)，并在5℃下將反應(yīng)混合物攪拌2小時(shí)。然后加入另外的N，N-二異丙基乙胺(0.275ml，1.57mmol)，接著加入2-巰基乙基氨甲酸烯丙酯(0.25g，1.5mmol)在乙腈(1ml)中的溶液，并將所得混合物在0-5℃下攪拌24小時(shí)。用乙酸乙酯(50ml)稀釋反應(yīng)混合物，用冷的0.01N HCl水溶液(50ml)、稀的亞硫酸氫鈉溶液、水、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑，得到油狀物，在硅膠(2.5×10cm)上層析。用乙酸乙酯/甲苯(0∶100→乙酸乙酯)梯度洗脫，得到0.10g(22%)油狀標(biāo)題卡巴潘尼姆 IR(NaCl，壓片)νmax1775(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1700cm-1(寬，烯丙酯的C＝O); 1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.44(d，3H，CH3CHO)，1.5-2.1(m，6H，吡咯烷基的CH2CH2CH2N和吡咯烷基的4-CH2)，2.7-3.0(2m，2H，S-CH2)，3.1-3.6(m，5H CH2NH2，CH2N(吡咯烷基)和H-4)，3.9-4.3(2m，2H，CH3CHO和吡咯烷基的CHN)，4.35(dd，JH5，H6＝3.10Hz，JH5，H6＝10.37Hz，1H，H-5)，4.5-4.9(2m，6H，烯丙基的CH2)，5-5.5和5.8-6.1ppm(2m，9H，烯丙基的CH). P.(4R，5S，6S)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(2″S)-(2″-吡咯烷基)甲基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸乙酸鹽
在22℃和氬氣氛下，將(4R，5S，6S)-4-〔(N-烯丙氧基羰基-(2″S)-2″-吡咯烷基)甲基〕-3-〔N-烯丙氧基羰基-(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸烯丙酯(0.1g，0.177mmol)在無水二氯甲烷(10ml)中的溶液用氫化三正丁基錫(0.206g，0.708mmol)在二氯甲烷(1ml)中的溶液、乙酸(0.40ml，0.708mmol)和四(三苯膦)鈀〔O〕(20mg)處理。20分鐘后，用水(2×10ml)提取反應(yīng)混合物，合并水提取液，用二氯甲烷(20ml)洗滌。減壓下濃縮后，水提取物在反相硅膠(μ-Bondapak C18，2×10cm)上用0.01N乙酸為洗脫劑進(jìn)行層析。冷凍干燥純級分，得到55mg(79%)灰白色非晶形固狀的標(biāo)題化合物 HPLC純度95.0%，μ-Bondapak C18，3.9mm×30mm，5%CH3CN-H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液洗脫，流速1ml/分鐘，UV檢測器300nm，保留時(shí)間8.48分鐘; UV(H2O，pH7.4磷酸鹽緩沖液)λmax294nm(6953); IR(KBr)νmax1760(β-內(nèi)酰胺的C＝O)和1600cm-1(羧酸的C＝O); 1H NMR(400MHz，D2O)δ1.33(d，J＝6.35Hz，3H，CH3CHO)，1.73-1.82和2.36-2.43(2x m，2H，β-CH2)，2.00-2.20(m，4H，吡咯烷基的CH2-3′和CH2-4′)，2.90-2.97和3.08-3.15(2m，3H，S-CH2和H-6)，3.26-3.39(m，4H，吡咯烷基的CH2-NH2和CH2-N)，3.50-3.53(m，1H，H-5)，3.58-3.65(m，1H，吡咯烷基的N-CH)和4.24-4.32ppm(m，2H，CH3CHO和H-5). 實(shí)施例158-318 按照上文和實(shí)施例的一般方法，用本發(fā)明所例舉的適當(dāng)選擇的起始原料和試劑，制備下面給定通式的4-取代烷基卡巴潘尼姆化合物，其1H-NMR數(shù)據(jù)如各表中所示。
























































實(shí)施例319 用適當(dāng)?shù)闹虚g體和巰基化合物，重復(fù)上文和實(shí)施例中的一般方法步驟，由此制得了具有下式結(jié)構(gòu)的化合物或其鹽






實(shí)施例320 用適當(dāng)?shù)闹虚g體和巰基化合物，重復(fù)上文和實(shí)施例中的一般方法步驟，由此制得了具有下式的化合物或其鹽








權(quán)利要求
1、下式所示的化合物或其無毒的可藥用的鹽
其中
R1是氫，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2NH2，
A為未取代的或羥基取代的直鏈或支鏈C1-10亞烷基或間插有選自氧、硫和氮的雜原子的直鏈或支鏈C1-10亞烷基；
R2是羥基，鹵素，C1-4烷氧基，氰基，疊氮基，季銨基，-NR5R6，
氮雜環(huán)丁烷基或選自通過其碳原子來連接的雜芳基和雜脂環(huán)基的5或6員雜環(huán)基；
B是一個(gè)直鏈或支鏈的C1-6亞烷基，或者當(dāng)R3通過它的碳原子連接到硫原子上時(shí)它就代表一個(gè)直接的化學(xué)鍵；
R3是一個(gè)有機(jī)基團(tuán)的殘基；
R4是氫，一個(gè)可除去的羧基保護(hù)基或是一個(gè)生理上可水解的酯基；
R5和R6各自獨(dú)立地是氫，C1-6烷基，C1-4烷氧基，羥乙基，疊氮基乙基，氨基乙基，并且當(dāng)R5是氫或C1-4烷基時(shí)，R6是羥基，C1-4烷氧基，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，取代的C1-4烷基(其中所說的烷基取代基選自羥基，疊氮基，氨基，胍基，氰基，羧基，亞胺甲基和苯基)或一種氨基酸或肽的?；鶜埢?；或者R5，R6和它們所連接的氮原子一起是一個(gè)未取代的或取代的雜環(huán)基，它具有1至2個(gè)環(huán)，每個(gè)環(huán)上可以有多至4個(gè)雜原子，這些雜原子可獨(dú)立地選自氧、氮和硫，其中所說的取代基選自C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羥基，鹵素，氨基，氰基，羧基，亞胺甲基，脲基，氨基甲?；?，C1-4烷氨基和氨基(C1-4)烷基；
W是一個(gè)直接的鍵，氧，硫或NR10；
Y是氧或NR10；
Z是氫，羥基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，-NR7R8，氨基(C1-4)烷基，疊氮基(C1-4)烷基或羥基(C1-4)烷基；
R7和R8各自獨(dú)立地是氫，C1-4烷基，羥基，芐氧基或鏈烷?；?；
R10是氫，C1-4烷基，C1-4烷基氨基或二(C1-4)烷基氨基。
2、權(quán)利要求1的下式化合物或其無毒的可藥用的鹽
其中
R1是氫，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2NH2，
A是未取代的或羥基取代的直鏈或支鏈的C1-10亞烷基或者間插有選自氧、硫和氮的雜原子的直鏈或支鏈C1-10亞烷基;
R2是羥基，鹵素，C1-4烷氧基，氰基，疊氮基，季銨基，-NR5R6，
氮雜環(huán)丁烷基或選自通過其碳原子來連接的雜芳基和雜脂環(huán)基的5或6員雜環(huán)基;
B是一個(gè)直鏈或支鏈的C1-6亞烷基，或者當(dāng)R3通過它的碳原子連接到硫原子上時(shí)它就代表一個(gè)直接的化學(xué)鍵;
R3為氫，C3-6環(huán)烷基或取代的C3-6環(huán)烷基，C5-6環(huán)烯基或取代的C5-6環(huán)烯基，苯基或取代的苯基，羥基，C1-4烷氧基，C1-4烷硫基，苯硫基或取代的苯硫基，鹵素，氰基，硝基，-NR7R8，
，或是一個(gè)選自雜芳環(huán)或雜環(huán)脂環(huán)的，未取代或取代的雜環(huán)基團(tuán)
它有1至2個(gè)環(huán)，在每個(gè)環(huán)中有4至7個(gè)環(huán)成員，并在每個(gè)環(huán)中可含有多至4個(gè)雜原子，這些雜原子獨(dú)立地選自氧，氮和硫;其中所說的雜環(huán)基團(tuán)可通過一個(gè)連接在所說雜環(huán)基團(tuán)的碳原子上的硫原子而被連接;其中所說的C3-6環(huán)烷基，C5-6環(huán)烯基，苯基和雜環(huán)取代基可以選自由下列基團(tuán)構(gòu)成的一組基團(tuán)一個(gè)或兩個(gè)C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羥基，鹵素，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，氰基，羧基，亞胺甲基，脲基，氨基甲?；?，氨基(C1-4)烷基，C1-4烷基氨基(C1-4)烷基，二(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基，C1-4烷氧羰基，C1-4烷氧羰基(C1-4)烷基，氨基(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基和C1-4烷基羰氧基，并且所說的雜環(huán)基還可以被
基所取代;
R4是氫，一個(gè)可除去的羧基保護(hù)基或是一個(gè)生理上可水解的酯基;
R5和R6各自獨(dú)立地是氫，C1-6烷基，C1-4烷氧基，羥乙基，疊氮基乙基，氨基乙基，并且當(dāng)R5是氫或C1-4烷基時(shí)，R6是羥基，C1-4烷氧基，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，取代的C1-4烷基(其中所說的烷基取代基選自羥基，疊氮基，氨基，胍基，氰基，羧基，亞胺甲基和苯基)或一種氨基酸或肽的?；鶜埢?，或者R5，R6和它們所連接的氮原子一起是未取代的或取代的氮雜環(huán)丁烷基，或是一個(gè)未取代的或取代的5或6員雜環(huán)基，每個(gè)環(huán)上可以有多至4個(gè)雜原子，這些雜原子可獨(dú)立地選自氧、氮和硫，其中所說的取代基選自C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羥基，鹵素，氨基，氰基，羧基，亞胺甲基，脲基，氨基甲?；珻1-4烷氨基和氨基(C1-4)烷基;
n為一個(gè)0-2的整數(shù)(包括0和2);
W是一個(gè)直接的鍵，氧，硫或NR10;
Y是氧或NR10;
Z是氫，羥基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，-NR7R8，氨基(C1-4)烷基，疊氮基(C1-4)烷基或羥基(C1-4)烷基;
R7和R8各自獨(dú)立地是氫，C1-4烷基，羥基，芐氧基或鏈烷?；?
R9是C1-4烷基或C2-4鏈烯基;
R10是氫，C1-4烷基，C1-4烷基氨基或二(C1-4)烷基氨基。
3、權(quán)利要求1的下式化合物或其無毒的可藥用的鹽
其中
R1是
A是未取代的或羥基取代的直鏈或支鏈的C1-10亞烷基或者間插有選自氧、硫和氮的雜原子的直鏈或支鏈C1-10亞烷基;
R2是羥基，氟，C1-4烷氧基，氰基，疊氮基，季銨基，-NR5R6，
，氮雜環(huán)丁烷基或選自通過其碳原子來連接的雜芳基和雜脂環(huán)基的5或6員雜環(huán)基;
B是一個(gè)直鏈或支鏈的C1-6亞烷基，或者當(dāng)R3通過它的碳原子連接到硫原子上時(shí)它就代表一個(gè)直接的化學(xué)鍵;
R3為氫，C3-6環(huán)烷基或取代的C3-6環(huán)烷基，C5-6環(huán)烯基或取代的C5-6環(huán)烯基，苯基或取代的苯基，羥基，C1-4烷氧基，C1-4烷硫基，苯硫基或取代的苯硫基，鹵素，氰基，-NR7R8，
，或是一個(gè)選自雜芳環(huán)或雜環(huán)脂環(huán)的，未取代或取代的雜環(huán)基團(tuán)
它有1至2個(gè)環(huán)，在每個(gè)環(huán)中有5至6個(gè)環(huán)成員，并在每個(gè)環(huán)中可含有多至4個(gè)雜原子，這些雜原子獨(dú)立地選自氧，氮和硫;其中所說的雜環(huán)基團(tuán)可通過一個(gè)連接在所說雜環(huán)基團(tuán)的碳原子上的硫原子而被連接;其中所說的C3-6環(huán)烷基，C5-6環(huán)烯基，苯基和雜環(huán)取代基選自由下列基團(tuán)構(gòu)成的一組基團(tuán)一個(gè)或兩個(gè)C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羥基，鹵素，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，氰基，羧基，亞胺甲基，脲基，氨基甲?；?，氨基(C1-4)烷基，C1-4烷基氨基(C1-4)烷基，二(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基，C1-4烷氧羰基，C1-4烷氧羰基(C1-4)烷基，氨基(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基和C1-4烷基羰氧基，并且所說的雜環(huán)基還可以被
基所取代;
R4是氫，一個(gè)可除去的羧基保護(hù)基或是一個(gè)生理上可水解的酯基;
R5和R6各自獨(dú)立地是氫和C1-6烷基，并且當(dāng)R5是氫或C1-4烷基時(shí)，R6是羥基，C1-4烷氧基，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，取代的C1-4烷基(其中所說的烷基取代基選自羥基，疊氮基，氨基，胍基，氰基，羧基，亞胺甲基和苯基)或一種氨基酸或肽的?；鶜埢?或者R5，R6和它們所連接的氮原子一起是一個(gè)未取代的或取代的氮雜環(huán)丁烷基，或是一個(gè)未取代的或取代的5或6員雜環(huán)基，每個(gè)環(huán)上可以有多至2個(gè)雜原子，這些雜原子可獨(dú)立地選自氧、氮和硫，其中所說的取代基選自C1-4烷基，羥基，氨基，氰基，亞胺甲基，C1-4烷氨基和氨基(C1-4)烷基;
n為0-2的整數(shù)(包括0和2);
W是一個(gè)直接的鍵，氧，硫或NR10;
Y是氧或NR10;
Z是氫，羥基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，-NR7R8，氨基(C1-4)烷基，疊氮基(C1-4)烷基或羥基(C1-4)烷基;
R7和R8各自獨(dú)立地是氫，C1-4烷基，羥基，芐氧基或鏈烷?；?
R9是C1-4烷基或C2-4鏈烯基;
R10是氫，C1-4烷基，C1-4烷基氨基或二(C1-4)烷基氨基。
4、權(quán)利要求1的下式化合物或其無毒的可藥用的鹽
其中
R1為
A是直鏈或支鏈的C1-10亞烷基;
R2是羥基，氰基，疊氮基，-NR5R6或
B是一個(gè)直鏈或支鏈的C1-6亞烷基，或者當(dāng)R3通過它的碳原子連接到硫原子上時(shí)它就代表一個(gè)直接的化學(xué)鍵;
R3為氫，C3-6環(huán)烷基或取代的C3-6環(huán)烷基，苯基或取代的苯基，羥基，C1-4烷氧基，C1-4烷硫基，苯硫基或取代的苯硫基，鹵素，氰基，-NR7R8，
，或是一個(gè)選自雜芳環(huán)或雜環(huán)脂環(huán)的，未取代或取代的雜環(huán)基團(tuán)，它有1至2個(gè)環(huán)，在每個(gè)環(huán)中有5至6個(gè)環(huán)成員，并在每個(gè)環(huán)中可含有多至4個(gè)雜原子，這些雜原子獨(dú)立地選自氧，氮和硫;其中所說的雜環(huán)基團(tuán)可通過一個(gè)連接在所說雜環(huán)基團(tuán)的碳原子上的硫原子而被連接;其中所說的C3-6環(huán)烷基，苯基和雜環(huán)取代基可以選自由下列基團(tuán)構(gòu)成的一組基團(tuán)一個(gè)或兩個(gè)C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羥基，鹵素，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，氰基，羧基，亞胺甲基，脲基，氨基甲?；被?C1-4)烷基，C1-4烷基氨基(C1-4)烷基，二(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基，C1-4烷氧羰基，C1-4烷氧羰基(C1-4)烷基，氨基(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基和C1-4烷基羰氧基，并且所說的雜環(huán)基還可以被
基所取代;
R4是氫，一個(gè)可除去的羧基保護(hù)基或是一個(gè)生理上可水解的酯基;
R5和R6各自獨(dú)立地是氫和C1-6烷基，并且當(dāng)R5是氫或C1-4烷基時(shí)，R6是取代的C1-4烷基(其中所說的烷基取代基選自羥基，疊氮基，氨基，胍基，氰基，羧基，亞胺甲基和苯基)或一種氨基酸或肽的?；鶜埢?或者R5，R6和它們所連接的氮原子一起是一個(gè)未取代的或取代的氮雜環(huán)丁烷基，或是一個(gè)未取代的或取代的5或6員雜環(huán)基，每個(gè)環(huán)上可以有多至4個(gè)雜原子，這些雜原子可獨(dú)立地選自氧、氮和硫，其中所說的雜環(huán)可以通過與所說雜環(huán)的碳原子連接的硫原子連接，其中所說的取代基選自C1-4烷基，氨基，亞胺甲基，C1-4烷氨基和氨基(C1-4)烷基;
n為0-2的整數(shù)(包括0和2);
W是一個(gè)直接的鍵，氧，硫或NR10;
Y是氧或NR10;
Z是氫，羥基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，-NR7R8，氨基(C1-4)烷基，疊氮基(C1-4)烷基或羥基(C1-4)烷基;
R7和R8各自獨(dú)立地是氫，C1-4烷基，羥基，芐氧基或鏈烷?；?
R9為C1-4烷基或C2-4鏈烯基;及
R10是氫，C1-4烷基，C1-4烷基氨基或二(C1-4)烷基氨基。
5、權(quán)利要求1的下式化合物或其無毒的可藥用的鹽
其中
A是直鏈或支鏈的C1-10亞烷基;
R2是羥基，氰基，疊氮基，-NR5R6或
B是一個(gè)直鏈或支鏈的C1-6亞烷基，或者當(dāng)R3通過它的碳原子連接到硫原子上時(shí)它就代表一個(gè)直接的化學(xué)鍵;
R3為氫，取代的C3-6環(huán)烷基，取代的苯基，羥基，C1-4烷氧基，C1-4烷硫基，取代的苯硫基，鹵素，氰基，-NR7R8，
，或是一個(gè)選自雜芳環(huán)或雜環(huán)脂環(huán)的，未取代或取代的雜環(huán)基團(tuán)，在每個(gè)環(huán)中有5或6個(gè)環(huán)成員，并在每個(gè)環(huán)中可含有多至4個(gè)雜原子，這些雜原子獨(dú)立地選自氧，氮和硫;其中所說的雜環(huán)基團(tuán)可通過一個(gè)連接在所說雜環(huán)基團(tuán)的碳原子上的硫原子而被連接;其中所說的C3-6環(huán)烷基，苯基和雜環(huán)取代基可以選自由下列基團(tuán)構(gòu)成的一組基團(tuán)一個(gè)或兩個(gè)C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羥基，鹵素，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，氰基，羧基，亞胺甲基，C1-4烷氧羰基，C1-4烷氧羰基(C1-4)烷基，氨基(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基和C1-4烷基羰氧基，并且所說的雜環(huán)基還可以被
基所取代;
R4是氫，一個(gè)可除去的羧基保護(hù)基或是一個(gè)生理上可水解的酯基;
R5和R6各自獨(dú)立地是氫和C1-6烷基，并且當(dāng)R5是氫或C1-4烷基時(shí)，R6是取代的C1-4烷基(其中所說的烷基取代基選自羥基，疊氮基，氨基，胍基，氰基，羧基，亞胺甲基和苯基)或一種氨基酸或肽的?；鶜埢?或者R5，R6和它們所連接的氮原子一起是氮雜環(huán)丁烷基，吡咯烷基，吡咯啉基，哌啶基，嗎啉基，硫代嗎啉基，哌嗪基，N-甲基哌嗪基，咪唑基，(這些雜環(huán)均以氮接出);
n是0-2的整數(shù)(包括0和2);
W是一個(gè)直接的鍵，氧，硫或NR10;
Y是氧或NR10;
Z是氫，羥基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，-NR7R8，氨基(C1-4)烷基，疊氮基(C1-4)烷基或羥基(C1-4)烷基;
R7和R8各自獨(dú)立地是氫，C1-4烷基，羥基，芐氧基或鏈烷?；?
R9是C1-4烷基或C2-4鏈烯基;及
R10是氫，C1-4烷基，C1-4烷基氨基或二(C1-4)烷基氨基。
6、權(quán)利要求1的下式化合物或其無毒的可藥用的鹽
其中
A是直鏈或支鏈的C1-8亞烷基;
R2是-NR5R6或
B是一個(gè)直鏈或支鏈的C1-4亞烷基，或者當(dāng)R3通過它的碳原子連接到硫原子上時(shí)它就代表一個(gè)直接的化學(xué)鍵;
R3是氫，取代的C3-6環(huán)烷基，取代的苯基，羥基，C1-4烷氧基，C1-4烷硫基，取代的苯硫基，氟，氰基，-NR7R8，
，或是一個(gè)選自雜芳環(huán)或雜環(huán)脂環(huán)的，未取代或取代的雜環(huán)基團(tuán)，在每個(gè)環(huán)中有5或6個(gè)環(huán)成員，并在每個(gè)環(huán)中可含有多至4個(gè)雜原子，這些雜原子獨(dú)立地選自氧，氮和硫;其中所說的C3-6環(huán)烷基，苯基和雜環(huán)取代基選自甲基，甲氧基，三氟甲基，羥基，鹵素，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，氰基，羧基，C1-4烷氧羰基，C1-4烷氧羰基(C1-4)烷基，氨基(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基和C1-4烷基羰氧基，并且所說的雜環(huán)基還可以被
基所取代;
R4是氫，一個(gè)可除去的羧基保護(hù)基或是一個(gè)生理上可水解的酯基;
R5和R6各自獨(dú)立地是氫和C1-6烷基，并且當(dāng)R5是氫或C1-4烷基時(shí)，R6是取代的C1-4烷基(其中所說的烷基取代基選自羥基，疊氮基，氨基，胍基，氰基，羧基，亞胺甲基和苯基)或一種氨基酸或肽的酰基殘基;或者R5，R6和它們所連接的氮原子一起是氮雜環(huán)丁烷基，吡咯烷基，吡咯啉基，哌啶基，嗎啉基，硫代嗎啉基，哌嗪基，N-甲基哌嗪基，咪唑基，這些雜環(huán)均以其氮原子接出;
n是0-2的整數(shù)(包括0和2);
W是一個(gè)直接的鍵，氧，硫或NR10;
Y是氧或NR10;
Z是氫，羥基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，-NR7R8，氨基(C1-4)烷基，疊氮基(C1-4)烷基或羥基(C1-4)烷基;
R7和R8各自獨(dú)立地是氫，C1-4烷基，羥基，芐氧基或鏈烷?；?
R9是C1-4烷基或C2-4鏈烯基;及
R10是氫，C1-4烷基，C1-4烷基氨基或二(C1-4)烷基氨基。
7、權(quán)利要求1的化合物，其中R2為氨基。
8、權(quán)利要求1的化合物，其中R2為二甲氨基。
9、權(quán)利要求1的化合物，其中R2為N-亞胺甲基氨基。
10、權(quán)利要求1的化合物，其中R2為胍基。
11、權(quán)利要求1的化合物，其中R2為1-吡咯烷基。
12、權(quán)利要求1的化合物，其中R2為甲氨基。
13、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
14、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
15、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-甲基吡啶鎓-2-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
16、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
17、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔4″-(N-亞胺甲基)氨基丁基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
18、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(4″-N，N-二甲基氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
19、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
20、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(2″-N，N-二甲基氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
21、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-〔2″-(N-氰甲基-N-甲基氨基)乙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(吡啶-3-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
22、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
23、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
24、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-亞胺甲基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
25、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-亞胺甲基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
26、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-胍基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
27、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-胍基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
28、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
29、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
30、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-甲硫基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
31、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(2″-胍基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
32、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
33、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(3″-羥基丙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
34、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-〔3″-(N-亞胺甲基)氨基丙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
35、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(3-氰基丙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
36、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(吡啶-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
37、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
38、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(1-吡咯烷基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
39、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
40、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
41、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(4″-胍基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
42、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-(2″-胍基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
43、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1-甲基-1，2，3-三唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
44、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-4-〔3″-(N-亞胺甲基)氨基丙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
45、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(4″-氨基丁基)-3-〔(2-氨甲酰氧基)乙硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
46、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(1，2，3-噻二唑-4-基)甲硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
47、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-3-〔(2-氨甲酰氧基乙基)硫基〕-4-(4″-N，N-二甲基氨基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
48、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(2″-乙醛基)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
49、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(羥基羰基甲基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
50、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-羥基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
51、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
52、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
53、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-3-((4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基)-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
54、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
55、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
56、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-N-亞胺甲基氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
57、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-羥基乙基)硫基〕-4-(2″-氨基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
58、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(1-N-甲基吡咯烷鎓)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
59、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔2″-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
60、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(3″-胍基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-(〔2-(1-吡咯烷基)乙基〕硫基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
61、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-N，N-二甲基氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
62、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基〕吡咯烷硫基｝-4-(2″-胍基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
63、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(N，N-二甲基脒基甲基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
64、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(2″-胍基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔2-(1-吡咯烷基)乙硫基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
65、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(3S)-3-吡咯烷硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
66、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(2-胍基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
67、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(2″-胍基乙基)-3-〔(2-胍基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
68、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-4-〔2″-(β-氯-L-丙氨酰-β-氯-L-丙氨?；?氨基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
69、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-3-〔(2-氟乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
70、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-3-〔(4-哌啶基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
71、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(2″-氨基乙基)-3-〔(N，N-二甲基脒基甲基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
72、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-3-〔(N，N-二甲基脒基甲基)硫基〕-4-(2″-胍基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
73、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-3-〔(3R)-(吡咯烷-3-基)硫基〕-4-〔2″-N-甲基氨基乙基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
74、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(2″-N-亞胺甲基-N-甲基氨基乙基)-3-｛〔(3R)-(N-亞胺甲基吡咯烷-3-基)〕硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
75、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-(3″-氨基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3-｛〔2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基〕硫基｝-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
76、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-3-｛(4S)-4-〔(2S)-2-二甲氨基羰基吡咯烷基〕硫基｝-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-N-甲基氨基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
77、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-3-〔(2-氟乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-(2″-N-甲基氨基乙基)-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
78、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-3-〔(2-氨基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(2″S)-(2″-吡咯烷基)甲基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
79、權(quán)利要求1的化合物，該化合物為(4R，5S，6S)-4-〔3″-氨基-(2″R或S)-2″-羥基丙基〕-3-〔(2-氰基乙基)硫基〕-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚-2-烯-2-羧酸或其無毒的可藥用鹽。
80、下式所示的化合物
式中
R11為氫，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2O-P2，-CH2NH2，-CH2N-P4，
A為未取代的或羥基取代的直鏈或支鏈C1-10亞烷基或間插有選自氧、硫和氮的雜原子的直鏈或支鏈C1-10亞烷基;
R12為羥基，鹵素，C1-4烷氧基，疊氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或任意保護(hù)的氮雜環(huán)丁烷基或選自雜芳基和雜脂環(huán)基的5或6員雜環(huán)基，它們通過它們的碳原子連接;
P1是常規(guī)的容易除去的羧基保護(hù)基;
P2和P3各自獨(dú)立地是常規(guī)的羥基保護(hù)基;
P4是常規(guī)的氨基保護(hù)基。
81、權(quán)利要求80的化合物，其結(jié)構(gòu)如下
式中
R12為
A為直鏈或支鏈的C1-10亞烷基;
R12為羥基，氟，C1-4烷氧基，疊氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或任意保護(hù)的氮雜環(huán)丁烷基或選自雜芳基和雜脂環(huán)基的5或6員雜環(huán)基，它們通過它們的碳原子連接;
P1是常規(guī)的容易除去的羧基保護(hù)基;
P2和P3各自獨(dú)立地是常規(guī)的羥基保護(hù)基;
P4是常規(guī)的氨基保護(hù)基。
82、權(quán)利要求80的化合物，其結(jié)構(gòu)如下
式中
R11為
A為直鏈或支鏈的C1-10亞烷基;
R12為羥基，氟，C1-4烷氧基，疊氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或任意保護(hù)的氮雜環(huán)丁烷基或選自雜芳基和雜脂環(huán)基的5或6員雜環(huán)基，它們通過它們的碳原子連接;
P1是常規(guī)的容易除去的羧基保護(hù)基;
P2和P3各自獨(dú)立地是常規(guī)的羥基保護(hù)基;
P4是常規(guī)的氨基保護(hù)基。
83、權(quán)利要求80的化合物，其結(jié)構(gòu)如下
式中A為直鏈或支鏈的C1-8亞烷基;
R12為羥基，疊氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或N-P4取代的吡咯烷基;
P1是常規(guī)的容易除去的羧基保護(hù)基;
P3是常規(guī)的羥基保護(hù)基;
P4是常規(guī)的氨基保護(hù)基。
84、權(quán)利要求80的化合物，其結(jié)構(gòu)如下
式中A是直鏈或支鏈的C1-8亞烷基;
R12是羥基，疊氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或N-P4取代的吡咯烷基;
P1是常規(guī)的容易除去的羧基保護(hù)基;
P2和P3各自獨(dú)立地是常規(guī)的羥基保護(hù)基;
P4是常規(guī)的氨基保護(hù)基。
85、權(quán)利要求80的化合物，其中R12為羥基。
86、權(quán)利要求80的化合物，其中R12為疊氮基。
87、權(quán)利要求80的化合物，其中R12為叔丁基二甲基硅氧基。
88、權(quán)利要求80的化合物，它是(4R，5R，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(2″-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯。
89、權(quán)利要求80的化合物，它是(4R，5R，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(3″-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯。
90、權(quán)利要求80的化合物，它是(4R，5R，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯。
91、權(quán)利要求80的化合物，它是(4R，5R，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯。
92、權(quán)利要求80的化合物，它是(4R，5R，6S)-4-(3″-疊氮基丙基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯。
93、權(quán)利要求80的化合物，它是(4R，5R，6S)-4-(4″-疊氮基丁基)-6-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯。
94、權(quán)利要求80的化合物，它是(4R，5R，6S)-4-(2″-疊氮基乙基)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯。
95、權(quán)利要求80的化合物，它是(4R，5R，6S)-6-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-(3″-疊氮基丙基)-3，7-二氧代-1-氮雜雙環(huán)〔3.2.0〕庚烷-2-羧酸烯丙酯。
96、下式所示的化合物
式中
R11為氫，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2O-P2，-CH2NH2，-CH2N-P4，
A為未取代的或羥基取代的直鏈或支鏈C1-10亞烷基或間插有選自氧、硫和氮的雜原子的直鏈或支鏈C1-10亞烷基;
R12為羥基，鹵素，C1-4烷氧基，疊氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或任意保護(hù)的氮雜環(huán)丁烷基或選自雜芳基和雜脂環(huán)基的5或6員雜環(huán)基，它們通過它們的碳原子連接;
R18是氫或P4;
P1是常規(guī)的容易除去的羧基保護(hù)基;
P2和P3各自獨(dú)立地是常規(guī)的羥基保護(hù)基;
P4是常規(guī)的氨基保護(hù)基。
97、權(quán)利要求96的化合物，其結(jié)構(gòu)如下
式中
R11為
A為直鏈或支鏈的C1-10亞烷基;
R12為羥基，氟，C1-4烷氧基，疊氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或任意保護(hù)的氮雜環(huán)丁烷基或選自雜芳基和雜脂環(huán)基的5或6員雜環(huán)基，它們通過它們的碳原子連接;
R18是氫或P4;
P1是常規(guī)的容易除去的羧基保護(hù)基;
P2和P3各自獨(dú)立地是常規(guī)的羥基保護(hù)基;
P4是常規(guī)的氨基保護(hù)基。
98、權(quán)利要求96的化合物，其結(jié)構(gòu)如下
式中
R11為
A為直鏈或支鏈的C1-10亞烷基;
R12為羥基，氟，C1-4烷氧基，疊氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或任意保護(hù)的氮雜環(huán)丁烷基或選自雜芳基和雜脂環(huán)基的5或6員雜環(huán)基，它們通過它們的碳原子連接;
R18是氫或P4;
P1是常規(guī)的容易除去的羧基保護(hù)基;
P2和P3各自獨(dú)立地是常規(guī)的羥基保護(hù)基;
P4是常規(guī)的氨基保護(hù)基。
99、權(quán)利要求96的化合物，其結(jié)構(gòu)如下
式中A為直鏈或支鏈的C1-8亞烷基;
R12為羥基，疊氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或N-P4取代的吡咯烷基;
R18是氫或P4;
P1是常規(guī)的容易除去的羧基保護(hù)基;
P3是常規(guī)的羥基保護(hù)基;
P4是常規(guī)的氨基保護(hù)基。
100、權(quán)利要求96的化合物，其結(jié)構(gòu)如下
式中A是直鏈或支鏈的C1-8亞烷基;
R12是羥基，疊氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或N-P4取代的吡咯烷基;
R18是氫或P4;
P1是常規(guī)的容易除去的羧基保護(hù)基;
P2和P3各自獨(dú)立地是常規(guī)的羥基保護(hù)基;
P4是常規(guī)的氨基保護(hù)基。
101、權(quán)利要求96的化合物，其中R12為羥基。
102、權(quán)利要求96的化合物，其中R12為疊氮基。
103、權(quán)利要求96的化合物，其中R12為叔丁基二甲基硅氧基。
104、權(quán)利要求96的化合物，它是(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮。
105、權(quán)利要求96的化合物，它是(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮。
106、權(quán)利要求96的化合物，它是(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(4-叔丁基二甲基硅氧基丁基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮。
107、權(quán)利要求96的化合物，它是(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-疊氮基乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮。
108、權(quán)利要求96的化合物，它是(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-疊氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮。
109、權(quán)利要求96的化合物，它是(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(4-疊氮基丁基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮。
110、權(quán)利要求96的化合物，它是(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(2-疊氮基乙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮。
111、權(quán)利要求96的化合物，它是(3S，4R)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-(3-疊氮基丙基)-3″-重氮基-3″-烯丙氧羰基-2″-氧代丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮。
112、下式所示的化合物
式中
R11為氫，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2O-P2，-CH2NH2，-CH2N-P4，
A為未取代的或羥基取代的直鏈或支鏈C1-10亞烷基或間插有選自氧、硫和氮的雜原子的直鏈或支鏈C1-10亞烷基;
R12為羥基，鹵素，C1-4烷氧基，疊氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或任意保護(hù)的氮雜環(huán)丁烷基或選自雜芳基和雜脂環(huán)基的5或6員雜環(huán)基，它們通過它們的碳原子連接;
R18是氫或P4;
P2和P3各自獨(dú)立地是常規(guī)的羥基保護(hù)基;
P4是常規(guī)的氨基保護(hù)基。
113、權(quán)利要求112的化合物，其結(jié)構(gòu)如下
式中
R11為
A為直鏈或支鏈的C1-10亞烷基;
R12為羥基，氟，C1-4烷氧基，疊氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或任意保護(hù)的氮雜環(huán)丁烷基或選自雜芳基和雜脂環(huán)基的5或6員雜環(huán)基，它們通過它們的碳原子連接;
R18是氫或P4;
P2和P3各自獨(dú)立地是常規(guī)的羥基保護(hù)基;
P4是常規(guī)的氨基保護(hù)基。
114、權(quán)利要求112的化合物，其結(jié)構(gòu)如下
式中
R11為
A為直鏈或支鏈的C1-10亞烷基;
R12為羥基，氟，C1-4烷氧基，疊氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或任意保護(hù)的氮雜環(huán)丁烷基或選自雜芳基和雜脂環(huán)基的5或6員雜環(huán)基，它們通過它們的碳原子連接;
R18是氫或P4;
P2和P3各自獨(dú)立地是常規(guī)的羥基保護(hù)基;
P4是常規(guī)的氨基保護(hù)基。
115、權(quán)利要求112的化合物，其結(jié)構(gòu)如下
式中A為直鏈或支鏈的C1-8亞烷基;
R12為羥基，疊氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或N-P4取代的吡咯烷基;
R18是氫或P4;
P3是常規(guī)的羥基保護(hù)基;
P4是常規(guī)的氨基保護(hù)基。
116、權(quán)利要求112的化合物，其結(jié)構(gòu)如下
式中A是直鏈或支鏈的C1-8亞烷基;
R12是羥基，疊氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或N-P4取代的吡咯烷基;
R12是氫或P4;
P2和P3各自獨(dú)立地是常規(guī)的羥基保護(hù)基;
P4是常規(guī)的氨基保護(hù)基。
117、權(quán)利要求112的化合物，其中R12為羥基。
118、權(quán)利要求112的化合物，其中R12為疊氮基。
119、權(quán)利要求112的化合物，其中R12為叔丁基二甲基硅氧基。
120、權(quán)利要求112的化合物，它是(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-叔丁基二甲基硅氧基丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮。
121、權(quán)利要求112的化合物，它是(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-4″-叔丁基二甲基硅氧基丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮。
122、權(quán)利要求112的化合物，它是(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-5″-叔丁基二甲基硅氧基戊基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮。
123、權(quán)利要求112的化合物，它是(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-疊氮基丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮。
124、權(quán)利要求112的化合物，它是(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-4″-疊氮基丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮。
125、權(quán)利要求112的化合物，它是(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-羥基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-5″-疊氮基戊基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮。
126、權(quán)利要求112的化合物，它是(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-3″-疊氮基丙基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮。
127、權(quán)利要求112的化合物，它是(3S，4S)-3-〔(1′R)-1′-叔丁基二甲基硅氧基乙基〕-4-〔(1″R)-1″-羧基-4″-疊氮基丁基〕氮雜環(huán)丁烷-2-酮。
128、下式所示的化合物或其無毒的可藥用的鹽
式中
R11為氫，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2O-P2，-CH2NH2，-CH2N-P4，
A為未取代的或羥基取代的直鏈或支鏈C1-10亞烷基或間插有選自氧、硫和氮的雜原子的直鏈或支鏈C1-10亞烷基;
B是直鏈或支鏈的C1-6亞烷基，或者當(dāng)R3通過其碳原子連接到硫原子上時(shí)它就代表一個(gè)直接的化學(xué)鏈;
R3是有機(jī)基團(tuán)的殘基;
L2是常規(guī)的離去基團(tuán);
P1是常規(guī)的容易除去的羧基保護(hù)基;
P2獨(dú)立地是常規(guī)的羥基保護(hù)基;
P4是常規(guī)的氨基保護(hù)基。
129、權(quán)利要求128的下式化合物或其無毒的可藥用的鹽
式中
R11為氫，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2O-P2，-CH2NH2，-CH2N-P4，
A為未取代的或羥基取代的直鏈或支鏈C1-10亞烷基或間插有選自氧、硫和氮的雜原子的直鏈或支鏈C1-10亞烷基;
B是直鏈或支鏈的C1-6亞烷基，或者當(dāng)R3通過其碳原子連接到硫原子上時(shí)它就代表一個(gè)直接的化學(xué)鏈;
R3為氫，C3-6環(huán)烷基或取代的C3-6環(huán)烷基，C5-6環(huán)烯基或取代的C5-6環(huán)烯基，苯基或取代的苯基，羥基，C1-4烷氧基，C1-4烷硫基，苯硫基或取代的苯硫基，鹵素，氰基，硝基，-NR7R8，
，或是一個(gè)選自雜芳環(huán)或雜環(huán)脂環(huán)的，未取代或取代的雜環(huán)基團(tuán)
它有1至2個(gè)環(huán)，在每個(gè)環(huán)中有4至7個(gè)環(huán)成員，并在每個(gè)環(huán)中可含有多至4個(gè)雜原子，這些雜原子獨(dú)立地選自氧，氮和硫;其中所說的雜環(huán)基團(tuán)可通過一個(gè)連接在所說雜環(huán)基團(tuán)的碳原子上的硫原子而被連接;其中所說的C3-6環(huán)烷基，C5-6環(huán)烯基，苯基和雜環(huán)取代基可以選自由下列基團(tuán)構(gòu)成的一組基團(tuán)一個(gè)或兩個(gè)C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羥基，鹵素，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，氰基，羧基，亞胺甲基，脲基，氨基甲?；?，氨基(C1-4)烷基，C1-4烷基氨基(C1-4)烷基，二(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基，C1-4烷氧羰基，C1-4烷氧羰基(C1-4)烷基，氨基(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基和C1-4烷基羰氧基，并且所說的雜環(huán)基還可以被
基所取代;
n是0-2的整數(shù)，包括0和2;
W是一個(gè)直接的鍵，氧，硫或NR10;
Y是氧或NR10;
Z是氫，羥基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，-NR7R8，氨基(C1-4)烷基，疊氮基(C1-4)烷基或羥基(C1-4)烷基;
R7和R8各自獨(dú)立地是氫，C1-4烷基，羥基，芐氧基或鏈烷酰基;
R9是C1-4烷基或C2-4鏈烯基;
R10是氫，C1-4烷基，C1-4烷基氨基或二(C1-4)烷基氨基;
L2是常規(guī)的離去基團(tuán);
P1是常規(guī)的容易除去的羧基保護(hù)基;
P2獨(dú)立地是常規(guī)的羥基保護(hù)基;
P4是常規(guī)的氨基保護(hù)基。
130、權(quán)利要求129的化合物或鹽，其中A是直鏈或支鏈的C1-10亞烷基。
131、權(quán)利要求130的化合物或鹽，其中R11是
式中P2是常規(guī)的羥基保護(hù)基;P4是常規(guī)的氨基保護(hù)基。
132、權(quán)利要求130的化合物或鹽，其中R11是
式中P2是常規(guī)的羥基保護(hù)基。
133、權(quán)利要求130的化合物或鹽，其中R11是叔丁基二甲基硅氧基乙基。
134、權(quán)利要求130的化合物或鹽，其中P1是烯丙基。
135、權(quán)利要求130的化合物或鹽，其中L2是-OSO2R14，R14是低級烷基，三氟甲基，苯基或取代的苯基，其中的所述取代基是甲基，異丙基，氯，溴或硝基。
136、權(quán)利要求130的化合物或鹽，其中L2是三氟甲磺?；?br> 137、權(quán)利要求130的化合物或鹽，其中L2是對硝基苯磺?；?。
138、制備式Ⅰ化合物或其無毒的可藥用的鹽的方法，
其中
R1是氫，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2NH2，
A為未取代的或羥基取代的直鏈或支鏈C1-10亞烷基或間插有選自氧、硫和氮的雜原子的直鏈或支鏈C1-10亞烷基;
R2是羥基，鹵素，C1-4烷氧基，氰基，疊氮基，季銨基，-NR5R6，
氮雜環(huán)丁烷基或選自通過其碳原子來連接的雜芳基和雜脂環(huán)基的5或6員雜環(huán)基;
B是一個(gè)直鏈或支鏈的C1-6亞烷基，或者當(dāng)R3通過它的碳原子連接到硫原子上時(shí)它就代表一個(gè)直接的化學(xué)鍵;
R3是一個(gè)有機(jī)基團(tuán)的殘基;
R4是氫，一個(gè)可除去的羧基保護(hù)基或是一個(gè)生理上可水解的酯基;
R5和R6各自獨(dú)立地是氫，C1-6烷基，C1-4烷氧基，羥乙基，疊氮基乙基，氨基乙基，并且當(dāng)R5是氫或C1-4烷基時(shí)，R6是羥基，C1-4烷氧基，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，取代的C1-4烷基(其中所說的烷基取代基選自羥基，疊氮基，氨基，胍基，氰基，羧基，亞胺甲基和苯基)或一種氨基酸或肽的?；鶜埢?或者R5，R6和它們所連接的氮原子一起是一個(gè)未取代的或取代的雜環(huán)基，它具有1至2個(gè)環(huán)，每個(gè)環(huán)上可以有多至4個(gè)雜原子，這些雜原子可獨(dú)立地選自氧、氮和硫，其中所說的取代基選自C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羥基，鹵素，氨基，氰基，羧基，亞胺甲基，脲基，氨基甲?；?，C1-4烷氨基和氨基(C1-4)烷基;
W是一個(gè)直接的鍵，氧，硫或NR10;
Y是氧或NR10;
Z是氫，羥基，C1-4烷基，C1-4烷氧基，-NR7R8，氨基(C1-4)烷基，疊氮基(C1-4)烷基或羥基(C1-4)烷基;
R7和R8各自獨(dú)立地是氫，C1-4烷基，羥基，芐氧基或鏈烷?；?及
R10是氫，C1-4烷基，C1-4烷基氨基或二(C1-4)烷基氨基;
所述方法包括
a)使式Ⅺa化合物與式HS-B-R3化合物(其中B和R3如上所定義)反應(yīng)，得到式ⅩⅢa化合物
式中R11是氫，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2O-P2，-CH2NH2，-CH2N-P4，
A是未取代的或被羥基取代的直鏈或支鏈的C1-10亞烷基或間插有選自氧、硫和氮的雜原子的直鏈或支鏈的C1-10亞烷基;P1是一個(gè)常規(guī)的容易除去的羧基保護(hù)基;R12是羥基，鹵素，C1-4烷氧基，疊氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4，任意保護(hù)的氮雜環(huán)丁烷基或選自雜環(huán)芳基和雜脂環(huán)基的5或6員雜環(huán)基，它們通過它們的碳原子連接;P2和P3各自獨(dú)立地是一個(gè)常規(guī)的羥基保護(hù)基;P4是一個(gè)常規(guī)的氨基保護(hù)基;L1是常規(guī)的離去基團(tuán);
式中R11，R12，R3，A，B和P1各如上所定義;或者
b)使式ⅩⅥ化合物與合適的親核試劑反應(yīng)，得到式ⅩⅦa化合物
式中R3，R11，A，B和P1各如上所定義;L2是常規(guī)的離去基團(tuán);
式中R3，R11，A，B和P1各如上所定義;R13是疊氮基，-NR5R6
氰基，取代的烷氧基或取代的烷硫基，其中R5，R6，Y和Z各如上所定義;或者
c)使任意地含有常規(guī)的羥基保護(hù)基、氨基保護(hù)基或羧基保護(hù)基的式ⅩⅧa化合物或其鹽與合適的亞胺?；噭?、?；噭┗蛲榛噭┓磻?yīng)，得到式ⅩⅧb化合物
式中R3，R11和P1各如上所定義;R16是氫或C1-4烷基，
式中R3，R11，P1和R16各如上所定義;R17是C1-4烷基或
，其中Y和Z各如上所定義;以及
d)如果需要，使步驟a)，b)或c)的產(chǎn)物脫保護(hù)，成鹽，季銨化或酯化，得到式Ⅰ化合物。
139、權(quán)利要求138的方法，其中R2是氰基，疊氮基，季銨基，-NR5R6或
140、權(quán)利要求138的方法，其中R11是
141、權(quán)利要求138，139或140的方法，其中
R3為氫，C3-6環(huán)烷基或取代的C3-6環(huán)烷基，C5-6環(huán)烯基或取代的C5-6環(huán)烯基，苯基或取代的苯基，羥基，C1-4烷氧基，C1-4烷硫基，苯硫基或取代的苯硫基，鹵素，氰基，硝基，-NR7R8，
或是一個(gè)選自雜芳環(huán)或雜環(huán)脂環(huán)的，未取代或取代的雜環(huán)基團(tuán)
它有1至2個(gè)環(huán)，在每個(gè)環(huán)中有4至7個(gè)環(huán)成員，并在每個(gè)環(huán)中可含有多至4個(gè)雜原子，這些雜原子獨(dú)立地選自氧，氮和硫;其中所說的雜環(huán)基團(tuán)可通過一個(gè)連接在所說雜環(huán)基團(tuán)的碳原子上的硫原子而被連接;其中所說的C3-6環(huán)烷基，C5-6環(huán)烯基，苯基和雜環(huán)取代基可以選自由下列基團(tuán)構(gòu)成的一組基團(tuán)一個(gè)或兩個(gè)C1-4烷基，C1-4烷氧基，三氟甲基，羥基，鹵素，氨基，C1-4烷基氨基，二(C1-4)烷基氨基，氰基，羧基，亞胺甲基，脲基，氨基甲?；?，氨基(C1-4)烷基，C1-4烷基氨基(C1-4)烷基，二(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基，C1-4烷氧羰基，C1-4烷氧羰基(C1-4)烷基，氨基(C1-4)烷基氨基(C1-4)烷基和C1-4烷基羰氧基，并且所說的雜環(huán)基還可以被
基所取代。
142、制備式Ⅱ化合物的方法，
式中
R11是氫，C1-2烷基，-CH2OH，-CH2O-P2，-CH2NH2，-CH2N-P4，
A為未取代的或羥基取代的直鏈或支鏈C1-10亞烷基或間插有選自氧、硫和氮的雜原子的直鏈或支鏈C1-10亞烷基;
R12為羥基，鹵素，C1-4烷氧基，疊氮基，O-P3，N-P4，N(C1-4烷基)-P4或任意保護(hù)的氮雜環(huán)丁烷基或選自雜芳基和雜脂環(huán)基的5或6員雜環(huán)基，它們通過它們的碳原子連接;
P1是常規(guī)的容易除去的羧基保護(hù)基;
P2和P3各自獨(dú)立地是常規(guī)的羥基保護(hù)基;
P4是常規(guī)的氨基保護(hù)基;
該方法包括將式Ⅲ化合物環(huán)化，
式中R11，R12，A和P1各如上所定義;R18是氫或P4，其中P4是常規(guī)的氨基保護(hù)基;以及
如果需要，脫去保護(hù)基，得到式Ⅱ化合物。
全文摘要
式I所示的化合物或其無毒的可藥用的鹽是新的抗菌劑，可用于治療人類和其它動物的感染性疾病。也公開了新的中間體和它們的制備方法。式I中R1，A，R2，B，R3和R4各如說明書中所定義。
文檔編號C07F7/18GK1067429SQ92104130
公開日1992年12月30日 申請日期1992年5月30日 優(yōu)先權(quán)日1991年5月31日
發(fā)明者A·馬泰爾, C·巴尚, M·博納爾 申請人:布里斯托爾-邁爾斯斯奎布公司