夏枯草水提物的醫(yī)藥用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥保健品領(lǐng)域，特別是涉及一種中藥植物提取物的醫(yī)藥用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 糖尿病性視網(wǎng)膜病變（Diabeticretinopathy，DR)是糖尿病性微血管病變中 最重要的表現(xiàn)之一，是一種具有特異性改變的眼底病變，是糖尿病的嚴重并發(fā)癥之一。臨 床上根據(jù)是否出現(xiàn)視網(wǎng)膜新生血管為標(biāo)志，將沒有視網(wǎng)膜新生血管形成，但是發(fā)生血-視 網(wǎng)膜屏障（BRB)滲漏以及視網(wǎng)膜炎性損傷的糖尿病性視網(wǎng)膜病變稱為非增殖性糖尿病 性視網(wǎng)膜病變（nonproliferativediabeticretinopathy，NPDR)(或稱單純型或背景 型），而將有視網(wǎng)膜新生血管形成的糖尿病性視網(wǎng)膜病變稱為增殖性糖尿病性視網(wǎng)膜病變 (proliferativediabeticretinopathy，H3R)。前者主要表現(xiàn)為視網(wǎng)膜散在微血管瘤、點 片狀出血、硬性滲出、黃斑水腫等；后者則表現(xiàn)為視網(wǎng)膜或視乳頭新生血管形成，且向玻璃 體生長，易發(fā)生玻璃體出血和牽拉視網(wǎng)膜脫離。
[0003] 夏枯草（PrunellavulgarisL)，別名麥穗夏枯草、鐵線夏枯草（云南叢書）、麥夏 枯、鐵線夏枯（滇南本草）、夕句等，是唇形科野芝麻亞科多年生草本植物。干燥果穗入藥， 適應(yīng)性強，全國各地均產(chǎn)。其藥性辛、苦，寒，歸肝、膽經(jīng)，具有清熱瀉火，明目，散結(jié)消腫之功 效。多用于治療目赤腫痛、頭痛眩暈、目珠夜痛，瘰疬、癭瘤，乳癰腫痛。夏枯草提取物中含 有的迷迭香酸（C1SH160S)是藥典中夏枯草鑒別及含量測定的指標(biāo)成分。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的旨在提供一種夏枯草水提物的新用途。
[0005] 具體地說，本發(fā)明的第一方面是提供了一種夏枯草水提物在制備預(yù)防或者治療糖 尿病性視網(wǎng)膜病的藥物或食品中的應(yīng)用，所述夏枯草水提物含〇. 1~20wt%迷迭香酸。
[0006] 在一優(yōu)選例中，所述的夏枯草水提物含1. 98wt%迷迭香酸
[0007] 在另一優(yōu)選例中，所述的糖尿病性視網(wǎng)膜病為非增殖性糖尿病性視網(wǎng)膜病。
[0008] 本發(fā)明各個方面的細節(jié)將在隨后的章節(jié)中得以詳盡描述。通過下文以及權(quán)利要求 的描述，本發(fā)明的特點、目的和優(yōu)勢將更為明顯。
【附圖說明】
[0009] 圖1夏枯草水提物（PV)對糖尿病小鼠體重和血糖的影響（A)體重；(B)血糖； (i±s,n= 16)_P〈0.OOlvs?空白對照；
[0010] 圖2夏枯草水提物（PV)對糖尿病小鼠BRB滲漏的影響（n= 6)_P〈0.OOlvs. 空白對照；*#P〈〇.ooivs.糖尿病組；
[0011] 圖3夏枯草水提物（PV)降低糖尿病小鼠血清中升高的IL-ie、TNF-a含量 (?±s, n=l〇)#P〈〇. 05vs?空白對照；*P〈0. 05, **P〈0. 01，***P〈0.0 Olvs?糖尿病組；
[0012] 圖4夏枯草水提物（PV)對糖尿病小鼠視網(wǎng)膜中Iba-1表達的影響（i±s,n= 8)_P〈0.0 Olvs?空白對照；***P〈0.0 Olvs?糖尿病組；
[0013] 圖5夏枯草水提物（PV)對糖尿病小鼠視網(wǎng)膜中NF-kBp65亞單位磷酸化及核轉(zhuǎn) 位的影響（士s, n=8)###P〈0.0 Olvs?空白對照；*P〈0. 05, ***P〈0.0 Olvs?糖尿病組；
[0014] 圖6不同批次的夏枯草水提物對糖尿病小鼠BRB滲漏的影響（a±s，n = 6)_?〈0.001￥8.空白對照；***卩〈0.001￥8.糖尿病組。
【具體實施方式】
[0015] 本發(fā)明的問世部分是基于這樣一個意外發(fā)現(xiàn)：中藥夏枯草水提物可以顯著改善 STZ誘導(dǎo)小鼠糖尿病性視網(wǎng)膜病的炎性損傷和BRB滲漏。因此，夏枯草水提物可有望開發(fā)成 為一種預(yù)防或者治療糖尿病視網(wǎng)膜病的藥物
[0016] 進而，本發(fā)明的第一方面是提供了夏枯草水提物在制備預(yù)防或者治療糖尿病性視 網(wǎng)膜病的藥物或食品中的應(yīng)用，所述夏枯草水提物含〇. 1~20wt%迷迭香酸。
[0017] 較優(yōu)選地，所述的夏枯草水提物含1. 98wt%迷迭香酸
[0018] 較優(yōu)選地，所述的糖尿病性視網(wǎng)膜病為非增殖性糖尿病性視網(wǎng)膜病。
[0019] 如本領(lǐng)域的技術(shù)人員所知，作為藥典中夏枯草之鑒別及含量測定的指標(biāo)成分，迷 迭香酸（Rosmarinicacid)具有如下結(jié)構(gòu)式：
[0020]
[0021] 本發(fā)明的夏枯草水提物可通過商業(yè)途徑從南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司等處購買 獲得，亦用本領(lǐng)域的常規(guī)方法從夏枯草中提取獲得，例如：將中藥夏枯草用水浸泡后加熱提 取濃縮制得。
[0022] 本發(fā)明的夏枯草水提物，可以單獨使用，或以藥物組合物的形式使用。藥物組合物 包括作為活性成分的本發(fā)明的夏枯草水提物及可藥用載體。較佳地，本發(fā)明的藥物組合物 含有0. 1-99. 9%重量百分比的作為活性成分的本發(fā)明的夏枯草水提物。"可藥用載體"不 會破壞本發(fā)明的夏枯草水提物的藥學(xué)活性，同時其有效用量，即能發(fā)揮藥物載體作用時的 用量對人體無毒。
[0023] 所述可藥用載體包括但不限于：軟磷脂、硬脂酸鋁、氧化鋁、離子交換材料、自乳化 藥物傳遞系統(tǒng)、吐溫或其他表面活化劑、血清蛋白、緩沖物質(zhì)如磷酸鹽、氨基乙酸、山梨酸、 水、鹽、電解質(zhì)如硫酸鹽精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、硅酸鎂、飽和脂肪酸 部分甘油酯混合物等。
[0024] 其他常用的藥物輔料如粘合劑（如微晶纖維素）、填充劑（如淀粉、葡萄糖、無水乳 糖和乳糖珠粒）、崩解劑（如交聯(lián)PVP、交聯(lián)羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、低取代羥 丙基纖維素）、潤滑劑（如硬脂酸鎂）以及吸收促進劑、吸附載體、香味劑、甜味劑、賦形劑、 稀釋劑、潤濕劑等。
[0025] 本發(fā)明的夏枯草水提物以及其藥物組合物可按本領(lǐng)域常規(guī)方法制備并可以通過 腸道或非腸道或局部途徑給藥。口服制劑包括膠囊劑、片劑、口服液、顆粒劑、丸劑、散劑、丹 劑、膏劑等；非腸道給藥制劑包括注射液等；局部給藥制劑包括霜劑、貼劑、軟膏劑、噴霧劑 等。優(yōu)選為口服制劑。
[0026] 本發(fā)明的夏枯草水提物以及其藥物組合物的給藥途徑可以為口服、舌下、經(jīng)皮、經(jīng) 肌肉或皮下、皮膚粘膜、靜脈、尿道、陰道等。
[0027] 除了制成藥劑之外，亦可在本發(fā)明的夏枯草水提物加入抗氧化劑、色素、酶制劑等 各種食品添加劑，按本領(lǐng)域的常規(guī)方法制成保健食品。
[0028] 下面結(jié)合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條 件或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則所有的百分數(shù)、比率、比例、或份數(shù)按 重量計。
[0029] 除非另行定義，文中所使用的所有專業(yè)與科學(xué)用語與本領(lǐng)域熟練人員所熟悉的意 義相同。此外，任何與所記載內(nèi)容相似或均等的方法及材料皆可應(yīng)用于本發(fā)明方法中。文 中所述的較佳實施方法與材料僅作示范之用。
[0030] 本發(fā)明提到的上述特征，或?qū)嵤├岬降奶卣骺梢匀我饨M合。本專利說明書所揭 示的所有特征可與任何組合物形式并用，說明書中所揭示的各個特征，可以任何可提供相 同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特別說明，所揭示的特征僅為均等或相似 特征的一般性例子。
[0031] 實施例1夏枯草水提物中迷迭香酸（RA)含量的測定
[0032] 1. 1實驗材料和方法
[0033] 夏枯草水提物的制備：秤取不同批次的夏枯草各100g，打粉或裁剪為適宜藥物提 取的顆粒、碎片，加十倍去離子水浸泡1小時，沸水煎煮1. 5小時，收集煎液，藥材再次煎煮， 共反復(fù)提取三次，合并煎液，減壓濃縮蒸干，得不同批次的固體夏枯草水提取物，4°C冰箱保 存?zhèn)溆谩?br>[0034] 對照品溶液的制備：取迷迭香酸對照品適量，精密稱定，置于棕色量瓶中，加50% 甲醇制成每lml含100yg的對照品溶液，即得（10°C以下保存）。
[0035] 供試品溶液的制備：精密稱取夏枯草水提物浸膏于容量瓶中，加入50%甲醇，超 聲溶解，過〇. 22ym微孔濾膜，即得（10°C以下保存）。
[0036] 迷迭香酸（RA)含量測定：色譜柱為PhenomenexC18柱（4. 6X250mm, 5ym);流動 相條件為甲醇-1 %甲酸（40:60,v/v)，流速為1.OmL/min，等度洗脫；進樣體積為5yL;柱 溫為25°C;檢測波長為330nm〇
[0037] 1. 2實驗結(jié)果
[0038] 表1不同批次夏枯草水提物中迷迭香酸的百分含量
[0039]
[0040] 實施例2 :夏枯草水提物（PV)改善糖尿病視網(wǎng)膜病的藥效活性及其機理
[0041] 2. 1實驗材料和方法
[0042] 2. 1. 1動物：SPF級C57小鼠，雄性，體重18-24g，購自中國科學(xué)院上海實驗動物中 心。動物合格證編號：SCXK(滬）2012-0002。飼養(yǎng)于上海中醫(yī)藥大學(xué)SPF級動物房，飼養(yǎng)一 周后使用。飼養(yǎng)條件為：溫度22±1°C，濕度55±5%，12小時光暗循環(huán)，飼料與水消毒后自 由攝取。實驗嚴格按照國家和上海中醫(yī)藥大學(xué)動物中心動物使用管理條例進行。
[0043] 2. 1. 2藥物的配制：取適量夏枯草水提物（PV)浸膏溶于生理鹽水中，灌胃給藥，濃 度為 100mg/kg和 200mg/kg。
[0044] 2. 1. 3動物實驗：
[0045] (1)將0.1M檸檬酸溶液與檸檬酸三鈉溶液以14:11的比例混勾，調(diào)混合液PH至 4. 3-4. 5,待用。稱取適量STZ粉末，避光溶解，使之成為5. 5mg/ml的溶液，立即給予已禁食 12h的小鼠腹腔注射，0.lml/10g，最終給予STZ的劑量為55mg/kg，連續(xù)給藥5天。
[0046] (2)末次給藥一周后用割尾法測小鼠血糖濃度，血糖值》16. 7mmol/L(250mg/dl) 視為造模成功。將造模成功的小鼠隨機分為3組：DR模型組（DRmodel組）、夏枯