Symphonone H的醫(yī)藥用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥食品保健品領(lǐng)域，特別是涉及一種口山酮類化合物的用途及其相 關(guān)廣品。
【背景技術(shù)】
[0002] 惡性腫瘤是當(dāng)前威脅人類健康和生命的主要疾病。在大多數(shù)發(fā)達(dá)國(guó)家，腫瘤是僅 次于心血管病的第二大死亡原因。腫瘤也是嚴(yán)重危害我國(guó)人民健康的重大疾病，我國(guó)的腫 瘤研究也受到政府的重視，控制腫瘤已成為我國(guó)衛(wèi)生戰(zhàn)略重點(diǎn)之一。
[0003] 腫瘤的治療方法包括外科手術(shù)和放化療。當(dāng)前臨床應(yīng)用的抗腫瘤藥物的突出問(wèn)題 是有效率低、選擇性差（毒性大）和對(duì)耐藥性腫瘤的不敏感。另外，復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移也是腫瘤治 療的難點(diǎn)。因此，研究選擇性好、療效高、靶點(diǎn)明確以及對(duì)非靶器官無(wú)副作用的抗腫瘤藥物 是藥學(xué)工作者的重大研究課題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的旨在提供一種Symphonone Η的新用途及其相關(guān)產(chǎn)品。
[0005] 具體地說(shuō)，本發(fā)明的第一方面是提供了 Symphonone Η在制備預(yù)防或治療腫瘤的藥 物中的應(yīng)用，所述腫瘤選自宮頸癌、胰腺癌、肺癌和肝癌中的一種或多種。
[0006] 在一優(yōu)選例中，所述的Symphonone Η是作為唯一的活性成分應(yīng)用于預(yù)防或治療腫 瘤的藥物的制備中。
[0007] 本發(fā)明還提供了一種防治腫瘤的藥物組合物，它含有有效量的Symphonone Η，所 述腫瘤選自宮頸癌、胰腺癌、肺癌和肝癌中的一種或多種。
[0008] 本發(fā)明各個(gè)方面的細(xì)節(jié)將在隨后的章節(jié)中得以詳盡描述。通過(guò)下文以及權(quán)利要求 的描述，本發(fā)明的特點(diǎn)、目的和優(yōu)勢(shì)將更為明顯。
【具體實(shí)施方式】
[0009] 本發(fā)明的問(wèn)世是基于這樣一個(gè)意外發(fā)現(xiàn)：藤黃酮類化合物Symphonone Η可以顯 著抑制多種腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。因此，Symphonone Η有望開(kāi)發(fā)成為一種可預(yù)防或者治療腫瘤 的藥物。
[0010] 進(jìn)而，本發(fā)明的第一方面是提供了 Symphonone Η在制備預(yù)防或治療腫瘤的藥物中 的應(yīng)用，所述腫瘤選自宮頸癌、胰腺癌、肺癌和肝癌中的一種或多種。
[0011] 較優(yōu)選地，所述的Symphonone Η是作為唯一的活性成分應(yīng)用于預(yù)防或治療腫瘤的 藥物的制備中。
[0012] 本發(fā)明還提供了一種防治腫瘤的藥物組合物，它含有有效量的Symphonone Η，所 述腫瘤選自宮頸癌、胰腺癌、肺癌和肝癌中的一種或多種。
[0013] 如本發(fā)明所用，本發(fā)明的化合物Symphonone H，英文名為Symphonone H，分子式 C38H4S06,分子量 600. 22, CAS 號(hào)：1235774-18-1，其化學(xué)結(jié)構(gòu)如下：
[0015] 如本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員所知，本發(fā)明的化合物Symphonone Η可通過(guò)商業(yè)途徑購(gòu) 買獲得或通過(guò)化學(xué)方法合成（J. Agric. Food Chem. . ΕΝ ;9. 1994, 42, 1869-1871)，其亦可用 本領(lǐng)域的常規(guī)方法從藤黃屬植物如云樹(shù)（Garcinia cowa Roxb.)等中提取獲得。其純度均 符合藥用標(biāo)準(zhǔn)。
[0016] 本發(fā)明的Symphonone Η可以單獨(dú)使用或以藥物組合物的形式使用。藥物組合物 包括作為活性成分的本發(fā)明的Symphonone Η及可藥用載體。較佳地，本發(fā)明的藥物組合物 含有0.1~99. 9%重量百分比的作為活性成分的本發(fā)明的Symphonone Η。"可藥用載體" 不會(huì)破壞本發(fā)明的Symphonone Η的藥學(xué)活性，同時(shí)其有效用量，即能發(fā)揮藥物載體作用時(shí) 的用量對(duì)人體無(wú)毒。
[0017] 所述可藥用載體包括但不限于：軟磷脂、硬脂酸鋁、氧化鋁、離子交換材料、自乳化 藥物傳遞系統(tǒng)、吐溫或其他表面活化劑、血清蛋白、緩沖物質(zhì)如磷酸鹽、氨基乙酸、山梨酸、 水、鹽、電解質(zhì)如硫酸鹽精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、硅酸鎂、飽和脂肪酸 部分甘油酯混合物等。
[0018] 其他常用的藥物輔料如粘合劑（如微晶纖維素）、填充劑（如淀粉、葡萄糖、無(wú)水乳 糖和乳糖珠粒）、崩解劑（如交聯(lián)PVP、交聯(lián)羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、低取代羥 丙基纖維素）、潤(rùn)滑劑（如硬脂酸鎂）以及吸收促進(jìn)劑、吸附載體、香味劑、甜味劑、賦形劑、 稀釋劑、潤(rùn)濕劑等。
[0019] 本發(fā)明的Symphonone Η以及其藥物組合物可按本領(lǐng)域常規(guī)方法制備并可以通過(guò) 腸道或非腸道或局部途徑給藥?？诜苿┌z囊劑、片劑、口服液、顆粒劑、丸劑、散劑、丹 劑、膏劑等；非腸道給藥制劑包括注射液等；局部給藥制劑包括霜?jiǎng)?、貼劑、軟膏劑、噴霧劑 等。優(yōu)選為口服制劑。
[0020] 本發(fā)明的Symphonone Η以及其藥物組合物的給藥途徑可以為口服、舌下、經(jīng)皮、經(jīng) 肌肉或皮下、皮膚粘膜、靜脈、尿道、陰道等。
[0021] 下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條 件或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說(shuō)明，否則所有的百分?jǐn)?shù)、比率、比例、或份數(shù)按 重量計(jì)。
[0022] 除非另行定義，文中所使用的所有專業(yè)與科學(xué)用語(yǔ)與本領(lǐng)域熟練人員所熟悉的意 義相同。此外，任何與所記載內(nèi)容相似或均等的方法及材料皆可應(yīng)用于本發(fā)明方法中。文 中所述的較佳實(shí)施方法與材料僅作示范之用。
[0023] 本發(fā)明提到的上述特征，或?qū)嵤├岬降奶卣骺梢匀我饨M合。本專利說(shuō)明書(shū)所揭 示的所有特征可與任何組合物形式并用，說(shuō)明書(shū)中所揭示的各個(gè)特征，可以任何可提供相 同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特別說(shuō)明，所揭示的特征僅為均等或相似 特征的一般性例子。
[0024] 實(shí)施例一、制備Symphonone Η純品
[0025] a)將云樹(shù)用丙酮浸泡提取，每次浸泡使用的丙酮體積為云樹(shù)待提取的云樹(shù)藥材質(zhì) 量的5倍，每次浸泡一星期，共浸泡提取3次；合并丙酮浸泡提取液，減壓濃縮至無(wú)丙酮味； 采用二氯甲烷萃取濃縮液4次，減壓濃縮二氯甲烷萃取液得浸膏；
[0026] b)對(duì)所得浸膏采用硅膠柱層析分離：以二氯甲烷與甲醇按1:0-0:1的體積比形成 的混合溶液進(jìn)行梯度洗脫，薄層層析檢測(cè)，收集含有Symphonone Η的流份；再經(jīng)反相硅膠 柱層析分離：以甲醇與水按15:35-90:10的體積比形成的混合溶液進(jìn)行梯度洗脫，薄層層 析檢測(cè)，收集含有Symphonone Η的流份；
[0027] c)米用 HPLC 純化：米用 waters2535Series，色譜柱 Xbridge Prep C180BD column(19X250mm, 5 μ m);洗脫液是以乙腈與水按25:75的體積比形成的混合溶液，且混 合溶液中還含有0. lwt%三氟乙酸（TFA);流速為16ml/min。
[0028] 對(duì)得到的Symphonone Η純品進(jìn)行質(zhì)譜和核磁分析的數(shù)據(jù)如下：
[0029] Symphonone Η，黃色膠體（甲醇），C38H4806, ESI-MS :m/z [Μ-1] = 599 ;
[0030] 4-匪1?(6001抱）：8.06(1!1，1^8，！1-12)，7.36(1!1，1^8，！1-15)，5.20(1!1，111，！1-35)，5· 18 (1H, m, H-18), 4. 94 (1H, brt, J = 6. 0Hz, H-25), 4. 74, 4. 76 (2H, brs, H-33), 1. 48 (3H, s, H- 20), 1. 85 (3H, s, H-21), 0. 90 (3H, s, H-22), 1. 19 (3H, s, H-23), 1. 57 (3H, s, H-27), 1. 52 (3H, s ，H-28)，1. 84 (3H, s, H-32)，1. 61 (3H, s, H-37)，1. 61 (3H, s, H-38);
[0031] 13C-NMR(150MHz):63.9(C-1)，193.3(C-2)，122.1(C-3)，172.1(C-4)，66.1(C- 5)，49. 5(C-6)，43. 5(C-7)，46. 9(C-8)，208. 4(C-9)，173. 1 (C-10)，116. 9(C-11)，109. 8( C-12)，147. 9 (C-13)，155. 5 (C-14)，104. 2 (C-15)，151. 3 (C-16)，26. 1 (C-17)，121. 1 (C-18 )，26. 3 (C-20)，18. 8 (C-21)，16. 4 (C-22)，24. 4 (C-23)，29. 2 (C-24)，123. 6 (C-25)，133. 6 ( C-26)，26. 1 (C-27)，18. 3 (C-28)，37. 8 (C-29)，44. 5 (C-30)，150. 8 (C-31)，18. 5 (C-32)，33. 0 (C-33)，26. 1 (C-35)，123. 9 (C-36)，26. 2 (C-37)，18. 4 (C-38)。
[0032] 實(shí)施例二、采用MTT法驗(yàn)證Symphonone H的體外活性
[0033] 在細(xì)胞水平上檢測(cè)化合物Symphonone Η對(duì)多種腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用。
[0034] 實(shí)驗(yàn)材料：
[0035] 人腫瘤細(xì)胞株及其培養(yǎng)：Hela宮頸癌細(xì)胞、PANC-1人胰腺癌細(xì)胞株、Α549人非小 細(xì)胞肺癌細(xì)胞株、HL-7702人肝細(xì)胞株等均購(gòu)自中科院生化細(xì)胞研究所。細(xì)胞于含10%胎 牛血清（Gibco)的RPMI-1640(Gibco)培養(yǎng)基中，在37°C、5%C02條件下培養(yǎng)。
[0036] 化合物Symphonone Η按實(shí)施例1制備；其他試劑：MTT及DMS0等均為Sigma公司 產(chǎn)品。
[0037] 實(shí)驗(yàn)方法：
[0038] Symphonone Η對(duì)上述多種腫瘤細(xì)胞株的細(xì)胞毒性通過(guò)MTT法測(cè)得。具體步驟如 下：
[0039] 1.樣品制備：將Symphonone Η分別溶解月DMS0中，得到濃度為lmg/ml的溶液；
[0040] 2.細(xì)胞經(jīng)胰酶消化并洗滌后懸浮于含10%胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基中，經(jīng)胎 盤藍(lán)染色排除法計(jì)或細(xì)胞數(shù)，并調(diào)節(jié)細(xì)胞懸浮液密度至1X 1〇5細(xì)胞/ml。
[0041] 3.在平底96孔板中，每孔加入100微升細(xì)胞，每孔中細(xì)胞總數(shù)為IX 104。于37°C、 5 % C02細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過(guò)夜。
[0042] 4.每孔加入5微升以細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基稀釋的樣品，使反應(yīng)終濃度分別為0、0. 3、1、 3、10、30、和100耶/1111。經(jīng)相應(yīng)量的0130加入不加藥的細(xì)胞中作為對(duì)照，不加藥物及0130 的含細(xì)胞孔作為背景。每點(diǎn)做三個(gè)平行實(shí)驗(yàn)。
[0043] 5.將加藥細(xì)胞在37°C、5% C02細(xì)胞培養(yǎng)箱中保溫48小時(shí)。
[0044] 6.每孔中加入10ul5mg/ml MTT溶液，繼續(xù)在培養(yǎng)箱中保溫3-4小時(shí)。
[0045] 7.將細(xì)胞板于lOOOrpm離心15分鐘，真空吸去培養(yǎng)液，加入150ul PBS洗滌后離 心并小心地吸去溶液。
[0046] 8.每孔加入150ul DMS0,置于搖床上以150rpm搖動(dòng)15分鐘，使生成的甲簪晶體 充分溶解。測(cè)定492nm光吸收值。
[0047] 9.根據(jù)光吸收值計(jì)算Symphonone Η處理后細(xì)胞相對(duì)存活率。計(jì)算公式如下：
[0048] 細(xì)胞相對(duì)存活率=(藥物處理組的光吸收值一背景吸收值）ADMS0處理組的光吸 收值一背景吸收值）
[0049] 表 1Κ：5〇(μΜ)
[0051] 由表1可見(jiàn)：Symphonone Η對(duì)Hela宮頸癌細(xì)胞、PANC-1人胰腺癌細(xì)胞株、A549人 非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株細(xì)胞株以及HL-7702人肝細(xì)胞的生長(zhǎng)均具有明顯抑制作用，強(qiáng)于陽(yáng)性 對(duì)照藥Etoposide (依托泊甙），其抗腫瘤活性顯著，故而其有望作為活性成分用于制備抗 腫瘤藥物制劑，具有藥用前景。
[0052] 本發(fā)明所涉及的多個(gè)方面已做如上闡述。然而，應(yīng)理解的是，在不偏離本發(fā)明精神 之前提下，本領(lǐng)域?qū)I(yè)人員可對(duì)其進(jìn)行等同改變和修飾，所述改變和修飾同樣落入本申請(qǐng) 所附權(quán)利要求的覆蓋范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. Symphonone H在制備預(yù)防或治療腫瘤的藥物中的應(yīng)用，所述腫瘤選自宮頸癌、胰腺 癌、肺癌和肝癌中的一種或多種。2. 如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的Symphonone H是作為唯一的活性成 分應(yīng)用于預(yù)防或治療腫瘤的藥物的制備中。3. -種防治腫瘤的藥物組合物，其特征在于，它含有有效量的Symphonone H，所述腫瘤 選自宮頸癌、胰腺癌、肺癌和肝癌中的一種或多種。
【專利摘要】本發(fā)明涉及醫(yī)藥保健品學(xué)領(lǐng)域，特別是涉及一種Symphonone？H的醫(yī)藥用途及其產(chǎn)品。本發(fā)明的Symphonone？H可用于制備防治腫瘤的藥物。
【IPC分類】A61P35/00, A61K31/352
【公開(kāi)號(hào)】CN105232521
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410279826
【發(fā)明人】徐宏喜, 夏正祥, 徐丹青, 勞遠(yuǎn)至, 譚紅勝, 付文衛(wèi)
【申請(qǐng)人】上海中醫(yī)藥大學(xué)
【公開(kāi)日】2016年1月13日
【申請(qǐng)日】2014年6月20日