miR-431在制備治療肌肉疾病的藥物中的用途
【專利摘要】本發(fā)明涉及miR-431在制備治療肌肉疾病的藥物中的用途。具體地,本發(fā)明涉及miR-431在骨骼肌干細胞及其在治療肌肉疾病中的功能,特別是肌肉損傷和肌營養(yǎng)不良中的用途。本發(fā)明還涉及miR-431在制備促進骨骼肌干細胞激活、增殖及分化的藥物中的用途,以及治療肌肉疾病的含有miR-431的藥物組合物。
【專利說明】mi R-431在制備治療肌肉疾病的藥物中的用途
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)學領域,具體而言涉及miR-431在治療肌肉疾病,特別是肌肉損傷 和肌營養(yǎng)不良中的用途。
【背景技術】
[0002] 骨骼肌在生物體的生命活動中起著非常重要的作用。它不僅發(fā)揮運動和支持功 能,同時它是一個重要的代謝器官。身體所攝取的糖和脂類等物質在骨骼肌中代謝產(chǎn)生能 量,這對維持整個身體的穩(wěn)定狀態(tài)起著非常重要的作用。許多的疾病如腫瘤、HIV感染、慢 性心衰等患者在晚期多伴隨有的骨骼肌逐漸減少的癥狀。此外,骨骼肌還是重要的內(nèi)分泌 器官,分泌一些調控因子,如肌肉抑制素(Myostatin)、IL-6、IL-8、IL-15和FGF21等。這 些調控因子除調節(jié)骨骼肌自身的生長發(fā)育外還參與其它的生理及病理過程[1]。
[0003] 衛(wèi)星細胞是骨骼肌最主要干細胞,衛(wèi)星細胞是位于肌纖維肌膜和基底膜之間的單 核細胞[2]。衛(wèi)星細胞表達一系列分子標記物,如Pax7、M-鈣粘蛋白、c-Met、MNF、NCAM及 VCAM-I等。在不同物種及發(fā)育的不同階段衛(wèi)星細胞的數(shù)量是不同的。新生小鼠中衛(wèi)星細胞 數(shù)量占整個肌核的30%左右成年后,衛(wèi)星細胞的比例減少到4%,到老年后,小鼠衛(wèi)星細胞 的比例下降到2%左右。
[0004] 骨骼肌組織的一個顯著特征在損傷后可以進行再生,衛(wèi)星細胞在骨骼肌損傷再生 過程中發(fā)揮重要功能。在正常狀態(tài)下衛(wèi)星細胞處于靜息狀態(tài),當受到外界刺激如損傷或運 動的情況下,處于靜息狀態(tài)的衛(wèi)星細胞被激活,激活的衛(wèi)星細胞經(jīng)過增殖,分化,融合形成 新的核在中央的骨骼肌纖維,同時有部分細胞通過自我更新維持骨骼肌衛(wèi)星細胞庫的穩(wěn)定 性。這個過程是高度協(xié)調統(tǒng)一的[3、4]。在正常狀況下,骨骼肌通過損傷再生新形成的骨骼 肌的形態(tài)及功能與沒有損傷的骨骼肌沒有差別。很多肌病在后期惡化是因為衛(wèi)星細胞自我 更新受到抑制導致衛(wèi)星細胞耗竭或者衛(wèi)星細胞的激活、增殖受到抑制所致。所以研究骨骼 肌衛(wèi)星細胞增殖,分化及自我更新的機制對于治療骨骼肌疾病有重要意義。
[0005] microRNA (也寫作miRNA或miR)作為一類具有調控活性的非編碼小分子RNA (通 常18至25nt),廣泛參與各種組織器官的發(fā)育與疾病發(fā)生。miRNA參與骨豁肌發(fā)育的直 接證據(jù)來自于在骨骼肌組織條件性敲除Dicer基因后小鼠的骨骼肌發(fā)育發(fā)生異常,其中包 括骨骼肌等減少,肌纖維形態(tài)異常。Dicer基因編碼的蛋白是miRNA成熟加工過程中所必 需的核酸內(nèi)切酶,這表明miRNA在骨骼肌發(fā)育過程中發(fā)揮重要作用?,F(xiàn)在已經(jīng)報道有許多 miRNA參與骨骼肌損傷再生的過程[5-8]。第一個報道在損傷修復過程中發(fā)生表達改變的 是miR-181,在損傷再生的最后階段miR-181表達量顯著上調[9]。MiR-351在CTX損傷再 生的早期表達量瞬時增加,miR-351通過抑制細胞周期抑制因子E2F3促進衛(wèi)星細胞的增殖 [lOhMiR-206在CTX損傷后,表達量顯著上調,這提示miR-206在骨骼肌損傷再生中發(fā)揮功 能,這與miR-206基因敲除小鼠中骨骼肌損傷再生功能嚴重受損相一致[11]。miR-206的 表達量上調可以抑制許多基因的表達,其中包括Pax7、Notch3、IGFBP5[11]和HMGB3[12], 而所有這些基因都抑制分化過程。此外,在損傷過程中miR-1的表達量上調也有助于抑制 Pax7的表達[13]。同樣地中,在CTX損傷后,miR-26a表達量上調。當在脛骨前肌中敲低 miR-26a表達后,骨骼肌損傷再生的進程減慢[14]。在相同的模型中,miR-125b在CTX損傷 后表達量上調,miR-125b下游的靶基因胰島素樣生長因子2(IGF-2)表達增加[15]。IGF-2 可以調控成肌分化過程并抑制后損傷再生進程[15]。此外,再生期間,miR-133表達量的增 加以防止衛(wèi)星細胞變成棕色脂肪細胞[16]。越來越多的miRNA參與到骨骼肌損傷再生的過 程中,外源性的miRNA干預損傷再生過程可能是未來治療肌肉疾病的一個方向。
[0006] 肌肉抑制素(也稱為生長分化因子 _8, growth and differentiation factor-8, ⑶F8)是TGF-β家族成員[17]。肌肉抑制素基因敲除小鼠全身骨骼肌顯著增大。同時, 多個種屬的動物(例如,雙肌牛[18-19]、犬[20]、綿羊[21]和人[22]等),因為肌肉抑制 素基因自然突變后,骨骼肌均出現(xiàn)與肌肉抑制素基因敲除小鼠骨骼肌相類似的表型。因此, 肌肉抑制素自1997年發(fā)現(xiàn)以來就被認為是控制肌肉發(fā)育的負調控因子,而引起廣泛的關 注。肌肉抑制素在出生后骨骼肌發(fā)育中的作用主要體現(xiàn)在兩個方面:第一,肌肉抑制素對 出生后正常骨骼肌生長發(fā)育的調控;第二,在各種肌肉損傷、刺激或肌病情況下,肌肉抑制 素對骨骼肌損傷修復的影響。盡管很多證據(jù)表明,成肌細胞和衛(wèi)星細胞是肌肉抑制素在體 內(nèi)作用的靶細胞,但其它細胞也可能受肌肉抑制素調控。在成年小鼠中過表達肌肉抑制素 后,可以誘導成年小鼠出現(xiàn)惡病質(cachexia),全身骨骼肌和脂肪組織顯著減少。這些動 物骨骼肌減少的程度和速度很難僅僅用肌肉抑制素抑制衛(wèi)星細胞進行解釋。因此,肌肉抑 制素也可能直接作用于肌管?,F(xiàn)在已有研究表明,肌肉抑制素可以抑制由C2C12分化的肌 管的蛋白合成。此外,肌肉抑制素使脂肪組織快速耗竭,這提示肌肉抑制素對脂肪組織有直 接作用。在HIV感染、惡病質以及慢性心衰等疾病情況下,骨骼肌體積大量減少,同時肌肉 抑制素的表達水平升高。表明肌肉抑制素可能參與這些肌病的發(fā)病或者這些疾病引起的骨 骼肌損傷修復過程。因此,干預肌肉抑制素的表達或抑制其活性,可能有會緩解由這些疾病 引起的骨骼肌體積的下降和功能的喪失,如老年骨骼肌衰減征(sarcopenia)、肌營養(yǎng)不良 (dystrophy)等。
[0007] 肌肉疾病(muscular disorders)通常是指骨豁肌疾病。肌營養(yǎng)不良是一組原發(fā) 于肌肉組織的遺傳病。臨床上表現(xiàn)為進行性加重的骨骼肌萎縮與無力、腱反射消失、肌肉 假性肥大。根據(jù)患者肌肉萎縮累及部位可分為多種類型:Duchenne/Becker型肌營養(yǎng)不良 (DMD/BMD)、面肩-肱型肌營養(yǎng)不良、肢帶型肌營養(yǎng)不良、股四頭肌型肌營養(yǎng)不良、遠端型肌 營養(yǎng)不良、進行性眼外肌麻痹型肌營養(yǎng)不良、眼肌-咽肌型肌營養(yǎng)不良。DMD型肌營養(yǎng)不良 是最常見的一類進行性肌營養(yǎng)不良癥?;疾÷蕿?. 3/10萬,占出生男嬰的20-30/10萬,為 X-連鎖隱性遺傳。主要是男孩發(fā)病,女性為致病基因的攜帶者。通常5歲左右發(fā)病。肌萎縮 是進行性的肌肉疾病,預后差,一般在20-30歲時伴隨心肌功能衰竭或呼吸困難等致死。目 前針對該病,醫(yī)學界尚無有效療法。Mdx小鼠是肌營養(yǎng)不良蛋白(dystrophin)基因缺陷鼠, 是研究骨骼肌干細胞激活、增殖、分化調控機制及骨骼肌損傷-再生機理的最常用模型。
[0008] 最初的研究報道體外培養(yǎng)的成肌細胞可以在Mdx小鼠中使肌營養(yǎng)不良蛋白恢復 重新表達,這激起了對臨床肌營養(yǎng)不良治療的極大熱情[23]。事實上,自體移植的由衛(wèi)星細 胞發(fā)展而來的成肌細胞在臨床應用到了心肌的修復中,同時也都的一些積極的結果。但是, 有幾大障礙減慢了對基于衛(wèi)星細胞治療肌營養(yǎng)失調疾病的研究。自體移植的衛(wèi)星細胞仍然 不能表達肌營養(yǎng)不良蛋白,在DMD患者中只有使用異體移植的衛(wèi)星細胞來補償缺失的肌營 養(yǎng)不良蛋白。因此,就存在如下的問題,首先是宿主的免疫排斥,其次是在移植衛(wèi)星細胞后 存活、自我更新及遷移都比較差。對如上問題的研究是未來治療肌營養(yǎng)不良的理論基礎,具 有很好的臨床應用前景。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0009] 鑒于以上技術問題,根據(jù)本公開的一些實施方式,提供了 miR-431在制備治療肌 肉疾病的藥物中的用途。
[0010] 在本公開中,肌肉疾病是指骨骼肌疾病,其選自肌肉損傷和肌營養(yǎng)不良。在一些 實施方式中,所述肌肉損傷是急性肌肉損傷。在一些實施方式中,所述肌營養(yǎng)不良選自: Duchenne/Becker型肌營養(yǎng)不良、面肩-肱型肌營養(yǎng)不良、肢帶型肌營養(yǎng)不良、股四頭肌型 肌營養(yǎng)不良、遠端型肌營養(yǎng)不良、進行性眼外肌麻痹型肌營養(yǎng)不良和眼肌-咽肌型肌營養(yǎng) 不良。在一些具體的實施方式中,肌營養(yǎng)不良為Duchenne/Becker型肌營養(yǎng)不良。
[0011] 在本公開中,所述miR-431的核苷酸序列如UGUCUUGCAGGCCGUCAUGCA (SEQ ID No. 1,Genbank no. MIMAT0001418)所示。
[0012] 在一些實施方式中,所述治療選自如下的一項或多項:促進成肌細胞的分化、促進 骨骼肌損傷再生、改善病理和生理表型。
[0013] 在一些實施方式中,所述促進成肌細胞的分化是指提高成肌素和/或肌球蛋白重 鏈的表達。
[0014] 在一些實施方式中,所述促進骨骼肌損傷再生是指促進衛(wèi)星細胞的激活、增殖和 分化。
[0015] 在一些實施方式中,所述改善病理和生理表型是指選自如下的一項或多項:降低 血清肌酸激酶水平、改善疲勞和提高肌纖維張力。
[0016] 根據(jù)本公開的另一些實施方式,提供了 miR-431在制備促進肌肉干細胞激活、增 殖及分化的藥物中的用途。
[0017] 根據(jù)本公開的另一些實施方式,提供一種用于治療肌肉疾病的藥物組合物,其包 含治療有效量的miR-431。所述肌肉疾病選自肌肉損傷和肌營養(yǎng)不良。在一些實施方式 中,所述肌肉損傷是急性肌肉損傷。在一些實施方式中,所述肌營養(yǎng)不良選自:Duchenne/ Becker型肌營養(yǎng)不良、面肩-肱型肌營養(yǎng)不良、肢帶型肌營養(yǎng)不良、股四頭肌型肌營養(yǎng)不 良、遠端型肌營養(yǎng)不良、進行性眼外肌麻痹型肌營養(yǎng)不良和眼肌-咽肌型肌營養(yǎng)不良。在一 些具體的實施方式中,肌營養(yǎng)不良為Duchenne/Becker型肌營養(yǎng)不良。
[0018] 在一些實施方式中,所述藥物組合物被制備成適于進行顯微注射的形式或適于轉 染的形式。
[0019] 在一些具體的實施方式中,所述藥物組合物是離體施用的:將miR-431或者能夠 表達miR-431的載體在體外導入或轉染哺乳動物自體或異體細胞,經(jīng)體外細胞擴增后,輸 回哺乳動物體。在另一些具體的實施方式中,所述藥物組合物是體內(nèi)施用的:miR-431或者 能夠表達miR-431的載體直接導入哺乳動物體內(nèi)。這種載體可以是病毒型或非病毒性,甚 至是裸DNA或RNA。
[0020] 所述哺乳動物選自人類、小鼠、狗、兔、?;蚝?;優(yōu)選人類或小鼠;最優(yōu)選人類。
[0021] 根據(jù)需要,藥物組合物還包括可藥用載體,其包括但不限于:稀釋劑、緩沖劑、混懸 齊?、乳劑、顆粒劑、包囊劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、噴霧劑、透皮吸收劑、濕潤劑、崩解劑、吸 收促進劑、表面活性劑、著色劑、矯味劑或吸附載體。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0022] 圖1顯示在微陣列中miR-431在肌肉抑制素基因敲除鼠及野生型小鼠中的表達 量。
[0023] 圖2顯示實時定量PCR驗證微陣列中miR-431在肌肉抑制素基因敲除鼠及野生型 小鼠中的表達量的結果。
[0024] 圖3顯示miR-431在肌肉抑制素基因敲除鼠及野生型小鼠的衛(wèi)星細胞中的表達 量。
[0025] 圖4顯示利用重組的肌肉抑制素以不同的劑量(0、0. 5、l、1.5yg/ml)處理C2C12 細胞后miR-431的表達量。
[0026] 圖5顯示利用重組的肌肉抑制素以lyg/ml劑量分別處理C2C12細胞不同時間 (12、24、36、48h)后 miR-431 的表達量。
[0027] 圖6顯示利用肌肉抑制素及其抑制劑卵泡抑制素(Follistatin)共同處理C2C12 細胞24小時后miR-431的表達量。
[0028] 圖7顯示Mek的抑制劑TO98059與肌肉抑制素共同處理C2C12細胞后p-Erk在蛋 白水平的表達。
[0029] 圖8顯示Mek的抑制劑TO98059與肌肉抑制素共同處理C2C12細胞后miR-431的 表達。
[0030] 圖9顯示肌肉抑制素同時處理Ras負性突變的C2C12(DN-Ras)細胞及對照組 C2C12細胞后p-Erk、p-Mek在蛋白水平的表達。
[0031] 圖10顯示肌肉抑制素同時處理Ras負性突變的C2C12 (DN-Ras)細胞及對照組 C2C12細胞后miR-431的表達量。
[0032] 圖11顯示miR-431在成年小鼠的不同組織中的表達豐度。
[0033] 圖12顯示miR-431在C2C12細胞分化過程中的表達變化。
[0034] 圖13顯示miR-431在骨骼肌衛(wèi)星細胞分化過程中的表達變化。
[0035] 圖14顯示C2C12細胞分化24小時后對照組與穩(wěn)定轉染miR-431后成肌素 (Myognin,MyoG)的細胞免疫熒光染色結果。
[0036] 圖15顯示C2C12細胞分化36小時后對照組與穩(wěn)定轉染miR-431后肌球蛋白重鏈 (MHC)的細胞免疫熒光染色結果。
[0037] 圖16顯示C2C12細胞分化24小時后對照組與穩(wěn)定轉染miR-431后成肌素在轉錄 水平的表達量。
[0038] 圖17顯示C2C12細胞分化24小時后對照組與穩(wěn)定轉染miR-431后成肌素在蛋白 水平的表達量。
[0039] 圖18和圖19顯示C2C12細胞分化36小時后對照組與穩(wěn)定轉染miR-431后肌球 蛋白重鏈在轉錄水平及蛋白水平的表達量。
[0040] 圖20顯示CTX誘導8-10周小鼠肌肉損傷再生7天后脛骨前?。═A?。M切面HE 染色結果。
[0041] 圖21顯示肌肉損傷后7天脛骨前肌橫切面上核在中央的肌纖維數(shù)目比例統(tǒng)計。
[0042] 圖22顯示miR-431轉基因小鼠及野生型小鼠在CTX損傷1天后理后MyoD (綠色) 免疫熒光染色結果,DAPI染色(紅色)定位細胞核。
[0043] 圖23顯示MyoD陽性細胞數(shù)量統(tǒng)計結果,每組統(tǒng)計10個以上視野。
[0044] 圖24顯示miR-431轉基因小鼠及野生型小鼠在CTX損傷1天后Pax7和MyoD蛋 白水平的檢測結果,GAPDH作為定量對照。
[0045] 圖25顯示miR-431轉基因小鼠及野生型小鼠在CTX損傷3天后理后Pax7 (紅色) MyoD (綠色)免疫熒光染色結果,DAPI染色(藍色)定位細胞核。
[0046] 圖26顯示Pax7及MyoD雙陽性細胞數(shù)量統(tǒng)計結果,每組統(tǒng)計10個以上視野。
[0047] 圖27顯示miR-431轉基因小鼠及野生型小鼠在CTX損傷3天后Pax7和MyoD蛋 白水平的檢測結果,GAPDH作為定量對照。
[0048] 圖28和圖29顯示miR-431轉基因小鼠及野生型小鼠在CTX損傷3和7天后eMHC 的表達水平的檢測結果。
[0049] 圖30顯示從miR-431轉基因小鼠與野生型小鼠中分離衛(wèi)星細胞后培養(yǎng)分化36小 時后MHC的細胞免疫熒光染色結果。
[0050] 圖31顯示從miR-431轉基因小鼠與野生型小鼠中分離衛(wèi)星細胞后培養(yǎng)分化36小 時后MHC陽性細胞的數(shù)目,每個統(tǒng)計10個以上的視野。
[0051] 圖32顯示從miR-431轉基因小鼠與野生型小鼠中分離衛(wèi)星細胞后培養(yǎng)分化36小 時后MHC的表達水平的檢測。
[0052] 圖33顯示從miR-431轉基因小鼠與野生型小鼠中分離單根肌纖維后懸浮培養(yǎng)72 小時后分Pax7 (紅色)、MyoD (綠色)及DAPI (藍色)分別染色的結果。
[0053] 圖34顯示分化(Pax77MyoD+)狀態(tài)衛(wèi)星細胞的比例。
[0054] 圖35A和35B為mdx: :miR-431⑶和mdx (A)脛骨前肌伊文思藍EBD浸潤(紅色) 面積及Lamin (綠色)顯示細胞膜的免疫熒光染色。
[0055] 圖36顯示為mdx: :miR-431和mdx脛骨前肌脛骨前?。═A)中伊文思藍浸染的面 積統(tǒng)計結果。
[0056] 圖37顯示mdx: :miR-431和mdx脛骨前?。═A)血清中肌酸激酶水平檢測結果。
[0057] 圖38顯示為mdx: :miR-431和mdx小鼠跑步實驗運動時間記錄結果。
[0058] 圖39和40顯不為mdx: :miR_431和mdx肌肉力量檢測結果。
【具體實施方式】
[0059] 本公開所述的肌肉損傷模型是指以蛇毒心臟毒素(Cardiotoxin/CTX)肌肉注射 脛骨前肌造成的急性肌肉損傷模型。此模型較好地提供了肌肉損傷后肌肉干細胞發(fā)揮功能 的進程。
[0060] 本發(fā)明所述的肌營養(yǎng)不良模型是指利用mdx小鼠模型,被廣泛用作DMD肌營養(yǎng)不 良模型,此模型以溫和進行性的方式模擬了人類肌肉疾病。
[0061] C2C12細胞為小鼠成肌細胞系。
[0062] 實施例1.肌肉抑制素通過Ras/Raf/Mek/Erk信號通路負調控miR-431的表達
[0063] 1.篩選到受肌肉抑制素負調控的miR-431
[0064] 選擇在肌肉抑制素基因敲除小鼠骨骼肌組織中表達上調的miR-431作為候選 miRNA對其功能和自身表達調控進行了研究。在骨骼肌發(fā)育的5個階段,miR-431在肌肉抑 制素基因敲除小鼠中的表達量均高于野生型小鼠(如圖1)。從肌肉抑制素基因敲除小鼠 (購自:南京模式動物所)與野生型同胞小鼠(基因敲除小鼠的同窩對照)不同發(fā)育階段 (E15. 5、4周、10周、16周和40周)的骨豁肌組織中提取總RNA,利用miRNA表達譜芯片方 法篩選和鑒定肌肉抑制素基因敲除小鼠與野生型小鼠骨骼肌組織中差異表達的miRNA。通 過統(tǒng)計學分析,鑒定到在肌肉抑制素基因敲除小鼠與野生型小鼠骨骼肌表達中存在差異的 miR-431。
[0065] 圖1的結果表明:miR-431在肌肉抑制素基因敲除小鼠中表達高于野生型小鼠提 示肌肉抑制素負調控miR-431的表達。
[0066] 2.實時(Real-time)驗證
[0067] 取肌肉抑制素基因敲除小鼠與野生型同胞小鼠不同發(fā)育階段(E15.5、4周、10周、 16周和40周)的骨骼肌組織的總RNA。
[0068] (1)逆轉錄:在0. 2mL的PCR反應管中加入下列試劑:
[0069]
【權利要求】
1. miR-431在制備治療肌肉疾病的藥物中的用途。
2. 根據(jù)權利要求1所述的用途,其中所述肌肉疾病選自肌肉損傷和肌營養(yǎng)不良。
3. 根據(jù)權利要求2所述的用途,所述治療是指選自如下的一項或多項:促進成肌細胞 的分化、促進骨骼肌損傷再生、改善病理和生理表型; 優(yōu)選地,所述促進成肌細胞的分化是指提高成肌素和/或肌球蛋白重鏈的表達; 優(yōu)選地,所述促進骨骼肌損傷再生是指促進衛(wèi)星細胞的激活、增殖和分化; 優(yōu)選地,所述改善病理和生理表型選自如下的一項或多項:降低血清肌酸激酶水平、改 善疲勞和提高肌纖維張力。
4. 根據(jù)權利要求2所述的用途,其中所述肌肉損傷為急性肌肉損傷。
5. 根據(jù)權利要求2所述的用途,其中所述肌營養(yǎng)不良選自Duchenne/Becker型肌營養(yǎng) 不良、面肩-肱型肌營養(yǎng)不良、肢帶型肌營養(yǎng)不良、股四頭肌型肌營養(yǎng)不良、遠端型肌營養(yǎng) 不良、進行性眼外肌麻痹型肌營養(yǎng)不良和眼肌-咽肌型肌營養(yǎng)不良;優(yōu)選地,所述肌營養(yǎng)不 良為Duchenne/Becker型肌營養(yǎng)不良。
6. 根據(jù)權利要求1至5任一項所述的用途,其中所述miR-431的核苷酸序列如SEQ ID No. 1所示。 7. miR-431在制備促進肌肉干細胞激活、增殖及分化的藥物中的用途。
8. -種用于治療肌肉疾病的藥物組合物,其包含治療有效量的miR-431 ;其中所述肌 肉疾病選自肌肉損傷和肌營養(yǎng)不良。
9. 根據(jù)權利要求8所述的藥物組合物,其中所述肌肉損傷為急性肌肉損傷。
10. 根據(jù)權利要求8所述的藥物組合物,其中所述肌營養(yǎng)不良選自Duchenne/Becker型 肌營養(yǎng)不良、面肩-肱型肌營養(yǎng)不良、肢帶型肌營養(yǎng)不良、股四頭肌型肌營養(yǎng)不良、遠端型 肌營養(yǎng)不良、進行性眼外肌麻痹型肌營養(yǎng)不良和眼肌-咽肌型肌營養(yǎng)不良;優(yōu)選所述肌營 養(yǎng)不良為Duchenne/Becker型肌營養(yǎng)不良。
【文檔編號】A61P21/00GK104306988SQ201410496029
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年9月25日 優(yōu)先權日:2014年9月25日
【發(fā)明者】朱大海, 武日茂, 翟麗麗, 張勇 申請人:中國醫(yī)學科學院基礎醫(yī)學研究所