治療下肢缺血性疾病的藥物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種治療下肢缺血性疾病的藥物，該藥物含有紅景天苷作為活性成 分。本發(fā)明還涉及PHD3的特異性抑制劑、血管新生因子促進劑、血管平滑肌細胞迀移促進 劑、骨骼肌細胞迀移促進劑以及成熟血管形成的促進劑。
【背景技術(shù)】
[0002] 外周動脈疾病(Peripheral Artery Disease)是指由于動脈粥樣硬化等導(dǎo)致動脈 阻塞，從而限制心臟以外的組織的血流供應(yīng)。下肢缺血性疾病(Limb Ischemia)是一種最常 見的外周動脈疾病，由于血管堵塞、血栓、高血糖等原因?qū)е逻h端（下肢)供血不足。由于氧 氣是由血液中的紅血球運輸?shù)礁鱾€組織器官，供血不足的結(jié)果是引起下肢組織缺氧、缺營 養(yǎng)，嚴(yán)重時會導(dǎo)致組織壞疽，組織缺失(tissue loss)甚至個體的死亡。
[0003] 目前，下肢缺血性疾病尚未有有效的治療和控制方法，嚴(yán)重時需要對患者進行截 肢，給患者帶來巨大的痛苦和損失。目前被認為有望起到良好效果的治療方法是通過促進 血管新生，改善遠端供血的情況，從而阻止組織繼續(xù)壞死并起到改善下肢功能的作用。
[0004] 作為下肢缺血性疾病的藥物，目前有第一代治療藥物和第二代治療藥物。其中，第 一代治療藥物利用的是單個血管新生因子（血管內(nèi)皮生長因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)等），但臨床試驗結(jié)果不理想，新生血管不成熟，出現(xiàn)漏的情況，缺乏 功會泛性（參見：Therapeutic angiogenesis for critical limb ischaemia.Nature Reviews Cardiology ,2013,10(7): 387-96)。治療結(jié)果不理想的原因被認為是由于血管重 構(gòu)是個多因子參與的復(fù)雜的過程。第二代治療藥物則利用了多種血管新生因子的組合(成 纖維細胞生長因子2(Fibroblast growth factor 2，F(xiàn)GF2)和血小板衍生因子(？1&七61〇1：-derived growth factor ,F1DGF); VEGF和血管生成素-l(Angiopoietin_l，ANGl))，雖然有一 定的效果，然而血管新生因子種類繁多，它們在血管重構(gòu)的不同的階段起到不同的作用。因 此，存在著血管新生因子種類的選擇、組合時的比率、何時給藥等難題。另外，目前對下肢缺 血性疾病的治療手段還面臨外來血管新生因子的局部化，因此不足以在廣泛的缺血缺氧區(qū) 域內(nèi)誘導(dǎo)足夠的新生成熟血管的難題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 發(fā)明所要解決的問題
[0006] 基于上述現(xiàn)狀，作為解決上述問題的最佳方法，目前迫切需要一種能在廣泛的缺 血缺氧區(qū)域內(nèi)起作用，并同時調(diào)控多種血管新生因子和參與成熟血管重構(gòu)的多種體內(nèi)通路 的藥物。
[0007] 解決問題的手段
[0008] 本發(fā)明的發(fā)明人等對此進行了深入研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，紅景天苷(結(jié)構(gòu)式如式1所示） 對治療下肢缺血性疾病有良好的治療效果。進而，還發(fā)現(xiàn)紅景天苷具有在骨骼肌內(nèi)特異性 抑制PHD3并促進骨骼肌細胞迀移能力的效果。進而，還發(fā)現(xiàn)紅景天苷能促進骨骼肌內(nèi)血管 新生因子（VEGF-A、ANG1、FGF2、PDGF-BB、血紅素加氧酶-I(Heme oxygenase-1，H0-1)、肝細 胞生長因子（Hepatocyte growth factor，HGF)、核因子-kappa B(Nuclear factor-kappa B，NF-κΒ))、特別是促進對血管成熟起關(guān)鍵作用的因子(FGF2、HGF、PDGF-BB、NF-κΒ和ANGI) 的表達以及分泌的作用。進而還發(fā)現(xiàn)，紅景天苷具有促進骨骼肌細胞迀移的作用。進而還發(fā) 現(xiàn)，紅景天苷具有在缺血以及/或缺氧條件下促進成熟血管形成的作用。由此，完成了本發(fā) 明。
[0009] 式 1
[0010] 本發(fā)明渉及如下方案。
[0011] 1.-種治療下肢缺血性疾病的藥物，所述藥物含有紅景天苷作為活性成分。本發(fā) 明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，紅景天苷對于治療下肢缺血性疾病起到良好的治療效果。
[0012] 2.根據(jù)方案1的治療下肢缺血性疾病的藥物，所述藥物為注射劑。
[0013] 3.根據(jù)方案1或2的治療下肢缺血性疾病的藥物，所述藥物為骨骼肌注射劑。
[0014] 4.根據(jù)方案1~3中任一項的治療下肢缺血性疾病的藥物，所述藥物進一步包含輔 料。
[0015] 5.-種PHD3的特異性抑制劑，所述抑制劑為紅景天苷。本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，紅景 天苷能特異性抑制PHD3的表達，同時對PHD家族的其他因子的表達沒有影響。
[0016] 6.-種血管新生因子的表達和分泌的促進劑，所述促進劑為紅景天苷。
[0017] 7.根據(jù)方案6的促進劑，所述促進劑促進骨骼肌細胞的血管新生因子的表達和分 泌。本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，紅景天苷能促進血管新生因子在骨骼肌細胞內(nèi)的表達以及從骨 骼肌細胞里的分泌。
[0018] 8.根據(jù)方案6或7的促進劑，所述血管新生因子為HIF-Ia依賴性和HIF-Ia非依賴性 的血管新生因子。本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，紅景天苷能促進HIF-Ia依賴性和HIF-Ia非依賴性 的血管新生因子，起到同時調(diào)控多種血管新生因子的作用，從而達到促進成熟血管形成的 結(jié)果。
[0019] 9.根據(jù)方案6~8中任一項的促進劑，所述血管新生因子能在缺血以及/或缺氧條 件下促進成熟血管形成。本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，紅景天苷能在缺血缺氧條件下促進缺血缺 氧區(qū)域內(nèi)血管內(nèi)皮細胞以及血管平滑肌細胞的數(shù)量，進一步能促進由血管平滑肌細胞包圍 血管內(nèi)皮細胞的管腔結(jié)構(gòu)（即成熟血管）的形成。
[0020] 10.-種治療下肢缺血性疾病的藥物，所述藥物為方案5的PHD3的特異性抑制劑或 方案6~9中任一項的促進劑。本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，PHD3的降低能起到同時調(diào)控多種血管 新生因子的作用，從而達到促進成熟血管形成的效果。
[0021] 11. -種骨骼肌細胞迀移的促進劑，所述促進劑為紅景天苷。本發(fā)明的發(fā)明人發(fā) 現(xiàn)，紅景天苷在促進骨骼肌細胞分泌各種血管新生因子的同時，能促進骨骼肌細胞的迀移， 從而達到在更廣泛的范圍內(nèi)促進成熟血管形成的效果。
[0022] 12.-種血管平滑肌細胞迀移的促進劑，所述促進劑含有利用紅景天苷刺激骨骼 肌細胞而產(chǎn)生的分泌性蛋白。
[0023] 13.根據(jù)方案11的骨骼肌細胞迀移的促進劑或方案12的血管平滑肌細胞迀移的促 進劑，所述促進劑通過骨骼肌細胞與血管平滑肌細胞之間的細胞通訊促進血管平滑肌細胞 的迀移。本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，紅景天苷能通過促進骨骼肌細胞與血管平滑肌細胞之間的 細胞通訊，促進血管平滑肌細胞的迀移，從而促進成熟血管的形成。
[0024] 14.根據(jù)方案11的骨骼肌細胞迀移的促進劑或根據(jù)方案12的血管平滑肌細胞迀移 的促進劑，所述促進劑通過促進FGF2介導(dǎo)的骨骼肌細胞與血管平滑肌細胞間的細胞通訊促 進血管平滑肌細胞的迀移。
[0025] 15.根據(jù)方案11的骨骼肌細胞迀移的促進劑或根據(jù)方案12的血管平滑肌細胞迀移 的促進劑，所述促進劑通過PDGF-BB介導(dǎo)的骨骼肌細胞與血管平滑肌細胞間的細胞通訊促 進血管平滑肌細胞的迀移。
[0026] 16.紅景天苷在制備治療下肢缺血性疾病的藥物中的用途。
[0027] 17.根據(jù)方案16所述的用途，所述治療下肢缺血性疾病的藥物為注射劑。
[0028] 18.根據(jù)方案17所述的用途，所述治療下肢缺血性疾病的藥物為骨骼肌注射劑。
[0029] 19.紅景天苷在制備PHD3的特異性抑制劑中的用途。
[0030] 20.根據(jù)方案19所述的用途，所述PHD3的特異性抑制劑為治療下肢缺血性疾病的 藥物。
[0031] 21.紅景天苷在制備血管新生因子的表達和分泌的促進劑中的用途。
[0032] 22.根據(jù)方案21所述的用途，所述血管新生因子的表達和分泌的促進劑為治療下 肢缺血性疾病的藥物。
[0033] 23.根據(jù)方案21所述的用途，所述血管新生因子的表達和分泌的促進劑促進骨骼 肌細胞的血管新生因子的表達和分泌。
[0034] 24.根據(jù)方案21~23中任一項的促進劑，所述血管新生因子為VEGF-A、ANG1、FGF2、 PDGF-BB、HO-I、HGF、NF-κΒ 中的一種或多種。
[0035] 25.紅景天苷在制備成熟血管形成促進劑中的用途。
[0036] 26.根據(jù)方案25的促進劑，其促進下肢缺血性疾病的組織中的血管新生以及新生 血管的成熟。
[0037] 另外，上述方案中的下肢缺血性疾病沒有限制，包括血栓閉塞性脈管炎、閉塞性動 脈硬化癥、間歇性跋行（Intermittent Claudication，IC)、糖尿病足(Diabetic Foot)等糖 尿病相關(guān)血管病變以及惡性下肢缺血性疾病(Critical Limb IsChemia，CLI)，優(yōu)選為間歇 性跛行、糖尿病足和下肢缺血性疾病，最優(yōu)選為糖尿病足和下肢缺血性疾病。
[0038] 根據(jù)本發(fā)明，能夠提供一種治療下肢缺血性疾病的藥物，所述藥物含有紅景天苷 作為活性成分。所述藥物通過抑制PHD3的表達，從而促進血管新生因子（VEGF-A、ANG1、 FGF2、PDGF-BB、HO-1、HGF、NF-κΒ)、特別是促進對血管成熟起關(guān)鍵作用的因子(FGF2、HGF、 H)GF-BB、NF-kB和ANGl)的表達，進而通過促進骨骼肌細胞迀移以及間接促進血管平滑肌細 胞迀移以及改善低氧適應(yīng)性，從而促進病變部位的成熟血管的形成，實現(xiàn)促進下肢血流的 恢復(fù)的治療效果。
【附圖說明】
[0039] 圖IA表示紅景天苷促進下肢缺血模型小鼠的血流恢復(fù)作用的圖。
[0040] 圖