專(zhuān)利名稱(chēng)：從生物質(zhì)中溶劑萃取聚羥基鏈烷酸酯的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于從其它生物質(zhì)組分中萃取特定組分的方法。更具體地講，本發(fā)明涉及通過(guò)用溶劑進(jìn)行萃取來(lái)從生物體系如植物或細(xì)菌中萃取聚羥基鏈烷酸酯的方法。
背景技術(shù)：
塑膠如聚酯可典型地通過(guò)熟知的合成方法由石化產(chǎn)品源制得。這些基于石化產(chǎn)品的聚合物在處理后需要幾百年的時(shí)間來(lái)降解。對(duì)于塑膠廢棄物積聚于垃圾掩埋地的憂(yōu)慮，造成目前用可生物降解聚合物作為代替的趨勢(shì)。
可生物降解的合成聚合物由于其生產(chǎn)成本昂貴，因此還未在市場(chǎng)上取得巨大的成功。然而，生物工藝學(xué)的發(fā)展已導(dǎo)出成本降低的生產(chǎn)方法。具體地講，如今通過(guò)大規(guī)模的細(xì)菌發(fā)酵可制得可生物降解的脂族共聚酯。統(tǒng)稱(chēng)為聚羥基鏈烷酸酯或PHA的這些聚合物可在以發(fā)酵植物中葡萄糖供養(yǎng)的原生或重組細(xì)菌體內(nèi)合成。如同它們的石化產(chǎn)品前體一樣，PHA的結(jié)構(gòu)性質(zhì)以及由此而得的機(jī)械性質(zhì)可被定制以符合所需最終產(chǎn)品的規(guī)格。然而，與它們的石化產(chǎn)品前體不同的是PHA既可需氧降解也可厭氧降解。
PHA是極其多樣化的，并且已識(shí)別了多達(dá)100種不同的PHA結(jié)構(gòu)。PHA結(jié)構(gòu)可以?xún)煞N方式變化。第一，PHA可根據(jù)R側(cè)基的結(jié)構(gòu)而變化，所述側(cè)基形成了羥基鏈烷酸的側(cè)鏈而不涉及PHA主碳鏈。第二，PHA可根據(jù)衍生出它們的單元數(shù)目和類(lèi)型而變化。例如，PHA可以為均聚物、共聚物和三元共聚物。PHA結(jié)構(gòu)中的這些變化是造成它們物理特性變化的原因。由此，物理特性變化是造成通常所用的已知PHA萃取方法低效的原因。
溶劑萃取已被描述為一種從細(xì)菌和植物中萃取PHA的方法。然而，溶劑萃取結(jié)構(gòu)柔韌的PHA聚合物是一種挑戰(zhàn)，因?yàn)檫@些PHA結(jié)晶緩慢，并且當(dāng)除去萃取溶劑時(shí)，易于粘結(jié)在一起以形成凝膠。凝膠形成是不可取的，因?yàn)樗枰~外高成本步驟以將溶劑從凝膠中逐出，并將所剩結(jié)構(gòu)柔韌的PHA壓成片以獲得純聚合物。若干雙溶劑萃取方法旨在解決凝膠形成的問(wèn)題。然而，雙溶劑萃取比單溶劑萃取更加昂貴，因?yàn)樗鼈兺ǔＰ枰獌杀读康娜軇?，并且在沒(méi)有額外溶劑處理如分離兩種溶劑的情況下回收溶劑是不可能的。
鑒于上述原因，需要一種用于從細(xì)菌和植物中萃取結(jié)構(gòu)柔韌的PHA聚合物的簡(jiǎn)便且更經(jīng)濟(jì)的方法。上述方法應(yīng)優(yōu)選涉及單一可循環(huán)使用的主要溶劑，所述溶劑優(yōu)選為環(huán)境友好的。
發(fā)明概述本發(fā)明人已驚奇地發(fā)現(xiàn)了一種具有最小程度凝膠形成的用于從潤(rùn)濕或干燥生物質(zhì)中萃取結(jié)構(gòu)柔韌的PHA聚合物的方法。所述方法涉及使用單一可循環(huán)使用的主要溶劑，所述溶劑優(yōu)選為環(huán)境友好的。
因此，本發(fā)明涉及用于從潤(rùn)濕或干燥生物質(zhì)中萃取結(jié)構(gòu)柔韌的PHA的方法，所述方法包括以下步驟使包含聚羥基鏈烷酸酯的生物質(zhì)與單一主要溶劑混合以形成生物質(zhì)液體；加熱所述生物質(zhì)液體直至至少部分聚羥基鏈烷酸酯從包含聚羥基鏈烷酸酯的生物質(zhì)中溶出以形成PHA液體；從PHA液體中分離出生物質(zhì)以形成富含PHA的液體；從富含PHA的液體中蒸去0％至約50％的單一主要溶劑以形成溶劑蒸氣和富含PHA的濃縮液體；并冷卻富含所述PHA的濃縮液體以形成沉淀的聚羥基鏈烷酸酯和不純的溶劑液體，并在所述冷卻后，通過(guò)加壓過(guò)濾從所述不純?nèi)軇┮后w中回收沉淀的聚羥基鏈烷酸酯；其中所述聚羥基鏈烷酸酯包含至少兩種無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元，其中第一種無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元具有以下結(jié)構(gòu) 并且第二種或高級(jí)無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元具有以下結(jié)構(gòu)
其中R為C3至C7烷基或它們的混合物；其中約75％摩爾至約99％摩爾的無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元具有第一種無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元的結(jié)構(gòu)，并且約1％摩爾至約25％摩爾的無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元具有第二種無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元的結(jié)構(gòu)；并且其中所述單一主要溶劑為丁醇、戊醇或它們的混合物。
在上述方法中，所述生物質(zhì)液體以約10至約100份單一主要溶劑對(duì)約1份生物質(zhì)的比率包含所述單一主要溶劑和所述生物質(zhì)。
在上述方法中，所述生物質(zhì)液體以約50份單一主要溶劑對(duì)約1份生物質(zhì)的比率包含所述單一主要溶劑和所述生物質(zhì)。
上述方法還包括在加熱所述生物質(zhì)液體前，將按重量計(jì)約3％至約8％的丙酮加入到所述生物質(zhì)液體中。
在上述方法中，加熱所述生物質(zhì)液體可使所述生物質(zhì)液體的溫度增加到離所述溶劑沸點(diǎn)約5℃至約20℃的范圍內(nèi)。在上述方法中，通過(guò)高溫過(guò)濾進(jìn)行所述生物質(zhì)從所述PHA液體中的分離以形成富含PHA的液體。在上述方法中，通過(guò)向富含PHA的液體施加真空以從富含所述PHA的液體中蒸發(fā)出所述溶劑。在上述方法中，使溶劑蒸氣回復(fù)為溶劑液體而回收。在上述方法中，溶劑液體可再循環(huán)以用于進(jìn)一步的萃取。
上述方法還包括在通過(guò)加壓過(guò)濾從不純?nèi)軇┮后w中回收聚羥基鏈烷酸酯后，用新鮮的單一主要溶劑洗滌沉淀的聚羥基鏈烷酸酯。在上述方法中，不純的溶劑液體可再循環(huán)以用于進(jìn)一步的萃取。在上述方法中，戊醇為異戊醇、1-戊醇、2-戊醇、3-戊醇或它們的混合物。在上述方法中，戊醇為異戊醇和/或丁醇為異丁醇。
一種用于從包含聚羥基鏈烷酸酯的干燥生物質(zhì)中萃取所述聚羥基鏈烷酸酯的方法，所述方法包括以下步驟使包含聚羥基鏈烷酸酯的干燥生物質(zhì)與單一主要溶劑混合以形成生物質(zhì)液體；加熱所述生物質(zhì)液體直至至少部分聚羥基鏈烷酸酯從包含聚羥基鏈烷酸酯的生物質(zhì)中溶出以形成PHA液體；從PHA液體中分離出生物質(zhì)以形成富含PHA的液體；從富含PHA的液體中蒸去0％至約50％的單一主要溶劑以形成溶劑蒸氣和富含PHA的濃縮液體；并冷卻富含所述PHA的濃縮液體以形成沉淀的聚羥基鏈烷酸酯和不純的溶劑液體，并在所述冷卻后，通過(guò)加壓過(guò)濾從所述不純?nèi)軇┮后w中回收沉淀的聚羥基鏈烷酸酯；其中所述聚羥基鏈烷酸酯包含至少兩種無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元，其中第一種無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元具有以下結(jié)構(gòu) 并且第二種或高級(jí)無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元具有以下結(jié)構(gòu) 其中R為C3至C7烷基或它們的混合物；其中約75％摩爾至約99％摩爾的無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元具有第一種無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元的結(jié)構(gòu)，并且約1％摩爾至約25％摩爾的無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元具有第二種無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元的結(jié)構(gòu)；并且其中所述單一主要溶劑為丁醇、戊醇、甲苯或它們的混合物。
對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，通過(guò)閱讀本說(shuō)明書(shū)的公開(kāi)內(nèi)容，本發(fā)明的這些和其它特征、方面和優(yōu)點(diǎn)將變得顯而易見(jiàn)。
所有引用文獻(xiàn)的相關(guān)部分均引入本文以供參考，任何文獻(xiàn)的引用不可解釋為對(duì)其作為本發(fā)明的現(xiàn)有技術(shù)的認(rèn)可。
發(fā)明詳述盡管本說(shuō)明書(shū)在結(jié)尾的權(quán)利要求書(shū)中特別指出并清楚地要求保護(hù)本發(fā)明，但據(jù)信通過(guò)下列說(shuō)明可更好地理解本發(fā)明。
除非另外指明，本文所用的所有百分?jǐn)?shù)和比率均按總組合物的重量計(jì)，并且所有測(cè)量均在25℃進(jìn)行。
“包括”是指可加入不影響最終結(jié)果的其它步驟和其它成分。該術(shù)語(yǔ)包括術(shù)語(yǔ)“由...組成”和“基本上由...組成”。
本領(lǐng)域描述了幾種可從生物質(zhì)中萃取PHA的方法。這些方法包括通過(guò)使用酶、化學(xué)試劑、機(jī)械部件的PHA萃取和溶劑萃取。不受理論的限制，據(jù)信單一主要溶劑方法可以(a)使所萃取的結(jié)構(gòu)柔韌的PHA的收率和純度達(dá)到最佳；和(b)將整個(gè)萃取過(guò)程中的步驟數(shù)減到最少，最大限度地實(shí)現(xiàn)經(jīng)濟(jì)商業(yè)化萃取結(jié)構(gòu)柔韌的PHA的目的。
上述目的可通過(guò)以下來(lái)實(shí)現(xiàn)(a)使用單一主要溶劑代替由具有基本上不相同溶劑化特性的溶劑或溶劑組構(gòu)成的雙溶劑體系；(b)回收單一主要溶劑以用于隨后的萃取中；(c)優(yōu)選使用環(huán)境友好的單一主要溶劑；(d)簡(jiǎn)化或免去單獨(dú)的生物質(zhì)細(xì)胞胞溶步驟；(e)降低或消除萃取過(guò)程開(kāi)始之前干燥生物質(zhì)的需要；(f)降低或消除對(duì)第二種主要溶劑的需要以沉淀結(jié)構(gòu)柔韌的PHA而基本上不形成凝膠；和/或(g)使用新鮮的單一主要溶劑，而不是使用其它不可用于余下萃取過(guò)程中的物質(zhì)如乙醇或活性炭，洗滌所萃取的結(jié)構(gòu)柔韌的PHA。
前述本發(fā)明實(shí)施方案具有許多比現(xiàn)行所用方法優(yōu)越的令人驚奇的優(yōu)點(diǎn)。例如，本發(fā)明所公開(kāi)的萃取方法可萃取結(jié)構(gòu)柔韌的PHA以獲得純聚合物，而不會(huì)有顯著的凝膠生成。
本發(fā)明的另一個(gè)令人驚奇的優(yōu)點(diǎn)是它具有在較低溫度(低于150℃)下萃取PHA的能力。不受理論的限制，從商業(yè)角度上看，溫度因素是重要的，這是因?yàn)榫酆衔镏辽俨糠秩芙鈺r(shí)的溫度和充分溶解所需的時(shí)間，可影響資本成本和產(chǎn)品質(zhì)量。例如，在較低溫度下經(jīng)受一段較短時(shí)間的PHA典型具有較高的質(zhì)量，并且增加了后面生產(chǎn)過(guò)程中的可用性。
本文的過(guò)程和方法還包括許多其它變型。本發(fā)明的過(guò)程和方法更詳細(xì)地描述于下文中。
本發(fā)明涉及使用單一主要溶劑，從生物質(zhì)中萃取結(jié)構(gòu)柔韌的PHA的方法。本文所用短語(yǔ)“從生物質(zhì)中萃取結(jié)構(gòu)柔韌的PHA”除了是指對(duì)由僅產(chǎn)生單一類(lèi)型PHA的生物質(zhì)所產(chǎn)生的PHA的萃取，在本文中還指當(dāng)所述生物質(zhì)產(chǎn)生多于一種類(lèi)型的PHA時(shí)對(duì)一種或多種類(lèi)型PHA的萃取。
此方法的步驟如下
I.使包含結(jié)構(gòu)柔韌的PHA的潤(rùn)濕或干燥生物質(zhì)與單一主要溶劑混合以形成生物質(zhì)液體a)生物質(zhì)經(jīng)由本發(fā)明方法，從原料來(lái)源中萃取結(jié)構(gòu)柔韌的PHA，所述原料來(lái)源包括但不限于單細(xì)胞生物體如細(xì)菌或真菌和高級(jí)生物體如植物。本文中，這些原料來(lái)源統(tǒng)稱(chēng)為“生物質(zhì)”。雖然生物質(zhì)可由野生型生物體構(gòu)成，但它們優(yōu)選為遺傳學(xué)操作的物種，專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)用于產(chǎn)生培育者感興趣的特定PHA。上述遺傳學(xué)操作的生物體可通過(guò)插入外源DNA來(lái)制得，所述DNA得自可自然產(chǎn)生PHA的細(xì)菌。
包含所關(guān)注的PHA的生物質(zhì)可以是潤(rùn)濕的或干燥的。潤(rùn)濕的生物質(zhì)由溶液如水溶液中的生物質(zhì)組成。干燥生物質(zhì)由已從其中除去液體的生物質(zhì)構(gòu)成，在開(kāi)始萃取步驟之前使用包括但不限于噴霧法或冷凍干燥法的方法從生物質(zhì)中除去液體。所述生物質(zhì)優(yōu)選為干燥的。
可用于本發(fā)明中的植物包括設(shè)計(jì)用于產(chǎn)生PHA的任何被遺傳工程學(xué)方法改變的植物。優(yōu)選的植物包括農(nóng)作物，如糧谷、含油種子和塊莖植物；更優(yōu)選鱷梨、大麥、甜菜、蠶豆、蕎麥、胡蘿卜、椰子、干椰肉、玉米(玉米)、棉籽、葫蘆、兵豆、利馬豆、黍粒、綠豆、燕麥、油棕、豌豆、花生、馬鈴薯、南瓜、油菜籽(如低芥酸菜子)、稻米、甜高粱、大豆、糖料甜菜、甘蔗、向日葵、甘薯、煙草、小麥和山藥。可用于本發(fā)明方法中的上述遺傳學(xué)上改變的結(jié)實(shí)植物包括但不限于，蘋(píng)果、杏、香蕉、香瓜、櫻桃、葡萄、金橘、橘子、番茄和西瓜。優(yōu)選地，依照Poirier，Y.、D.E.Dennis、K.Klomparens和C.Somerville的“Polyhydroxybutyrate，a biodegradable thermoplastic，produced in transgenic plants”(SCIENCE，第256卷第520至523頁(yè)，1992)；和/或1997年7月22日公布的授予Michigan StateUniversity的美國(guó)專(zhuān)利5,650,555中所公開(kāi)的方法，用遺傳工程學(xué)方法改變所述植物以產(chǎn)生PHA。尤其優(yōu)選的植物是被遺傳工程學(xué)方法改變以產(chǎn)生PHA的大豆、馬鈴薯、玉米和椰子植物；更優(yōu)選大豆。
可用于本發(fā)明中的細(xì)菌包括設(shè)計(jì)用于產(chǎn)生PHA的任何被遺傳工程學(xué)方法改變的細(xì)菌以及可天然產(chǎn)生PHA的細(xì)菌。上述細(xì)菌的實(shí)施例包括公開(kāi)于“NOVEL BIODEGRADABLE MICROBIALPOLYMERS”(E.A.Dawes編輯，NATO ASI系列，系列E“AppliedSciences”，第186卷，Kluwer Academic Publishers，1990)；1994年3月8日公布的授予Kanegafuchi Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha的美國(guó)專(zhuān)利5,292,860；1993年10月5日公布的授予MassachusettsInstitute of Technology的美國(guó)專(zhuān)利5,250,430；1993年9月14日公布的授予 Massachusetts Institute of Technology的美國(guó)專(zhuān)利5,245,023；和/或1993年7月20日公布的授予Massachusetts Instituteof Technology的美國(guó)專(zhuān)利5,229,279中的那些。
優(yōu)選地，所述生物質(zhì)包含足量的結(jié)構(gòu)柔韌的PHA以使本發(fā)明中所述的萃取方法在經(jīng)濟(jì)上是適宜的。優(yōu)選地，生物質(zhì)源物質(zhì)中結(jié)構(gòu)柔韌的PHA的起始含量應(yīng)為所述生物質(zhì)總干重的至少約20％；更優(yōu)選至少50％；還更優(yōu)選至少約60％。
b)結(jié)構(gòu)柔韌的PHA本發(fā)明關(guān)注的PHA是本文中稱(chēng)為“結(jié)構(gòu)柔韌的”P(pán)HA的那些，以強(qiáng)調(diào)與特征在于較低共聚單體含量和較短R側(cè)基的PHA相比，由較高共聚單體含量和較長(zhǎng)R基團(tuán)鏈長(zhǎng)造成的物理性破壞，使得它們通常更加柔軟，并更難于晶化(參見(jiàn)2000年3月28日公布的授予Monsanto的美國(guó)專(zhuān)利6,043,063，和/或2000年7月11日公布的授予Monsanto的美國(guó)專(zhuān)利6,087,471)。
經(jīng)由本發(fā)明所述方法萃取的結(jié)構(gòu)柔韌的PHA優(yōu)選由至少兩種無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元構(gòu)成，其中第一種無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元具有以下結(jié)構(gòu) 并且第二種或高級(jí)無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元具有以下結(jié)構(gòu) 其中R為C3至C7烷基或它們的混合物；其中約75％摩爾至約99％摩爾的無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元具有第一種無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元的結(jié)構(gòu)，并且約1％摩爾至約25％摩爾的無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元具有第二種無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元的結(jié)構(gòu)。本發(fā)明關(guān)注的結(jié)構(gòu)柔韌的PHA優(yōu)選具有約80℃或更高的熔融溫度(“Tm”)。
c)單一主要溶劑使包含結(jié)構(gòu)柔韌的PHA的潤(rùn)濕或干燥生物質(zhì)與單一主要溶劑混合以形成生物質(zhì)液體。本文所用術(shù)語(yǔ)“單一主要溶劑”是指能夠溶解結(jié)構(gòu)柔韌的PHA以在離子尺寸或分子水平上形成至少部分均一的分散混合物的一種物質(zhì)或物質(zhì)混合物。優(yōu)選地，在本發(fā)明整個(gè)萃取過(guò)程中，僅使用單一主要溶劑，并且沒(méi)有其它由一種物質(zhì)或物質(zhì)混合物構(gòu)成的溶劑用于本發(fā)明的萃取過(guò)程中。
可用于本發(fā)明的從生物質(zhì)中萃取結(jié)構(gòu)柔韌的PHA的單一主要溶劑的選擇取決于生物質(zhì)是潤(rùn)濕的還是干燥的。如果生物質(zhì)是潤(rùn)濕的，則可用于本發(fā)明的單一主要溶劑包括丁醇、戊醇或它們的混合物。更優(yōu)選地，戊醇為異戊醇、1-戊醇、2-戊醇、3-戊醇或它們的混合物。最優(yōu)選地，戊醇為異戊醇。優(yōu)選地，丁醇為異丁醇。如果生物質(zhì)是干燥的，則可用于本發(fā)明的單一主要溶劑可包括丁醇、戊醇、甲苯或它們的混合物。更優(yōu)選地，戊醇為異戊醇、1-戊醇、2-戊醇、3-戊醇或它們的混合物。最優(yōu)選地，戊醇為異戊醇。優(yōu)選地，丁醇為異丁醇。
優(yōu)選地，以約50至約150份單一主要溶劑對(duì)約1份潤(rùn)濕或干燥生物質(zhì)的比率將單一主要溶劑加入到潤(rùn)濕或干燥的生物質(zhì)中以形成生物質(zhì)液體。更優(yōu)選地，以約100份單一主要溶劑對(duì)約1份潤(rùn)濕或干燥生物質(zhì)的比率將單一主要溶劑加入到潤(rùn)濕或干燥的生物質(zhì)中以形成生物質(zhì)液體。
優(yōu)選地，當(dāng)將生物質(zhì)和單一主要溶劑混合時(shí)，將它們攪拌以確保生物質(zhì)更好地分散于單一主要溶劑中以形成生物質(zhì)液體。
在一個(gè)實(shí)施方案中，所述生物質(zhì)液體以約10至約100份單一主要溶劑對(duì)約1份生物質(zhì)的比率包含所述單一主要溶劑和所述生物質(zhì)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述生物質(zhì)液體以約50份單一主要溶劑對(duì)約1份生物質(zhì)的比率包含所述單一主要溶劑和所述生物質(zhì)。
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，可將低含量(即按重量計(jì)小于約10％)丙酮加入到生物質(zhì)液體中。優(yōu)選地，可將按重量計(jì)約3％至約8％的丙酮加入到生物質(zhì)液體中。不受理論的束縛，據(jù)信當(dāng)丙酮以上述低含量存在于生物質(zhì)液體中時(shí)，丙酮并非用作溶劑來(lái)有助于結(jié)構(gòu)柔韌的PHA溶解以形成離子尺寸或分子水平上均勻分散的混合物。相反，據(jù)信在生物質(zhì)液體中存在上述低含量的丙酮可令人驚奇地有助于使同樣存在于生物質(zhì)液體中的生物質(zhì)細(xì)胞胞溶。通過(guò)胞溶所述生物質(zhì)細(xì)胞，丙酮通過(guò)使更多的結(jié)構(gòu)柔韌的PHA與溶解PHA的單一主要溶劑接觸可促進(jìn)隨后的溶解步驟。
II.加熱所述生物質(zhì)液體，直至至少部分結(jié)構(gòu)柔韌的PHA從包含結(jié)構(gòu)柔韌的PHA的生物質(zhì)中溶出以形成PHA液體然后加熱所述生物質(zhì)液體，增加結(jié)構(gòu)柔韌的PHA從生物質(zhì)中溶出的速率以形成PHA液體。PHA液體由所述生物質(zhì)的所有細(xì)胞組分組成，包括任何未溶解的結(jié)構(gòu)柔韌的PHA、單一主要溶劑和至少部分溶解的結(jié)構(gòu)柔韌的PHA。本文所用術(shù)語(yǔ)“部分溶解”涉及某些結(jié)構(gòu)柔韌的PHA保持夾帶于生物質(zhì)細(xì)胞或生物質(zhì)細(xì)胞片斷中的理論。因此，某些結(jié)構(gòu)柔韌的PHA沒(méi)有與單一主要溶劑接觸并保持固態(tài)，而不是被單一主要溶劑溶解。
典型地，通過(guò)將所述生物質(zhì)液體加熱至離所述單一主要溶劑沸點(diǎn)約5℃至約20℃的溫度來(lái)形成PHA液體。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，將所述生物質(zhì)液體加熱至約80℃至約130℃。在本發(fā)明的一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案中，將所述生物質(zhì)液體加熱至約90℃至約120℃。不受理論的限制，從商業(yè)角度上看，溫度因素是重要的，這是因?yàn)榫酆衔镏辽俨糠秩芙鈺r(shí)的溫度和充分溶解所需的時(shí)間可影響資本成本和產(chǎn)品質(zhì)量。典型地，加熱生物質(zhì)液體以形成PHA液體的時(shí)間越長(zhǎng)，結(jié)構(gòu)柔韌的PHA的收率越高。然而，由于長(zhǎng)時(shí)間加熱，會(huì)造成結(jié)構(gòu)柔韌的PHA部分分子量降解。優(yōu)選地，將所述生物質(zhì)液體加熱約30分鐘至約300分鐘以形成PHA液體。更優(yōu)選地，將所述生物質(zhì)液體加熱約60至約180分鐘。甚至更優(yōu)選地，將所述生物質(zhì)液體加熱約100至約150分鐘。最優(yōu)選地，將所述生物質(zhì)液體加熱120分鐘。
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，在加熱期間攪拌生物質(zhì)液體以確保結(jié)構(gòu)柔韌的PHA更好的分散以形成PHA液體。
III.從所述PHA液體中分離出所述生物質(zhì)以形成富含PHA的液體在PHA液體形成后，從留下的剩余的PHA液體中分離出包括加熱步驟后未溶解的任何結(jié)構(gòu)柔韌的PHA在內(nèi)的生物質(zhì)細(xì)胞組分，本文將其稱(chēng)為“富含PHA的液體”。優(yōu)選的分離方法是過(guò)濾。更優(yōu)選的分離方法是高溫過(guò)濾，即在得自加熱步驟的PHA液體顯著冷卻之前過(guò)濾。尤其優(yōu)選的過(guò)濾裝置包括具有攪拌、加熱和洗滌功能的Nutsche過(guò)濾器、轉(zhuǎn)鼓式壓力過(guò)濾器和真空過(guò)濾器。其它分離方法包括離心。
IV.從富含PHA的液體中蒸去0％至約50％的單一主要溶劑以形成溶劑蒸氣和富含PHA的濃縮液體在下一步中，可從富含PHA的液體中蒸去0％至約50％的單一主要溶劑。如果蒸去大于0％的單一主要溶劑，則可形成溶劑蒸氣和富含PHA的濃縮液體。本文所用術(shù)語(yǔ)“溶劑蒸氣”是指單一主要溶劑的氣態(tài)形式。本文所用術(shù)語(yǔ)“富含PHA的濃縮液體”是指與原來(lái)富含PHA的液體中結(jié)構(gòu)柔韌的PHA的密度相比，其中結(jié)構(gòu)柔韌的PHA密度增加的液體。
如果進(jìn)行單一主要溶劑的蒸發(fā)，優(yōu)選將富含PHA的液體置于真空下以加快從富含PHA的液體中蒸去單一主要溶劑的速度以形成富含PHA的濃縮液體。
從富含PHA的液體中蒸去不超過(guò)約50％的單一主要溶劑以形成溶劑蒸氣和富含PHA的濃縮液體。不受理論的限制，典型地由于兩個(gè)原因，使得蒸去大于約50％的單一主要溶劑以形成溶劑蒸氣和富含PHA的濃縮液體是沒(méi)有成本效率的。第一，在蒸發(fā)單一主要溶劑時(shí)，會(huì)使溶于單一主要溶劑中的任何雜質(zhì)留在富含PHA的濃縮液體中。從而，如果蒸去所有的單一主要溶劑，則優(yōu)選在萃取過(guò)程稍后的某一步中除去殘留雜質(zhì)以獲得純凈的結(jié)構(gòu)柔韌的沉淀的PHA。為了除去這些雜質(zhì)，通常必須使下一步中沉淀出的結(jié)構(gòu)柔韌的PHA經(jīng)受隨后的洗滌步驟，這會(huì)增加萃取過(guò)程的資本成本。第二，因?yàn)樗P(guān)注的結(jié)構(gòu)柔韌的PHA可能不易于結(jié)晶，因此除去超過(guò)約50％的單一主要溶劑會(huì)導(dǎo)致結(jié)構(gòu)柔韌的PHA纏結(jié)，并導(dǎo)致夾帶部分單一主要溶劑，形成凝膠。為了獲得純凈的結(jié)構(gòu)柔韌的沉淀的PHA，需要進(jìn)行進(jìn)一步處理以除去夾帶的單一主要溶劑。所加的處理結(jié)果增加了萃取過(guò)程的資本成本。
不受理論的限制，由于以下原因，蒸去部分單一主要溶劑，換句話(huà)說(shuō)，蒸去超過(guò)0％的溶劑是更具有成本效率的。從富含PHA的液體中蒸去部分單一主要溶劑可降低剩余富含PHA的濃縮液體的溫度。富含PHA的濃縮液體的溫度降低會(huì)由此縮減后續(xù)冷卻工序中使富含PHA的濃縮液體冷卻以析出結(jié)構(gòu)柔韌的PHA所需的時(shí)間。不受理論的限制，從生物質(zhì)中萃取結(jié)構(gòu)柔韌的PHA所需時(shí)間的任何縮減，包括冷卻時(shí)間的縮減，均會(huì)降低資本成本，并從而增加萃取過(guò)程的成本效率。
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，捕獲、冷卻溶劑蒸氣以形成溶劑液體，并再循環(huán)以進(jìn)一步用作單一主要溶劑。本文所用術(shù)語(yǔ)“再循環(huán)”是指處理，其包括但不限于除去雜質(zhì)如色素和蛋白質(zhì)。
V.使富含PHA的濃縮液體冷卻以形成結(jié)構(gòu)柔韌的沉淀的PHA和不純的溶劑液體在此步驟中，使富含PHA的濃縮液體溫度降低直至結(jié)構(gòu)柔韌的PHA從富含PHA的濃縮液體中沉淀出來(lái)，留下不純的溶劑液體。本文所用術(shù)語(yǔ)“不純的”溶劑液體是指可能存在于溶液中的來(lái)自生物質(zhì)的雜質(zhì)，如色素和蛋白質(zhì)。
在本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案中，從不純的溶劑液體中回收結(jié)構(gòu)柔韌的沉淀的PHA。優(yōu)選的回收方法包括但不限于離心、過(guò)濾和加壓過(guò)濾。更優(yōu)選的回收方法是加壓過(guò)濾。尤其優(yōu)選的過(guò)濾裝置包括具有攪拌、加熱和洗滌功能的Nutsche過(guò)濾器，轉(zhuǎn)鼓式壓力過(guò)濾器和真空過(guò)濾器。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，使不純的溶劑液體再循環(huán)以在進(jìn)一步的萃取過(guò)程中用作單一主要溶劑。
通常，當(dāng)使用本發(fā)明萃取方法回收結(jié)構(gòu)柔韌的PHA時(shí)，它們可具有典型的白色或灰色。如果需要，有許多方式可進(jìn)一步改善結(jié)構(gòu)柔韌的PHA的顏色。例如，可用活化粘土或活性炭處理結(jié)構(gòu)柔韌的PHA。優(yōu)選地，在干燥結(jié)構(gòu)柔韌的PHA之前，可用乙醇和/或新鮮的單一主要溶劑洗滌結(jié)構(gòu)柔韌的PHA。本文所用術(shù)語(yǔ)“新鮮的單一主要溶劑”是指先前沒(méi)有用于萃取過(guò)程中、也不是用于萃取過(guò)程并再循環(huán)的單一主要溶劑。更優(yōu)選地，用新鮮的單一主要溶劑洗滌結(jié)構(gòu)柔韌的PHA。甚至更優(yōu)選地，在洗滌步驟后可回收新鮮的單一主要溶劑，并再循環(huán)以用于溶解步驟中。優(yōu)選使用新鮮的單一主要溶劑來(lái)洗滌結(jié)構(gòu)柔韌的PHA，這是因?yàn)榕c使用本發(fā)明其它任何步驟中不使用的物質(zhì)如乙醇或活化粘土或活性炭相比，它通常成本較低。
部件操作條件或單獨(dú)裝置的最佳范圍很大程度上將根據(jù)原生物質(zhì)的類(lèi)型而變化。
任選用氧化劑或表面活性劑后處理在回收了結(jié)構(gòu)柔韌的沉淀的PHA后，除了(或代替)上述后處理技術(shù)以外，還需要用氧化劑/漂白劑或表面活性劑對(duì)PHA進(jìn)行后處理以除去不可取的色素和/或氣味。當(dāng)用于本文中時(shí)，氧化劑的用量為約1份PHA需約0.0001至約0.5份氧化劑，可供選擇地，約1份PHA需約0.01份氧化劑。當(dāng)使用過(guò)氧化物時(shí)，典型以稀釋形式(即分散于水中)來(lái)使用它。當(dāng)用于本文中時(shí)，表面活性劑的用量范圍為約1份PHA需約0.005份表面活性劑。
可用于本發(fā)明的氧化劑/漂白劑包括空氣、過(guò)氧化氫(H2O2)、次氯酸鹽、漂白化合物(包括氯、溴和/或碘氧化劑)、過(guò)氧化苯甲酰、C9OBS、過(guò)硼酸鹽，以及它們的混合物。
可用于本發(fā)明的表面活性劑包括胺氧化物、AES、和其它常見(jiàn)表面活性劑，以及它們的混合物。
用表面活性劑洗滌和/或用氧化劑處理可導(dǎo)致產(chǎn)生適度至顯著顏色改善的色素的去除(處理后獲得更白的樣本)、生物氣味的去除、和/或雜質(zhì)的減少。
通過(guò)用氧化劑和/或表面活性劑洗滌潤(rùn)濕的聚合物，可用氧化劑和/或表面活性劑來(lái)處理聚羥基鏈烷酸酯。另一個(gè)選擇是在聚合物干燥期間，使用氧化劑(如H2O2)和/或使用稀釋的溶液。
在聚羥基鏈烷酸酯干燥期間，如果需要去除的雜質(zhì)已知是可氧化的(如來(lái)自丙酮-水萃取/沉淀過(guò)程中的三丙酮胺雜質(zhì))，則使用氧化劑是尤其有用的。
下列實(shí)施例進(jìn)一步描述和證明了本發(fā)明范圍內(nèi)的優(yōu)選實(shí)施方案。給出這些實(shí)施例僅僅是為了舉例說(shuō)明，而不可解釋為是對(duì)本發(fā)明的限制，因?yàn)樵诓槐畴x本發(fā)明精神或范圍的條件下可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行許多改變。
實(shí)施例1
從潤(rùn)濕的生物質(zhì)中進(jìn)行萃取以100kg通過(guò)發(fā)酵方法制得的潤(rùn)濕的生物質(zhì)作為開(kāi)始。所述潤(rùn)濕的生物質(zhì)具有約30％的固體，并且所述固體包含約60％的PHA。加入5kg丙酮以加速細(xì)胞胞溶。加入1800kg異丁醇。將所得混合物在100℃加熱2小時(shí)。在高于75℃的溫度下，使用Rosenmund過(guò)濾器除去固體，包括不溶解的不產(chǎn)生PHA的細(xì)胞物質(zhì)。將包含PHA的濾液溫度冷卻至30℃至45℃。使用加壓過(guò)濾，過(guò)濾所得漿液。應(yīng)在5巴壓力下，使用0.2至2微米介質(zhì)過(guò)濾器進(jìn)行加壓過(guò)濾。向所述過(guò)濾器中加入90kg新鮮的異丁醇并攪拌10分鐘。在壓力過(guò)濾器中過(guò)濾固體以形成由50％固體組成的濾餅。真空干燥所述濾餅?？色@得約17kg白色PHA?；厥帐褂眠^(guò)的溶劑，并使其沉降為濃溶劑和稀溶劑?；厥諠馊軇┫唷７懦?0％的濃溶劑相和所有的稀溶劑相以用于蒸餾，并回收溶劑。
實(shí)施例2從干燥的生物質(zhì)中進(jìn)行萃取以50kg通過(guò)發(fā)酵方法制得的干燥的生物質(zhì)作為開(kāi)始。干燥生物質(zhì)含有約60％的PHA。加入3000kg的甲苯。將混合物在100℃加熱2小時(shí)。在高于75℃的溫度下，使用Rosenmund過(guò)濾器除去固體，包括不溶解的不產(chǎn)生PHA的細(xì)胞物質(zhì)。將包含PHA的濾液溫度冷卻至30℃至45℃。使用加壓過(guò)濾，過(guò)濾所得漿液。應(yīng)在500kPa(5巴)壓力下，使用0.2至2微米介質(zhì)過(guò)濾器，進(jìn)行加壓過(guò)濾。向所述過(guò)濾器中加入150kg新鮮的甲苯，并攪拌10分鐘。在壓力過(guò)濾器中過(guò)濾固體以形成由50％固體組成的濾餅。檢查所述濾餅的顏色。如果需要，可通過(guò)用150kg 醇洗滌來(lái)改善顏色。倒出濾餅，并在真空下干燥?？色@得約27kg白色PHA?；厥帐褂眠^(guò)的溶劑，并蒸餾溶劑以再循環(huán)。
盡管已用具體實(shí)施方案來(lái)說(shuō)明和描述了本發(fā)明，但對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員顯而易見(jiàn)的是，在不背離本發(fā)明的精神和保護(hù)范圍的情況下可作出許多其它的變化和修改。因此，有意識(shí)地在附加的權(quán)利要求書(shū)中包括屬于本發(fā)明范圍內(nèi)的所有這些變化和修改。
權(quán)利要求
1.一種用于從包含聚羥基鏈烷酸酯的生物質(zhì)中萃取聚羥基鏈烷酸酯的方法，所述方法包括a)使包含所述聚羥基鏈烷酸酯的生物質(zhì)與單一主要溶劑混合以形成生物質(zhì)液體；b)加熱所述生物質(zhì)液體直至至少部分所述聚羥基鏈烷酸酯從包含聚羥基鏈烷酸酯的生物質(zhì)中溶出以形成PHA液體；c)從所述PHA液體中分離出生物質(zhì)以形成富含PHA的液體；d)從富含所述PHA的液體中蒸去0％至50％的單一主要溶劑以形成溶劑蒸氣和富含PHA的濃縮液體；和e)冷卻富含所述PHA的濃縮液體以形成沉淀的聚羥基鏈烷酸酯和不純的溶劑液體，并在所述冷卻后，通過(guò)加壓過(guò)濾從所述不純的溶劑液體中回收沉淀的聚羥基鏈烷酸酯；其中所述聚羥基鏈烷酸酯包含至少兩種無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元，其中第一種無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元具有以下結(jié)構(gòu) 并且第二種或高級(jí)無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元具有以下結(jié)構(gòu) 其中R為C3至C7烷基或它們的混合物；其中75％摩爾至99％摩爾的所述無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元具有第一種無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元的結(jié)構(gòu)，并且1％摩爾至25％摩爾的所述無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元具有第二種無(wú)規(guī)重復(fù)單體單元的結(jié)構(gòu)；并且其中所述單一主要溶劑為丁醇、戊醇或它們的混合物；優(yōu)選地其中所述生物質(zhì)液體以10至100份單一主要溶劑對(duì)1份PHA的比率包含所述單一主要溶劑和所述生物質(zhì)。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，所述方法還包括在加熱所述生物質(zhì)液體前，將按重量計(jì)3％至8％的丙酮加入到所述生物質(zhì)液體中。
3.如前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其中加熱所述生物質(zhì)液體可使所述生物質(zhì)液體的溫度增加到離所述溶劑沸點(diǎn)5℃至20℃的范圍內(nèi)。
4.如前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其中通過(guò)高溫過(guò)濾進(jìn)行所述生物質(zhì)從所述PHA液體中的分離以形成富含所述PHA的液體。
5.如前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其中通過(guò)向富含所述PHA的液體施加真空從富含所述PHA的液體中部分蒸出含有極小量水的溶劑。
6.如前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其中使所述溶劑蒸氣作為溶劑液體被回收，并且優(yōu)選地其中將所述溶劑液體再循環(huán)以用于進(jìn)一步萃取。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，所述方法還包括冷卻含有PHA的溶液，并且在通過(guò)加壓過(guò)濾從所述不純的溶劑液體中回收沉淀的聚羥基鏈烷酸酯之后，用新鮮的單一主要溶劑洗滌沉淀的聚羥基鏈烷酸酯，進(jìn)一步優(yōu)選地其中蒸餾所述不純?nèi)軇┮后w以回收溶劑，并且將所述回收溶劑再循環(huán)以用于進(jìn)一步萃取。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述戊醇為異戊醇、1-戊醇、2-戊醇、3-戊醇或它們的混合物。
9.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述丁醇為異丁醇。
10.如權(quán)利要求1所述的方法，其中在通過(guò)加壓過(guò)濾從所述不純?nèi)軇┮后w中回收沉淀的聚羥基鏈烷酸酯的步驟之后，所述方法還包括以下步驟f)用氧化劑或溫和表面活性劑或溫和漂白劑處理沉淀的聚羥基鏈烷酸酯以增強(qiáng)顏色和氣味。
全文摘要
用于從生物質(zhì)中萃取PHA的方法，所述方法包括使包含PHA的生物質(zhì)與單一主要溶劑混合以形成生物質(zhì)液體；加熱所述生物質(zhì)液體直至至少部分PHA從生物質(zhì)中溶出以形成PHA液體；從PHA液體中分離出生物質(zhì)以形成富含PHA的液體；從富含PHA的液體中蒸去0％至約50％的單一主要溶劑以形成溶劑蒸氣和富含PHA的濃縮液體；并冷卻富含所述PHA的濃縮液體以形成沉淀的PHA和不純的溶劑液體。任選地，通過(guò)加壓過(guò)濾，從所述不純?nèi)軇┮后w中進(jìn)一步回收沉淀的PHA。
文檔編號(hào)B01D11/02GK101014641SQ200580022100
公開(kāi)日2007年8月8日 申請(qǐng)日期2005年6月29日 優(yōu)先權(quán)日2004年6月29日
發(fā)明者K·納拉辛漢, K·葉, A·C·切爾利, D·萊文古德, G·－Q·陳 申請(qǐng)人:寶潔公司