C)。加入后，用另一部分甲苯 (5g)洗滌。
[0160] 1. 5小時后，加入N, N-二異丙基戊-3-胺（8. 7g, 50. 3mmol)，然后是甲苯（3g)和 雷帕霉素（10. 0g，10. 9mmol)，用甲苯（18g)洗。反應(yīng)隨后加熱至40°C并在此溫度攪拌22. 5 小時，根據(jù)HPLC分析在此時剩余小于5面積％的雷帕霉素。反應(yīng)冷卻至環(huán)境溫度，之后加入 吡啶（l.OmL)淬滅反應(yīng)，所述反應(yīng)再攪拌30分鐘。反應(yīng)用乙酸異丙酯過濾并稀釋。有機(jī)溶 液用1M檸檬酸、10%碳酸氫鈉溶液、水洗滌，（MgS04)干燥，真空濃縮。向粗剩余物（35. 6g) 加入THF (240mL)，然后在0°C向氟化氫吡啶溶液（1: 1，38. lg)逐滴加入此溶液。反應(yīng)加熱 至45°C，持續(xù)3. 5h小時，隨后冷卻至環(huán)境溫度并用乙酸異丙酯（300g)稀釋。反應(yīng)隨后緩慢 加入8%碳酸氫鈉水溶液，用乙酸異丙酯（250g)進(jìn)一步洗滌。接著分離有機(jī)相并用飽和氯 化鈉水溶液洗，（MgS04)干燥，真空濃縮。用乙酸異丙酯稀釋剩余物，加入BHT(0. 2%m/m)， 通過HPLC分析根據(jù)外標(biāo)測定依維莫司產(chǎn)率（6. 81g，65% )。
[0161] 實(shí)施例3 (二甲氧基三苯甲基保護(hù)基團(tuán)）
[0162]
[0163] 步驟（a)
[0164] 2_(雙（4-甲氧基苯基）（苯基）甲氧基）乙醇（3. 049g, 8. 366mmol)溶于甲苯 (10. 2g)，隨后加入N，N-二異丙基戊-3-胺（1.648g，9.621mm〇l)，接著是甲苯（0. 5g)。反 應(yīng)混合物冷卻至〇°C并逐滴加入三氟甲基磺酸酐（1. 376ml，8. 145mmol)，接著是甲苯（lg)。 反應(yīng)混合物加熱至室溫并在此溫度再攪拌1小時。然后，加入另一部分N，N-二異丙基 戊-3-胺（1. 648g，9. 621mmol)，接著是甲苯（lg)。之后雷帕霉素（2g，2. 092mmol) -次全部 加入并用甲苯（3. 7g)洗滌。反應(yīng)隨后加熱至40°C，持續(xù)18小時，然后冷卻至環(huán)境溫度并加 入吡啶（0. 20g)。反應(yīng)隨后攪拌30分鐘并用乙酸異丙酯（50mL)稀釋。此有機(jī)相接著用1M 檸檬酸（2x 40mL)、碳酸氫鈉水溶液（8%，26g)洗滌且最后用水（2x 20mL)洗，之后（MgS04) 干燥，真空濃縮。粗產(chǎn)物溶于極少量二氯甲烷并通過快速柱色譜（溶于庚烷的15-100%乙 酸乙酯）純化，獲得黃色油狀所需產(chǎn)物。
[0165] 步驟（b)
[0166] 然后，此中間體溶于丙酮（8. 2mL)，加入庚烷（9mL)，接著是水（4. 6g)。兩相混合物 隨后冷卻至l〇°C并逐滴加入乙酸（3. 45mL)。反應(yīng)在此溫度攪拌18小時，之后用乙酸異丙 酯（15g)稀釋并冷卻至0°C。隨后逐滴加入氫氧化鈉水溶液（15%，17g)，并分液。水相用 乙酸異丙酯（2x 7. 2g)提取，合并的有機(jī)相用水洗滌，（MgS04)干燥，真空濃縮獲得無色油。
[0167] 根據(jù)外標(biāo)，產(chǎn)物依維莫司的HPLC分析顯示2步的產(chǎn)率為381mg，19%。
[0168] 實(shí)施例4(二甲氧基三苯甲基保護(hù)基團(tuán)）
[0170] 步驟（a)如上進(jìn)行，所得中間體在色譜后溶于六氟異丙醇（26mL)。反應(yīng)在50°C加 熱1. 5小時，隨后冷卻至0°C，用飽和碳酸氫鈉水溶液（26mL)淬滅。分離有機(jī)相并用飽和氯 化鈉水溶液、水洗滌，（MgS04)干燥并濃縮。根據(jù)外標(biāo)，產(chǎn)物依維莫司的HPLC分析顯示2步 的產(chǎn)率為621mg，31%。
[0171] 實(shí)施例5 (叔丁基二苯基硅基保護(hù)基團(tuán)）
[0172]
[0173] 步驟（a)
[0174] 向溶于甲苯（15g)的2-((叔丁基二苯基娃基）氧基）乙醇（8. 22g, 27. 3mmol)溶 液加入N，N-二異丙基戊-3-胺（5. 39g，31. 4mmol)。然后，澄清溶液冷卻至0°C并逐滴加入 三氟甲基磺酸酐（7.3g，26.0mmol)，溫度維持在（_2°C至2°C)。加入后，用另一部分甲苯 (5g)洗滌。
[0175] 1. 5小時后，加入N, N-二異丙基戊-3-胺（5. 39g, 31. 4mmol)，然后是甲苯（2. 5g) 和雷帕霉素（l〇.〇g，l〇.9mmol)，用甲苯（12. 5g)洗。反應(yīng)隨后加熱至45°C并在此溫度攪拌 21小時，根據(jù)HPLC分析在此時剩余小于5面積％的雷帕霉素。反應(yīng)冷卻至環(huán)境溫度，之后 加入吡啶（l.OmL)淬滅反應(yīng)，所述反應(yīng)再攪拌30分鐘。反應(yīng)用乙酸異丙酯過濾并稀釋。有 機(jī)溶液用1M檸檬酸、10%碳酸氫鈉溶液、水洗滌，（MgS04)干燥，真空濃縮。反應(yīng)混合物分成 2部分，其中之一用快速柱色譜（溶于庚烷的0-100%乙酸乙酯）純化，獲得約5. 7g黃色油。
[0176] 步驟（b)
[0177] 吡啶（12. 2g，154. 4mmol)冷卻至0°C，然后在30分鐘內(nèi)逐滴加入氟化氫吡啶溶液 65% (5. 5g)。所得溶液隨后升溫至環(huán)境溫度，硅基保護(hù)的依維莫司衍生物（5. 7g)作為溶于 THF(120mL)的溶液逐滴加入。黃色溶液加熱至40°C，持續(xù)2小時，之后冷卻至環(huán)境溫度并 用乙酸異丙酯（150g)稀釋。反應(yīng)隨后緩慢加入8%碳酸氫鈉水溶液（500g)，用乙酸異丙酯 (250g)進(jìn)一步洗滌。接著分離有機(jī)相并用飽和氯化鈉水溶液洗，（MgS04)干燥，真空濃縮。 用乙酸異丙酯稀釋剩余物，加入丁基羥基甲苯（BHT ;0. 2%m/m)，通過HPLC分析根據(jù)外標(biāo)測 定依維旲司廣率（從雷帕霉素開始3. 14g, 60. 0% )。然后，此材料從乙酸乙醋/庚丨元中重 結(jié)晶以獲得高純度依維莫司（2. 05g，65% )。
[0178] 實(shí)施例6 (三苯甲基保護(hù)基團(tuán)）
[0180] 步驟（a)
[0181] 向溶于甲苯（42. 8g)的2-(三苯甲氧基）乙醇（10. 7g, 35. 2mmol)溶液加入 N，N-二異丙基戊-3-胺（7.0g，40.4mmol)。然后，澄清溶液冷卻至0°C并逐滴加入三氟甲基 磺酸酐（10. 〇g，35. 2mmol)，溫度維持在（_2°C至2°C )。
[0182] 2小時后，向反應(yīng)混合物加入N, N-二異丙基戊_3_胺（7. 0g, 40. 4mmol)，然后是甲 苯（14. 4g)和雷帕霉素（8. 24g，8. 79mmol)，用甲苯（2. 4g)洗。反應(yīng)隨后加熱至40°C并在 此溫度攪拌21小時，根據(jù)HPLC分析在此時剩余小于5面積％的雷帕霉素。反應(yīng)冷卻至環(huán) 境溫度，之后加入吡啶（〇.8mL)淬滅反應(yīng)，所述反應(yīng)再攪拌30分鐘。反應(yīng)用乙酸異丙酯稀 釋。有機(jī)溶液用1M檸檬酸、10%碳酸氫鈉溶液、水洗滌，（MgS04)干燥，真空濃縮。反應(yīng)混合 物用快速柱色譜（溶于庚烷的乙酸乙酯）純化，獲得黃色油（6. 85g，65%產(chǎn)率）。
[0183] 步驟（b)
[0184] 然后，三苯甲基保護(hù)的依維莫司衍生物（5. 0g，4. 165mmol)溶于六氟異丙醇并加 熱至58°C，持續(xù)3. 5小時。反應(yīng)隨后冷卻至環(huán)境溫度并用乙酸乙酯（50mL)稀釋，真空濃縮。 所述稀釋/濃縮過程再重復(fù)一次，之后粗產(chǎn)物在硅膠（25g)上過濾，用庚烷/乙酸乙酯洗 脫。從庚烷/乙酸乙酯中重結(jié)晶，獲得白色晶體的所需產(chǎn)物（1.60g，40. 1%)。根據(jù)外標(biāo)， 母液的HPLC分析表明其中包括另外12%產(chǎn)率的依維莫司。
[0185] 實(shí)施例7
[0186] 比較堿的選擇對反應(yīng)產(chǎn)率的影響

[0195] LG =三氟甲基磺酸酯；*九氟丁磺酸酯（九氟丁基磺酸酯）用于取代三氟甲基磺 酸酯
[0196] PG =保護(hù)基團(tuán)；TBS =叔丁基二甲基硅基，TBDPS =叔丁基二苯基硅基，TIPS =三 異丙基娃基
[0197] DIPEA = N, N-二異丙基乙胺
[0198] 反應(yīng)如說明書所述完成，用不同組合的堿、保護(hù)基團(tuán)和摩爾比的氟代烷基磺酸烷 基酯（即磺酸酯）/雷帕霉素。所用溶劑通常是甲苯。步驟1中，制備氟代烷基磺酸烷基 酯。步驟2中，雷帕霉素烷化制備被保護(hù)的依維莫司。"HPLC面積依維莫司-PG"縱列顯示 所得被保護(hù)的依維莫司的水平。隨后，脫除保護(hù)基團(tuán)獲得依維莫司。"產(chǎn)率*粗依維莫司" 縱列顯示總體反應(yīng)產(chǎn)率。R、R4和R5指式（4)和（5)化合物的堿的取代基。例如，若R4 = R5 =乙基，意味著所用堿是N，N-二異丙基戊-3-胺。應(yīng)注意所有反應(yīng)引起大于95%轉(zhuǎn)化 (小于5%雷帕霉素剩余）。
[0199] HPLC 法面積％ 3 :Macherey-Nagel CC 250/4Nucleosil 120-3C18 貨號：721666. 40,流動相： 35分鐘內(nèi)從80:20甲醇：7K到1〇〇:〇甲醇：7K，流速ΙΛ/min，檢測波長=275皿。
[0200] *HPLC分析根據(jù)外標(biāo)測定的純依維莫司產(chǎn)率
[0201] HPLC 法產(chǎn)率測定：Atlantis_dC18, 3. 0 μm,波長 150mm,內(nèi)徑 3. Omm(Waters 號 186001307)或等效柱，流動相乙酸銨試劑+水+甲醇+乙腈（160+160+320+360) (V/V/V/V)， 流速 1. 2ml/min
[0202] 檢測波長=278nm，運(yùn)行時間=25分鐘。
[0203] 結(jié)果顯示三（2-甲基丙基）胺獲得的粗依維莫司產(chǎn)率（條目12, 47% )顯著低于 本公開所涵蓋的2種堿（條目9,65%和條目10,61%)。此外，使用本文所述的有位阻的堿 允許采用較低當(dāng)量數(shù)的氟代烷基磺酸烷基酯（條目11，2. 5當(dāng)量的所用三氟甲基磺酸酯）。 用三（2-甲基丙基）胺作為堿的條目12所述的反應(yīng)（用4當(dāng)量三氟甲基磺酸酯）在40°C 比用N，N-二異丙基戊-3-胺的類似反應(yīng)慢許多，出于此原因，反應(yīng)必須在50°C進(jìn)行以能獲 得>95%轉(zhuǎn)化。為清楚起見，如果反應(yīng)在三（2-甲基丙基）胺存在下在40°C進(jìn)行，則同一時 間點(diǎn)所測產(chǎn)率甚至低于在本公開所定義的堿存在下所得的產(chǎn)率。用N，N-二異丙基乙胺作 為堿（條目13)獲得相同的觀察。為推動反應(yīng)完成，需要50°C溫度和總共6當(dāng)量氟代烷基 磺酸烷基酯。此過程也獲得50%產(chǎn)率，顯著低于用本公開所述的2種堿（條目9和10)所 得產(chǎn)率。因此，根據(jù)本公開使用的堿使得所述工藝甚至在更溫和條件（即較低反應(yīng)溫度） 下實(shí)現(xiàn)更高產(chǎn)率。另外，需要更少摩爾過量的氟代烷基磺酸烷基酯以實(shí)現(xiàn)更好的產(chǎn)率。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種制備化合物的工藝，所述工藝包括親核試劑在堿存在下與氣代烷基橫酸烷基醋 反應(yīng)，其中所述堿具有式NR1R2R3 : ? R1和R2獨(dú)立地是2-甲基丙基或異丙基訊 ? R3是-CH(R4) (R5)，其中R4和R5是相同或不同的烷基，其任選連接形成環(huán)。2. -種如權(quán)利要求1所述的制備化合物的工藝，所述工藝包括親核試劑與氣代