一種葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種高分子藥物載體領(lǐng)域，具體涉及一種葉酸/生物素修飾的殼聚糖 材料及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 殼聚糖來源于天然的動物甲殼，結(jié)構(gòu)和性質(zhì)均十分接近天然的多糖，具有良好的 生物相容性、天然可降解性及對細胞無毒性，且易溶于酸性環(huán)境下的水溶液，因此成為研宄 的熱門，尤其是作為藥物控釋載體而受到極大的重視。殼聚糖分子鏈中含有大量的活潑氨 基，可與多種親電試劑進行反應(yīng)，形成穩(wěn)定的化學(xué)接枝，這種便于改性的特點進一步增強了 殼聚糖的實用性，其中利用配體對其進行共軛接枝從而與細胞表面受體形成特異性識別的 方法是目前靶向載藥研宄領(lǐng)域的常用手段。已被較多研宄的生物素和葉酸作為上述配體種 類中的典型，在應(yīng)用于殼聚糖抗癌藥物載體的靶向改性中各自均能達到較佳的實驗效果， 由二者之一修飾的殼聚糖納米載體均在一定程度上對肝癌細胞構(gòu)成主動革G向，并在載藥的 情況下主要對病變組織產(chǎn)生藥效，而基本上不會傷害正常細胞，但利用生物素與葉酸作為 雙配體的研宄還未見報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述不足，提供一種合成周 期短、反應(yīng)效率高的葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料及其制備方法。
[0004] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案是：
[0005] 提供一種葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料，所述葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料 以殼聚糖為載體，葉酸和生物素為配體，利用N-?；磻?yīng)制備葉酸/生物素修飾的殼聚糖 材料，其結(jié)構(gòu)式如下：
[0006]
【主權(quán)項】
1. 一種葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料，其特征在于，所述葉酸/生物素修飾的殼聚糖 材料以殼聚糖為載體，葉酸和生物素為配體，利用N-?；磻?yīng)制備葉酸/生物素修飾的殼 聚糖材料。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料，其特征在于：所述殼聚糖 分子量為20000-50000,脫乙酰度多85%。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料，其特征在于：所述葉酸/生 物素修飾的殼聚糖材料中葉酸和生物素的接枝率均多5%。
4. 一種葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料的制備方法，其特征在于步驟如下： 1) 制備殼聚糖溶液：將殼聚糖溶于醋酸溶液中，得到濃度為5-10mg/mL的殼聚糖溶液， 并調(diào)節(jié)pH值至4. 7-6.0,備用； 2) 制備琥珀酰亞胺基生物素酯：將DCC、NHS與生物素按摩爾比1. 2-1. 5:1:1混合后于 50-60°C條件下反應(yīng)16-24h，過濾后在冰浴條件下向濾液中滴加乙醚析出沉淀，然后用異丙 醇對沉淀進行重結(jié)晶，過濾收集結(jié)晶并用DMF溶解結(jié)晶，過濾后逐滴加入無水乙醚中，冷藏 過夜，移走上清液，室溫下真空干燥得到琥珀酰亞胺基生物素酯，備用； 3) 制備具有氨基反應(yīng)活性的葉酸活性酯溶液：將葉酸溶于無水DMSO中，并加入EDC. HC1，在避光條件下于25-40°C磁力攪拌反應(yīng)l_4h，得到葉酸活性酯溶液，濃度以葉酸質(zhì)量 濃度計為26-44mg/mL，備用； 4) 將步驟2)所得琥珀酰亞胺基生物素酯溶于DMF中，得到濃度為20-34mg/mL的生物 素酯溶液，在磁力攪拌條件下，將生物素酯溶液緩慢加入步驟1)所得殼聚糖溶液中，在室 溫條件下反應(yīng)至反應(yīng)液澄清，然后在攪拌條件下緩慢加入步驟3)所得葉酸活性酯溶液，在 室溫下繼續(xù)反應(yīng)12-24h，反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液移入透析袋，于蒸餾水中透析3d，每6h換水 一次，透析后經(jīng)冷凍干燥即得到葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料的制備方法，其特征在于： 步驟3)所述葉酸與EDC. HCl的摩爾比為1:5-10。
6. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料的制備方法，其特征在于： 步驟4)所述琥珀酰亞胺基生物素酯與殼聚糖的摩爾比為20-30:1 ;所述葉酸活性酯與殼聚 糖的摩爾比為20-30:1。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料及其制備方法，所述葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料以殼聚糖為載體，葉酸和生物素為配體，利用N-?；磻?yīng)制備葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料。本發(fā)明通過先后加入活性生物素酯和活性葉酸酯與殼聚糖反應(yīng)一次合成雙配體修飾的殼聚糖材料，接枝率高，反應(yīng)時間較兩步法大大縮短，所制備的葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料可用作一種靶向抗癌藥物載體材料。
【IPC分類】A61K47-36, C08B37-08
【公開號】CN104558246
【申請?zhí)枴緾N201510027979
【發(fā)明人】王勇, 何法
【申請人】武漢理工大學(xué)
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2015年1月20日