專利名稱：一種從蘆根中提取薏苡素的方法
一種從蘆根中提取薏苡素的方法技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地涉及一種從蘆根中提取薏苡素的方法。
技術(shù)背景
薏苡素又稱薏苡酰胺。屬碳環(huán)芳香族酸酚性化合物。針狀結(jié)晶(水)，熔點(diǎn)151. 5 152. 5°C。無(wú)色針狀結(jié)晶(丙酮-石油醚)，熔點(diǎn)157 158°C。薏苡素對(duì)骨骼肌和中樞神經(jīng)系統(tǒng)有抑制作用，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、消炎、降溫解熱、抑制多突觸反應(yīng)、肌肉松弛以及抗驚厥及使腦電波振幅增大、頻率變慢，抑制蛙的肌肉收縮、糖原的無(wú)氧酵解等多種藥理作用。據(jù)現(xiàn)代中西醫(yī)臨床試驗(yàn)，在合適濃度下，還可以用于改善情緒，增強(qiáng)性欲，輔助治療藥物濫用和成癮等作用，對(duì)治療神經(jīng)痛癥頗有療效。通過(guò)對(duì)人體中樞神經(jīng)的調(diào)節(jié)，根本解決各種因素所致的內(nèi)分泌失調(diào)。薏苡素對(duì)橫紋肌有抑制作用，可減少皺紋，它的特殊排毒作用，可以讓皮膚質(zhì)地變的透明。是天然的養(yǎng)顏去皺佳品，常食可以令皮膚光澤細(xì)膩，消除皺紋，緊繃皮膚，減小眼袋，防止面部肌肉下垂。對(duì)消除粉刺、斑雀，皮膚粗糙等都有良好療效。還可以防止曬黑、改善肌膚干燥狀況。大劑量時(shí)使血糖下降，降低血壓。在人類生活壓力日益增加的現(xiàn)代生活中，具有廣闊的應(yīng)用前景。
蘆根為禾本科多年生草本植物蘆葦?shù)牡叵赂o，是一種較常用的中藥材。性寒、味甘、歸肺、胃經(jīng)，具有清熱、生津、除煩、止嘔、利尿之功效。臨床主要用于發(fā)燒、尿路感染、肺膿瘍、支氣管炎等病的治療。而且，我國(guó)適宜種植蘆根的地域廣闊，春末夏初或秋季均可采挖，產(chǎn)量大，但蘆根深加工技術(shù)還比較薄弱，大部分都被丟棄，造成資源的浪費(fèi)。所以研究蘆根提取分離方法具有現(xiàn)實(shí)的意義。目前還沒有人從蘆根中提取薏苡素，薏苡素又具有很多功能，因此，對(duì)蘆根薏苡素的研究很有意義。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供一種提取工藝簡(jiǎn)單、成本低、可靠性強(qiáng)的蘆根薏苡素提取方法。
應(yīng)用本發(fā)明，一方面獲得了蘆根中的薏苡素，另一方面為薏苡素的研究打下了基石出。
為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的一種從蘆根中提取薏苡素的方法，包括如下步驟a)稱取蘆根粉，放入索氏提取器中，加入提取溶劑，提取2飛h ；b) 提取液在40°C，0. 09Mpa下，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，60°C水浴揮干溶劑，得濃縮液。
上述的從蘆根中提取薏苡素的方法，還包括步驟c)濃縮液加入甲醇溶解，0 7°C保存。
為保證蘆根中薏苡素能有效地提取出來(lái)。上述的從蘆根中提取薏苡素的方法所述蘆根粉為過(guò)30目篩，取篩下物。
上述的從蘆根中提取薏苡素的方法蘆根粉與提取溶劑的配比為每Ig蘆根粉加入15 35ml的提取溶劑。優(yōu)選的，每Ig蘆根粉加入15 20ml的提取溶劑。更優(yōu)選的， 每Ig蘆根粉加入20ml的提取溶劑。
上述的從蘆根中提取薏苡素的方法所述提取溶劑為甲醇、氯仿、二氯甲烷、丙酮或無(wú)水乙醇的一種或兩種以上的混合溶劑。優(yōu)選的，提取溶劑為二氯甲烷或丙酮。
上述的從蘆根中提取薏苡素的方法更優(yōu)選的，提取溶劑為丙酮，蘆根粉與丙酮的配比為每Ig蘆根粉加入20ml的丙酮，提取時(shí)間為池。
本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明采用索氏提取的方法，成功從蘆根中提取了薏苡素， 并經(jīng)薄層層析，高效液相色譜定性、定量分析，進(jìn)一步驗(yàn)證了通過(guò)本發(fā)明的方法確實(shí)獲得了蘆根薏苡素。本發(fā)明平均回收率為96. 35%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差(RSD)為0. 16%，首次從蘆根中提取出了薏苡素，使薏苡素的開發(fā)利用成為了可能。通過(guò)抑菌試驗(yàn)證實(shí)了蘆根薏苡素的抗菌作用，抑菌效果是蠟樣芽胞桿菌 > 金黃色葡萄球菌 > 大腸桿菌 > 枯草芽孢桿菌。


圖1是實(shí)施例2中料液比為1: 20的薄層層析定性分析、分離圖。
圖2A是甲醇溶液的高效液相色譜圖。(陰性對(duì)照)。
圖2B是薏苡素標(biāo)準(zhǔn)樣品的高效液相色譜圖。(陽(yáng)性對(duì)照)。
圖2C是實(shí)施例2中料液比為1: 20的本發(fā)明提取的薏苡素樣品的高效液相色譜圖。
圖2D是實(shí)施例2中料液比為1: 20的本發(fā)明提取的薏苡素樣品經(jīng)薄層層析分離得到的薏苡素樣品的的高效液相色譜圖。
圖3是采用外標(biāo)法繪制的薏苡素標(biāo)準(zhǔn)曲線。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合具體實(shí)施方式
對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)描述實(shí)施例1 從蘆根中提取薏苡素的方法(一)制備方法1)蘆根的前處理將新鮮蘆根用自來(lái)水沖洗干凈，蒸餾水沖洗一次，淋干水后，60°c恒溫鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)烘干6h。然后剪成小段，用粉碎機(jī)粉碎，粉碎的蘆根粉經(jīng)30目篩子過(guò)濾，取篩下蘆根粉末備用。
2)提取溶劑的選擇按表1選擇六種提取溶劑，分別進(jìn)行索氏提取。
3)提取薏苡素的步驟a)稱取蘆根粉末，放入索氏提取器中，按料液比1:15 (即Ig蘆根粉加入15ml的提取溶劑)，如表1加入提取溶劑，提取池；b)提取液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮(40°C，0. 09Mpa)，6(TC水浴揮干溶劑，得到薏苡素樣品。
(二)檢測(cè)1)薄層層析分離，展開劑為石油醚/乙酸乙酯=5. 5 1。通過(guò)薄層層析，可以看出，采用本發(fā)明制備的樣品中分離出與標(biāo)準(zhǔn)薏苡素樣品具有相同Rf值(Rf=O. 44)的物質(zhì)。證實(shí)本發(fā)明制備的樣品中含有薏苡素。
2)將提取的薏苡素樣品，溶于色譜級(jí)甲醇中，過(guò)0.45 μ m微孔濾膜，高效液相色譜檢測(cè)。同時(shí)做薏苡素標(biāo)準(zhǔn)樣品的陽(yáng)性對(duì)照和甲醇溶液的陰性對(duì)照，結(jié)果可以看出，本發(fā)明制備的樣品與標(biāo)準(zhǔn)薏苡素樣品具有相同的峰，出峰時(shí)間基本相同(標(biāo)準(zhǔn)品的出峰時(shí)間為3. 043min，樣品的出峰時(shí)間為3. 057 min)，說(shuō)明，通過(guò)本發(fā)明，從蘆根中提取出了薏苡素。
(三)含量測(cè)定采用HPLC法，色譜柱為Diamonsil-C18 (150mmX4. 6mm, 5Mm.迪馬公司)，流動(dòng)相為乙腈-水(50 50)，檢測(cè)波長(zhǎng)232nm，體積流量1. OmL/min,柱溫室溫。如圖3，采用外標(biāo)法得到標(biāo)準(zhǔn)曲線Y=217009X+12086 (R2=O. 9994)，在0. Γθ. 5μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，該方法相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差(RSD)為0. 16%，結(jié)果如表1。
表1不同提取溶劑對(duì)薏苡素含量的影響
權(quán)利要求
1.一種從蘆根中提取薏苡素的方法，其特征在于包括如下步驟a)稱取蘆根粉，放入索氏提取器中，加入提取溶劑，提取2飛h ；b)提取液在40°C，0. 09Mpa下，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮， 60°C水浴揮干溶劑，得濃縮液。
2.如權(quán)利要求1所述的從蘆根中提取薏苡素的方法，其特征在于包括步驟c)濃縮液加入甲醇溶解，0 7°C保存。
3.如權(quán)利要求1或2所述的從蘆根中提取薏苡素的方法，其特征在于所述蘆根粉為過(guò)30目篩，取篩下物。
4.如權(quán)利要求1或2所述的從蘆根中提取薏苡素的方法，其特征在于蘆根粉與提取溶劑的配比為每Ig蘆根粉加入15 35ml的提取溶劑。
5.如權(quán)利要求4所述的從蘆根中提取薏苡素的方法，其特征在于蘆根粉與提取溶劑的配比為每Ig蘆根粉加入15 20ml的提取溶劑。
6.如權(quán)利要求5所述的從蘆根中提取薏苡素的方法，其特征在于蘆根粉與提取溶劑的配比為每Ig蘆根粉加入20ml的提取溶劑。
7.如權(quán)利要求1或2所述的從蘆根中提取薏苡素的方法，其特征在于所述提取溶劑為甲醇、氯仿、二氯甲烷、丙酮或無(wú)水乙醇的一種或兩種以上的混合溶劑。
8.如權(quán)利要求7所述的從蘆根中提取薏苡素的方法，其特征在于提取溶劑為二氯甲烷或丙酮。
9.如權(quán)利要求8所述的從蘆根中提取薏苡素的方法，其特征在于提取溶劑為丙酮。
10.如權(quán)利要求9所述的從蘆根中提取薏苡素的方法，其特征在于蘆根粉與丙酮的配比為每Ig蘆根粉加入20ml的丙酮，提取時(shí)間為池。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從蘆根中提取薏苡素的方法。采用的技術(shù)方案是a)稱取一定量的蘆根粉末，放入索氏提取器中，按1:15~35比例加入提取溶劑，提取2h~6h；b)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮(40℃，0.09Mpa)，60℃水浴揮干溶劑。經(jīng)薄層層析，高效液相色譜定性、定量分析，證明了通過(guò)本發(fā)明確實(shí)獲得了蘆根薏苡素，采用HPLC法，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線Y=217009X+12086(R2=0.9994)，在0.1~0.5μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，該方法的平均回收率為96.35%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差(RSD)為0.16%，開創(chuàng)了蘆根薏苡素研究先河，使薏苡素的開發(fā)利用成為了可能。
文檔編號(hào)C07D263/58GK102503907SQ20111031073
公開日2012年6月20日 申請(qǐng)日期2011年10月14日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月14日
發(fā)明者劉宏生, 朱俊豐, 趙健, 邵麗杰 申請(qǐng)人:遼寧仙鶴礦泉水有限公司