用于前列腺癌的生物標(biāo)志物檢測(cè)中的方法和陣列的制作方法
【專利說(shuō)明】用于前列腺癌的生物標(biāo)志物檢測(cè)中的方法和陣列 發(fā)明領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明提供用于確定前列腺癌相關(guān)疾病狀態(tài)的方法，W及用于運(yùn)些方法的陣列和 試劑盒。
[0002] 發(fā)巧背景
[0003] 使用血液中的前列腺特異性抗原（PSA)對(duì)前列腺癌（PC)的早期檢測(cè)減少了未篩 過(guò)的人中的PC死亡。然而，由于通常使用的臨界值PSA的中度特異性，對(duì)有助于在具有中 度升高的PSA的人中增強(qiáng)風(fēng)險(xiǎn)分類的另外的生物標(biāo)志物有迫切的需求。
[0004] 前列腺癌（PC)在西方國(guó)家是與癌癥相關(guān)的死亡的第二大原因山，而為了改進(jìn)PC 患者的預(yù)后，早期且特異性的診斷至關(guān)重要。八十年代晚期，在臨床中引入了基于血液的生 物標(biāo)志物前列腺特異性抗原（PSA)，而在今天用作PC風(fēng)險(xiǎn)的指示物W及作為患者活組織檢 查進(jìn)一步檢測(cè)的一個(gè)參數(shù)巧，3]。PSA的引入導(dǎo)致了早期診斷的PC病例的數(shù)量增加，但是 PSA對(duì)于惡性疾病的中度特異性已經(jīng)引起了對(duì)于不必要的活組織檢查的成本和潛在副作用 W及過(guò)度診斷和過(guò)度治療的風(fēng)險(xiǎn)的主要關(guān)注巧-4]。實(shí)際上，基于總血清PSA水平（巧SA) (>4]1邑/1111)選擇進(jìn)行活組織檢查的65%-75%的人不患有口(：(>麗.。曰]1。61\〇'邑）。因此， 為了改進(jìn)風(fēng)險(xiǎn)分類，使得臨床醫(yī)生能夠選擇適當(dāng)?shù)幕颊哌M(jìn)行活組織檢查測(cè)試，需要確定另 外的和/或更特異性的生物標(biāo)志物。
[000引為了改進(jìn)測(cè)試PC時(shí)的特異性，已經(jīng)進(jìn)行了幾種嘗試W聯(lián)合巧SA值與其它參數(shù)，例 如PSA隨著時(shí)間的變化（PSA速率），與前列腺體積相關(guān)的PSA(PSA密度），或PSA的年齡特 異性范圍巧，3]。然而，目前僅觀察到了對(duì)巧SA試驗(yàn)診斷能力的無(wú)改進(jìn)或僅中度改進(jìn)巧]。 相反，已經(jīng)證實(shí)了區(qū)分巧SA和游離（未結(jié)合的）PSA提高所述試驗(yàn)的表現(xiàn)，特別是對(duì)于具有 中間范圍（4-1化g/ml)水平的巧SA的人。實(shí)際上，已經(jīng)表明具有游離PSA對(duì)巧SA比率（％ 巧SA)在18-25%?下的人與顯著較高的風(fēng)險(xiǎn)患有PC相關(guān)[5-7]。盡管如此，運(yùn)一特定患 者群體中的25-50%不患有PC，但他們?nèi)匀槐贿x擇進(jìn)行活組織檢查測(cè)試[7,8]。最近，已經(jīng) 表明一組四種激膚釋放酶標(biāo)志物作為活組織檢查結(jié)果的潛在預(yù)示物巧，10]，而巧SA，游離 PSA與稱為化roPSA的游離PSA子部分的組合也可W改進(jìn)診斷準(zhǔn)確性[11]。
[0006] 然而，對(duì)于能夠用于檢測(cè)前列腺癌和/或根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)對(duì)前列腺癌分層（特別是在活 組織檢查和/或治療之前）的另外的、更特異性的，生物標(biāo)記物仍然存在顯著的未滿足的臨 床需要。
[0007] 發(fā)巧公開(kāi)
[0008] 也已經(jīng)開(kāi)展主要的工作W確定與PC相關(guān)的另外的，新的血清生物標(biāo)志物，最初使 用各種經(jīng)典的生物化學(xué)技術(shù)。迄今，人激膚釋放酶2 [12, 13]，尿激酶型血纖維蛋白溶酶原激 活劑[14]，[11]轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子0 1OOF-β1)巧，15, 16]，W及白細(xì)胞介素-6 (比-6) [16-1引 已特別被表明作為潛在的血清標(biāo)志物。盡管前景看好，將需要進(jìn)一步的驗(yàn)證研究來(lái)探索和 確認(rèn)運(yùn)些標(biāo)志物的預(yù)后能力巧-4]、此外，使用傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)也已經(jīng)表明了另外的 潛在PC標(biāo)志物[19, 20]，但是運(yùn)些觀察仍待使用獨(dú)立的患者群進(jìn)行驗(yàn)證巧1]。另外，對(duì)于 試驗(yàn)的靈敏度，動(dòng)態(tài)范圍，和/或處理量也提出了嚴(yán)重的技術(shù)問(wèn)題巧2, 23]。為此，已經(jīng)建立 了親和蛋白質(zhì)組學(xué)作為一種高通量替代，其能夠w多重、靈敏且快速的方式祀向未分級(jí)的 蛋白質(zhì)組，例如血清和血漿巧4-27]。
[0009] 在運(yùn)種情況下，本發(fā)明人之前已經(jīng)設(shè)計(jì)了重組單鏈片段可變（scFv)抗體微陣列 平臺(tái)用于復(fù)雜蛋白質(zhì)組的蛋白表達(dá)概況分析（profiling) [26, 28, 29]。使用運(yùn)一親和蛋 白質(zhì)組學(xué)技術(shù)平臺(tái)，本發(fā)明人已經(jīng)能夠W-種快速，靈敏W及可重現(xiàn)的方式，概況分析范 圍廣泛的天然的，直接標(biāo)記的蛋白質(zhì)組，包括血清，血漿，尿液，完整細(xì)胞，細(xì)胞裂解物，W 及組織提取物巧8, 30, 31]。我們已經(jīng)掲示所述平臺(tái)可W用于鑒定候選生物標(biāo)記物簽名 (signature)，用于例如診斷，預(yù)后，分類，W及用于基于證據(jù)的治療選擇巧2-37]。
[0010] 本發(fā)明人研究了親和蛋白組是否可W用于驗(yàn)證和甚至進(jìn)一步改善W血漿樣品為 目標(biāo)來(lái)自常規(guī)PSA測(cè)量的風(fēng)險(xiǎn)組分類，其中患者樣品根據(jù)目前建立的臨床實(shí)踐被分為四種 生化定義的風(fēng)險(xiǎn)群體巧8-41]。該數(shù)據(jù)表明可W鑒定血漿蛋白簽名，其能夠準(zhǔn)確確定PC("惡 性生物標(biāo)志物簽名"）并用于將患者分為當(dāng)前W及新的與PC風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)的亞組，其從長(zhǎng)遠(yuǎn)來(lái) 看具有有助于更多的PC個(gè)體化治療的潛力。
[0011] 因此，本發(fā)明的第一個(gè)方面提供用于確定個(gè)體中前列腺癌相關(guān)的疾病狀態(tài)的方 法，其包含W下步驟，或由W下步驟組成：
[0012] a)提供來(lái)自所述個(gè)體的待測(cè)試樣品；
[0013]b)通過(guò)測(cè)量所述測(cè)試樣品中一種或多種選自表1中定義的組的生物標(biāo)志物的表 達(dá)，確定所述測(cè)試樣品的生物標(biāo)志物簽名；
[0014] 其中，所述測(cè)試樣品中一種或多種選自表1中定義的組的生物標(biāo)志物的表達(dá)對(duì)于 所述個(gè)體中一種或多種前列腺癌相關(guān)的疾病狀態(tài)是指示性的。
[0015] 通過(guò)"前列腺癌相關(guān)疾病狀態(tài)"我們表示前列腺癌的存在或不存在，前列腺癌組或 亞組（A，BC，C1，C2或化下文定義）和/或在個(gè)體中前列腺癌發(fā)生的可能性（優(yōu)選的，在 給定的時(shí)間框內(nèi)）。
[0016] 通過(guò)"生物標(biāo)志物"我們表示天然存在的生物分子，或其組分或片段，其測(cè)量能夠 提供在確定前列腺癌相關(guān)疾病狀態(tài)中有用的信息，例如，前列腺癌的預(yù)后。例如，所述生物 標(biāo)志物可W是天然存在的蛋白或碳水化合物部分，或抗原組分或其片段。
[0017] 優(yōu)選的待測(cè)試樣品提供自哺乳動(dòng)物。所述哺乳動(dòng)物可W是任意的馴養(yǎng)動(dòng)物或農(nóng)場(chǎng) 動(dòng)物。優(yōu)選的，所述哺乳動(dòng)物是大鼠，小鼠，或豚鼠，貓，狗，馬或靈長(zhǎng)類。最優(yōu)選的，所述哺 乳動(dòng)物是人。優(yōu)選的樣品是細(xì)胞或組織樣品（或其衍生物），其包含W下物質(zhì)，或由W下物 質(zhì)組成：粗制血，預(yù)分級(jí)的血，血漿，血漿細(xì)胞，前列腺細(xì)胞或同樣優(yōu)選的，衍生于細(xì)胞或組 織樣品的蛋白或核酸，所述細(xì)胞或組織包含W下物質(zhì)，或由W下物質(zhì)組成：血漿，血漿細(xì)胞 或前列腺細(xì)胞。優(yōu)選的測(cè)試和對(duì)照樣品來(lái)自同一種類。
[0018] 在一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的第一個(gè)方面的方法進(jìn)一步包含W下步驟，或由 W下步驟組成：
[0019]C)提供來(lái)自未患前列腺癌的個(gè)體的一種或多種對(duì)照樣品；
[0020] d)通過(guò)在步驟化）中測(cè)量所述對(duì)照樣品中一種或多種生物標(biāo)志物的表達(dá)，確定所 述對(duì)照樣品的生物標(biāo)志物簽名；
[0021] 其中一種或多種前列腺癌相關(guān)疾病狀態(tài)在W下事件中定義：在步驟化）中測(cè)量的 測(cè)試樣品中一種或多種生物標(biāo)志物的表達(dá)與步驟（d)中測(cè)量的對(duì)照樣品中一種或多種生 物標(biāo)志物的表達(dá)不同。
[0022] 在進(jìn)一步的或另外的實(shí)施方案中，所述方法包含W下步驟，或由W下步驟組成：
[0023]e)提供來(lái)自患有前列腺癌的個(gè)體的對(duì)照樣品；
[0024] f)通過(guò)在步驟化）中測(cè)量所述對(duì)照樣品中一種或多種生物標(biāo)志物的表達(dá)，確定所 述對(duì)照樣品的生物標(biāo)志物簽名；
[0025] 其中一種或多種前列腺癌相關(guān)疾病狀態(tài)在W下事件中定義：在步驟化）中測(cè)量的 測(cè)試樣品中一種或多種生物標(biāo)志物的表達(dá)對(duì)應(yīng)步驟（f)中測(cè)量的對(duì)照樣品中一種或多種 生物標(biāo)志物的表達(dá)。
[0026] 通過(guò)"對(duì)應(yīng)對(duì)照樣品中的存在和/或量"我們表示所述存在和/或量與步驟（e) 中提供的對(duì)照樣品的相同；或與步驟（e)中提供的對(duì)照樣品（例如，陽(yáng)性對(duì)照樣品）比步驟 (C)中提供的對(duì)照樣品（例如，陰性對(duì)照樣品）（或與代表相同樣品的預(yù)定義參考值）更接 近。優(yōu)選的存在和/或量為步驟（e)中提供的對(duì)照樣品的至少60%，例如至少65%，66%， 67%，68%，09%，7〇%，71%，巧％，巧％，74%，75%，76%，77%，78%，79%，8〇%，81%，沒(méi)％，83%，84%，沒(méi)％ ，86%，87%，88%，89%，90%，91%，92%，93%，94%，95%，96%，97%，98%，99%或 100%。
[0027] 通過(guò)"與對(duì)照樣品中的存在和/或量不同"我們表示所述存在和或量與步驟（C) 中提供的對(duì)照樣品（或與代表相同樣品的預(yù)定義參考值）不同。優(yōu)選的所述存在和/或值 不多于包含前列腺癌細(xì)胞或由前列腺癌細(xì)胞組成的對(duì)照樣品的40%，例如，不多于39%，3 8%，37%，36%，35%，34%，33%，32%，31%，30%，29%，龍％，27%，龍％，25%，24%，23%，。％，21%，20%，19 %, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 11%, 10%,9%,8%, 7%,6%, 5%,4%, 3%, 2%, 1% 或0%。
[0028] 優(yōu)選的，所述一種或多種對(duì)照樣品對(duì)于待測(cè)試個(gè)體是年齡和/或性別匹配的。也 就是說(shuō)，健康個(gè)體與待測(cè)的年齡大致相同（例如，5歲之內(nèi)）且性別相同。
[0029] 優(yōu)選的，在步驟化）中測(cè)量的測(cè)試樣品中一種或多種生物標(biāo)志物的存在和/或量 與預(yù)定義參考值相比。
[0030] 因此，優(yōu)選的是在步驟化）中測(cè)量的測(cè)試樣品中一種或多種生物標(biāo)志物的存在和 /或量與步驟（d)中測(cè)量的一種或多種生物標(biāo)志物的存在和/或量或與預(yù)定義的參考值顯 著差異（例如，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異）。因此，優(yōu)選的是在步驟化）中測(cè)量的測(cè)試樣品中一種或多種 生物標(biāo)志物的存在和/或量與步驟（f)中測(cè)量的一種或多種生物標(biāo)志物的存在和/或量或 與預(yù)定義的參考值顯著對(duì)應(yīng)（即統(tǒng)計(jì)學(xué)相似）。例如，如在隨附的實(shí)施例中討論的，在測(cè)試 樣品和對(duì)照樣品中特定生物標(biāo)志物的存在和/或量之間的顯著差異可W歸類為那些其中 p<0. 05 (例如，其中！)<0. 04,p<0. 03, !)<0. 02 或其中！)<0. 01)。
[0031] 優(yōu)選的，步驟化）包含W下項(xiàng)，或由W下項(xiàng)組成：測(cè)量測(cè)試樣品中一種或多種選自 表1中定義的組的生物標(biāo)志物的存在和/或量，例如，至少2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11，12, 13 ，14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21，22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31，32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 3 9, 40, 41，42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51，52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61，62, 63, 64， 65, 66,或67種選自表1中定義的組的生物標(biāo)志物。
[0032] 步驟化）可W包含測(cè)量IL-4的表達(dá)，或由測(cè)量IL-4的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者 另外，步驟化）可W包含測(cè)量IL-12的表達(dá)，或由測(cè)量IL-12的表達(dá)組成。可替換的或者另 夕F，步驟化）可W包含測(cè)量IL-9的表達(dá)，或由測(cè)量IL-9的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外， 步驟（b)可W包含測(cè)量IL-la的表達(dá)，或由測(cè)量IL-la的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步 驟化）可W包含測(cè)量HLA-DR的表達(dá)，或由測(cè)量HLA-DR的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步 驟化）可W包含測(cè)量IL-3的表達(dá)，或由測(cè)量IL-3的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟 化）可W包含測(cè)量ICAM的表達(dá)，或由測(cè)量ICAM的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化） 可W包含測(cè)量CD40的表達(dá)，或由測(cè)量CD40的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W 包含測(cè)量IL-18的表達(dá)，或由測(cè)量IL-18的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W包 含測(cè)量IL-化的表達(dá)，或由測(cè)量IL-化的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W包含 測(cè)量GLP-1的表達(dá)，或由測(cè)量GLP-1的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W包含 測(cè)量IL-11的表達(dá)，或由測(cè)量IL-11的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W包含測(cè) 量VEGF的表達(dá)，或由測(cè)量VEGF的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W包含測(cè)量脫 抑素C(切statinC)的表達(dá)，或由測(cè)量脫抑素C的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化） 可W包含測(cè)量C1-INH的表達(dá)，或由測(cè)量C1-INH的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化） 可W包含測(cè)量MCP-3的表達(dá)，或由測(cè)量MCP-3的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可 W包含測(cè)量IL-13的表達(dá)，或由測(cè)量IL-13的表達(dá)組成。可替換的或者另外，步驟化）可 W包含測(cè)量TNF-β的表達(dá)，或由測(cè)量TNF-β的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可 W包含測(cè)量CIS的表達(dá)，或由測(cè)量CIS的表達(dá)組成。可替換的或者另外，步驟化）可W包含 測(cè)量整聯(lián)蛋白α-10的表達(dá)，或由測(cè)量整聯(lián)蛋白α-10的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外， 步驟化）可W包含測(cè)量C3的表達(dá)，或由測(cè)量C3的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化） 可W包含測(cè)量GLP-1R的表達(dá)，或由測(cè)量GLP-1R的表達(dá)組成。可替換的或者另外，步驟化） 可W包含測(cè)量IgM的表達(dá)，或由測(cè)量IgM的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W包 含測(cè)量IL-16的表達(dá)，或由測(cè)量IL-16的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W包含 測(cè)量TM膚的表達(dá)，或由測(cè)量TM膚的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W包含測(cè)量 Mucine-1的表達(dá)，或由測(cè)量Mucine-1的表達(dá)組成。可替換的或者另外，步驟化）可W包含 測(cè)量IL-2的表達(dá)，或由測(cè)量IL-2的表達(dá)組成。可替換的或者另外，步驟化）可W包含測(cè)量 IFN-丫的表達(dá)，或由測(cè)量IFN-丫的表達(dá)組成。可替換的或者另外，步驟化）可W包含測(cè)量 CD40配體的表達(dá)，或由測(cè)量CD40配體的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W包含 測(cè)量比-10的表達(dá)，或由測(cè)量比-10的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W包含測(cè) 量GM-CSF的表達(dá)，或由測(cè)量GM-CSF的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W包含測(cè) 量因子B的表達(dá)，或由測(cè)量因子B的表達(dá)組成。可替換的或者另外，步驟化）可W包含測(cè)量 C4的表達(dá)，或由測(cè)量C4的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W包含測(cè)量整聯(lián)蛋白 α-11的表達(dá)，或由測(cè)量整聯(lián)蛋白α-11的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W包 含測(cè)量IL-8的表達(dá)，或由測(cè)量IL-8的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W包含測(cè) 量MCP-4的表達(dá)，或由測(cè)量MCP-4的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W包含測(cè)量 LDL(l)的表達(dá)，或由測(cè)量LDL(l)的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W包含測(cè)量 TNF-β(1)的表達(dá)，或由測(cè)量TNF-β(1)的表達(dá)組成。可替換的或者另外，步驟化）可W包 含測(cè)量IL-7的表達(dá)，或由測(cè)量IL-7的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W包含測(cè) 量Eotaxin的表達(dá)，或由測(cè)量Eotaxin的表達(dá)組成。可替換的或者另外，步驟化）可W包含 測(cè)量Rantes的表達(dá)，或由測(cè)量Rantes的表達(dá)組成。可替換的或者另外，步驟化）可W包 含測(cè)量β-半乳糖巧酶的表達(dá)，或由測(cè)量β-半乳糖巧酶的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另 夕F，步驟化）可W包含測(cè)量瘦素的表達(dá)，或由測(cè)量瘦素的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步 驟化）可W包含測(cè)量粘蛋白1的表達(dá)，或由測(cè)量粘蛋白1的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外， 步驟化）可W包含測(cè)量LDL(2)的表達(dá)，或由測(cè)量LDL(2)的表達(dá)組成。可替換的或者另外， 步驟化）可W包含測(cè)量JAK3的表達(dá)，或由測(cè)量JAK3的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟 化）可W包含測(cè)量比-10的表達(dá)，或由測(cè)量比-10的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟 化）可W包含測(cè)量備解素（properdin)的表達(dá)，或由測(cè)量備解素的表達(dá)組成?？商鎿Q的或 者另外，步驟化）可W包含測(cè)量IL-5的表達(dá)，或由測(cè)量IL-5的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另 夕F，步驟化）可W包含測(cè)量Apo-Al的表達(dá)，或由測(cè)量Apo-Al的表達(dá)組成。可替換的或者另 夕F，步驟化）可W包含測(cè)量LDL的表達(dá)，或由測(cè)量LDL的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟 化）可W包含測(cè)量TNF-a的表達(dá)，或由測(cè)量TNF-a的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟 化）可W包含測(cè)量BTK的表達(dá)，或由測(cè)量BTK的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可 W包含測(cè)量TNF-β(2)的表達(dá)，或由測(cè)量TNF-β(2)的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟 化）可W包含測(cè)量MCP-4(1)的表達(dá)，或由測(cè)量MCP-4(1)的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外， 步驟化）可W包含測(cè)量MCP-4似的表達(dá)，或由測(cè)量MCP-4似的表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另 夕F，步驟化）可W包含測(cè)量GLP的表達(dá)，或由測(cè)量GLP的表達(dá)組成。可替換的或者另外，步 驟化）可W包含測(cè)量血管動(dòng)蛋白（angiomotin)的表達(dá)，或由測(cè)量血管動(dòng)蛋白的表達(dá)組成。 可替換的或者另外，步驟化）可W包含測(cè)量MCP-1的表達(dá)，或由測(cè)量MCP-1的表達(dá)組成。可 替換的或者另外，步驟化）可W包含測(cè)量IL-6的表達(dá)，或由測(cè)量IL-6的表達(dá)組成。可替換 的或者另外，步驟化）可W包含測(cè)量LewisX的表達(dá)，或由測(cè)量LewisX的表達(dá)組成?？商?換的或者另外，步驟化）可W包含測(cè)量Clq的表達(dá)，或由測(cè)量Clq的表達(dá)組成?？商鎿Q的或 者另外，步驟化）可W包含測(cè)量唾液酸化LewisX的表達(dá)，或由測(cè)量唾液酸化LewisX的表 達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W包含測(cè)量TGF-β的表達(dá)，或由測(cè)量TGF-β的表 達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W包含測(cè)量比-Ira的表達(dá)，或由測(cè)量比-Ira的表 達(dá)組成。可替換的或者另外，步驟化）可W包含測(cè)量TGF-β1的表達(dá)，或由測(cè)量TGF-β1的 表達(dá)組成?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W包含測(cè)量PSA的表達(dá)，或由測(cè)量PSA的表達(dá)組 成。
[0033] 因此，步驟化）可W不包含測(cè)量IL-4的表達(dá)。可替換的或者另外，步驟化）可W不 包含測(cè)量IL-12的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量IL-9的表達(dá)?？商?換的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量IL-la的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W 不包含測(cè)量HLA-DR的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量IL-3的表達(dá)?？?替換的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量ICAM的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W 不包含測(cè)量CD40的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量IL-18的表達(dá)。可 替換的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量IL-化的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可 W不包含測(cè)量GLP-1的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量IL-11的表達(dá)。 可替換的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量VEGF的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可 W不包含測(cè)量脫抑素C的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量C1-INH的表 達(dá)。可替換的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量MCP-3的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟 化）可W不包含測(cè)量IL-13的表達(dá)。可替換的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量TNF-0 的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量Cls的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步 驟（b)可W不包含測(cè)量整聯(lián)蛋白α-10的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟（b)可W不包含 測(cè)量C3的表達(dá)。可替換的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量GLP-1R的表達(dá)?？商鎿Q的 或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量IgM的表達(dá)。可替換的或者另外，步驟化）可W不包含 測(cè)量IL-16的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量TM膚的表達(dá)?？商鎿Q的 或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量Mucine-1的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W 不包含測(cè)量IL-2的表達(dá)。可替換的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量IFN-T的表達(dá)。 可替換的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量CD40配體的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟 化）可W不包含測(cè)量IL-10的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量GM-CSF 的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量因子B的表達(dá)。可替換的或者另外， 步驟化）可W不包含測(cè)量C4的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量整聯(lián)蛋 白α-11的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量IL-8的表達(dá)?？商鎿Q的或 者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量MCP-4的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含 測(cè)量LDL(1)的表達(dá)。可替換的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量TNF-β(1)的表達(dá)?？?替換的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量IL-7的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可 W不包含測(cè)量Eotaxin的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量Rantes的表 達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量β-半乳糖巧酶的表達(dá)。可替換的或者另 夕F，步驟化）可W不包含測(cè)量瘦素的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量粘 蛋白1的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量LDL(2)的表達(dá)?？商鎿Q的或 者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量JAK3的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè) 量IL-10的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量備解素的表達(dá)?？商鎿Q的 或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量IL-5的表達(dá)。可替換的或者另外，步驟化）可W不包 含測(cè)量Apo-Al的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量LDL的表達(dá)?？商鎿Q 的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量TNF-a的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W 不包含測(cè)量BTK的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量TNF-β(2)的表達(dá)。 可替換的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量MCP-4(1)的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟 化）可W不包含測(cè)量MCP-4(2)的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量GLP 的表達(dá)。可替換的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量血管動(dòng)蛋白的表達(dá)?？商鎿Q的或者 另外，步驟化）可W不包含測(cè)量MCP-1的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè) 量IL-6的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量LewisX的表達(dá)?？商鎿Q的 或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量Clq的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含 測(cè)量唾液酸化的LewisX的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量TGF-β的 表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量IL-lra的表達(dá)。可替換的或者另外， 步驟化）可W不包含測(cè)量TGF-β1的表達(dá)?？商鎿Q的或者另外，步驟化）可W不包含測(cè)量 PSA的表達(dá)。
[0034] 通過(guò)"表達(dá)"我們表示基因產(chǎn)物例如mRNA或蛋白的水平或量。
[003引通過(guò)"TM膚"我們表示衍生于10TM蛋白的膚，W下的scFv抗體構(gòu)建物SEQIDNO: 1 對(duì)其具有特異性（其中CDR序列W下劃線表示）：
[0036] MAEVQLLESGGGLVQPGG化化SCAASGFTFSSYGFHWVRQAPGKGLEWV化ISWDGGSTYYADSVKGR FTIS畑NSKNTLYLQMN化RAEDTAVYYCARGTW抑PWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSVLTQPPSASGTP GQRVTISCSGSSSNIGNNAVNWYQQLPGTAPKLLIYRNNQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAIS化RS邸EADYYCAAWDD化SWVFGGGTKLWLG [0037][SEQIDN0:1]
[003引