本發(fā)明涉及一種檢測(cè)診斷用抗體，尤其是涉及一種抗人cd16工程抗體及應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、cd16(fcγriii)是一種低親和力igg?fc受體，主要分布于巨噬細(xì)胞、nk細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞表面，作為igg?fc段的特異結(jié)合受體，cdl6是連接細(xì)胞免疫和體液免疫的橋梁，在生物醫(yī)學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，cd16抗體的開發(fā)具有重要的應(yīng)用價(jià)值，為疾病診斷、治療監(jiān)測(cè)和免疫狀態(tài)評(píng)估提供了新的策略。

2、檢測(cè)cd16受體可以用于評(píng)估免疫細(xì)胞的活性和功能狀態(tài)，比如對(duì)自然殺傷(nk)細(xì)胞表面cd16分子的檢測(cè)。nk細(xì)胞屬于天然淋巴細(xì)胞（ilc），其作為天然免疫系統(tǒng)的一部分，對(duì)于免疫監(jiān)視和隨后的宿主防御病毒感染和癌細(xì)胞至關(guān)重要。nk細(xì)胞通過表達(dá)cd16受體與腫瘤抗原特異性抗體fc段結(jié)合，介導(dǎo)抗體依賴性的細(xì)胞毒性（adcc）作用，利用cd16抗體，可以定量分析nk細(xì)胞表面cd16受體的表達(dá)水平。

3、檢測(cè)cd16受體為免疫細(xì)胞相關(guān)疾病的研究和診斷提供重要信息，以便進(jìn)一步評(píng)估cd16的異常表達(dá)與腫瘤發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性。頭頸部鱗狀細(xì)胞癌(hnscc)是世界范圍內(nèi)高發(fā)的惡性腫瘤，以免疫細(xì)胞失調(diào)和免疫功能受損為主要特征，包括中性粒細(xì)胞、nk細(xì)胞等。作為腫瘤微環(huán)境(tumor?microenvironment,?tme)內(nèi)腫瘤細(xì)胞與免疫細(xì)胞通訊網(wǎng)絡(luò)的一部分，細(xì)胞外囊泡(extracellular?vesicles,?evs)，尤其是外泌體，在免疫抑制和腫瘤進(jìn)展調(diào)控中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。有研究表明，晚期hnscc患者血漿源性cd16+總外泌體水平顯著升高，且血漿源性cd16+總外泌體水平與臨床病理參數(shù)相關(guān)，表明cd16+外泌體具有作為hnscc腫瘤分期和侵襲性的液體生物標(biāo)志物的潛力。通過檢測(cè)hnscc病人體內(nèi)血漿源性cd16+外泌體的表達(dá)水平，對(duì)于hnscc的診斷、分期及治療具有重要意義，可以用于評(píng)估hnscc患者免疫治療方案的有效性。

4、因此，鑒于cd16在免疫應(yīng)答和腫瘤發(fā)展中的關(guān)鍵作用，開發(fā)cd16抗體、特別是適于單細(xì)胞水平檢測(cè)的cd16抗體，用于精確檢測(cè)和量化cd16的表達(dá)，對(duì)于深入理解免疫細(xì)胞功能、輔助疾病的診斷與監(jiān)測(cè)、以及優(yōu)化治療方案等方面具有重大意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、有鑒于此，本發(fā)明的目的在于：提出一種抗人cd16工程抗體及應(yīng)用。

2、為達(dá)到上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實(shí)現(xiàn)的：

3、本發(fā)明提供了一種抗人cd16工程抗體，該抗體包括重鏈可變區(qū)與輕鏈可變區(qū)；

4、所述的重鏈可變區(qū)的cdr1、cdr2、cdr3分別為如seq?id?no.1、seq?id?no.2、seqid?no.3所示的氨基酸序列；

5、所述的輕鏈可變區(qū)的cdr1、cdr2、cdr3分別為如seq?id?no.4、seq?id?no.5、seqid?no.6所示的氨基酸序列。

6、進(jìn)一步，所述的重鏈可變區(qū)的fr1、fr2、fr3、fr4分別為如seq?id?no.7、seq?idno.8、seq?id?no.9、seq?id?no.10所示的氨基酸序列；

7、所述的輕鏈可變區(qū)的fr1、fr2、fr3、fr4分別為如seq?id?no.11、seq?id?no.12、seq?id?no.13、seq?id?no.14所示的氨基酸序列。

8、進(jìn)一步，所述的抗體的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列如seq?id?no.15所示，輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列如seq?id?no.16所示。

9、本發(fā)明還提供了一種核酸分子，該核酸分子包含編碼所述的抗人cd16工程抗體的核苷酸序列。

10、本發(fā)明還提供了一種表達(dá)載體，該表達(dá)載體包含所述的核酸分子。

11、本發(fā)明還提供了一種細(xì)胞，該細(xì)胞包含所述的核酸分子或所述的表達(dá)載體。

12、本發(fā)明還提供了所述的抗人cd16工程抗體在制備cd16分子的檢測(cè)試劑中的應(yīng)用。

13、本發(fā)明還提供了所述的抗人cd16工程抗體在制備輔助診斷與cd16分子表達(dá)異常相關(guān)的疾病的檢測(cè)試劑中的應(yīng)用。

14、本發(fā)明還提供了一種免疫檢測(cè)試劑盒，該試劑盒包含所述的抗人cd16工程抗體。

15、相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明具有以下優(yōu)勢(shì)：

16、本發(fā)明所述的抗人cd16工程抗體提供了抗人cd16單克隆抗體輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)，兩者重組后表達(dá)產(chǎn)生的抗cd16工程抗體能夠特異性結(jié)合人cd16分子具有高敏感性和高特異性，能夠用于人cd16分子的檢測(cè)；同時(shí)，可用于開發(fā)輔助診斷與cd16分子表達(dá)異常相關(guān)的疾病的檢測(cè)試劑。

技術(shù)特征：

1.一種抗人cd16工程抗體，其特征在于：該抗體包括重鏈可變區(qū)與輕鏈可變區(qū)；

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗人cd16工程抗體，其特征在于：所述的重鏈可變區(qū)的fr1、fr2、fr3、fr4分別為如seq?id?no.7、seq?id?no.8、seq?id?no.9、seq?id?no.10所示的氨基酸序列；

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗人cd16工程抗體，其特征在于：所述的抗體的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列如seq?id?no.15所示，輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列如seq?id?no.16所示。

4.一種核酸分子，其特征在于：該核酸分子包含編碼權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的抗人cd16工程抗體的核苷酸序列。

5.一種表達(dá)載體，其特征在于：該表達(dá)載體包含權(quán)利要求4所述的核酸分子。

6.一種細(xì)胞，其特征在于：該細(xì)胞包含權(quán)利要求4所述的核酸分子或權(quán)利要求5所述的表達(dá)載體。

7.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的抗人cd16工程抗體在制備cd16分子的檢測(cè)試劑中的應(yīng)用。

8.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的抗人cd16工程抗體在制備輔助診斷與cd16分子表達(dá)異常相關(guān)的疾病的檢測(cè)試劑中的應(yīng)用。

9.一種免疫檢測(cè)試劑盒，其特征在于：該試劑盒包含權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的抗人cd16工程抗體。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種抗人CD16工程抗體及應(yīng)用，該抗體包括重鏈可變區(qū)與輕鏈可變區(qū)；所述的重鏈可變區(qū)的CDR1、CDR2、CDR3分別為如SEQ?ID?NO.1、SEQ?ID?NO.2、SEQ?ID?NO.3所示的氨基酸序列；所述的輕鏈可變區(qū)的CDR1、CDR2、CDR3分別為如SEQ?ID?NO.4、SEQ?ID?NO.5、SEQ?ID?NO.6所示的氨基酸序列。本發(fā)明所述的抗人CD16工程抗體能夠特異性結(jié)合人CD16分子，并且具有高敏感性和高特異性，能夠用于人CD16分子的檢測(cè)；同時(shí)，可用于開發(fā)輔助診斷與CD16分子表達(dá)異常相關(guān)的疾病的檢測(cè)試劑。

技術(shù)研發(fā)人員：李宜波,張紅霞,李靖宇,王思齊,李子旸,李原,趙雨萌,郝軍鳳,劉紅芹,屈浩,廖曉龍
受保護(hù)的技術(shù)使用者：蘇州為度生物技術(shù)有限公司天津分公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/10/21