專利名稱：：甘氨雙唑氨丁三醇鹽化合物及其制備方法和藥物應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于藥物
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種放化療增敏劑藥物甘氨雙唑酸的衍生物鹽化合物，本發(fā)明進(jìn)一步涉及它的制備方法和藥物應(yīng)用。技術(shù)背景放射治療和化學(xué)治療是腫瘤治療中的重要方法，放化療效果的好壞直接影響著患者的康復(fù)和生存期，影響發(fā)射和化學(xué)療效的因素很多，其中一個(gè)重要的原因是腫瘤組織中含有1050%的乏氧細(xì)胞，這些乏氧細(xì)胞對(duì)射線和化療藥物的耐受性比腫瘤組織中的有氧細(xì)胞正常細(xì)胞強(qiáng)大三倍，對(duì)射線及放化療藥物有明顯的抗拒作用，因此，在常規(guī)放化療劑量治療時(shí)，乏氧細(xì)胞不能被有效殺死，而成為腫瘤轉(zhuǎn)移和存活的"庇護(hù)所"，這是腫瘤放化療效果不理想的主要原因，也是導(dǎo)致或加速導(dǎo)致腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)的主要原因，而放化療增敏劑是一種化學(xué)藥物，它能增強(qiáng)射線和放化療藥物對(duì)腫瘤的乏氧細(xì)胞的殺滅作用，而對(duì)有氧的正常組織一般損傷較小。中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?9102182.5公開(kāi)了一種放化療增敏劑一甲硝唑胺酸的制備方法，采用氨三乙酸與甲硝唑在一定條件和環(huán)境下進(jìn)行雙酯化反應(yīng)而生成，由于甲硝唑氨酸(又稱甘氨雙唑酸)的水溶性差，在藥物制備和應(yīng)用上十分不便，為提高其水溶性，臨床上采用甘氨雙唑酸的鈉鹽應(yīng)用于臨床治療，甘氨雙唑酸鈉(CMNa)其注射劑已有國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)上市，甘氨雙唑鈉的化學(xué)名稱為N，N-雙[(2-甲基-5-硝基-1H-咪唑-l-基)-乙氧羰甲基]甘氨酸鈉，其分子結(jié)構(gòu)式如下分子式為C18H22NA。Na。注射用甘氨雙唑鈉是創(chuàng)新的硝基咪唑類放、化療增敏劑類藥物，對(duì)乏氧細(xì)胞有確切的放射增敏效果，甘氨雙唑酸的親電子基團(tuán)能捕獲腫瘤細(xì)胞受損靶分子(核酸和蛋白質(zhì))上的電子，使其形成陽(yáng)離子自由基，固定損傷，加速腫瘤細(xì)胞死亡，另外，還能抑制DNA修復(fù)酶，特別是聚合酶P，抑制腫瘤細(xì)胞潛在致死性損傷修復(fù)(PLDR)和亞致死性損傷修復(fù)(SLDR)，從而提高腫瘤乏氧細(xì)胞對(duì)輻射和化療藥物的敏感性，減少腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。甘氨雙唑鈉使用時(shí)用生理鹽水溶解后靜脈滴注，但是應(yīng)當(dāng)注意，甘氨雙唑鈉是甘氨雙唑酸的金屬鈉鹽結(jié)構(gòu)，屬離子鹽化合物，其在水溶液中的穩(wěn)定性較差，容易水解產(chǎn)生雜質(zhì)，影響了藥物的質(zhì)量穩(wěn)定，對(duì)藥物的使用安全帶來(lái)隱患，同時(shí)也影響藥效的正常發(fā)揮。另外，中國(guó)專利公開(kāi)號(hào)CN1580048提供了甘氨雙唑酸的葡甲胺加成鹽化合物及其制法和用途；中國(guó)專利公開(kāi)號(hào)CN1660817提供了甘氨雙唑酸與堿性氨基酸的復(fù)鹽化合物及其制法和用途；中國(guó)專利公開(kāi)號(hào)CN1810790提供了甘氨雙唑酸的銨鹽、二乙胺鹽、乙二胺鹽等。然而，對(duì)于甘氨雙唑酸的葡甲胺加成鹽，由于葡甲胺易于吸潮，在制備時(shí)葡甲胺鹽常常以軟粘態(tài)的無(wú)定形體在反應(yīng)溶劑中出現(xiàn)，需要在較高溫度下才能將其中的水除去或烘干或凍干，另外得到葡甲胺鹽制備時(shí)生成的葡甲胺鹽極易吸濕，不利于使葡甲胺鹽作為藥物原料使用和保存，影響產(chǎn)品質(zhì)量；對(duì)于甘氨雙唑酸的堿性氨基酸的復(fù)鹽，由于氨基酸中含有羧基，與甘氨雙唑酸中的羧基有對(duì)沖反應(yīng)的效應(yīng)，其與氨基酸反應(yīng)成鹽的難度較大，且生成的氨基酸鹽穩(wěn)定性差，在水溶液中放置易于發(fā)生甘氨雙唑酸的沉淀析出，尤其在葡萄糖注射液(葡萄糖注射液通常是中強(qiáng)度的酸性水溶液)易于發(fā)生甘氮雙唑酸的沉淀析出，而且，甘氨雙唑酸的堿性氨基酸的復(fù)鹽也很容易吸濕，這些缺陷都嚴(yán)重影響了氨基酸鹽的臨床應(yīng)用；對(duì)于甘氨雙唑酸的銨鹽、二乙胺鹽、乙二胺鹽，由于氨在常溫下是氣體，二乙胺、乙二胺常溫下是液體，它們與甘氨雙唑酸的成鹽性能差，其熱穩(wěn)定差，即使在常溫下就易于降解為甘氨雙唑酸，并且，二乙胺、乙二胺鹽作為藥物使用時(shí)對(duì)血管的刺激性十分強(qiáng)烈，嚴(yán)重影響了它們?cè)谧⑸鋭┧幬镏械膽?yīng)用。吸濕性是選擇鹽的幾個(gè)重要原則之一。易于吸濕的藥物，不僅在制劑制備時(shí)難于操作(例如稱取、混合、干燥等操作)，而且也影響到原料藥的穩(wěn)定性、儲(chǔ)存等。參見(jiàn)K.Morris等人，"選擇新藥物候選物的最佳鹽形式的合并途徑"，In.J.Pharm.，105巻，209-217(1994年)。任何藥物物質(zhì)的吸濕性已經(jīng)明顯影響了藥物產(chǎn)品的壽命和穩(wěn)定性。基于現(xiàn)有的上述技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種新的氨雙唑酸的非離子鹽化合物
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種甘氨雙挫酸的非離子鹽化合物，具體是提供一種甘氨雙唑酸的氨丁三醇鹽化合物，不僅具有較好的水溶性，而且屬于甘氨雙唑酸的非金屬的復(fù)鹽結(jié)構(gòu)，吸濕性差，穩(wěn)定性好，尤其在水溶液中的穩(wěn)定性良好。本發(fā)明進(jìn)一步提供了甘氨雙唑氨丁三醇鹽的制備方法，還提供了甘氨雙唑氨丁三醇鹽在藥物中的應(yīng)用。甘氨雙唑酸分子結(jié)構(gòu)中存在有酸性中心(羧基)，本發(fā)明創(chuàng)造性地將甘氨雙唑酸與具有堿性基團(tuán)的氨丁三醇結(jié)合而制成甘氨雙唑酸氨丁三醇鹽化合物，簡(jiǎn)稱甘氨雙唑氨丁三醇鹽，它具有如下的化學(xué)結(jié)構(gòu)式分子式為UH23N(VC4HuN03。應(yīng)當(dāng)說(shuō)明的是，氨丁三醇，又名三(羥甲基)氨基甲垸，化學(xué)名為2-氨基-2-羥甲基-1，3-丙二醇，分子式C4HuN03，氨丁三醇屬于堿性物質(zhì)，穩(wěn)定性好，不吸潮，對(duì)人體安全性高，注射或口服均安全無(wú)毒，亦無(wú)附加的藥理作用。本發(fā)明甘氨雙唑氨丁三醇鹽是甘氨雙唑酸與氨丁三醇以1:1的摩爾比形成的加成鹽化合物，由于基團(tuán)間的電荷位移效應(yīng)，甘氨雙唑氨丁三醇鹽的分子結(jié)構(gòu)式也可表示為IIYIIc(oCOOH<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>eQQ_，以上三個(gè)結(jié)構(gòu)式被認(rèn)為是相同或等同的，均表示的是甘氨雙唑算與氨丁三醇以l:l的摩爾數(shù)形成的加成鹽化合物。本發(fā)明還提供了甘氨雙唑氨丁三醇鹽的制備方法，其制備方法是將甘氨雙唑酸與氨丁三醇在合適的溶劑中充分混合，使甘氨雙唑酸與氨丁三醇在液體環(huán)境中接觸反應(yīng)形成鹽，再將溶劑除去并干燥得到固體形態(tài)的反應(yīng)物(例如通過(guò)過(guò)濾或蒸發(fā)或冷凍干燥等方法除去)，即得到固體形態(tài)的甘氨雙唑氨丁三醇鹽，所述溶劑選自水、乙醇、甲醇、丙酮、異丙醇、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺中的一種或幾種溶劑的混合物，在制備時(shí)，甘氨雙唑酸和氨丁三醇的投料反應(yīng)量以摩爾比為1:1或接近1:1的量投料反應(yīng)。所述摩爾比接近1:1是指摩爾數(shù)之比的上下范圍在l:l的5%以內(nèi)，即1:(0.951.05)。具體的，本發(fā)明提供以下甘氨雙唑氨丁三醇鹽的制備方法，它包括下列順序步驟(1)配制將甘氨雙唑酸和氨丁三醇在適量的溶劑中于055。C完全溶解，使混合液呈淡黃色的澄明溶液，并攪拌；其中甘氨雙唑酸與氨丁三醇摩爾比為1:(0.951.05)，優(yōu)選甘氨雙唑酸與氨丁三醇摩爾比為l:l，所述溶劑選自水、乙醇、甲醇、丙酮、異丙醇、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺中的一種或幾種溶劑的混合物。(2)析出固化方法一:將澄明溶液減壓蒸餾除去部分溶劑，當(dāng)溶液產(chǎn)生混濁時(shí)停止減壓蒸餾，置于5'C以下的環(huán)境中使其產(chǎn)生沉淀，優(yōu)選置于0-C以下的環(huán)境中使其產(chǎn)生沉淀，得到析出物，將析出物用丙酮、乙腈、甲苯、乙醇或甲醇洗滌后，干燥，得到淺黃色的固體，即得甘氨雙唑氨丁三醇鹽；在上述制備中，其中干燥方法選自加熱干燥、減壓干燥、真空干燥、冷凍干燥中的一種或幾種。方法二:將澄明溶液減壓蒸餾除去溶劑，使其產(chǎn)生沉淀，得到析出物，將析出物用丙酮、乙腈、甲苯、乙醇、乙醚或甲醇洗滌后，干燥，得到淺黃色的固體，即得甘氨雙唑氨丁三醇鹽；在上述制備中，其中干燥方法選自加熱干燥、減壓干燥、真空干燥、冷凍干燥中的一種或幾種。方法三:在混合澄明溶液中加入乙酸乙酯、丙酮、乙醇或乙醚直至出現(xiàn)混濁液，靜置混濁液使其充分沉淀，去除上清液，即得到析出物，將析出物用丙酮、乙醇或乙醚洗滌后，采用干燥或冷凍干燥的方法得到淺黃色的固體，即得甘氨雙唑氨丁三醇鹽；方法四將混合澄明溶液直接采用冷凍干燥的方法得到淺黃色的固體，即得甘氨雙唑氨丁三醇鹽。上述制備方法的配制步驟(l)中，可以將甘氨雙唑酸、氨丁三醇先分別與溶劑混合后再進(jìn)行反應(yīng)，也可將甘氨雙唑酸、氨丁三醇直接加入溶劑中進(jìn)行反應(yīng)，均可得到甘氨雙唑氨丁三醇鹽。進(jìn)一步的，本發(fā)明提供甘氨雙唑氨丁三醇鹽在制備腫瘤放、化療治療中作為增敏劑的藥物中的應(yīng)用。尤其在制備實(shí)體腫瘤放、化療治療中作為增敏劑的藥物中的應(yīng)用，例如在制備肺癌、頭頸部腫瘤或食道癌放、化療治療中作為增敏劑的藥物中的應(yīng)用。進(jìn)一步的，本發(fā)明提供的甘氨雙唑氨丁三醇鹽，它作為活性成份用于治療時(shí)，一般不直接給予患者單純的甘氨雙唑氨丁三醇的衍生物鹽化合物上述，通常都是以含有可藥用載體的藥物組合物的形式出現(xiàn)，因此，本發(fā)明還提供了相應(yīng)的藥物組合物和制備方法。本發(fā)明提供了一種含有上述甘氨雙唑氨丁三醇鹽的藥物組合物，可以通過(guò)任意合適的途徑給藥本發(fā)明所述的甘氨雙唑氨丁三醇鹽，但通常通過(guò)口服或非腸道途徑，例如通過(guò)注射使用。為了進(jìn)行這類應(yīng)用，一般以含有可藥用載體的藥物組合物形式使用本發(fā)明所述的甘氨雙唑氨丁三醇鹽，不過(guò)，該組合物的確切形式自然取決于給藥形式。本發(fā)明甘氨雙唑氨丁三醇鹽通常不以單純的化學(xué)品給患者使用，而是將其加工成患者易于接受的組合物(制劑)形式，故本發(fā)明還提供了甘氨雙唑氨丁三醇鹽為活性成份(原料藥)在藥物組合物(制劑)中的應(yīng)用。以本發(fā)明甘氨雙唑氨丁三醇鹽為活性成份(原料藥)，以及含有一種或一種以上藥學(xué)上可接受的藥用載體，配制成經(jīng)任何適當(dāng)途徑給藥的形式，可制備藥劑學(xué)上可以接受的任何藥物劑型，包括注射制劑、口服制劑、非口服的液體制劑，等等，如注射劑，包括注射用粉針劑和注射液，又如口服的片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服溶液劑、粉末劑、丸劑、舌下含服劑等等；等等；再如非口服的透皮吸收的乳膏、凝膠、乳液、乳膠劑、貼劑等，又如滴眼液、滴鼻液、滴耳液等等。也可以是以上各種劑型的速釋、緩釋、控釋等劑型，例如口服的分散片、緩釋片、咀嚼片、緩釋膠囊、腸溶片、泡騰片、口腔崩解片、異型片、泡騰顆粒，等等。特別地，按本領(lǐng)域己知方法制備，優(yōu)選用于制備藥劑學(xué)上使用的片劑(包括分散片、緩釋片、咀嚼片、腸溶片、泡騰片、口腔崩解片、異型片)、膠囊劑(包括胃溶、腸溶、緩釋膠囊)、顆粒劑、口服溶液劑、注射劑(包括注射用粉針劑和注射液)等；透皮吸收的軟膏劑、凝膠劑、乳液劑、乳膠劑、貼劑等，以滿足臨床使用上的各種需要。本發(fā)明提供了一種含有上述甘氨雙唑氨丁三醇鹽的藥物組合物，以及含有一種或多種藥學(xué)上可接受的載體，其中本發(fā)明甘氨雙唑氨丁三醇鹽的含量為101000mg，例如10mg、20mg、50mg、100mg、200mg、250mg、300mg、350mg、400mg、450mg、500mg、550mg、600mg、650mg、700mg、715mg、750mg、800mg、850mg、900mg、950mg、1000mg，等等。應(yīng)當(dāng)理解，對(duì)于口服或注射劑，按照本領(lǐng)域熟知的方法，藥用載體是保持藥物劑型的基質(zhì)或輔料，通常根據(jù)不同的藥劑來(lái)選用或組合使用，可選擇性的包括賦形劑或稀釋劑，例如甘露醇、山梨醇、葡萄糖、右旋糖酐、果糖、微晶纖維素、乳糖、預(yù)膠化淀粉、淀粉、糊精、磷酸鈣、蔗糖、水、聚乙二醇、丙二醇、甘油、環(huán)糊精及其衍生物，等等；還可包括粘合劑，例如聚維酮(聚乙烯吡咯烷酮)、甲基纖維素、羥甲基纖維素、羥丙甲基纖維素、羥丙基纖維素、羥乙基纖維素、明膠、瓜耳膠、黃原膠，等等；還包括潤(rùn)滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸、滑石粉、硬脂基富馬酸鈉、月桂基硫酸鈉，等等；還可包括崩解劑，例如羧甲基淀粉鈉、低取代羥丙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、交聯(lián)羧甲基淀粉鈉、預(yù)膠化淀粉，等等；還包括表面活性劑，例如十二垸基硫酸鈉、聚山梨酯-80，等等；還可包括pH值調(diào)節(jié)劑或緩沖劑，例如磷酸鹽緩沖液、檸檬酸、檸檬酸鈉、醋酸鹽緩沖液、稀鹽酸、碳酸鈉、氫氧化鈉，等等；還可包括防腐劑，例如苯甲酸鈉、山梨酸鉀、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯，等等；還可包括穩(wěn)定劑和抗氧劑，例如依地酸鈣鈉、亞硫酸鈉、維生素C，等等；還可包括口味調(diào)節(jié)劑，例如麥芽糖醇、果糖、蔗糖、糖精鈉、桔子香精、草莓香精，等等；另外還可包括其它常規(guī)的、恰當(dāng)?shù)奶砑觿?。還應(yīng)當(dāng)理解，物劑型是片劑或膠囊劑時(shí)，可以是膜包衣的。用于膜包衣的材料，包括適合的包衣劑，例如羥丙甲基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙甲基纖維素鄰苯二甲酸酯，等等；還可包含增塑劑，例如聚乙二醇、檸檬酸三乙酯，等等；還包括適宜的增溶劑，如聚山梨醇酯-80;還可包含適宜的色素，如二氧化鈦、各種氧化鐵、桃紅色色素，等等。應(yīng)當(dāng)理解，上述"可選擇性的包括"是指即可以視需要選擇使用，也可以不使用。如上所述的藥物組合物，含有一種或一種以上藥學(xué)上可接受的藥用載體，配制成經(jīng)任何適當(dāng)途徑給藥的形式，可制備藥劑學(xué)上可以接受的任何藥物劑型，本發(fā)明所述的甘氨雙唑氨丁三醇鹽的衍生物鹽是其中的活性物質(zhì)，藥物組合物中還可以包含其它具有藥學(xué)活性的物質(zhì)，形成一種復(fù)方的藥物組合物，來(lái)聯(lián)合治療。如上所述的藥物組合物的制備方法，該方法包括將甘氨雙唑氨丁三醇鹽與藥學(xué)上可接受的藥用載體充分混合制成藥劑學(xué)上可接受的任何藥物劑型，優(yōu)選的藥物劑型是注射劑(包括注射用粉針劑和注射液，例如以葡萄糖、氯化鈉、果糖、轉(zhuǎn)化糖、木糖醇、麥芽糖等作為滲透壓調(diào)節(jié)劑的靜脈注射使用的水溶液，)；片劑(包括分散片、緩釋片、腸溶片、泡騰片、口腔崩解片、異型片等)、膠囊劑(包括胃溶、腸溶、緩釋膠囊)、顆粒劑、口服溶液劑；透皮吸收的軟膏劑、凝膠劑、乳液劑、乳膠劑、貼劑等。特別的，并且優(yōu)選的，本發(fā)明提供了將甘氨雙唑氨丁三醇鹽的注射劑藥物組合物，尤其是注射使用的凍干粉針劑。因?yàn)?，將甘氨雙唑氨丁三醇鹽作為放化療增敏劑的藥物活性成份，口服使用起效緩慢而不適宜與放化療治療同步應(yīng)用，注射使用是其最佳的應(yīng)用方式，然而甘氨雙唑酸分子結(jié)構(gòu)中含有不穩(wěn)定的酯基，在水溶液中穩(wěn)定性較差，易于分解，水溶液形式的注射劑存在儲(chǔ)存時(shí)間短，包裝、運(yùn)輸、貯存不便，故水溶液注射劑影響了藥物的安全和有效使用，而粉針劑可以避免上述問(wèn)題，但也不適宜采用高溫滅菌法制成注射用無(wú)菌粉末。本發(fā)明經(jīng)過(guò)研究，發(fā)現(xiàn)采用冷凍干燥的方法將將甘氨雙唑氨丁三醇鹽制成注射用粉末制劑，可以解決上述缺陷。本發(fā)明的甘氨雙唑氨丁三醇鹽凍干粉針劑含有作為活性成份甘氨雙唑氨丁三醇鹽、pH值調(diào)節(jié)劑和其它藥用載體，其中可藥用載體選自甘露醇、乳糖、葡萄糖、泊洛沙姆、氯化鈉、環(huán)糊精、果糖、木糖醇、山梨醇、右旋糖酐、蔗糖、羥丙基纖維素鈉、水解明膠中的一種或幾種，但并不限于此。藥用載體的含量為190%，優(yōu)選藥用載體的含量為280%，優(yōu)選藥用載體的含量為570%。概念性的，本發(fā)明所述可藥用載體是指是指在凍干粉針劑中，除主藥成份之外的、可以用來(lái)進(jìn)行賦形、支架、填充、抗氧化、調(diào)節(jié)PH等的藥用輔料。與前述含量一致性的，本發(fā)明提供的甘氨雙唑氨丁三醇鹽粉針劑，其中甘氨雙唑氨丁三醇鹽化合物的含量規(guī)格為1001000mg，并且該粉針劑是通過(guò)凍干方法制備得到的，優(yōu)選甘氨雙唑氨丁三醇鹽的含量規(guī)格為200900mg，更優(yōu)選甘氨雙唑氨丁三醇鹽的含量規(guī)格為300800mg。這種劑量規(guī)格在用于成人的腫瘤放化療增敏劑的治療中，每次使用甘氨雙唑氨丁三醇鹽凍干粉針劑只需14支，使用方便、經(jīng)濟(jì)和高效，易于臨床使用，尤其更方便醫(yī)務(wù)人員配制藥液，減少醫(yī)務(wù)人員配制藥液的煩鎖性。由于甘氨雙唑氨丁三醇鹽是呈堿性的化合物，因此調(diào)節(jié)甘氨雙唑氨丁三醇鹽凍干粉針劑的pH值范圍是必需的，本發(fā)明pH值調(diào)節(jié)劑為水溶性調(diào)節(jié)劑，選自鹽酸、枸櫞酸、磷酸、醋酸、門冬氨酸、谷氨酸、枸櫞酸鉀、枸櫞酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、碳酸銨、磷酸二氫鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉、磷酸氫二鉀、碳酸鈉、酒石酸、酒石酸氫鉀、酒石酸鉀、酒石酸鈉、偏磷酸鉀、聚偏磷酸鉀、偏磷酸鈉中的一種或幾種，但并不限于此。但pH調(diào)節(jié)劑的量不可過(guò)多加入，否則pH值過(guò)高，當(dāng)用100ml0.9%氯化鈉(生理鹽水)或5%葡萄糖注射劑稀釋時(shí)，pH值不能降至正常機(jī)體可以承受的范圍以內(nèi)，因此將本品在凍干前的水溶液的pH定為612.5，最適宜pH值在6.512，最適宜pH值在7.711，這樣就可以使甘氨雙唑氨丁三醇鹽凍干粉針劑溶解后pH值在10以下，在機(jī)體可以承受的范圍以內(nèi)，且能保證溶解后6小時(shí)保持穩(wěn)定，以保證臨床靜脈滴注使用。為了保證藥物制劑的穩(wěn)定，本發(fā)明注射用甘氨雙唑氨丁三醇鹽還可以含有金屬離子絡(luò)合劑，優(yōu)選依地酸二鈉、依地酸鈣鈉；還可以含有抗氧劑，選自亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉、硫脲、維生素C;還可以含有氮?dú)庾鳛楸Ｗo(hù)性氣體。本發(fā)明還提供了甘氨雙唑氨丁三醇鹽凍干粉針劑的制備方法。本發(fā)明所述的甘氨雙唑氨丁三醇鹽凍干粉針劑的制備方法包括稱取處方量的甘氨雙唑氨丁三醇鹽加注射用水溶解，制成甘氨雙唑氨丁三醇鹽溶液，加入適量的藥用載體，調(diào)節(jié)pH值6.512.5，優(yōu)選調(diào)節(jié)pH值為7.712，無(wú)菌灌裝，進(jìn)行冷凍干燥，真空壓蓋或充氮?dú)鈮荷w后取出，壓鋁蓋貼簽即得成品。具體地，本發(fā)明所述的甘氨雙唑氨丁三醇鹽凍干粉針劑的冷凍干燥的工藝包括藥液置于凍干箱，預(yù)凍16小時(shí)，使溫度下降至-30-55°C;第一次升華812小時(shí)，溫度上升至-5°C;第二次升華68小時(shí)，溫度上升至2530°C，真空壓蓋或充氮?dú)鈮荷w后取出，貼簽即得成品。本發(fā)明還提供另一種制備方法，它包括:稱取處方量的甘氨雙唑氨丁三醇鹽加注射用水溶解，制成甘氨雙唑氨丁三醇鹽溶液，加入適量的藥用載體，調(diào)節(jié)pH值為6.512.5，優(yōu)選調(diào)節(jié)pH值為7.711，加入0.10.5%(w/v)針用活性炭，206(TC下攪拌2080分鐘，用經(jīng)滅菌的0.6um濾膜脫炭，調(diào)節(jié)濾液pH值為6.512.5，以0.22um濾膜過(guò)濾除菌，灌裝于玻璃管制瓶中，送入冷凍干燥機(jī)凍干，加蓋或充氮?dú)饧由w后取出，貼標(biāo)簽即得，其中凍干工藝曲線如下表l:表l<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>本發(fā)明甘氨雙唑氨丁三醇鹽的顯著優(yōu)點(diǎn)或特點(diǎn)1.本發(fā)明甘氨雙唑氨丁三醇鹽，是所選用氨丁三醇作為甘氨雙唑酸的堿性配位體的衍生物鹽化合物，化合物結(jié)構(gòu)中無(wú)金屬離子，是甘氨雙唑酸的非金屬鹽化合物，而且氨丁三醇安全，對(duì)人體沒(méi)有額外的副作用和藥理作用。2.本發(fā)明采用氨丁三醇作為甘氨雙唑酸的加成鹽的配位體，沒(méi)有改變甘氨雙唑酸的藥作用，但形成的甘氨雙唑氨丁三醇鹽的水溶性良好，易于藥物的應(yīng)用和制劑的制備。3.穩(wěn)定性本發(fā)明甘氨雙唑氨丁三醇鹽在水溶液中的穩(wěn)定性好，對(duì)于保證藥物在使用過(guò)程中的質(zhì)量穩(wěn)定和藥效的正常發(fā)揮具有重要意義。為說(shuō)明本發(fā)明甘氨雙唑氨丁三醇鹽在水溶液中的穩(wěn)定性效果，特提供以下實(shí)驗(yàn)資料。取甘氨雙唑氨丁三醇鹽淺黃色固體粉末，測(cè)定其常溫常壓下在水中的溶解度大于30%，可完全滿足其在制備藥劑上的應(yīng)用。現(xiàn)通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)考察其在水溶液中的穩(wěn)定性，并以甘氨雙唑鈉作照品比較。實(shí)驗(yàn)方法精密稱取甘氨雙唑氨丁三醇鹽和甘氨雙唑鈉，用蒸餾水分別制成濃度約為1%的溶液，并調(diào)節(jié)溶液PH^8.5土0.2，每隔4小時(shí)分別測(cè)定兩種溶液的濃度，分別觀察其中甘氨雙唑氨丁三醇鹽和甘氨雙唑鈉的含量變化。含量測(cè)定方法照高效液相色譜法測(cè)定。系統(tǒng)適用性條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-0.05mol/L醋酸銨(15:85)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為316nm，理論塔板數(shù)按甘氨雙唑酸峰計(jì)應(yīng)不小于1200，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以甘氨雙唑酸峰面積計(jì)算，即得含量，換算得數(shù)據(jù)如下表2:甘氨雙唑氨丁三醇鹽和甘氨雙唑鈉在水溶液中穩(wěn)定性比較<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>由表2數(shù)據(jù)可看出，在12^時(shí)甘氨雙唑鈉的含量下降值為4.215%，而甘氨雙唑氨丁三醇鹽的含量下降值僅為1.961%，表明甘氨雙唑氨丁三醇鹽的穩(wěn)定性遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于甘氨雙唑鈉在水溶液中的穩(wěn)定性，這對(duì)于甘氨雙唑氨丁三醇鹽具有兩方面的重要意義，一是在制備藥物制劑和使用保存方面能更加保證藥品的質(zhì)量穩(wěn)定；二是藥物進(jìn)入人體后也能夠保持相對(duì)好的穩(wěn)定性，能更多地以原型藥物聚集在腫瘤實(shí)體內(nèi)，達(dá)到更好的放、化療增敏效果。4.吸濕性本發(fā)明甘氨雙唑氨丁三醇鹽是固體粉末態(tài)，在室溫、大氣壓下，相對(duì)于甘氨雙唑酸葡甲胺鹽、甘氨雙唑酸的堿性氨基酸的復(fù)鹽(如精氨酸鹽)等，本發(fā)明甘氨雙唑氨丁三醇鹽是非吸濕的，以下面的實(shí)驗(yàn)說(shuō)明。分別取大約lg的甘氨雙唑氨丁三醇鹽、甘氨雙唑酸葡甲胺鹽、甘氨雙唑酸精氨酸鹽，置于玻璃表面皿中，放置在室溫、大氣壓下、相對(duì)濕度為50%的環(huán)境中，觀測(cè)三種鹽的吸濕狀況。分別在0hr、0.5hr、1.5hr觀測(cè)三種鹽的外觀、吸濕度。結(jié)果如下-表3:三種鹽的吸濕性能比較<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>注吸濕度=[(吸濕后的重量一原粉末重量)/原粉末重量]X100%由表3可以看出，甘氨雙唑氨丁三醇鹽的吸濕性遠(yuǎn)低于甘氨雙唑酸葡甲胺鹽和甘氨雙唑酸精氨酸鹽，表現(xiàn)出良好的吸濕穩(wěn)定性。進(jìn)一步的，通過(guò)下面的試驗(yàn)來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明甘氨雙唑氨丁三醇鹽及其凍干粉針劑制備、應(yīng)用方面的特性和優(yōu)點(diǎn)。1.相關(guān)質(zhì)量及穩(wěn)定性考察含量測(cè)定方法:用專屬性強(qiáng)的高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定。系統(tǒng)適用性條件用十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑，乙睛-0.05mol/L醋酸銨(15:85)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)316mn，理論塔板數(shù)按甘氨雙唑酸峰計(jì)應(yīng)不小于1200，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以甘氨雙唑酸峰面積計(jì)算，即得含量，換算即得。根據(jù)《中華人民共和國(guó)藥典》2005年版的有關(guān)格式和要求，對(duì)本發(fā)明甘氨雙唑氨丁三醇鹽的凍干粉針劑的性狀、鑒別、檢査和含量測(cè)定等進(jìn)行了研究，均符合要求。根據(jù)《中華人民共和國(guó)藥典》2005年版的有要求，對(duì)本發(fā)明甘氨雙唑氨丁三醇鹽的凍干粉針劑的穩(wěn)定性進(jìn)行了研究，考察了60°C、強(qiáng)光(4500Lx)照射、高濕朋75%、加速試驗(yàn)(模擬上市包裝在4(TC條件下放置)、室溫留樣考察等項(xiàng)目，測(cè)定了降解產(chǎn)物、含量等，本發(fā)明甘氨雙唑氨丁三醇鹽的凍干粉針劑在加速試驗(yàn)和室溫留樣試驗(yàn)中是穩(wěn)定的，性狀無(wú)變化，降解產(chǎn)物沒(méi)有明顯變化。2.安全性考察(1)血管刺激性試驗(yàn)取健康雄性家兔4只，體重22.3Kg，分成兩組，每只家兔右耳為給藥組，給予本發(fā)明甘氨雙唑氨丁三醇鹽的凍干粉針劑，左耳為生理鹽水對(duì)照組，每只家兔右耳靜脈注射等容量的生理鹽水。每日一次，連續(xù)三日，然后觀察動(dòng)物耳部血管刺激反應(yīng)癥狀，并取標(biāo)本進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。試驗(yàn)結(jié)果給藥組、生理鹽水對(duì)照組家兔耳部血管均無(wú)充血，結(jié)節(jié)、水腫及組織變性或壞死等反應(yīng)癥狀，病理學(xué)檢查也無(wú)異常改變，表明供試品無(wú)明顯血管刺激性，符合規(guī)定要求。(2)過(guò)敏試驗(yàn)取健康豚鼠12只，雌雄兼用，雌無(wú)孕，健康，體重220250g。按無(wú)菌操作，給藥組每只動(dòng)物均隔日腹腔注射供試品溶液0.5ml(1%甘氨雙唑氨丁三醇鹽的凍干粉針劑，以甘氨雙唑氨丁三醇鹽計(jì))，共3次，陽(yáng)性對(duì)照組每只動(dòng)物隔日腹腔注射1%卵白蛋白0.5ml共3次；其中給藥組的第一組于首次給藥后14日靜脈注射供試品2ml進(jìn)行攻擊，第二組于首次給藥后21日同法攻擊;陽(yáng)性對(duì)照組的第一組于首次給藥后14日靜脈注射1%白蛋白2ml進(jìn)行攻擊，第二組于首次給藥后21日同法攻擊，觀察攻擊后動(dòng)物的過(guò)敏反應(yīng)癥狀。試驗(yàn)結(jié)果:給藥給動(dòng)物在注射后均無(wú)豎毛、呼吸困難、痙攣、休克及死亡等過(guò)敏反應(yīng)癥狀，而陽(yáng)性對(duì)照組動(dòng)物在注射后均有不同程度的豎毛、抓鼻、痙攣等過(guò)敏癥狀，表明供試藥品無(wú)明顯過(guò)敏性，符合規(guī)定要求。(3)溶血試驗(yàn)取健康家兔l只，自心臟采血約5ml，置三角燒瓶中，除去纖維蛋白元，然后將血液移至刻度離心管內(nèi)，加入生理鹽水5ml，混勻后，離心5分鐘(2000rpm)除去上清液，再加生理鹽水混勻離心，反復(fù)洗35次至上清液呈無(wú)色透明為止。將所得紅胞用生理鹽水稀釋成2%(紅細(xì)胞1.6ml加生理鹽水80ml)混懸液備用。取7只試管，編號(hào)排列于試管架，按表4加入各種試液(1%甘氨雙唑氨丁三醇鹽的凍干粉針劑，以甘氨雙唑氨丁三醇鹽計(jì))，第6管不加供試品溶液作為空白對(duì)照，第7管仍不加供試品溶液，并用蒸餾水代替生理鹽水，作為溶血的陽(yáng)性對(duì)照組。將各管輕輕搖勻，在3637C恒溫水浴保溫，觀察0.5、1、2、3小時(shí)各管有無(wú)沉淀和細(xì)胞凝集溶血現(xiàn)象，結(jié)果如下表4所示表4<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>注(-)不溶血；(i)難以判斷；(+)部分溶血；(++)全部溶血由表可見(jiàn)，體外溶血試驗(yàn)均未見(jiàn)溶血及血球凝集現(xiàn)象，與生理鹽水組比較無(wú)明顯差別，常規(guī)方法作紅細(xì)胞鏡檢，未見(jiàn)紅細(xì)胞破裂及形態(tài)異常。蒸餾水組則完全溶血，產(chǎn)生紅色透明溶液。結(jié)果表明本發(fā)明的藥品無(wú)沉淀、細(xì)胞凝集和溶血現(xiàn)象。3.細(xì)菌內(nèi)毒素的測(cè)定采用兩個(gè)廠家鱟試劑，對(duì)本發(fā)明的藥品連續(xù)三個(gè)批號(hào)進(jìn)行了干擾試驗(yàn)，結(jié)果表明對(duì)鱟試劑試驗(yàn)無(wú)干擾作用，可進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素檢査。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，確定本發(fā)明藥品檢査方法如下取本品，依法檢查(《中國(guó)藥典》2005年版附錄)每lml中含內(nèi)毒素量應(yīng)小于250EU，符合規(guī)定。更進(jìn)一步的，以下面的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō)明本發(fā)明甘氨雙唑氨丁三醇鹽的在腫瘤治療中的增敏效應(yīng)。(一)受試藥物甘氨雙唑氨丁三醇鹽(以下稱CMT),陽(yáng)性對(duì)照藥甘氨雙唑鈉(以下稱C麗a)。根據(jù)DrudAndStatisticsVerl.0軟件動(dòng)物等效量程序換算，得到甘氮雙唑鈉(CMNa)注射液小鼠治療劑量為200mg/Kg，等價(jià)的CMT注射液小鼠治療劑量為238mg/Kg。(注CMT與C麗a的效價(jià)換算關(guān)系1克CMT相當(dāng)于0.84克CMNa)(二)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物1、近交系小鼠，體重20±2克，四周齡，雌性，二級(jí)清潔動(dòng)物，由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心繁育場(chǎng)提供，合格證SCXK(京)2005-0013。2、飼養(yǎng)條件動(dòng)物飼養(yǎng)于清潔級(jí)動(dòng)物室中，由獲得資格認(rèn)可的人員詞養(yǎng)。動(dòng)物室掛置溫濕度計(jì)，每天早8:0010:00測(cè)定記錄1次，室溫控制在22.6±0.4°C，濕度75.8±6.2%，12小時(shí)照明，12小時(shí)黑暗。標(biāo)準(zhǔn)詞養(yǎng)盒內(nèi)喂養(yǎng)，每盒5只，盒內(nèi)保持清潔，試驗(yàn)時(shí)按動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室使用規(guī)定操作。3、飼料清潔級(jí)鼠料，軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，生產(chǎn)許可證號(hào)京動(dòng)(2000)第015號(hào)。4、飲水由飲用水瓶供應(yīng)電滲析超濾凈化水，每日沖洗飲水瓶、換水一次。(三)實(shí)驗(yàn)主要步驟1、瘤株及實(shí)體腫瘤移植方法Lewis肺癌由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤研究所中心實(shí)驗(yàn)室常規(guī)保存。腫瘤細(xì)胞從液氮內(nèi)取出，37"C迅速解凍復(fù)蘇后，接種于小鼠的右側(cè)腋窩皮下，當(dāng)移植腫瘤生長(zhǎng)達(dá)1.5cm直徑左右，處死小鼠，在無(wú)菌條件下，剝離腫瘤按常規(guī)方法傳代。2、腫瘤接種造模與分組處死荷瘤小鼠在無(wú)菌條件下剝離腫瘤，生理鹽水清洗數(shù)次，剔除壞死的組織，選擇生長(zhǎng)良好的腫瘤組織，用手術(shù)刀片將腫瘤組織切割成34mm3大小的組織塊，玻璃勻漿器研磨制備細(xì)胞懸液，接種腫瘤細(xì)胞于小鼠右后肢肌肉。隨機(jī)分為4組，每組10只，g卩生理鹽水組、放射10Gy組、CMNa+放射10Gy組、CMT+放射10Gy組。3、治療方案當(dāng)腫瘤直徑生長(zhǎng)7.58mm左右時(shí)在清醒狀態(tài)下對(duì)荷瘤小鼠進(jìn)行腫瘤局部放射治療。單周兩次放射治療，兩次放射間隔期為3天，放射前1小時(shí)分別腹腔注射CMNa和CMT。正常組織完全鉛屏蔽，腫瘤表面覆蓋1.5cm厚蠟板。8MevX線，SSD=100，劑量率250cGy/min。隔天測(cè)量腫瘤大小，接種腫瘤后28天處死動(dòng)物，DAS.verl.0藥學(xué)軟件做統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。4、藥物判定標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局頒布的《〈抗腫瘤藥物藥效學(xué)指導(dǎo)原則〉征求意見(jiàn)稿》和《細(xì)胞毒類抗腫瘤藥物非臨床研究指導(dǎo)原則》。給藥組平均瘤體積(1)腫瘤抑制率^(1-------------------------)X10096，生理鹽水組平均瘤體積(2)用游標(biāo)卡尺定期測(cè)定各組腫瘤直徑，腫瘤體積計(jì)算公式V二(AXB2)/2，A為長(zhǎng)徑，B為短徑。5、觀察時(shí)間28天。(四)實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下表。表5:CMT合并分次放射(10GyX2)治療小鼠肺癌(Lewis)的放射增敏效應(yīng)(『10)<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>*(p生理〈0.001),氺氺(;p放射〈o.oi;)實(shí)驗(yàn)結(jié)論1.與生理鹽水組比較單純分次放射10GyX2組:腫瘤抑制率為35.4%(P生理〈0.001);2.與生理鹽水組比較分次放射C麗a+10GyX2組腫瘤抑制率為47.4%(P生理〈0.001);3.與生理鹽水組比較分次放射CMT+10GyX2組腫瘤抑制率為49.2%(P生理〈0.001);4.分次放射C麗a+10GyX2與放射組比較P放射<0.01;5.分次放射CMT+10GyX2與放射組比較P放射〈0.01。由以上可以看出，本發(fā)明甘氨雙唑氨丁三醇鹽對(duì)小鼠肺癌(Lewis)的放射治療具有顯著的增敏效果。具體實(shí)施方式在本發(fā)明的實(shí)施過(guò)程中，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在不脫離本發(fā)明的范圍和精神實(shí)質(zhì)的基礎(chǔ)上產(chǎn)生的各種實(shí)施方案和修飾是顯而易見(jiàn)的并且是容易迸行的。通過(guò)下面的實(shí)施例來(lái)對(duì)本發(fā)明甘氨雙唑氨丁三醇鹽化合物及其制備方法和藥物應(yīng)用做進(jìn)一步具體說(shuō)明，但并不表示實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的限制。實(shí)施例1.甘氨雙唑氨丁三醇鹽化合物及其制備首先，進(jìn)行甘氨雙唑酸的合成:將30g氨三乙酸(O.157mol)及100ml二甲基甲酰胺加入到反應(yīng)瓶中，于4548-C攪拌下緩慢滴加44ml的醋酐滴畢反應(yīng)56h，然后將53g甲硝唑(0.31mol)加入反應(yīng)瓶中保溫反應(yīng)3h，薄層檢驗(yàn)反應(yīng)終止后，將二甲基甲酰胺減壓蒸出得甘氨雙唑酸粗品，將粗品用95%乙醇溶解并加活性炭脫色，過(guò)濾，濾液重結(jié)晶操作，得淺黃色晶體物，6(TC減壓烘干，即得甘氨雙唑酸。其氫譜圖特征如下鍵R(DMSO-de)S:2.44(s,6H)，3.38(s，2H)，3.47(s，4H)，4.37(t,4H)，4.56(t，4H),7.99(s，2H)，12.29(brs，1H)。甘氨雙唑氨丁三醇鹽的制備向lOmL甲醇中加入lg氨丁三醇，加熱至回流，待氨丁三醇完全溶解后，加入4g甘氨雙唑酸，在6(TC下攪拌lh左右。將反應(yīng)液減壓濃縮得到膠狀殘留物，向該殘留物中加入8mL甲醇，攪拌使其溶解，緩慢加入約50毫升乙酸乙酯，在這個(gè)過(guò)程中有微黃色固體析出，攪拌30min，抽濾，在減壓下干燥，得微黃色粉末狀的固體(mp859(TC分解)。W麗R(DMS0-d6)S:2.44(s，6H)，3.39(s，8H)，3.49(s，4H)，4.37(t，J二4.8Hz，4H)，4.56(t，J=4.8Hz，4H)，5.98(brs，6H)，7.99(s，2H)。13CNMR(DMS0—d6)S:14.04，14.23，44.94，54.22,56.55，60.19，60.46，62.25，133.15，138.62，151.85，170.59，174.23。(注:由于甘氨雙唑酸與氨丁三醇均為對(duì)稱結(jié)構(gòu)，因此有9個(gè)碳元素的峰形重疊。)實(shí)施例2.取甘氨雙唑酸lg(2mmol)和氨丁三醇0.24g(2mmol)加入77ml無(wú)水乙醇，于3550'C加熱攪拌使其完全溶解呈淡黃色澄明溶液，繼續(xù)攪拌1030min，緩慢攪拌下減壓蒸除部分無(wú)水乙醇，當(dāng)溶液出現(xiàn)混濁時(shí)將其置于冰箱中過(guò)夜產(chǎn)生沉淀，將析出物用丙酮洗滌后，真空干燥，得到淺黃色的固體，即得甘氨雙唑氨丁三醇鹽。元素分析結(jié)果%理論值C:42.72H:5.54N:18.12%實(shí)測(cè)值C:42.57H:5.69N:18.07。氫譜與碳譜與實(shí)施例1一致。實(shí)施例3.甘氨雙唑氨丁三醇鹽化合物及其制備將甘氨雙唑酸4.lg(8.26mmo1)、氨丁三醇lg(約8.26咖o1)加入蒸餾水10ml，在58'C下攪拌反應(yīng)15min使反應(yīng)液澄清，在澄明溶液中加入丙酮直至出現(xiàn)混濁液，靜置混濁液使其充分沉淀，去除上清液，即得到析出物，將析出物用丙酮洗滌后，45。C真空干燥得到淺黃色的固體，即得甘氨雙唑氨丁三醇鹽。元素分析結(jié)果%理論值C:42.72H:5.54N:18.12%實(shí)測(cè)值C:42.68H:5.77N:18.15。氫譜與碳譜與實(shí)施例1一致。實(shí)施例4.甘氮雙唑氨丁三醇鹽化合物及其制備將甘氨雙唑酸4.lg(8.26mmo1)、氨丁三醇lg(約8.26咖o1)加入蒸餾水15ml，在l5t:下攪拌反應(yīng)15min使反應(yīng)液澄清，過(guò)濾，濾液冷凍干燥得淺黃色或類白色固體即得甘氨雙唑氨丁三醇鹽。元素分析結(jié)果%理論值C:42.72H:5.54N:18.12%實(shí)測(cè)值C:42.52H:5.71N:18.10。氫譜與碳譜與實(shí)施例1一致。實(shí)施例5.甘氨雙唑氨丁三醇鹽化合物及其制備將甘氨雙唑酸4.lg(8.26mmo1)、氨丁三醇lg(約8.26mmo1)加入二甲基甲酰胺75ml，加熱使其完全溶解呈澄明溶液，將澄明溶液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，減壓蒸除去溶劑，使其產(chǎn)生沉淀，得到析出物，將析出物用乙醚洗滌后，干燥，得到淺黃色的固體，即得甘氨雙唑氨丁三醇鹽。元素分析結(jié)果%理論值C:42.72H:5.54N:18.12%實(shí)測(cè)值C:42.60H:5.66N:18.24。氫譜與碳譜與實(shí)施例1一致。實(shí)施例6.甘氨雙唑氨丁三醇鹽凍干粉針劑及其制備方法甘氨雙唑氨丁三醇鹽300g甘露醇100g磷酸二氫鈉適量注射用水加至1700ml取處方量的甘氨雙唑氨丁三醇鹽、甘露醇加1500ml注射用水溶解，加1M磷酸二氫鈉水溶液調(diào)節(jié)pH為8.59，加注射用水至1700ml,以微孔濾膜過(guò)濾除菌，在百級(jí)條件下進(jìn)行無(wú)菌灌裝至1000支西林瓶中，檢査裝量后加入膠塞，留孔，將玻瓶送入已消毒的凍干箱內(nèi)進(jìn)行凍干燥預(yù)凍5小時(shí)，溫度下降至-35。C，第一次升華8小時(shí)，溫度上升至-5'C;第二次升華7小時(shí)，溫度上升至25'C，真空壓蓋或充氮?dú)鈮荷w后取出，壓鋁蓋貼簽即得成品，每瓶?jī)龈煞坩樅拾彪p唑氨丁三醇鹽300mg。實(shí)施例7.甘氨雙唑氨丁三醇鹽凍干粉針劑及其制備方法<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>制備方法取處方量的賦性劑(處方一:氯化鈉、葡萄糖；處方二:泊洛沙姆、甘露醇;處方三泊洛沙姆、木糖醇)加處方量的80%的注射用水使完全溶解，再加入處方量的甘氨雙唑氨丁三醇鹽和金屬離子絡(luò)合劑或抗氧劑，完全溶解，用O.1M鹽酸調(diào)節(jié)pH為89，加注射用水至處方量，用0.3。/。(w/v)針用活性炭攪拌20分鐘，用經(jīng)滅菌的0.6um濾膜脫炭，以0.22um濾膜過(guò)濾除菌后，測(cè)調(diào)pH為89，濾液灌裝于1000支管制西林瓶中，送入冷凍干燥機(jī)凍干，加蓋或充氮?dú)夂蠹由w取出，貼標(biāo)簽即得，其中凍干的工藝方法如下<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>上述制得的的凍干粉針，每瓶含甘氨雙唑氨丁三醇鹽為700mg或350mg。實(shí)施例8.甘氨雙唑氨丁三醇鹽注射液取1瓶實(shí)施例5制備的甘氨雙唑氨丁三醇鹽凍干粉針，加入2ml注射用水溶解，得淺黃色澄明溶液，即得甘氨雙唑氨丁三醇鹽注射液。實(shí)施例9.甘氨雙唑氨丁三醇鹽氯化鈉注射液取1瓶實(shí)施例7的處方一制備的甘氨雙唑氨丁三醇鹽凍干粉針，另市購(gòu)100ml氯化鈉注射液(0.9%)1瓶，將甘氨雙唑氨丁三醇鹽凍干粉針以5ml氯化鈉注射液溶解后注入l瓶100ml氯化鈉注射液中，搖勻，即得甘氨雙唑氨丁三醇鹽氯化鈉注射液，100ml含甘氨雙唑氨丁三醇鹽700mg、氯化鈉0.9g，供靜脈注射用。實(shí)施例10.甘氨雙唑氨丁三醇鹽葡萄糖注射液取1瓶實(shí)施例7的處方二制備的甘氨雙唑氨丁三醇鹽凍干粉針，另市購(gòu)250ml葡萄糖注射液(5y。)l瓶，將甘氨雙唑氨丁三醇鹽凍干粉針以3ml葡萄糖注射液溶解后注入l瓶250ml葡萄糖注射液中，搖勻，即得甘氨雙唑氨丁三醇鹽葡萄糖注射液，250ml含甘氨雙唑氨丁三醇鹽350mg、葡萄糖12.5g，供靜脈注射用。實(shí)施例11.甘氨雙唑氨丁三醇鹽轉(zhuǎn)化糖注射液取1瓶實(shí)施例7的處方三制備的甘氨雙唑氨丁三醇鹽凍干粉針，另市購(gòu)100ml轉(zhuǎn)化糖注射液(590l瓶，將甘氨雙唑氨丁三醇鹽凍干粉針以3ml轉(zhuǎn)化糖注射液溶解后注入l瓶100ml轉(zhuǎn)化糖注射液中，搖勻，即得甘氨雙唑氨丁三醇鹽轉(zhuǎn)化糖注射液，100ml含甘氨雙唑氨丁三醇鹽350mg、轉(zhuǎn)化糖5g，供靜脈注射用。實(shí)施例12.實(shí)施例1、2、3、4、5制備的甘氨雙唑氨丁三醇鹽及其實(shí)施例6、7、8、9、10、11制備的甘氨雙唑氨丁三醇鹽制劑組合物在制備腫瘤放化療治療中作為增敏劑的藥物中的應(yīng)用。與化療藥物或放射治療時(shí)同時(shí)使用，提高化療藥物或放射治療的治療效果。權(quán)利要求1.一種甘氨雙唑氨丁三醇鹽化合物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下2.—種制備權(quán)利要求1所述的甘氨雙唑氨丁三醇鹽的制備方法,它包括將甘氨雙唑酸與氨丁三醇在合適的溶劑中充分混合，使甘氨雙唑酸與氨丁三醇在液體環(huán)境中接觸反應(yīng)形成鹽，再將溶劑除去并干燥得到固體形態(tài)的反應(yīng)物，即得到甘氨雙唑氨丁三醇鹽，其中所述溶劑選自水、乙醇、甲醇、丙酮、異丙醇、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺中的一種或幾種溶劑的混合物，并且甘氨雙唑酸和氨丁三醇的投料反應(yīng)量以摩爾比為1:1或1:(0.951.05)的量投料反應(yīng)。3.—種制備權(quán)利要求1所述的甘氨雙唑氨丁三醇鹽的制備方法,它包括(1)配制將甘氨雙唑酸和氨丁三醇在適量的溶劑中于055'C完全溶解，使混合液呈淡黃色的澄明溶液，并攪拌；其中甘氨雙唑酸與氨丁三醇摩爾比為1:(0.951.05)，所述溶劑選自水、乙醇、甲醇、丙酮、異丙醇、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺中的一種或幾種溶劑的混合物。(2)析出固化方法一:將澄明溶液減壓蒸餾除去部分溶劑，當(dāng)溶液產(chǎn)生混濁時(shí)停止減壓蒸餾，置于5°C以下的環(huán)境中使其產(chǎn)生沉淀，優(yōu)選置于0°C以下的環(huán)境中使其產(chǎn)生沉淀，得到析出物，將析出物用丙酮、乙腈、甲苯、乙醇或甲醇洗滌后,干燥，得到淺黃色的固體，即得甘氨雙唑氨丁三醇鹽；在上述制備中，其中干燥方法選自加熱干燥、減壓干燥、真空干燥、冷凍干燥中的一種或幾種。方法二:將澄明溶液減壓蒸餾除去溶劑,使其產(chǎn)生沉淀,得到析出物，將析出物用丙酮、乙腈、甲苯、乙醇、乙醚或甲醇洗滌后，干燥，得到淺黃色的固體，即得甘氨雙唑氨丁三醇鹽；在上述制備中，其中干燥方法選自加熱干燥、減壓干燥、真空干燥、冷凍干燥中的一種或幾種。方法三:在混合澄明溶液中加入乙酸乙酯、丙酮、乙醇或乙醚直至出現(xiàn)混濁液，靜置混濁液使其充分沉淀，去除上清液，即得到析出物，將析出物用丙酮、乙醇或乙醚洗漆后，采用干燥或冷凍干燥的方法得到淺黃色的固體,即得甘氨雙唑氨丁三醇鹽；方法四將混合澄明溶液直接采用冷凍干燥的方法得到淺黃色的固體，即得甘氨雙唑氨丁三醇鹽。上述制備方法的配制步驟(1)中，可以將甘氨雙唑酸、氨丁三醇先分別與溶劑混合后再進(jìn)行反應(yīng)，也可將甘氨雙唑酸、氨丁三醇直接加入溶劑中進(jìn)行反應(yīng)，均可得到甘氨雙唑氨丁三醇鹽。4.權(quán)利要求1所述的甘氨雙唑氨丁三醇鹽在制備腫瘤放化療治療中作為增敏劑的藥物中的應(yīng)用。5.—種藥物組合物，含有權(quán)利要求1所述的甘氨雙唑氨丁三醇鹽的和一種或多種藥學(xué)上可接受的載體，并且甘氨雙唑氨丁三醇鹽的含量為101000mg。6.—種制備權(quán)利要求5所述的藥物組合物的制備方法，它包括將甘氨雙唑氨丁三醇鹽與藥學(xué)上可接受的藥用載體充分混合制成藥劑學(xué)上可接受的任何藥物劑型，優(yōu)選的藥物劑型是注射劑。7.—種凍干粉針劑，其特征在于含有甘氨雙唑氨丁三醇鹽、PH值調(diào)節(jié)劑和其它藥用載體，其中可藥用載體選自甘露醇、乳糖、葡萄糖、泊洛沙姆、氯化鈉、環(huán)糊精、果糖、木糖醇、山梨醇、右旋糖酐、蔗糖、羥丙基纖維素鈉、水解明膠中的一種或幾種，并且藥用載體的含量為190%，優(yōu)選藥用載體的含量為280%，優(yōu)選藥用載體的含量為570%。8.權(quán)利要求7所述的甘氨雙唑氨丁三醇鹽凍干粉針劑,其凍干前的水溶液的pH為612.5，優(yōu)選凍干前的水溶液的pH為6.512，優(yōu)選凍干前的水溶液的pH為7.711。9.一種制備權(quán)利要求7所述的甘氨雙唑氨丁三醇凍干粉針劑的方法，該制備方法包括:稱取處方量的甘氨雙唑氨丁三醇加注射用水溶解，制成甘氨雙唑氨丁三醇溶液，加入適量的藥用載體，調(diào)節(jié)pH值6.512.5，優(yōu)選調(diào)節(jié)pH值為7.712，無(wú)菌灌裝，進(jìn)行冷凍干燥，真空壓蓋或充氮?dú)鈮荷w后取出，壓鋁蓋貼簽即得凍干粉針劑，其中冷凍千燥的工藝包括:藥液置于凍干箱，預(yù)凍16小時(shí)，使溫度下降至-30-55t:;第一次升華812小時(shí)，溫度上升至-5'C;第二次升華68小時(shí)，溫度上升至2530°C。10.—種制備權(quán)利要求7所述的甘氨雙唑氨丁三醇凍干粉針劑的方法,該制備方法包括:稱取處方量的甘氨雙唑氨丁三醇鹽加注射用水溶解，制成甘氨雙唑氨丁三醇鹽溶液,加入適量的藥用載體，調(diào)節(jié)pH值為6.512.5，優(yōu)選調(diào)節(jié)pH值為7.711，加入0.10.5。/。(w/v)針用活性炭，2060。C下攪拌2080分鐘，用經(jīng)滅菌的0.6um濾膜脫炭，調(diào)節(jié)濾液pH值為6.512.5，以0.22um濾膜過(guò)濾除菌，灌裝于玻璃管制瓶中，送入冷凍干燥機(jī)凍干，加蓋或充氮?dú)饧由w后取出，貼標(biāo)簽即得，其中凍干工藝曲線如下<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>全文摘要本發(fā)明提供甘氨雙唑氨丁三醇鹽化合物，選取對(duì)人體安全無(wú)毒的堿性配位物質(zhì)氨丁三醇與甘氨雙唑酸形成的衍生物鹽化合物不僅水溶性良好，而且提高了藥物穩(wěn)定性，不改變甘氨雙唑酸的藥理作用，有利于藥物的應(yīng)用和制劑的制備。本發(fā)明還提供了甘氨雙唑氨丁三醇鹽化合物的制備方法，以及甘氨雙唑氨丁三醇鹽在藥物中的應(yīng)用，包括藥物組合物，尤其是凍干粉針劑、藥物組合物制備、用途等。文檔編號(hào)C07C215/00GK101514189SQ20091000892公開(kāi)日2009年8月26日申請(qǐng)日期2009年2月13日優(yōu)先權(quán)日2008年2月18日發(fā)明者楊喜鴻申請(qǐng)人:楊喜鴻