羥基酪醇在制備抗血管性癡呆的藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及徑基酪醇的應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域，是一種徑基酪醇在制備抗血管性癡呆藥物 中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 血管性癡呆（VascularDementia,VD)是各種血管疾病引起的腦功能障礙而產(chǎn)生 的獲得性智能損害綜合癥，W記憶、認(rèn)知功能缺損為主，可伴有語(yǔ)言、視空間技能及人格障 礙。血管性癡呆是一種嚴(yán)重困擾老年人生活質(zhì)量提高的常見病，其發(fā)病隨年齡增長(zhǎng)而增加。 VD發(fā)病率較高，被認(rèn)為是導(dǎo)致癡呆的第二位原因。約25%的腦血管患者伴有不同程度的 智能障礙。相對(duì)于其他類型的癡呆，血管性癡呆預(yù)后較好，治療前景廣闊，且在一定程度上 可W預(yù)防，隨著世界各國(guó)人口老齡化速度加快，其患者將大量增加，流行病學(xué)研究表明，VD 的發(fā)病率隨年齡而直線上升，我國(guó)VD的患病率約為1. 1 %至3. 0%，因此，VD已成為全球性 的重點(diǎn)公共衛(wèi)生問題，已經(jīng)成為一個(gè)嚴(yán)重的社會(huì)和家庭問題，愈來(lái)愈引起人們的重視。
[0003] 徑基酪醇（Hy化oxytyrosol，HT)是橄攬中的有效成分，在地中海飲食中占有重要 地位。具有很強(qiáng)的抗氧化活性，主要醫(yī)醋類形式存在于橄攬的果實(shí)和枝葉中。HT具有抗癌、 抗血栓、調(diào)血脂和抗動(dòng)脈硬化、抗病原微生物、防止視網(wǎng)膜黃斑變性、保護(hù)軟骨和抗骨質(zhì)疏 松等多方面的生物活性。但未見有徑基酪醇抗血管性癡呆的相關(guān)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明提供了 一種徑基酪醇在制備抗血管性癡呆藥物中的應(yīng)用，克服了上述現(xiàn)有 技術(shù)之不足，其能有效解決徑基酪醇在制備抗血管性癡呆藥物中的應(yīng)用還沒有相關(guān)報(bào)道的 問題。
[0005] 本發(fā)明所述的一種徑基酪醇在制備抗血管性癡呆得藥物中的應(yīng)用。
[0006] 徑基酪醇W干品重量計(jì)的質(zhì)量百分含量為50% -99. 9%。
[0007] 徑基酪醇的劑型為片劑、丸劑、顆粒劑、膠囊、懸浮液、溶液、糖漿、注射劑、注射用 無(wú)菌粉末或軟膏。
[0008] 本發(fā)明所述的徑基酪醇在制備抗血管性癡呆的藥物中的應(yīng)用，其有益效果為：徑 基酪醇能夠減輕神經(jīng)功能缺陷，減少腦梗死范圍和減輕腦水腫程度，有效抑制血管性癡呆 大鼠神經(jīng)組織形態(tài)學(xué)改變，提高血管性癡呆大鼠的認(rèn)知、學(xué)習(xí)和記憶能力，減輕癡呆癥狀。
[0009] 本發(fā)明所述的徑基酪醇在制備抗血管性癡呆的藥物中的應(yīng)用，其中徑基酪醇為 合成或從植物中制備得到，合成或制備方法均為已有技術(shù)。
【具體實(shí)施方式】
[0010] 本發(fā)明不受所給出的實(shí)施例的限制，可根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案與實(shí)際情況來(lái)確定 具體的實(shí)施方式。
[0011] 實(shí)施例1徑基酪醇對(duì)氨漠酸東賞窘堿致小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的療效研究：
[001引 1實(shí)驗(yàn)材料；
[0013] 1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及飼料：
[0014] 昆明種小白鼠（23±3g) 108只，S，由新疆實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中屯、提供，動(dòng)物許可證 號(hào)：SCXK(新）2003 - 0002。北京科澳協(xié)力飼料有限公司，許可證號(hào)：SCXK(京）2009-0012， 批號(hào)：11055111-1。
[0015] 1.2主要試劑及儀器略 [001引 2方法：
[0017] 2. 1給藥劑量：
[0018] 徑基酪醇劑量的設(shè)定參考相關(guān)文獻(xiàn)并且進(jìn)行預(yù)試，劑量最終確定為10、50、100mg/ kg。
[001引 2. 2試驗(yàn)方法：
[0020]自新疆動(dòng)物中屯、購(gòu)入小白鼠后，飼養(yǎng)于新疆維吾爾自治區(qū)維吾爾醫(yī)藥研究所普通 動(dòng)物房，提供合格飼料和飲用水。動(dòng)物適應(yīng)性飼養(yǎng)7d后，經(jīng)小鼠跳臺(tái)測(cè)試去掉不符合條件 的小鼠，其中包括先天愚笨的和特別聰明的。
[002。 篩選方法：跳臺(tái)設(shè)定參數(shù)為：36V，2Ma。將小鼠置于跳臺(tái)儀的隔間內(nèi)，適應(yīng)5min，然 后測(cè)定5min，2次/只，兩次間間隔地。第1次將5min內(nèi)未能跳上跳臺(tái)或在隔間內(nèi)躁動(dòng)不 安或哨咬電柵的小鼠淘汰；第2次將錯(cuò)誤次數(shù)> 6的小鼠淘汰。
[0022] 經(jīng)過(guò)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)篩選合格的72只小鼠，采用陽(yáng)MS3. 1醫(yī)用統(tǒng)計(jì)軟件，W體重為指 標(biāo)，隨機(jī)分為6組，每組各12只。給藥組ig給予低、中、高的徑基酪醇和石杉?jí)A甲片，空白 對(duì)照組、模型組給予等量的生理鹽水，具體給藥劑量、配制濃度、灌胃容積、給藥時(shí)間見表1， 徑基酪醇灌胃前溶于0. 9 %生理鹽水中，現(xiàn)用現(xiàn)配。
[0023] 表1給藥濃度及配制方法
[0024]
[00巧]末次給藥后化，除空白對(duì)照組外，其余各組小鼠均分別腹腔注射東賞窘堿3mg/kg，腹腔注射體積為0.ImL/lOg，空白對(duì)照組腹腔注射等容量生理鹽水。15min后進(jìn)行小鼠 跳臺(tái)測(cè)試。
[0026] 跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，將小鼠斷頭處死，迅速在冰上取出腦組織，去掉腦干和小腦，審U 成10%腦組織勻漿，W3500r/min離屯、lOmin，吸取上清液按照試劑盒說(shuō)明書測(cè)定腦組織中 蛋白濃度，MDA含量，AChE、SOD和GSH-PX活力。
[0027] 3試驗(yàn)結(jié)果：
[002引 3. 1小鼠跳臺(tái)測(cè)試結(jié)果：
[0029] 學(xué)習(xí)記憶能力測(cè)試：末次給藥化后開始訓(xùn)練，讓小鼠在箱內(nèi)適應(yīng)3min后通W36V 的交流電。當(dāng)小鼠為了躲避電擊刺激時(shí)而跳上絕緣平臺(tái)時(shí)，開始計(jì)時(shí)，記錄從計(jì)時(shí)開始至小 鼠跳下平臺(tái)遭受電擊的時(shí)間，作為小鼠潛伏期（Stepdownlatency,SDL)，S化大于300s， 則按300s記錄，同時(shí)記錄5min內(nèi)小鼠跳下平臺(tái)遭受電擊的次數(shù)（即錯(cuò)誤次數(shù)），W此作為 學(xué)習(xí)成績(jī)。24h后重復(fù)進(jìn)行，測(cè)其記憶保持能力，見表2 :
[0030] 表2徑基酪醇對(duì)小鼠跳臺(tái)成績(jī)的影響（；-上S，n=:12)
[0031]
[0032]注：與空白對(duì)照組相比，*P< 0. 05,叮< 0. 01;與模型組相比，#P< 0. 05, < 0. 01。
[0033] 結(jié)果，模型組小鼠逃避潛伏期明顯低于空白對(duì)照組（P< 0.01)，觸電次數(shù)明顯 高于空白對(duì)照組（P< 0.01);給藥組石杉?jí)A甲片陽(yáng)性對(duì)照組可延長(zhǎng)小鼠逃避潛伏期（P <0.05)。徑基酪醇低、中、高劑量組均可顯著延長(zhǎng)小鼠逃避潛伏期（P< 0.01);此外徑 基酪醇低、中、高劑量組均能使小鼠由于學(xué)習(xí)記憶能力下降引起的跳臺(tái)錯(cuò)誤次數(shù)降低（P <0. 01)。由此提示東賞窘堿破壞了小鼠被動(dòng)回避學(xué)習(xí)記憶能力，而徑基酪醇可W改善東賞 窘堿對(duì)小鼠被動(dòng)回避學(xué)習(xí)記憶能力的損傷。
[0034] 3. 2徑基酪醇對(duì)小鼠腦組織中丙二醒（MAD)含量的影響：
[0035] 取10%腦組織勻漿液100y1，按MDA測(cè)定試劑盒說(shuō)明書的具體操作步驟和計(jì)算公 式要求進(jìn)行，用紫外分光光度計(jì)在532nm處比色，測(cè)定腦組織中MDA含量。組織中MDA含量 (nmol/mgprot)=(測(cè)定管吸光度-測(cè)定空白管吸光度）/(標(biāo)準(zhǔn)管吸光度-標(biāo)準(zhǔn)空白管吸 光度）X標(biāo)準(zhǔn)品濃度（10皿1〇/1111) 待測(cè)樣本蛋白濃度（111甜1'〇1:/1]11)。用TOMS3. 1軟件進(jìn) 行t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。見表3:
[0036] 表3徑基酪醇對(duì)小鼠腦組織中MDA含量的影響(之/?=化9
[0037]
[0038]
[003引注：與空白對(duì)照組相比，**P< 0. 01 ;與模型組相比，#P< 0. 05,##P< 0. 01。
[0040] 結(jié)果，模型組MDA含量顯著高于空白對(duì)照組（P<0.01);徑基酪醇低劑量組和中 劑量組與模型組比較均顯著降低（P< 0. 05)。而徑基酪醇高劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組與空白對(duì) 照組相比較均顯著性升高（P< 0. 01)，陽(yáng)性對(duì)照組與模型組相比較顯著性升高。
[0041] 3. 4徑基酪醇對(duì)小鼠腦組織中乙酷膽堿醋酶（A化巧活性的影響：
[0042] 取10%腦組織勻漿液30y1，按A化E測(cè)定試劑盒說(shuō)明書的具體操作步驟和計(jì)算 公式要求進(jìn)行，用酶標(biāo)儀在412皿處讀數(shù)，測(cè)定腦組織中A化E含量。組織中A化E活力扣/ m甜rot)=(測(cè)定管吸光度-對(duì)照管吸光度）/(標(biāo)準(zhǔn)管吸光度-空白管吸光度）X標(biāo)準(zhǔn)管 濃度（1ymol/ml) ^待測(cè)樣本蛋白濃度（m甜rot/ml)。用陽(yáng)MS3. 1軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué) 處理。見表4:
[0043] 表4徑基酪醇對(duì)小鼠腦組織中A化E活性的影響（立立馬。二於）
[0044]
[004引注：與空白對(duì)照組相比，*P< 0. 05,叩< 0. 01 ;與模型組相比，< 0. 01。
[0046] 結(jié)果，模型組A化E活性顯著性高于空白對(duì)照組任<0.01)。徑基酪醇低、中、高劑 量組與模型組相比較A化E活性均顯著性降低（P< 0. 01)，陽(yáng)性對(duì)照組與模型組相比較也顯 著性降低（P< 0.01)。徑基酪醇中、高劑量組與空白對(duì)照組相比較A化E活性均顯著性降 低（P< 0. 01)，而徑基酪醇低劑量組與空白對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P> 0. 05)，而陽(yáng)性對(duì)照 組與空白對(duì)照組相比較也顯著性降低（P< 0. 05)。
[0047] 3. 5徑基酪醇對(duì)小鼠腦組織中超氧化物歧化酶燈-SOD)活性的影響：
[0048]取0. 15 %腦組織勻漿液20y1，按T-S0D測(cè)定試劑盒說(shuō)明書的具體操作 步驟和計(jì)算公式要求進(jìn)行，用酶標(biāo)儀在450nm處讀數(shù)，測(cè)定