用包含紫杉烷的納米顆?；诩に厥荏w狀態(tài)治療乳腺癌的制作方法
【專利說明】
[0001] 本申請是分案申請，原申請的申請日為2007年12月14日、申請?zhí)枮?200780049623. 6 (PCT/US2007/025645)、發(fā)明名稱為"用包含紫杉烷的納米顆粒基于激素受 體狀態(tài)治療乳腺癌"。
[0002] 相關(guān)申請
[0003] 本申請要求2006年12月14日提交的臨時(shí)申請60/875, 004的優(yōu)先權(quán)權(quán)益，其內(nèi) 容通過在此引用全部并入。
技術(shù)領(lǐng)域
[0004] 本發(fā)明涉及基于孕酮受體和雌激素受體的激素受體狀態(tài)治療乳腺癌的方法和試 劑盒，其包括單獨(dú)、與至少一種其他治療劑和多種其它治療劑聯(lián)合以及與可用于治療乳腺 癌的其他治療形式聯(lián)合，給予紫杉烷（taxane)。特別地，本發(fā)明涉及單獨(dú)或與其它化療劑或 放療聯(lián)合，應(yīng)用包含紫杉醇（paclitaxel)和白蛋白的納米顆粒（如A_bra\anc K )，其可用于 治療不表達(dá)雌激素受體和/或孕酮受體的乳腺癌。
[0005] 背景
[0006] 大量的腫瘤不對(duì)藥物和/或放療應(yīng)答是癌癥治療中的一個(gè)嚴(yán)重問題。事實(shí)上，盡 管在化療領(lǐng)域中取得了一些進(jìn)展，但上述問題是許多最普遍形式的人類癌癥仍然抵抗有效 化療干預(yù)的主要原因之一。
[0007] 現(xiàn)在，主要應(yīng)用三種療法中的一種或組合來治療癌癥：手術(shù)、放療和化療。手術(shù)是 傳統(tǒng)方法，其中腫瘤被全部或部分地從機(jī)體去除。一般地，手術(shù)僅對(duì)治療較早期癌癥有效。 雖然手術(shù)在去除一些部位例如乳腺、結(jié)腸和皮膚處的腫瘤有時(shí)有效，但它不能用于治療位 于手術(shù)者達(dá)不到的其它部位的腫瘤，也不能用于治療播散性腫瘤情況如白血病。對(duì)于50% 以上的癌癥個(gè)體，他們在被診斷時(shí)已不再是有效手術(shù)治療的候選者。手術(shù)方法可能增加手 術(shù)期間腫瘤通過血液循環(huán)的轉(zhuǎn)移。大多數(shù)癌癥個(gè)體不是在診斷或手術(shù)時(shí)死于癌癥，而是死 于癌癥的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)。
[0008] 其它治療也常常是無效的。放射治療僅對(duì)癌癥早期和中期表現(xiàn)為臨床局部化疾 病的個(gè)體有效，對(duì)于伴有轉(zhuǎn)移的晚期癌癥無效。放療一般用于含有異常增殖性組織的對(duì)象 機(jī)體的限定區(qū)域，目的是使異常組織吸收的劑量最大化并使附近正常組織吸收的劑量最小 化。然而，將治療性放射選擇性給予異常組織是困難的（如果不是不可能的話）。因此，與 異常組織接近的正常組織在整個(gè)治療過程中也暴露于放射的潛在損害劑量。也存在一些治 療，它們在稱為"全身放射（total body irradiation)"或"TBI"的過程中需要將對(duì)象的全 部身體暴露于放射。從而，放療技術(shù)破壞異常增殖細(xì)胞的效應(yīng)由于對(duì)附近正常細(xì)胞的相關(guān) 細(xì)胞毒性作用而被抵消。因此，放療技術(shù)具有固有的窄的治療指數(shù)，這使得大多數(shù)腫瘤被不 充分治療。甚至最佳的放療技術(shù)也可能引起不完全的腫瘤縮小、腫瘤復(fù)發(fā)、增加腫瘤負(fù)荷和 誘導(dǎo)對(duì)放射具有抗性的腫瘤。
[0009] 化學(xué)治療包含細(xì)胞復(fù)制或細(xì)胞代謝的破壞?；熆梢允怯行У?，但具有嚴(yán)重的副 作用，例如，惡心、白細(xì)胞（WBC)減少、脫發(fā)、體重減輕和其它毒性作用。由于極端毒性的副 作用，許多癌癥個(gè)體不能成功地完成整個(gè)化療方案?；熣T導(dǎo)的副作用顯著影響個(gè)體的生 活質(zhì)量，并可能明顯影響個(gè)體對(duì)治療的依從性。此外，與化療劑有關(guān)的不利副作用一般是給 予這些藥物中的主要的劑量限制性毒性（dose-limiting toxicity) (DLT)。例如，粘膜炎 是幾種抗癌藥的主要?jiǎng)┝肯拗菩远拘灾?，所述抗癌藥包括抗代謝劑細(xì)胞毒性藥5-FU、甲 氨喋呤和抗腫瘤抗生素如多柔比星。這些化療誘導(dǎo)的副作用中的許多如果嚴(yán)重的話可能導(dǎo) 致住院治療，或者需要止痛劑治療疼痛。一些癌癥個(gè)體由于對(duì)化療的耐受不良而死于化療。 抗癌藥的極端副作用是由這些藥物的靶向特異性不良而引起的。藥物循環(huán)通過個(gè)體的大多 數(shù)正常器官以及目標(biāo)靶腫瘤。引起副作用的靶特異性不良也降低化療的效果，因?yàn)閮H有一 部分藥物被正確靶向?；煹男Ч捎诳拱┧幵诎心[瘤內(nèi)的保持性差而被進(jìn)一步降低。 [0010] 由于贅生物、腫瘤和癌癥的嚴(yán)重程度和廣度，對(duì)克服手術(shù)、化療和放療的各種缺點(diǎn) 的這種疾病或病癥的有效治療方法存在巨大需求。
[0011] 化療劑的問題
[0012] 抗藥性問題是聯(lián)合化療的重要性增加的一個(gè)原因，因?yàn)樗鲋委煴匦璞苊饪剐约?xì) 胞的產(chǎn)生，并殺死預(yù)先存在的已經(jīng)具有抗藥性的細(xì)胞。
[0013] 抗藥性是用于疾病不應(yīng)答于一種或多種治療藥物的情況的名稱?？顾幮钥梢?是固有的，這意味著疾病從未對(duì)一種藥物或多種藥物產(chǎn)生應(yīng)答，或者可以是獲得性的， 這意味著疾病停止對(duì)該疾病先前對(duì)其應(yīng)答的一種藥物或多種藥物產(chǎn)生應(yīng)答。多元抗藥 性（MDR)是特定類型的抗藥性，其特征是疾病對(duì)一種以上功能上和/或結(jié)構(gòu)上不相關(guān) 的藥物具有交叉抗性。癌癥領(lǐng)域中的多元抗藥性在"Detoxification Mechanisms and Tumor Cell Resistance to Anticancer Drugs"，Kuzmich 和 Tew 著，特別是第 VII 節(jié) "The Multidrug-Resistant Phenotype(MDR)，"Med. Research Rev. 11 (2) :185_217，（第 VII 節(jié)在 208-213 頁）（1991);和"Multidrug Resistance and Chemosensitization : Therapeutic Implications for Cancer Chemotherapy"，Georges，Sharom和Ling著，Adv. in Pharmacology，21 :185-220(1990)中有比較詳細(xì)的討論。
[0014] 多元抗藥性（MDR)的一種形式是由被稱作P-糖蛋白（P-gp)的膜結(jié)合170-180kD 能量依賴性流出泵介導(dǎo)的。已經(jīng)顯示，P-糖蛋白在許多人腫瘤對(duì)疏水性天然產(chǎn)物藥物的固 有和獲得性抗藥性中起關(guān)鍵作用。作為P-gp的底物并且因而被P-gp解毒的藥物包括長春 花堿（長春新堿和長春堿）、蒽環(huán)類抗生素（亞德里亞霉素）和表鬼白毒素（依托泊甙）。 雖然與P-gp有關(guān)的MDR是腫瘤細(xì)胞對(duì)化療劑耐藥的主要決定因素，但顯然，MDR現(xiàn)象是多 因素的并且涉及許多不同的機(jī)制。
[0015] 癌癥化療和抗病毒化療的一個(gè)主要并發(fā)癥是對(duì)骨髓細(xì)胞的損傷或?qū)ζ涔δ艿囊?制。具體地，化療損傷或破壞主要見于骨髓和脾的造血前體細(xì)胞，削弱了新的血細(xì)胞（粒細(xì) 胞、淋巴細(xì)胞、紅細(xì)胞、單核細(xì)胞、血小板等）的產(chǎn)生。例如，用5-氟尿嘧啶治療癌癥個(gè)體， 降低白細(xì)胞（淋巴細(xì)胞和/或粒細(xì)胞）數(shù)目，并且可以引起個(gè)體對(duì)感染的敏感性增強(qiáng)。許 多癌癥個(gè)體死于化療后感染或造血失敗的其它后果。化療劑也可以引起血小板形成低于正 常水平，產(chǎn)生出血傾向。對(duì)紅細(xì)胞產(chǎn)生的抑制可以引起貧血。對(duì)于一些癌癥個(gè)體，對(duì)造血系 統(tǒng)或其它重要組織的損傷風(fēng)險(xiǎn)常常限制了將化療劑的化療劑量增加至足夠高以提供良好 的抗腫瘤或抗病毒效應(yīng)的機(jī)會(huì)。重復(fù)化療或高劑量化療周期可能引起嚴(yán)重的干細(xì)胞損耗， 導(dǎo)致嚴(yán)重的長期造血后遺癥和骨髓耗竭。
[0016] 防止化療副作用或保護(hù)免遭化療副作用會(huì)對(duì)癌癥個(gè)體具有巨大的益處。對(duì)于威 脅生命的副作用，努力集中于改變化療劑的劑量和時(shí)間安排來降低副作用。其它的選擇 也可以利用，如應(yīng)用粒細(xì)胞集落刺激因子（G-CSF)、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞-CSF(GM-CSF)、表 皮生長因子（EGF)、白介素11、促紅細(xì)胞生成素、血栓形成素、巨核細(xì)胞生成和生長因子、 pixykines、干細(xì)胞因子、FLT-配體、以及白介素1、3、6和7,以增加化療開始前各種組織中 的正常細(xì)胞數(shù)量（參見 Jimenez 和 Yunis，Cancer Research 52:413-415(1992))。這些因 子的保護(hù)機(jī)制雖然未被充分了解，但是最可能與細(xì)胞毒劑治療前正常的關(guān)鍵靶細(xì)胞的數(shù)目 增加有關(guān)，并且與化療后細(xì)胞存活增加無關(guān)。
[0017] 腫瘤治療的化療靶向性
[0018] 實(shí)體瘤的生長和轉(zhuǎn)移是血管發(fā)生依賴性的（Folkman，J. Cancer Res.，46， 467-73 (1986) ;Folkman，J. Nat. Cancer Inst.，82,4-6 (1989) ;Folkman 等， "Tumor Angiogenesis，"第 10 章，第 206-32 頁，The Molecular Basis of Cancer, Mendelsohn 等編著（W.B. Saunders，1995))。已經(jīng)顯示，例如，增大至直徑2mm以上的腫瘤必需獲得它 們自身的血液供應(yīng)并且通過誘導(dǎo)新毛細(xì)血管生長實(shí)現(xiàn)這一點(diǎn)。這些新血管埋入腫瘤后，它 們提供對(duì)于腫瘤生長必要的營養(yǎng)物和生長因子以及腫瘤細(xì)胞進(jìn)入循環(huán)和轉(zhuǎn)移到遠(yuǎn)處如肝 臟、肺或骨的途徑（Weidner，New Eng. J. Med.，324(1)，1-8 (1991))。當(dāng)被用作攜帶腫瘤動(dòng) 物中的藥物時(shí)，血管發(fā)生的天然抑制劑可以防止小腫瘤的生長（(V Reilly等，Cell 79: 315-28(1994))。事實(shí)上，在一些方案中，這種抑制劑的應(yīng)用使得腫瘤退化和靜止，甚至在 治療結(jié)束后（O' Reilly等，Cell 88:277-85(1997))。而且，提供血管發(fā)生抑制劑到一些 腫瘤能夠加強(qiáng)它們對(duì)其它治療方案（例如化療）的應(yīng)答（參見，例如，Teischer等，Int. J. Cancer 57:920-25(1994))。
[0019] 蛋白酪氨酸激酶催化參與調(diào)節(jié)細(xì)胞生長和分化的多種蛋白質(zhì)中的特定酪氨 酰殘基磷酸化（A.F.Wilks，Progress in Growth Factor Research(1990)2:97_lll; S. A. Courtneidge, Dev. Suppl. (1993) 57-64 ；J. A. Cooper, Semin. Cell Biol. (1994)5(6)： 377-387 ；R. F. Paulson, Semin. Immunol. (1995)7(4) :267-277 ；A. C. Chan, Curr. Opin. Immunol. (1996)8(3) :394-401)。蛋白酪氨酸激酶可以被廣義地歸類為受體（例如，EGFr、 c-erbB-2、c_met、tie-2、FOGFr、FGFr)或非受體（例如，c_src、Ick、Zap70)激酶。已顯 示，許多這些激酶的不適當(dāng)或不受控制的激活，即，蛋白酪氨酸激酶活性異常，例如，由于過 表達(dá)或突變所致，引起不受控制的細(xì)胞生長。例如，表皮生長因子受體（EGFR)活性增加涉 及小細(xì)胞肺癌、膀胱癌和頭頸癌，以及c-erbB-2活性增加涉及乳腺癌、卵巢癌、胃癌和胰腺 癌。因此，蛋白酪氨酸激酶抑制應(yīng)該可用于治療如上列出的腫瘤。
[0020] 生長因子是誘導(dǎo)細(xì)胞增殖的物質(zhì)，典型地通過與細(xì)胞表面上的特定受體結(jié)合實(shí) 現(xiàn)。表皮生長因子（EGF)誘導(dǎo)體內(nèi)多種細(xì)胞增殖，并且是大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞生長所需的。EGF 受體是170-180kD跨膜糖蛋白，可以在多種細(xì)胞類型上檢測到。該受體的細(xì)胞外N端結(jié)構(gòu) 域被高度糖基化，并且與選擇性結(jié)合EGFR的EGF抗體結(jié)合。已經(jīng)應(yīng)用競爭性結(jié)合EGFR的 藥劑來治療一些類型的癌癥，因?yàn)樵S多中胚層和外胚層起源的腫瘤過表達(dá)EGF受體。例如， 已顯示EGF受體在許多神經(jīng)膠質(zhì)瘤、鱗狀細(xì)胞癌、乳腺癌、黑色素瘤、侵入性膀胱癌和食道 癌中過表達(dá)。研宄EGFR系統(tǒng)以獲得抗腫瘤治療的嘗試一般包括應(yīng)用針對(duì)EGFR的單克隆抗 體。此外，原發(fā)性人乳腺腫瘤的研宄顯示，EGFR高度表達(dá)和存在轉(zhuǎn)移、增殖速度增高和個(gè)體 存活時(shí)間較短之間具有相關(guān)性。
[0021] HerIyn等在美國專利5, 470, 571中公開了應(yīng)用放射標(biāo)記Mab425治療表達(dá)EGFR的 神經(jīng)膠質(zhì)瘤。Herlyn等報(bào)道，抗-EGFR抗體可以刺激或抑制癌細(xì)胞生長和增殖。已報(bào)道， 對(duì)EGFR有特異性的其它單克隆抗體或是單獨(dú)地或是與細(xì)胞毒性化合物偶聯(lián)，對(duì)治療一些 類型的癌癥是有效的。Bendig等在美國專利5, 558, 864中公開了治療性抗-EGFR Mab，其 與EGFR競爭性結(jié)合。Heimbrook等在美國專利5, 690, 928中公開了應(yīng)用與來源于假單胞菌 (Pseudomonas)某種的內(nèi)毒素融合的EGF治療膀胱癌。Brown等在美國專利5, 859, 018中 公開了治療以由EGF等介導(dǎo)的細(xì)胞高增殖為特征的疾病的方法。
[0022] 化療施用方式
[0023] 經(jīng)常應(yīng)用單一或多種化療劑治療被診斷患有癌癥的人，以殺死腫瘤原發(fā)部位或癌 癥轉(zhuǎn)移的遠(yuǎn)處部位的癌細(xì)胞。一般地，化療治療或以單劑量或以幾個(gè)大劑量給予，或是在數(shù) 周至數(shù)月的變化時(shí)間期間給予。然而，重復(fù)化療或高劑量周期化療可以引起毒性增加和嚴(yán) 重的副作用。
[0024] 新的研宄表明，節(jié)律性化療（metronomic chemotherapy)--即低劑量和頻繁 給予細(xì)胞毒性劑而無長的無藥物間隔，靶向腫瘤血管中活化的內(nèi)皮細(xì)胞。許多臨床前研 宄表明，節(jié)律性方案相比于最大耐受劑量（MTD)對(duì)應(yīng)方案具有優(yōu)越的抗腫瘤效應(yīng)、有效的 抗血管發(fā)生作用以及減輕的毒性和副作用（例如骨髓抑制）（Bocci等，Cancer Res 62: 6938-6943(2002) ;Bocci 等，PNAS 100(22) :12917-12922(2003);和 Bertolini 等，Cancer Res 63(15) :4342-4346(2003))。是所有的化療藥劑發(fā)揮相似作用還是一些化療藥劑比其 它化療藥劑更適于這種方案，仍然不清楚。然而，節(jié)律性化療在克服與化療有關(guān)的一些主要 缺點(diǎn)方面似乎是有效的。
[0025] 化療劑
[0026] 已經(jīng)顯示，紫杉醇在藥物難治性卵巢癌中具有明顯的抗腫瘤和抗癌作用，并且在 寬范圍的腫瘤模型中表現(xiàn)出優(yōu)異的抗腫瘤活性，并且在以非常低的劑量應(yīng)用時(shí)也抑制血管 發(fā)生（Grant等，Int. J. Cancer，2003)。然而，紫杉醇的水溶性差為施用于人類提出了難 題。事實(shí)上，如果經(jīng)口輸送不是有效的話，在含水介質(zhì)中固有地不溶或溶解性差的藥物的 輸送可被嚴(yán)重削弱。因此，目前應(yīng)用的紫杉醇制劑（例如Taxoi s:)需要CrcmoplK^ (聚 氧乙稀蓖麻油）來溶解藥物。Crcmophor1'在此制劑中的存在與動(dòng)物（Lorenz等，Agents Actions 7 :63-67(1987))和人（Weiss 等，J. Clin. Oncol. 8 :1263-68(1990))的嚴(yán)重超敏 反應(yīng)有關(guān)，因而需要對(duì)個(gè)體預(yù)先應(yīng)用皮質(zhì)類固醇（地塞米松）和抗組胺劑。也報(bào)道，制劑載 體C'rcmophor :< EL在Taxof中的臨床相關(guān)濃度使得紫杉醇的抗血管生成作用無效，這表明 在Crcmophorli EL中配制的這一藥物或其它抗癌藥可能需要在比實(shí)現(xiàn)有效節(jié)律性化療所 預(yù)期的劑量高的劑量下應(yīng)用（Ng等，Cancer Res. 64:821-824(2004))。因而，與傳統(tǒng)的MTD 化療相比，缺乏與低劑量紫杉醇方案有關(guān)的不期望副作用的優(yōu)勢可能被損害。也參見美國 專利公布 2004/0143004 ;W000/64437。
[0027] Abraxane?是無 Cremophor? EL的結(jié)合納米顆粒白蛋白的紫杉醇
[0028] 臨床前模型已經(jīng)顯示，相比于Taxolli丨（Desai等，E0RTC-NCI-AACR，2004)和在患 有轉(zhuǎn)移性乳腺癌個(gè)體中（O' Shaughnessy 等，San Antonio Breast Cancer Symposium， Abstract#1122，Dec. 2003)，Abraxan:在安全性和效率方面顯著改進(jìn)。這可能是由于 Abraxane%中不存在表面活性劑（例如，Cremophor8'或Tween8' 80，分別用在Taxof和 Taxoteres'1中），和/或優(yōu)先應(yīng)用基于白蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制，該機(jī)制利用微血管內(nèi)皮細(xì)胞上的 gp6〇/ 內(nèi)陷（caveolae) (Desai 等，EORTC-NCI_AACR，2〇04)。此外，已經(jīng)顯不，（:'remophor' 和Twee，80均強(qiáng)烈抑制紫杉醇與白蛋白的結(jié)合，可能影響基于白蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)（Desai等， E0RTC-NCI-AACR，2004)。
[0029] IDN5109 (Ortataxel)是新的紫杉烷，目前在II期中，由于其在表達(dá)多元藥物抗 性表型的腫瘤細(xì)胞系（MDR/Pgp)中缺乏交叉抗藥和對(duì)P糖蛋白（P gp)的抑制而被選擇 (Minderman ;Cancer Chemother Pharmacol. 2004 ;53 :363_9)。由于其疏水性，IDN5109 目 前被配制在表面活性劑Tween8' 80 (與Taxoteres;相同的載體）中。從紫杉烷制劑中去除 表面活性劑，例如，在納米顆粒白蛋白結(jié)合的紫杉醇(Abraxane?)的情況下，顯示出與它們的 含表面活性劑的對(duì)應(yīng)物相比，具有改進(jìn)的安全性和效率（〇' Shaughnessy等，San Antonio Breast Cancer Symposium，Abstract#1122, Dec. 2003)。Tween81 80 也強(qiáng)烈抑制紫杉燒、 紫杉醇與白蛋白的結(jié)合，可能損害通過微血管內(nèi)皮細(xì)胞上gp60受體的、基于白蛋白的藥物 轉(zhuǎn)運(yùn)（Des