本發(fā)明涉及眼科疾病的藥物，尤其是涉及一種姜黃素納米混懸眼用制劑及制備方法。
背景技術(shù)：
白內(nèi)障是世界首位致盲因素，同時也是我國第一位的致盲眼病。研究表明在白內(nèi)障發(fā)生發(fā)展過程度中，自由基以及與其相關(guān)的氧化應(yīng)激是導致晶狀體生理功能改變、最終導致白內(nèi)障的樞紐。
姜黃素是從姜科姜黃屬(curcuma L.)植物姜黃、莪術(shù)、郁金等的根莖中提取的一種天然有效成分，分子式為C21H20O6。姜黃素為水難溶性藥物，具有不飽和脂族及酚羥基，能提供質(zhì)子阻斷自由基鏈式反應(yīng)，已有文獻對姜黃素原料藥的體外抗硒性白內(nèi)障作用及外傷性白內(nèi)障作用進行考察，結(jié)果顯示姜黃素可推遲硒性白內(nèi)障的發(fā)生、發(fā)展并抑制早期輕度外傷性白內(nèi)障形成。但是，由于姜黃素穩(wěn)定性差、溶解度小、體內(nèi)生物利用度極低等，限制了姜黃素在眼部的應(yīng)用、推廣。如何改善姜黃素上述缺點，制備生物利用度高、患者順應(yīng)性好的的滴眼用眼用制劑，成為近年來藥學工作者的亟待解決的課題。
納米混懸劑是不使用任何載體，由純的藥物粒子在少量的穩(wěn)定劑作用下高度分散在分散介質(zhì)中形成的亞微粒膠體分散系統(tǒng)，粒徑一般在10-1000nm。其比表面積大，藥物能夠迅速的溶出，有效解決藥物溶解度低的問題。
眼用凝膠常以親水性高分子材料為載體，有較好的生物相容性，為半固體制劑，可延長藥物的作用時間，減少給藥次數(shù)，能克服滴眼液生物利用度低、眼膏劑油膩不易涂抹以及混懸劑眼部不適等缺點。
尚未見姜黃素納米混懸劑及姜黃素納米混懸凝膠劑用于白內(nèi)障的治療。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的第一個目的是提供一種能顯著提高姜黃素的溶解度、溶出速度并增加藥物的有效吸收、延長眼部滯留時間、提高藥物生物利用度、可用于治療白內(nèi)障等疾病的姜黃素納米混懸眼用制劑。
本發(fā)明的第二個目的是提供一種姜黃素納米混懸眼用制劑的制備方法。
本發(fā)明的第一個目的是這樣實現(xiàn)的：
一種姜黃素納米混懸眼用制劑，特征是：姜黃素納米混懸眼用制劑為姜黃素眼用納米混懸劑或姜黃素眼用納米混懸凝膠劑。
A、姜黃素納米混懸眼用制劑為姜黃素眼用納米混懸劑：
在100mL姜黃素眼用納米混懸劑中含有如下以重量計的組分：
姜黃素：0.05-10.0g；
穩(wěn)定劑：0.01-40.0g；
滲透壓調(diào)節(jié)劑：0.01-10.0g；
pH調(diào)節(jié)劑：0.01-2.0g；
防腐劑：0.02-1.0g；
抗氧劑：0.01-5.0g；
金屬螯合劑：0.001-0.1g
余量為注射用水。
所述穩(wěn)定劑在本發(fā)明中起的是形成納米制劑并達到穩(wěn)定作用，選自以下材料，包含以下材料中的一種或多種的任意組合：吐溫20、吐溫60、吐溫80、司盤20、司盤80、賣澤35、月桂醇硫酸鈉、十二烷基硫酸鈉、卵磷脂、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、乙烯基吡咯烷酮-乙烯乙酸酯共聚物、乙烯-醋酸乙烯共聚物、泊洛沙姆、聚乙二醇、甲基纖維素、乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙甲纖維素、羧甲基纖維素鈉、卡波姆、亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、依地酸、依地酸鹽依地酸、異抗壞血酸及其鈉鹽、硫脲、丙烯酸樹脂類、纖維素及其衍生物、聚氧乙烯蓖麻油、泰洛沙泊中的一種或任意混合物。
所述穩(wěn)定劑優(yōu)選泊洛沙姆、吐溫80、聚乙烯吡咯烷酮K30、羧甲基纖維素鈉、丙烯酸樹脂RL100和乙基纖維素。
所述滲透壓調(diào)節(jié)劑為氯化鈉、聚乙二醇、甘油、葡萄糖、碳酸鈉、碳酸氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、硼酸、硼砂、甘露醇和丙二醇中的一種或多種。
所述pH調(diào)節(jié)劑為NaOH、HCl、枸櫞酸、三乙醇胺、三羥甲基氨基甲烷、硼酸、硼酸鈉、醋酸和醋酸鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉中的一種或多種。
所述防腐劑為硫柳汞、山梨酸、醋酸苯汞、苯扎氯胺、苯扎溴胺、苯甲酸鈉、苯氧乙醇、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯和三氯叔丁醇中的一種或多種。
所述抗氧劑為亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉、硫脲、維生素E、維生素A、維生素C和胡蘿卜素中的一種或多種。
所述金屬螯合劑為乙二胺四乙酸（Ethylene Diamine Tetraacetic Acid，EDTA）、EDTA-2Na、EDTA-Ca和EDTA-2K中的一種或多種。
由于是眼用制劑，為符合藥品制劑標準，所述水為蒸餾水或注射用水。
B、姜黃素納米混懸眼用制劑為姜黃素眼用納米混懸凝膠劑：
在100mL姜黃素眼用納米混懸凝膠劑中含有如下以重量計的組分：
姜黃素：0.1-20.0g；
凝膠基質(zhì)：0.2-20g；
穩(wěn)定劑：0.02-80.0g；
滲透壓調(diào)節(jié)劑：0.01-10.0g；
pH調(diào)節(jié)劑：0.01-2.0g；
防腐劑：0.02-1.0g；
抗氧劑：0.01-5.0g；
金屬螯合劑：0.001-0.1g；
余量為注射用水。
所述穩(wěn)定劑在本發(fā)明中起的是形成納米制劑并達到穩(wěn)定作用，選自以下材料，包含以下材料中的一種或多種的任意組合：吐溫20、吐溫60、吐溫80、司盤20、司盤80、賣澤35、月桂醇硫酸鈉、十二烷基硫酸鈉、卵磷脂、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、乙烯基吡咯烷酮-乙烯乙酸酯共聚物、乙烯-醋酸乙烯共聚物、泊洛沙姆、聚乙二醇、甲基纖維素、乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙甲纖維素、羧甲基纖維素鈉、卡波姆、亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、依地酸、依地酸鹽依地酸、異抗壞血酸及其鈉鹽、硫脲、丙烯酸樹脂類、纖維素及其衍生物、聚氧乙烯蓖麻油、泰洛沙泊中的一種或任意混合物。
所述穩(wěn)定劑泊洛沙姆、吐溫80、聚乙烯吡咯烷酮K30、羧甲基纖維素鈉、丙烯酸樹脂RL100和乙基纖維素。
所述凝膠基質(zhì)為凝膠材料和增稠劑經(jīng)混合使用，凝膠材料選自以下材料，包含以下材料中的一種或多種的任意組合：泊洛沙姆、殼聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素、海藻酸鈉及其衍生物、阿拉伯膠、西黃耆膠、瓜爾豆膠、卡波姆、植物凝集素、透明質(zhì)酸、黃原膠、殼聚糖、糊精及衍生物、透明質(zhì)酸鈉、殼聚糖、甘油磷酸鈉、海藻酸鹽、結(jié)冷膠、去乙酰結(jié)冷膠、聚羧乙烯、聚卡波菲、泰洛沙泊。
所述增稠劑選自以下材料，包含以下材料中的一種或多種的任意組合：糊精及衍生物、海藻酸鈉及其衍生物、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、羥丙基甲基纖維素(羥丙甲纖維素)、羥丙基纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素、阿拉伯膠、西黃耆膠、瓜爾豆膠、卡波姆、植物凝集素、透明質(zhì)酸、黃原膠、殼聚糖、糊精及衍生物、泰洛沙泊。
所述滲透壓調(diào)節(jié)劑為氯化鈉、聚乙二醇、甘油、葡萄糖、碳酸鈉、碳酸氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、硼酸、硼砂、甘露醇和丙二醇中的一種或多種。
所述pH調(diào)節(jié)劑為NaOH、HCl、枸櫞酸、三乙醇胺、三羥甲基氨基甲烷、硼酸、硼酸鈉、醋酸和醋酸鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉中的一種或多種。
所述防腐劑為硫柳汞、山梨酸、醋酸苯汞、苯扎氯胺、苯扎溴胺、苯甲酸鈉、苯氧乙醇、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯和三氯叔丁醇中的一種或多種。
所述抗氧劑為亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉、硫脲、維生素E、維生素A、維生素C和胡蘿卜素中的一種或多種。
所述金屬螯合劑為EDTA、EDTA-2Na、EDTA-Ca和EDTA-2K中的一種或多種。
由于是眼用制劑，為符合藥品制劑標準，所述水為蒸餾水或注射用水。
本發(fā)明的第二個目的是這樣實現(xiàn)的：
一種姜黃素納米混懸眼用制劑的制備方法，特征是：姜黃素納米混懸眼用制劑為姜黃素眼用納米混懸劑，制備方法包括以下步驟：
（1）、將穩(wěn)定劑溶解于100mL注射用水中得到穩(wěn)定劑溶液，再將姜黃素分散于穩(wěn)定劑溶液中，得到姜黃素混懸液；
（2）、對步驟（1）所得姜黃素混懸液使用高速剪切機、乳勻機、高壓均質(zhì)機、探頭超聲或球磨機進行加工，制得姜黃素納米混懸劑；
（3）、在納米混懸劑中加入滲透壓調(diào)節(jié)劑、pH調(diào)節(jié)劑、抗氧劑、金屬螯合劑；
（4）、灌裝即得姜黃素眼用納米混懸劑。
或，一種姜黃素納米混懸眼用制劑的制備方法，特征是：姜黃素納米混懸眼用制劑為姜黃素眼用納米混懸凝膠劑，制備方法包括以下步驟：
（1）、穩(wěn)定劑溶解于50-70mL注射用水中得到穩(wěn)定劑溶液；加入姜黃素混勻，得到姜黃素混懸液；
（2）、對步驟（1）所得姜黃素混懸液使用高速剪切機、乳勻機、高壓均質(zhì)機、探頭超聲或球磨機進行加工，制得姜黃素納米混懸劑A；
（3）、使用余量的注射用水溶解凝膠基質(zhì)，攪拌均勻，得到凝膠基質(zhì)水溶液B；
（4）、將姜黃素納米混懸劑A和凝膠基質(zhì)水溶液B混勻，加入滲透壓調(diào)節(jié)劑、pH調(diào)節(jié)劑，以調(diào)節(jié)pH值和滲透壓，加入金屬螯合劑、抗氧劑、防腐劑，補充注射用水至100mL，灌裝即得姜黃素眼用納米混懸凝膠劑。
姜黃素眼用納米混懸劑的有益效果：該姜黃素眼用納米混懸劑所含輔料種類和用量均較少，而姜黃素是以一定的晶型或無定型狀態(tài)存在的固體納米顆粒；滴眼使用后，能在結(jié)膜囊內(nèi)和角膜表面滯留較長時間，同時較高的藥物濃度有利于濃度梯度依賴的角膜藥物透過，提高生物利用度，延長作用時間，提高療效。姜黃素納米混懸眼用制劑與普通混懸劑相比，粒徑更小，藥物溶出速度更快，眼部吸收速率和程度就更大，姜黃素納米混懸眼用制劑中的藥物顆粒有較大的表面積，在眼部具有一定的黏附性，可提高藥物的吸收程度，延長作用時間。
姜黃素眼用納米混懸劑的粒徑可以通過改變探頭超聲的功率和超聲時間以及調(diào)節(jié)高壓均質(zhì)的壓力和更改循環(huán)次數(shù)進行調(diào)節(jié)。
姜黃素眼用納米混懸凝膠劑的有益效果：綜合利用了納米混懸劑以及凝膠劑的優(yōu)點，更進一步提高姜黃素的生物利用度，大大提高患者的順應(yīng)性。
本發(fā)明的優(yōu)點在于：顯著提高了姜黃素的溶解度、溶出速度并增加了藥物的有效吸收、延長了眼部滯留時間，提高了藥物生物利用度，可用于治療白內(nèi)障等疾病，凝膠劑可延長藥物在眼部的保留時間，減少給藥次數(shù)和給藥劑量，不僅提高了患者順應(yīng)性，同時降低了藥物的副作用。所述制劑制備方法工藝可行、質(zhì)量可控，有非常廣闊的產(chǎn)業(yè)化前景。
具體實施方式
為了更好地理解本發(fā)明，下面結(jié)合實施例進一步闡明本發(fā)明的內(nèi)容，但本發(fā)明的內(nèi)容不僅僅局限于下面的實施例。
實施例1-3：姜黃素眼用納米混懸劑
注：“/”表示未添加。
姜黃素眼用納米混懸劑的制備方法如下：
（1）將穩(wěn)定劑溶解于100mL注射用水中得到穩(wěn)定劑溶液，再將藥物分散于穩(wěn)定劑溶液中；
（2）使用高速剪切乳化法，轉(zhuǎn)速為16000rpm，剪切時間6min，制得平均粒徑在30微米左右的初混懸液，然后將上述初混懸液進行高壓均質(zhì)，控制均質(zhì)溫度為10攝氏度，均質(zhì)工藝如下：先在200bar、400bar、600bar、800bar循環(huán)均質(zhì)6次，然后在1000bar壓力下循環(huán)20次，調(diào)節(jié)pH和滲透壓，得到納米晶體，加入防腐劑、抗氧劑、金屬螯合劑，灌裝即得。
實施例4-7：姜黃素眼用納米混懸凝膠劑
注：“/”表示未添加。
姜黃素眼用納米混懸凝膠劑的制備方法，包括以下步驟：
（1）將穩(wěn)定劑溶解于50-70mL注射用水中得到穩(wěn)定劑溶液，再將藥物分散于穩(wěn)定劑溶液中；
（2）使用球磨機，使用氧化鋯為研磨介質(zhì)，35Hz研磨7小時，取出制劑，過濾除去研磨介質(zhì)，制得納米混懸劑A；
（3）使用余量的注射用水溶解凝膠基質(zhì)，攪拌均勻，得到凝膠基質(zhì)水溶液B，將A和B混勻，調(diào)節(jié)pH值和滲透壓，加入金屬螯合劑、抗氧劑或防腐劑，補充注射用水至100mL，灌裝即得。
實施例8 藥效學評價
所用測試制劑為：實施例5
建立硒性白內(nèi)障大鼠模型，對照組和模型組動物給予生理鹽水（5微升/20g），給藥組動物給予同體積的姜黃素混懸液、姜黃素納米混懸凝膠劑，每天給藥3次，持續(xù)8天。除對照組動物外，各組動物在首次給藥后的30min后于頸背部皮下注射亞硒酸鈉的生理鹽水溶液。所有動物在實驗結(jié)束后，處死，迅速剖出眼球，分離晶狀體，測定晶狀體總超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）及谷胱甘肽（GSH）含量。按總SOD檢測試劑盒的方法測得空白組、模型組、姜黃素混懸液組、姜黃素納米混懸凝膠劑組的SOD活力分別為(65.2±4.5)、(24.1±1.1)、(47.7±5.1)、(58.1±7.0) U·mg prot-1，MDA含量分別為(3.4±0.4)、(18.8±0.4)、(9.4±0.6)、(6.0±2.1) mol·mL-1，GSH含量分別為(49.9±0.9)、(17.5±1.8)、(19.1±1.1)、(38.1±2.6) mg·g prot-1。