穿心蓮內酯納米混懸劑組合物及其制備方法和應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術領域，具體的說，涉及穿心蓮內酯納米混懸劑凍干組合物及 其制備方法和應用。
【背景技術】
[0002] 穿心蓮內酯（分子式為C2QH3Q05,分子量為350. 45)為爵床科植物穿心蓮中提取 得到的二萜內酯化合物，是中藥穿心蓮的主要有效成分之一，具有清熱解毒、涼血消腫等功 能?，F代藥理研究表明，穿心蓮內酯具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗腫瘤、調節(jié)免疫、治療心血管 疾病、保肝利膽等作用。臨床用于治療菌痢、鉤端螺旋體病、腦膜炎、肺炎、上呼吸道感染。
[0003] 穿心蓮內酯在沸乙醇中溶解，甲醇或乙醇中微溶，極微溶于氯仿，乙醚中幾乎不 溶，水中的溶解度只有〇. 〇7mg/mL (22°C )，熔點230-231°C，油水分配系數為3. 90。針對臨 床上病毒感染急癥的需求，亟需研發(fā)穿心蓮內酯注射劑，但由于其給藥劑量較高（穿心蓮 內酯片日用量為300-450mg ;喜炎平注射液日用量為250-500mg)，所以對制劑中的藥物濃 度有較高的要求，而現有技術無法達到這個要求。如張等以吐溫80、普郎尼克F68、聚氧乙 烯（35)氫化蓖麻油、聚氧乙烯（40)氫化蓖麻油、聚乙二醇12羥基硬脂酸酯、聚乙二醇400、 聚乙二醇300和丙二醇等增溶輔料均無法將其增溶至要求濃度（2. 5mg/mL);以脂質體、乳 劑和膠束為載體，或仍無顯著提高制劑藥物濃度，或需加入大量輔料及有機溶劑。為了解決 上述問題，穿心蓮內酯注射劑的研發(fā)已受國家科技重大專項"基于脂質載體釋藥技術的穿 心蓮內酯新給藥系統(tǒng)的研究與開發(fā)"的資助。
[0004] 參考文獻：張海燕，齊云，廖永紅.注射劑常用增溶性藥用輔料的安全與增溶研究 [J]·中國實驗方劑學雜志，2011，17(11) :1-4.
[0005] 于波濤，張志榮.穿心蓮內酯脂質體的制備及體外釋放特性[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜 志，2009, 40 (2) :114-116.
[0006] 歐陽五慶，吳旭錦.一種穿心蓮內酯納米乳口服液及其制備方法[P].中國專 利：200610104591. 2,2007-03-21.
[0007] 納米混懸劑是利用表面活性劑的穩(wěn)定作用，將藥物微粒分散在水中，通過粉碎或 控制析晶等技術形成穩(wěn)定的納米膠態(tài)分散體。制劑中藥物粒徑?。ㄆ骄叫∮? μ m，一 般在100-500nm)、比表面積大，這是解決難溶性藥物水溶性的一個重要技術。
[0008] 納米混懸劑的應用特點：
[0009] 1.藥物以固體微粒分散于介質（通常為水）中，制劑含藥量高，特別適合大劑量、 難溶藥物的口服和注射給藥。
[0010] 2.應用范圍廣，可以應用于那些水不溶但溶于油的藥物（高ΙορΡ)，如CoQi。納米 混懸劑；對于那些高熔點、水油均不溶的藥物（以脂質體、乳劑、固體脂質納米粒等脂質系 統(tǒng)無法有效載藥），納米混懸劑也能輕而易舉地使制劑中藥物濃度達到臨床應用的需求。
[0011] 參考文獻：
[0012] Rabinow BE.Nanosuspensions in drug delivery[J]. Nature Reviews Drug Discovery, 2004, 3(9):785-796.
[0013] 3.有機溶劑和輔料用量少，毒性小，安全性高。目前增加難溶性藥物水溶性通常采 用共溶劑增溶、表面活性劑增溶等技術。但共溶劑增溶存在有機溶劑毒副作用，配伍時藥物 析出等問題；而大量表面活性劑的加入會帶來潛在的毒副作用，其中注射增溶劑吐溫80還 可能帶來溶血性問題。納米混懸劑一般僅用少量輔料和有機溶劑，甚至不需要有機溶劑，從 注射安全性考慮，納米混懸劑具有較大的優(yōu)勢。
[0014] 4.改變藥動學參數，減少給藥頻率。由于特殊的粒徑效應，靜脈注射納米混懸劑在 體內的清除與分布與溶液劑是完全不同的。納米粒子大部分被體內的巨噬細胞吞噬，聚集 在肝、脾等組織，這些組織成為藥物的"倉庫"，藥物可緩慢地釋放，延長作用時間，如伊曲康 唑納米混懸劑注射后24h，血藥濃度能達到2. 8 μ g/mL。
[0015] 5.增大藥物溶解度，提高藥物溶出速率。根據Ostwald-Freundlich方程提出的粒 徑與溶解度的關系，藥物的納米化處理，可增大藥物溶解度，而其比表面積的增加同時提高 了其溶出速度，這也是改善口服難溶性藥物生物利用度的有效措施。
[0016] 6.提高藥物穩(wěn)定性。將化學性質不穩(wěn)定的藥物制劑制備成納米混懸劑后，一方面 固體藥物比藥物分子與外界環(huán)境接觸小，另一方面納米混懸劑中的表面活性劑以及高分子 對藥物顆粒有包裹作用。因此，藥物納米化大大增加其化學穩(wěn)定性。
[0017] 7.可起到被動或者主動靶向作用。納米制劑的體內分布與其粒徑有很大關系，一 般大于7 μπι的微粒被肺毛細血管截留，更小的微粒被網狀內皮系統(tǒng)（RES)匯集于肝脾組 織，而在100nm左右的粒子則易借助EPR效應靶向于腫瘤。所以可以根據治療目的，制備不 同粒徑的納米制劑，從而靶向治療對應病灶。

【發(fā)明內容】

[0018] 本發(fā)明目的是提供一種可注射的穿心蓮內酯納米混懸劑組合物及其制備工藝和 使用方法。該納米混懸劑處方簡單，制備工藝精簡且易于產業(yè)化、載藥量高、穩(wěn)定性好，無有 機溶劑、安全性好。
[0019] 本發(fā)明要解決的第一個技術問題是提供穿心蓮內酯納米混懸劑組合物，其包含以 下組分和質量百分含量：
[0020] 穿心蓮內酯 0.05%-5% 穩(wěn)定劑 0.5%-5°/〇 稀釋穩(wěn)定劑 0.005%-1% 添加水至 100%,
[0021 ] 其中所述的穩(wěn)定劑選自普朗尼克F68、普朗尼克F87、普朗尼克F108、普朗尼 克F127、普朗尼克P124、聚氧乙烯蓖麻油（Cremophor EL)、聚氧乙烯醚（35)氫化蓖麻 油（Cremophor RH 35)、聚氧乙稀醚（40)氫化蓖麻油（Cremophor RH 40)、聚山梨酯 80(Polysorbate 80)、聚乙二醇12羥基硬脂酸酯（solutol HS 15);天然磷脂：大豆卵磷 脂（SPC)、蛋磷脂（EPC);合成磷脂：氫化大豆磷脂（HSPC)、二油酰磷脂酰膽堿（D0PC)、二 油酰磷脂酰乙醇胺（DOPE)、二棕櫚酰磷脂酰膽堿（DPPC)、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺（DPPE)、 二硬脂酰磷脂酰膽堿（DSPC)、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺（DSPE)、二硬脂酰磷脂酰甘油 (DSPG)、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿（DMPC)、二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺（DSPE)、二月桂酰磷 脂酰膽堿（DLPC)、二月桂酰磷脂酰乙醇胺（DLPE)、二硬脂?；字Ｒ掖及?聚乙二醇 2000 (DSPE-mPEG2_)等中的一種或其任意混合物；所述的稀釋穩(wěn)定劑選自膽酸及其鈉鹽、 脫氧膽酸及其鈉鹽、去氫膽酸及其鈉鹽、?；悄懰峒捌溻c鹽、?；切苋パ跄懰峒捌溻c鹽、牛 磺鵝去氧膽酸及其鈉鹽等膽酸鹽中的一種或其任意混合物。
[0022] 作為優(yōu)選，本發(fā)明的穩(wěn)定劑為：普朗尼克F68、普朗尼克F108、普朗尼克F127、聚氧 乙烯蓖麻油、聚氧乙烯醚（40)氫化蓖麻油、大豆卵磷脂、氫化大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂、氫 化蛋黃卵磷脂、聚乙二醇12羥基硬脂酸酯中的一種或其任意混合物；稀釋穩(wěn)定劑為：脫氧 膽酸鈉、?；悄懰徕c、?；切苋パ跄懰徕c、?；蛆Z去氧膽酸鈉中的一種或任意混合物。
[0023] 更為優(yōu)選地，本發(fā)明中穩(wěn)定劑的用量為：普朗尼克F68、普朗尼克F108及普朗尼克 F127為0. 5% -5% ;聚氧乙烯蓖麻油和聚氧乙烯醚（40)氫化蓖麻油為0. 5% -5% ;大豆卵 磷脂、氫化大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂及氫化蛋黃卵磷脂為〇. 5% -2%;聚乙二醇12羥基硬脂 酸酯為2 % -5 % ;
[0024] 稀釋穩(wěn)定劑的用量為：脫氧膽酸鈉為0. 005% -0. 5%，?；悄懰徕c為0. 01 % -1 %， ?；切苋パ跄懰徕c為〇. 01% -1 %，?；蛆Z去氧膽酸鈉為〇. 005% -0. 5%。
[0025] 由于納米粒的物理穩(wěn)定性對穩(wěn)定劑濃度很敏感，若臨床需要靜脈滴注必然需要稀 釋，期間可能產生粒子聚集等問題，而使用大量穩(wěn)定劑會帶來潛在的毒性。因此本發(fā)明中在 穩(wěn)定劑的基礎上加入少量稀釋穩(wěn)定劑，即能起到穩(wěn)定納米粒的作用，不需要加入大量的一 般穩(wěn)定劑，從而減少大量穩(wěn)定劑帶來的毒性。
[0026] 本發(fā)明要解決的第二個技術問題是提供穿心蓮內酯納米混懸劑組合物的制備方 法。本發(fā)明所提供的制備方法有兩種：第一種制備方法是介質研磨法，即將穿心蓮內酯和穩(wěn) 定劑混合，加入球磨珠研磨，制得l〇〇-l〇〇〇nm左右的穿心蓮內酯納米混懸劑；第二種方法 是高壓均質法，是將過100目的穿心蓮內酯原料藥與穩(wěn)定劑混合，通過高壓均質機粉碎制 得100-1000nm左右的穿心蓮內酯納米混懸劑。
[0027] 本發(fā)明提供的第一種制備穿心蓮內酯納米混懸劑的方法是介質研磨法，包括以 下步驟：1)將穩(wěn)定劑溶于水，完全溶解后依次加入藥物及球磨介質；2)轉移至球磨機，以 200-400rmp工作10min，間歇2-5min，12-24次循環(huán)；3)分離球磨介質，得到乳白色納米混 懸液，向其中加入稀釋穩(wěn)定劑，攪拌或渦旋使所加物質溶解；4)分裝得穩(wěn)定的納米混懸劑。 研磨球粒徑為0. 2-lmm，投放量為球磨介質/水=2/1 - 4/1 ;稀釋穩(wěn)定劑可以研磨后加，亦 可以研磨前加。
[0028] 本發(fā)明提供的第二種制備穿心蓮內酯納米混懸劑的方法是高壓均質法，包括以下 步驟：1)將穩(wěn)定劑溶于水，完全溶解后加入過100目的穿心蓮內酯原料藥；2)轉移至高壓 均質機，500bar循