一種測(cè)定生發(fā)丸中有效成分含量的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種中藥制劑的質(zhì)量控制方法，具體涉及一種測(cè)定生發(fā)丸中有效成分 含量的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前，在生活中脫發(fā)給人們帶來很多困擾，尤其增加了精神壓力和思想包袱，而這 些又反作用影響了人們的病情;包括溢脂性脫發(fā)、感染性脫發(fā)、貧血性脫發(fā)、遺傳性脫發(fā)、神 經(jīng)過敏性脫發(fā)以及斑禿在內(nèi)的脫發(fā)的大多病因在于氣血虛熱、肝腎不足等，針對(duì)脫發(fā)，市場(chǎng) 上已有很多生發(fā)藥，現(xiàn)有市售的生發(fā)丸由制何首烏、鹽補(bǔ)骨脂、牛膝、當(dāng)歸、茯苓、枸杞子、鹽 菟絲子、女貞子、墨旱蓮、桑椹、黑芝麻、熟地黃、桑寄生、核桃仁、沙苑子、蛇床子、紫河車、骨 碎補(bǔ)、黃芪、制黃精、五味子、靈芝、地黃、側(cè)柏葉、苦參和山楂二十六味藥制備而成，在臨床 應(yīng)用多年，其療效不容置疑，但對(duì)于生發(fā)丸的質(zhì)量控制，現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)檢查手段過于簡(jiǎn)單，相對(duì) 于目前中藥質(zhì)量控制的要求有較大的差距。故現(xiàn)有質(zhì)量控制方法不能有效控制生發(fā)丸的質(zhì) 量，從而影響產(chǎn)品的生產(chǎn)和質(zhì)量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，提供一種測(cè)定生發(fā)丸中有效成分含量的 方法，該方法精密度和靈敏度高、穩(wěn)定性好，操作簡(jiǎn)單、回收率高，確保了生發(fā)丸制劑質(zhì)量的 安全、均一、穩(wěn)定、有效、可控。
[0004] 本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)：一種測(cè)定生發(fā)丸中有效成分含量的方 法，包括制何首烏的含量的測(cè)定和鹽補(bǔ)骨脂含量的測(cè)定，所述制何首烏含量的測(cè)定包括以 下步驟：
[0005] S1.色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水 為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為320nm，理論板數(shù)按2，3，5，4 ' -四羥基二苯乙烯-2-0-?Η)_葡萄糖苷峰 計(jì)算應(yīng)不低于3000;
[0006] S2.對(duì)照品溶液的制備:取2，3，5，4' -四羥基二苯乙烯-2-(H3-D-葡萄糖苷對(duì)照品 適量，精密稱定，加稀乙醇制成每lml含0. lmg的溶液，即為對(duì)照品溶液；
[0007] S3.供試品溶液的制備：取生發(fā)丸蜜丸剪碎，取10g或生發(fā)丸水蜜丸6g，研細(xì)，精密 稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，稱定重量，加熱回流后用稀乙醇補(bǔ)足減失的 重量，搖勻后用微孔濾膜過濾，取濾液，即為供試品溶液；
[0008] S4.測(cè)定:分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10μ1，注入高效液相色譜儀中 測(cè)定，本品含制何首烏以2,3,5,4'_四羥基二苯乙烯-2-〇-i3-D-葡萄糖苷計(jì)，水蜜丸每lg不 得少于〇. 23mg;大蜜丸每丸不得少于1.5mg;
[0009] 所述鹽補(bǔ)骨脂含量的測(cè)定包括以下步驟：
[0010] (1)色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-水 為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為246nm，理論板數(shù)按補(bǔ)骨脂素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000;
[0011] (2)對(duì)照品溶液的制備:取補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制 成每lml含10yg的混合溶液，即為對(duì)照品溶液；
[0012] (3)供試品溶液的制備:取生發(fā)丸蜜丸剪碎，取5g或生發(fā)丸水蜜丸3g，研細(xì)，精密稱 定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30min，用甲醇補(bǔ)足減失的重 量，搖勻后用微孔濾膜過濾，取濾液，即為供試品溶液；
[0013] (4)測(cè)定:分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10μ1，注入高效液相色譜儀中 測(cè)定，本品含鹽補(bǔ)骨脂以補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素的總量計(jì)，水蜜丸每lg不得少于〇.12mg，大 蜜丸每丸不得少于0.76mg。
[0014] 進(jìn)一步地，所述乙腈和水的體積比為1:5~7。
[0015] 進(jìn)一步地，所述加熱回流的溫度為85~95°C，時(shí)間為25~35min。
[0016] 進(jìn)一步地，所述甲醇和水的體積比為1:1.2~1.7。
[0017] 進(jìn)一步地，所述超聲處理的條件為:功率400~600W，頻率為50~60KHz。
[0018] 本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)：本發(fā)明提供的一種測(cè)定生發(fā)丸中有效成分含量的方法，對(duì) 生發(fā)丸中藥制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了提高、完善，采用高效液相色譜法對(duì)成分中的制何首烏 和鹽補(bǔ)骨脂含量進(jìn)行了測(cè)定，該方法精密度和靈敏度高、穩(wěn)定性好，操作簡(jiǎn)便快捷、回收率 高，為其安全合理用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，確保了生發(fā)丸中藥制劑質(zhì)量的安全、均一、穩(wěn)定、有 效、可控。
【具體實(shí)施方式】
[0019] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的描述，本發(fā)明的保護(hù)范圍不局限于以下所 述。
[0020] 實(shí)施例1:生發(fā)丸的制備 配方：制何首烏30g 鹽補(bǔ)骨脂_1.5g 牛膝 _15g 當(dāng)歸 10g
[0021] 茯苓 l〇g 枸杞子 30:g 鹽菟絲子20g 女貞子30g 墨旱蓮30g 桑椹 30g 黑芝麻 30g 熟地黃15g 桑寄生30g 核桃仁 30g 沙苑子15g 蛇床子15g 紫河車3g 骨碎補(bǔ) 15g 黃芪 30g 制黃精30g
[0022] 五味子l_5g 靈芝 15g 地黃 1.5? 側(cè)柏葉30g 苦參 10g 山楂 3€:g。
[0023]制備方法：以上二十六味，粉碎成細(xì)粉，過篩，混勻。每100g粉末加煉蜜35~50g與 適量的水，泛丸或制丸，干燥，制成水蜜丸;或加煉蜜1 〇〇~120g制成大蜜丸，即得。
[0024]實(shí)施例2:測(cè)定生發(fā)丸中有效成分含量，包括制何首烏的含量的測(cè)定和鹽補(bǔ)骨脂含 量的測(cè)定，所述制何首烏含量的測(cè)定包括以下步驟：
[0025] S1.色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水 為流動(dòng)相，乙腈和水的體積比為1:5，檢測(cè)波長(zhǎng)為320nm，理論板數(shù)按2，3，5，4' -四羥基二苯 乙稀-2-0-β-?-葡萄糖苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000;
[0026] S2.對(duì)照品溶液的制備:取2，3，5，4' -四羥基二苯乙烯-2_(H3-D-葡萄糖苷對(duì)照品 適量，精密稱定，加稀乙醇制成每lml含Ο. lmg的溶液，即為對(duì)照品溶液；
[0027] S3.供試品溶液的制備:取生發(fā)丸蜜丸取10g剪碎，研細(xì)，精密稱定，置具塞錐形瓶 中，精密加入稀乙醇50ml，稱定重量，加熱回流后用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量，加熱回流的溫 度為85°C，時(shí)間為25min，搖勻后用孔徑為0.45μπι的微孔濾膜過濾，取濾液，即為供試品溶 液；
[0028] S4.測(cè)定:分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10μ1，注入高效液相色譜儀中 測(cè)定，本品含制何首烏以2，3，5，4 ' -四羥基二苯乙烯-2-〇-i3-D-葡萄糖苷計(jì)，大蜜丸每丸不 得少于1.5mg;
[0029] 所述鹽補(bǔ)骨脂含量的測(cè)定包括以下步驟：
[0030] (1)色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-水 為流動(dòng)相，甲醇和水的體積比為1:1.2,檢測(cè)波長(zhǎng)為246nm，理論板數(shù)按補(bǔ)骨脂素峰計(jì)算應(yīng)不 低于3000;
[0031] (2)對(duì)照品溶液的制備:取補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制 成每lml含10yg的混合溶液，即為對(duì)照品溶液；
[0032] (3)供試品溶液的制備:取生發(fā)丸蜜丸5g剪碎，研細(xì)，精密稱定，置具塞錐形瓶中， 精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30min，超聲處理的功率400W，頻率為50KHz，用甲醇 補(bǔ)足減失的重量，搖勻后用孔徑為〇.45μπι的微孔濾膜過濾，取濾液，即為供試品溶液；
[0033] (4)測(cè)定:分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10μ1，注入高效液相色譜儀中 測(cè)定，本品含鹽補(bǔ)骨脂以補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素的總量計(jì)，大蜜丸每丸不得少于〇.76mg。
[0034] 實(shí)施例3:測(cè)定生發(fā)丸中有效成分含量，包括制何首烏的含量的測(cè)定和鹽補(bǔ)骨脂含 量的測(cè)定，所述制何首烏含量的測(cè)定包括以下步驟：
[0035] S1.色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水 為流動(dòng)相，乙腈和水的體積比為1:7，檢測(cè)波長(zhǎng)為320nm，理論板數(shù)按2，3，5，4' -四羥基二苯 乙稀-2-0-β-?-葡萄糖苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000;
[0036] S2.對(duì)照品溶液的制備:取2，3，5，4' -四羥基二苯乙烯-2_(H3-D-葡萄糖苷對(duì)照品 適量，精密稱定，加稀乙醇制成每lml含0. lmg的溶液，即為對(duì)照品溶液；
[0037] S3.供試品溶液的制備:取生發(fā)丸水蜜丸6g，研細(xì)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精 密加入稀乙醇50ml，稱定重量，加熱回流后用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量，加熱回流的溫度為95 °C，時(shí)間為35min，搖勻后用孔徑為0.45μπι的微孔濾膜過濾，取濾液，即為供試品溶液；
[0038] S4.測(cè)定:分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10μ1，注入高效液相色譜儀中 測(cè)定，本品含制何首烏以2,3,5,4'_四羥基二苯乙烯-2-〇-i3-D-葡萄糖苷計(jì)，水蜜丸每lg不 得少于〇.23mg;
[0039] 所述鹽補(bǔ)骨脂含量的測(cè)定包括