專利名稱：首烏丹參滴丸中天然冰片含量測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥首烏丹參滴丸產(chǎn)品中天然冰片的含量測(cè)定方法。
背景技術(shù)：
首烏丹參滴丸是天士力公司開發(fā)的中藥制劑，處方由丹參2 40份、三七1 30份、制首烏2 40份、女貞子1 20份、天然冰片0. 05 0. 8份、適量成型輔料和包衣材料等組成。具有活血止痛，滋補(bǔ)肝腎之功效。主治肝腎陰虛型冠心病、心絞痛，癥見胸脘痞悶，心前劇痛，伴頭昏目澀、腰膝酸軟、心煩失眠，舌暗紅，脈沉或細(xì)數(shù)。適用于穩(wěn)定型心絞痛而有上述癥狀者。 方中天然冰片又名龍腦，味辛苦，性微寒，歸心、脾、肺經(jīng)，其味辛散，具有開竅醒神、消腫止痛功效。 現(xiàn)有首烏丹參滴丸制劑存在質(zhì)量控制方法落后，產(chǎn)品質(zhì)量不易控制的缺點(diǎn)?，F(xiàn)有質(zhì)量控制方法中并沒有對(duì)其冰片成分進(jìn)行含量測(cè)定的內(nèi)容。故現(xiàn)有質(zhì)量控制方法不能有效控制產(chǎn)品的質(zhì)量，從而將影響產(chǎn)品的生產(chǎn)和保證質(zhì)量。 為有效控制產(chǎn)品質(zhì)量，我們建立了首烏丹參滴丸新的質(zhì)量控制方法，我們采用氣相色譜法對(duì)首烏丹參滴丸中天然冰片進(jìn)行了定量分析。為首烏丹參滴丸質(zhì)量控制方法提供了依據(jù)。該質(zhì)量控制方法精密度、靈敏度、穩(wěn)定性均好，確保產(chǎn)品質(zhì)量的"安全、均一、穩(wěn)定、有效、可控"。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種新的首烏丹參滴丸的質(zhì)量控制方法。 本發(fā)明方法包括對(duì)首烏丹參滴丸中的冰片成分進(jìn)行含量測(cè)定的步驟。 其中對(duì)冰片成分進(jìn)行含量測(cè)定采用氣相色譜法。 本發(fā)明方法包括將天然冰片對(duì)照品，首烏丹參滴丸供試品，不含冰片的首烏丹參滴丸供試品分別通過氣相色譜儀，按公式計(jì)算首烏丹參滴丸供試品中冰片的含量。
所用儀器為氣相色譜儀，色譜條件為色譜柱HP-INNOWAX柱(30mX0. 32mmX0. 5iim);載氣氮?dú)猓恢髁?lmL/min ;進(jìn)樣口溫度220。C ;檢測(cè)器溫度:240°C ;分流比10 : 1 ;程序升溫從140°C，以8°C /min升至180。C，保持3min ;進(jìn)樣量1 P l，理論塔板數(shù)按右旋龍腦峰計(jì)算應(yīng)不低于1900。 所用藥劑為天然冰片對(duì)照品；水楊酸甲酯；色譜純乙酸乙酯；首烏丹參滴丸；不含冰片的首烏丹參滴丸陰性供試品(天然冰片陰性滴丸)。其中優(yōu)選的儀器為美國Agilent6890氣相色譜儀，7683系列自動(dòng)進(jìn)樣器，F(xiàn)ID檢測(cè)器；HS6150D超聲波清洗儀。
測(cè)定方法 —、內(nèi)標(biāo)溶液和對(duì)照品溶液的制備 內(nèi)標(biāo)溶液的制備取水楊酸甲酯適量，加乙酸乙酯制成每lmL含lmg的溶液，作為
4內(nèi)標(biāo)溶液。 對(duì)照品溶液的制備取冰片對(duì)照品20. 0mg，精密稱定，置10mL量瓶中，加乙酸乙酯 溶解至刻度，精密量取1.5mL至10mL量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液3mL溶解并用乙酸乙酯稀 釋至刻度，搖勻，作為冰片對(duì)照品溶液。
二、檢測(cè)品溶液制備 供試品溶液的制備取首烏丹參滴丸供試品0. 5g，壓口，精密稱定，置10mL量瓶 中，精密加入內(nèi)標(biāo)3mL溶液和乙酸乙酯6mL，超聲處理10分鐘，放冷，用乙酸乙酯稀釋至刻 度，搖勻，濾過，即得。 陰性供試品溶液制備取不含冰片的首烏丹參滴丸陰性供試品0.5g，壓口，精密 稱定，置10mL量瓶中，加入乙酸乙酯9mL，超聲處理10分鐘，放冷，用乙酸乙酯稀釋至刻度， 搖勻，濾過，即得。
三、測(cè)定 分別吸取以上內(nèi)標(biāo)溶液，對(duì)照品溶液，供試品溶液和陰性供試品溶液各1 iU，注入 氣相色譜儀， 得到內(nèi)標(biāo)溶液色譜圖，對(duì)照品溶液色譜圖，供試品溶液色譜圖，陰性供試品溶液色 譜圖，測(cè)量陰性供試品溶液的峰面積，對(duì)照品溶液中冰片的峰面積，供試品溶液中冰片的峰 面積。
四、計(jì)算按下述公式計(jì)算供試品中冰片含量。 冰片含量(mg/g) = (NX A/A樣內(nèi)X C標(biāo))/ (A標(biāo)/A標(biāo)內(nèi)XM) 其中A為供試品中冰片的峰面積； A^a為供試品的內(nèi)標(biāo)物的陰性供試品溶液的峰面積 A^為標(biāo)準(zhǔn)溶液中冰片的峰面積； A標(biāo)內(nèi)為標(biāo)準(zhǔn)品的內(nèi)標(biāo)物的峰面積； C標(biāo)為標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(mg/ml); M為供試品稱樣量(g); N為供試品稀釋體積(N = 10ml)。 為驗(yàn)證本發(fā)明方法的"安全、均一、穩(wěn)定、有效、可控"。進(jìn)行了以下實(shí)驗(yàn) —、干擾試驗(yàn)分別取對(duì)照品溶液、供試品溶液和陰性供試品溶液各1 P l，注入氣色
譜儀，進(jìn)行測(cè)定。將陰性供試品色譜圖與對(duì)照品色譜圖和供試品色譜圖進(jìn)行比較，陰性供試
品在天然冰片對(duì)照品出峰的時(shí)間范圍內(nèi)未見任何雜峰，各色譜峰分離良好。 證明，所建GC檢測(cè)丹參滴丸中天然冰片含量的方法可排除干擾，該方法可靠、準(zhǔn)
確，可信度高。 二、線性試驗(yàn)分別精密量取濃度為2. 07mg/ml天然冰片對(duì)照品溶液0. 25mL， 0. 50mL， 1. OOmL， 1. 50mL， 2. OOmL， 2. 50mL于10mL容量瓶中，加入3mL內(nèi)標(biāo)溶液，用乙酸乙酉旨 定容，搖勻，分別吸取各對(duì)照品溶液1. Oii L注入氣相色譜儀分析，記錄峰面積。以量取天然 冰片的體積為橫坐標(biāo)，以天然冰片峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積之比為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，供試 品溶液中天然冰片含量在O. 05175mg/ml 0. 5175mg/ml范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，標(biāo)準(zhǔn)曲線 為y = 1. 0204x-0. 0082，相關(guān)系數(shù)R2為0. 9999。 三、精密度試驗(yàn)取同一對(duì)照品及內(nèi)標(biāo)物的混合溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，每次進(jìn)樣1 Pi 。計(jì)算對(duì)照品與內(nèi)標(biāo)物的峰面積比值，RSD為0. 048 % 。 四、穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一供試品溶液(批號(hào)20080201)及內(nèi)標(biāo)物的混合溶液，在 室溫下，分別在0h， 2h， 4h， 6h， 8h， 10h進(jìn)樣，計(jì)算天然冰片與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值，RSD為 0. 031%，表明供試品在10h內(nèi)穩(wěn)定。 五、重復(fù)性試驗(yàn)取同一批號(hào)(批號(hào)20080201)供試品6份，按供試品溶液的制備 方法進(jìn)行制備，并測(cè)定冰片含量，測(cè)得供試品中冰片含量為5. 23mg/g， RSD為1. 51%，試驗(yàn) 結(jié)果表明該方法重復(fù)性良好，即方法精密度良好。 六、回收率試驗(yàn)取同一批號(hào)(批號(hào)20080201)供試品6份，每份約0. 25g，壓口 ，精 密稱定，分別加入對(duì)照品適量，再按供試品溶液的制備方法進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算回收率。該法回 收率為101. 6%， RSD為2. 0%，試驗(yàn)結(jié)果表明該方法回收率良好。 七、供試品含量測(cè)定取20080201、20080202和20080203批首烏丹參滴丸，按上述 方法進(jìn)行天然冰片的含量測(cè)定并計(jì)算，其含量分別為5. 22% 、5. 10 %和5. 19%。
本發(fā)明的一些處理方法是經(jīng)過篩選得到的， 如供試品處理方法本品為包衣滴丸，壓口后的供試品超聲提取10min，滴丸溶 散，滴丸的包衣層亦溶散；而不壓口的供試品經(jīng)超聲提取10min后，滴丸溶散，但包衣層存 在，不能保證待測(cè)成分釋放完全，影響含量測(cè)定結(jié)果，故選用壓口 。 提取方法的選擇(1)供試品加乙酸乙酯超聲處理10min ; (2)供試品加乙酸乙酯 溶解。方法(1)較方法(2)操作簡(jiǎn)便快速，有效減小待測(cè)成分的揮發(fā)損失，故選定(1)為本 試驗(yàn)的提取方法。 測(cè)定方法的選擇乙酸乙酯的揮發(fā)性很強(qiáng)，當(dāng)全部采用內(nèi)標(biāo)液對(duì)供試品進(jìn)行提取 和稀釋定容，由于乙酸乙酯的揮發(fā)，內(nèi)標(biāo)溶液的加入體積增加，內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的加入量可能會(huì)大 于實(shí)際的加入量，造成內(nèi)標(biāo)物質(zhì)響應(yīng)增大，含量測(cè)定結(jié)果偏低。本發(fā)明采用內(nèi)標(biāo)法對(duì)首烏丹 參滴丸中天然冰片的含量進(jìn)行測(cè)定，并依據(jù)內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的響應(yīng)情況，確定適宜的內(nèi)標(biāo)物質(zhì)加 入量，再以乙酸乙酯進(jìn)行稀釋定容，使得內(nèi)標(biāo)物質(zhì)和待測(cè)成分的響應(yīng)值更加接近，減小內(nèi)標(biāo) 物質(zhì)用量，而且減小了由于乙酸乙酯揮發(fā)引入的誤差，因此本方法具有可行性。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1 : 將天然冰片對(duì)照品，首烏丹參滴丸供試品，不含冰片的首烏丹參滴丸供試品分別 通過氣相色譜儀，按公式計(jì)算首烏丹參滴丸供試品中冰片的含量。 所用儀器為美國Agilent6890氣相色譜儀，7683系列自動(dòng)進(jìn)樣器，F(xiàn)ID檢測(cè)器； HS6150D超聲波清洗儀。色譜條件為色譜柱HP-INNOWAX柱(30mX0. 32mmX0. 5iim);載氣氮?dú)?；柱?br> 量:lmL/min ;進(jìn)樣口溫度:220。C;檢測(cè)器溫度:240。C;分流比10 : 1 ;程序升溫從140°C，
以8°C /min升至18(TC，保持3min ;進(jìn)樣量1 y 1，理論塔板數(shù)按右旋龍腦峰計(jì)算應(yīng)不低于 1900。
所用藥劑為天然冰片對(duì)照品；水楊酸甲酯；色譜純乙酸乙酯；首烏丹參滴丸；不 含天然冰片的首烏丹參滴丸陰性供試品(天然冰片陰性滴丸)。
測(cè)定方法
—、內(nèi)標(biāo)溶液和對(duì)照品溶液的制備 內(nèi)標(biāo)溶液的制備取水楊酸甲酯適量，加乙酸乙酯制成每lmL含lmg的溶液，作為 內(nèi)標(biāo)溶液。 對(duì)照品溶液的制備取冰片對(duì)照品20. 0mg，精密稱定，置lOmL量瓶中，加乙酸乙酯 溶解至刻度，精密量取1.5mL至10mL量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液3mL溶解并用乙酸乙酯稀 釋至刻度，搖勻，作為冰片對(duì)照品溶液。
二、檢測(cè)品溶液制備 供試品溶液的制備取首烏丹參滴丸供試品0. 5g，壓口，精密稱定，置10mL量瓶 中，精密加入內(nèi)標(biāo)3mL溶液和乙酸乙酯6mL，超聲處理10分鐘，放冷，用乙酸乙酯稀釋至刻 度，搖勻，濾過，即得。 陰性供試品溶液制備取不含冰片的首烏丹參滴丸陰性供試品0. 5g，壓口，精密 稱定，置10mL量瓶中，加乙酸乙酯9mL，超聲處理10分鐘，放冷，用乙酸乙酯稀釋至刻度，搖 勻，濾過，即得。
三、測(cè)定 分別吸取以上內(nèi)標(biāo)溶液，對(duì)照品溶液，供試品溶液和陰性供試品溶液各1 iU，注入 氣相色譜儀， 得到內(nèi)標(biāo)溶液色譜圖，對(duì)照品溶液色譜圖，供試品溶液色譜圖，陰性供試品溶液色
譜圖，測(cè)量陰性供試品溶液所對(duì)應(yīng)的峰面積為都為O，對(duì)照品溶液中天然冰片的峰面積為
427. 2，內(nèi)標(biāo)物水楊酸甲酯的峰面積為283. 2，供試品溶液中天然冰片的峰面積為385. 1，內(nèi)
標(biāo)物水楊酸甲酯的峰面積為293. 0。 四、計(jì)算按下述公式計(jì)算供試品中冰片含量。 冰片含量(mg/g) = (NXA/A樣內(nèi)XC標(biāo))/(A標(biāo)/A標(biāo)內(nèi)XM) = (10 X 20/10 X 1. 5/10 X 385. 1/293. 0) / (0. 500 X 427. 2/283. 2) = 5. 23mg/g 其中A為供試品中冰片的峰面積385. 1 ; A^a為供試品的內(nèi)標(biāo)物的陰性供試品溶液的峰面積293. 0 ; A^為標(biāo)準(zhǔn)溶液中冰片的峰面積427. 2 ; A標(biāo)內(nèi)為標(biāo)準(zhǔn)品的內(nèi)標(biāo)物的峰面積283. 2 C標(biāo)為標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度20/10X 1. 5/10 ; M為供試品稱樣量0. 500 ; N供試品為稀釋體積10ml 。
權(quán)利要求
一種首烏丹參滴丸的質(zhì)量控制方法，包括對(duì)首烏丹參滴丸中的冰片成分采用氣相色譜法進(jìn)行含量測(cè)定的步驟，其特征在于，樣品在檢測(cè)前經(jīng)過提取，在提取前經(jīng)過壓口處理。
2. 權(quán)利要求l的質(zhì)量控制方法，其特征在于，樣品在檢測(cè)前壓口后加乙酸乙酯經(jīng)超聲提取5 15min。
3. 權(quán)利要求2的質(zhì)量控制方法，其特征在于，樣品在檢測(cè)前壓口后經(jīng)超聲提取10min。
4. 權(quán)利要求3的質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述對(duì)首烏丹參滴丸中的冰片成分進(jìn)行含量測(cè)定的步驟包括將天然冰片對(duì)照品，首烏丹參滴丸供試品，不含冰片的首烏丹參滴丸陰性供試品分別通過氣相色譜儀，按公式計(jì)算首烏丹參滴丸供試品中冰片的含量。
5. 權(quán)利要求4的質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述對(duì)首烏丹參滴丸中的冰片成分進(jìn)行含量測(cè)定的方法如下一、 內(nèi)標(biāo)溶液和對(duì)照品溶液的制備內(nèi)標(biāo)溶液的制備取水楊酸甲酯適量，加乙酸乙酯制成每lmL含lmg的溶液，作為內(nèi)標(biāo)溶液；對(duì)照品溶液的制備取冰片對(duì)照品20. 0mg，精密稱定，置10mL量瓶中，加乙酸乙酯溶解至刻度，精密量取1.5mL至10mL量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液3mL溶解并用乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，作為冰片對(duì)照品溶液，二、 檢測(cè)品溶液制備供試品溶液的制備取首烏丹參滴丸供試品0. 5g，壓口，精密稱定，置10mL量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)3mL溶液和乙酸乙酯6mL，超聲處理10分鐘，放冷，用乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得；陰性供試品溶液制備取不含冰片的首烏丹參滴丸陰性供試品0. 5g，壓口，精密稱定，置10mL量瓶中，加乙酸乙酯9mL，超聲處理10分鐘，放冷，用乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得，分別吸取以上內(nèi)標(biāo)溶液，對(duì)照品溶液，供試品溶液和陰性供試品溶液各1P1，注入氣相色譜儀，得到內(nèi)標(biāo)溶液色譜圖，對(duì)照品溶液色譜圖，供試品溶液色譜圖，陰性供試品溶液色譜圖，測(cè)量陰性供試品溶液的峰面積，對(duì)照品溶液中冰片的峰面積，供試品溶液中冰片的峰面積。按公式計(jì)算供試品中冰片含量。
6. 權(quán)利要求5的質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述對(duì)首烏丹參滴丸中的冰片成分進(jìn)行含量測(cè)定的公式如下冰片含量(mg/g) = (NXA/A樣內(nèi)XC標(biāo))/(A標(biāo)/A標(biāo)內(nèi)XM)其中A為供試品中冰片的峰面積；A^rt為供試品的內(nèi)標(biāo)物的陰性供試品溶液的峰面積Ag為標(biāo)準(zhǔn)溶液中冰片的峰面積；A，^為標(biāo)準(zhǔn)品的內(nèi)標(biāo)物的峰面積；C標(biāo)為標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(mg/ml);M為供試品稱樣量(g);N為供試品稀釋體積(N = 10ml)。
7.權(quán)利要求6的質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述對(duì)首烏丹參滴丸中的冰片成分進(jìn)行含量測(cè)定的方法如下測(cè)定方法一、 內(nèi)標(biāo)溶液和對(duì)照品溶液的制備內(nèi)標(biāo)溶液的制備取水楊酸甲酯適量，加乙酸乙酯制成每lmL含lmg的溶液，作為內(nèi)標(biāo)溶液；對(duì)照品溶液的制備取冰片對(duì)照品20. 0mg，精密稱定，置10mL量瓶中，加乙酸乙酯溶解至刻度，精密量取1.5mL至10mL量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液3mL溶解并用乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，作為冰片對(duì)照品溶液；二、 檢測(cè)品溶液制備供試品溶液的制備取首烏丹參滴丸供試品0. 5g，壓口，精密稱定，置10mL量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)3mL溶液和乙酸乙酯6mL，超聲處理10分鐘，放冷，用乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得；陰性供試品溶液制備取不含冰片的首烏丹參滴丸陰性供試品0. 5g，壓口，精密稱定，置10mL量瓶中，加乙酸乙酯9mL，超聲處理10分鐘，放冷，用乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得；分別吸取以上內(nèi)標(biāo)溶液，對(duì)照品溶液，供試品溶液和陰性供試品溶液各lPl，注入氣相色譜儀，得到內(nèi)標(biāo)溶液色譜圖，對(duì)照品溶液色譜圖，供試品溶液色譜圖，陰性供試品溶液色譜圖，測(cè)量陰性供試品溶液的峰面積，對(duì)照品溶液中冰片的峰面積，供試品溶液中冰片的峰面積；四、計(jì)算按下述公式計(jì)算供試品中冰片含量；冰片含量(mg/g) = (NXA/A樣內(nèi)XC標(biāo))/(A標(biāo)/A標(biāo)內(nèi)XM)其中A為供試品中冰片的峰面積；A^rt為供試品的內(nèi)標(biāo)物的陰性供試品溶液的峰面積Ag為標(biāo)準(zhǔn)溶液中冰片的峰面積；A，^為標(biāo)準(zhǔn)品的內(nèi)標(biāo)物的峰面積；C標(biāo)為標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(mg/ml);M為供試品稱樣量(g);N為供試品稀釋體積(N = 10ml);其中，所用儀器為美國Agilent6890氣相色譜儀；色譜條件為色譜柱HP-INNOWAX柱(30mX0. 32mmX0. 5iim);載氣氮?dú)?；柱流?lmL/min ;進(jìn)樣口溫度220。C ;檢測(cè)器溫度:`240°C ;分流比10 : 1 ;程序升溫從140°C，以8°C /min升至180。C，保持3min ;進(jìn)樣量`1 P l，理論塔板數(shù)按右旋龍腦峰計(jì)算應(yīng)不低于1900 ;所用藥劑為天然冰片對(duì)照品；水楊酸甲酯；色譜純乙酸乙酯；首烏丹參滴丸；不含冰片的首烏丹參滴丸陰性供試品。
全文摘要
本發(fā)明提供一種新的首烏丹參滴丸的質(zhì)量控制方法，本發(fā)明方法包括對(duì)首烏丹參滴丸中的冰片成分進(jìn)行含量測(cè)定的步驟。
文檔編號(hào)G01N30/86GK101744891SQ200810153629
公開日2010年6月23日 申請(qǐng)日期2008年11月28日 優(yōu)先權(quán)日2008年11月28日
發(fā)明者周水平, 李莉, 韓建平, 馬潔 申請(qǐng)人:天津天士力制藥股份有限公司