一種發(fā)酵法提取魷魚眼中透明質(zhì)酸的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種發(fā)酵法提取魷魚眼中透明質(zhì)酸的方法，屬于透明質(zhì)酸領(lǐng)域。本發(fā)明先活化獸疫鏈球菌得菌液，再從魷魚眼加入獸疫鏈球菌液進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)得發(fā)酵液，對(duì)發(fā)酵液醇沉得粗透明質(zhì)酸鈉沉淀物，加入氯化鈉溶液溶解后加入胰蛋白酶酶解得酶解液，將酶解液中的透明質(zhì)酸鈉絡(luò)合反應(yīng)得絡(luò)合物，分離后解離，調(diào)節(jié)解離液pH后用超濾膜過濾，得透明質(zhì)酸鈉水溶液，通過陽離子交換樹脂，得透明質(zhì)酸水溶液，蒸發(fā)濃縮后真空干燥得透明質(zhì)酸粉末，本發(fā)明利用微生物發(fā)酵法從魷魚眼制得透明質(zhì)酸，不僅制備方法簡單，成本低廉，而且提取率為45～60%、純度為95.9～99.9％、生物活性高、保濕性強(qiáng)，在化妝品中具有廣泛的應(yīng)用。
【專利說明】
一種發(fā)酵法提取魷魚眼中透明質(zhì)酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明公開了一種發(fā)酵法提取魷魚眼中透明質(zhì)酸的方法，屬于透明質(zhì)酸領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]透明質(zhì)酸是一種糖胺聚糖，在人體內(nèi)廣泛分布，大于50%的HA分布在人體的皮膚、肺、腸道中，在血液、關(guān)節(jié)滑液、臍帶中也有分布。其為人體的正常生理活動(dòng)發(fā)揮著重要作用，如影響細(xì)胞的增殖和分化、調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)、潤滑關(guān)節(jié)、調(diào)節(jié)血管壁的通透性、創(chuàng)傷修復(fù)等。由于其特殊的生理功能，近年來透明質(zhì)酸在醫(yī)藥、保健品行業(yè)得到廣泛的應(yīng)用。
[0003]魷魚眼睛玻璃體含有豐富的透明質(zhì)酸，由于透明質(zhì)酸具有保濕、抗氧化等多種活性而備受關(guān)注，而魷魚眼睛又是沿海地區(qū)一類數(shù)量較大的廢棄物，可以作為提取透明質(zhì)酸的資源。
[0004]透明質(zhì)酸的生產(chǎn)方法有以動(dòng)物組織為原料的提取法和微生物發(fā)酵法。從動(dòng)物組織中提取HA常用的原料有雞冠、臍帶、眼玻璃體和豬皮等，生產(chǎn)工藝過程主要包括原料脫水、磨碎、浸泡、提取、除雜、沉淀和分級(jí)分離等。提取法由于原料有限，且原料中HA含量較低，因而生產(chǎn)成本較高，限制了它的應(yīng)用。微生物發(fā)酵法是利用某些種屬的鏈球菌在生長繁殖過程中向胞外分泌以HA為主要成分的莢膜而生產(chǎn)透明質(zhì)酸的方法，與動(dòng)物組織提取法相比，發(fā)酵法生產(chǎn)透明質(zhì)酸具有不受原料資源限制、成本低、產(chǎn)量高、保濕性強(qiáng)、品質(zhì)穩(wěn)定、有較高的相對(duì)分子量、分離純化工藝簡便、易于大規(guī)模生產(chǎn)、且無動(dòng)物來源致病病毒污染的危險(xiǎn)等優(yōu)點(diǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明主要解決的技術(shù)問題:針對(duì)傳統(tǒng)采用動(dòng)物組織為原料提取透明質(zhì)酸的生產(chǎn)過程中，會(huì)導(dǎo)致分離過程復(fù)雜、透明質(zhì)酸價(jià)格昂貴、無法在化妝品中大量使用，以及提取率極低的問題，提供了一種發(fā)酵法提取魷魚眼中透明質(zhì)酸的方法，本發(fā)明先活化獸疫鏈球菌得菌液，再從魷魚眼加入獸疫鏈球菌液進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)得發(fā)酵液，從發(fā)酵液中進(jìn)行醇沉得沉淀物，加入氯化鈉溶液溶解后加入胰蛋白酶酶解得酶解液，將酶解液中的透明質(zhì)酸進(jìn)行絡(luò)合反應(yīng)得絡(luò)合物，分離后解離液，調(diào)節(jié)PH后截留用超濾膜過濾，即可得透明質(zhì)酸鈉水溶液，通過陽離子交換樹脂，得透明質(zhì)酸水溶液，蒸發(fā)濃縮后真空干燥得透明質(zhì)酸粉末，本發(fā)明利用微生物發(fā)酵法從魷魚眼制得透明質(zhì)酸，不僅制備方法簡單，成本低廉，而且提取率高、純度好、生物活性高、保濕性強(qiáng)，在化妝品中具有廣泛的應(yīng)用。
[0006]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是:
(1)將冷凍保存的獸疫鏈球菌ATCC39920接種到液體培養(yǎng)基中，在35?37°C溫度下培養(yǎng)20?24h，培養(yǎng)后得活化的獸疫鏈球菌菌液，備用；所述的液體培養(yǎng)基為15?20g蛋白胨、12?16g葡萄糖、0.5?0.8g磷酸氫二鈉、3?4g氯化鈉，加水定容到I?2L，并調(diào)節(jié)pH值為7.0，調(diào)節(jié)后在120?125°C下高溫滅菌處理10?20min;
(2)稱取200?250g魷魚眼放入丙酮中浸泡I?2h后取出，在通風(fēng)處放置5?7h后放入絞碎機(jī)中絞碎，將絞碎后的魷魚眼按質(zhì)量比I: I和水混合，并研磨成糊狀物，再將糊狀物按質(zhì)量比1:10與質(zhì)量分?jǐn)?shù)I?3%氯化鈉溶液混合，放入鍋中，在70?800C下蒸煮15?20min，蒸煮后冷卻至37?40°C，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為7.5?8.0;
(3)向上述調(diào)節(jié)后pH的混合液中加入總質(zhì)量I?2%酵母粉和混合液體積3?5%步驟(I)備用的獸疫鏈球菌菌液，保持在37?40 °C溫度下發(fā)酵培養(yǎng)18?20h，發(fā)酵培養(yǎng)后用紗布過濾，得發(fā)酵液；
(4)將上述發(fā)酵液用質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%鹽酸調(diào)節(jié)pH值為5.5?6.0，調(diào)節(jié)后加入總體積2?4倍質(zhì)量分?jǐn)?shù)90%乙醇溶液，機(jī)械攪拌20?30min后離心分離，得沉淀物，并用無水乙醇清洗2?3次，放入真空干燥箱中在50?60 °C下干燥3?5h;
(5)將上述干燥后的固體按固液比1:10與質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%氯化鈉溶液混合，攪拌至固體溶解，溶解后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%鹽酸調(diào)節(jié)pH值為7.0，并向其中加入7000?8000U/g胰蛋白酶，在180?250?下超聲處理15?20111；[11，處理后在50?55 °C下酶解2?3h后在100°C下滅菌5?1min，離心分離得上清液；
(6 )將上述上清液放入濃縮罐中減壓濃縮至原體積15?20%，向濃縮液中加入濃縮液體積2?3%濃度60?80g/L十六烷基三甲基溴化銨溶液，絡(luò)合反應(yīng)30?40min后離心分離得絡(luò)合物，將絡(luò)合物溶于質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%氯化鈉溶液中解離2?3h，得解離液，并調(diào)節(jié)pH值為3.0?4.0，調(diào)節(jié)后用截留分子量4X 14?9X 14的超濾膜過濾，得透明質(zhì)酸鈉水溶液，通過陽離子交換樹脂，得透明質(zhì)酸水溶液，蒸發(fā)濃縮后真空干燥得透明質(zhì)酸粉末。
[0007]本發(fā)明的應(yīng)用方法:本發(fā)明制備得到的透明質(zhì)酸分子量為4X14?9X104，透明質(zhì)酸保濕性好，應(yīng)用在化妝品中可以提高化妝品的保濕性，使用后20?24h后的保濕率仍可高達(dá)91?94%。
[0008]本發(fā)明的有益效果是:
(1)本發(fā)明利用微生物發(fā)酵法從魷魚眼制得透明質(zhì)酸，制備方法簡單，成本低廉；
(2)本發(fā)明制備得的透明質(zhì)酸產(chǎn)品提取率為45?60%、純度為95.9?99.9%、生物活性高，在化妝品中具有廣泛的應(yīng)用。
【具體實(shí)施方式】
[0009]首先將冷凍保存的獸疫鏈球菌ATCC39920接種到液體培養(yǎng)基中，在35?37°C溫度下培養(yǎng)20?24h，培養(yǎng)后得活化的獸疫鏈球菌菌液，備用;所述的液體培養(yǎng)基為15?20g蛋白胨、12?16g葡萄糖、0.5?0.8g磷酸氫二鈉、3?4g氯化鈉，加水定容到I?2L，并調(diào)節(jié)pH值為7.0，調(diào)節(jié)后在120?125°(:下高溫滅菌處理10?201^11;稱取200?2508魷魚眼放入丙酮中浸泡I?2h后取出，在通風(fēng)處放置5?7h后放入絞碎機(jī)中絞碎，將絞碎后的魷魚眼按質(zhì)量比1:1和水混合，并研磨成糊狀物，再將糊狀物按質(zhì)量比I: 10與質(zhì)量分?jǐn)?shù)I?3%氯化鈉溶液混合，放入鍋中，在70?80°C下蒸煮15?20min，蒸煮后冷卻至37?40°C，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為7.5?8.0;向上述調(diào)節(jié)后pH的混合液中加入總質(zhì)量I?2%酵母粉和混合液體積3?5%備用的獸疫鏈球菌菌液，保持在37?40 °C溫度下發(fā)酵培養(yǎng)18?20h，發(fā)酵培養(yǎng)后用紗布過濾，得發(fā)酵液;將上述發(fā)酵液用質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%鹽酸調(diào)節(jié)pH值為5.5?6.0，調(diào)節(jié)后加入總體積2?4倍質(zhì)量分?jǐn)?shù)90%乙醇溶液，機(jī)械攪拌20?30min后離心分離，得沉淀物，并用無水乙醇清洗2?3次，放入真空干燥箱中在50?60 °C下干燥3?5h;將上述干燥后的固體按固液比1:10與質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%氯化鈉溶液混合，攪拌至固體溶解，溶解后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%鹽酸調(diào)節(jié)pH值為7.0，并向其中加入7000?8000U/g胰蛋白酶，在180?250rf超聲處理15?20min，處理后在50?55°C下酶解2?3h后在100°C下滅菌5?lOmin，離心分離得上清液;將上述上清液放入濃縮罐中減壓濃縮至原體積15?20%，向濃縮液中加入濃縮液體積2?3%濃度60?80g/L十六烷基三甲基溴化銨溶液，絡(luò)合反應(yīng)30?40min后離心分離得絡(luò)合物，將絡(luò)合物溶于質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%氯化鈉溶液中解離2?3h，得解離液，并調(diào)節(jié)pH值為3.0?4.0，調(diào)節(jié)后用截留分子量4X 14?9X 14的超濾膜過濾，得透明質(zhì)酸鈉水溶液，通過陽離子交換樹脂，得透明質(zhì)酸水溶液，蒸發(fā)濃縮后真空干燥得透明質(zhì)酸粉末。
[0010]實(shí)例I
首先將冷凍保存的獸疫鏈球菌ATCC39920接種到液體培養(yǎng)基中，在35°C溫度下培養(yǎng)20h，培養(yǎng)后得活化的獸疫鏈球菌菌液，備用;所述的液體培養(yǎng)基為15g蛋白胨、12g葡萄糖、0.5g磷酸氫二鈉、3g氯化鈉，加水定容到IL，并調(diào)節(jié)pH值為7.0，調(diào)節(jié)后在120 °C下高溫滅菌處理1min;稱取200g魷魚眼放入丙酮中浸泡Ih后取出，在通風(fēng)處放置5h后放入絞碎機(jī)中絞碎，將絞碎后的魷魚眼按質(zhì)量比1:1和水混合，并研磨成糊狀物，再將糊狀物按質(zhì)量比1:10與質(zhì)量分?jǐn)?shù)1%氯化鈉溶液混合，放入鍋中，在70°C下蒸煮15min，蒸煮后冷卻至37°C，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為7.5;向上述調(diào)節(jié)后pH的混合液中加入總質(zhì)量1%酵母粉和混合液體積3%備用的獸疫鏈球菌菌液，保持在37°C溫度下發(fā)酵培養(yǎng)18h，發(fā)酵培養(yǎng)后用紗布過濾，得發(fā)酵液;將上述發(fā)酵液用質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%鹽酸調(diào)節(jié)pH值為5.5，調(diào)節(jié)后加入總體積2倍質(zhì)量分?jǐn)?shù)90%乙醇溶液，機(jī)械攪拌20min后離心分離，得沉淀物，并用無水乙醇清洗2次，放入真空干燥箱中在50 °C下干燥3h;將上述干燥后的固體按固液比1:1O與質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%氯化鈉溶液混合，攪拌至固體溶解，溶解后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%鹽酸調(diào)節(jié)pH值為7.0，并向其中加入7000U/g胰蛋白酶，在180W下超聲處理15min，處理后在50°C下酶解2h后在100°C下滅菌5min，離心分離得上清液;將上述上清液放入濃縮罐中減壓濃縮至原體積15%，向濃縮液中加入濃縮液體積2%濃度60g/L十六烷基三甲基溴化銨溶液，絡(luò)合反應(yīng)30min后離心分離得絡(luò)合物，將絡(luò)合物溶于質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%氯化鈉溶液中解離2h，得解離液，并調(diào)節(jié)pH值為3.0，調(diào)節(jié)后用截留分子量4X 14的超濾膜過濾，得透明質(zhì)酸鈉水溶液，通過陽離子交換樹脂，得透明質(zhì)酸水溶液，蒸發(fā)濃縮后真空干燥得透明質(zhì)酸粉末。
[0011]本發(fā)明制備得到的透明質(zhì)酸產(chǎn)品提取率為45%、純度為95.9%，透明質(zhì)酸分子量為4X104，透明質(zhì)酸保濕性好，應(yīng)用在化妝品中可以提高化妝品的保濕性，使用后20h后的保濕率仍可高達(dá)91%。
[0012]
實(shí)例2
首先將冷凍保存的獸疫鏈球菌ATCC39920接種到液體培養(yǎng)基中，在36°C溫度下培養(yǎng)22h，培養(yǎng)后得活化的獸疫鏈球菌菌液，備用;所述的液體培養(yǎng)基為17g蛋白胨、14g葡萄糖、0.6g磷酸氫二鈉、3.5g氯化鈉，加水定容到1.5L，并調(diào)節(jié)pH值為7.0，調(diào)節(jié)后在123°C下高溫滅菌處理15min;稱取200?250g魷魚眼放入丙酮中浸泡1.5h后取出，在通風(fēng)處放置6h后放入絞碎機(jī)中絞碎，將絞碎后的魷魚眼按質(zhì)量比1:1和水混合，并研磨成糊狀物，再將糊狀物按質(zhì)量比1:10與質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%氯化鈉溶液混合，放入鍋中，在75°C下蒸煮17min，蒸煮后冷卻至39°C，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為7.8;向上述調(diào)節(jié)后pH的混合液中加入總質(zhì)量1.5%酵母粉和混合液體積4%備用的獸疫鏈球菌菌液，保持在38°C溫度下發(fā)酵培養(yǎng)19h，發(fā)酵培養(yǎng)后用紗布過濾，得發(fā)酵液;將上述發(fā)酵液用質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%鹽酸調(diào)節(jié)pH值為5.7，調(diào)節(jié)后加入總體積3倍質(zhì)量分?jǐn)?shù)90%乙醇溶液，機(jī)械攪拌25min后離心分離，得沉淀物，并用無水乙醇清洗2次，放入真空干燥箱中在55°C下干燥4h;將上述干燥后的固體按固液比1:10與質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%氯化鈉溶液混合，攪拌至固體溶解，溶解后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%鹽酸調(diào)節(jié)pH值為7.0，并向其中加入7500U/g胰蛋白酶，在220W下超聲處理17min，處理后在53°C下酶解2.5h后在100°C下滅菌8min，離心分離得上清液;將上述上清液放入濃縮罐中減壓濃縮至原體積17%，向濃縮液中加入濃縮液體積2.5%濃度70g/L十六烷基三甲基溴化銨溶液，絡(luò)合反應(yīng)35min后離心分離得絡(luò)合物，將絡(luò)合物溶于質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%氯化鈉溶液中解離2.5h，得解離液，并調(diào)節(jié)pH值為3.5，調(diào)節(jié)后用截留分子量6X 14的超濾膜過濾，得透明質(zhì)酸鈉水溶液，通過陽離子交換樹脂，得透明質(zhì)酸水溶液，蒸發(fā)濃縮后真空干燥得透明質(zhì)酸粉末。
[0013]本發(fā)明制備得到的透明質(zhì)酸產(chǎn)品提取率為45%、純度為95.9%，透明質(zhì)酸分子量為4X104，透明質(zhì)酸保濕性好，應(yīng)用在化妝品中可以提高化妝品的保濕性，使用后22h后的保濕率仍可高達(dá)91%。
[0014]實(shí)例3
首先將冷凍保存的獸疫鏈球菌ATCC39920接種到液體培養(yǎng)基中，在37°C溫度下培養(yǎng)24h，培養(yǎng)后得活化的獸疫鏈球菌菌液，備用;所述的液體培養(yǎng)基為20g蛋白胨、16g葡萄糖、
0.8g磷酸氫二鈉、4g氯化鈉，加水定容到2L，并調(diào)節(jié)pH值為7.0，調(diào)節(jié)后在125°C下高溫滅菌處理20min;稱取250g魷魚眼放入丙酮中浸泡2h后取出，在通風(fēng)處放置7h后放入絞碎機(jī)中絞碎，將絞碎后的魷魚眼按質(zhì)量比1:1和水混合，并研磨成糊狀物，再將糊狀物按質(zhì)量比1:10與質(zhì)量分?jǐn)?shù)3%氯化鈉溶液混合，放入鍋中，在80°C下蒸煮20min，蒸煮后冷卻至40°C，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為8.0;向上述調(diào)節(jié)后pH的混合液中加入總質(zhì)量2%酵母粉和混合液體積5%備用的獸疫鏈球菌菌液，保持在40°C溫度下發(fā)酵培養(yǎng)20h，發(fā)酵培養(yǎng)后用紗布過濾，得發(fā)酵液;將上述發(fā)酵液用質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%鹽酸調(diào)節(jié)pH值為6.0，調(diào)節(jié)后加入總體積4倍質(zhì)量分?jǐn)?shù)90%乙醇溶液，機(jī)械攪拌30min后離心分離，得沉淀物，并用無水乙醇清洗3次，放入真空干燥箱中在60 °C下干燥5h;將上述干燥后的固體按固液比1:1O與質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%氯化鈉溶液混合，攪拌至固體溶解，溶解后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%鹽酸調(diào)節(jié)pH值為7.0，并向其中加入8000U/g胰蛋白酶，在250W下超聲處理20min，處理后在55 °C下酶解3h后在100 °C下滅菌1min，離心分離得上清液;將上述上清液放入濃縮罐中減壓濃縮至原體積20%，向濃縮液中加入濃縮液體積3%濃度80g/L十六烷基三甲基溴化銨溶液，絡(luò)合反應(yīng)40min后離心分離得絡(luò)合物，將絡(luò)合物溶于質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%氯化鈉溶液中解離3h，得解離液，并調(diào)節(jié)pH值為4.0，調(diào)節(jié)后用截留分子量9 X 14的超濾膜過濾，得透明質(zhì)酸鈉水溶液，通過陽離子交換樹脂，得透明質(zhì)酸水溶液，蒸發(fā)濃縮后真空干燥得透明質(zhì)酸粉末。
[0015]本發(fā)明制備得到的透明質(zhì)酸產(chǎn)品提取率為60%、純度為99.9%，透明質(zhì)酸分子量為9X 104，透明質(zhì)酸保濕性好，應(yīng)用在化妝品中可以提高化妝品的保濕性，使用后24h后的保濕率仍可高達(dá)94%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種發(fā)酵法提取魷魚眼中透明質(zhì)酸的方法，其特征在于具體制備步驟為: 將冷凍保存的獸疫鏈球菌ATCC39920接種到液體培養(yǎng)基中，在35?37°C溫度下培養(yǎng)20?24h，培養(yǎng)后得活化的獸疫鏈球菌菌液，備用;所述的液體培養(yǎng)基為15?20g蛋白胨、12?16g葡萄糖、0.5?0.8g磷酸氫二鈉、3?4g氯化鈉，加水定容到1?2L，并調(diào)節(jié)pH值為7.0，調(diào)節(jié)后在120?125°C下高溫滅菌處理10?20min; 稱取200?250g魷魚眼放入丙酮中浸泡1?2h后取出，在通風(fēng)處放置5?7h后放入絞碎機(jī)中絞碎，將絞碎后的魷魚眼按質(zhì)量比1: 1和水混合，并研磨成糊狀物，再將糊狀物按質(zhì)量比1:1O與質(zhì)量分?jǐn)?shù)1?3%氯化鈉溶液混合，放入鍋中，在70?80°C下蒸煮15?20min，蒸煮后冷卻至37?40°C，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為7.5?8.0; 向上述調(diào)節(jié)后pH的混合液中加入總質(zhì)量1?2%酵母粉和混合液體積3?5%步驟(1)備用的獸疫鏈球菌菌液，保持在37?40 0C溫度下發(fā)酵培養(yǎng)18?20h，發(fā)酵培養(yǎng)后用紗布過濾，得發(fā)酵液； 將上述發(fā)酵液用質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%鹽酸調(diào)節(jié)pH值為5.5?6.0，調(diào)節(jié)后加入發(fā)酵液總體積2?4倍質(zhì)量分?jǐn)?shù)90%乙醇溶液，機(jī)械攪拌20?30min后離心分離，得沉淀物，并用無水乙醇清洗2?3次，放入真空干燥箱中在50?60°C下干燥3?5h ； 將上述干燥后的固體按固液比1:10與質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%氯化鈉溶液混合，攪拌至固體溶解，溶解后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%鹽酸調(diào)節(jié)pH值為7.0，并向其中加入7000?8000U/g胰蛋白酶，在180?250W下超聲處理15?20min，處理后在50?55 °C下酶解2?3h后在100°C下滅菌5?10min，離心分離得上清液； 將上述上清液放入濃縮罐中減壓濃縮至原體積15?20%，向濃縮液中加入濃縮液體積2?3%濃度60?80g//L十六烷基三甲基溴化銨溶液，絡(luò)合反應(yīng)30?40min后離心分離得絡(luò)合物，將絡(luò)合物溶于質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%氯化鈉溶液中解離2?3h，得解離液，并調(diào)節(jié)pH值為3.0?.4.0，調(diào)節(jié)后用截留分子量4X 14?9X 14的超濾膜過濾，得透明質(zhì)酸鈉水溶液，通過陽離子交換樹脂，得透明質(zhì)酸水溶液，蒸發(fā)濃縮后真空干燥得透明質(zhì)酸粉末。
【文檔編號(hào)】C08B37/08GK105907820SQ201610469792
【公開日】2016年8月31日
【申請(qǐng)日】2016年6月26日
【發(fā)明人】吳迪, 王統(tǒng)軍
【申請(qǐng)人】吳迪