一種連翹脂素的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及中藥制作領(lǐng)域，尤其涉及一種連翹脂素的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]中藥連翅為木犀■科(Oleaceae)連翅屬植物連翅(Forsythia suspensa(Thunb.)vahl)的干燥果實。該屬原植物現(xiàn)己知有十幾種，分布于世界各地。中國歷屆版藥典規(guī)定作為連翅可入藥品種均為Forsythia suspensa (Thunb.) vahl。連翅主產(chǎn)于我國山西、河南、陜西、山東等地。藥用分“青翹”、“老翹”兩種。青翹在九月上旬，果皮呈青色尚未成熟時采下，置沸水中稍煮片刻或放蒸籠內(nèi)蒸約半小時，取出曬干。老翹在十月上旬果實熟透變黃、果殼裂開時采收、曬干。篩去種子及雜質(zhì)。連翹作為中藥應(yīng)用，已有兩千年歷史。
[0003]連翹作為中藥應(yīng)用，已有兩千年歷史，始見于《神農(nóng)本草經(jīng)》。在宋代以前，連翹藥用記載較為混亂，金絲桃科、金絲桃屬植物亦記做連翹?！稜栄拧吩?“連，異翹”;《神農(nóng)本草經(jīng)》上載:“主寒熱，癰腫惡瘡，結(jié)熱，鼠瘺瘰疬。”；陶弘景曰:“連翹處處有，今用莖連花實也?！薄短票静荨啡?“連翹有兩種，大翹、小翹。大翹葉狹長，如水蘇，花黃可愛，生下濕地，著子似椿實之未開者，作房翹出眾草。其小翹生崗原之上，葉花實皆似大翹而小細，山南人并用之。今京下惟用大翹子，不用莖花也。”，最先應(yīng)用的是全草或果實，但據(jù)考證，應(yīng)為草本金絲桃科植物。因為連翹是灌木，藥用全草似乎難以講得通，而金絲桃科金絲桃屬植物多為草本，所以這兩處的記載可能為金絲桃屬植物。
[0004]宋代蘇頌的《本草圖經(jīng)》所記:“連翅，今近京及河中、江寧府，澤、潤、淄、袞、鼎、岳、利州，南康軍皆有之。有大翹、小翹二種。(大翹)生下濕地或山崗上。葉青黃而狹長，如榆葉、水蘇輩。莖赤色，高三、四尺許?；S可愛，秋結(jié)實似蓮，作房翹出眾草，以此得名。根黃如篙根，八月采房陰干。其小翹生崗原之上，葉、花、實皆似大翹而細。南方生者，葉狹而小，莖短，才高一、二尺。花亦黃，實房黃黑，內(nèi)含黑子如粟粒，亦名早連草，南人用花葉?？甲C其所附藥圖(鼎州連翹)及其性狀描述，尤其是關(guān)于其花和種子的描述“花亦黃，實房黃黑，內(nèi)含黑子如粟?！币部梢耘袛啻硕χ葸B翹應(yīng)該是金絲桃屬植物。
[0005]自宋代開始往后連翹的記載逐漸清晰，而主流藥用品種也逐漸成為今天所用的正品連翹一木犀科連翹屬植物，在蘇頌的《本草圖經(jīng)》中關(guān)于“澤州連翹”、“兗州連翹”作為連翹的新興品種而逐漸應(yīng)用，澤州位于今天的山西省境內(nèi)，連翹至今以山西省為道地藥材產(chǎn)區(qū)。另外宋代寇宗爽《本草衍義》:“連翹，亦不翹出眾草，太山山谷間甚多，今止用其子，片片相比如翅，因以此得名爾，治心經(jīng)客熱最勝，尤益小兒?！钡挠浭?，應(yīng)該指的是木犀科連翹CForsythia suspensa)。而明代劉文泰所著《本草品匯精要》中，則明確指出山西澤州連翹為道地藥材，與現(xiàn)今藥典記述和民間使用一致。在中醫(yī)臨床應(yīng)用中，《備急千金要方》中的連翹五香湯及《外臺密要》中的治癰疽腫毒方中的連翹，均屬木犀科連翹；《證治準繩》中的連翹敗毒散及連翹散，《溫病條辨》中治溫病初起的銀翹散，《瘍病大全》中的連翹解毒湯，《醫(yī)宗金鑒》中的連翹消毒飲及清宮方中的連翹以及現(xiàn)代應(yīng)用的中成藥銀翹解毒丸和銀翹解毒片所用的連翹皆屬木犀科植物連翹的果實。
[0006]Murakami首次從連翹果實中得到齊墩果酸以來，連翹及其同屬植物中已有六十余種成分見諸報道、其主要含萜類、苯乙醇及其甙類、木脂素類、黃酮類和一些醇、酯、醚和酮等類化合物，其中木質(zhì)素類化合物含量最為豐富，我國藥典也規(guī)定連翹藥材中連翹苷含量不少于0.15%,是其最主要的質(zhì)量控制指標(biāo)。
[0007]連翹屬中的木脂素成分主要為木脂內(nèi)酷和雙環(huán)氧木脂素。1978年，Nishibe等從連翅中分得了 arctigenin, mataresinol, arctiin 和 matairesinoside。1985年，Tsukamoto 等從連翅果實中分得了 phillygenin, (+) -pinoresinol, phillyrin,(+)-pinoresnol-β-D-glucoside 和(+)-epinoresinol-4_0-glucoside。1997 年，劉冬雷等又從連翅果實中分得了(+)松脂素單甲基醚_β-D-葡萄糖營(pinoresinolmonomethylether-β -D-gluco-side)。近來生合成研究表明，連翅屬中木脂素前體是松伯醇，已知連翅屬中木脂素及其苷的3，3’位全是甲氧基取代，4，4’位可以是羥基，甲氧基取代或與糖成苷。
[0008]研究表明，在連翹提取物中，連翹脂素占有一定的比例，通常連翹脂素的比例可達10%-30%,連翹脂素是否具有藥理活性尚不清楚，是否具有毒性也未見報導(dǎo)，因而分離連翹脂素的單體，制備高含量連翹脂素并建立其分析方法，具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，提供一種連翹脂素的制備方法，本發(fā)明方法操作工藝過程簡單，生產(chǎn)周期短。運用本發(fā)明方法，可以充分提取連翹中的連翹脂素，提取效果顯著；分離純化處理獲得高純度連翹脂素單體，顯著地降低了生產(chǎn)成本，適宜批量制備和工業(yè)化生產(chǎn)。
[0010]為實現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明一方面提供一種連翹脂素的制備的方法，包括如下順序進行的步驟:
[0011]1)將連翹葉或連翹果實與提取溶劑混勻后，加熱，進行回流提取，收集提取液，并回收溶劑，獲得連翹提取物；
[0012]2)向連翹提取物中加入石油醚混勻后，進行超聲處理或進行石油醚回流提取處理，收集石油醚提取液并回收石油醚，獲得連翹石油醚提取物；
[0013]3)對連翹石油醚提取物采用甲醇或乙醇進行重結(jié)晶處理，獲得連翹脂素。
[0014]其中，步驟1)中所述溶劑選擇質(zhì)量百分比濃度為50-100%的甲醇或質(zhì)量百分比濃度為50-100 %的乙醇，優(yōu)選為無水甲醇或無水乙醇。
[0015]特別是，步驟1)中所述溶劑與連翹葉或連翹果實的重量份配比為5-20:1，優(yōu)選為8-10:1。
[0016]特別是，步驟1)中所述溶劑加熱提取的次數(shù)為1-3次，優(yōu)選為2-3次；所述溶劑加熱提取的時間為2-3h/次。
[0017]其中，步驟2)中所述石油醚的體積與所述連翹提取物的重量之比為1-100:1，即如果連翹提取物重量為lg時，石油醚的體積為l-100ml ;如果連翹提取物重量為1kg時，石油醚的體積為1-100L，優(yōu)選為10-50:1，進一步優(yōu)選為10-20:1。
[0018]特別是，步驟2)中所述石油醚超聲處理或回流提取處理的次數(shù)為2-3次，每次超聲處理或回流提取處理的時間為0.5-4h。
[0019]本發(fā)明另一方面提供一種連翹脂素的制備方法，包括如下順序進行的步驟:
[0020]1)將連翹葉或連翹果實與提取溶劑混勻后，加熱，進行回流提取，收集提取液，并回收溶劑，獲得連翹提取物；
[0021]2)向連翹提取物中加入酸溶液進行酸水解處理，然后向水解產(chǎn)物中加入堿性溶液，進行中和反應(yīng)至pH為7.0，放置析出沉淀并過濾，沉淀水洗后進行干燥或減壓回收溶劑，析出沉淀并過濾，沉淀水洗后進行干燥或減壓回收溶劑至干，所得產(chǎn)物經(jīng)水洗、干燥，獲得連翹酸水解物；
[0022]3)對連翹酸水解物進行硅膠柱層析處理，分段收集洗脫液，洗脫液分別干燥后，得到連翹脂素。
[0023]其中，步驟1)中所述溶劑選擇質(zhì)量百分比濃度為50-100%的甲醇或質(zhì)量百分比濃度為50-100%的乙醇。
[0024]特別是，步驟1)中所述溶劑與連翹葉或連翹果實的重量份配比為5-20:1，優(yōu)選為8-10:1。
[0025]特別是，步驟1)中所述溶劑加熱提取的次數(shù)為1-3次，優(yōu)選為2-3次；所述溶劑加熱提取的時間為2-3h/次。
[0026]其中，步驟2)中所述酸溶液選擇稀硫酸或稀鹽酸水溶液或醇溶液，優(yōu)選為稀硫酸甲醇溶液、稀硫酸乙醇溶液、稀鹽酸甲醇溶液、稀鹽酸乙醇溶液。
[0027]特別是，所述酸溶液選擇質(zhì)量百分比濃度為1%?10%的稀硫酸或稀鹽酸水溶液或醇溶液，優(yōu)選為質(zhì)量百分比濃度為1%?10%的稀硫酸甲醇溶液、稀硫酸乙醇溶液、稀鹽酸甲醇溶液、稀鹽酸乙醇溶液。
[0028]特別是，所述酸水解處理的溫度為30?80°C ;酸水解處理時間為0.1?5h。
[0029]尤其是，所述酸溶液的體積與連翹提取物重量之比為2-7:1，優(yōu)選為4-5:1。
[0030]其中，步驟2)中所述堿性溶液選擇質(zhì)量百分比濃度為0.01-100%的氫氧化鈉溶液、氫氧化鉀溶液。
[0031]其中，步驟3)中所述硅膠柱層析處理過程中的洗脫溶劑選擇氯仿與甲醇的混合溶液。
[0032]特別是，所述洗脫溶劑氯仿與甲醇的體積之比為10:1?1:1，優(yōu)選為5:1?1:1。
[0033]特別是，步驟3)中所述硅膠柱層析處理過程中的吸附劑硅膠與連翹酸水解物的重量之比為120-170:1，優(yōu)選為130-160:1 ;所述硅膠為硅膠Η、硅膠G ;優(yōu)選為薄層層析用硅膠Η。
[0034]尤其是，硅膠柱層析處理過程中硅膠柱的柱直徑與柱內(nèi)硅膠高之比(即徑高比)為 1:5-10，優(yōu)選為 1:6-8。
[0035]尤其是，硅膠柱層析處理過程中洗脫流速為100_300ml/h