一種用嗜熱細(xì)菌處理含油脂廢水生產(chǎn)耐高溫脂肪酶的培養(yǎng)基的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 在生活或者工業(yè)生產(chǎn)中會(huì)產(chǎn)生大量高溫、含油脂的廢水，本發(fā)明的培養(yǎng)基，適合于 處理含油脂廢水的嗜熱細(xì)菌的生長(zhǎng)，且可促進(jìn)耐高溫脂肪酶生產(chǎn)。
【背景技術(shù)】
[0002] 生活、工業(yè)生產(chǎn)中會(huì)產(chǎn)生大量的高溫、含油脂廢水。微生物技術(shù)治理含油脂廢水， 是利用微生物的分解作用來(lái)減少水中油的濃度，消除或降低其危害程度。傳統(tǒng)的工藝中，當(dāng) 含油脂污水溫度較高時(shí)，需要等待冷卻才能使用常溫嗜油菌處理，這就造成了效率的低下 與時(shí)間的浪費(fèi)，而使用人工降溫散熱時(shí)，產(chǎn)生能源浪費(fèi)。嗜熱微生物俗稱高溫菌或嗜熱菌， 通常是最低生長(zhǎng)溫度45右，最適生長(zhǎng)溫度在50~60°C最高生長(zhǎng)溫度在70°C以上的一類微 生物的總稱，采用嗜熱微生物直接處理含油廢水并生產(chǎn)工業(yè)用霉，可以縮短處理時(shí)間，提高 處理效益。而篩選合適的培養(yǎng)基是該處理技術(shù)的重要環(huán)節(jié)。
[0003] 傳統(tǒng)的處理培養(yǎng)基為無(wú)機(jī)鹽或HB培養(yǎng)基，在這些培養(yǎng)基中細(xì)菌處理效率和產(chǎn)酶 效率較低，這對(duì)該技術(shù)的實(shí)際應(yīng)用造成了一定的阻礙。因此，優(yōu)化培養(yǎng)基是首要任務(wù)。
[0004] 本發(fā)明結(jié)合傳統(tǒng)培養(yǎng)基中的成分，同時(shí)加入生長(zhǎng)因子和微量元素促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)速 度和代謝活性，可以大幅度提高油脂處理效率和產(chǎn)酶效率。
[0005] 處理含油脂廢水的嗜熱細(xì)菌來(lái)源于環(huán)境中的含油脂土壤，最適生長(zhǎng)溫度在55°C。 在應(yīng)用方面，處理含油脂廢水的嗜熱細(xì)菌能夠產(chǎn)生耐高溫的脂肪酶。該種脂肪酶的活性和 熱穩(wěn)定性有待進(jìn)一步探索。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于提供用于處理含油脂廢水的嗜熱細(xì)菌生產(chǎn)耐高溫脂肪酶的培 養(yǎng)基，其制備方法及應(yīng)用。
[0007] 本發(fā)明的第一方面，提供一種處理含油脂廢水的嗜熱細(xì)菌的培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基 包括以下組分：
【主權(quán)項(xiàng)】
1.兩種適合于處理含油脂廢水的嗜熱細(xì)菌生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，其特征在于，所述包括以下 組分： 無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基 磷酸氫二鉀 2g/L; 磷酸二氫鉀 〇.5g/L; 氯化鈉 〇.5g/L; 氯化銨 〇.5g/L; 硫酸鎂 〇.2g/L; 氯化鈣 10mg/L和 維生素母液 ImLZL 生長(zhǎng)因子胰蛋白胨 〇. lg/L和 酵母提取物〇.〇5g/L。 微量元素 硫酸鈣 0.2g/L; 七水合硫酸亞鐵 〇.2g/L; 硫酸猛 0,02g/L; 鉬酸鈉 0.0 lg/L· 硫酸銅 0.02g/L; 七水硫酸鈷 O.Olg/L和 硼酸 0.005g/L。 在無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基中加入1 %生長(zhǎng)因子和1 %微量元素，組成培養(yǎng)基A。 在另一優(yōu)選案例中，所述培養(yǎng)基包括以下組分： HB培養(yǎng)基 硫酸鎂 0.2g/L; 氯化鈣 0.02g/L; 磷酸二氫鉀 l.〇g/L; 磷酸氫二鉀 1.0g/L; 磷酸氫二鈉 1.0431g/'L; 氯化銨 0.6688g/L; 硝酸鈉 1.0625g/L和 氯化鐵： 0.05g/L。 生長(zhǎng)因子胰蛋白胨 〇. lg/L和 酵母提取物〇.〇5g/L。 微量元素 硫酸0.2g/L； 七水合硫酸亞鐵 〇.2g/L; 硫酸錳 0.02g/L; 鉬酸鈉 O.Olg/L; 硫酸銅 0.02g/L; 七水硫酸鈷 0.01g/L和 硼酸 0.005g/L。 在HB培養(yǎng)基中加入1 %生長(zhǎng)因子和1 %微量兀素，組成培養(yǎng)基B。
2.如權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基，其特征在于，所述培養(yǎng)基組分如下所示： 無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基 磷酸氫二鉀 2g/L; 磷酸二氫鉀 0.5g/L; 氯化鈉 0.5g/L; 氯化銨 〇.5g/L; 硫酸鎂 0.2g/L; 氯化鈣 10mg/Lfll 維生素母液 lmL/L 生長(zhǎng)因子胰蛋白胨 〇. lg/L和 酵母提取物〇.〇5g/L。 微量元素 硫酸齊 〇.2g/L； 七水合硫酸亞鐵 〇.2g/L; 硫酸錳 0.02g/L; 鉬酸鈉 O.Olg/L; 硫酸銅 0.02g/L; 七水硫酸鈷 0.01 g/L和 硼酸 0.005g/L。 在無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基中加入1 %生長(zhǎng)因子和1 %微量元素，組成培養(yǎng)基A。 在另一優(yōu)選案例中，所述培養(yǎng)基包括以下組分： HB培養(yǎng)基 硫酸鎂 0.2g/L; 氯化鈣 0.02g/L; 磷酸二氫鉀 l.Og/L; 磷酸氫二鉀 l.Og/L: 磷酸氫二鈉 丨.043lg/L: 氯化銨 0.6688g/L; 硝酸鈉 1.0625g/L和 氯化鐵： 0.05g/L。 生長(zhǎng)因子胰蛋白胨 〇. lg/L和 酵母提取物〇.〇5g/L。 微量元素 硫酸興 0.2g/L； 七水合硫酸亞鐵 0.2g/L; 硫酸錳 0.02g/L; 鉬酸鈉 0.01g/L; 硫酸銅 0.02g/L; 七水硫酸鈷 0.0 IgZL和 硼酸 0.005g/U 在HB培養(yǎng)基中加入1 %生長(zhǎng)因子和1 %微量兀素，組成培養(yǎng)基B。
3. 如權(quán)利要求1-2所述的培養(yǎng)基，其特征在于，所述培養(yǎng)基中，還含有有效量的生長(zhǎng)因 素和微量元素：較佳的， 生長(zhǎng)因子含量為：胰蛋白胨 〇. lg/L和 酵母提取物〇.〇5g/L。 微量元素含量為：硫酸鈣 〇.2g/L; 七水合硫酸亞鐵 〇.2g/L; 硫酸錳 0.02gZL; 鉬酸鈉 0.01 g/L; 硫酸銅 0.02g/L; 七水硫酸鈷 0.01 g/L和 硼酸 0.005g/L。
4. 如權(quán)利要求1-3任一所述培養(yǎng)基，其特征在于，所述培養(yǎng)基中，各組分配置于水中； 和/或所述培養(yǎng)基的pH值7. 0±0. 5。
5. 權(quán)利要求1-3任一所述培養(yǎng)基的用途，用于培養(yǎng)處理含油脂廢水的嗜熱細(xì)菌，生產(chǎn) 耐高溫的脂肪酶。
6. -種制備權(quán)利要求1-3任一所述的處理含油脂廢水的嗜熱細(xì)菌的培養(yǎng)基的方法，其 特征在于，所述方法包括： a) 將所述胰蛋白胨、酵母提取物、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化銨、硫酸鎂、氯 化鈣、維生素母液、硫酸鈣、七水合硫酸亞鐵、硫酸錳、鉬酸鈉、硫酸銅、七水硫酸鈷和硼酸用 去離子水溶解混合。 b) 將所述胰蛋白胨、酵母提取物、硫酸鎂、氯化鈣、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、硝酸銨、氯 化銨、硝酸鈉、氯化鐵、硫酸鈣、七水合硫酸亞鐵、硫酸錳、鉬酸鈉、硫酸銅、七水硫酸鈷和硼 酸用去離子水溶解混合。
7. -種利用處理含油脂廢水的嗜熱細(xì)菌，生產(chǎn)耐高溫的脂肪酶的方法，其特征在于，所 述方法包括：利用權(quán)利要求1-3任一所述的培養(yǎng)基培養(yǎng)處理含油脂廢水的嗜熱細(xì)菌，從而 生產(chǎn)耐高溫的脂肪酶。
8. 如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，將處理含油脂廢水的嗜熱細(xì)菌按體積比3% 的接種量接種入權(quán)利要求1-3任一所述的培養(yǎng)基，55°C，置于搖床中160rpm/min，發(fā)酵培養(yǎng) 24h后，離心分離發(fā)酵上清液，其中含有脂肪酶。
【專利摘要】本實(shí)驗(yàn)涉及一種用于處理含油脂廢水的嗜熱細(xì)菌生產(chǎn)耐高溫脂肪酶的培養(yǎng)基。在生活或者工業(yè)生產(chǎn)中會(huì)產(chǎn)生大量的含油脂的廢水，本發(fā)明的培養(yǎng)基，適合于處理含油脂廢水的嗜熱細(xì)菌的生長(zhǎng)并生產(chǎn)耐高溫的脂肪酶。
【IPC分類】C12N9-20, C12N1-20
【公開號(hào)】CN104745508
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510126483
【發(fā)明人】李琳, 肖雅, 周遠(yuǎn)群, 張強(qiáng), 閆筱, 羅明志, 董進(jìn), 周歡, 邱國(guó)華, 鄧林紅
【申請(qǐng)人】常州大學(xué)
【公開日】2015年7月1日
【申請(qǐng)日】2015年3月20日