本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥的，尤其涉及一種嘌呤降解酶劑、菌株及構(gòu)建方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、尿酸是嘌呤化合物的最終代謝產(chǎn)物，人體內(nèi)嘌呤代謝紊亂或尿酸排泄減少可能會導致體內(nèi)尿酸濃度升高，進而出現(xiàn)高尿酸血癥、痛風等疾病，臨床主要表現(xiàn)為高尿酸血癥、痛風性急性關(guān)節(jié)炎反復發(fā)作、痛風性慢性關(guān)節(jié)炎和痛風石、痛風性腎病以及腎尿酸結(jié)石等癥狀，重者還可能會出現(xiàn)關(guān)節(jié)殘疾和腎功能不全，對人體的生命和健康造成嚴重危害。

2、目前，高尿酸血癥、痛風及其并發(fā)癥的治療方法主要是通過抑制黃嘌呤氧化酶活性，有效的抑制尿酸的形成或促進尿酸的排泄，以實現(xiàn)對血液中的尿酸進行控制，代表性藥物有別嘌呤醇、非布司他、丙磺舒、苯溴馬隆等。但是，上述藥物的毒副作用通常較大，可能會引起嚴重的變態(tài)反應(yīng)、胃腸道癥狀以及增加心血管系統(tǒng)疾病的風險，且存在著耐受性普遍較低的問題，存在著較大的局限性。因此，研究新型的降尿酸藥物具有重要意義。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的第一目的在于提供一種嘌呤降解酶劑，具體包括嘌呤降解酶ygew、dpal、ygey、hyua和arcc中的一種或多種，使用該嘌呤降解酶劑對于腺嘌呤、黃嘌呤等化合物的降解率高達90％以上，具有優(yōu)秀的降解能力；所述嘌呤降解酶劑能夠在消化道中對食物中的嘌呤進行降解，減少腸道所吸收的嘌呤，且降解產(chǎn)物為腸道難以吸收的可直接被排出體外的嘌呤堿基，進而實現(xiàn)對血液中尿酸含量的有效控制，且上述嘌呤降解酶為腸道有益菌的代謝物，毒副作用極小，具有較高的安全性，可很好地被應(yīng)用作為降尿酸藥物或保健食品。

2、本發(fā)明的第二目的在于提供一種菌株。

3、本發(fā)明的第三目的在于提供上述菌株的構(gòu)建方法。

4、本發(fā)明的第四目的在于提供一種上述嘌呤降解酶劑和/或菌株在制備降尿酸制品中的應(yīng)用。

5、具體的，本發(fā)明提供的降尿酸酶劑包括嘌呤降解酶ygew、嘌呤降解酶dpal、嘌呤降解酶ygey、嘌呤降解酶hyua和嘌呤降解酶arcc中的一種或多種。

6、進一步地，所述嘌呤降解酶ygew的氨基酸序列如seq?id?no:5所示。

7、進一步地，所述嘌呤降解酶dpal的氨基酸序列如seq?id?no:9所示。

8、進一步地，所述嘌呤降解酶ygey的氨基酸序列如seq?id?no:13所示。

9、進一步地，所述嘌呤降解酶hyua的氨基酸序列如seq?id?no:17所示。

10、進一步地，所述嘌呤降解酶arcc的氨基酸序列如seq?id?no:21所示。

11、本發(fā)明提供的降尿酸菌株表達分泌嘌呤降解酶ygew、嘌呤降解酶dpal、嘌呤降解酶ygey、嘌呤降解酶hyua和嘌呤降解酶arcc中的一種或多種。

12、本發(fā)明提供的上述菌株的構(gòu)建方法包括：s1、取嘌呤降解酶編碼基因與質(zhì)粒載體進行重組，得到表達框；s2、取所述表達框?qū)牍こ叹玫剿鼍?；其中，所述嘌呤降解酶編碼基因選自ygew基因、dpal基因、ygey基因、hyua基因和arcc基因中的一種或多種，且所述嘌呤降解酶編碼基因來源于大腸桿菌nissle?1917。

13、本發(fā)明還提供了上述降尿酸酶劑和/或菌株在制備降尿酸制品中的應(yīng)用。

14、進一步地，所述降尿酸制品可降低膳食嘌呤含量和/或?qū)崿F(xiàn)腸道內(nèi)嘌呤的降解。

技術(shù)特征：

1.一種嘌呤降解酶劑，其特征在于，該酶劑包括嘌呤降解酶ygew、嘌呤降解酶dpal、嘌呤降解酶ygey、嘌呤降解酶hyua和嘌呤降解酶arcc中的一種或多種。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的嘌呤降解酶劑，其特征在于，所述嘌呤降解酶ygew的氨基酸序列如seq?id?no:5所示。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的嘌呤降解酶劑，其特征在于，所述嘌呤降解酶dpal的氨基酸序列如seq?id?no:9所示。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的嘌呤降解酶劑，其特征在于，所述嘌呤降解酶ygey的氨基酸序列如seq?id?no:13所示。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的嘌呤降解酶劑，其特征在于，所述嘌呤降解酶hyua的氨基酸序列如seq?id?no:17所示。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的嘌呤降解酶劑，其特征在于，所述嘌呤降解酶arcc的氨基酸序列如seq?id?no:21所示。

7.一種菌株，其特征在于，該菌株表達分泌氨基酸序列如seq?id?no:5所示的嘌呤降解酶ygew、氨基酸序列如seq?id?no:9所示的嘌呤降解酶dpal、氨基酸序列如seq?id?no:13所示的嘌呤降解酶ygey、氨基酸序列如seq?id?no:17所示的嘌呤降解酶hyua和氨基酸序列如seq?id?no:21所示的嘌呤降解酶arcc中的一種或多種。

8.權(quán)利要求7所述的菌株的構(gòu)建方法，其特征在于，該構(gòu)建方法包括：s1、取嘌呤降解酶編碼基因與質(zhì)粒載體進行重組，得到表達框；s2、取所述表達框?qū)牍こ叹?，得到所述菌株?/p>

9.權(quán)利要求1～6任一所述的嘌呤降解酶劑和/或權(quán)利要求7所述的菌株在制備降尿酸制品中的應(yīng)用。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述降尿酸制品可降低膳食嘌呤含量和/或?qū)崿F(xiàn)腸道內(nèi)嘌呤的降解。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥的技術(shù)領(lǐng)域領(lǐng)域，公開了一種嘌呤降解酶劑、菌株及構(gòu)建方法和應(yīng)用。本發(fā)明提供的呤降解酶劑具體包括嘌呤降解酶ygeW、dpaL、ygeY、hyuA和arcC中的一種或多種，該嘌呤降解酶劑具有優(yōu)秀的體外嘌呤降解能力，能夠?qū)κ澄镏械泥堰蔬M行降解，且降解產(chǎn)物不被消化道吸收可直接被排出體外，且該嘌呤降解酶劑為腸道有益菌的代謝物，毒副作用極小，具有較高的安全性，可很好地被應(yīng)用作為降尿酸制品，降低食物的嘌呤含量和/或減少腸道對嘌呤的吸收，以實現(xiàn)對血液中尿酸含量的有效控制，應(yīng)用前景良好。

技術(shù)研發(fā)人員：張幫周,徐煒,朱笑蝶,李源濤,何劍全,肖傳興
受保護的技術(shù)使用者：廈門承葛生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/9/26