具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵培養(yǎng)基及發(fā)酵制劑的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵培養(yǎng)基及發(fā)酵制劑的制備方法，所述培養(yǎng)基包含如下組分：食鹽、糖蜜、葡萄糖、酵母提取物、中草藥添加劑、水。所述發(fā)酵制劑的制備包括如下步驟：將培養(yǎng)基、水在厭氧菌種組合物的存在下，于32～39℃進行第一次厭氧發(fā)酵；加入好氧菌種組合物，在32～39℃下進行第一次好氧發(fā)酵后，進行第二次厭氧發(fā)酵；所述第二次厭氧發(fā)酵結(jié)束后，進行第二次好氧發(fā)酵，即可。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明制備的發(fā)酵制劑具有美容抗衰，調(diào)節(jié)腸道，保健養(yǎng)身的功效，并且利用微生物發(fā)酵技術(shù)，將其中大分子物質(zhì)轉(zhuǎn)換為小分子物質(zhì)方便吸收，是一種新型的抗衰生物科技產(chǎn)品。
【專利說明】
具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵培養(yǎng)基及發(fā)酵制劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵培養(yǎng)基及發(fā)酵制劑的制備方法，屬于 中藥制劑和微生物發(fā)酵領(lǐng)域技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著科學(xué)技術(shù)的進步和人們生活水平的提高，人們對自身健康越來越重視，青春， 是每個人都渴望能夠長期擁有的，然而，衰老總是在阻擋著人們的美麗夢。其實中醫(yī)對抗衰 老早有認(rèn)識，《黃帝內(nèi)經(jīng)》中就有抗衰老的精辟論述："上古之人，其知道者，法于陰陽，和以 術(shù)數(shù)，食飲有節(jié)，起居有常，不妄作勞，故能形與神倶，而盡終其天年，度百歲乃去。"我國最 早的藥學(xué)專著《神農(nóng)本草經(jīng)》，收載365種藥物，其中列為"上品"的有100多種。經(jīng)過長期的實 踐，中醫(yī)又不斷發(fā)現(xiàn)新的有抗衰老作用中藥(本草書稱為"輕身延年"）。例如:黃芪，枸杞子， 人參，紅景天，三七，絞股藍，刺五加，蜂王漿，何首烏，靈芝等。
[0003] 中國專利CN101703660A公開了一種抗衰老藥物，它是由人參、紅參、三七、大棗、黃 芪、地鱉蟲、當(dāng)歸、九香蟲、山藥、白術(shù)、肉桂、遠志、黨參、何首烏組成，其作用效果表明了這 一類中藥材具有一定的保健、養(yǎng)生抗衰老作用，但該藥物口感較差，且其效果未見具體健康 指標(biāo)的改善。
[0004] 中國專利CN102771790A的一種抗衰老的營養(yǎng)保健品，它是由山藥萃取物，人參，當(dāng) 歸，甘草，白芍，薏仁，茯苓，桂枝，牡蠣殼粉組成，其實施例表明這一類中藥材組合在長期服 用后對延緩衰老和治療衰老癥有切實的保健療效，但是該藥物見效較慢。
[0005] 現(xiàn)有的中藥產(chǎn)品雖然在很多醫(yī)學(xué)和實驗上面證明了其具有抗衰老的作用，然而在 很多使用者尤其是已經(jīng)呈現(xiàn)一些衰老跡象的中老年人群方面并不明顯，其主要原因是雖然 這一類藥物中含有一些抗衰老成分，但是很多成分很難被人體吸收，尤其是年紀(jì)稍大的人 群，其吸收能力也會減弱，甚至大部分有效的成分都直接被代謝出去，造成了營養(yǎng)的流失。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 針對現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，本發(fā)明的目的是提供一種具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵培 養(yǎng)基及發(fā)酵制劑的制備方法。
[0007] 本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的：
[0008] 第一方面，本發(fā)明提供了一種具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵制劑的培養(yǎng)基，其包含 按以下重量份數(shù)計的如下組分： 食鹽 2.3:0份; 糖蜜 100~150份； 葡萄糖 300-400份：
[0009] 酵母提取物 100~200份； 中草藥添加劑 50~100份； 水 15000~丨6000份。
[0010]經(jīng)過大量實驗發(fā)現(xiàn)，各組分配比若是高于這個范圍，會影響微生物的生長分裂，若 是低于這個范圍，則不能提供微生物分裂生長所需的營養(yǎng)。
[0011] 作為優(yōu)選方案，所述中草藥添加劑包括按重量份數(shù)計的如下組分： 人參提取物 10~12份； 黃芪提取物 10~12份； 枸杞子提取物 8~10份； 紅景天提取物 .8~.10份:；
[0012] 三七提取物 11~13份; 何首烏提取物 8~10份： 山藥提取物 10~12份； 蜂王漿 8~10份。
[0013] 上述提取物范圍是根據(jù)微生物發(fā)酵效率和性價比決定的，低于這個范圍會導(dǎo)致效 果打折，高于這個范圍會影響微生物活性，從而影響發(fā)酵進程并且造成提取物的浪費。
[0014] 第二方面，本發(fā)明還提供了一種利用前述的培養(yǎng)基制備具有抗衰老功能的中藥發(fā) 酵制劑的方法，其包括如下步驟：
[0015] 步驟一，在厭氧菌種組合物存在的條件下，取培養(yǎng)基和水進行第一次厭氧發(fā)酵；
[0016] 步驟二，加入好氧菌種組合物，進行第一次好氧發(fā)酵；
[0017] 步驟三，進行第二次厭氧發(fā)酵；
[0018] 步驟四，進行第二次好氧發(fā)酵，即得所述中藥發(fā)酵制劑。
[0019] 以上溫度范圍是根據(jù)綜合菌種最適宜生長的溫度決定的，低于這個溫度和高于這 個溫度都會影響微生物活性，影響發(fā)酵進程。
[0020] 作為優(yōu)選方案，步驟一中，所述厭氧菌種組合物包括按重量份數(shù)計的如下組分： 青春雙歧桿菌 13-15份； 嗜熱鏈球菌 8~10份； 保加利亞乳桿菌 8~i0份；
[0021] 嗜酸乳桿菌 8~10份； 鼠李糖乳桿菌 8~10份； 瑞士乳桿菌 8~1:0份? 胚芽乳桿菌 8~10份。
[0022] 青春雙歧桿菌是一種益生菌，可治療慢性腹瀉、便秘，還有抗衰老作用。青春雙歧 桿菌具有顯著的抗衰老作用，可明顯增加血中超氧化物歧化酶(S0D)的活性與含量。從而減 少自由基的氧化反應(yīng)和對人體細(xì)胞的損傷，具有延年益壽的功效。
[0023] 上述范圍是按照培養(yǎng)基比例進行配置的，根據(jù)實踐結(jié)論得到的菌種參數(shù)范圍；
[0024] 低于這個比例容易導(dǎo)致菌種生長緩慢，發(fā)酵時間延長;高于這個比例容易發(fā)酵影 響下一步好養(yǎng)菌種的生長，而且造成不必要的浪費。
[0025] 作為優(yōu)選方案，步驟二中，所述好氧菌種組合物包含按重量份數(shù)計的如下組分：
[0026] 米曲霉菌 18~20份；
[0027] 克魯為酵母菌 13~15份；
[0028] 啤酒酵母菌 13~15份。
[0029]上述范圍是按照培養(yǎng)基比例進行配置的，根據(jù)實踐結(jié)論得到的菌種參數(shù)范圍；
[0030] 低于這個比例容易導(dǎo)致菌種生長緩慢，不能和已經(jīng)發(fā)酵的厭氧菌共生而被厭氧菌 占據(jù)大部分空間和營養(yǎng)，以至于菌種慢慢死亡，達不到想要的發(fā)酵效果;高于這個比例容易 導(dǎo)致好養(yǎng)菌占據(jù)大部分空間和營養(yǎng)，影響厭養(yǎng)菌的生長。
[0031] 作為優(yōu)選方案，所述第一次厭氧發(fā)酵的時間為10~12h，發(fā)酵的溫度為32~39°C。
[0032] 作為優(yōu)選方案，所述第一次好氧發(fā)酵的時間為12~24h，發(fā)酵的溫度為32~39°C。
[0033] 作為優(yōu)選方案，所述第二次厭氧發(fā)酵的時間為30~36h。
[0034] 作為優(yōu)選方案，所述第二次好氧發(fā)酵的時間為20~24h。
[0035] 上述時間范圍是根據(jù)發(fā)酵過程中菌群消耗培養(yǎng)基的營養(yǎng)和菌群數(shù)量測算所得，若 低于上述時間范圍和高于上述時間范圍都會導(dǎo)致厭氧和好養(yǎng)菌不能平衡生長，容易被單一 菌種占據(jù)培養(yǎng)罐。
[0036] 作為優(yōu)選方案，所述第一次好氧發(fā)酵和第二次好氧發(fā)酵中的通氣量均控制為1.0 ~1·5vvm〇
[0037] 本通氣量是根據(jù)好養(yǎng)菌生長活性計算所得，若低于這個范圍，好養(yǎng)菌不能很好的 生長，若高于這個范圍，已經(jīng)生長的厭氧菌容易大部分死亡。
[0038] 本發(fā)明的原理在于:使用的原材料為這類中藥的提取物，并且利用微生物發(fā)酵技 術(shù)，將其中大分子物質(zhì)轉(zhuǎn)換為小分子物質(zhì)方便吸收，并且在發(fā)酵的菌種中特別添加青春雙 歧桿菌，使其成品既含有利于吸收的中藥抗衰老成分還含有微生物等活性成分，是一種新 型的抗衰生物科技產(chǎn)品。
[0039] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下的有益效果：
[0040] 本發(fā)明的產(chǎn)品具有美容抗衰，調(diào)節(jié)腸道，保健養(yǎng)身的功效，并且利用微生物發(fā)酵技 術(shù)，將其中大分子物質(zhì)轉(zhuǎn)換為小分子物質(zhì)方便吸收，并且在發(fā)酵的菌種中特別添加青春雙 歧桿菌，使其成品既含有利于吸收的中藥抗衰老成分還含有微生物等活性成分，是一種新 型的抗衰生物科技產(chǎn)品。
【附圖說明】
[0041] 通過閱讀參照以下附圖對非限制性實施例所作的詳細(xì)描述，本發(fā)明的其它特征、 目的和優(yōu)點將會變得更明顯：
[0042] 圖1為本發(fā)明實施例6中衰老模型的建立及分組對比實驗圖；
[0043]圖2為飼養(yǎng)4周和8周后，血清中S0D含量測定的對比圖；
[0044] 圖3為飼養(yǎng)4周和8周后，血清中MDA含量測定的對比圖。
【具體實施方式】
[0045]下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進行詳細(xì)說明。以下實施例將有助于本領(lǐng)域的技術(shù) 人員進一步理解本發(fā)明，但不以任何形式限制本發(fā)明。應(yīng)當(dāng)指出的是，對本領(lǐng)域的普通技術(shù) 人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進。這些都屬于本發(fā)明 的保護范圍。
[0046] 本發(fā)明中各實施例所選用的酵母提取物為市售產(chǎn)品，生產(chǎn)廠家為安琪酵母股份有 限公司，型號:FD00_A。
[0047] 本發(fā)明中各實施例所選用的青春雙歧桿菌、嗜熱鏈球菌、保加利亞乳桿菌、嗜酸乳 桿菌、鼠李糖乳桿菌、瑞士乳桿菌、胚芽乳桿菌、米曲霉菌、克魯為酵母菌、啤酒酵母菌均購 自蘇州北納創(chuàng)聯(lián)生物技術(shù)有限公司，型號分別為BNCC186535、BNCC134430、BNCC223782、 BNCC186470、BNCC186487、BNCC187918、BNCC337212、BNCC337769、BNCC197021、BNCC336054。
[0048] 本發(fā)明中各實施例所選用的人參提取物、黃芪提取物、枸杞子提取物、紅景天提取 物、三七提取物、何首烏提取物、山藥提取物均為水溶性提取物，提取方法如下:將相應(yīng)中藥 粉碎加入提取罐中，在120°C、1.5個氣壓下，煮36小時;將煮好的液體利用真空抽提罐，保持 溫度60°C以下，負(fù)壓抽掉水蒸氣，即得相應(yīng)提取物。
[0049] 實施例1
[0050] 本實施例涉及一種具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵制劑的制備方法，其包括如下步 驟：
[0051] 1、將培養(yǎng)基和水按比例裝入發(fā)酵罐中，高溫滅菌后將溫度控制在37°C左右，加入 厭氧菌種組合物，混合攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為lOOrpm，溫度為37 °C，持續(xù)厭氧發(fā)酵10小時；
[0052] 2、加入好氧菌種組合物，打開通氣，進行好氧發(fā)酵，控制通氣量在1. Ovvm，攪拌轉(zhuǎn) 速為150rpm，溫度控制在37°C，持續(xù)好氧發(fā)酵12小時；
[0053] 3、關(guān)閉通氣，進行厭氧發(fā)酵，攪拌轉(zhuǎn)速為lOOrpm，溫度控制在37°C，持續(xù)厭氧發(fā)酵 30小時；
[0054] 4、打開通氣，控制通氣量在l.Ovvm，攪拌轉(zhuǎn)速為200rpm，溫度為37°C，持續(xù)好氧發(fā) 酵20小時即得產(chǎn)品初始形態(tài)；
[0055] 5、將第4步獲得的液態(tài)產(chǎn)品分裝冷藏保存即得口服液形態(tài)發(fā)酵制劑;或
[0056] 將第4步產(chǎn)品采用凍結(jié)干燥法獲得粉末后可以裝入膠囊也可制成片劑，即得固態(tài) 發(fā)酵制劑，方便長期保存和運輸。
[0057] 其中，培養(yǎng)基成分、中草藥添加劑成分、厭氧菌種組合物成分以及好氧菌種組合物 成分的分別如表1、表2、表3和表4所不。
[0058] 實施例2
[0059] 本實施例涉及一種具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵制劑的制備方法，其包括如下步 驟：
[0060] 1、將培養(yǎng)基和水按比例裝入發(fā)酵罐中，高溫滅菌后將溫度控制在37°C左右，加入 厭氧菌種組合物，混合攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為120rpm，溫度為37°C，持續(xù)厭氧發(fā)酵11小時；
[0061 ] 2、加入好氧菌種組合物，打開通氣，進行好氧發(fā)酵，控制通氣量在1. Ovvm，攪拌轉(zhuǎn) 速為150rpm，溫度控制在37°C，持續(xù)好氧發(fā)酵12小時；
[0062] 3、關(guān)閉通氣，進行厭氧發(fā)酵，攪拌轉(zhuǎn)速為lOOrpm，溫度控制在37°C，持續(xù)厭氧發(fā)酵 36小時；
[0063] 4、打開通氣，控制通氣量在1.5vvm，攪拌轉(zhuǎn)速為200rpm，溫度為37°C，持續(xù)好氧發(fā) 酵20小時即得產(chǎn)品初始形態(tài)；
[0064] 5、將第4步獲得的液態(tài)產(chǎn)品分裝冷藏保存即得口服液形態(tài)發(fā)酵制劑;或
[0065] 將第4步產(chǎn)品采用凍結(jié)干燥法獲得粉末后可以裝入膠囊也可制成片劑，即得固態(tài) 發(fā)酵制劑，方便長期保存和運輸。
[0066] 其中，培養(yǎng)基成分、中草藥添加劑成分、厭氧菌種組合物成分以及好氧菌種組合物 成分的分別如表1、表2、表3和表4所不。
[0067] 實施例3
[0068] 本實施例涉及一種具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵制劑的制備方法，其包括如下步 驟：
[0069] 1、將培養(yǎng)基和水按比例裝入發(fā)酵罐中，高溫滅菌后將溫度控制在37°C左右，加入 厭氧菌種組合物，混合攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為150rpm，溫度為37°C，持續(xù)厭氧發(fā)酵10小時；
[0070] 2、加入好氧菌種組合物，打開通氣，進行好氧發(fā)酵，控制通氣量在1. Ovvm，攪拌轉(zhuǎn) 速為200rpm，溫度控制在37°C，持續(xù)好氧發(fā)酵12小時；
[0071] 3、關(guān)閉通氣，進行厭氧發(fā)酵，攪拌轉(zhuǎn)速為lOOrpm，溫度控制在37°C，持續(xù)厭氧發(fā)酵 30小時；
[0072] 4、打開通氣，控制通氣量在1.5vvm，攪拌轉(zhuǎn)速為200rpm，溫度為37°C，持續(xù)好氧發(fā) 酵24小時即得產(chǎn)品初始形態(tài)；
[0073] 5、將第4步獲得的液態(tài)產(chǎn)品分裝冷藏保存即得口服液形態(tài)發(fā)酵制劑;或
[0074] 將第4步產(chǎn)品采用凍結(jié)干燥法獲得粉末后可以裝入膠囊也可制成片劑，即得固態(tài) 發(fā)酵制劑，方便長期保存和運輸。
[0075] 其中，培養(yǎng)基成分、中草藥添加劑成分、厭氧菌種組合物成分以及好氧菌種組合物 成分的分別如表1、表2、表3和表4所不。
[0076] 實施例4
[0077] 本實施例涉及一種具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵制劑的制備方法，其包括如下步 驟：
[0078] 1、將培養(yǎng)基和水按比例裝入發(fā)酵罐中，高溫滅菌后將溫度控制在37°C左右，加入 厭氧菌種組合物，混合攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為150rpm，溫度為37 °C，持續(xù)厭氧發(fā)酵12小時；
[0079] 2、加入好氧菌種組合物，打開通氣，進行好氧發(fā)酵，控制通氣量在1.5vvm，攪拌轉(zhuǎn) 速為200rpm，溫度控制在37°C，持續(xù)好氧發(fā)酵14小時；
[0080] 3、關(guān)閉通氣，進行厭氧發(fā)酵，攪拌轉(zhuǎn)速為lOOrpm，溫度控制在37°C，持續(xù)厭氧發(fā)酵 35小時；
[00811 4、打開通氣，控制通氣量在l.Ovvm，攪拌轉(zhuǎn)速為300rpm，溫度為37°C，持續(xù)好氧發(fā) 酵20小時即得產(chǎn)品初始形態(tài)；
[0082] 5、將第4步獲得的液態(tài)產(chǎn)品分裝冷藏保存即得口服液形態(tài)發(fā)酵制劑;或
[0083]將第4步產(chǎn)品采用凍結(jié)干燥法獲得粉末后可以裝入膠囊也可制成片劑，即得固態(tài) 發(fā)酵制劑，方便長期保存和運輸。
[0084] 其中，培養(yǎng)基成分、中草藥添加劑成分、厭氧菌種組合物成分以及好氧菌種組合物 成分的分別如表1、表2、表3和表4所不。
[0085] 實施例5
[0086] 本實施例涉及一種具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵制劑的制備方法，其包括如下步 驟：
[0087] 1、將培養(yǎng)基和水按比例裝入發(fā)酵罐中，高溫滅菌后將溫度控制在37°C左右，加入 厭氧菌種組合物，混合攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為130rpm，溫度為37°C，持續(xù)厭氧發(fā)酵11小時；
[0088] 2、加入好氧菌種組合物，打開通氣，進行好氧發(fā)酵，控制通氣量在1.5vvm，攪拌轉(zhuǎn) 速為150rpm，溫度控制在37°C，持續(xù)好氧發(fā)酵12小時；
[0089] 3、關(guān)閉通氣，進行厭氧發(fā)酵，攪拌轉(zhuǎn)速為lOOrpm，溫度控制在38°C，持續(xù)厭氧發(fā)酵 30小時；
[0090] 4、打開通氣，控制通氣量在1 .Ovvm，攪拌轉(zhuǎn)速為200rpm，溫度為36°C，持續(xù)好氧發(fā) 酵20小時即得產(chǎn)品初始形態(tài)；
[0091] 5、將第4步獲得的液態(tài)產(chǎn)品分裝冷藏保存即得口服液形態(tài)發(fā)酵制劑;或
[0092] 將第4步產(chǎn)品采用凍結(jié)干燥法獲得粉末后可以裝入膠囊也可制成片劑，即得固態(tài) 發(fā)酵制劑，方便長期保存和運輸。
[0093] 其中，培養(yǎng)基成分、中草藥添加劑成分、厭氧菌種組合物成分以及好氧菌種組合物 成分的分別如表1、表2、表3和表4所不。
[0094] 實施例6
[0095] 本實施例涉及一種具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵制劑的制備方法，其包括如下步 驟：
[0096] 1、將培養(yǎng)基和水按比例裝入發(fā)酵罐中，高溫滅菌后將溫度控制在37°C左右，加入 厭氧菌種組合物，混合攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為130rpm，溫度為37°C，持續(xù)厭氧發(fā)酵11小時；
[0097] 2、加入好氧菌種組合物，打開通氣，進行好氧發(fā)酵，控制通氣量在1.5vvm，攪拌轉(zhuǎn) 速為150rpm，溫度控制在37°C，持續(xù)好氧發(fā)酵12小時；
[0098] 3、關(guān)閉通氣，進行厭氧發(fā)酵，攪拌轉(zhuǎn)速為lOOrpm，溫度控制在38°C，持續(xù)厭氧發(fā)酵 30小時；
[00"] 4、打開通氣，控制通氣量在1 .Ovvm，攪拌轉(zhuǎn)速為200rpm，溫度為36°C，持續(xù)好氧發(fā) 酵20小時即得產(chǎn)品初始形態(tài)；
[0100] 5、將第4步獲得的液態(tài)產(chǎn)品分裝冷藏保存即得口服液形態(tài)發(fā)酵制劑;或
[0101] 將第4步產(chǎn)品采用凍結(jié)干燥法獲得粉末后可以裝入膠囊也可制成片劑，即得固態(tài) 發(fā)酵制劑，方便長期保存和運輸。
[0102] 其中，培養(yǎng)基成分、中草藥添加劑成分、厭氧菌種組合物成分以及好氧菌種組合物 成分的分別如表1、表2、表3和表4所不。
[0103] 實施例7
[0104] 本實施例涉及一種具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵制劑的制備方法，其包括如下步 驟：
[0105] 1、將培養(yǎng)基和水按比例裝入發(fā)酵罐中，高溫滅菌后將溫度控制在37°C左右，加入 厭氧菌種組合物，混合攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為130rpm，溫度為37°C，持續(xù)厭氧發(fā)酵11小時；
[0106] 2、加入好氧菌種組合物，打開通氣，進行好氧發(fā)酵，控制通氣量在1.5vvm，攪拌轉(zhuǎn) 速為150rpm，溫度控制在37°C，持續(xù)好氧發(fā)酵12小時；
[0107] 3、關(guān)閉通氣，進行厭氧發(fā)酵，攪拌轉(zhuǎn)速為lOOrpm，溫度控制在38°C，持續(xù)厭氧發(fā)酵 30小時；
[0108] 4、打開通氣，控制通氣量在l.Ovvm，攪拌轉(zhuǎn)速為200rpm，溫度為36°C，持續(xù)好氧發(fā) 酵20小時即得產(chǎn)品初始形態(tài)；
[0109] 5、將第4步獲得的液態(tài)產(chǎn)品分裝冷藏保存即得口服液形態(tài)發(fā)酵制劑;或
[0110] 將第4步產(chǎn)品采用凍結(jié)干燥法獲得粉末后可以裝入膠囊也可制成片劑，即得固態(tài) 發(fā)酵制劑，方便長期保存和運輸。
[0111] 其中，培養(yǎng)基成分、中草藥添加劑成分、厭氧菌種組合物成分以及好氧菌種組合物 成分的分別如表1、表2、表3和表4所不。
[0112] 表1各實施例中中草藥添加劑的配比(份數(shù)均為重量份）
[0113]
[0114] 表2各實施例中培養(yǎng)基的配比(份數(shù)均為重量份）
[0115]

[0116] 表3各實施例中厭氧菌種組合物的配比(份數(shù)均為重量份）
[0117]
[0118] 表4各實施例中好氧菌種組合物的配比(份數(shù)均為重量份）
[0119]
[0120] 實施例7
[0121 ]本發(fā)明制得的中藥發(fā)酵制劑的效果實驗:
[0122] 1.模型建立：
[0123] 取自然衰老16月齡SD大鼠30只（購自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司），隨機 分10只為空白組，10只為對照組，10只為實驗組。
[0124] 空白組的10只大鼠進行正常飼養(yǎng)，對照組的10只大鼠在其飼料(購自江蘇省協(xié)同 醫(yī)藥生物工程有限責(zé)任公司，為SPF級營養(yǎng)強化鼠糧）中添加 lwt%的實施例5中的中藥提取 物，實驗組的10只大鼠在飼料中添加 lwt%實施例5中制得的發(fā)酵制劑。如圖1所示，各組其 他飼養(yǎng)環(huán)境均相同，分別飼養(yǎng)4周和8周后對各組收集數(shù)據(jù)進行對比。
[0125] 2.抗衰老檢測指標(biāo)的確定：
[0126] 目前應(yīng)用于抗衰老評定的指標(biāo)主要是抗氧化類物質(zhì)，細(xì)胞代謝產(chǎn)生的自由基，在 衰老中起到重要作用。超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase，SOD)是體內(nèi)自由基防御體 系中最重要的酶類抗氧化劑，它可直接清除超氧陰離子自由基，阻斷自由基連鎖反應(yīng)，保護 組織免受超氧陰離子自由基的損傷。S0D活力的高低間接反應(yīng)機體抗氧化的能力，即反應(yīng)機 體抗衰老能力。氧自由基通過生物膜中不飽和脂肪酸的過氧化作用引起細(xì)胞損傷，而且能 通過脂氫過氧化物的分解產(chǎn)物引起細(xì)胞損傷。因此，檢測丙二醛的量可反映機體內(nèi)脂質(zhì)過 氧化的程度，間接地反映出細(xì)胞損傷的程度。
[0127] 3.抗衰老檢測指標(biāo)的檢測：
[0128] 實驗進行4周和8周后，分別取所有的三組的30只大鼠血清，測定各組大鼠血清中 超氧化物歧化酶(S0D)的活性和丙二醛(MDA)的含量；
[0129] (1)超氧化物歧化酶(S0D)活性測定用黃嘌呤氧化酶法，按照試劑盒說明進行。
[0130] S0D測定原理:通過黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶反應(yīng)系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子自由基，后者 氧化羥胺形成亞硝酸鹽，在顯色劑的作用下呈現(xiàn)紫紅色，測其吸光度。當(dāng)被測樣品中含有 S0D時，對超氧陰離子自由基有專一性的抑制作用，使形成的亞硝酸鹽減少，比色時測定管 的吸光度值低于對照管的吸光度值，通過公式計算可求出被測樣品中的S0D活力。
[0131] (2)丙二醛(MDA)含量測定用硫代巴比妥酸比色法。
[0132] MDA測定原理:過氧化脂質(zhì)降解產(chǎn)物中的丙二醛可與硫代巴比妥酸縮合，形成紅色 產(chǎn)物，在532nm處有最大吸收峰，根據(jù)測定的0D值計算MDA的含量。
[0133] 3.檢測結(jié)果：
[0134] (1)飼料中添加抗衰老發(fā)酵制劑對大鼠血清中超氧化物歧化酶(S0D)活性的影響 結(jié)果如圖2所示：空白組，對照組，實驗組飼養(yǎng)4周時，血清中S0D(U/ml)活性分別是：75、89、 105,飼養(yǎng)8周時S0D(U/ml)活性分別是:70、86、103，可見，無論是飼養(yǎng)4周還是8周，與空白組 比較，對照組血清中S0D活性略有提高，實驗組和空白組相比，血清中S0D活性顯著升高。
[0135] (2)飼料中添加抗衰老發(fā)酵制劑對大鼠血清中丙二醛(MDA)含量的影響結(jié)果如圖3 所示：空白組，對照組，實驗組飼養(yǎng)4周時，血清中MDA(nmol/ml)含量分別是：12.9、11.5、 9.0，飼養(yǎng)8周時血清中1?從(11111〇1/1111)含量分別是 ：13.4、11.8、9.2，可見，無論是飼養(yǎng)4周還 是8周，與空白組比較，對照組血清中MDA含量略有降低;實驗組和空白組相比，血清MDA含量 顯著降低。
[0136] 綜上所述，本發(fā)明的抗衰老發(fā)酵制劑可以顯著減緩和改善SD大鼠的衰老狀態(tài)。
[0137] 以上對本發(fā)明的具體實施例進行了描述。需要理解的是，本發(fā)明并不局限于上述 特定實施方式，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以在權(quán)利要求的范圍內(nèi)做出各種變形或修改，這并不影 響本發(fā)明的實質(zhì)內(nèi)容。
【主權(quán)項】
1. 一種具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于，包含按重量份數(shù)計的如下組 分： 食鹽 20~30份； 糖蜜 100~150份； 葡萄糖 300~400份； 酵母提取物 100~200份； 中草藥添加劑 50…100份； 漱 口000~:16000 機。2. 如權(quán)利要求1所述的具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于，所述中草藥添 加劑包括按重量份數(shù)計的如下組分： 人參提取物 ]0~]2份； 黃巧提取物 10~12份； 構(gòu)杞子提取物 8~10份;^ 紅景天提取物 8~10份; 三屯提取物 11~13份； 何首烏提取物 8~10份； 山藥提取物 ]0~]2份； 蜂王漿 8~10份。3. -種利用權(quán)利要求1或2所述的培養(yǎng)基制備具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵制劑的方法， 其特征在于，包括如下步驟： 步驟一，在厭氧菌種組合物存在的條件下，取培養(yǎng)基和水進行第一次厭氧發(fā)酵； 步驟二，加入好氧菌種組合物，進行第一次好氧發(fā)酵； 步驟Ξ，進行第二次厭氧發(fā)酵； 步驟四，進行第二次好氧發(fā)酵，即得所述中藥發(fā)酵制劑。4. 如權(quán)利要求3所述的具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵制劑的制備方法，其特征在于，步驟 一中，所述厭氧菌種組合物包括按重量份數(shù)計的如下組分： 青春雙歧桿菌 13~;15份; 嗜熱鏈球菌 8~10份； 保加利亞乳桿菌 8~10粉； 嗜酸乳桿菌 8~10份； 鼠李糖乳桿菌 8~10份； 瑞±乳桿菌 8~10份； 胚芽就桿菌 8~10:傲。5. 如權(quán)利要求3所述的具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵制劑的制備方法，其特征在于，步驟 二中，所述好氧菌種組合物包含按重量份數(shù)計的如下組分： 米曲霉菌 18~20份； 克魯為酵母菌 13~15份； 啤酒酵母菌 13~15份。6. 如權(quán)利要求3所述的具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵制劑的制備方法，其特征在于，所述 第一次厭氧發(fā)酵的時間為10~12h，發(fā)酵的溫度為32~39°C。7. 如權(quán)利要求3所述的具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵制劑的制備方法，其特征在于，所述 第一次好氧發(fā)酵的時間為12~2地，發(fā)酵的溫度為32~39°C。8. 如權(quán)利要求3所述的具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵制劑的制備方法，其特征在于，所述 第二次厭氧發(fā)酵的時間為30~36h。9. 如權(quán)利要求3所述的具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵制劑的制備方法，其特征在于，所述 第二次好氧發(fā)酵的時間為20~24h。10. 如權(quán)利要求3所述的具有抗衰老功能的中藥發(fā)酵制劑的制備方法，其特征在于，所 述第一次好氧發(fā)酵和第二次好氧發(fā)酵中的通氣量均控制為1.0~1.5vvm。
【文檔編號】A61P1/00GK105935404SQ201610378855
【公開日】2016年9月14日
【申請日】2016年5月31日
【發(fā)明人】劉朋程, 朱兵銳
【申請人】上海華顏醫(yī)藥科技有限公司