Virosaine A的哌嗪基和咪唑基衍生物的組合物在抗急性腎衰藥物中的應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開一種Virosaine A的哌嗪基和咪唑基衍生物的組合物在抗急性腎衰藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明涉及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及組合物、制備方法及其在制備抗急性腎衰藥物上的用途。本發(fā)明公開了一種組合物及其制備方法。藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明的組合物具有抗急性腎衰的作用，具有開發(fā)抗急性腎衰藥物的價(jià)值。
【專利說明】
Vi rosa i ne A的脈瞎基和咪性基衍生物的組合物在抗急性腎 衰藥物中的應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體設(shè)及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 急性腎功能衰竭(Acute Renal化ilure，ARF)是由多種原因引起的臨床綜合征， 可見于臨床各科病人，發(fā)病率高且往往帶來嚴(yán)重后果，其特點(diǎn)為短期內(nèi)（數(shù)小時(shí)至數(shù)天）腎 功能急劇下降，臨床表現(xiàn)為急性少尿(尿量<400mLPd)或無尿(尿量〈lOOmLPd)，體內(nèi)氮質(zhì)代 謝產(chǎn)物排出產(chǎn)生障礙，迅速出現(xiàn)氮質(zhì)血癥，水及電解質(zhì)、酸堿平衡素亂，并引起全身各系統(tǒng) 相應(yīng)功能失調(diào)。引起急性腎衰的主要因素是腎血流量的急劇減少，W及由于腎組織缺血引 起的氧化應(yīng)激和細(xì)胞損傷，最終導(dǎo)致腎臟組織結(jié)構(gòu)的破壞和功能的惡化。目前臨床上尚無 公認(rèn)的治療急性腎衰有效的藥物，僅能通過糾正水電解質(zhì)平衡，糾正酸中毒等對(duì)癥治療措 施改善癥狀，后期還需要通過血液透析維持機(jī)體機(jī)能。在改善腎臟血流灌注障礙和減輕腎 組織損傷方面有明顯療效的臨床藥物少見。
[0003] 從天然產(chǎn)物中尋找化合物或先導(dǎo)化合物并進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾獲得其衍生物，從而得到 高效低毒的潛在藥物最有重要價(jià)值。
[0004] 本發(fā)明設(shè)及的化合物I是一個(gè)2012年發(fā)表（Bing-Xin Zhao et al .， 2012.Virosaines A and B,Two New Birdcage-Shaped Securinega Alkaloids with an Unprecedented Skeleton from Flueggea virosa.Organic Letters 14(2012)3096- 3099)的化合物，我們對(duì)化合物I進(jìn)行了結(jié)構(gòu)修飾，獲得了兩個(gè)新的衍生物即化合物HI和化 合物IV，并用化合物ΠΙ和化合物IV制備了組合物并對(duì)該組合物抗急性腎衰活性進(jìn)行了評(píng) 價(jià)，其具有抗急性腎衰活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明公開了一個(gè)新的組合物，該組合物由化合物ΙΠ 和化合物IV組成，該組合物 中化合物ΠI和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為40 %和60 %。
[0006]
[0007] 本發(fā)明公開的組合物可W制成藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的載體。
[0008] 本發(fā)明的目的是提供組合物用于治療急性腎衰的用途，即用于制備治療急性腎衰 藥物的用途。
[0009] 本發(fā)明的組合物對(duì)急性腎衰疾病有明顯的治療作用。
[0010] 通過我們的研究發(fā)現(xiàn)組合物能夠改善腎臟的功能。
[0011] W下通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受具體實(shí) 施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加 W限定。
【具體實(shí)施方式】
[0012] 實(shí)施例1化合物Virosaine A的制備
[0013] 化合物Virosaine A(I)的制備方法參照Bing-Xin Zhao等人發(fā)表的文獻(xiàn)(Bing- Xin Zhao et al.,2012.Virosaines A and B,Two New Birdcage-Shaped Securinega Alkaloids with an Unprecedented Skeleton from Flueggea virosa.Organic Letters 14(2012)3096-3099)的方法。
[0014]
[0015] 實(shí)施例2 Virosaine A的0-漠乙基衍生物（II)的合成
[0016] 將化合物I (235mg，1. OOmmo 1)溶于20mL苯，向溶液中加入四下基漠化錠（TBAB) (0.08g)，1，2-二漠乙燒(3.760g，20.0 Ommol)和5mL的50%氨氧化鋼溶液?；旌衔镌?5攝氏 度攬拌化。她之后將反應(yīng)液倒入冰水中，立即用二氯甲燒萃取兩次，合并有機(jī)相溶液。然后 對(duì)有機(jī)相溶液依次用水和飽和食鹽水洗涂3次，再用無水硫酸鋼干燥，最后減壓濃縮去除溶 劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油酸/丙酬=100:1.0，v/v)，收 集棟色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棟色粉末(261mg，78%)。
[0017] iHMffi(500MHz，DMS0-d6)S5.91(s，lH)，4.07(s，lH)，3.81(s，2H)，3.59(s，lH)， 3.43(s，2H)，3.33(s，lH)，2.26(s，lH)，1.58(d J = 9.8Hz，3H)，1.41(s，2H).
[001 引"C 醒R(125MHz，DMS0-d6)Sl71.81(s)，106.71(s)，79.95(s)，74.33(s)，69.81 (s),66.68(s),44.21(s),35.56(s),33.28(s),25.85(s),21.88(s).
[0019] HRMS(ESI)m/z[M+扣+calcd for Cm出7BrN04:342.0:341;found 342.0:343.
[0020]
[0021] 實(shí)施例3 Virosaine A的0-(贓嗦基）乙基衍生物（III)的合成
[0022] 將化合物II(17Img，0.5mmo 1)溶于20mL乙臘當(dāng)中，向其中加入無水碳酸鐘(690mg， S.Ommol)，艦化鐘（168mg，1 .Ommol)和無水贓嗦（3446mg，40mmol)，混合物加熱回流化。反應(yīng) 結(jié)束后將反應(yīng)液倒入冰水中，用等量二氯甲燒萃取2次，合并有機(jī)相。依次用水和飽和食鹽 水洗涂合并之后的有機(jī)相，再用無水硫酸鋼干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗 品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油酸/丙酬= 100: l.〇，v/v)，收集棟色集中洗脫帶并揮 去溶劑即得到化合物π I的淡棟色固體(123.2mg，71 % )。
[0023] 1h 醒R(500MHz，DMS0-d6)S5.90(s，lH)，4.04(s，lH)，3.59(s，lH)，3.50(s，2H), 3.40(d J = 65.9Hz，lH)，2.64(s，4H)，2.54(s，2H)，2.31(s，4H)，2.22(s，lH)，1.62(s，2H), 1.56(s，lH)，1.43(s，2H)，0.97(s，lH).
[0024] "C NMR(125MHz，DMS0-d6)Sl71.84(s)，106.72(s)，79.94(s)，74.33(s)，66.72(d， J=9.2Hz),54.45(s),54.16(s),45.25(s),44.20(s),35.56(s),25.86(s),21.87(s).
[0025] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for Cl姐26化〇4:348.1923;found:：M8.1927。
[0026]
[0027]
[0028] 實(shí)施例4 Virosaine A的0-(咪挫基）乙基衍生物（IV)的合成
[0029] 將化合物II(17Img，0.5mmo 1)溶于25mL乙臘當(dāng)中，向其中加入無水碳酸鐘(690mg， 5. Ommo 1)，艦化鐘（2 5 2mg，1.5mmo 1)和咪挫（8 7 Omg，1 Ommo 1)，混合物加熱回流化。反應(yīng)結(jié)束 后將反應(yīng)液倒入25mL冰水中，用等量二氯甲燒萃取3次，合并有機(jī)相。依次用水和飽和食鹽 水洗涂合并之后的有機(jī)相，再用無水硫酸鋼干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗 品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油酸/丙酬= 100:0.3，v/v)，收集棟色集中洗脫帶并揮 去溶劑即得到化合物IV的淡棟色固體(144. lmg，71%)。
[0030] 1h NMR(500MHz，DMS0-d6)S7.86(s，lH)，7.12(s，lH)，6.71(s，lH)，5.99(s，lH), 4.09(s，lH)，3.89(d，J=16.4Hz，2H)，3.80(s，2H)，3.58(s，lH)，3.35(s，lH)，2.31(s，lH)， 1.68(s,lH),1.58(s,2H),1.44(s,2H).
[0031] 13c NMR(125MHz，DMS0-d6)i3c 醒Ra25MHz，Common 醒R Solvents)Sl71.82(s), 139.64(s)，128.67(s)，119.31(s)，106.70(s)，79.92(s)，74.31(s)，67.61(s)，66.66(s), 44.20(s),43.75(s),35.52(s),25.85(s),21.86(s).
[0032] HRMS化SI):m/z[M+H]+calcd for Cl訊20化〇4:330.1454;found:330.1458。
[0033]
[0034] 實(shí)施例5組合物對(duì)急性腎衰大鼠的治療作用 [00對(duì)（一)實(shí)驗(yàn)方法
[0036] 組合物的制備：將研磨之后過200目網(wǎng)的40mg化合物III的粉末和研磨之后過200 目網(wǎng)的60mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用滿輪攬拌儀混合即得到lOOmg組合物， 使用時(shí)用水溶解運(yùn)lOOmg的組合物即得到組合物的溶液。
[0037] 采用肌肉注射甘油致急性腎功能衰竭大鼠動(dòng)物模型。選用180~220g健康雄性SD 大鼠30只，隨機(jī)分為5組:假手術(shù)組(肌肉注射生理鹽水）；模型組(肌肉注射甘油）；給藥干預(yù) 組(組合物、化合物ΠΙ或者化合物IV 0.6mg/Kg，肌肉注射甘油），各組大鼠在甘油造模后立 即尾靜脈注射生理鹽水或待試藥物，12和24小時(shí)后再給藥一次。
[003引（二)觀察指標(biāo)
[0039] 大鼠末次給藥或生理鹽水后放入代謝籠收集24小時(shí)尿，留尿后6小時(shí)用4%水合氯 醒腹腔注射麻醉，采用激光多普勒血流儀測定造模后及治療后雙側(cè)腎臟血流量，取平均值 作為單只動(dòng)物腎血流量;取血制備血清，測定血BUN和化e(均按試劑盒說明書操作）。
[0040] (立)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0041] 1.組合物可增加急性腎衰小鼠腎血流量
[0042] 組合物可顯著增加急性腎衰小鼠腎血流量，而化合物ΙΠ 和化合物IV無此作用。
[0043] 表1組合物對(duì)急性腎衰小鼠腎血流量的影響
[0044]
[0045] 沖<0.05vs急性腎衰模型組
[0046] 2.組合物對(duì)急性腎衰小鼠腎功能具保護(hù)作用
[0047] 急性腎衰大鼠靜脈注射生理鹽水24小時(shí)后，血清腳財(cái)日化e見表2。急性腎衰模型組 明顯高于假手術(shù)組，說明模型組動(dòng)物腎功能損害嚴(yán)重。組合物能改善急性腎衰大鼠的腎功 能(P<0.05)，而化合物ΠI和化合物IV無此作用。見表2。
[0048] 表2各試驗(yàn)組大鼠腎功能指標(biāo)比較
[0049]
[00加]沖<0.05vs急性腎衰模型組
[0051] 結(jié)論:組合物能夠保護(hù)腎臟的功能，可W用來制備抗急性腎衰藥物。而化合物III 和化合物IV不能夠保護(hù)腎臟，不可用來制備抗急性腎衰藥物。
[0052] 實(shí)施例6本發(fā)明所設(shè)及組合物片劑的制備
[0053] 取2克組合物，加入制備片劑的常規(guī)輔料18克，混勻，常規(guī)壓片機(jī)制成100片。
[0054] 實(shí)施例7本發(fā)明所設(shè)及組合物膠囊的制備
[0055] 取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100粒。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種組合物，其特征為該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物中化合物 III和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為40%和60%，2. 如權(quán)利要求1所述的組合物的制備方法，其特征為:將化合物III的粉末和化合物IV 的粉末按照質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為40%和60%充分混合。3. -種如權(quán)利要求1所述的組合物在治療急性腎衰藥物中的應(yīng)用。4. 如權(quán)利要求3所述的組合物在治療急性腎衰藥物中的應(yīng)用，其特征為:所述組合物改 善急性腎衰所引起的腎臟血流量的降低。5. 如權(quán)利要求3所述的組合物在治療急性腎衰藥物中的應(yīng)用，其特征為:所述組合物改 善急性腎衰引起的血清BUN的升高。6. 如權(quán)利要求3所述的組合物在治療急性腎衰藥物中的應(yīng)用，其特征為:所述組合物改 善急性腎衰引起的血清Cre的升高。
【文檔編號(hào)】C07D498/22GK105920005SQ201610278600
【公開日】2016年9月7日
【申請日】2016年4月28日
【發(fā)明人】王卓婷
【申請人】南京賦海澳賽醫(yī)藥科技有限公司