背景本發(fā)明涉及n-(2，6-二(1-甲基乙基)苯基)-n′-((1-(4-(二甲基氨基)苯基)環(huán)戊基)甲基)脲鹽酸鹽(還稱為“atr-101”)的新型固體藥物形式，以及涉及其的組合物、方法和試劑盒。相關(guān)技術(shù)描述腎上腺由兩部分組成：其中產(chǎn)生某些激素的外部皮質(zhì)，和內(nèi)部髓質(zhì)，所述內(nèi)部髓質(zhì)是神經(jīng)系統(tǒng)的一部分，其中產(chǎn)生神經(jīng)系統(tǒng)激素。皮質(zhì)專注合成糖皮質(zhì)激素、鹽皮質(zhì)激素和雄激素。特定的皮質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生特定激素，包括醛固酮、皮質(zhì)醇和雄激素，如雄烯二酮。腎上腺皮質(zhì)瘤在皮質(zhì)中發(fā)生。存在兩種主要類型的腎上腺皮質(zhì)瘤：良性的腺瘤(adenomas)和惡性的腎上腺皮質(zhì)癌(adrenocorticalcarcinomas)。在許多人中，腺瘤不產(chǎn)生癥狀，但在一些情形中，該腫瘤引起過量的激素產(chǎn)生。腎上腺皮質(zhì)癌可以產(chǎn)生多種激素，即皮質(zhì)醇、醛固酮、雌激素或睪酮以及其他的激素。腎上腺皮質(zhì)癌(acc)是罕見的、高度惡性的腫瘤。該腫瘤常常釋放這些激素，這些激素在女性中能夠?qū)е履行孕誀睢＿^量的激素可能引起或可能不引起癥狀。一般來說，通過摘除腎上腺或使用治療干預(yù)來治療腺瘤。類似地，腎上腺皮質(zhì)癌能夠?qū)е乱鹈黠@身體變化的激素產(chǎn)生，所述身體變化諸如增重、流體累積(fluidbuild-up)、兒童早熟(earlypuberty)或女性過多的面部毛發(fā)或體毛。盡管起因是未知的，但腎上腺皮質(zhì)癌在低于5歲的兒童中和三十多歲以及四十多歲的成年人中最常見。腎上腺皮質(zhì)癌可能與家族傳下來的(遺傳的)癌癥綜合征相關(guān)。男性和女性都可能發(fā)展這種腫瘤。盡管隨著現(xiàn)代分子技術(shù)的出現(xiàn)對(duì)于疾病的理解已有進(jìn)步，但是患有晚期疾病的患者(他們占診斷的大約一半)的預(yù)后仍然令人失望。靶向療法正處在臨床開發(fā)中，但是其是否將在疾病的管理中產(chǎn)生突破仍然是未知的(hammer，g.d.和t.else，編，adrenocorticalcarcinoma，basicscienceandclinicalconcepts，2011，newyork：springer)。fda核準(zhǔn)用于acc的唯一的治療劑是米托坦(mitotane)(o，p′-ddd)，其是殺蟲劑ddt的一種衍生物，在二十世紀(jì)五十年代發(fā)現(xiàn)，那時(shí)發(fā)現(xiàn)其破壞狗的腎上腺皮質(zhì)。盡管使用了半個(gè)世紀(jì)，但是其分子機(jī)制仍然是不清楚的。該藥物需要化學(xué)轉(zhuǎn)化成活性的自由基形式，然后該自由基形式誘導(dǎo)脂質(zhì)過氧化和細(xì)胞死亡。米托坦還阻抑類固醇生成并且抑制其它細(xì)胞色素p450-種類的酶類(id.)。盡管米托坦廣泛用于治療acc，但是其僅在四分之一到三分之一的患者中具有增加的無進(jìn)展存活。對(duì)于得到治療益處的患者，效果是暫時(shí)的，平均延緩疾病進(jìn)展五個(gè)月(id.)。米托坦作為治療劑具有多種問題，這使得其應(yīng)用困難，并且需要對(duì)患者密切監(jiān)護(hù)。因此，對(duì)于用于治療acc和其他相關(guān)的疾病或病況的新型治療劑存在重大需求。一種這樣有希望的藥劑是n-(2，6-二(1-甲基乙基)苯基)-n′-((1-(4-(二甲基-氨基)苯基)環(huán)戊基)甲基)脲鹽酸鹽(“atr-101”)。atr-101的游離堿形式具有下述化學(xué)結(jié)構(gòu)：之前trivedi等人(j.med.chem.37：1652-1659，1994)已經(jīng)報(bào)道了atr-101的化學(xué)合成。然而，該過程沒有提供適于固體給藥(特別是關(guān)于膠囊或片劑形成)的形式的atr-101，并且沒有提供高純度的atr-101。盡管在該領(lǐng)域中，特別是在atr-101的情形中，已經(jīng)取得了顯著進(jìn)步，但是對(duì)于有此需要的患者，包括患有acc和/或其他病癥或病況(如庫欣綜合征和先天性腎上腺增生(congenitaladrenalhyperplasia，cah))的患者，對(duì)用于atr-101的口服給藥的改進(jìn)的技術(shù)和產(chǎn)品仍然存在重要的需求。簡(jiǎn)述本發(fā)明一般提供n-(2，6-二(1-甲基乙基)苯基)-n′-((1-(4-(二甲基氨基)苯基)環(huán)戊基)甲基)脲鹽酸鹽(還稱為“atr-101”)的新型固體藥物形式，以及用于其口服給藥的組合物、方法和/或試劑盒。atr-101在異常腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞活性(包括acc和下文中更詳細(xì)描述的其他病況)的治療中具有特別用途。本文提供的atr-101的固體藥物形式提供高負(fù)載能力，由此允許將atr-101配制成適于口服給藥的形式。在一個(gè)實(shí)施方案中，提供具有下述特定粒度分布的atr-101固體藥物形式：d(0.1)約為2μm，d(0.5)約為12μm，以及d(0.9)約為49μm。在一個(gè)實(shí)施方案中，提供具有在約228.28℃的差示掃描量熱法(dsc)開始和在約230.93℃的吸熱作用(endotherm)的atr-101固體藥物形式。在一個(gè)實(shí)施方案中，提供具有超過下述任一值的純度的atr-101固體藥物形式：95％(w/w)，96％(w/w)，97％(w/w)，98％(w/w)和99％(w/w)。在一個(gè)實(shí)施方案中，提供一種口服劑量產(chǎn)品，其包含atr-101的固體藥物形式，諸如膠囊、片劑或丸劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，提供適于口服給藥的單位劑型的固體藥物組合物。所述組合物包含與一種或多種藥用載體或賦形劑組合的atr-101，其中atr-101以約250-750mg范圍內(nèi)的水平(按照atr-101的游離堿形式測(cè)量)存在于單位劑型的固體藥物組合物中。在更具體的實(shí)施方案中，按照atr-101的游離堿形式測(cè)量，atr-101以處于或超過單位劑型總重量的50重量％、60重量％、65重量％或70重量％的水平存在于固體藥物組合物中。在另一個(gè)實(shí)施方案中，提供用于施用固體藥物組合物的方法，所述方法包括向有此需要的受試者口服施用單位劑型的atr-101。在更具體的實(shí)施方案中，所述方法包括在口服施用單位劑型的atr-101的時(shí)候或在相近的時(shí)候口服施用酸性劑。所述酸性劑用于提高胃液酸度(降低ph)，并且，包括例如，酸性水溶液，如非飲食性可樂飲料，以及固相劑型的酸性劑。在甚至更具體的實(shí)施方案中，共同施用包括與所述固體藥物組合物的口服施用同時(shí)、或在緊密相近的時(shí)候吞服或飲用非飲食性可樂飲料的全部或一部分。代表性的酸性水溶液具有下述范圍的ph：2.0-3.5，2.2-3.0或2.3-2.7，包括端點(diǎn)值。在另一個(gè)實(shí)施方案中，提供用于與酸性劑共同施用atr-101的試劑盒。所述試劑盒包括多個(gè)與用于共同施用的酸性劑組合的atr-101口服單位劑型和/或用于在口服施用單位劑型的atr-101的時(shí)候或相近的時(shí)候與酸性劑共同施用的使用說明。在一個(gè)實(shí)施方案中，提供用于治療有此需要的患者中的腎上腺皮質(zhì)癌的方法，所述方法包括給所述患者施用治療有效量的包含atr-101固體藥物形式的口服劑量產(chǎn)品。在一個(gè)實(shí)施方案中，提供用于治療有此需要的患者中的先天性腎上腺增生或庫欣綜合征的方法，所述方法包括向所述患者施用治療有效量的包含atr-101固體藥物形式的口服劑量產(chǎn)品。在一個(gè)實(shí)施方案中，提供用于治療有此需要的患者中的良性腺瘤、增加的激素產(chǎn)生、腎上腺皮質(zhì)癌、先天性腎上腺增生、過量的皮質(zhì)醇產(chǎn)生、與過量的皮質(zhì)醇產(chǎn)生相關(guān)的癥狀、醛固酮增多癥(hyperaldosteronism)或21-羥化酶缺乏的方法，所述方法包括向所述患者施用治療有效量的包含atr-101固體藥物形式的口服劑量產(chǎn)品。在一個(gè)實(shí)施方案中，提供用于減少有此需要的患者中的腎上腺皮質(zhì)瘤尺寸的方法，所述方法包括向所述患者施用治療有效量的包含atr-101固體藥物形式的口服劑量產(chǎn)品。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法進(jìn)一步包括施用第二治療劑。在更具體的實(shí)施方案中，所述第二治療劑是化療劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，提供制備高純度atr-101的方法，所述方法包括在合成中使用結(jié)晶的2，6-二異丙基苯胺鹽酸鹽(2，6-diisopropylanalinehydrochloridesalt)作為中間體的步驟。具體而言，在用于形成作為游離堿的atr-101的異氰酸鹽偶聯(lián)步驟中使用2，6-二異丙基苯胺鹽酸鹽。該步驟允許大規(guī)模產(chǎn)生高純度水平的atr-101，使2，4-二異丙基區(qū)域異構(gòu)體(regioisomer)和2-正丙基-6-異丙基異構(gòu)體雜質(zhì)減至最少。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在原位(與分離的中間體相對(duì))形成相應(yīng)的異氰酸酯，從而避免形成另外的雜質(zhì)；即，下文討論的對(duì)稱的脲。通過使用這些合成步驟，能夠以大規(guī)模產(chǎn)量獲得高純度的atr-101，諸如純度超過98％(w/w)或99％(w/w/)。本發(fā)明的這些和其他方面在參考下述詳細(xì)描述時(shí)將變得清楚。為了這一目的，本文列出了多篇參考文獻(xiàn)，它們更詳細(xì)地描述了某些背景信息、步驟、化合物和/或組合物，并且分別通過引用以其整體結(jié)合在本文中。附圖簡(jiǎn)述圖1是atr-101固體藥物形式的lc/ms質(zhì)譜。圖2是atr-101固體藥物形式的質(zhì)子nmr譜。圖3是atr-101固體藥物形式的2-d1hnmr譜(cosy)。圖4是atr-101固體藥物形式的13cnmr譜。圖5是atr-101固體藥物形式的ft-ir譜。圖6是atr-101固體藥物形式的dsc結(jié)果。圖7是atr-101固體藥物形式的xrpd衍射。圖8是atr-101固體藥物形式的晶體結(jié)構(gòu)中的兩種無序組分的疊置(為了清楚，省略了h原子)。圖9是顯示作為粒度的函數(shù)的暴露的曲線圖。詳述在下述描述中，列出某些具體的詳細(xì)信息，以提供對(duì)多個(gè)實(shí)施方案的透徹理解。然而，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該明白，沒有這些詳細(xì)信息也可以實(shí)施本發(fā)明。在其他情形中，為了避免不必要地使實(shí)施方案的描述變得不清楚，沒有顯示或詳細(xì)描述公知的結(jié)構(gòu)。除非上下文另外需要，在整個(gè)說明書以及之后的權(quán)利要求書中，詞語“包括”及其變體，諸如“包含”和“含有”應(yīng)該以開放式包含意義解釋，即，解釋為“包括，但不限于”。此外，本文提供的標(biāo)題僅是為了便利，而不是解釋本發(fā)明的范圍或意思。在整個(gè)說明書中，提及“一個(gè)實(shí)施方案”或“某個(gè)實(shí)施方案”意指與該實(shí)施方案相聯(lián)系所述的特定的特征、結(jié)構(gòu)或特點(diǎn)包括在至少一個(gè)實(shí)施方案中。由此，在整個(gè)說明書的不同地方出現(xiàn)短語“在一個(gè)實(shí)施方案中”或“在某個(gè)實(shí)施方案中”不必要都是指該實(shí)施方案。此外，在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，特定的特征、結(jié)構(gòu)或特點(diǎn)可以以任何適當(dāng)?shù)姆绞浇M合。并且，當(dāng)用在本說明書和后附的權(quán)利要求書中時(shí)，單數(shù)形式“某個(gè)”、“一個(gè)”和“這個(gè)”包括復(fù)數(shù)引用，除非內(nèi)容另外清楚表明。還應(yīng)該注意，術(shù)語“或”通常以其包括“和/或”的意義使用，除非內(nèi)容另外清楚表明。用于本文時(shí)，“約”意指所述值的±20％，并且更具體地包括所述值的±10％、±5％、±2％和±1％的值。用于本文時(shí)，“異常腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞行為”包括增加的激素產(chǎn)生，庫欣綜合征，良性腺瘤、腎上腺皮質(zhì)癌(acc)，轉(zhuǎn)移性腎上腺皮質(zhì)癌，先天性腎上腺增生，醛固酮增多癥，包括康恩綜合征(connsyndrome)，單側(cè)醛固酮產(chǎn)生腺瘤(unilateralaldosterone-producingadenoma)，雙側(cè)腎上腺增生(bilateraladrenalhyperplasia)(或特發(fā)性高醛固酮癥(idiopathichyperaldosteronism，iha))，腎素響應(yīng)性腺瘤(renin-responsiveadenoma)，原發(fā)性腎上腺增生(primaryadrenalhyperplasia)和可用糖皮質(zhì)激素治療的醛固酮增多癥(glucocorticoid-remediablealdosteronism，gra)，以及21-羥化酶缺乏。用于本文時(shí)，“與異常腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞行為相關(guān)的病癥”用在本文中意指直接或間接由異常的腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞行為引起的癥狀和/或病況。在本文中將清楚的是，這些直接或間接由異常的腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞行為引起的癥狀和/或病況為數(shù)眾多。用于本文時(shí)，“腎上腺皮質(zhì)”和“腎上腺的皮質(zhì)”旨在具有相同的意思。用于本文時(shí)，“庫欣綜合征”意指由身體組織長(zhǎng)期暴露于高水平的皮質(zhì)醇所引起的激素病癥。庫欣綜合征有時(shí)稱作“皮質(zhì)醇增多癥(hypercortisolism)”(過量的皮質(zhì)醇產(chǎn)生)。庫欣綜合征包括該疾病的多種亞型，包括庫欣病，腎上腺庫欣綜合征，和異位acth綜合征，其按照皮質(zhì)醇增多癥的起因分類。庫欣病，也稱為腦垂體庫欣病，由垂體腺腫瘤引起，所述垂體腺腫瘤過量分泌acth，過量的acth又刺激腎上腺產(chǎn)生更多的皮質(zhì)醇。異位acth綜合征由在垂體腺外產(chǎn)生的腫瘤引起，所述腫瘤能夠產(chǎn)生acth，所述acth刺激皮質(zhì)醇產(chǎn)生。腎上腺庫欣綜合征由引起過量皮質(zhì)醇分泌的腎上腺異常(通常是腎上腺腫瘤)引起。用于本文時(shí)，“受試者”意指哺乳動(dòng)物，包括人。用于本文時(shí)，短語術(shù)語“治療有效量”是指治療劑治療、改善或預(yù)防疾病或病況或表現(xiàn)出可檢測(cè)的治療或預(yù)防效果的量。例如，該效果通過腫瘤尺寸的減小來檢測(cè)。例如，該效應(yīng)也通過化學(xué)標(biāo)記、甾醇水平或抗原水平檢測(cè)。治療效果還包括物理癥狀的減少，諸如降低的體溫。對(duì)于受試者精確的有效量將取決于受試者的大小和健康狀況、病況的性質(zhì)和程度、選擇施用的治療劑或治療劑組合和本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其他變量。對(duì)于給定的情形，有效量通過常規(guī)實(shí)驗(yàn)確定，并且在臨床醫(yī)師的判斷之內(nèi)。用于本文時(shí)，“治療”包括減緩或終止病癥進(jìn)展的治療性應(yīng)用、預(yù)防病癥發(fā)展的預(yù)防性應(yīng)用和/或病癥的逆轉(zhuǎn)。病癥的逆轉(zhuǎn)不同于減緩或終止病癥的治療性應(yīng)用，不同在于，使用逆轉(zhuǎn)的方法，不僅病癥的進(jìn)展被完全終止，在某種程度上推動(dòng)細(xì)胞行為至在不存在所述病癥時(shí)將觀察到的正常狀態(tài)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述病癥與異常的腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞行為相關(guān)。由此，在該情形中，“治療”包括減緩或終止與異常的腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞行為相關(guān)的病癥的進(jìn)展的治療性應(yīng)用，預(yù)防與異常的腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞行為相關(guān)的病癥的發(fā)展的預(yù)防性應(yīng)用，和與異常的腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞行為相關(guān)的病癥的逆轉(zhuǎn)。在這種情形中，病癥的逆轉(zhuǎn)不同于減緩或終止病癥的治療性應(yīng)用，不同在于，使用逆轉(zhuǎn)的方法，不僅病癥的進(jìn)展被完全終止，在某種程度上推動(dòng)細(xì)胞行為至在不存在異常腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞行為時(shí)將觀察到的正常狀態(tài)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述病癥是得益于酰基-輔酶a：膽固醇轉(zhuǎn)移酶(acat)的抑制的病癥。為了該目的，atr-101是一種acat1抑制劑。acat是定位在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的完整膜蛋白，并且催化由膽固醇和脂肪?；o酶a形成膽固醇基酯(ce)(還稱為膽固醇酯)。膽固醇基酯作為細(xì)胞質(zhì)裝置小滴存儲(chǔ)在細(xì)胞中。在哺乳動(dòng)物中，存在兩種acat同工酶，即acat1和acat2。acat2在肝和腸中表達(dá)。acat1的表達(dá)更普遍，并且存在于細(xì)胞和組織中，諸如巨噬細(xì)胞、肝細(xì)胞、腸細(xì)胞、腎小管細(xì)胞和神經(jīng)元中，并且在腎上腺和腎上腺皮質(zhì)中高表達(dá)。改變的脂質(zhì)代謝已被鑒定為癌癥中的重要過程。例如，在晚期前列腺癌中發(fā)現(xiàn)異常的膽固醇基酯積累，并且已經(jīng)報(bào)道抑制膽固醇酯化，減弱癌癥的侵襲性(yue等人.“cholesterylesteraccumulationinducedbyptenlossandpi3k/aktactivationunderlieshumanprostatecanceraggressiveness(由pten喪失和pi3k/akt活化誘導(dǎo)的膽固醇基酯積累是人前列腺癌侵襲性的基礎(chǔ))，”cellmetab.4：393-406，2014)。因此，在該實(shí)施方案中，“治療”包括減緩或終止病癥的進(jìn)展的治療性應(yīng)用、預(yù)防病癥發(fā)展的預(yù)防性應(yīng)用或病癥的逆轉(zhuǎn)，所述病癥將得益于對(duì)acat的抑制，包括將得益于對(duì)膽固醇酯化抑制的病癥。在這一點(diǎn)上，代表性的病癥包括其中存在異常的膽固醇基酯積累的癌癥，和/或其中膽固醇酯化減弱癌癥生長(zhǎng)或侵襲性的癌癥。在這一點(diǎn)上，代表性的癌癥包括(但不限于)前列腺癌和卵巢癌。atr-101的固體藥物形式，特別是在適于膠囊或片劑配制的固體粉末的情形中，已經(jīng)證明使用現(xiàn)有的藥物產(chǎn)品形式是困難的。例如，現(xiàn)有藥物產(chǎn)品的缺陷包括缺少流動(dòng)性和不適合膠囊或片劑配制的堆密度(bulkdensity)。固體藥物組合物的atr-101可以由其顆粒的中值直徑表征，所述中值直徑使用裝備有scirocco2000模件的malvernmastersizer2000(測(cè)量范圍為0.02至2000μm)以干燥-分散模式確定。例如，“d(0.5)”粒度分布是粒度分布的中值直徑，并且表示有50％的顆粒大于該d(0.5)值且有50％的顆粒小于該d(0.5)值的粒度。類似地，“d(0.1)”值是有10％的顆粒更小且有90％的顆粒更大的粒度，并且“d(0.9)”值是有90％的顆粒更小且有10％的顆粒更大的粒度。在一個(gè)實(shí)施方案中，固體藥物組合物的atr-101具有約12μm的d(0.5)粒度分布，并且可以進(jìn)一步表征為：具有約2μm的d(0.1)粒度分布，和/或具有約49μm的d(0.9)粒度分布。在其他實(shí)施方案中，固體藥物組合物的atr-101具有在5至20μm、6至18μm、8至16μm、10至14μm或2至10μm范圍內(nèi)的d(0.5)粒度分布。在另一些實(shí)施方案中，固體藥物組合物的atr-101具有大于1μm的d(0.1)粒度分布和/或小于60μm的d(0.9)粒度分布，或者，在另一個(gè)實(shí)施方案中，具有小于50μm的d(0.9)粒度分布。在其他實(shí)施方案中，固體藥物形式具有在5至20μm、6至18μm、8至16μm或10至14μm范圍內(nèi)的d(0.5)粒度分布。在另一些實(shí)施方案中，固體藥物形式具有大于1μm的d(0.1)粒度分布和/或小于60μm的d(0.9)粒度分布。在其他實(shí)施方案中，提供具有在約228.28℃的差示掃描量熱法(dsc)開始和在約230.93℃的吸熱作用的atr-101固體藥物形式。在其他實(shí)施方案中，提供具有在約228-229℃的差示掃描量熱法(dsc)開始和在約231-232℃的吸熱作用的atr-101固體藥物形式。在另一些實(shí)施方案中，提供具有超過98％(w/w)的純度的atr-101固體藥物形式。在其他實(shí)施方案中，提供具有超過98.5％(w/w)或99％(w/w)的純度的atr-101?？梢詫tr-101固體藥物形式進(jìn)行碾磨、研磨和/或過篩，條件是得到的產(chǎn)品的粒度分布保持在上述范圍內(nèi)。可以使用此類另外的碾磨或研磨，從而提供更均勻的粒度分布。用于其的步驟是固體藥物材料研磨/碾磨領(lǐng)域的技術(shù)人員已知的。固體藥物組合物可以采用適于口服施用的多種形式，諸如膠囊、丸劑、顆粒劑、混懸液、小藥丸(pellet)、片劑或粉劑，并且包含一種或多種藥用載體或賦形劑。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，所述固體藥物組合物采用壓縮的片劑的形式，其可以被包覆，例如，用非功能性膜或改變釋放的包衣包覆。藥用載體和賦形劑在本領(lǐng)域中是公知的，諸如在remington：thescienceandpracticeofpharmacy(remington：制藥科學(xué)與實(shí)踐)，第22版，allen，lloydv.，jr.編(2012)(通過引用結(jié)合在本文中)中公開的那些，并且包括(但不限于)稀釋劑、粘合劑、粘附劑、崩解劑、濕潤(rùn)劑、潤(rùn)滑劑、抗粘附劑、助流劑、張度劑和/或表面活性劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，atr-101固體藥物形式不與任何另外的組分一起配制。在該情形中，適當(dāng)?shù)墓腆w形式包括粉劑。當(dāng)atr-101采用膠囊形式時(shí)，所述膠囊可以僅包含所述固體藥物形式，諸如粉末形式的atr-101，不存在任何的填充劑或載體。在該實(shí)施方案中，膠囊可以包含，例如，25至1000mg，諸如25mg，50mg，100mg，125mg，200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，700mg，750mg或1000mg的atr-101固體藥物形式(作為游離堿測(cè)量)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，atr-101固體藥物形式可以被配制為藥物組合物，所述藥物組合物除atr-101固體藥物形式外還包含remington’spharmaceuticalsciences(雷明頓藥物科學(xué))第16版，osol，a.，編(1980)中所述的一種或多種另外的藥用組分。藥用載體和/或稀釋劑是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟悉的，并且通常沒有不利地影響所述組合物的所需特征。在多個(gè)方面中，所述固體藥物組合物單獨(dú)或組合包含稀釋劑，諸如，并且不限于，乳糖，包括無水乳糖和乳糖一水合物；乳糖醇；麥芽糖醇；甘露醇；山梨醇；木糖醇；葡萄糖和葡萄糖一水合物；果糖；蔗糖和基于蔗糖的稀釋劑，如可壓縮糖，糖果店的糖和糖球；麥芽糖；肌醇；水解的谷物固體(hydrolyzedcerealsolids)；淀粉(例如，玉米淀粉，小麥淀粉，大米淀粉，馬鈴薯淀粉，木薯淀粉等)，淀粉組分，如直鏈淀粉和葡聚糖結(jié)合劑(dextrates)，和改性的或加工的淀粉，如預(yù)膠化的淀粉；糊精；纖維素，包括粉狀纖維素，微晶纖維素，硅化的微晶纖維素，α-和無定形纖維素以及粉狀纖維素的食品級(jí)來源，和乙酸纖維素；鈣鹽，包括碳酸鈣，磷酸鈣，磷酸氫鈣二水合物，硫酸氫鈣一水合物，硫酸鈣和顆粒狀乳酸鈣三水合物；碳酸鎂；氧化鎂；膨潤(rùn)土；高嶺土；氯化鈉；等等。所選的一種或多種稀釋劑應(yīng)該表現(xiàn)出適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)特性，并且在需要片劑的情形中，表現(xiàn)出適當(dāng)?shù)目蓧嚎s性。在多個(gè)方面中，所述固體藥物組合物包含粘合劑或粘附劑，其是有用的賦形劑，特別是在組合物以片劑形式存在的情形中。此類粘合劑和粘附劑應(yīng)該給配制在片劑中的摻和物賦予充分的內(nèi)聚性，以足以允許正常的加工操作，諸如分篩，潤(rùn)滑，壓縮和包裝，但是在攝入時(shí)仍然允許片劑崩解和化合物吸收。適當(dāng)?shù)恼澈蟿┖驼掣絼┌▎为?dú)的或組合的下述各項(xiàng)：阿拉伯膠；黃蓍膠；葡萄糖；聚葡萄糖；淀粉，包括預(yù)膠化的淀粉；明膠；改性的纖維素，包括甲基纖維素，羧甲纖維素鈉，羥丙基甲基纖維素(hpmc或羥丙甲纖維素)，羥丙基纖維素，羥乙基纖維素和乙基纖維素；糊精，包括麥芽糊精；玉米醇溶蛋白(zein)；海藻酸和海藻酸鹽，例如，海藻酸鈉；硅酸鎂鋁；膨潤(rùn)土；聚乙二醇(peg)；聚環(huán)氧乙烷；瓜耳膠；多糖酸；聚乙烯吡咯烷酮(聚維酮)，例如，聚維酮k-15，k-30和k-29/32；聚丙烯酸(卡波姆)；聚甲基丙烯酸酯；等等。在多個(gè)方面中，一種或多種粘合劑和/或粘附劑，如果存在的話，共組成所述組合物重量的約0.5％至約25％，例如約0.75％至約15％，或約1％至約10％。在多個(gè)方面中，所述固體藥物組合物包含崩解劑。適當(dāng)?shù)谋澜鈩┌▎为?dú)的或組合的下述各項(xiàng)：淀粉，包括預(yù)膠化的淀粉和乙醇酸淀粉鈉；粘土；硅酸鎂鋁；基于纖維素的崩解劑，如粉狀纖維素，微晶纖維素，甲基纖維素，低取代的羥丙基纖維素，羧甲纖維素，羧甲纖維素鈣，羧甲纖維素鈉和交聯(lián)羧甲纖維素鈉；海藻酸鹽；聚維酮；交聯(lián)聚維酮；聚克立林鉀(polacrilinpotassium)；膠，如瓊脂，瓜耳膠，槐豆，刺梧桐樹膠(karaya)，果膠和黃蓍膠；膠體二氧化硅；等等。一種或多種崩解劑，如果存在的話，通常共組成所述組合物重量的約0.2％至約30％，例如，約0.2％至約10％，或約0.2％至約5％。在多個(gè)方面中，所述固體藥物組合物包含濕潤(rùn)劑。濕潤(rùn)劑，如果存在的話，通常選擇用來保持化合物與水緊密聯(lián)系，這是一種被認(rèn)為提高組合物的生物利用度的條件?？梢杂米鳚駶?rùn)劑的表面活性劑的非限制性實(shí)例包括單獨(dú)的或組合的下述各項(xiàng)：季銨化合物，例如，苯扎氯銨，芐索氯銨和西吡氯銨；二辛基磺基琥珀酸鈉；聚氧乙烯烷基苯基醚，例如，壬苯聚醇9，壬苯聚醇10和辛苯昔醇9；泊洛沙姆(聚氧乙烯和聚氧丙烯嵌段共聚物)；聚氧乙烯脂肪酸甘油酯和油，例如，聚氧乙烯(8)辛酸/癸酸單酸甘油酯和甘油二酯，聚氧乙烯(35)蓖麻油和聚氧乙烯(40)氫化蓖麻油；聚氧乙烯烷基醚，例如ceteth-10，laureth-4，laureth-23，oleth-2，oleth-10，oleth-20，steareth-2，steareth-10，steareth-20，steareth-100和聚氧乙烯(20)鯨蠟硬脂酰醚；聚氧乙烯脂肪酸酯，例如聚氧乙烯(20)硬脂酸酯，聚氧乙烯(40)硬脂酸酯和聚氧乙烯(100)硬脂酸酯；脫水山梨糖醇酯；聚氧乙烯脫水山梨糖醇酯，例如，聚山梨醇酯20和聚山梨醇酯80；丙二醇脂肪酸酯，例如，丙二醇月桂酸酯；十二烷基硫酸鈉；脂肪酸及其鹽，例如，油酸，油酸鈉和三乙醇胺油酸酯；脂肪酸甘油酯，例如，單油酸甘油酯，單硬脂酸甘油酯和棕櫚酰硬脂酸甘油酯；脫水山梨糖醇酯，例如，單月桂酸脫水山梨糖醇酯，單油酸脫水山梨糖醇酯，單棕櫚酸脫水山梨糖醇酯和單硬脂酸脫水山梨糖醇酯；泰洛沙泊(tyloxapol)；等等。一種或多種濕潤(rùn)劑，如果存在的話，通常共組成所述組合物重量的約0.25％至約15％，優(yōu)選約0.4％至約10％，并且更優(yōu)選約0.5％至約5％。在多個(gè)方面中，所述固體藥物組合物包含潤(rùn)滑劑。潤(rùn)滑劑減少在片劑制劑壓縮過程中在成片劑混合物與成片劑設(shè)備之間的摩擦。適當(dāng)?shù)臐?rùn)滑劑包括單獨(dú)的或組合的下述各項(xiàng)：山崳酸甘油酯；硬脂酸及其鹽，包括硬脂酸鎂，硬脂酸鈣和硬脂酸鈉；氫化植物油；棕櫚酰硬脂酸甘油酯；滑石；蠟；苯甲酸鈉；乙酸鈉；延胡索酸鈉；硬脂酰延胡索酸鈉；peg(例如，peg4000和peg6000)；泊洛沙姆；聚乙烯醇；油酸鈉；十二烷基硫酸鈉；十二烷基硫酸鎂；等等。一種或多種潤(rùn)滑劑，如果存在的話，通常共組成所述組合物重量的約0.05％至約10％，例如約0.1％至約8％，或約0.2％至約5％。硬脂酸鎂是特別有用的潤(rùn)滑劑。在多個(gè)方面中，所述固體藥物組合物包含抗粘劑。抗粘劑減少片劑制劑與設(shè)備表面的粘結(jié)。適當(dāng)?shù)目拐硠┌▎为?dú)的或組合的下述各項(xiàng)：滑石，膠體二氧化硅，淀粉，dl-亮氨酸，十二烷基硫酸鈉和金屬硬脂酸鹽。一種或多種抗粘劑，如果存在的話，通常共組成所述組合物重量的約0.1％至約10％，例如約0.1％至約5％，或約0.1％至約2％。在多個(gè)方面中，所述固體藥物組合物包含助流劑。助流劑改善流動(dòng)特性并且減少成片劑混合物中的靜電。適當(dāng)?shù)闹鲃┌▎为?dú)的或組合的下述各項(xiàng)：膠體二氧化硅，淀粉，粉狀纖維素，十二烷基硫酸鈉，三硅酸鎂和金屬硬脂酸鹽。一種或多種助流劑，如果存在的話，通常共組成所述組合物重量的約0.1％至約10％，例如約0.1％至約5％，或約0.1％至約2％。在多個(gè)方面中，所述固體藥物組合物包含表面活性劑。也可以加入表面活性劑，以減少化合物的聚集和/或使制劑中顆粒的形成最小化和/或減少吸附。示例性的表面活性劑包括非離子表面活性劑，如聚山梨醇酯(例如，聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80)或泊洛沙姆(例如，泊洛沙姆188)。示例性表面活性劑濃度可以在約0.001％至約0.5％，或約0.005％至約0.2％，或備選地約0.004％至約0.01％w/v的范圍內(nèi)。在多個(gè)方面中，所述固體藥物組合物也可以包含各種改變劑量單位的物理形式的物質(zhì)。例如，所述組合物可以包含在活性成分周圍形成包衣殼的物質(zhì)。形成包衣殼的物質(zhì)通常是惰性的，并且可以選自，例如，糖，蟲膠，聚合物，塑化劑，色素，或其他包衣試劑。在多個(gè)方面中，所述固體藥物組合物是固體粉末的形式，并且包裹在適當(dāng)?shù)哪z囊中，諸如明膠膠囊。包含在此類膠囊中的藥物的量可以變化，這取決于認(rèn)識(shí)到的因素，諸如治療的頻率和持續(xù)時(shí)間，劑量給藥時(shí)間間隔，排泄速率，接受者的年齡，體重，性別，飲食，醫(yī)學(xué)病史和一般狀態(tài)(例如，健康)，疾病的嚴(yán)重性，和/或要治療的腫瘤的尺寸、惡性和侵襲性。由此化合物是適當(dāng)?shù)男问剑⑶乙宰阋垣@得需要的治療效果或預(yù)防效果的劑量施用。固體劑型atr-101的施用通常是一個(gè)或多個(gè)單位劑量的形式，其中，例如，單個(gè)片劑或膠囊是單個(gè)單位劑量。選擇劑量的量和頻率，以產(chǎn)生治療有效水平的藥劑。例如，頻率可以是每日一次；每日兩次、三次或四次；隔日；每三天；或每周2，3，4，5或6次；每周一次；每月兩次；每月一次或更頻繁或更少頻率，按需要確定，這取決于響應(yīng)或病況和接受者對(duì)治療的耐受性。考慮在較長(zhǎng)時(shí)間期間，諸如4，5，6，7，8，10或12周或更久維持劑量，并且劑量可以按需要調(diào)整。類似地，還考慮間歇性給藥，其中給藥停止一段時(shí)間，然后再重新開始。治療的進(jìn)展可以通過常規(guī)技術(shù)和測(cè)定監(jiān)測(cè)，如通過監(jiān)測(cè)腫瘤尺寸和/或皮質(zhì)醇水平，并且在本領(lǐng)域的技能之內(nèi)。在一個(gè)實(shí)施方案中，考慮多個(gè)劑量單位的口服施用，每天一次，每天兩次，每天三次或每天四次。取決于，例如，單個(gè)片劑中包含的atr-101的量，多個(gè)單位劑型可以是每天一次、每天兩次、每天三次或每天四次施用的2-30片片劑的范圍內(nèi)。在一個(gè)實(shí)施方案中，并且取決于下文討論的暴露，施用可以是4-24片片劑，每天兩次，或6-12片片劑，每天兩次。在一些實(shí)施方案中，所述固體藥物形式按每日基礎(chǔ)以約0.1mg/kg至約200mg/kg的劑量施用。適當(dāng)?shù)膭┝堪?，但不限于?.5mg/kg至150mg/kg，0.75mg/kg至100mg/kg，1mg/kg至50mg/kg，2mg/kg至40和3mg/kg至35mg/kg。適當(dāng)?shù)膭┝窟€包括1mg/kg至5mg/kg和2mg/kg至4mg/kg，以及10mg/kg至50mg/kg和20mg/kg至40mg/kg。在更具體的實(shí)施方案中，在固體藥物組合物中，atr-101以處于或超過單位劑型總重量的50重量％的水平存在(按照atr-101的游離堿形式測(cè)量)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在固體藥物組合物中，atr-101以處于或超過單位劑型總重量的60重量％的水平存在(按照atr-101的游離堿形式測(cè)量)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在固體藥物組合物中，atr-101以處于或超過單位劑型總重量的65重量％的水平存在(按照atr-101的游離堿形式測(cè)量)。在又一個(gè)實(shí)施方案中，在固體藥物組合物中，atr-101以處于或超過單位劑型總重量的70重量％的水平存在(按照atr-101的游離堿形式測(cè)量)。令人驚訝地，atr-101本身的性質(zhì)，包括粒度分布，堆密度，壓縮性等，允許所述固體藥物組合物中此種升高的藥物水平。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述固體藥物組合物可以與酸性劑共同使用，以增加口服施用時(shí)atr-101的暴露。在一些實(shí)施方案中，共同施用的藥劑是酸性水溶液，以增加口服施用時(shí)atr-101的暴露。在其他實(shí)施方案中，酸性劑是固體劑型的，例如，酸(如檸檬酸)的固體劑型。因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，提供用于共同施用與酸性水溶液組合的固體藥物組合物的方法。所述酸性水溶液用于增加胃液酸度(降低ph)，并且由此增加口服施用時(shí)atr-101的暴露。在更具體的實(shí)施方案中，共同施用包括與所述固體藥物組合物的口服施用同時(shí)、或在緊密相近的時(shí)候吞服或飲用所述酸性水溶液。例如，受試者可以使用所述酸性水溶液作為輔助物來吞服一片或更多片包含atr-101的片劑，諸如通過在吞服所述片劑之前、與其同時(shí)或在吞服所述片劑之后立即飲用所述酸性水溶液。酸性水溶液通過增加胃液酸度(降低ph)或維持胃液酸度而增加atr-101的暴露，并且由此輔助atr-101吸收到受試者的血流中。為了這一目的，代表性的酸性水溶液具有下述范圍的ph：2.0-3.5，2.2-3.0或2.3-2.7，包括端點(diǎn)值。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述酸性水溶液是非飲食性可樂飲料，諸如()、()等。與固體藥物組合物共同施用的酸性水溶液的量應(yīng)該足以使胃液酸度增加或維持在口服施用時(shí)獲得增加的atr-101暴露的水平。例如，共同施用可以包括單次啜飲(sip)或吞服，其通常是約0.5盎司的液體，或可以包括多次啜飲或吞服，例如，這取決于在給定時(shí)間吞服的單位劑量(例如，片劑)的數(shù)量。因此，共同施用的酸性水溶液的量通常在單次啜飲(0.5盎司)至24次啜飲(其將對(duì)應(yīng)于12盎司罐的非飲食性可樂飲料)的范圍內(nèi)。本發(fā)明的方法包括通過給有此需要的受試者施用治療有效量的包含atr-101的固體藥物組合物而治療病癥。在多個(gè)實(shí)施方案中，所述方法包含向有此需要的受試者共同施用與酸性劑組合的治療有效量固體藥物組合物，所述酸性劑諸如酸性水溶液或酸性固體劑型。在多個(gè)方面中，還提供用于減緩或終止病癥進(jìn)展、預(yù)防病癥或逆轉(zhuǎn)病癥的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述病癥是與異常的腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞活性相關(guān)的病癥，并且所述方法包括向有此需要的受試者施用治療有效量的固體藥物組合物。在多個(gè)方面中，還提供用于減緩或終止與異常的腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞活性相關(guān)的病癥的進(jìn)展的方法。在多個(gè)方面中，還提供用于預(yù)防與異常的腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞活性相關(guān)的病癥的方法。在多個(gè)方面中，還提供用于逆轉(zhuǎn)與異常的腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞活性相關(guān)的病癥的方法。在該實(shí)施方案中，本發(fā)明所述的方法包括治療：增加的激素產(chǎn)生，良性腺瘤，腎上腺皮質(zhì)癌(acc)，轉(zhuǎn)移性腎上腺皮質(zhì)癌，先天性腎上腺增生，庫欣綜合征，過量的皮質(zhì)醇產(chǎn)生，與過量的皮質(zhì)醇產(chǎn)生相關(guān)的癥狀，醛固酮增多癥，康恩綜合征，單側(cè)醛固酮產(chǎn)生腺瘤，雙側(cè)腎上腺增生(或特發(fā)性高醛固酮癥(iha))，原發(fā)性腎上腺增生，可用糖皮質(zhì)激素治療的醛固酮增多癥(gra)和/或21-羥化酶缺乏。此類方法涉及向有此需要的受試者施用治療有效量的固體藥物組合物。在其他實(shí)施方案中，本發(fā)明所述的方法包括通過向有此需要的受試者施用治療有效量的固體藥物組合物減小患者中腎上腺皮質(zhì)腫瘤尺寸和/或抑制異常的腎上腺激素產(chǎn)生。本發(fā)明所述的方法還包括減緩或終止下述各項(xiàng)的進(jìn)展：增加的激素產(chǎn)生，良性腺瘤，腎上腺皮質(zhì)癌，轉(zhuǎn)移性腎上腺皮質(zhì)癌，庫欣綜合征，過量的皮質(zhì)醇產(chǎn)生，與過量的皮質(zhì)醇產(chǎn)生相關(guān)的癥狀，先天性腎上腺增生，醛固酮增多癥，康恩綜合征，單側(cè)醛固酮產(chǎn)生腺瘤，雙側(cè)腎上腺增生(或特發(fā)性高醛固酮癥(iha))，腎素響應(yīng)性腺瘤，原發(fā)性腎上腺增生，可用糖皮質(zhì)激素治療的醛固酮增多癥(gra)，21-羥化酶缺乏。此類方法涉及向有此需要的受試者施用治療有效量的固體藥物組合物。在其他實(shí)施方案中，所述病癥是將得益于對(duì)acat的抑制的病癥，并且所述方法向有此需要的受試者施用治療有效量的固體藥物組合物。在多個(gè)方面中，還提供用于減緩或終止將得益于對(duì)acat的抑制的病癥的進(jìn)展的方法。在多個(gè)方面中，還提供用于預(yù)防將得益于對(duì)acat的抑制的病癥的方法。在多個(gè)方面中，還提供用于逆轉(zhuǎn)將得益于對(duì)acat的抑制的病癥的方法。在該實(shí)施方案中，本發(fā)明所述的方法包括治療前列腺癌和卵巢癌。本發(fā)明所述的方法還包括通過施用第二治療劑的共同治療，所述第二治療劑包括已知的化療劑、靶向劑、腎透析劑(adrenalysisagents)、二甲雙胍(metformin)、依維莫司(everolimus)和/或igflr拮抗劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，共同施用還包括施用米托坦。適當(dāng)?shù)幕焺┖头暖焺┑膶?shí)例包括，但不限于：抗代謝藥；dna-破壞劑；用作化療劑的細(xì)胞因子；共價(jià)dna-結(jié)合藥；拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑；抗有絲分裂劑；抗腫瘤抗生素；分化劑；烷基化劑；甲基化劑；激素或激素拮抗劑；氮芥(nitrogenmustard)；放射性敏感劑；光敏劑；輻射源，任選地與放射性敏感劑或光敏劑一起使用；或其他常用的治療劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，提供用于共同施用atr-101與酸性劑的試劑盒，用以增加口服施用時(shí)atr-101的暴露。所述試劑盒包括多個(gè)與用于共同施用的酸性劑組合的atr-101口服單位劑型。備選地，所述試劑盒包括多個(gè)atr-101口服單位劑型，其與用于共同施用酸性劑的使用說明組合。在其他實(shí)施方案中，提供用于制備高純度的atr-101的方法，特別是在大規(guī)模制造的情形中。如在實(shí)施例5中更詳細(xì)地描述的，提供一種制備高純度的atr-101的方法，所述方法包括使用結(jié)晶的2，6-二異丙基苯胺鹽酸鹽作為合成的中間體的步驟。具體地，所述方法在用于形成作為游離堿的atr-101的異氰酸酯偶聯(lián)步驟(上文所示)中使用2，6-二異丙基苯胺鹽酸鹽70。該步驟允許大規(guī)模制備高純度水平的atr-101，使2，4-二異丙基區(qū)域異構(gòu)體和2-正丙基-6-異丙基異構(gòu)體雜質(zhì)減至最少。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在原位(與分離的中間體相對(duì))形成相應(yīng)的異氰酸酯，從而避免形成另外的雜質(zhì)；即，下文討論的對(duì)稱的脲。通過使用這些合成步驟，能夠以大規(guī)模生產(chǎn)獲得高純度的atr-101，諸如純度超過98％(w/w)或98.5％(w/w)或99％(w/w/)。在本文中描述了本發(fā)明的多個(gè)備選實(shí)施方案和實(shí)施例。這些實(shí)施方案和實(shí)施例是舉例說明性的，并且不應(yīng)該理解為限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例實(shí)施例1atr-101固體藥物形式的合成步驟1：由腈1制備伯胺2在反應(yīng)器容器中填裝四氫呋喃(thf)和化合物1，并且緩慢加入在thf中的氫化鋁鋰(lah)溶液。加入后，將反應(yīng)混合物溫?zé)岬?5℃并攪拌，直到過程中hplc分析表明反應(yīng)完全。將反應(yīng)混合物冷卻至0-10℃，并緩慢加入水性naoh，同時(shí)控制溫度在0-10℃。然后，將混合物溫?zé)岬?0-25℃，并且通過過濾去除任意的無機(jī)鹽。然后，將固體用另外的thf洗滌。將濾過液在真空中蒸餾。加入乙腈(mecn)并且繼續(xù)蒸餾以減少總體積。加入h2o并將溶液冷卻至20℃，并且在需要時(shí)，接入晶種。向漿料中加入另外的水并且冷卻至0-5℃并過濾。將結(jié)晶容器和濾餅用mecn和水(1∶2的混合物)洗滌，并且在真空中在40-45℃干燥，以產(chǎn)生化合物2。標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)率為：85％。步驟2：制備atr-101游離堿通過在二氯甲烷(dcm)和10％水性naoh的混合物中攪拌，將2，6-二異丙基苯胺鹽酸鹽(化合物3)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的游離堿。分離有機(jī)相并用水洗滌。將包含苯胺游離堿的dcm溶液通過蒸餾濃縮。向分開的反應(yīng)容器中填裝4-二甲基氨基吡啶(dmap)和dcm。將混合物冷卻，并且緩慢加入碳酸二-叔丁酯(boc2o)在dcm中的溶液，同時(shí)將溫度保持在0-5℃。然后將苯胺游離堿溶液緩慢加入到反應(yīng)容器中。通過過程中hplc分析驗(yàn)證苯胺向異氰酸酯的完全轉(zhuǎn)化。向分開的容器中填裝化合物2和mecn，并且將該溶液冷卻至0-5℃。緩慢加入異氰酸酯中間體溶液(上文制備的)，同時(shí)將溫度保持在0-5℃，并且攪拌，直到過程中hplc表明反應(yīng)完全。將反應(yīng)混合物在真空下蒸餾，并且加入異丙醇(ipa)并繼續(xù)蒸餾。將得到的溶液冷卻，并且在需要時(shí)，加入晶種。在結(jié)晶發(fā)生后，加入水，并且將混合物冷卻至0-5℃，并過濾。將結(jié)晶容器和濾餅用異丙醇∶水(1∶1)洗滌，并且將產(chǎn)物餅在真空下干燥，得到作為游離堿的atr-101。典型產(chǎn)率為：89％。步驟3：制備atr-101固體藥物形式將atr-101游離堿溶解在丙酮中，并且過濾，以去除顆粒。使用另外的丙酮沖洗蒸餾容器和濾器。加入濃鹽酸(hcl)，同時(shí)將反應(yīng)保持在室溫。將得到的漿料過濾，并且用丙酮洗滌濾餅。將得到的固體在真空下在40-45℃干燥，以得到atr-101固體藥物形式。典型產(chǎn)率為：70-80％。實(shí)施例2atr-101固體藥物形式的表征分析atr-101固體藥物形式以完全表征該物質(zhì)并提供結(jié)構(gòu)證據(jù)。元素分析一式兩份進(jìn)行atr-101固體藥物形式的元素(chn)分析。結(jié)果總結(jié)在表1中，并且與為c27h39n3ohcl的分子atr-101藥物物質(zhì)式計(jì)算的理論值一致。表1元素理論值實(shí)驗(yàn)結(jié)果％c70.7970.63％h8.808.44％n9.179.14％o3.503.56％cl7.747.84氯化物含量將atr-101固體藥物形式制備為其鹽酸鹽(hclsalt)。為了證實(shí)氯化物含量(和化學(xué)計(jì)量)，使用驗(yàn)證的方法通過離子色譜法分析鹽酸鹽。w/w％結(jié)果顯示存在7.8％的氯化物。關(guān)于單鹽酸鹽的理論值是7.7％。實(shí)驗(yàn)結(jié)果與關(guān)于單鹽酸鹽的理論值相符。質(zhì)譜法使用absciexapi2000lc/ms/ms系統(tǒng)按照usp＜736＞進(jìn)行質(zhì)譜法研究。通過以正極模式的電噴霧電離分析樣品。觀察到的基峰為422.3(m+h-hcl)，與母本化合物一致(見圖1)。觀察到在301.3和202.3的兩個(gè)次峰(未表征的片段)。lc/ms和chn結(jié)果的合并數(shù)據(jù)支持c27h39n3o的分子式分配和游離堿的421.63g/mol質(zhì)量以及單鹽酸鹽的c27h39n3o.hcl(質(zhì)量為458.09g/mol)。核磁共振(nmr)-1hnmr使用variangemini400mhz光譜儀得到atr-101固體藥物形式的質(zhì)子nmr光譜。樣品溶解在cd3od中。得到的質(zhì)子nmr譜顯示在圖2中。二維(2d)nmr圖3所示的2d質(zhì)子nmr譜(cosy)證實(shí)了關(guān)于atr-101固體藥物形式預(yù)期的一些連接性(connectivity)。具體地，在1.2ppm的共振與在3.1的共振強(qiáng)相關(guān)。這種相關(guān)性以及對(duì)于在3.1的峰觀察到的分裂模式強(qiáng)烈表明是異丙基結(jié)構(gòu)部分。此外，來自這些光譜的數(shù)據(jù)顯示在1.6-2.2ppm的每個(gè)寬縫之間的強(qiáng)相關(guān)性，這與其中不存在雜原子或其他非烷基取代的環(huán)烷基官能性一致。碳13nmr(13cnmr)使用variangemini400mhz光譜儀得到atr-101固體藥物形式的100mhz13cnmr光譜。樣品溶解在cd3od中。得到的13cnmr光譜顯示在圖4中。用于光譜分析的碳原子的編號(hào)顯示在下文中，并且解釋顯示在表2中。觀察到的信號(hào)與atr-101的結(jié)構(gòu)一致。表2位移(ppm)預(yù)測(cè)(ppm)#碳數(shù)目分配159.8155.01c10151.6146.12c14148.5145.71c5141.9143.11c2133.4138.31c11130.4128.92c4128.7128.01c16124.1124.62c3121.4123.32c1553.854.51c947.250.31c636.541.62c129.635.32c724.628.72c1224.424.94c1323.625.12c8傅里葉變換紅外光譜(ir)使用atr-101固體藥物形式進(jìn)行紅外(ir)光譜。圖5中顯示的得到的光譜與atr-101藥物物質(zhì)的結(jié)構(gòu)一致。主峰分配顯示在表3中。表3波數(shù)(cm-1)官能團(tuán)3232n-h(脲)2959c-h延伸2380苯胺-hcl1668c＝o(脲)區(qū)域1200-1600芳香族的示差掃描量熱法(dsc)使用ta設(shè)備q2000獲得atr-101固體藥物形式的dsc熱分析圖。使用10℃/分鐘的溫度上升至300℃。在228.64℃觀察到吸熱事件，開始溫度是225.87℃。結(jié)果顯示在圖6中。x-射線粉末衍射分析(xrpd)使用配備有石墨單色儀和在50kv，40ma操作的cux-射線源的西門子d500自動(dòng)化粉末衍射儀(siemensd500automatedpowderdiffractometer)確定atr-101固體藥物形式的x-射線粉末衍射模式。樣品使用4-40°2θ的測(cè)量范圍，0.050°的步長(zhǎng)和每步1.2秒的測(cè)量時(shí)間進(jìn)行分析。圖7所示的得到的xrpd光譜表明樣品實(shí)際上是晶體。單晶x-射線衍射單晶x-射線衍射是在裝備有在150k操作的oxfordcryosystem低溫裝置的agilentsupernova雙源衍射儀上對(duì)atr-101固體藥物形式(固體形式溶液)進(jìn)行的研究。使用cu-kα輻射收集數(shù)據(jù)，分辨率為。在整合和應(yīng)用多掃描系統(tǒng)誤差校正(crysalispro)后，將數(shù)據(jù)合并在點(diǎn)組2/m中。通過電荷跳躍法(charge-flipping)(superflip)解析結(jié)構(gòu)，并且使用全部數(shù)據(jù)(shelxl-2012)通過針對(duì)f2的最小二乘法精細(xì)化。單晶結(jié)構(gòu)，以及無序組分的疊加顯示在表8中。批次分析表4總結(jié)了關(guān)于atr-101固體藥物形式的批次分析結(jié)果。表4實(shí)施例3與現(xiàn)有技術(shù)的atr-101合成(trivedi等人，j.med.chem.37：1652-1659，1994)比較在本實(shí)驗(yàn)中，按照上述流程合成10.6gatr-101，所述流程對(duì)應(yīng)于trivedi等人，j.med.chem.137：1652-1659，1994中記載的流程(下文稱為“trivedi流程”)。發(fā)現(xiàn)通過trivedi流程制備的atr-101的純度為94.9％，相比較而言，通過實(shí)施例1的流程制得并在實(shí)施例2中評(píng)價(jià)的atr-101的純度為98.3％。步驟1：對(duì)-硝基苯基乙腈的烷基化初始烷基化反應(yīng)以15.0g規(guī)格運(yùn)行，并且，按照trivedi流程，應(yīng)該產(chǎn)生15.7g(79％)產(chǎn)物52。然而，發(fā)生了一些問題，并且產(chǎn)率遠(yuǎn)低于預(yù)計(jì)產(chǎn)率(6.0g，30％的產(chǎn)率)，盡管通過1hnmr和熔點(diǎn)(實(shí)際：71-72℃，報(bào)道：76℃)確定的純度看起來良好。通過向nah中加入1，4-溴代丁烷和對(duì)-硝基苯基乙腈大約一半時(shí)，從紫色溶液中沉淀出黑色固體，引起燒瓶中的攪拌子跳動(dòng)。在其余的添加時(shí)間過程中必須監(jiān)測(cè)攪拌速率，以保持溶液緩慢的且效率低的混合。在環(huán)境溫度攪拌過夜以確保反應(yīng)結(jié)束后，按流程指示對(duì)反應(yīng)進(jìn)行后處理(worked-up)。首先，使用空氣鼓泡去除過量的醚，并且通過過濾分離黑色固體。然后加入二乙醚，直到所有的固體溶解產(chǎn)生清澈的黑色溶液。然而，當(dāng)用2nhcl洗滌醚溶液時(shí)，從溶液中沉淀出黑色無定形固體。在trivedi流程中沒有關(guān)于該黑色固體的注釋，因此，不修改繼續(xù)后處理。黑色固體最終處于水性洗液中，或者粘在分液漏斗上。后處理的其余部分如預(yù)期繼續(xù)進(jìn)行，并且粗固體的熱己烷萃取產(chǎn)生淺粉色平面晶體。以認(rèn)為導(dǎo)致低產(chǎn)率的兩個(gè)變化重復(fù)該流程：將無水溶劑(來自瓶子)過篩干燥，以去除痕量的水，并且將攪拌子替換為機(jī)械攪拌器，以確保溶液更均勻混合。再次以10g規(guī)格運(yùn)行流程，其應(yīng)該產(chǎn)生10.5g的化合物52。然而，盡管改變了流程，得到的產(chǎn)物和產(chǎn)率幾乎與第一次運(yùn)行相同(4.5g，34％的產(chǎn)率，71-72℃的熔點(diǎn))。在確定物質(zhì)塊處于何處的嘗試中，將來自該反應(yīng)的水性層用二乙醚再次萃取，但是僅產(chǎn)生痕量的物質(zhì)。在后處理過程中形成的黑色固體經(jīng)過濾分離，并且對(duì)該物質(zhì)采集nmr。nmr顯示對(duì)應(yīng)于化合物52的峰。推測(cè)起來，在hcl形成后產(chǎn)生的該無定形黑色固體是失去的物質(zhì)的主要來源，因?yàn)樗坪跤袔卓怂２襟E2：硝基化合物的還原以兩個(gè)步驟進(jìn)行硝基化合物52向二甲基胺53的轉(zhuǎn)化：鈀催化的硝基化合物氫化，產(chǎn)生游離胺52b，之后是亞胺形成和還原成二甲基胺53。使用可用物質(zhì)(1.0g化合物52)的十分之一(1/10)運(yùn)行研究性的小規(guī)格反應(yīng)。以1克規(guī)格的硝基化合物的還原非?？焖?，3-4小時(shí)后氫消耗停止。反應(yīng)混合物的等分試樣的粗nmr顯示非常純的胺(52b)。加入甲醛，以及另外的pd/c，并且繼續(xù)氫化。氫的消耗不像對(duì)于亞胺還原那么快，并且當(dāng)容器增壓至55psi并搖動(dòng)過夜(約16小時(shí))時(shí)，反應(yīng)仍然進(jìn)行。16小時(shí)后，燒瓶中的壓力降至30psi，這表明過夜氫化仍然進(jìn)行。等分試樣的nmr證實(shí)反應(yīng)還沒有進(jìn)行到結(jié)束。在大規(guī)格上，硝基還原進(jìn)行地非常順利，以非?？斓乃俣认臍?，并且也在3-4小時(shí)內(nèi)結(jié)束。反應(yīng)器增壓至55psi并且搖動(dòng)過夜，如初始流程所示，然后加入pd/c，接著加入甲醛。同樣觀察到氫消耗非常緩慢，因此使氫罐的閥門對(duì)容器開放，并且反應(yīng)搖動(dòng)24小時(shí)。24小時(shí)搖動(dòng)后，將對(duì)容器的閥門關(guān)閉，經(jīng)過1小時(shí)觀察到5psi的下降，這表明反應(yīng)還沒有進(jìn)行到結(jié)束。tlc也顯示一些極性產(chǎn)物，這表明反應(yīng)僅完成大約50％。用氫將氫化容器增壓至55psi，并且將閥門再開放另外24小時(shí)的氫化時(shí)間。24小時(shí)后，反應(yīng)停止消耗氫，并且吹掃容器，將內(nèi)容物過濾以去除鈀催化劑。與小規(guī)格相似地進(jìn)行后處理，并且在通過柱色譜純化之前將兩份反應(yīng)合并，產(chǎn)生5.7g(57.5％的產(chǎn)率)需要的二甲基胺產(chǎn)物53。步驟3：氰基化合物的還原進(jìn)行小規(guī)格的rani氫化，并且測(cè)試反應(yīng)順利進(jìn)行。氫消耗快速，并且在大約2小時(shí)后似乎反應(yīng)完全。氫消耗停止，并且tlc表明沒有化合物53剩余。在過濾去除雷尼鎳后，通過等分試樣的nmr證實(shí)反應(yīng)完全。使用相同的條件將剩余的物質(zhì)進(jìn)行還原，并且氫消耗和tlc分析同樣表示反應(yīng)在2小時(shí)后結(jié)束。將物質(zhì)過濾并與更小規(guī)格的反應(yīng)物質(zhì)合并。在濃縮至干燥后，發(fā)現(xiàn)粗產(chǎn)量為5.5g(96.5％的產(chǎn)率)，這與報(bào)道的產(chǎn)率(99％)非常接近。步驟4：形成脲化合物脲形成是一個(gè)直接的流程，并且使用胺54(500mg)的小規(guī)格測(cè)試反應(yīng)與在20份乙酸乙酯中的1.0當(dāng)量的異氰酸酯合并。在攪拌16小時(shí)后，將溶液濃縮至干，以產(chǎn)生白色固體。固體的粗1hnmr證實(shí)光譜與trivedi流程中報(bào)道的光譜相匹配。剩余的物質(zhì)沒有困難地繼續(xù)進(jìn)行到atr-101游離堿，并且將多個(gè)產(chǎn)物合并。在去除殘余的乙酸乙酯的嘗試中，將固體溶解在10ml甲苯中，然后在減壓下濃縮。在高真空中干燥后，atr-101游離堿分離為粘性的白色泡沫物(10.6g，99％的產(chǎn)率)。終產(chǎn)物的1hnmr顯示甚至在延長(zhǎng)的干燥后仍有痕量的甲苯，并且物質(zhì)繼續(xù)進(jìn)行到hcl鹽的形成。后來測(cè)量固體的熔點(diǎn)，并且發(fā)現(xiàn)該熔點(diǎn)出乎意料地低(50-56℃，預(yù)測(cè)：132-133℃)。固體的性質(zhì)(油性泡沫)使得熔點(diǎn)的確定變得困難，但是判斷其在高于60℃完全熔融。步驟5：hcl鹽形成向在甲苯中的atr-101游離堿中加入37％hcl，立即有粘性白色固體沉淀出來。通過dean-stark設(shè)備，利用劇烈攪拌和加熱(浴溫：160℃)，經(jīng)過大約3小時(shí)將溶液干燥。干燥后，將溶液冷卻，并且通過過濾分離細(xì)小的晶體固體，并用丙酮和二乙醚洗滌。干燥產(chǎn)物atr-101，直到得到恒定的重量(10.6g，92％的產(chǎn)率)，并且充分表征?？偨Y(jié)成功地重復(fù)了trivedi流程，合成了10.6克atr-101。過程中的初始步驟證明是困難的，報(bào)道了相當(dāng)?shù)偷漠a(chǎn)量。硝基化合物還原為胺順利進(jìn)行，但是使用甲醛的甲基化和得到的亞胺的氫化非常緩慢，產(chǎn)生比預(yù)測(cè)產(chǎn)率低的產(chǎn)率。腈的雷尼鎳還原順利進(jìn)行，得到的胺具有預(yù)期的產(chǎn)率和純度。脲的形成和最終hcl鹽的形成也順利進(jìn)行，從而經(jīng)過最后的步驟以優(yōu)異的產(chǎn)率提供atr-101。發(fā)現(xiàn)通過trivedi流程合成的atr-101的純度為94.9％(見下表5)。特別注意的是非常高水平的2-正丙基-6-異丙基異構(gòu)體(rrt1.02)，以及2，4-二異丙基區(qū)域異構(gòu)體(rrt1.09)。表5通過trivedi流程制備的atr-101的分析rt性質(zhì)rrt面積％5.18---0.240.09319.985---0.930.32920.129---0.940.3820.806---0.970.05821.376atr-101(hcl鹽)1.0094.85821.757正丙基-6-異丙基異構(gòu)體1.021.97623.3162，4-二異丙基區(qū)域異構(gòu)體1.092.00530.891---1.450.09231.517---1.470.05232.24---1.510.07235.292---1.650.086實(shí)施例4大規(guī)模合成-低純度通過上文所示的流程進(jìn)行初始大規(guī)格的合成。在第一步中，將4-硝基苯基乙腈用1，4-二溴丁烷烷基化，產(chǎn)生62，這是使用koh作為堿在dmso中進(jìn)行的。然后通過先使用mtbe作為萃取溶劑進(jìn)行水性后處理，并隨后將溶劑濃縮至干燥而分離產(chǎn)物(深色固體)。分別以～3kg的規(guī)格運(yùn)行幾個(gè)批次，以產(chǎn)生在92-100％范圍內(nèi)的產(chǎn)率和83-95％范圍內(nèi)的純度。第二步實(shí)現(xiàn)硝基還原成相應(yīng)的苯胺，隨后用甲醛和acoh進(jìn)行雙重還原性胺化，以提供二甲基苯胺64。這通過使用典型的pd/c催化劑，以dme作為反應(yīng)溶劑而實(shí)現(xiàn)。在觀察反應(yīng)完成后，過濾催化劑，并且在水性后處理以及濃縮溶劑至干燥后得到粗形式的產(chǎn)物。然后，通過將粗固體在庚烷中加熱至80℃(這提供雙相混合物)并從底層的“紅色軟泥”相潷析澄清的上層相而純化。然后，將以這種方式得到的庚烷萃取物濃縮至干燥。然后，在用于下一步驟之前，將得到的固體從ipa/h2o中重結(jié)晶。這一順序以2.6kg規(guī)格進(jìn)行四次，并且將粗物質(zhì)合并在一起用于上述的純化程序；以51％的產(chǎn)率得到產(chǎn)物，通過hplc測(cè)定的純度為97.5％。該順序的第三步是將腈還原成相應(yīng)的伯胺66，這通過使用在thf中的lah(作為沉淀物的來源)進(jìn)行。在反應(yīng)完全后，利用典型的“fieser”猝滅使鋁鹽轉(zhuǎn)化成可過濾的形式。過濾鋁鹽后，然后通過將濾過液濃縮至干燥而得到固體產(chǎn)物。這以500g的規(guī)格進(jìn)行，并且以95％的產(chǎn)率產(chǎn)生產(chǎn)物。工序的第四步是將胺66與2，6-二異丙基苯基異氰酸酯偶聯(lián)產(chǎn)生atr-101游離堿。這通過向66在thf中的混懸液中加入異氰酸酯(純的)而實(shí)現(xiàn)。當(dāng)反應(yīng)完全時(shí)，將thf蒸發(fā)至特定的體積，加入丙酮，并且通過加入水使產(chǎn)物沉淀出來。然后，過濾和干燥提供16aa70040。在300g規(guī)格上，這產(chǎn)生產(chǎn)率為74％、純度為97.5％的產(chǎn)物。工序的最后一步是將atr-101游離堿轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的hcl鹽(atr-101)。這通過向在ipa中的游離堿漿料中添加濃hcl而實(shí)現(xiàn)(漿料-到-漿料轉(zhuǎn)化)。將得到的漿料濃縮以減少ipa的體積，并且加入mtbe作為對(duì)抗溶劑。然后，通過過濾分離產(chǎn)物，以94％的產(chǎn)率(400g規(guī)格)提供粗atr-101。隨后將物質(zhì)從meoh/mtbe中重結(jié)晶，以提供產(chǎn)率為84％、通過hplc確定的純度為99.7％(后來發(fā)現(xiàn)不正確)的純化的atr-101。然而，后來發(fā)現(xiàn)通過上述技術(shù)制備的這些批次被兩種沒有通過hplc解析的異構(gòu)體雜質(zhì)污染；即，2，4-二異丙基區(qū)域異構(gòu)體和2-正丙基-6-異丙基異構(gòu)體：由此，盡管相信以高純度水平得到atr-101，但是事實(shí)上其以低得多的純度水平(即，小于95％)產(chǎn)生，原因在于存在上述雜質(zhì)(這些雜質(zhì)僅在制備后通過更靈敏的hplc方法分析時(shí)溶解)。嚴(yán)重的是，發(fā)現(xiàn)要從atr-101中清除這些密切相關(guān)的雜質(zhì)是非常困難的。實(shí)施例5大規(guī)模合成-高純度發(fā)現(xiàn)實(shí)施例4的流程具有一些缺點(diǎn)，更重要的是其不能得到高純度的atr-101。為了避免產(chǎn)生2，4-二異丙基區(qū)域異構(gòu)體和2-正丙基-6-異丙基異構(gòu)體，研究由2，6-二異丙基苯胺制備2，6-二異丙基苯基異氰酸酯的備選方案。進(jìn)行初步實(shí)驗(yàn)，以評(píng)價(jià)文獻(xiàn)流程(knolker等人，aciee，34(22)：2497-2500，1995)，該流程使用在mecn中的boc2o(1.4當(dāng)量)和dmap(1.0當(dāng)量)制備異氰酸酯。發(fā)現(xiàn)對(duì)稱脲(顯示在下)的形成是有問題的。在該實(shí)驗(yàn)中，在室溫下進(jìn)行反應(yīng)導(dǎo)致僅形成這種雜質(zhì)。進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)(使用1.4當(dāng)量的boc2o和1.0當(dāng)量的dmap)揭示，通過確保反應(yīng)溫度保持在0℃一直到異氰酸酯形成完成可以避免對(duì)稱脲的形成。還發(fā)現(xiàn)dcm是用于產(chǎn)生異氰酸酯的可接受的溶劑，但是使用thf產(chǎn)生不可接受量的對(duì)稱脲，甚至在-20℃運(yùn)行時(shí)也產(chǎn)生。由于可能在適當(dāng)?shù)娜軇┲屑儍舻禺a(chǎn)生異氰酸酯，因此將其作為原位產(chǎn)生的中間體使用，而不是作為分離的中間體。(注意，這種策略需要在如下文討論所應(yīng)用之前純化2，6-二異丙基苯胺)。首先，使用mecn作為反應(yīng)溶劑，證明該方法的可行性。在使用上文所述的條件產(chǎn)生異氰酸酯后，加入66導(dǎo)致向atr-101游離堿的非常純凈的轉(zhuǎn)化。然后，可以使用水性后處理而去除殘余的dmap。為了簡(jiǎn)化所述后處理，使用dcm作為反應(yīng)溶劑(避免與水混溶的反應(yīng)溶劑)進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)。在短時(shí)間優(yōu)化后，將boc2o的化學(xué)計(jì)量減至1.05當(dāng)量(以使boc-保護(hù)的66的偶然形成減至最少)，并將dmap(其作為催化劑起作用)的量減至10mol％。在這些條件下，主要反應(yīng)物(2，6-二異丙基苯胺和66)可以以1∶1的摩爾比使用。還發(fā)現(xiàn)用于反應(yīng)的溶劑的量存在靈活性，因?yàn)榇蟛糠值姆磻?yīng)組分(除了66)在dcm中都是高度可溶的。另外，可以加入純的boc2o和苯胺，或作為dcm溶液加入，這允許我們更容易定制反應(yīng)體積，使其適合大規(guī)模生產(chǎn)中使用的設(shè)備。在得到優(yōu)化的反應(yīng)條件后，然后將注意力集中于鑒定分離atr-101游離堿的適當(dāng)條件。溶劑的篩選表明meoh、ipa和mecn都是用于結(jié)晶atr-101游離堿的潛在候選物。與meoh相比，從ipa中結(jié)晶更好產(chǎn)生，并且發(fā)現(xiàn)使用mecn的混合物非常粘稠，因此最終選擇ipa作為結(jié)晶溶劑。取決于物質(zhì)的純度，我們預(yù)計(jì)也可以使用水作為對(duì)抗溶劑以使回收最大化。還發(fā)現(xiàn)，一起避免水性后處理也可能是可行的，原因在于在反應(yīng)中使用的dmap的量已經(jīng)減少至僅有10mol％，并且除了殘余的boc2o和t-buoh之外，應(yīng)該沒有其他副產(chǎn)物需要去除。為了這一目的，使用dcm作為反應(yīng)溶劑進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，并且在反應(yīng)結(jié)束時(shí)，將反應(yīng)混合物從dcm中進(jìn)行溶劑交換到ipa中。然后，容易地發(fā)生結(jié)晶，并且分離產(chǎn)物，產(chǎn)率為79％，沒有殘余dmap的污染。關(guān)于hcl鹽形成的步驟，對(duì)ipa作為產(chǎn)生atr-101的結(jié)晶溶劑進(jìn)行評(píng)價(jià)。盡管ipa給出高于90％的產(chǎn)率，但是關(guān)于形成異丙基氯的可能性的擔(dān)憂導(dǎo)致對(duì)其他溶劑系統(tǒng)的評(píng)價(jià)。評(píng)價(jià)thf、dma和丙酮，并且它們都很好地起作用，并且選擇丙酮作為最優(yōu)的，原因在于其容易干燥，具有高ich界限，并且不貴。另外，游離堿可以容易地溶解在丙酮中，并且在加入hcl之前精煉過濾(與實(shí)施例4的流程相反，其是漿料-到-漿料轉(zhuǎn)化)。上述實(shí)驗(yàn)使用商購(gòu)的2，6-二異丙基苯胺，發(fā)現(xiàn)其包含不可接受的高水平的不需要的2，4-二異丙基區(qū)域異構(gòu)體和2-正丙基-6-異丙基異構(gòu)體。為了解決這個(gè)問題，發(fā)現(xiàn)可以將該商購(gòu)的物質(zhì)純化為其鹽酸鹽，然后，異氰酸酯偶聯(lián)可以隨后使用苯胺鹽酸鹽替代相應(yīng)的游離堿。這通過首先使苯胺鹽酸鹽在dcm/水性naoh中游離堿化而實(shí)現(xiàn)。然后，將得到的包含純化的2，6-二異丙基苯胺的dcm溶液蒸餾至適合用在異氰酸酯偶聯(lián)中的體積。所述蒸餾也用于確保溶液在使用之前是干燥的。由于2，6-二異丙基異氰酸酯(一種不容易商購(gòu)得到的油)的純化是行不通的，使用通過結(jié)晶為hcl鹽對(duì)母本苯胺的純化(見上述方案)。早期實(shí)驗(yàn)表明，需要的鹽酸鹽70可以從ipa中結(jié)晶出來。在開發(fā)工作過程中，觀察到該物質(zhì)的不同的多形形式。發(fā)現(xiàn)在室溫向苯胺溶液中加入濃hcl導(dǎo)致一種特定形式的產(chǎn)物的結(jié)晶。如果然后將這種漿料加熱回流(當(dāng)全部或大部分物質(zhì)溶解時(shí))并且隨后允許冷卻至室溫，得到不同的(并且較不可溶的)多形形式的物質(zhì)。重要的是，第二種多形形式似乎以比第一種形式更高的純度結(jié)晶。在該流程之后的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中，從5體積ipa和1.05當(dāng)量的hcl得到產(chǎn)率為72％的高純度的(每種＜0.2％的不需要的異構(gòu)體)的需要的70。在該實(shí)驗(yàn)中結(jié)合產(chǎn)物餅的mtbe洗滌，以促使產(chǎn)物的干燥。然而，遇到的一個(gè)小問題是在室溫向苯胺在ipa中的溶液中加入hcl導(dǎo)致隨著產(chǎn)物結(jié)晶形成不可接受的粘稠的混合物。出于這種原因，將hcl放大填裝到苯胺在ipa中的熱溶液(60℃)中。以這種方式，反應(yīng)混合物將保持?jǐn)噭?dòng)。綜合上述發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)生高純度atr-101的完全的大規(guī)模反應(yīng)方案如下：烷化步驟向套層反應(yīng)器容器中填裝koh(薄片；2.5當(dāng)量)和dmso(2.0體積)，產(chǎn)生混懸液。在分開的燒瓶中，在dmso(3.5體積)中制備苯胺(1.0當(dāng)量)和1，4-二溴丁烷(1.05當(dāng)量)的溶液。然后將該溶液經(jīng)4.5小時(shí)緩慢經(jīng)套管導(dǎo)入到koh混懸液中，同時(shí)保持反應(yīng)溫度在30℃以下。使用15℃的套層溫度，觀察到最大批次溫度為27℃。在17-18℃攪拌過夜后，等分試樣的hplc分析表明殘余5％的腈。將該批次溫?zé)岬?5-30℃，并且加入另外的5mol％的1，4-二溴丁烷。再過一小時(shí)后，殘余的腈的量＜3％，并且因此認(rèn)為反應(yīng)完全。將反應(yīng)混合物過濾，以去除無機(jī)物質(zhì)，并且將反應(yīng)器和濾餅用dmso(1體積)洗滌。然后，將該批次在三個(gè)相等部分中進(jìn)行后處理。將每個(gè)部分填裝到干凈的套層反應(yīng)器容器中，然后緩慢加入h2o(13體積)，同時(shí)保持批次溫度在30℃以下(約2小時(shí)，套層溫度為10-15℃)。老化2小時(shí)后，通過過濾收集產(chǎn)物，并且將反應(yīng)器和濾餅用冰冷的6∶1meoh∶h2o(3.33體積)洗滌。以這種方式分離每部分，然后在真空中在40-45℃干燥至恒重。這一流程產(chǎn)生產(chǎn)物71，總產(chǎn)率為78.3％，hplc純度為～96％(具有～2％的二聚體雜質(zhì))。氫化步驟向套層反應(yīng)器中填裝71(1.0當(dāng)量)、10％pd/c(7.0wt％)和meoh(10體積)。將反應(yīng)器的內(nèi)容物用n2鈍化，然后用h2加壓至6.0bar。套層開始時(shí)設(shè)置為18℃，以涵蓋接著發(fā)生的最小的放熱反應(yīng)(exotherm)。2小時(shí)后，將套層溫度調(diào)整為35℃，以實(shí)現(xiàn)可接受的反應(yīng)速率。將反應(yīng)混合物在這些條件下攪拌過夜。反應(yīng)混合物的等分試樣的hplc分析揭示，向中間體苯胺的轉(zhuǎn)化是完全的(殘余＜0.1％的羥胺中間體)。然后向反應(yīng)器中填裝acoh(1.0當(dāng)量)、甲醛(在meoh中37％的溶液，2.7當(dāng)量)和10％pd/c(3.0wt％)。將反應(yīng)混合物再次用n2鈍化，然后用h2加壓至6.0bar并且加熱至45℃。2小時(shí)后，hplc分析表明反應(yīng)是完全的(殘余＜0.1％的單甲基中間體)。將反應(yīng)混合物用n2鈍化，然后用通過celite過濾，同時(shí)仍保持在45℃。將反應(yīng)器和濾餅用另外的meoh(2.0體積)洗滌，并且將得到的濾過物轉(zhuǎn)移到干凈的套層反應(yīng)器容器中。然后，將溶液蒸餾至10體積的水平，同時(shí)保持釜中溫度為40-50℃(套層溫度為55℃，250托)。這在蒸餾結(jié)束時(shí)產(chǎn)生均相的溶液。然后，將溶液經(jīng)1小時(shí)冷卻至20℃。在～33℃開始發(fā)生結(jié)晶。然后經(jīng)1小時(shí)逐滴加入水(5.0體積)，同時(shí)保持批次溫度為～20℃。將得到的漿料老化處理過夜，然后過濾。將反應(yīng)器和濾餅用冰冷的1∶1meoh∶h2o(5.0體積)洗滌。在真空中在40-45℃干燥至恒重后，得到72，產(chǎn)率為90％，hplc純度為96.0％(2.8％的二聚體相關(guān)的雜質(zhì))。lah還原步驟將起始物質(zhì)和thf(5.0體積)填裝到套層反應(yīng)器容器中，產(chǎn)生紅色/橙色溶液。經(jīng)10分鐘的時(shí)間加入lah溶液(在thf中2.4m，1.5當(dāng)量)，1并且然后將得到的溶液加熱至45℃。發(fā)現(xiàn)反應(yīng)在1.5小時(shí)后完成(殘余0.9％亞胺中間體)。然后在制備中將反應(yīng)混合物冷卻至0℃進(jìn)行淬滅。然后非常緩慢地添加包含50％naoh(1.5當(dāng)量；0.56體積)和水(1.29體積)的溶液，同時(shí)保持批次溫度為～0℃。所述添加需要1.5小時(shí)完成，并且導(dǎo)致形成致密的、顆粒狀固體。然后將反應(yīng)混合物溫?zé)岬?0℃并且過濾。使用另外的thf(2x3.5體積)洗滌反應(yīng)器和濾餅。然后將濾過液轉(zhuǎn)移到干凈的套層反應(yīng)器中，并且在真空中蒸餾至4體積，同時(shí)保持釜中溫度為～40℃(套層50℃，300托)。然后，填裝mecn(12體積)，將溶液再在真空中蒸餾至4體積，同時(shí)保持釜中溫度為50℃。然后加入水(2.0體積)，同時(shí)保持溫度在50℃。然后將溶液冷卻至40℃并且接入晶種(0.1wt％)。然后將反應(yīng)混合物經(jīng)2小時(shí)冷卻至20℃?；旌衔镩_始變得非常粘稠，在～30℃產(chǎn)生結(jié)晶的產(chǎn)物。一旦漿料冷卻至20℃，經(jīng)30分鐘添加另外的水(4.0體積)，同時(shí)將批次溫度保持在20℃。將漿料經(jīng)1小時(shí)冷卻至0℃，老化1小時(shí)，然后過濾。將反應(yīng)器和濾餅用冰冷的1∶2mecn∶h2o(3.0體積)洗滌。然后，將產(chǎn)物在真空中在40-45℃干燥至恒重，以提供85.0％產(chǎn)率的73，其hplc純度為97.2％(具有1.5％二聚體相關(guān)的雜質(zhì))。異氰酸酯偶聯(lián)步驟通過水性后處理，苯胺鹽酸鹽酸鹽70(1.0當(dāng)量)被轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的游離堿。將該物質(zhì)在dcm(5.0體積)和10％水性naoh(5.0體積)的混合物中攪拌30分鐘。分離有機(jī)相，然后用水(2x5.0體積)洗滌。然后將包含苯胺游離堿的dcm溶液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(rotovap)上濃縮至體積為2.0體積。然后向分開的燒瓶中填裝dmap(10mol％)和dcm(3體積)。將得到的溶液冷卻至0℃，然后通過套管經(jīng)5-10分鐘加入在dcm(1.0體積)中的boc2o(1.05當(dāng)量)溶液，同時(shí)保持批次溫度在0℃。然后通過套管經(jīng)30分種加入苯胺溶液，同時(shí)保持批次溫度在0℃。再攪拌另外30分鐘后，通過hplc觀察到向異氰酸酯的完全轉(zhuǎn)化(殘余0.6％苯胺)。向分開的燒瓶中填裝73和dcm(3.0體積)。然后將得到的溶液冷卻至0℃，并且由套管經(jīng)20分鐘添加異氰酸酯溶液，同時(shí)保持溫度在0℃。10分鐘后，hplc分析表明反應(yīng)完全(殘余0.3％73和2.1％異氰酸酯)。然后將反應(yīng)混合物在真空蒸餾至體積為5.0體積，同時(shí)保持釜中溫度為～30℃(40°套層，500托)。然后加入ipa(22體積)，并且將反應(yīng)混合物在真空蒸餾至體積為20體積，同時(shí)保持釜中溫度為50-60℃(套層65℃，350-200托)。當(dāng)蒸餾完成時(shí)，將溶液冷卻至40℃然后接入晶種(0.1wt％)。然后將溶液經(jīng)1小時(shí)冷卻至20℃，并且得到粘稠的漿料。然后經(jīng)1.5小時(shí)加入h2o(7.3體積)，同時(shí)保持批次溫度在20℃。然后將得到的漿料冷卻至0℃，老化3小時(shí)，然后過濾。將反應(yīng)器和濾餅用冰冷的1∶1ipa∶h2o(10體積)洗滌，將產(chǎn)物在真空中在40-45℃干燥至恒重。得到atr-101游離堿，產(chǎn)率為89％，hplc純度為99.7％。hcl鹽制備將游離堿溶解在丙酮(7.0體積)中并且精煉過濾。使用另外的丙酮(3.0體積)沖洗濾器并將溶液轉(zhuǎn)移到反應(yīng)器容器中。然后經(jīng)10分鐘加入濃hcl(1.3當(dāng)量)，同時(shí)保持溫度在20℃。在添加的中途，產(chǎn)物開始結(jié)晶。在添加完成后，允許得到的漿料老化2小時(shí)，然后過濾。將反應(yīng)器和濾餅用丙酮(3.0體積)洗滌，然后將產(chǎn)物在真空中在40-45℃干燥至恒重。干燥完成后，得到92.5％產(chǎn)率的atr-101，hplc純度為99.7％。實(shí)施例6制備含有atr-101的片劑可以按照下文所述的流程制備含有500mgatr-101(作為游離堿)的片劑，并且示例性的片劑的組成在表1和2中列出。a.高剪切力濕法制粒1.稱重atr-101。2.稱重甘露醇，并且過no.30目篩子。3.稱重微晶纖維素、交聯(lián)羧甲纖維素和預(yù)膠化的淀粉，并且過no.30目篩子。4.使用v-摻混機(jī)制備內(nèi)加(intragranular)賦形劑(上述成分2和3)和atr-101的成粒前混合物。5.稱重羥丙甲纖維素并且攪拌溶解在水中。6.使用高剪切力成粒機(jī)將成粒前混合物用羥丙甲纖維素溶液濕法成粒。7.過no.7目篩子使?jié)裥灶w粒不成團(tuán)。然后將顆粒在流化床干燥機(jī)中干燥。干燥的終點(diǎn)通過干燥失重(lod)確定。b.加入外加(extragranular)賦形劑1.將干燥的顆粒過no.20目篩，并且重新引入到v-摻混機(jī)中。1.將交聯(lián)羧甲纖維素和硬脂酸鎂過no.30目篩，并且加入到v-摻混機(jī)中。2.然后將干燥的顆粒和外加賦形劑混合。c.壓縮1.使用重力輸送的旋轉(zhuǎn)式壓片機(jī)(gravityfedrotarytabletpress)壓縮片劑核心。d.薄膜包衣1.可以使用適當(dāng)?shù)陌氯芤簩⒑诵钠瑒┌?。?代表性的500mgatr-101片劑的成分成分mg/片劑atr-101(作為游離堿)500mg甘露醇150mg101型微晶纖維素170mg交聯(lián)羧甲纖維素鈉20mg預(yù)膠化的淀粉50mg羥丙甲纖維素30mg102型微晶纖維素50mg硬脂酸鎂20mg水(在加工過程中去除)--以與上述相似的方式制備下述包衣片劑。表7代表性的500mgatr-101片劑的成分成分mg/片劑atr-101(作為游離堿)500mg甘露醇54.3mg101型微晶纖維素54.3mg交聯(lián)羧甲纖維素鈉36.2mg預(yù)膠化的淀粉14.5mg羥丙甲纖維素14.5mg硬脂酸鎂7.2mg白色歐巴代ii(opadryiiwhite)21.7mg水(在加工過程中去除)--實(shí)施例7利用胃酸化的增強(qiáng)的暴露為了檢驗(yàn)按照實(shí)施例6制備的atr-101片劑的藥物代謝動(dòng)力學(xué)和暴露，在用五肽胃泌素(pentagastrin)預(yù)處理以降低胃ph或用法莫替丁(famotidine)預(yù)處理以提高胃ph的狗中進(jìn)行體內(nèi)研究。在兩個(gè)處理中使用同齡群組的狗，并且在治療組之間包括5天的洗胃。在給藥前，將雄性小獵犬(約6.5-12.5kg，n＝6)禁食過夜，并采集前4小時(shí)的血液樣品。對(duì)于五肽胃泌素組，在測(cè)試制品施用前16-22分鐘，將動(dòng)物用單次肌內(nèi)注射五肽胃泌素(0.06mg/ml，劑量水平為6μg/kg，劑量體積為0.01ml/kg)注射。對(duì)于法莫替丁組，在片劑施用前59-60分鐘，將動(dòng)物用20mg法莫替丁的單次口服片劑劑量預(yù)處理。在片劑施用后，每個(gè)動(dòng)物通過口管飼接受30ml自來水。將動(dòng)物用口服施用的單片125mgatr-101片劑處理。該片劑如上文實(shí)施例6所述制備，并且包含表6中列出的成分，但是atr-101的量是125mg(作為游離堿)而不是500mg，其余的成分按相同的重量百分?jǐn)?shù)減少。對(duì)兩個(gè)處理組，在0小時(shí)(給藥前)、給藥后1、2、4、8和24小時(shí)采集用于血漿的pk血液樣品。通過頸靜脈將樣品(～1ml)采集到包含k2edta的采血管中，在冷凍(2-8℃)條件下離心，收集血漿并且在-60至-90℃冷凍。通過lc/msms確定atr-101濃度。與用法莫替丁預(yù)處理相比，在用五肽胃泌素預(yù)處理的狗中，atr-101表現(xiàn)出57％的系統(tǒng)暴露增加，這表明在atr-101的口服施用中酸性的胃環(huán)境是有利的。實(shí)施例8粒度研究對(duì)十只頸靜脈插管的雌性sprague-dawley大鼠的組以約3mg/kg施用單次口服劑量的各種atr-101制劑，如表8所示，其中所述大鼠約13周齡，具有225至275克的目標(biāo)重量。atr-101以9號(hào)明膠膠囊(組1-3)或通過管飼法(組4)施用。表8制劑在給藥后1、2、4和8小時(shí)將血液樣品采集到包含k2edta的管中。表9顯示在大鼠中關(guān)于不同粒度的atr-101制劑得到的cmax和暴露(auc0-24hr)。如圖9中所示，隨著粒度減小，觀察到暴露增加。使用d(0.9)＜5μm的粒度的制劑觀察到最大暴露。在具有d(0.9)＜1μm的粒度的納米-研磨的制劑的暴露中沒有進(jìn)一步增加。表9不同粒度的cmax和auc0-24具有較小粒度的制劑表現(xiàn)出增加難度的操作特征。納米-研磨的制劑表現(xiàn)出低堆密度和非常差的流動(dòng)特征。另外的研究評(píng)估了該片劑制劑的藥物負(fù)載能力約為25％，而對(duì)于粒度為d(0.9)＜18.5的制劑，藥物負(fù)載能力為～70％。這種制劑的高(70％)藥物負(fù)載能力的確令人驚訝，并且表明藥物的物理-機(jī)械特性和/或表面特性導(dǎo)致更高的粘聚現(xiàn)象。本說明書中引用的和/或申請(qǐng)數(shù)據(jù)表中列出的全部美國(guó)專利、美國(guó)專利申請(qǐng)公布、美國(guó)專利申請(qǐng)、外國(guó)專利、外國(guó)專利公布和非專利公布都通過引用完全結(jié)合在本文中，包括于2014年9月26日提交的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)?zhí)?2/055,964，和2014年12月1日提交的62/086,153。在必要時(shí)，實(shí)施方案的各個(gè)方面可以修改，以使用各個(gè)專利、申請(qǐng)和公布的理念，從而提供其他的實(shí)施方案。盡管在本文中公開了本發(fā)明的多個(gè)實(shí)施方案，但是，按照本領(lǐng)域技術(shù)人員的公知常識(shí)，可以在本發(fā)明的范圍內(nèi)進(jìn)行多種修改和改進(jìn)。所述改進(jìn)包括用已知的等價(jià)物替換本發(fā)明的任意方面，從而以基本上相同的方式實(shí)現(xiàn)相同的結(jié)果。本說明書中引用的任意在先的文件和全部公開，包括但不限于專利和專利申請(qǐng)，如同指示每個(gè)單獨(dú)的公布專門而且單獨(dú)地通過引用結(jié)合在本文中并且如同在本文中充分描述一樣通過引用結(jié)合在本文中。本發(fā)明包括基本上如本文之前描述的并且參考實(shí)施例和附圖的所有實(shí)施方案和變化形式。當(dāng)前第1頁12當(dāng)前第1頁12