專利名稱：一種⁹⁹Tc^mO核標記環(huán)丙沙星氨荒酸鹽配合物及制備方法和應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及"TcmO核標記的放射性藥物化學和臨床核醫(yī)學技術領域，具體說是涉 及到一種99TcmO核標記環(huán)丙沙星氨荒酸鹽配合物及制備方法和應用。
背景技術：
核素炎癥顯像是早期檢查病灶的一項重要手段，炎癥顯像劑依據(jù)不同的標記物分 為蛋白質類、抗生素類、白細胞類和小分子化合物類等，選用的核素有67Ga、 mIn和 99Tcm。由于99Tcm優(yōu)良的核性質以及便宜易得等優(yōu)點使其成為放射性藥物研究的首選核 素之一。"Tc^標記的白細胞顯像探測急性慢性炎癥病灶，有"金標準"之稱，但其標 記過程復雜，又易發(fā)生交叉感染，故其臨床推廣應用上受限。
近年來，"Tcm標記喹諾酮類抗菌素是核醫(yī)學炎癥顯像的熱點之一。其中"TC"標
記環(huán)丙沙星("Tc氣Ciprofloxacin)不僅能診斷炎癥，還能區(qū)分細菌性和非細菌性感染， 安全可靠，是一種有效的炎癥顯像劑。但是"Tc"1-Ciprofloxacin配合物的放射化學純度 不高，標記時會形成不定量的膠體锝而影響顯像質量，而且配合物需要微孔濾膜純化處 理，導致放射化學產(chǎn)率降低，臨床應用不方便(SeungJO, Jin-SookR, JoongWS, etal. Synthesis of 99Tc -ciprofloxacin by different methods and its biodistribution[J], Applied Radiation and Isotopes, 2002, 57: 193-200)。
由于99TcmN三重鍵具有很高的化學穩(wěn)定性和特殊的生物分布性質，文獻報 道了 一種新型"TcmN核環(huán)丙沙星氨荒酸鹽配合物(99TcmN-CPFXDTC)作為炎癥顯像劑 (Junbo Zhang , Haixun Guo, Shijian Zhang，et al. Synthesis and biodistribution of a novel 99TcmN complex of ciprofloxacin dithiocarbamate as a potential agent for infection imaging[J]， Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2008， 18:5168-5170)。 與 99TCm-Cipr0flOXaCin相比，"TcmN-CPFXDTC雖然有著較高的炎癥攝取和炎癥/血比值， 但其炎癥/肌肉比值較低，而且其肝、肺等臟器攝取較高，因此仍有必要研制更為理想 的新型炎癥顯像劑。
"Tc氣葡庚糖酸鹽(99Tcm-GH)是以["TcmO產(chǎn)為中心核的配合物，結構確定，而
3且其容易和其他配休發(fā)生配體交換反應生成新的["Tc""0產(chǎn)核配合物，所以將 "Tcm-GH作為["Tc"^產(chǎn)核配合物的標記前體來制備新型["Tc^O產(chǎn)核配合物成為放 射性藥物化學的研究熱點之一。目前，99Tcm-GH的制備已經(jīng)實現(xiàn)了藥盒化，這為 ["Tcmof+核標記的放射性藥物的研究和應用打下了堅實的基礎。因此制備 ["Tc"X)f+核環(huán)丙沙星氨荒酸鹽配合物(99TcmO-CPFXDTC)來用作新型炎癥顯像劑， 是當前放射性藥物化學領域的研究熱點和需要解決的重要課題之一。
本發(fā)明的目的提供一種放射化學純度高、穩(wěn)定性好，應用在炎癥顯像領域的 ["Tcmof+核標記環(huán)丙沙星氨荒酸鹽配合物，同時還提供["T^Of+核標記環(huán)丙沙星氨荒 酸鹽配合物的制備方法。
為了達到上述目的，本發(fā)明采用以下技術方案 一種["TcmOf+核標記環(huán)丙沙星氨
荒酸鹽配合物("TcmO-CPFXDTC)，其結構式為
該結構式中以"T(^0核為中心核，兩個CPFXDTC配體分子中的4個硫原子與 99Tcm配位得到99TcmO-CPFXDTC配合物。
99TcmO-CPFXDTC配合物的制備方法如下 "TcmO-CPFXDTC的制備
在GH藥盒中加入1-5mL_Na99TcmO4(37~740MBq)，搖勻后室溫放置15分鐘后即 得到"Tcm-GH。用O.lmol/LNaOH調(diào)節(jié)溶液pH值為8，將lmL濃度為lg~2g/L的 CPFXDTC水溶液加入到上述溶液中，混勻后，于100°C水浴下繼續(xù)反應20 30分鐘， 即得到本發(fā)明所述的99TcmO-CPFXDTC配合物。
上述所用的化學試劑均是市售商品，來源廣泛，容易獲得；CPFXDTC按照文獻 (Junbo Zhang ， Haixun Guo， Shijian Zhang,et al. Synthesis and biodistribution of a novel 99TcmN complex of ciprofloxacin dithiocarbamate as a potential agent for infection
發(fā)明內(nèi)容imaging[J]， Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2008, 18:5168-5170)自才亍合成。
通過上述方法制備的"TcmO-CPFXDTC配合物室溫下體外穩(wěn)定性好，其放射化學 純度大于90%。
將"TcmO-CPFXDTC配合物與"Tcm-Ciprofloxacin(張弘，蔣寧一，朱霖等。"Tc"示 記環(huán)丙沙星炎癥顯像的實驗研究[J]，中國臨床醫(yī)學影像雜志，2006， 17: 42-44)以及 "TcmN-CPFXDTC (Junbo Zhang , Haixun Guo, Shijian Zhang,et al. Synthesis and biodistribution of a novel 99TcmN complex of ciprofloxacin dithiocarbamate as a potential agent for infection imaging[J]， Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2008， 18:5168-5170)在細菌感染模型昆明小白鼠體內(nèi)生物分布數(shù)據(jù)比較，結果如表1:
表1 999TcmO-CPFXDTC， "Tcm-Ciprofloxacin和"Tc -CPFXDTC在注射4h后細菌 感染模型昆明小白鼠體內(nèi)生物分布[(X±S), %ID/g, n=4]
99TcmO-CPFXDTC"Tcm-Ciprofloxacin99TcmN-CPFXDTC
肝4.65±0.9520.08±0.1034.65±5.93
月市2.45±0.692.09±0.152U1±6.80
脾1.35±0.325.50±0.0128.49±5.84
炎癥2.79±0.551.24±0.063.21±0.66
血2.98士0.911.51±0.021.82±0.27
肌肉0.90±0.140.29±0.031.80±0.29
炎癥/血0.940.821,78
炎癥/肌肉3.104.281.76
以上結果表明，與"Tcm-Ciprofloxacin相比，999TcmO-CPFXDTC配合物有著更高的 炎癥攝取和炎癥/血比值以及更低的肝脾本底值；與99TcmN-CPFXDTC相比， 999TcmO-CPFXDTC配合物有著更好的炎癥/肌肉比值，而且999TcmO-CPFXDTC配合物 在肝，脾，肺中的攝取要遠遠低于"Tc"^N-CPFXDTC,從而有利于腹部炎癥顯像。 999TcmO-CPFXDTC配合物可以作為一種新型炎癥顯像劑推廣應用。
具體實施例方式
下面通過實施例詳述本發(fā)明
一種99TcmO核標記環(huán)丙沙星氨荒酸鹽配合物
99TcmO-CPFXDTC的制備在GH藥盒中加入1-5mL_Na99TcmO4(37~740MBq)，搖勻后室溫放置15分鐘后即 得到"Tcm-GH。用O.lmol/LNaOH調(diào)節(jié)溶液pH值為8,將lmL濃度為lg~2g/L的 CPFXDTC水溶液加入到上述溶液中，混勻后，于100。C水浴下繼續(xù)反應20 30分鐘， 即得到本發(fā)明所述的99TcmO-CPFXDTC配合物。
對"TcmO-CPFXDTC配合物的性能測定
1. "TcmO-CPFXDTC的薄層色譜(TLC)鑒定
采用薄層色譜(TLC)方法鑒定99TcmO-CPFXDTC，所用體系為聚酰胺-生理鹽水。 在此體系中"Tcm-GH， 99TcmO-CPFXDTC和99Tcm04W Rf值如表2所示
表2聚酰胺-生理鹽水體系中不同組分的Rf值
99mTc04-99mTc-GH99m TcO-CPFXDTC
0-0.10.8-1.00-0.1
TLC鑒定結果表明生成的"TcmO-CPFXDTC配合物的放射化學純度大于90%。 2. "TcmO-CPFXDTC配合物的脂水分配系數(shù)的測定
取1.0mLpH7.4的磷酸鹽緩沖液(0.025mol/L)于10mL離心試管中，在離心試管中 加入l.OmL正辛醇和0.01mL99TcmO-CPFXDTC溶液，蓋上塞子，充分搖勻，離心 5min(5000r/min)。然后分別從有機相和水相中取出O.lmL，測定二相的放射性計數(shù)，并 計算其分配系數(shù)p (P^有機相的放射性活度/水相的放射性活度)，測得1ogP^0.96，說 明99TcmO-CPFXDTC是一種水溶性物質。 3.99TcmO-CPFXDTC配合物的穩(wěn)定性測定
將標記好的99TcmO-CPFXDTC配合物在室溫下放置6小時后測定其放射化學純度， 實驗結果表明"TcmO-CPFXDTC配合物在放置6小時后放射化學純度大于90%，說明 99TcmO-CPFXDTC配合物在室溫下體外穩(wěn)定性好，適于臨床應用的需要。 4.99TcmO-CPFXDTC配合物的體外細菌結合實驗
取0.4mL O.Olmol/L的醋酸溶液和0.4mL金黃色葡萄球菌溶液[l X 101Q/lmL O.lmol/L 的PBS (pH7.4)溶液]置于離心管中，取標記好的99TcmO-CPFXDTC配合物溶液 0.2mL(3.7MBq)分別加入到上述混合液中，4°C下培養(yǎng)lh后下離心5min (2000rpm)， 移去上層清液，用lmL0.1mol/L的PBS (pH7.4)溶液洗滌沉淀后再次離心，取出上層 清液后合并所有清液，測量放射性計數(shù)Al，沉淀放射性計數(shù)A2,細菌結合率為 [A2/(A1+A2)] X 100%。測得"TcmO-CPFXDTC配合物的細菌結合率為59.3%。 5. 99TcmO-CPFXDTC配合物在炎癥小鼠模型中的生物分布實驗
6取0.05mL金黃色葡萄球菌(lX109/lmL0.1mol/LPBS)，注射到18g左右的昆明小 白鼠的左后大腿內(nèi)側肌肉中，72h后取8只感染明顯的小鼠，分別經(jīng)尾靜脈注射0.1mL (約7.4Xl()SBq)"TcmO-CPFXDTC配合物，于注射lh和4h后斷頸處死。取不同臟器、 膿腫肌肉和對側大腿肌肉，擦凈后稱重，并在FT-603阱型Y閃爍探頭上測其放射性計 數(shù)，計算各組織的每克百分注射劑量(％ID/g)。結果見表3。
表3 "TcmO-CPFXDTC配合物在炎癥小鼠模型中的生物分布(x±s,n=4， ％ID/g) HI Hi ^
通過以上實施例的檢測數(shù)據(jù)說明，"TcmO環(huán)丙沙星氨荒酸鹽配合物可以作為一種新 型炎癥顯像劑推廣應用。
炎癥/肌肉 炎癥/血
1.58±0.51
3.22±0.46
3.47±1.20
5.77±0.93
1.62±0.30
1.77±0.27
3.16±0.38
0.99±0.23
5.18±1.96
3.19
0.61
1.22±0.30 4.65±0.95 2.45±0.69 6.94±1.72 1.35±0.32 1.77±0.11 2.79±0.55 0.90±0.14 2.98±0.91
3.10
0.94
心肝肺腎脾骨射g血
權利要求
1.一種[99TcmO]3+核標記環(huán)丙沙星氨荒酸鹽配合物，其特征在于99TcmO-CPFXDTC配合物的結構式為該結構式中以99TcmO核為中心核，兩個CPFXDTC配體分子的4個硫原子與99Tcm配位得到99TcmO-CPFXDTC配合物。
2. —種制備"T,0環(huán)丙沙星氨荒酸鹽配合物的制備方法，其特征在于采 用配體交換法制備99TcmO-CPFXDTC ， 在GH藥盒中加入 l-5mLNa99TcmO4(37~740MBq)，搖勻后室溫放置15分鐘后即得到"Tcm-GH; 用O.lmol/LNaOH調(diào)節(jié)溶液pH值為8，將ImL濃度為lg~2g/L的CPFXDTC 水溶液加入到上述溶液中，混勻后，于100。C水浴下繼續(xù)反應20 30分鐘，得到 所述"TcmO-CPFXDTC配合物。
3. 如權利要求1或2所述的99TcmO環(huán)丙沙星氨荒酸鹽配合物，其特征在于 所述配合物作為炎癥顯像劑在核醫(yī)學領域的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種⁹⁹Tc^mO核標記環(huán)丙沙星氨荒酸鹽配合物及制備方法和應用，該配合物以⁹⁹Tc^mO核為中心核，兩個CPFXDTC配體分子中4個硫原子⁹⁹Tc^m原子與⁹⁹Tc^m絡合得到⁹⁹Tc^mO-CPFXDTC配合物。該配合物的放射化學純度高、穩(wěn)定性好、具有炎癥攝取高，炎癥/肌肉等靶/非靶比值好，肝、肺和脾等部位攝取低的優(yōu)點，是一種有推廣應用價值的新型炎癥顯像劑。
文檔編號A61K103/10GK101574531SQ20091008689
公開日2009年11月11日 申請日期2009年6月18日 優(yōu)先權日2009年6月18日
發(fā)明者唐志剛, 張仕堅, 張俊波, 張現(xiàn)忠, 躍 王, 王學斌, 潔 陸 申請人:北京師范大學;北京師宏藥物研制中心