一種甲鈷胺片有關(guān)物質(zhì)的測定方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種甲鈷胺片有關(guān)物質(zhì)的測定方法，包括如下步驟：①供試品的制備：②對照品的制備；③采用高效液相色譜測定有關(guān)物質(zhì)的含量，色譜條件為：固定相是以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料的色譜柱，流動相是由乙腈與磷酸鹽緩沖液組成的混合液；檢測波長為300～360nm，進(jìn)樣量為20μl，柱溫為30℃，流速為0.5～1.5ml/min；梯度洗脫；④計算供試品中各雜質(zhì)的含量。本發(fā)明提供的甲鈷胺片有關(guān)物質(zhì)的測定方法，通用性強(qiáng)、重現(xiàn)性好、分離度高、檢測結(jié)果準(zhǔn)確；經(jīng)方法學(xué)驗證表明，具有穩(wěn)定性指示作用，能夠快速、準(zhǔn)確地實現(xiàn)甲鈷胺片各雜質(zhì)的限度控制，確保質(zhì)量可控，而且該測定方法成本低廉，具有良好的經(jīng)濟(jì)效益和推廣前景。
【專利說明】一種甲鈷胺片有關(guān)物質(zhì)的測定方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及分析化學(xué)【技術(shù)領(lǐng)域】，更具體地說，涉及一種甲鈷胺片有關(guān)物質(zhì)的測定 方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 甲鈷胺又名甲基維生素 B12,是一種深紅色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；無臭、無味；引濕 性強(qiáng)；遇光易分解；甲鈷胺分子式為(：63Η 91〇Λ3〇14Ρ，分子量為1344. 38,其結(jié)構(gòu)是以鈷離子為 中心的大環(huán)絡(luò)合物，該結(jié)構(gòu)式如下：
[0003]

【權(quán)利要求】
1. 一種甲鈷胺片有關(guān)物質(zhì)的測定方法，包括如下步驟： (1) 供試品的制備：直接研磨甲鈷胺片至細(xì)粉，取適量細(xì)粉置于量瓶中，加流動相使細(xì) 粉溶解、稀釋至刻度，制成濃度為〇. 25mg/ml的溶液；搖勻、濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶 液； (2) 對照品的制備：取適量步驟（1)所得的供試品溶液，加流動相稀釋至刻度，制成濃 度為7. 5 μ g/ml的溶液，作為對照品溶液； (3) 采用高效液相色譜測定有關(guān)物質(zhì)的含量：取步驟（2)所得的對照品溶液注入液相 色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，再精密量取供試品溶液和對照品溶液分別注入液相色譜儀，記錄 色譜圖至甲鈷胺峰保留時間的2倍，供試品溶液中單個雜質(zhì)含量不得大于1. 0%，總雜質(zhì)含 量不得大于2. 0%。 色譜條件為：固定相是以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料的色譜柱，流動相是由乙腈與 磷酸鹽緩沖液組成的混合液；檢測波長為300?360nm，進(jìn)樣量為20 μ 1，柱溫為30°C，流速 為0. 5?1. 5ml/min ;梯度洗脫； (4) 計算供試品中各雜質(zhì)的含量。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的甲鈷胺片有關(guān)物質(zhì)的測定方法，其特征在于：所述的梯度洗 脫中，于0?2分鐘，流動相中乙腈的體積占5%，磷酸鹽緩沖液的體積占95% ;于2?15 分鐘，流動相中乙腈的體積從5 %變化為15 %，磷酸鹽緩沖液的體積從95 %變化為85 %;于 15?30分鐘，流動相中乙腈的體積從15%變化為20%，磷酸鹽緩沖液的體積從85%變化 為80% ;于30?32分鐘，流動相中乙腈的體積從20%變化為25%，磷酸鹽緩沖液的體積 從80%變化為75% ;于32?35分鐘，流動相中乙腈和磷酸鹽緩沖液的體積各自回到初始 比例，色譜柱重新平衡；后運行2分鐘,使色譜柱充分平衡。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的甲鈷胺片有關(guān)物質(zhì)的測定方法，其特征在于：所述的磷 酸鹽緩沖液的濃度為〇. 01?〇. 〇5mol/L，PH值為3. 5?5. 0。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的甲鈷胺片有關(guān)物質(zhì)的測定方法，其特征在于：所述的磷酸鹽 緩沖液的濃度為〇· 〇3mol/L，PH值為3. 5。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的甲鈷胺片有關(guān)物質(zhì)的測定方法，其特征在于：所述的磷 酸鹽緩沖液選自磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸氫二鉀、磷酸二氫胺、磷酸氫二胺中的一種 或幾種。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的甲鈷胺片有關(guān)物質(zhì)的測定方法，其特征在于：所述的磷酸鹽 緩沖液選自磷酸二氫鈉。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的甲鈷胺片有關(guān)物質(zhì)的測定方法，其特征在于：所述的步驟 (1)、步驟⑵中的流動相是由乙腈與0. 03mol/L磷酸二氫鈉溶液按照體積比19 :81的比例 混合而成。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的甲鈷胺片有關(guān)物質(zhì)的測定方法，其特征在于：所述的色譜條 件為：固定相是以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料的色譜柱，流動相是由乙腈與磷酸鹽緩沖 液組成的混合液；檢測波長為342nm，進(jìn)樣量為20μ 1，柱溫為30°C，流速為1. Oml/min ;梯 度洗脫。
【文檔編號】G01N30/89GK104122363SQ201410288671
【公開日】2014年10月29日 申請日期:2014年6月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月24日
【發(fā)明者】徐春玲, 徐秀卉, 陸振宇, 宋遠(yuǎn)征, 姚麗萍, 蔣國潮, 徐鵬鶴, 丁忠海 申請人:杭州康恩貝制藥有限公司