專利名稱：評(píng)估肝酶誘導(dǎo)的工具和方法
評(píng)估肝酶誘導(dǎo)的工具和方法本發(fā)明涉及化合物風(fēng)險(xiǎn)分級(jí)的毒理學(xué)評(píng)估領(lǐng)域。具體來(lái)說，本發(fā)明涉及診斷肝酶 誘導(dǎo)的方法。其還涉及測(cè)定化合物能否在受試者中誘導(dǎo)這種肝酶誘導(dǎo)的方法和鑒別用于治 療肝酶誘導(dǎo)的藥物的方法。而且，本發(fā)明涉及包含至少5種分析物的特征值的數(shù)據(jù)集(data collection)、包含所述數(shù)據(jù)集的數(shù)據(jù)存儲(chǔ)介質(zhì)以及診斷肝酶誘導(dǎo)的系統(tǒng)和設(shè)備。最后，本 發(fā)明還涉及分析物組或用于其測(cè)定的工具(means)在制備用于診斷受試者肝酶誘導(dǎo)的診 斷設(shè)備或組合物中的用途。肝的主要功能包括代謝功能、解毒作用和膽汁排泄。這些功能由肝酶實(shí)施。根據(jù) 對(duì)代謝酶或解毒酶的需求，這些酶的活性在肝中增加或降低。將響應(yīng)增加的需求而引起 的肝酶的活性增加稱為酶誘導(dǎo)。酶誘導(dǎo)可能導(dǎo)致潛在的病理前狀態(tài)(pro-pathological condition)，尤其是當(dāng)與其它化合物的解毒相關(guān)時(shí)。還有許多實(shí)例，尤其是致癌物，在它們 能夠發(fā)揮致癌效應(yīng)之前需要代謝激活。因此，酶誘導(dǎo)能夠潛在地增加這些活化化合物的形 成。酶誘導(dǎo)可以被視為增加出現(xiàn)肝毒性和伴隨疾病或病癥的預(yù)兆(predisposition)。 由于各種病癥、疾病或醫(yī)學(xué)狀態(tài)包括肝細(xì)胞壞死、肝炎、脂肪變性、肝硬化、磷脂質(zhì)病 (phospholipoidosis)、膽汁淤積、膽管炎，肝毒性在受試者中可能變得明顯(參見例如， Grunhagen 2003, Z.Gastroenterol. 41(6) :565-578)。能夠觀察到酶誘導(dǎo)對(duì)肝臟暴露于其下的各種化合物有響應(yīng)。在這些化合物中，存 在主動(dòng)暴露的化合物，例如藥物或食物中含有的營(yíng)養(yǎng)化合物以及從環(huán)境中不可避免攝入的 化合物。與表現(xiàn)出直接的肝毒性效應(yīng)的化合物相反，某些化合物可能僅引起酶誘導(dǎo)，酶誘導(dǎo) 本身并不明顯成為病理狀態(tài)，但其會(huì)增加受試者出現(xiàn)病理性肝毒性或任何前述肝臟伴發(fā)病 的風(fēng)險(xiǎn)。由于所述的病理前狀態(tài)，應(yīng)謹(jǐn)慎地使肝臟不暴露于與病理前的酶誘導(dǎo)結(jié)合可能引 起肝毒性或伴發(fā)病的其它因素下。測(cè)定酶誘導(dǎo)的現(xiàn)有方法不能對(duì)化合物的潛在肝毒性效應(yīng)進(jìn)行可靠的診斷(參見 例如 G. G. Gibson 和 P. Skett 2001，藥物代謝導(dǎo)論(Introduction toDrug Metabolism)， 第 3 章藥物代謝的誘導(dǎo)和抑制(Induction andlnhibition of Drug Metabolism), 第 3 版，Nelson Thornes Publishers, Cheltenham, UK ；Ε. Μ. Bomhard 等人 1998，毒 理學(xué)(Toxicology) 131 :73-91 ；A. Lahoz 等人 2008，當(dāng)前藥物代謝(Current Drug Metabolism)9 :12-19).然而，如果考慮到目前為止肝毒性為藥物退出市場(chǎng)的最常見的原 因，則酶誘導(dǎo)和隨后潛在的肝毒性的重要性可能變得更明顯。而且，在歐洲共同體中任何產(chǎn)業(yè)中使用的化合物例如現(xiàn)在將需要符合REACH(化 學(xué)品注冊(cè)、評(píng)價(jià)禾口授權(quán)(Registration, Evaluation andAuthorisation of Chemicals))。 應(yīng)理解，應(yīng)將化合物誘導(dǎo)肝毒性的潛在性認(rèn)為是化合物的高危險(xiǎn)性，并且因此，僅當(dāng)遵守高 安全標(biāo)準(zhǔn)時(shí)所述化合物才可用于有限的應(yīng)用。目前尚無(wú)以有效和可靠的方式評(píng)估誘導(dǎo)肝酶的化合物的毒理學(xué)性質(zhì)的靈敏和特 異的方法，然而，這樣的方法將是非常受歡迎的。
因此，可以將本發(fā)明隱含的技術(shù)問題視為提供符合前述需要的工具和方法。所述 技術(shù)問題被在權(quán)利要求書中表征且在下文進(jìn)行描述的實(shí)施方案解決。因此，本發(fā)明涉及診斷肝酶誘導(dǎo)的方法，該方法包括(a)在疑似表現(xiàn)出肝酶誘導(dǎo)的雄性受試者的測(cè)試樣品中測(cè)定至少1種優(yōu)選至少5 種下列分析物的量硬脂酸(C18:0)、半乳糖、二十四烷酸(以4:0)、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸 (CM:1)、3-和5-甲氧基鞘氨醇、膽固醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)、l，2-二油酰 基-sn-甘油基-3-磷脂?；?L-絲氨酸、二十碳五烯酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)，或者 在疑似表現(xiàn)出肝酶誘導(dǎo)的雌性受試者的測(cè)試樣品中測(cè)定至少1種優(yōu)選至少5種下列分析 物的量甘油、棕櫚酸(C16:0)、亞油酸(C18:順式[9，12]2)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸 (C20 :順式_[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22 順式[4，7，10，13，16，19]6)、膽固醇、 磷酸甘油酯、半乳糖、二十四烷酸(C24:0)、十二醇、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、肌醇 (my0-h0Sit0l)-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(CM: 1)、γ-亞麻酸(C18 順式[6， 9，12]3)、3_和5-甲氧基鞘氨醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18:2，C20:4)、磷脂酰膽堿(C18:0/ C18:》，和(b)將在步驟(a)中測(cè)定的量與參考值進(jìn)行比較，據(jù)此診斷肝酶誘導(dǎo)。本文所用的術(shù)語(yǔ)“磷脂酰膽堿(C18 0/C18 2) ”指的是優(yōu)選以含有C18 0脂肪酸單 元和C18:2脂肪酸單元的組合的甘油磷酰膽堿的和參數(shù)(sumparameter)為特征的分子種 類(molecular species)。離子化種類的質(zhì)荷比(m/z)為786. 6Da (+/-0. 3Da)。優(yōu)選的裂 解圖在下文

圖1中顯示。本文所用的術(shù)語(yǔ)“ 1，2- 二油?；?sn-甘油基_3_磷脂?；鵢L_絲氨酸”指的是優(yōu) 選以含有碳總數(shù)為36和雙鍵總數(shù)為1的脂肪酸單元的甘油磷酰膽堿的和參數(shù)為特征的分 子種類。離子化種類的質(zhì)荷比(m/z)為788.6Da(+/-0.3Da)。本文所用的術(shù)語(yǔ)“磷脂酰膽堿(C18 0/C22 6) ”指的是優(yōu)選以含有C18 0脂肪酸單 元和C22:6脂肪酸單元的組合的甘油磷酰膽堿的和參數(shù)為特征的分子種類。離子化種類的 質(zhì)荷比(m/z)為834. 6Da(+/"0. 3Da)。優(yōu)選的裂解圖在下文圖2中顯示。根據(jù)本發(fā)明提到的表述“用于診斷的方法”意指該方法基本上由前述步驟組成或 可能還包括其他步驟。然而，應(yīng)理解，在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述方法為在活體外進(jìn)行的方 法，即不是在人體或動(dòng)物體上實(shí)施的方法。本文所用的診斷指的是評(píng)估受試者患有疾病的 可能性。如本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解的，這種評(píng)估，盡管優(yōu)選對(duì)100%的待診斷受試者是正確 的，但通常不可能是100%正確的。然而，該術(shù)語(yǔ)要求統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著份額的受試者能夠被鑒 定為患有疾病或具有患病傾向。份額是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著性能夠由本領(lǐng)域技術(shù)人員使用 各種熟知的統(tǒng)計(jì)評(píng)價(jià)工具(例如置信區(qū)間的測(cè)定、P-值測(cè)定、魏爾希檢驗(yàn)(WELCH-test)、 曼-懷二氏檢驗(yàn)(Mann-Whitney test)等)立即測(cè)定。具體內(nèi)容可見于Dowdy和Wearden， 研究統(tǒng)計(jì)學(xué)(Statisticsfor Research)，John Wiley&Sons，紐約 1983 中。優(yōu)選的置信區(qū) 間為至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%。ρ-值優(yōu)選為0. 2、 0. 1、0· 05。根據(jù)本發(fā)明的診斷包括相關(guān)疾病或其癥狀的監(jiān)控、確認(rèn)和分類。監(jiān)控涉及記錄已 診斷的疾病例如用來(lái)分析疾病的進(jìn)展、特定治療對(duì)疾病進(jìn)展的影響或者在疾病期間或在成 功治療疾病后出現(xiàn)的并發(fā)癥。確認(rèn)涉及加強(qiáng)或證實(shí)對(duì)已使用其它指示物或標(biāo)記物進(jìn)行的診斷。分類涉及根據(jù)癥狀的強(qiáng)度或類型將診斷分到不同的種類中。與肝酶誘導(dǎo)有關(guān)的一 些疾病或狀況可能伴隨著其它代謝變化。而且，分類還優(yōu)選包括根據(jù)本發(fā)明的方法將待檢 測(cè)的化合物就作用方式歸類。具體來(lái)說，本發(fā)明的方法能夠測(cè)定化合物的特殊的作用方式， 化合物的這種作用方式是未知的。這優(yōu)選通過比較表示所述化合物的生物標(biāo)記物(即生物 標(biāo)記物特征(profile))的已測(cè)定分析物與作為參考的已知作用方式的化合物的生物標(biāo)記 物特征來(lái)實(shí)現(xiàn)。作用方式的分類使得能夠更可靠地評(píng)估化合物的酶誘導(dǎo)性質(zhì)，因?yàn)榛衔?的分子靶點(diǎn)被鑒定。由于所述的鑒定，可以考慮影響肝酶誘導(dǎo)的其它參數(shù)。本文所用的術(shù)語(yǔ)“肝酶誘導(dǎo)”或“酶誘導(dǎo)”指的是一種病理前狀態(tài)，其中肝 臟中的代謝酶和解毒酶在活性和豐度方面與在種群中發(fā)現(xiàn)的正常值的上限相比顯 著增加。更優(yōu)選，誘導(dǎo)的酶包括至少細(xì)胞色素P450酶、烷氧基試鹵靈-0-脫乙基酶 (Alkoxyresorufin-O-Deethylase)、4_羥基聯(lián)苯基-UDP-葡糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶和/或4_甲基 傘形酮-UDP-葡糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶。優(yōu)選地，肝酶誘導(dǎo)為肝毒性及其伴隨的疾病或病癥(更 優(yōu)選肝細(xì)胞壞死、肝炎、脂肪變性、肝硬化、磷脂質(zhì)病、膽汁淤積、膽管炎)的預(yù)兆。前述疾 病和病癥的癥狀和臨床體征對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是熟知的，且詳細(xì)地描述在H. Marquardt, S. G. Schafer, R. O.McClelIan，F(xiàn). Welsch (eds.)，“毒理學(xué)(Toxicology) " % 13 章肝臟 (The Liver)，1999，學(xué)術(shù)出版社，倫敦。當(dāng)單獨(dú)分析時(shí)，待在本發(fā)明的方法中測(cè)定的每種分析物也適用于診斷本文中提到 的疾病或病癥。然而，根據(jù)本發(fā)明發(fā)現(xiàn)至少5種不同分析物的組合進(jìn)一步加強(qiáng)診斷，因?yàn)槊?種分析物對(duì)于診斷為明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)上的獨(dú)立等值預(yù)測(cè)因子。而且，對(duì)于肝毒性的特異性也 顯著增加因?yàn)槠渌M織對(duì)標(biāo)記物豐度的影響被抗衡。對(duì)特定的肝酶誘導(dǎo)化合物種類的優(yōu)選 標(biāo)記物組合為在下面表1和表2中顯示的那些。應(yīng)理解，除了由至少5種上述分析物組成的組外，在本發(fā)明的方法中優(yōu)選還測(cè)定 其它分析物。其它分析物也優(yōu)選選自前述的組中。換句話說，優(yōu)選地，在本發(fā)明的方法中測(cè) 定前述組中的至少6種、至少7種、至少8種、至少9種或全部分析物。這些分析物的額外 的測(cè)定更進(jìn)一步加強(qiáng)根據(jù)本發(fā)明的方法得到的結(jié)果。而且，此外還可以測(cè)定其它分析物或 代謝產(chǎn)物(即在前述的組中未明確敘述的代謝產(chǎn)物)或生物標(biāo)記物(例如酶)。優(yōu)選地， 根據(jù)本發(fā)明方法測(cè)定的其它參數(shù)為總的細(xì)胞色素P450含量、烷氧基試鹵靈-0-脫乙基酶、 4-羥基聯(lián)苯基-UDP-葡糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶或4-甲基傘形酮-UDP-葡糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶。在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，雄性樣品中的至少一種分析物選自由下面物質(zhì)構(gòu)成的 組硬脂酸(C18:0)、二十四烷酸(以4:0)、山崳酸(C22:0)、膽固醇和二十碳五烯酸。在一 種更優(yōu)選的實(shí)施方案中，對(duì)所有前述分析物進(jìn)行測(cè)定。然而，還優(yōu)選考慮，在待根據(jù)本發(fā)明測(cè)定的至少5種分析物的組中，1種、2種、3種 或4種分析物來(lái)自前述的優(yōu)選分析物的組，而剩余的分析物為如本文其它地方指出的用于 雄性樣品的分析物。因此，如果待根據(jù)本發(fā)明測(cè)定的5種分析物的優(yōu)選組的第1種分析物為硬脂 酸(C18:0)，則剩余的4種分析物選自下列分析物半乳糖、二十四烷酸(以4:0)、山崳酸 (C22:0)、神經(jīng)酸(C24:l)、3-和5-甲氧基鞘氨醇、膽固醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18:0/ C18:2)U,2- 二油酰基-sn-甘油基_3_磷脂?；?L-絲氨酸、二十碳五烯酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)。如果第1種和第2種分析物為硬脂酸(C18:0)和二十四烷酸(以4:0)，則剩余的3 種分析物選自半乳糖、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(C24:l)、3-和5-甲氧基鞘氨醇、膽固醇、 蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18 0/C18:2),1,2- 二油?；?sn-甘油基_3_磷脂?；?L-絲氨酸、 二十碳五烯酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)。如果第1種、第2種和第3種分析物為硬脂酸(C18:0)、二十四烷酸(C24:0)和山崳 酸(C22:0)，則剩余的2種分析物選自半乳糖、神經(jīng)酸(C24:l)、3-和5-甲氧基鞘氨醇、膽 固醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18 0/C18:2),1,2- 二油?；?sn-甘油基-3-磷脂?；?L-絲 氨酸、二十碳五烯酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)。如果第1種、第2種、第3種和第4種分析物為硬脂酸(C18:0)、二十四烷酸 (C24:0)、山崳酸(C22:0)和膽固醇，則剩余的一種分析物選自半乳糖、神經(jīng)酸(C24:l), 3-和5-甲氧基鞘氨醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)、l，2-二油?；?sn-甘油 基-3-磷脂酰基-L-絲氨酸、二十碳五烯酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)。在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，雌性中的至少1種分析物選自甘油、棕櫚酸 (C16:0)、亞油酸(C18 順式[9，12]2)、硬脂酸(C180)、花生四烯酸(C20:順式-[5，8，11， 14]4)、膽固醇、二十四烷酸(以4:0)、花生酸(C20:0)和山崳酸(C22:0)。在一個(gè)甚至更優(yōu) 選的實(shí)施方案中，對(duì)所有前述6種分析物進(jìn)行測(cè)定。然而，優(yōu)選考慮，在待根據(jù)本發(fā)明測(cè)定 的至少5種分析物的組中，1種、2種、3種或4種分析物來(lái)自前述的優(yōu)選分析物的組，而剩余 的分析物為如本文其它地方指出的用于雌性樣品的分析物。然而，還優(yōu)選考慮，在待根據(jù)本發(fā)明測(cè)定的至少5種分析物的組中，1種、2種、3種 或4種分析物來(lái)自前述的優(yōu)選分析物的組，而剩余的分析物為如本文其它地方指出的用于 雄性樣品的分析物。因此，如果待根據(jù)本發(fā)明測(cè)定的5種分析物的優(yōu)選組的第1種分析物為甘油，則 剩余4種分析物選自下列分析物棕櫚酸(C16:0)、亞油酸(C18:順式[9，12]2)、硬脂酸 (C18:0)、花生四烯酸(C20 :順式_[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22 順式W，7，10， 13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、半乳糖、二十四烷酸(以4:0)、十二醇、十七酸(C17:0)、 花生酸(C20:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(C24:l), Y -亞麻酸(C18 順式W，9，12];3)、3-和5-甲氧基鞘氨醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18:2，C20:4)、磷脂酰膽堿 (C18:0/C18:2)。如果第1種和第2種分析物為甘油和棕櫚酸(C16:0)，則剩余3種分析物選自 亞油酸(C18 順式[9，12]2)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸(C20 順式_[5，8，11，14]4)、 二十二碳六烯酸(C22:順式W，7，10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、半乳糖、二十四烷 酸(C24:0)、十二醇、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、 神經(jīng)酸(C24:l), Y-亞麻酸(C18 順式[6，9，12]3)、3_和5-甲氧基鞘氨醇、蘇糖酸、磷脂 酰膽堿(C18:2，C20:4)、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)。如果第1種、第2種和第3種分析物為甘油、棕櫚酸(C16:0)和亞油酸(C18 順式 [9，12]2)，則剩余的兩種分析物選自硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸(C20:順式-[5，8，11， 14]4)、二十二碳六烯酸(C22 順式[4,7,10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、半乳糖、 二十四烷酸(C24:0)、十二醇、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(以4:1)、γ-亞麻酸(C18 順式[6，9，12]3)、3_和5-甲氧基鞘氨醇、蘇糖 酸、磷脂酰膽堿(C18:2，C20:4)、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)。如果第1種、第2種、第3種和第4種分析物為甘油、棕櫚酸(C16:0)、亞油酸(C18 順式[9,12] 和硬脂酸(C18:0)，則剩余的一種分析物選自花生四烯酸(C20 順式-[5， 8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22 順式[4,7,10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、半乳 糖、二十四烷酸(C24:0)、十二醇、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳 酸(C22:0)、神經(jīng)酸(以4:1)、γ-亞麻酸(C18 順式[6，9，12]3)、3_和5-甲氧基鞘氨醇、蘇 糖酸、磷脂酰膽堿(C18:2，C20:4)、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)。本文所用的分析物指的是至少一分子特定分析物直到多分子所述的特定分析物。 應(yīng)進(jìn)一步理解，分析物組意指多種化學(xué)上不同的分子，其中對(duì)于每種分析物可能存在至少 一個(gè)分子直到許多分子。根據(jù)本發(fā)明的分析物包括所有種類的有機(jī)或無(wú)機(jī)化合物，包括由 生物材料(例如有機(jī)體)包含的那些化合物。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的分析物為小分子化合 物。更優(yōu)選地，在多種分析物的情況下，應(yīng)理解每種分析物表示一種代謝產(chǎn)物，并且多種代 謝產(chǎn)物表示一個(gè)代謝組(metabolome)。代謝組為在特定時(shí)間和特定條件下由有機(jī)體、器官、 組織或細(xì)胞包含的代謝產(chǎn)物的集合。代謝產(chǎn)物為小分子化合物，例如代謝途徑的酶的底物、這些途徑的中間體或由代 謝途徑得到的產(chǎn)物。代謝途徑為本領(lǐng)域中熟知的，并可能在物種之間有所變化。優(yōu)選地，所 述的途徑包括至少檸檬酸循環(huán)、呼吸鏈、糖酵解、糖原異生、磷酸己糖途徑、氧化磷酸戊糖途 徑、脂肪酸的生成和β-氧化、尿素循環(huán)、氨基酸生物合成途徑、蛋白質(zhì)降解途徑(例如蛋白 酶體(proteasomal)降解)、氨基酸降解途徑、下列物質(zhì)的生物合成或降解脂類、聚酮化合 物(包括例如黃酮類和異黃酮類)、類異戊二烯類(包括例如萜類、留醇類、留體類、類胡蘿
卜素類)、碳水化合物、苯丙素類(phenylpropanoids)及其衍生物、生物堿類(alcaloids)、 苯型烴類(benzenoids)、吲哚類、吲哚-硫化合物、紫菜堿類、激素類、維生素類、輔因子(例 如輔基或電子載體)、硫代葡糖酸鹽類、嘌呤類、嘧啶類、核苷類、核苷酸類和相關(guān)分子(例 如tRNAs、microRNAs (miRNA)或mRNAs)。因此，小分子化合物代謝產(chǎn)物優(yōu)選由下列種類的 化合物組成醇類、烷烴類、烯烴類、炔烴類、芳香化合物、酮類、醛類、羧酸類、酯類、胺類、亞 胺類、酰胺類、氰化物、氨基酸類、肽類、硫醇類、硫酯類、磷酸酯類、硫酸酯類、硫醚類、亞砜 類、醚類或前述化合物的組合或衍生物。代謝產(chǎn)物中的小分子可能是正常細(xì)胞功能、器官功 能或動(dòng)物生長(zhǎng)、發(fā)育或健康所需要的初級(jí)代謝產(chǎn)物。而且，小分子代謝產(chǎn)物還包括具有基本 生態(tài)學(xué)功能的次級(jí)代謝產(chǎn)物，例如致使有機(jī)體適應(yīng)它所處的環(huán)境的代謝產(chǎn)物。而且，代謝產(chǎn) 物不限于所述的初級(jí)和次級(jí)代謝產(chǎn)物，且進(jìn)一步包括人工小分子化合物。所述的人工小分 子化合物來(lái)源于外源性提供的小分子，這些小分子由有機(jī)體處理或吸收，但不為上面所定 義的初級(jí)或次級(jí)代謝產(chǎn)物。例如，人工小分子化合物可以是通過動(dòng)物的代謝途徑獲自藥物 的代謝產(chǎn)物。而且，代謝產(chǎn)物進(jìn)一步包括肽類、寡肽類、多肽類、寡核苷酸類和聚核苷酸類， 例如RNA或DNA。更優(yōu)選地，代謝產(chǎn)物具有的分子量為50Da (道爾頓)-30，OOODa,最優(yōu)選小 于 30，OOODa、小于 20，OOODa、小于 15，OOODa、小于 10，OOODa、小于 8，OOODa、小于 7，OOODa, 小于 6，OOODa、小于 5，OOODa、小于 4，OOODa、小于 3，OOODa、小于 2，OOODa、小于 1，OOODa、小 于500Da、小于300Da、小于200Da、小于lOODa。但是，優(yōu)選地，代謝產(chǎn)物具有的分子量為至 少50Da。最優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的代謝產(chǎn)物具有的分子量為50Da直到1，500Da。
根據(jù)本發(fā)明所提到的分析物為通過純化和/或測(cè)定方法而來(lái)獲自天然存在的代 謝產(chǎn)物的分子種類。在一些情況下，分析物是相同的。然而在其它情況下，分析物是其化學(xué) 衍生物。雖然如此，應(yīng)理解分析物的出現(xiàn)必然能夠得出存在代謝產(chǎn)物的結(jié)論。本文所用的術(shù)語(yǔ)“測(cè)試樣品”指的是用來(lái)根據(jù)本發(fā)明的方法診斷肝酶誘導(dǎo)的樣品。 所述的測(cè)試樣品為生物樣品。來(lái)自生物來(lái)源的樣品(即生物樣品)通常包含多種代謝產(chǎn) 物。待在本發(fā)明的方法中使用的優(yōu)選的生物樣品為來(lái)自體液(優(yōu)選血液、血漿、血清、唾液、 膽汁、尿液或腦脊髓液)的樣品或例如通過活組織檢查來(lái)源于細(xì)胞、組織或器官(優(yōu)選來(lái)源 于肝臟)的樣品。更優(yōu)選地，樣品為血液、血漿或血清樣品，最優(yōu)選為血漿樣品。生物樣品 來(lái)源于本文其它地方說明的受試者。獲得前述不同類型生物樣品的技術(shù)為本領(lǐng)域熟知的。 例如，血液樣品可以通過采血獲得，而組織或器官樣品可以例如通過活組織檢查獲得。前述樣品優(yōu)選在它們用于本發(fā)明方法之前被預(yù)處理。如在下文更詳細(xì)的描述，所 述的預(yù)處理可能包括釋放或分離化合物或除去過量的材料或廢棄物所需要的處理。適當(dāng) 的技術(shù)包括離心、萃取、分級(jí)處理(fractioning)、超濾、跟隨過濾的蛋白質(zhì)沉淀和化合物純 化和/或富集。而且，進(jìn)行其它預(yù)處理以便以適合進(jìn)行化合物分析的形式或濃度提供化合 物。例如，如果在本發(fā)明的方法中使用氣-質(zhì)聯(lián)用色譜法，則需要在進(jìn)行所述的氣相色譜法 之前將化合物進(jìn)行衍生。適當(dāng)?shù)暮捅匾念A(yù)處理取決于用于實(shí)施本發(fā)明方法的工具，且為 本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的。如前文所述的預(yù)處理的樣品還包含在本發(fā)明所用的術(shù)語(yǔ)“樣品” 中。本文所用的術(shù)語(yǔ)“受試者”涉及動(dòng)物，優(yōu)選涉及哺乳動(dòng)物例如小鼠、大鼠、豚鼠、兔、 倉(cāng)鼠、豬、羊、犬、貓、馬、猴或牛，還優(yōu)選涉及人。更優(yōu)選地，受試者為嚙齒類動(dòng)物，最優(yōu)選為 大鼠?？赡軕?yīng)用本發(fā)明方法進(jìn)行診斷的其它動(dòng)物為魚、鳥或爬行動(dòng)物。優(yōu)選地，所述的受試 者與疑似能夠誘導(dǎo)肝酶的化合物接觸或已經(jīng)與疑似能夠誘導(dǎo)肝酶的化合物接觸。已經(jīng)與疑 似誘導(dǎo)肝酶的化合物接觸的受試者可能例如為用于例如化合物的毒性篩選實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)用 動(dòng)物(例如大鼠)。疑似已與能夠誘導(dǎo)肝酶的化合物接觸的受試者可能還為待診斷用于選 擇適當(dāng)?shù)闹委煹氖茉囌?。?yōu)選地，在本文中使用的能夠誘導(dǎo)肝酶的化合物為苯巴比妥鈉、多 氯聯(lián)苯12M、五氯苯、β-紫羅蘭酮、乙苯或乙烯菌核利(Vinclozoline)。本文中所用的術(shù)語(yǔ)“測(cè)定......量”指的是測(cè)定所述的至少5種分析物中每種分
析物的至少一種特征性特征。根據(jù)本發(fā)明的特征性特征為表征分析物的物理和/或化學(xué)性 質(zhì)(包括生化性質(zhì))的特征。這些性質(zhì)包括例如分子量、粘度、密度、電荷、自旋、旋光度、顏 色、熒光、化學(xué)發(fā)光、元素組成、化學(xué)結(jié)構(gòu)、與其它化合物反應(yīng)的能力、在生物讀出系統(tǒng)中引 發(fā)反應(yīng)(例如誘導(dǎo)報(bào)告基因)的能力等。所述性質(zhì)的值可以作為特征性特征，并能夠根據(jù) 本領(lǐng)域熟知的技術(shù)進(jìn)行測(cè)定。而且，特征性特征可以是通過標(biāo)準(zhǔn)操作(例如，數(shù)學(xué)計(jì)算例如 乘法、除法或?qū)?shù)微積分)衍生自分析物的物理和/或化學(xué)性質(zhì)的值的任何特征。最優(yōu)選 地，至少一種特征性特征使得能夠進(jìn)行分析物及其量的測(cè)定和/或化學(xué)鑒別。相應(yīng)地，特征 值優(yōu)選還包含與得到特征值的代謝產(chǎn)物的豐度有關(guān)的信息。例如，代謝產(chǎn)物的特征值可以 是質(zhì)譜中的一個(gè)峰。這樣的峰含有代謝產(chǎn)物的特征性信息(即m/z (質(zhì)荷比)信息)以及 與該分析物在樣品中的豐度(即它的量)有關(guān)的強(qiáng)度值。如前文所討論的，可以優(yōu)選對(duì)待根據(jù)本發(fā)明方法測(cè)定的分析物組中的每種分析物 進(jìn)行定量或半定量測(cè)定。對(duì)于定量測(cè)定，基于對(duì)上文提到的特征性特征測(cè)定的值，對(duì)分析物的絕對(duì)量或準(zhǔn)確量進(jìn)行測(cè)定，或?qū)Ψ治鑫锏南鄬?duì)量進(jìn)行測(cè)定。在不能或不應(yīng)測(cè)定分析物的 準(zhǔn)確量的情況下可以測(cè)定相對(duì)量。在所述的情況下，可以測(cè)定分析物出現(xiàn)的量相對(duì)于包含 第二種量的所述代謝產(chǎn)物的第二種樣品是擴(kuò)大了還是縮小了。因此，定量分析分析物還包 括時(shí)常提到的分析物的半定量分析。而且，在本發(fā)明方法中所用的測(cè)定優(yōu)選包括在前文提到的分析步驟之前進(jìn)行化合 物分離步驟。優(yōu)選地，所述的化合物分離步驟得到樣品包含的分析物的時(shí)間分辨分離。因 此，待根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選使用的用于分離的適當(dāng)技術(shù)包括所有色譜分離技術(shù)例如液相色譜 法(LC)、高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜法(GC)、薄層色譜法、分子排阻色譜法或親和色 譜法。這些技術(shù)為本領(lǐng)域熟知的，并能夠被本領(lǐng)域技術(shù)人員立即應(yīng)用。最優(yōu)選地，LC和/ 或GC為本發(fā)明方法使用的色譜技術(shù)。用于代謝產(chǎn)物的這種測(cè)定的適當(dāng)設(shè)備為本領(lǐng)域熟知 的。優(yōu)選地，使用質(zhì)譜法，尤其是氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MQ、液相色譜-質(zhì)譜法(LC-MS)、 直接輸注質(zhì)譜法或傅里葉變換-離子回旋共振(ion-cyclotrone-resonance)-質(zhì)譜法 (FT-ICR-MS)、毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜法(CE-MS)、高效液相色譜法-質(zhì)譜法聯(lián)用(HPLC-MS)、 四級(jí)桿質(zhì)譜法、任何串聯(lián)質(zhì)譜(例如MS-MS或MS-MS-MQ、電感耦合等離子體質(zhì)譜法 (ICP-MQ、熱解質(zhì)譜法(Py-MQ、離子遷移率質(zhì)譜法或飛行時(shí)間質(zhì)譜法(TOF)。最優(yōu)選地，如 下文詳述的那樣使用LC-MS和/或GC-MS。所述的技術(shù)在例如Nissen，色譜雜志A (Journal of Chromatography Α)，703，1995 :37-57, US 4，540，884 或 US 5，397，894 中公開，因此將 其公開內(nèi)容引入作為參考。作為質(zhì)譜技術(shù)的替代技術(shù)或者除了質(zhì)譜技術(shù)外，可以使用下列 技術(shù)進(jìn)行化合物測(cè)定核磁共振(NMR)、磁共振成像(MRI)、傅里葉變換紅外分析(FT-IR)、 紫外(UV)光譜法、折射指數(shù)(RI)、熒光檢測(cè)、放射化學(xué)檢測(cè)、電化學(xué)檢測(cè)、光散射(LS)、散射 拉曼光譜或火焰離子化檢測(cè)(FID)。這些技術(shù)為本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的，并可立即應(yīng)用。本 發(fā)明的方法優(yōu)選由自動(dòng)化進(jìn)行輔助。例如，樣品處理或預(yù)處理可以由機(jī)器人自動(dòng)完成。數(shù) 據(jù)處理和比較優(yōu)選由適當(dāng)?shù)挠?jì)算機(jī)程序和數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行輔助。前文所述的自動(dòng)化容許以高通 量方法使用本發(fā)明的方法。而且，分析物還能夠由特異性化學(xué)或生物測(cè)定法進(jìn)行測(cè)定。所述的測(cè)定法包含允 許特異性地檢測(cè)樣品中的分析物的工具。優(yōu)選地，所述的工具基于分析物與其它化合物反 應(yīng)的能力或它在生物讀出系統(tǒng)中引發(fā)反應(yīng)(例如誘導(dǎo)報(bào)告基因)的能力而能夠特異性地識(shí) 別分析物的化學(xué)結(jié)構(gòu)或能夠特異性地鑒別分析物。能夠特異性地識(shí)別分析物的化學(xué)結(jié)構(gòu) 的工具優(yōu)選是抗體或與化學(xué)結(jié)構(gòu)特異性相互作用的其它蛋白質(zhì)(例如受體或酶)。特異性 抗體，例如可以采用代謝產(chǎn)物作為抗原根據(jù)本領(lǐng)域熟知的方法獲得。本文提到的抗體包括 多克隆抗體和單克隆抗體，以及其片段，例如能夠結(jié)合抗原或半抗原的Fv、Fab和F(ab)2片 段。本發(fā)明還包括人源化的雜交抗體，其中表現(xiàn)出想要的抗原-特異性的非人供體抗體的 氨基酸序列與人受體抗體的序列結(jié)合。而且，還包含單鏈抗體。供體序列通常包括至少供 體的結(jié)合抗原的氨基酸殘基，但同樣可以包含供體抗體的其它結(jié)構(gòu)和/或功能相關(guān)的氨基 酸殘基。這些雜交體(hybrids)可以通過本領(lǐng)域熟知的一些方法進(jìn)行制備。能夠特異性識(shí) 別分析物的適當(dāng)?shù)牡鞍踪|(zhì)優(yōu)選為與分析物或代謝產(chǎn)物的代謝轉(zhuǎn)化有關(guān)的酶。所述的酶或可 以使用分析物作為底物或可以將底物轉(zhuǎn)化成分析物。而且，所述的抗體可以用作生成特異 性識(shí)別分析物的寡肽的基礎(chǔ)。這些寡肽例如包含對(duì)于所述分析物的酶結(jié)合域或結(jié)合口袋。 適當(dāng)?shù)幕诳贵w和/或酶的測(cè)定法可以是RIA (放射性免疫測(cè)定)、ELISA (酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)、夾心酶標(biāo)免疫試驗(yàn)、電化學(xué)發(fā)光夾心免疫測(cè)定(ECLIA)、解離放大鑭系熒光免疫測(cè)定 (DELFIA)或固相免疫試驗(yàn)。而且，還可以基于分析物與其它化合物反應(yīng)的能力(即通過特 異性化學(xué)反應(yīng))來(lái)識(shí)別分析物。此外，由于代謝產(chǎn)物在生物讀出系統(tǒng)中引發(fā)反應(yīng)的能力可 以在樣品中測(cè)定代謝產(chǎn)物。當(dāng)讀數(shù)表明樣品中包含的分析物的存在和/或量時(shí)將檢測(cè)生物 反應(yīng)。生物反應(yīng)可以為例如基因表達(dá)的誘導(dǎo)或細(xì)胞或有機(jī)體的表型反應(yīng)。術(shù)語(yǔ)“參考值(reference) ”指的是能夠與肝酶誘導(dǎo)相關(guān)的分析物組中的每一種分 析物的特征性特征的值。這些參考結(jié)果優(yōu)選從來(lái)源于已經(jīng)與苯巴比妥鈉、多氯聯(lián)苯12M、五 氯苯、β-紫羅蘭酮、乙苯或乙烯菌核利接觸的受試者的樣品中獲得。只要化合物是生物可 用的，則可通過各自局部或全身施用方式使受試者與所述化合物接觸。對(duì)于分析物的量，可 以如上文所述的那樣測(cè)定參考結(jié)果。或者，但還優(yōu)選地，參考結(jié)果可以從來(lái)源于未與苯巴比 妥鈉、多氯聯(lián)苯1254、五氯苯、紫羅蘭酮、乙苯或乙烯菌核利接觸的受試者或在肝酶誘 導(dǎo)以及更優(yōu)選還有其它疾病或病癥方面為健康受試者的樣品中獲得。而且，就來(lái)源于包含 待研究的受試者的一群個(gè)體的分析物組中的每種分析物的相對(duì)量或絕對(duì)量來(lái)說，參考值還 優(yōu)選可以為計(jì)算的參考值，最優(yōu)選為平均值或中位值。然而，應(yīng)理解用于測(cè)定計(jì)算參考值的 待研究受試者的群體優(yōu)選或由明顯健康的受試者(即未處理的)組成或包含大量明顯健康 的受試者，該數(shù)量足夠大以至于能在統(tǒng)計(jì)學(xué)上對(duì)抗由于測(cè)試受試者在所述群體中的存在引 起的顯著的平均值或中位值變化?？梢园凑毡疚钠渌胤秸f明的那樣測(cè)定所述的群體中的 個(gè)體的分析物的絕對(duì)量或相對(duì)量。怎樣計(jì)算合適的參考值(優(yōu)選平均值或中位值)為本領(lǐng) 域中熟知的。前面提到的受試者的群體應(yīng)包含多個(gè)受試者，優(yōu)選至少5、10、50、100、1，000 或10，000個(gè)受試者。應(yīng)理解待根據(jù)本發(fā)明方法診斷的受試者和所述的多個(gè)受試者中的受 試者為相同種類。更優(yōu)選地，參考結(jié)果即分析物的至少一種特征性特征的值將存儲(chǔ)在適當(dāng)?shù)臄?shù)據(jù)存 儲(chǔ)介質(zhì)(例如數(shù)據(jù)庫(kù))中，因此也可用于將來(lái)的診斷。術(shù)語(yǔ)“比較”指的是評(píng)估上文詳述的測(cè)定的結(jié)果(即分析物的定性或定量測(cè)定的 結(jié)果)與參考結(jié)果是相同或相似還是不同的。在參考結(jié)果從來(lái)源于已與苯巴比妥鈉、多氯聯(lián)苯12Μ、五氯苯、β-紫羅蘭酮、乙 苯或乙烯菌核利接觸的受試者的樣品中獲得的情況下，可以基于從測(cè)試樣品獲得的試驗(yàn)結(jié) 果和前述參考結(jié)果之間的一致性或相似性程度，即基于就前述分析物來(lái)講的相同的或相似 的定性或定量組成，來(lái)診斷肝酶誘導(dǎo)。如果特征性特征的值和在定量測(cè)定情況下的強(qiáng)度值 都是相同的，則測(cè)試樣品的結(jié)果和參考結(jié)果是相同的。如果特征性特征的值是相同的但強(qiáng) 度值是不同的，則所述結(jié)果是相似的。這種不同優(yōu)選是不顯著的，且其特征在于強(qiáng)度值在至 少參考值的第1和第99百分位數(shù)之間、第5和第95百分位數(shù)之間、第10和第90百分位數(shù) 之間、第20和第80百分位數(shù)之間、第30和第70百分位數(shù)之間、第40和第60百分位數(shù)之 間的區(qū)間內(nèi)。參考值的第50、第60、第70、第80、第90或第95百分位數(shù)。在參考結(jié)果從未與苯巴比妥鈉、多氯聯(lián)苯12Μ、五氯苯、β-紫羅蘭酮、乙苯或乙 烯菌核利接觸的受試者獲得的情況下，可以基于從測(cè)試樣品獲得的試驗(yàn)結(jié)果和前述參考結(jié) 果的差異(即關(guān)于前述分析物的定性或定量組成的差異)來(lái)診斷肝酶誘導(dǎo)。如果使用如 上文說明的計(jì)算參考值，則上述同樣適用。差異可能為分析物的絕對(duì)量或相對(duì)量增加(有 時(shí)稱為分析物的向上調(diào)節(jié)；還參見實(shí)施例)或者所述量之一降低或分析物的可檢測(cè)量消失(有時(shí)稱為分析物的向上調(diào)節(jié)；也參見實(shí)施例)。優(yōu)選地，所述相對(duì)量或絕對(duì)量的差異是顯 著的，即在參考值的第45和第55百分位數(shù)之間、第40和第60百分位數(shù)之間、第30和第70 百分位數(shù)之間、第20和第80百分位數(shù)之間、第10和第90百分位數(shù)之間、第5和第95百分 位數(shù)之間、第1和第99百分位數(shù)之間的區(qū)間之外。優(yōu)選地，分析物的量與參考值相比差異如下所示(i)在雄性樣品中硬脂酸 (C18:0)、半乳糖、二十四烷酸(C24:0)、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(以4:1)、3_和5-甲氧基 鞘氨醇、膽固醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)、1，2_ 二油?；?sn-甘油基_3_磷脂 ?；?L-絲氨酸、二十碳五烯酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)全部增加；和(ii)在雌性受 試者樣品中甘油、棕櫚酸(C16:0)、亞油酸(C18:順式[9，12]2)、硬脂酸(C18:0)、花生四 烯酸(C20 :順式_[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22 順式 W，7，10，13，16，19]6)、膽固 醇、磷酸甘油酯、半乳糖、二十四烷酸(以4:0)、十二醇、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、肌 醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(C24:l)、γ-亞麻酸(C18 順式W，9，12] 3)、3_和 5-甲氧基鞘氨醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18:2，C20:4)、磷脂酰膽堿(C180/C182)全部增 加。對(duì)于本說明書中提到的特定分析物，相對(duì)量的變化(即“倍數(shù)”變化)的優(yōu)選值或變化 種類(即導(dǎo)致更高或更低相對(duì)量和/或絕對(duì)量的“向上”調(diào)節(jié)或“向下”調(diào)節(jié))在下文實(shí)施 例中表明。優(yōu)選通過自動(dòng)化輔助進(jìn)行比較。例如，可以使用適當(dāng)?shù)陌糜趦煞N不同數(shù)據(jù)集 合(data set)(例如，包含特征性特征的值的數(shù)據(jù)集合)比較的算法的計(jì)算機(jī)程序。這些 計(jì)算機(jī)程序和算法為本領(lǐng)域熟知的。盡管如上所述，還可以手動(dòng)進(jìn)行比較?？梢詫⒂糜跍y(cè)定分析物的前述方法應(yīng)用到設(shè)備中。本文所用的設(shè)備應(yīng)包含至少 前述的工具。而且，該設(shè)備優(yōu)選進(jìn)一步包含用于比較和評(píng)價(jià)分析物的檢測(cè)的特征性特征和 (還優(yōu)選的)測(cè)定的信號(hào)強(qiáng)度的工具。設(shè)備的工具優(yōu)選工作上(operatively)彼此相連接。 怎樣以工作方式連接工具將取決于設(shè)備中包括的工具的類型。例如，當(dāng)應(yīng)用自動(dòng)定性或定 量測(cè)定代謝產(chǎn)物的工具時(shí)，為了便于診斷，由所述的自動(dòng)工作工具獲得的數(shù)據(jù)可以通過例 如計(jì)算機(jī)程序進(jìn)行處理。優(yōu)選地，在這種情況下工具由單一設(shè)備包含。所述的設(shè)備可能因 此包含用于分析物的分析單元和用來(lái)處理用于診斷的結(jié)果數(shù)據(jù)的計(jì)算機(jī)單元?；蛘撸?dāng)使 用例如試紙的工具來(lái)測(cè)定分析物時(shí)，用于診斷的工具可以包含對(duì)照試紙或表格，其將測(cè)定 的結(jié)果數(shù)據(jù)分配到已知伴隨肝酶誘導(dǎo)的結(jié)果數(shù)據(jù)或如上文所討論的健康受試者所示的結(jié) 果數(shù)據(jù)中。優(yōu)選的設(shè)備為無(wú)需專科臨床醫(yī)師的特殊知識(shí)即可以應(yīng)用的設(shè)備，例如試紙或僅 需裝載樣品的電子設(shè)備?；蛘撸梢詫⒂糜跍y(cè)定分析物的方法應(yīng)用到包含優(yōu)選工作上彼此連接的數(shù)個(gè)設(shè)備 的系統(tǒng)中。具體來(lái)說，工具必須以允許實(shí)施上文詳述的本發(fā)明方法的方式連接。因此，本文 所用的工作上連接的優(yōu)選意為功能性連接的。根據(jù)待用于本發(fā)明的系統(tǒng)的工具，可能通過 采用允許在所述的工具之間進(jìn)行數(shù)據(jù)傳輸?shù)墓ぞ?例如，玻璃纖維電纜和其它用于高通量 數(shù)據(jù)傳輸?shù)碾娎|)連接每種工具和其它工具來(lái)對(duì)所述的工具進(jìn)行功能性連接。盡管如此， 本發(fā)明還考慮工具之間的無(wú)線數(shù)據(jù)傳遞，例如經(jīng)由LAN(無(wú)線LAN，ff-LAN)。優(yōu)選的系統(tǒng)包 含用于測(cè)定分析物的工具。本文所用的用于測(cè)定分析物的工具包含用于分離分析物的工具 (例如色譜設(shè)備)和用于分析物測(cè)定的工具(例如質(zhì)譜設(shè)備)。適當(dāng)?shù)脑O(shè)備已在上文進(jìn)行 詳細(xì)描述。待用在本發(fā)明系統(tǒng)中的用于化合物分離的優(yōu)選工具包括色譜設(shè)備，更優(yōu)選進(jìn)行液相色譜法、HPLC和/或氣相色譜法的設(shè)備。用于化合物測(cè)定的優(yōu)選設(shè)備包括質(zhì)譜設(shè)備，更 優(yōu)選GC-MS、LC-MS、直接輸注質(zhì)譜、FT-ICR-MS、CE-MS, HPLC-MS,四極桿質(zhì)譜、串聯(lián)質(zhì)譜(包 括MS-MS或MS-MS-MQ、I CP-MS, Py-MS或T0F。分離工具和測(cè)定工具優(yōu)選彼此偶聯(lián)。更優(yōu) 選地，在本說明書其它地方詳述的本發(fā)明的系統(tǒng)中使用LC-MS和/或GC-MS。應(yīng)進(jìn)一步包含 用于比較和/或分析獲自用于測(cè)定分析物的工具的結(jié)果的工具。用于比較和/或分析結(jié)果 的工具可以包含至少一個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)和用于比較結(jié)果的應(yīng)用計(jì)算機(jī)程序。前述系統(tǒng)和設(shè)備的優(yōu) 選實(shí)施方案也在下文進(jìn)行詳述。有利的是，在本發(fā)明進(jìn)行的研究中已發(fā)現(xiàn)至少5種前述分析物的組的量為肝酶誘 導(dǎo)的生物標(biāo)記，并因此為肝毒性的預(yù)兆。方法的特異性和準(zhǔn)確度將通過對(duì)所有前述分析物 進(jìn)行測(cè)定來(lái)進(jìn)一步提高。關(guān)于這些特定的分析物的代謝組的定量和/或定性組成的變化預(yù) 示肝酶誘導(dǎo)。目前用于診斷肝酶誘導(dǎo)的形態(tài)學(xué)參數(shù)、生理學(xué)參數(shù)以及生物化學(xué)參數(shù)與本發(fā) 明提供的生物標(biāo)記測(cè)定相比特異性和敏感性均較差。由于本發(fā)明，能夠更有效地和更可靠 地評(píng)估化合物的肝酶誘導(dǎo)性質(zhì)。而且，基于前述的發(fā)現(xiàn)，對(duì)用于治療或改善肝酶誘導(dǎo)的藥物 的篩選試驗(yàn)是可行的。原則上，本發(fā)明涉及在雄性受試者樣品中的至少一種優(yōu)選至少五種下列分析物 硬脂酸(C18:0)、半乳糖、二十四烷酸(C24:0)、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(以4:1)、3_和 5-甲氧基鞘氨醇、膽固醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)、l，2-二油酰基-sn-甘油 基-3-磷脂?；?L-絲氨酸、二十碳五烯酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)和/或在雌性受 試者樣品中的至少一種優(yōu)選至少5種下列分析物甘油、棕櫚酸(C16:0)、亞油酸(C18 順 式[9，12]2)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸(C20 順式-[5,8,11，14]4)、二十二碳六烯酸 (C22:順式W，7，10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、半乳糖、二十四烷酸(以4:0)、十二 醇、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(C24:l), Y-亞麻酸(C18:順式[6，9，12]3)、3_和5-甲氧基鞘氨醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18:2, C20:4)、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)或用于其檢測(cè)的工具在制備用于診斷肝酶誘導(dǎo)的診斷 設(shè)備或組合物中的用途。除非下文另有說明，上文制定的所有術(shù)語(yǔ)的定義和解釋就實(shí)際情形適用于前述方 法和在下文進(jìn)一步描述的所有其它實(shí)施方案。接著上文，本發(fā)明還考慮測(cè)定化合物能否誘導(dǎo)受試者的肝酶誘導(dǎo)的方法，該方法 包括(a)在已經(jīng)與疑似能夠誘導(dǎo)肝酶誘導(dǎo)的化合物接觸的雄性受試者的樣品中測(cè)定至 少1種優(yōu)選至少5種下列分析物的量硬脂酸(C18:0)、半乳糖、二十四烷酸(以4:0)、山崳 酸(C22:0)、神經(jīng)酸(C24:l)、3-和5-甲氧基鞘氨醇、膽固醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18:0/ C18:2),1,2- 二油酰基-sn-甘油基_3_磷脂?；?L-絲氨酸、二十碳五烯酸、磷脂酰膽堿 (C18 0/C22 6)或者在已經(jīng)與疑似能夠誘導(dǎo)肝酶誘導(dǎo)的化合物接觸的雌性測(cè)試樣品中測(cè)定 至少1種優(yōu)選至少5種下列分析物甘油、棕櫚酸(C16:0)、亞油酸(C18:順式[9，12]2)、 硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸(C20 順式_[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22:順式 [4,7,10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、半乳糖、二十四烷酸(C24:0)、十二醇、十七酸 (C17:0)、花生酸(C20:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(C24:1)、γ -亞麻酸 (C18 順式[6，9，12] 3)、3_和5-甲氧基鞘氨醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18 2、C20 4)、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)；和(b)將在步驟(a)中測(cè)定的量與參考值進(jìn)行比較，據(jù)此測(cè)定化合物誘導(dǎo)肝酶誘導(dǎo) 的能力。在所述方法的優(yōu)選實(shí)施方案中，所述的化合物為選自下列的至少一種化合物苯 巴比妥鈉、多氯聯(lián)苯1254、五氯苯、β-紫羅蘭酮、乙苯或乙烯菌核利。優(yōu)選地，所述的參考值來(lái)源于患有肝酶誘導(dǎo)的受試者或來(lái)源于已經(jīng)與至少一種選 自下列的化合物接觸的受試者苯巴比妥鈉、多氯聯(lián)苯1254、五氯苯、β-紫羅蘭酮、乙苯或 乙烯菌核利。更優(yōu)選地，在測(cè)試樣品中與參考值基本上相同的分析物的量指示肝酶誘導(dǎo)。還優(yōu)選地，所述的參考值來(lái)源于已知未患有肝酶誘導(dǎo)的受試者或來(lái)源于未與至少 一種選自下列的化合物接觸的受試者苯巴比妥鈉、多氯聯(lián)苯1254、五氯苯、β-紫羅蘭酮、 乙苯或乙烯菌核利?；蛘?，還優(yōu)選地，所述的參考值為對(duì)一群受試者的分析物的計(jì)算參考 值。更優(yōu)選地，在測(cè)試樣品中與參考值相比有差異的分析物的量指示肝酶誘導(dǎo)。優(yōu)選的肝酶誘導(dǎo)的指示量在本說明書其它地方公開。本發(fā)明還涉及鑒別用于治療肝酶誘導(dǎo)的物質(zhì)的方法，該方法包括下列步驟(a)在已與疑似能夠治療肝酶誘導(dǎo)的候選物質(zhì)接觸的患有肝酶誘導(dǎo)的雄性受試者 的樣品中測(cè)定至少1種優(yōu)選至少5種下列分析物的量硬脂酸(C18:0)、半乳糖、二十四烷 酸(C24:0)、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(C24:1)、3-和5-甲氧基鞘氨醇、膽固醇、蘇糖酸、磷脂 酰膽堿(C18 0/C18:2),1,2- 二油?；?sn-甘油基_3_磷脂?；?L-絲氨酸、二十碳五烯 酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)，或者在已經(jīng)與疑似能夠治療肝酶誘導(dǎo)的候選物質(zhì)接觸的患 有肝酶誘導(dǎo)的雌性受試者的樣品中測(cè)定至少1種優(yōu)選至少5種下列分析物的量甘油、棕 櫚酸(C16:0)、亞油酸(C18:順式[9，12] 2)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸(C20:順式-[5， 8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22 順式[4,7,10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、半乳 糖、二十四烷酸(C24:0)、十二醇、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳 酸(C22:0)、神經(jīng)酸(以4:1)、γ-亞麻酸(C18 順式[6，9，12]3)、3_和5-甲氧基鞘氨醇、蘇 糖酸、磷脂酰膽堿(C18:2，C20:4)、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)；和(b)將在步驟(a)中測(cè)定的量與參考值進(jìn)行比較，從而鑒別能夠治療肝酶誘導(dǎo)的 物質(zhì)。具體來(lái)說，在鑒別用于治療肝酶誘導(dǎo)的物質(zhì)的方法中，所述的參考值優(yōu)選來(lái)源于 已經(jīng)與至少一種選自下列的化合物接觸的受試者苯巴比妥鈉、多氯聯(lián)苯1254、五氯苯、 β-紫羅蘭酮、乙苯或乙烯菌核利或來(lái)源于患有肝酶誘導(dǎo)的受試者。更優(yōu)選地，測(cè)試樣品中 與參考值有差異的分析物的量提示為可用于治療肝酶誘導(dǎo)的物質(zhì)。具體來(lái)說，對(duì)能夠治療肝酶誘導(dǎo)的物質(zhì)的提示為分析物的量與參考值相比差 異如下所示(i)在雄性樣品中硬脂酸(C18:0)、半乳糖、二十四烷酸(以4:0)、山崳酸 (C22:0)、神經(jīng)酸(C24:l)、3-和5-甲氧基鞘氨醇、膽固醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18:0/ C182)、l，2-二油?；?sn-甘油基-3-磷脂?；?L-絲氨酸、二十碳五烯酸、磷脂酰膽 堿(C18:0/C22:6)都降低和(ii)在雌性受試者的樣品中甘油、棕櫚酸(C16:0)、亞油酸 (C18 順式[9，12]2)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸(C20 順式-[5，8，11，14]4)、二十二 碳六烯酸(C22 順式W，7，10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、半乳糖、二十四烷酸 (C24:0)、十二醇、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(C24:l), Y-亞麻酸(C18:順式[6，9，12]3)、3_和5-甲氧基鞘氨醇、蘇糖酸、磷脂酰 膽堿(C18:2，C20:4)、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)都降低?；蛘?，所述的參考值可以優(yōu)選來(lái)源于未與苯巴比妥鈉、多氯聯(lián)苯1254、五氯苯、 β-紫羅蘭酮、乙苯或乙烯菌核利接觸的受試者或者來(lái)源于已知未患有肝酶誘導(dǎo)的受試者， 或者可以為對(duì)一群受試者中的分析物的計(jì)算參考值。如果使用這種參考值，測(cè)試樣品中與 參考值相同或相似的代謝產(chǎn)物的量指示為可用于治療肝酶誘導(dǎo)的物質(zhì)。術(shù)語(yǔ)“用于治療肝酶誘導(dǎo)的物質(zhì)”指的是可以直接干擾本說明書其它地方提到的 引發(fā)肝酶誘導(dǎo)的生物機(jī)理的化合物。因此，可以調(diào)節(jié)與結(jié)合和/或氧化相關(guān)的酶的活性?；?者，應(yīng)考慮，物質(zhì)可以通過例如調(diào)節(jié)與所述過程相關(guān)的酶或其它因子的表達(dá)來(lái)間接影響這 些活性。待根據(jù)本發(fā)明的方法鑒別的物質(zhì)可以為有機(jī)和無(wú)機(jī)的化學(xué)品，例如小分子、聚核苷 酸類、寡核苷酸類、肽類、多肽類包括抗體或其它人工或生物多聚體。優(yōu)選地，該物質(zhì)適合作 為藥物、前藥或開發(fā)藥物或前藥的先導(dǎo)物。本文意指的治療不僅包括使酶誘導(dǎo)的肝臟病理 前狀態(tài)返回到其中酶在它們的生理豐度和活性范圍內(nèi)(即等于或小于它們正常值的上限) 的生理狀態(tài)，還包括改善，即降低肝臟中的酶誘導(dǎo)。治療應(yīng)優(yōu)選影響接受治療的群體的至少 一顯著群組的個(gè)體，但不必在所有進(jìn)行所述治療的個(gè)體中都成功。應(yīng)理解如果本發(fā)明的方法是用來(lái)鑒別用于肝酶誘導(dǎo)的治療的藥物，或用于化合物 的毒理學(xué)評(píng)估(即測(cè)定化合物能否誘導(dǎo)肝酶誘導(dǎo))，可以基于統(tǒng)計(jì)學(xué)理由對(duì)多個(gè)受試者的 測(cè)試樣品進(jìn)行研究。優(yōu)選地，在這樣的一群組測(cè)試受試者內(nèi)的代謝組應(yīng)當(dāng)盡可能相似，以便 避免例如由待研究的化合物之外的因素引起的差異。待用于所述方法的受試者優(yōu)選為實(shí)驗(yàn) 用動(dòng)物，例如嚙齒類，更優(yōu)選為大鼠。應(yīng)進(jìn)一步理解，所述的實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物優(yōu)選在完成本發(fā)明 的方法后被處死。應(yīng)將群組測(cè)試的所有受試者和參考動(dòng)物保持在相同的條件下，以避免任 何環(huán)境影響差別。提供給這些動(dòng)物的適當(dāng)?shù)臈l件和方法在W02007/014825中進(jìn)行了詳細(xì)描 述。因此將所述的條件引入作為參考。本發(fā)明還涉及數(shù)據(jù)集，其包含下列分析物硬脂酸(C18:0)、半乳糖、二十四烷酸 (以4:0)、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(C24:l)、3-和5-甲氧基鞘氨醇、膽固醇、蘇糖酸、磷脂 酰膽堿(C18 0/C18:2),1,2- 二油?；?sn-甘油基_3_磷脂?；?L-絲氨酸、二十碳五烯 酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)的特征值和/或至少下列分析物甘油、棕櫚酸(C16:0)、 亞油酸(C18 順式[9，12]2)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸(C20 順式_[5，8，11，14]4)、 二十二碳六烯酸(C22:順式W，7，10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、半乳糖、二十四烷 酸(C24:0)、十二醇、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、 神經(jīng)酸(C24:l), Y-亞麻酸(C18 順式[6，9，12]3)、3_和5-甲氧基鞘氨醇、蘇糖酸、磷脂 酰膽堿(C18:2，C20:4)、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)的特征值。術(shù)語(yǔ)“數(shù)據(jù)集(data collection) ”指的是可以在物理和/或邏輯上將其組合到一 起的數(shù)據(jù)的集合。因此，可以將數(shù)據(jù)集應(yīng)用在單一的數(shù)據(jù)存儲(chǔ)介質(zhì)中或應(yīng)用到工作上彼此 連接的物理分離的數(shù)據(jù)存儲(chǔ)介質(zhì)中。優(yōu)選地，通過數(shù)據(jù)庫(kù)方式應(yīng)用數(shù)據(jù)集。因此，本文所用 的數(shù)據(jù)庫(kù)包括在適當(dāng)?shù)拇鎯?chǔ)介質(zhì)中的數(shù)據(jù)集。而且，數(shù)據(jù)庫(kù)優(yōu)選進(jìn)一步包含數(shù)據(jù)庫(kù)管理系 統(tǒng)。數(shù)據(jù)庫(kù)管理系統(tǒng)優(yōu)選為基于網(wǎng)絡(luò)的、分級(jí)的或面向?qū)ο蟮臄?shù)據(jù)庫(kù)管理系統(tǒng)。而且，數(shù)據(jù) 庫(kù)可以為聯(lián)合數(shù)據(jù)庫(kù)或集中數(shù)據(jù)庫(kù)。更優(yōu)選地，數(shù)據(jù)庫(kù)作為分布式(聯(lián)合)系統(tǒng)(例如作 為客戶機(jī)-服務(wù)器-系統(tǒng))進(jìn)行應(yīng)用。更優(yōu)選地，構(gòu)造數(shù)據(jù)庫(kù)以使檢索算法來(lái)比較試驗(yàn)數(shù)據(jù)集合和數(shù)據(jù)集所包含的數(shù)據(jù)集合。具體來(lái)說，通過使用這種算法，能夠檢索數(shù)據(jù)庫(kù)中指示 肝酶誘導(dǎo)的相似或相同的數(shù)據(jù)集合(例如查詢檢索)。因此，如果能夠在數(shù)據(jù)集中鑒別出相 同或相似的數(shù)據(jù)集合，則所述試驗(yàn)數(shù)據(jù)集合與肝酶誘導(dǎo)性質(zhì)相關(guān)。繼而，基于從受試者中獲 得的試驗(yàn)數(shù)據(jù)集合，能夠用從數(shù)據(jù)集中獲得的信息來(lái)診斷肝酶誘導(dǎo)。而且，本發(fā)明涉及包含所述數(shù)據(jù)集的數(shù)據(jù)存儲(chǔ)介質(zhì)。本文所用的術(shù)語(yǔ)“數(shù)據(jù)存儲(chǔ)介質(zhì)”包括基于單個(gè)物理實(shí)體的數(shù)據(jù)存儲(chǔ)介質(zhì)，例如 CD、CD-R0M、硬盤、光存儲(chǔ)介質(zhì)或軟盤。而且，該術(shù)語(yǔ)進(jìn)一步包括由物理分離實(shí)體組成的數(shù)據(jù) 存儲(chǔ)介質(zhì)，所述的物理分離實(shí)體以提供前述的數(shù)據(jù)集的方式(優(yōu)選地，以進(jìn)行查詢檢索的 適當(dāng)方式)工作上彼此連接。本發(fā)明還涉及一種系統(tǒng)，其包含(a)與(b)工作上連接的用于比較樣品的分析物的特征值的工具(b)本發(fā)明的數(shù)據(jù)存儲(chǔ)介質(zhì)。本文所用的術(shù)語(yǔ)“系統(tǒng)”涉及工作上彼此連接的不同工具。所述的工具可以應(yīng)用 在單一的設(shè)備中或可以應(yīng)用于工作上彼此連接的物理分離設(shè)備中。用于比較分析物的特征 值的工具優(yōu)選基于前文提到的比較算法進(jìn)行操作。數(shù)據(jù)存儲(chǔ)介質(zhì)優(yōu)選包含前述數(shù)據(jù)集或數(shù) 據(jù)庫(kù)，其中每一存儲(chǔ)的數(shù)據(jù)集合指示肝酶誘導(dǎo)。因此，本發(fā)明的系統(tǒng)能夠鑒別試驗(yàn)數(shù)據(jù)集合 是否被存儲(chǔ)在數(shù)據(jù)存儲(chǔ)介質(zhì)中的數(shù)據(jù)集所包含。繼而，本發(fā)明的系統(tǒng)可以作為診斷肝酶誘 導(dǎo)的診斷工具進(jìn)行應(yīng)用。在系統(tǒng)的優(yōu)選實(shí)施方案中，包含用于測(cè)定樣品的代謝產(chǎn)物的特征值的工具。術(shù)語(yǔ)“用于測(cè)定分析物的特征值的工具”優(yōu)選涉及用于測(cè)定分析物的前述設(shè)備，例 如質(zhì)譜設(shè)備、NMR設(shè)備或?qū)嵤┓治鑫锏幕瘜W(xué)或生物測(cè)定的設(shè)備。本發(fā)明還包括診斷組合物，該組合物包含至少1種優(yōu)選至少5種下列分析物硬脂 酸(C18:0)、半乳糖、二十四烷酸(C24:0)、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(以4:1)、3_和5-甲氧 基鞘氨醇、膽固醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)、1，2_ 二油酰基-sn-甘油基_3_磷 脂?；?L-絲氨酸、二十碳五烯酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)和/或至少一種優(yōu)選至少5 種下列分析物甘油、棕櫚酸(C16:0)、亞油酸(C18:順式[9，12]2)、硬脂酸(C18:0)、花生 四烯酸(C20 :順式_[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22 順式 W，7，10，13，16，19]6)、膽 固醇、磷酸甘油酯、半乳糖、二十四烷酸(C24:0)、十二醇、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、 肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(C24:l), Y -亞麻酸(C18 順式[6，9，12]3)、 3-和5-甲氧基鞘氨醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18:2，C20:4)、磷脂酰膽堿(C180/C182)或 者用于其測(cè)定的工具。本發(fā)明進(jìn)一步包括診斷設(shè)備，該設(shè)備包含(a)工具，其用于測(cè)定至少1種優(yōu)選至少5種下列分析物硬脂酸(C18:0)、半乳 糖、二十四烷酸(以4:0)、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(C24:l)、3-和5-甲氧基鞘氨醇、膽固醇、 蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18 0/C18:2),1,2- 二油?；?sn-甘油基_3_磷脂酰基-L-絲氨酸、 二十碳五烯酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)的特征值和/或至少1種優(yōu)選至少5種下列分析 物甘油、棕櫚酸(C16:0)、亞油酸(C18 順式[9，12]2)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸(C20 順式-[5,8,11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22 順式[4,7,10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘 油酯、半乳糖、二十四烷酸(C24:0)、十二醇、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(以4:1)、γ-亞麻酸(C18 順式[6，9，12]3)、3_和5-甲氧基 鞘氨醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18:2，C20:4)、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)的特征值；和(b)基于由(a)中的工具測(cè)定的特征值用于診斷肝酶誘導(dǎo)的工具。術(shù)語(yǔ)“診斷工具(means) ”優(yōu)選涉及本說明書中其它地方詳細(xì)說明的診斷設(shè)備、系 統(tǒng)或生物或化學(xué)測(cè)定。表述“用于測(cè)定分析物組的特征值的工具”涉及能夠特異性識(shí)別代謝產(chǎn)物的設(shè)備 或物質(zhì)。適當(dāng)?shù)脑O(shè)備可能是光譜測(cè)定設(shè)備(例如質(zhì)譜)、NMR設(shè)備或用于實(shí)施代謝產(chǎn)物的化 學(xué)或生物測(cè)定的設(shè)備。適當(dāng)?shù)奈镔|(zhì)可以是特異性檢測(cè)代謝產(chǎn)物的化合物。本文所用的檢測(cè) 可以為兩步驟過程，即化合物可以首先特異性地與待檢測(cè)的代謝產(chǎn)物結(jié)合，隨后生成可檢 測(cè)的信號(hào)，例如熒光信號(hào)、化學(xué)發(fā)光信號(hào)(chemiluminescent signals)、放射性信號(hào)等。對(duì) 于可檢測(cè)信號(hào)的生成，可能需要其它化合物，其全部被術(shù)語(yǔ)“用于測(cè)定分析物組的特征值的 工具”所包含。特異性與代謝產(chǎn)物結(jié)合的化合物在本說明書其他地方進(jìn)行詳細(xì)描述，其優(yōu)選 包括酶、抗體、配體、受體或其它生物分子或特異性與分析物結(jié)合的化學(xué)品。上文提到的所有參考文獻(xiàn)也因此就它們整體公開內(nèi)容以及上文說明書中明確提 到的具體公開內(nèi)容引入作為參考。附圖顯示圖1 磷脂酰膽堿(C180/C182)的裂解圖。圖2 磷脂酰膽堿(C180/C226)的裂解圖。下列實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明的目的。無(wú)論如何不應(yīng)將它們解釋為在任何方面限 制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例與肝酶誘導(dǎo)相關(guān)的生物標(biāo)記物對(duì)一組各5只的雄性和雌性大鼠用指明的化合物(參見下表)以10和100mg/kg 體重經(jīng)由管飼法每天一次給藥，持續(xù)28天。含有5只雄性和5只雌性大鼠的其它組作為對(duì) 照。在處理周期開始之前，將供應(yīng)時(shí)62-64天大的動(dòng)物適應(yīng)居住和環(huán)境條件7天。動(dòng)物群 體中的所有動(dòng)物保持在相同的恒定溫度OO-M士3°C )和相同的恒定濕度(30-70% )下。 將動(dòng)物群體中的每只動(dòng)物放在單獨(dú)的籠子中。對(duì)動(dòng)物群體中的動(dòng)物進(jìn)行無(wú)限制地喂養(yǎng)。使 用的食物基本上無(wú)化學(xué)或微生物污染物。也無(wú)限制地提供飲用水。相應(yīng)地，如歐洲飲用水 規(guī)則(European Drinking Water Directive)98/83/E G中規(guī)定的那樣，水中無(wú)化學(xué)和微生 物污染物。照明周期為12小時(shí)光亮接著12小時(shí)黑暗(12小時(shí)光亮，從6:00到18:00 ；12 小時(shí)黑暗，從18:00到6:00)。在第7天、第14天和第觀天的早晨，從空腹麻醉的動(dòng)物中從眶后靜脈叢取血。從 每只動(dòng)物中收集Iml血液，用EDTA作為抗凝劑。將樣品離心以得到血漿。所有血漿樣品用 N2氣氛覆蓋，然后在-80°C下貯存，直到進(jìn)行分析。對(duì)于基于質(zhì)譜的代謝產(chǎn)物側(cè)貌(profiling)分析，萃取血漿樣品，得到極性和非 極性部分。對(duì)于GC-MS分析，將非極性部分在酸性條件下用甲醇進(jìn)行處理得到脂肪酸甲酯。 將兩部分進(jìn)一步用0-甲基-羥胺鹽酸鹽和吡啶進(jìn)行衍生化，將氧代-基團(tuán)轉(zhuǎn)化為0-甲 基肟，隨后在分析前用硅烷化試劑進(jìn)行衍生化。在LC-MS分析中，將兩部分重溶在適當(dāng)?shù)?溶劑混合物中。通過梯度洗脫在反相分離柱上進(jìn)行HPLC。對(duì)于質(zhì)譜檢測(cè)，應(yīng)用代謝組學(xué) (metanomics)專有技術(shù)，其使得靶向和高靈敏度MRM(多重反應(yīng)監(jiān)控)側(cè)貌分析與全篩析并行。綜合性分析驗(yàn)證步驟之后，將每種分析物的數(shù)據(jù)針對(duì)來(lái)自庫(kù)(pool)樣品的數(shù)據(jù) 進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。在整個(gè)方法中平行運(yùn)行這些樣品來(lái)減少方法變異性。通過使用Mudent t-檢 驗(yàn)比較處理組的平均值和各未處理的對(duì)照組的平均值來(lái)測(cè)定對(duì)性別、劑量組和代謝產(chǎn)物特 異的處理組值的顯著性。將標(biāo)準(zhǔn)化處理組值和它們的顯著性注入數(shù)據(jù)庫(kù)中以便進(jìn)行進(jìn)一步 的統(tǒng)計(jì)學(xué)和數(shù)據(jù)挖掘處理。大鼠處理后指示肝酶誘導(dǎo)的血漿代謝產(chǎn)物組的變化在下表中顯示
權(quán)利要求
1.診斷肝酶誘導(dǎo)的方法，該方法包括(a)在疑似患有肝酶誘導(dǎo)的雄性受試者的測(cè)試樣品中測(cè)定至少5種下列分析物的 量硬脂酸(C18:0)、半乳糖、二十四烷酸(C24:0)、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(以4:1)、3_和 5-甲氧基鞘氨醇、膽固醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)、l，2-二油酰基-sn-甘油 基-3-磷脂?；?L-絲氨酸、二十碳五烯酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)，或者在疑似患有肝 酶誘導(dǎo)的雌性受試者的測(cè)試樣品中測(cè)定至少5種下列分析物的量甘油、棕櫚酸(C16:0)、 亞油酸(C18 順式[9，12]2)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸(C20 順式_[5，8，11，14]4)、 二十二碳六烯酸(C22:順式W，7，10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、半乳糖、二十四烷 酸(C24:0)、十二醇、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、 神經(jīng)酸(C24:l), Y-亞麻酸(C18 順式[6，9，12]3)、3_和5-甲氧基鞘氨醇、蘇糖酸、磷脂 酰膽堿(C18:2、C20:4)、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)，和(b)將在步驟(a)中測(cè)定的量與參考值進(jìn)行比較，從而診斷肝酶誘導(dǎo)。
2.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的受試者已經(jīng)與疑似能夠誘導(dǎo)肝酶誘導(dǎo)的化合物 接觸。
3.測(cè)定化合物能否在受試者中誘導(dǎo)肝酶誘導(dǎo)的方法，該方法包括(a)在已經(jīng)與疑似能夠誘導(dǎo)肝酶誘導(dǎo)的化合物接觸的雄性受試者的樣品中測(cè)定至少5 種下列分析物的量硬脂酸(C18:0)、半乳糖、二十四烷酸(以4:0)、山崳酸(C22:0)、神經(jīng) 酸(CM:1)、3-和5-甲氧基鞘氨醇、膽固醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)、l，2-二油 ?；?sn-甘油基-3-磷脂?；?L-絲氨酸、二十碳五烯酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)，或 者在已經(jīng)與疑似能夠誘導(dǎo)肝酶誘導(dǎo)的化合物接觸的雌性的測(cè)試樣品中測(cè)定至少5種下列 分析物的量甘油、棕櫚酸(C16:0)、亞油酸(C18:順式[9，12]2)、硬脂酸(C18:0)、花生四 烯酸(C20 :順式_[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22 順式 W，7，10，13，16，19]6)、膽固 醇、磷酸甘油酯、半乳糖、二十四烷酸(以4:0)、十二醇、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、肌 醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(CM: 1)、γ-亞麻酸(C18 順式[6，9，12] 3)、3_和 5-甲氧基鞘氨醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18:2，C20:4)、磷脂酰膽堿(C180/C182)；和(b)將在步驟(a)中測(cè)定的量與參考值進(jìn)行比較，從而測(cè)定化合物誘導(dǎo)肝酶誘導(dǎo)的能力。
4.權(quán)利要求2或權(quán)利要求3所述的方法，其中所述的化合物為至少一種選自下列的化 合物苯巴比妥鈉、多氯聯(lián)苯1254、五氯苯、β -紫羅蘭酮、乙苯或乙烯菌核利。
5.權(quán)利要求1-4中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述的參考值來(lái)源于(i)患有肝酶誘導(dǎo) 的受試者或(ii)已經(jīng)與至少一種選自下列的化合物接觸的受試者苯巴比妥鈉、多氯聯(lián)苯 1254、五氯苯、β-紫羅蘭酮、乙苯或乙烯菌核利。
6.權(quán)利要求5所述的方法，其中測(cè)試樣品中與參考值基本上相同的分析物的量指示肝 酶誘導(dǎo)。
7.權(quán)利要求1-4中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述的參考值來(lái)源于(i)已知未患有肝 酶誘導(dǎo)的受試者或(ii)未與至少一種選自下列的化合物接觸的受試者苯巴比妥鈉、多氯 聯(lián)苯1254、五氯苯、β-紫羅蘭酮、乙苯或乙烯菌核利。
8.權(quán)利要求1-4中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述的參考值為對(duì)一群受試者的分析物 的計(jì)算參考值。
9.權(quán)利要求7或權(quán)利要求8所述的方法，其中測(cè)試樣品中與參考值相比有差異的分析 物的量指示肝酶誘導(dǎo)。
10.權(quán)利要求7-9中任意一項(xiàng)所述的方法，其中肝酶誘導(dǎo)的指示為與參考值相比分 析物的量具有如下所示差異(i)在雄性樣品中硬脂酸(C18:0)、半乳糖、二十四烷酸 (C24:0)、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(C24:1),3- ^P 5-甲氧基鞘氨醇、膽固醇、蘇糖酸、磷脂 酰膽堿(C18 0/C18:2),1,2- 二油?；?sn-甘油基_3_磷脂?；?L-絲氨酸、二十碳五烯 酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)的量均增加和(ii)在雌性受試者的樣品中甘油、棕櫚酸 (C16:0)、亞油酸(C18 順式[9，12]2)、硬脂酸(C180)、花生四烯酸(C20 順式_[5，8，11， 14]4)、二十二碳六烯酸(C22 順式[4,7,10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、半乳糖、 二十四烷酸(C24:0)、十二醇、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸 (C22:0)、神經(jīng)酸(C24:l)、γ-亞麻酸(C18 順式[6，9，12] 3)、3_和5-甲氧基鞘氨醇、蘇糖 酸、磷脂酰膽堿(C18:2，C20:4)、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)的量均增加。
11.鑒別用于治療肝酶誘導(dǎo)的物質(zhì)的方法，該方法包括下列步驟(a)在已經(jīng)與疑似能夠治療肝酶誘導(dǎo)的候選物質(zhì)接觸的患有肝酶誘導(dǎo)的雄性受試者的 樣品中測(cè)定至少5種下列分析物的量硬脂酸(C18:0)、半乳糖、二十四烷酸(以4:0)、山崳 酸(C22:0)、神經(jīng)酸(C24:l)、3-和5-甲氧基鞘氨醇、膽固醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18:0/ C18:2),1,2- 二油酰基-sn-甘油基_3_磷脂?；?L-絲氨酸、二十碳五烯酸、磷脂酰膽堿 (C18:0/C22:6)，或者在已經(jīng)與疑似能夠治療肝酶誘導(dǎo)的候選物質(zhì)接觸的患有肝酶誘導(dǎo)的 雌性受試者的樣品中測(cè)定至少5種下列分析物的量甘油、棕櫚酸(C16:0)、亞油酸(C18: 順式[9，12]2)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸化20:順式-[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸 (C22 順式W，7，10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、半乳糖、二十四烷酸(以4:0)、十二 醇、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(C24:l), Y-亞麻酸(C18:順式[6，9，12]3)、3_和5-甲氧基鞘氨醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18:2, C20:4)、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)；和(b)將在步驟(a)中測(cè)定的量與參考值進(jìn)行比較，從而鑒別能夠治療肝酶誘導(dǎo)的物質(zhì)。
12.權(quán)利要求11所述的方法，其中所述的參考值來(lái)源于(i)患有肝酶誘導(dǎo)的受試者或 ( )已經(jīng)與至少一種選自下列的化合物接觸的受試者苯巴比妥鈉、多氯聯(lián)苯1254、五氯 苯、紫羅蘭酮、乙苯或乙烯菌核利。
13.權(quán)利要求12所述的方法，其中測(cè)試樣品中與參考值相比有差異的分析物的量指示 物質(zhì)能夠治療肝酶誘導(dǎo)。
14.權(quán)利要求11-13中任意一項(xiàng)所述的方法，其中能夠治療肝酶誘導(dǎo)的物質(zhì)的指示為 與參考值相比分析物的量具有如下所示差異(i)在雄性樣品中硬脂酸(C18:0)、半乳糖、 二十四烷酸(以4:0)、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(C24:l)、3-和5-甲氧基鞘氨醇、膽固醇、蘇 糖酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)、1，2_ 二油?；?sn-甘油基_3_磷脂?；?L-絲氨酸、 二十碳五烯酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)的量均降低和(ii)在雌性受試者的樣品中甘 油、棕櫚酸(C16:0)、亞油酸(C18:順式[9，12]2)、硬脂酸(C180)、花生四烯酸(C20 順 式-[5,8,11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22 順式[4,7,10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油 酯、半乳糖、二十四烷酸(C24:0)、十二醇、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、肌醇_2_單磷酸 酯、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(以4:1)、γ-亞麻酸(C18 順式[6，9，12]3)、3_和5-甲氧基鞘氨醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18:2，C20:4)、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)的量均降低。
15.權(quán)利要求11所述的方法，其中所述的參考值來(lái)源于(i)已知未患有肝酶誘導(dǎo)的受 試者或(ii)未與至少一種選自下列的化合物接觸的受試者苯巴比妥鈉、多氯聯(lián)苯1254、 五氯苯、β-紫羅蘭酮。
16.權(quán)利要求11所述的方法，其中所述的參考值為對(duì)一群受試者中的分析物的計(jì)算的 參考值。
17.權(quán)利要求15或權(quán)利要求16所述的方法，其中測(cè)試樣品中與參考值基本上相同的分 析物的量指示物質(zhì)能夠治療肝酶誘導(dǎo)。
18.權(quán)利要求1-21中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述的肝酶誘導(dǎo)指示至少一種選自 下列的病癥或疾病的預(yù)兆肝細(xì)胞壞死、肝炎、脂肪變性、肝硬化、磷脂質(zhì)病、膽汁淤積、膽管 炎、肝靜脈血栓形成、肝腫瘤。
19.權(quán)利要求1-18中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述的測(cè)定分析物組包括質(zhì)譜法 (MS)。
20.權(quán)利要求19所述的方法，其中所述的質(zhì)譜法為液相色譜(LC)-MS或氣相色譜 (GC)-MS0
21.權(quán)利要求1-20中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述的樣品為所述受試者的體液樣品。
22.權(quán)利要求21所述的方法，其中所述的體液為血液。
23.權(quán)利要求1-22中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述的受試者為哺乳動(dòng)物。
24.一種數(shù)據(jù)集，該數(shù)據(jù)集包含至少5種下列分析物硬脂酸(C18:0)、半乳糖、二十四 烷酸(以4:0)、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(C24:1),3-^P 5-甲氧基鞘氨醇、膽固醇、蘇糖酸、磷 脂酰膽堿(C18 0/C18:2),1,2- 二油?；?sn-甘油基_3_磷脂酰基-L-絲氨酸、二十碳五 烯酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)的特征值和/或至少下列分析物甘油、棕櫚酸(C16:0)、 亞油酸(C18 順式[9，12]2)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸(C20 順式_[5，8，11，14]4)、 二十二碳六烯酸(C22:順式W，7，10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、半乳糖、二十四烷 酸(C24:0)、十二醇、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、 神經(jīng)酸(C24:l), Y-亞麻酸(C18 順式[6，9，12]3)、3_和5-甲氧基鞘氨醇、蘇糖酸、磷脂 酰膽堿(C18:2，C20:4)、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)的特征值。
25.包含權(quán)利要求23所述的數(shù)據(jù)集的數(shù)據(jù)存儲(chǔ)介質(zhì)。
26.—種系統(tǒng)，其包含(a)與(b)工作上連接的用于比較樣品的分析物的特征值的工具(b)權(quán)利要求25所述的數(shù)據(jù)存儲(chǔ)介質(zhì)。
27.權(quán)利要求沈所述的系統(tǒng)，該系統(tǒng)進(jìn)一步包含用于測(cè)定樣品中分析物的特征值的工具。
28.—種診斷組合物，其包含至少5種下列分析物硬脂酸(C18:0)、半乳糖、二十四 烷酸(以4:0)、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(C24:l)、3-和5-甲氧基鞘氨醇、膽固醇、蘇糖酸、 磷脂酰膽堿(C18 0/C18:2),1,2- 二油?；?sn-甘油基_3_磷脂酰基-L-絲氨酸、二十碳 五烯酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)和/或至少下列分析物甘油、棕櫚酸(C16:0)、亞油 酸(C18 順式[9，12]2)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸(C20 順式-[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22 順式W，7，10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、半乳糖、二十四烷酸 (C24:0)、十二醇、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、神 經(jīng)酸(C24:l), Y-亞麻酸(C18:順式[6，9，12]3)、3_和5-甲氧基鞘氨醇、蘇糖酸、磷脂酰 膽堿(C18:2，C20:4)、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)或用于其測(cè)定的工具。
29.—種診斷設(shè)備，其包含(a)工具，該工具用于測(cè)定至少5種下列分析物硬脂酸(C18:0)、半乳糖、二十四烷酸 (以4:0)、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(C24:l)、3-和5-甲氧基鞘氨醇、膽固醇、蘇糖酸、磷脂 酰膽堿(C18 0/C18:2),1,2- 二油?；?sn-甘油基_3_磷脂酰基-L-絲氨酸、二十碳五烯 酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)的特征值和/或至少下列分析物甘油、棕櫚酸(C16:0)、 亞油酸(C18 順式[9，12]2)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸(C20 順式_[5，8，11，14]4)、 二十二碳六烯酸(C22:順式W，7，10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、半乳糖、二十四烷 酸(C24:0)、十二醇、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、 神經(jīng)酸(C24:l), Y-亞麻酸(C18 順式[6，9，12]3)、3_和5-甲氧基鞘氨醇、蘇糖酸、磷脂 酰膽堿(C18:2，C20:4)、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)的特征值；和(b)基于由(a)中的工具測(cè)定的特征值用來(lái)診斷肝酶誘導(dǎo)的工具。
30.至少5種下列分析物硬脂酸(C18:0)、半乳糖、二十四烷酸(以4:0)、山崳酸 (C22:0)、神經(jīng)酸(CM:1)、3-和5-甲氧基鞘氨醇、膽固醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18:0/ C18:2)U,2- 二油?；?sn-甘油基_3_磷脂?；?L-絲氨酸、二十碳五烯酸、磷脂酰膽堿 (C18:0/C22:6)和/或至少5種下列分析物甘油、棕櫚酸(C16:0)、亞油酸(C18 順式[9， 12]2)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸化20:順式-[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22 順 式W，7，10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、半乳糖、二十四烷酸(CM:0)、十二醇、十七 酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(C24:l), γ-亞 麻酸(C18:順式W，9，12]3)、3-和5-甲氧基鞘氨醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C182，C204)、 磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)在制備用來(lái)診斷肝酶誘導(dǎo)的診斷設(shè)備或組合物中的用途。
31.用來(lái)測(cè)定至少5種下列分析物硬脂酸(C18:0)、半乳糖、二十四烷酸(以4:0)、 山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(CM:1)、3-和5-甲氧基鞘氨醇、膽固醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿 (C18 0/C18:2),1,2- 二油?；?sn-甘油基-3-磷脂?；?L-絲氨酸、二十碳五烯酸、磷脂 酰膽堿(C18:0/C22:6)和/或至少5種下列分析物甘油、棕櫚酸(C16:0)、亞油酸(C18 順式[9，12]2)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸化20:順式-[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸 (C22 順式W，7，10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、半乳糖、二十四烷酸(以4:0)、十二 醇、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、神經(jīng)酸(C24:l), Y-亞麻酸(C18:順式[6，9，12]3)、3_和5-甲氧基鞘氨醇、蘇糖酸、磷脂酰膽堿(C18:2, C20:4)、磷脂酰膽堿(C18:0/C18:2)的工具在制備用來(lái)診斷肝酶誘導(dǎo)的診斷設(shè)備或組合物 中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及化合物風(fēng)險(xiǎn)分級(jí)的毒理學(xué)評(píng)估領(lǐng)域。具體來(lái)說，本發(fā)明涉及診斷誘導(dǎo)肝酶的化合物的病理前作用的方法。其還涉及測(cè)定化合物能否在受試者中通過酶誘導(dǎo)對(duì)肝臟表現(xiàn)出病理前作用的方法和鑒別用來(lái)治療肝酶誘導(dǎo)的病理前作用的藥物的方法。而且，本發(fā)明涉及包含至少5種分析物的特征值的數(shù)據(jù)集、包含所述數(shù)據(jù)集的數(shù)據(jù)存儲(chǔ)介質(zhì)以及診斷肝酶誘導(dǎo)的病理前作用的系統(tǒng)和設(shè)備。最后，本發(fā)明還涉及分析物組或用于其測(cè)定的工具在制備用來(lái)診斷受試者肝酶誘導(dǎo)的病理前作用的診斷設(shè)備或組合物中的用途。對(duì)于每種性別，公開了不同的代謝組模式，即不同組別的分析物。肝酶誘導(dǎo)標(biāo)記物主要選自游離脂肪酸，但還包括各種磷脂酰膽堿、半乳糖、3-和5-甲氧基鞘氨醇、膽固醇、蘇糖酸、1，2-二油酰基-sn-甘油基-3-磷脂?；?L-絲氨酸、甘油、磷酸甘油酯、十二醇、肌醇-2-單磷酸酯。
文檔編號(hào)G01N33/66GK102105793SQ200980129418
公開日2011年6月22日 申請(qǐng)日期2009年5月25日 優(yōu)先權(quán)日2008年5月28日
發(fā)明者A·普奧考汀, B·V·拉文茲韋, E·法比安, E·萊博爾德, 巴勒莫 庫(kù)尼亞 G·科埃略, H·坎普, J·C·威爾莫, M·M·赫羅爾德, R·洛塞, T·B·沃克, V·施特勞斯, W·梅勒特 申請(qǐng)人:巴斯夫歐洲公司