專利名稱：甘參膠囊的成分檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種甘參膠囊的成分檢測方法。
背景技術(shù)：
傳統(tǒng)中成藥檢測方法只能定性說明中成藥的成分。高效和定量的檢測中成藥的成分，是現(xiàn)代中藥產(chǎn)業(yè)急需解決的技術(shù)問題。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決高效和定量的檢測中成藥的成分含量，本發(fā)明采取液相色譜技術(shù)結(jié)合薄層鑒別技術(shù)，提供能定性、定量檢測中成藥的成分含量的方法。本發(fā)明采用高效液相色譜檢測甘參膠囊成藥的炙甘草中甘草酸的含量，并定性鑒別人參、丹參、苦參的主要成分，從而為確保甘參膠囊成藥成分的質(zhì)量穩(wěn)定、安全可靠，提供質(zhì)量控制更科學和更高效方法。
本發(fā)明的目的是提供一種對甘參膠囊藥品的成分含量進行有效的定性、定量檢測方法。
實現(xiàn)本發(fā)明的主要技術(shù)方案是1.甘參膠囊藥品的觀察與薄層鑒別(1)取甘參膠囊藥品觀察，內(nèi)容物為棕黃色至棕褐色粉末；氣微，味苦；(2)取甘參膠囊藥品內(nèi)容物2g，加氯仿40ml，加熱回流1小時，棄去氯仿液，藥渣揮盡溶劑，加水0.5ml攪勻潤濕后，加水飽和正丁醇10ml，超聲處理30分鐘，離心，吸取上清液，加3倍量正丁醇飽和氨試液，搖勻，放置分層，取正丁醇層液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。
取人參皂苷Re、Rg1對照品，加甲醇制成每1ml含Re、Rg1各2mg的混合溶液，用薄層色譜法，吸取上述供試品溶液和對照品溶液兩種溶液各5ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(65∶35∶10)4℃放置過夜的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰。
檢測品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取甘參膠囊藥品內(nèi)容物4g，加甲醇50ml，超聲30min，放冷，濾過，濾液揮干，殘渣加水10ml使溶解，用氯仿提取3次，每次10ml，氯仿液棄去；水液用乙醚提取3次，每次10ml，合并乙醚液，揮干乙醚，藥渣加1ml甲醇溶解，作為供試品溶液。
另取原兒茶醛對照品，加甲醇使成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。采用薄層色譜法，吸取上述兩種溶液各5ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-丙酮-甲酸(60∶5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2，4-二硝基苯肼溶液，熱風吹至顯色清晰。
檢測品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；(4)取甘參膠囊藥品內(nèi)容物2g，加氨水1ml潤濕，加氯仿30ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液。
另取苦參堿對照品，加氯仿制成使每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。采用薄層色譜法，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-醋酸乙酯-丙酮-氨水(1.5∶4∶3∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液，熱風吹至顯色清晰。
檢測品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
2.含量測定(1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-2％醋酸溶液(36∶64)為流動相；檢測波長為250nm。理論板數(shù)按甘草酸峰計算應(yīng)不低于4000。
(2)取甘草酸單銨鹽對照品約10mg，精密稱定，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；再精密吸取2ml置10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液。
(3)取甘參膠囊藥品內(nèi)容物0.5g，精密稱定，置索氏提取器中，加乙醚50ml，加熱回流1小時，棄去乙醚液，藥渣揮盡乙醚置錐形瓶中，加甲醇50ml，超聲處理(功率250W，頻率20kHz)1小時，放冷，濾過，提取液揮干，加水5ml使溶解，通過D101大孔吸附樹脂柱(內(nèi)徑1cm，長20cm)，以水50ml洗脫，棄去水液。再用20％乙醇60ml洗脫，棄去20％乙醇洗脫液，繼用80％乙醇70ml洗脫，收集洗脫液，置100ml量瓶中，加80％乙醇至刻度，搖勻，即得供試品溶液。
(4)分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得對照品溶液與供試品溶液的甘草酸(C42H62O16)含量。甘參膠囊成品每粒(0.4g/粒)含甘草以甘草酸(C42H62O16)計不得少于3.0mg即為合格品。
上述步驟并不需要按照先后順序進行。而且同時還可以進行常規(guī)檢測，該甘參膠囊成品為膠囊劑，符合膠囊劑項下有關(guān)的各項規(guī)定(中國藥典2000年版一部附錄I L)。經(jīng)本發(fā)明的方法檢測，符合以上條件的甘參膠囊成品為合格品。
本發(fā)明定性和定量檢測了甘參膠囊成品的成分含量，有利于對甘參膠囊成品的質(zhì)量的科學和有效控制。
具體實施例方式
實施例1一種甘參膠囊成品的成分含量檢測方法，包含如下步驟和條件1.甘參膠囊成品的觀察與薄層鑒別(1)取甘參膠囊成品觀察，內(nèi)容物為棕黃色至棕褐色粉末；氣微，味苦；(2)取甘參膠囊成品內(nèi)容物2g，加氯仿40ml，加熱回流1小時，棄去氯仿液，藥渣揮盡溶劑，加水0.5ml攪勻潤濕后，加水飽和正丁醇10ml，超聲處理30分鐘，離心，吸取上清液，加3倍量正丁醇飽和氨試液，搖勻，放置分層，取正丁醇層液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。
另取人參皂苷Re、Rg1對照品，加甲醇制成每1ml含Re、Rg1各2mg的混合溶液。采用薄層色譜法，吸取上述兩種供試品溶液和對照品溶液各5ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(65∶35∶10)4℃放置過夜的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰。
檢測品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取甘參膠囊藥品內(nèi)容物4g，加甲醇50ml，超聲30min，放冷，濾過，濾液揮干，殘渣加水10ml使溶解，用氯仿提取3次，每次10ml，氯仿液棄去；水液用乙醚提取3次，每次10ml，合并乙醚液，揮干乙醚，藥渣加1ml甲醇溶解，作為供試品溶液。
另取原兒茶醛對照品，加甲醇使成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。采用薄層色譜法，吸取上述兩種溶液各5ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-丙酮-甲酸(60∶5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2，4-二硝基苯肼溶液，熱風吹至顯色清晰。
檢測品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；(4)取甘參膠囊藥品內(nèi)容物2g，加氨水1ml潤濕，加氯仿30ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液。
另取苦參堿對照品，加氯仿制成使每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。甘參膠囊藥品，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-醋酸乙酯-丙酮-氨水(1.5∶4∶3∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液，熱風吹至顯色清晰。
檢測品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
2.含量測定(1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-2％醋酸溶液(36∶64)為流動相；檢測波長為250nm。理論板數(shù)按甘草酸峰計算應(yīng)不低于4000。
(2)取甘草酸單銨鹽對照品約10mg，精密稱定，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；再精密吸取2ml置10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液。
(3)取甘參膠囊藥品內(nèi)容物0.5g，精密稱定，置索氏提取器中，加乙醚50ml，加熱回流1小時，棄去乙醚液，藥渣揮盡乙醚置錐形瓶中，加甲醇50ml，超聲處理(功率250W，頻率20kHz)1小時，放冷，濾過，提取液揮干，加水5ml使溶解，通過D101大孔吸附樹脂柱(內(nèi)徑1cm，長20cm)，以水50ml洗脫，棄去水液。再用20％乙醇60ml洗脫，棄去20％乙醇洗脫液，繼用80％乙醇70ml洗脫，收集洗脫液，置100ml量瓶中，加80％乙醇至刻度，搖勻，即得供試品溶液。
(4)分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得對照品溶液與供試品溶液的甘草酸(C42H62O16)含量，甘參膠囊成品每粒(0.4g/粒)含甘草以甘草酸(C42H62O16)計不得少于3.0mg即為合格品。。
上述步驟并不需要按照先后順序進行。
權(quán)利要求
1.一種甘參膠囊的成分含量檢測方法，其特征在于，包含如下步驟和條件(A).甘參膠囊藥品的觀察與薄層鑒別(1)取甘參膠囊藥品觀察，內(nèi)容物為棕黃色至棕褐色粉末；氣微，味苦；(2)取甘參膠囊藥品內(nèi)容物2g，加氯仿40ml，加熱回流1小時，棄去氯仿液，藥渣揮盡溶劑，加水0.5ml攪勻潤濕后，加水飽和正丁醇10ml，超聲處理30分鐘，離心，吸取上清液，加3倍量正丁醇飽和氨試液，搖勻，放置分層，取正丁醇層液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；取人參皂苷Re、Rg1對照品，加甲醇制成每1ml含Re、Rg1各2mg的混合溶液，用薄層色譜法，吸取上述供試品溶液和對照品溶液兩種溶液各5ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(65∶35∶10)4℃放置過夜的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰；檢測品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取甘參膠囊藥品內(nèi)容物4g，加甲醇50ml，超聲30min，放冷，濾過，濾液揮干，殘渣加水10ml使溶解，用氯仿提取3次，每次10ml，氯仿液棄去；水液用乙醚提取3次，每次10ml，合并乙醚液，揮干乙醚，藥渣加1ml甲醇溶解，作為供試品溶液；另取原兒茶醛對照品，加甲醇使成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；采用薄層色譜法，吸取上述兩種溶液各5ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-丙酮-甲酸(60∶5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2，4-二硝基苯肼溶液，熱風吹至顯色清晰；檢測品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；(4)取甘參膠囊藥品內(nèi)容物2g，加氨水1ml潤濕，加氯仿30ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液；另取苦參堿對照品，加氯仿制成使每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液，采用薄層色譜法，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-醋酸乙酯-丙酮-氨水(1.5∶4∶3∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液，熱風吹至顯色清晰；檢測品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；(B).含量測定(1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-2％醋酸溶液(36∶64)為流動相；檢測波長為250nm；理論板數(shù)按甘草酸峰計算應(yīng)不低于4000；(2)取甘草酸單銨鹽對照品約10mg，精密稱定，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；再精密吸取2ml置10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液；(3)取甘參膠囊藥品內(nèi)容物0.5g，精密稱定，置索氏提取器中，加乙醚50ml，加熱回流1小時，棄去乙醚液，藥渣揮盡乙醚置錐形瓶中，加甲醇50ml，超聲處理(功率250W，頻率20kHz)1小時，放冷，濾過，提取液揮干，加水5ml使溶解，通過D101大孔吸附樹脂柱(內(nèi)徑1cm，長20cm)，以水50ml洗脫，棄去水液，再用20％乙醇60ml洗脫，棄去20％乙醇洗脫液，繼用80％乙醇70ml洗脫，收集洗脫液，置100ml量瓶中，加80％乙醇至刻度，搖勻，即得供試品溶液；(4)分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得對照品溶液與供試品溶液的甘草酸(C42H62O16)含量；甘參膠囊成品每粒(0.4g/粒)含甘草以甘草酸(C42H62O16)計不得少于3.0mg即為合格品。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種甘參膠囊的成分檢測方法。它包含對甘參膠囊中的人參、丹參、苦參的薄層鑒別和炙甘草中甘草酸的含量測定。檢測甘參膠囊的成分含量及解決高效和定量的檢測中成藥的成分含量，本發(fā)明采取液相色譜技術(shù)結(jié)合薄層鑒別技術(shù)，提供能定性、定量檢測中成藥的成分含量的方法。本發(fā)明采用高效液相色譜檢測甘參膠囊成藥的炙甘草中鹽甘草酸的含量，并定性鑒別人參、丹參、苦參的主要成分，從而為確保甘參膠囊成藥成分的質(zhì)量穩(wěn)定、安全可靠，提供質(zhì)量控制更科學和更高效方法。
文檔編號G01N21/25GK1766606SQ20051001727
公開日2006年5月3日 申請日期2005年11月9日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月9日
發(fā)明者劉志強, 李惠琳, 劉淑瑩, 宋鳳瑞, 金東明 申請人:中國科學院長春應(yīng)用化學研究所