一種葛根素的分離純化方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種葛根素的分離純化方法。本發(fā)明提供了一種葛根素的分離純化方法，其包括以下步驟：以乙酸乙酯、正丁醇和水組成的三元溶劑體系為分離溶劑體系，采用高速離心分配色譜法對葛根素提取物進行分離純化得到葛根素即可；所述的高速離心分配色譜法在高速離心分配色譜儀中進行。本發(fā)明的葛根素的分離純化方法步驟簡單、分離時間短、分離能力強、分離到的葛根素純度高（HPLC純度大于99%）、回收率高（大于65%），具有良好的市場開發(fā)前景。
【專利說明】一種葛根素的分離純化方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種葛根素的分離純化方法。
【背景技術】
[0002]葛根為豆科植物葛Pueraria lobata (Wi I Id.) Ohwi的干燥根，習稱野葛，系常用中藥，具有解肌退熱，生津止渴，透疹，升陽止瀉，通經(jīng)活絡，解酒毒之功效。葛根含有多種有效成分，異黃酮類化合物是葛屬植物的主要成分之一，其中葛根素(Puerarin)是本屬植物的主要有效成分。葛根素的藥理作用十分廣泛，具有降血脂，抗炎，抗心律失常、對心肌缺血的保護作用、腎保護、抗氧化、抗缺血再灌注損傷、抗肝缺血再灌注損傷、抗酒精中樞抑制、調控骨代謝、降血糖、利尿等作用。
[0003]隨著葛根素的藥理作用的研究深入，葛根素的分離純化也越來越受到人們的重視。目前葛根素純化方法主要有:大孔吸附樹脂法、柱層析、酸水解有機溶劑萃取法及金屬離子絡合法等。如專利CN1154849A采用正丁醇萃取后經(jīng)三氧化二鋁柱脫色得到純度97%以上的葛根素產(chǎn)品；專利CN1927876A經(jīng)過離子交換大孔樹脂層析再經(jīng)過大孔樹脂層析可以獲得葛根素含量很高的葛根素提取物；專利CN1398872A通過大孔吸附樹脂及硅膠柱層
析可得到高純度葛根素。葛根素的化學結構式如下式所示:
[0004]
【權利要求】
1.一種葛根素的分離純化方法，其特征在于包括以下步驟:以乙酸乙酯、正丁醇和水組成的三元溶劑體系為分離溶劑體系，采用高速離心分配色譜法對葛根素提取物進行分離純化得到葛根素即可；所述的高速離心分配色譜法在高速離心分配色譜儀中進行。
2.如權利要求1所述的葛根素的分離純化方法，其特征在于:所述的高速離心分配色譜儀為廠家為法國Rousselet Robatel，型號為FCPC A或FCPC C的高速離心分配色譜儀。
3.如權利要求1所述的葛根素的分離純化方法，其特征在于:所述的高速離心分配色譜儀的轉速為1800r/min~2300r/min。
4.如權利要求1所述的葛根素的分離純化方法，其特征在于:所述的三元溶劑體系中乙酸乙酯、正丁醇和水的體積比為(3~8):2:(6~10)，優(yōu)選2:1:3。
5.如權利要求1所述的葛根素的分離純化方法，其特征在于:所述的高速離心分配色譜法采用的三元溶劑體系充分混合后分層，取下層溶液為固定相，上層溶液為流動相。
6.如權利要求5所述的葛根素的分離純化方法，其特征在于:所述的固定相和流動相過濾后超聲備用，所述的超聲的頻率為16KHz~28KHz。
7.如權利要求5所述的葛根素的分離純化方法，其特征在于:所述的高速離心分配色譜法，將葛根素提取物溶解于所述的固定相和流動相形成的混合溶液中，過濾后上樣；所述的固定相和流動相形成的混合溶液中所述的流動相與所述的固定相的體積比優(yōu)選1:1~1:5。
8.如權利要求1所述的葛根素的分離純化方法，其特征在于:所述的葛根素提取物為采用普通超聲提取法、循環(huán)超聲提取法或者回流提取法得到的葛根素提取物；所述的葛根素提取物的純度為11%~18%，所述的純度是指葛根素的質量占葛根素提取物總質量的百分比。
9.如權利要求1所述的葛根素的分離純化方法，其特征在于:所述的高速離心分配色譜儀的流速為 2.0mT,/min ~7.0mL/min,優(yōu)選 2.0mT,/min ~3.0mT,/min。
10.如權利要求1所述的葛根素的分離純化方法，其特征在于:所述的高速離心分配色譜儀的上樣濃度為10mg/mL~30mg/mL ;所述的上樣濃度是指葛根素提取物的質量與流動相的體積的比例。
11.如權利要求1所述的葛根素的分離純化方法，其特征在于:所述的 葛根素分離純化方法，包括以下步驟: 步驟1:將三元溶劑體系充分混合后分層，取下層溶液為固定相、上層溶液為流動相；將葛根素提取物溶解于固定相與流動相的混合溶液中，形成葛根素提取物的溶液； 步驟2:高速離心分配色譜儀在descending模式下充滿固定相；轉換成ascending模式，后再將流動相泵入色譜柱；待體系平衡完畢后，由進樣閥注入步驟I中制得的葛根素提取物的溶液，然后根據(jù)檢測器圖譜接收目標組分即可。
12.如權利要求11所述的葛根素的分離純化方法，其特征在于:步驟2中，所述的在高速離心分配色譜儀在descending模式下充滿固定相,在高流速和低轉速下進行,所述的高流速是指流速在5mL/min~10mL/min ;所述的低轉速是指轉速在600r/min~800r/min ； 步驟2中，所述的轉換成ascending模式，后再將流動相泵入色譜柱中，轉換成ascending 模式后提高轉速至 1800r/min ~2300r/min。
【文檔編號】B01D15/10GK103709152SQ201310729209
【公開日】2014年4月9日 申請日期:2013年12月25日 優(yōu)先權日:2013年12月25日
【發(fā)明者】楊義芳, 孫百玲, 謝欣辛 申請人:上海醫(yī)藥工業(yè)研究院, 中國醫(yī)藥工業(yè)研究總院