含胺基的l-薄荷醇類p2y12受體拮抗劑及其用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及心血管疾病治療的藥物領(lǐng)域。具體地講，本發(fā)明涉及對(duì)心血管疾病尤 其是血栓栓塞性疾病具有治療作用的一類含胺基的L-薄荷醇結(jié)構(gòu)的P2Y12受體拮抗劑、其 制備方法，以及在制藥上的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 與發(fā)生血栓形成有關(guān)的醫(yī)學(xué)并發(fā)癥代表一種主要的致死原因。一些與發(fā)展血栓 形成有關(guān)的病理學(xué)實(shí)例包括急性心肌梗塞、不穩(wěn)定型心絞痛和慢性穩(wěn)定型心絞痛、短暫性 缺血發(fā)作、腦血管意外、周圍性血管疾病、先兆子癇和子癇、深部靜脈血栓形成、栓塞（腦栓 塞、肺栓塞、冠狀動(dòng)脈栓塞、腎栓塞等等）、彌散性血管內(nèi)凝血或血栓性血小板減少性紫癜。 在侵入性外科手術(shù)期間和之后仍有發(fā)生血栓形成和再狹窄并發(fā)癥的危險(xiǎn)，所述侵入性外科 手術(shù)如血管成形術(shù)、頸動(dòng)脈內(nèi)膜切除術(shù)、主動(dòng)脈冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)或支架或血管內(nèi)假體 的安置。
[0003] 動(dòng)脈血栓形成可在血管壁損傷或動(dòng)脈粥樣化斑塊破裂后發(fā)生。血小板在這些血栓 形成中發(fā)揮著必要的作用。血小板可通過以下物質(zhì)激活：血流中循環(huán)細(xì)胞或沿血管壁呈現(xiàn) 的損害性內(nèi)皮細(xì)胞所釋放的介體，或者在血管損傷期間所暴露的內(nèi)皮下基質(zhì)（如膠原）的 血栓形成分子。此外，血小板還可在具有高剪切應(yīng)力的血流條件下如在狹窄血管中所觀察 到的那樣激活。激活后，所述循環(huán)血小板粘附并積聚在血管損傷處，形成血栓。在該過程中， 血管中所產(chǎn)生的血栓對(duì)血流是體積足夠大的，從而使其被部分或完全堵塞。
[0004] 在靜脈中，血栓還可在阻塞或血流慢處形成。由于這些靜脈血栓的性質(zhì)，其可產(chǎn)生 在血管系統(tǒng)中移動(dòng)的栓子。這些栓子因而可堵塞更遠(yuǎn)距離的血管中的血流，所述血管如肺 動(dòng)脈或冠狀動(dòng)脈。
[0005] 許多研究已經(jīng)證明5'-二磷酸腺苷（ADP)是血小板激活和聚集的主要 介體，在血栓形成的啟動(dòng)和進(jìn)展中發(fā)揮著決定性作用（Maffrand et al.，Thromb. Haemostas.，1988, 59, 225-230)。ADP通過損害的紅細(xì)胞和動(dòng)脈粥樣硬化壁的內(nèi)皮細(xì)胞釋 放到循環(huán)中，更具體而言，由以密集顆粒在非常高濃度儲(chǔ)存ADP之處的激活血小板所分泌。 ADP-誘導(dǎo)的血小板聚集由其與在人血小板的細(xì)胞膜表達(dá)的兩種特異性嘌呤能受體P2Y1 和P2Y12的結(jié)合所觸發(fā)。所述P2Y1受體，與經(jīng)Ga q的PLCP刺激聯(lián)合，負(fù)責(zé)內(nèi)部鈣儲(chǔ)存 的動(dòng)員、血小板形狀的改變和在ADP上的瞬間聚集。所述P2Y12,與經(jīng)Ga i2的腺苷酸環(huán) 化酶的抑制和PI-3激酶的激活聯(lián)合，負(fù)責(zé)響應(yīng)的放大和聚集的穩(wěn)定化。P2Y1-/-轉(zhuǎn)基因 小鼠（Gachet et al.，J. Clin. Invest.，1999, 104, 1731-1737)和 P2Y12-/-小鼠（Conley et al.，Nature, 2001，409, 202-207)的使用證明了所述兩種受體在體內(nèi)血栓發(fā)展中的重要 性。在人類中，已經(jīng)描述P2Y12基因缺陷與出血表型和ADP-誘導(dǎo)的血小板聚集的顯著衰 退有關(guān)。在人類臨床實(shí)踐中使用氯吡格雷已經(jīng)證明，由拮抗劑阻斷P2Y12受體代表著治療 心血管疾病的關(guān)鍵治療策略。氯吡格雷為噻吩并吡啶家族的前藥，其活性代謝物共價(jià)結(jié)合 至P2Y12受體，導(dǎo)致體內(nèi)血小板活性的不可逆抑制（Savi et al.，Biochem. Biophys. Res. Commun.，2001，283, 379-383)，該藥物在若干臨床試驗(yàn)中顯示其效能，即降低有危險(xiǎn)的患者 發(fā)生心血管意外的危險(xiǎn)。
[0006] 本發(fā)明公開了一類含胺基的L-薄荷醇結(jié)構(gòu)的P2Y12受體拮抗劑，這些化合物可用 于制備治療心血管疾病尤其是血栓栓塞性疾病的藥物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種具有通式I的良好活性的P2Y12受體拮抗劑。
[0008] 本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供制備具有通式I的化合物的方法。
[0009] 本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供含有通式I的化合物作為有效成分及其在治療心血 管疾病尤其是血栓栓塞性疾病方面的應(yīng)用。
[0010] 現(xiàn)結(jié)合本發(fā)明的目的對(duì)本
【發(fā)明內(nèi)容】
進(jìn)行具體描述。
[0011] 本發(fā)明具有通式I的化合物具有下述結(jié)構(gòu)式：
[0017] 化合物II和化合物III在堿存在下加熱反應(yīng)生成化合物IV ;化合物IV用還原劑 還原得到化合物V ;化合物V在堿存在下與氯乙酰氯反應(yīng)，得到化合物VI ;化合物VI在堿存 在下與巰基化合物VII反應(yīng)，得到對(duì)應(yīng)的I。
[0018] 本發(fā)明所述通式I化合物具有P2Y12受體的拮抗作用，可作為有效成分用于制備 心血管疾病尤其是血栓栓塞性疾病治療藥物。本發(fā)明所述通式I化合物的活性是通過體外 人血血小板聚集的抑制試驗(yàn)來驗(yàn)證的。
[0019] 本發(fā)明的通式I化合物在相當(dāng)寬的劑量范圍內(nèi)是有效的。例如每天服用的劑量約 在lmg-700mg/人范圍內(nèi)，分為一次或數(shù)次給藥。實(shí)際服用本發(fā)明通式I化合物的劑量可由 醫(yī)生根據(jù)有關(guān)的情況來決定。
【具體實(shí)施方式】
[0020] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。需要說明的是，下述實(shí)施例僅是用于 說明，而并非用于限制本發(fā)明。本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的教導(dǎo)所做出的各種變化均應(yīng) 在本申請(qǐng)權(quán)利要求所要求的保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0021] 實(shí)施例1化合物I-I的合成
[0023] 步驟1.化合物IV的合成
[0024] I. 56g(IOmmol)化合物II溶于15mL DMF中，冰水浴冷卻下攪拌，分批加入 0. 48g(12mmol，60%)固體NaH，室溫下攪拌30分鐘。加入1.86g(10mmol)2,4-二硝基化 合物III，而后室溫下攪拌3小時(shí)，TLC顯示反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物小心傾倒入200mL冰水 中，攪拌，用50mLX3CH 2Cl2萃取，合并萃取相，用鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。抽濾除去干 燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，殘余物使用硅膠柱層析純化，得到化合物IV，白色固體， ESI-MS，m/z = 323 ([M+H]+)。步驟 2.化合物 V 的合成
[0025] 2.26g(7mmol)化合物IV溶于20mL無水乙醇中，攪拌，加入0? Ig 10% Pd/C，然 后按照標(biāo)準(zhǔn)操作進(jìn)行常溫常壓下加氫，12小時(shí)后完成。反應(yīng)混合物小心傾倒入200mL冰 水中，攪拌，用50mLX3CH 2Cl2萃取，合并萃取相，用鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。抽濾除去 干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，殘余物使用硅膠柱層析純化，得到化合物V，白色固體， ESI-MS，m/z = 263 ([M+H]+) 〇
[0026] 步驟3.化合物VI的合成
[0027] I. 31g(5mmol)化合物V溶于15mL干燥的二氯甲烷中，冰水浴冷卻下攪拌，加入 1. 52g(15mmol)三乙胺，而后慢慢滴加0. 56g(5mmol)氯乙酰氯和ImL干燥二氯甲燒配制的 溶液，滴加完畢后，反應(yīng)混合物在室溫下繼續(xù)攪拌過夜，TLC顯示反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物小 心傾倒入200mL冰水中，攪拌，用50mLX 3CH2C12萃取，合并萃取相，依次用1 %的鹽酸和鹽 水洗滌，無水硫酸鈉干燥。抽濾除去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，殘余物使用硅膠柱 層析純化，得到化合物VI，白色固體，ESI-MS，m/z = 339([M+H]+)。
[0028] 步驟4.化合物I-I的合成
[0029] I. 02g(3mmol)化合物 VI、0. 38g(3mmol)VII-l 和 0? 91g(9mmol)三乙胺溶于 IOmL 干燥的二氯甲烷中，反應(yīng)混合物在室溫下繼續(xù)攪拌過夜，TLC顯示反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物小 心傾倒入200mL冰水中，攪拌，用50mLX 3CH2C12萃取，合并萃取相，依次用1 %的鹽酸和鹽 水洗滌，無水硫酸鈉干燥。抽濾除去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，殘余物使用硅膠柱 層析純化，得到化合物1-1，白色固體，ESI-MS，m/z = 428([M+H]+)。
[0030] 實(shí)施例2-4
[0031] 參照實(shí)施例1的方法，合成了下表所列化合物。
[0032]
[0033] 實(shí)施例4化合物體外對(duì)人血血小板的抑制作用
[0034] 使用含有2mL緩沖的檸檬酸鈉的20mL注射器，從健康志愿者采集血液。將血液轉(zhuǎn) 移至聚丙烯管中，并在室溫離心（l〇〇g)5分鐘（不使用離心機(jī)的制動(dòng)）。然后收集浮在表面 的富血小板血漿（PRP)，稀釋，并在將其用于聚集測量之前進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)。
[0035] 在玻璃管中37°C進(jìn)行血小板聚集的測量（血小板聚集儀）。將4 y L測試化合物 (比需要的終濃度濃100倍的DMSO溶液）與392 y L新制的PRP混合，并伴隨攪拌孵育1分 鐘。然后向混合物中加入4 y L 250 y M的ADP溶液。持續(xù)攪拌，通過按照G. V. R. Born的方 法記錄光密度變化（Born，Nature，1962, 194, 927)，監(jiān)測聚集的測量6至8分鐘。使用以高 度表示的聚集振幅計(jì)算結(jié)果，并以抑制百分?jǐn)?shù)表示。本發(fā)明化合物的血小板聚集抑制作用 IC 5。如下表所示。
[0036]
[0037] 從上表結(jié)果可以看出，本發(fā)明的化合物對(duì)P2Y12具有很強(qiáng)的拮抗作用，可以作為 制備治療心血管疾病尤其是血栓栓塞性疾病的藥物。
【主權(quán)項(xiàng)】
2.權(quán)利要求1所定義的通式I化合物，選自下列化合物，
3.合成權(quán)利要求1-2任一所定義的屬于通式I的化合物的方法：化合物II和化合物III在堿存在下加熱反應(yīng)生成化合物IV;化合物IV用還原劑還原 得到化合物V;化合物V在堿存在下與氯乙酰氯反應(yīng)，得到化合物VI;化合物VI在堿存在下 與巰基化合物VII反應(yīng)，得到對(duì)應(yīng)化合物I。
4.權(quán)利要求1-2之一所定義的通式I化合物在制備治療血栓栓塞性疾病藥物方面的應(yīng) 用。
【專利摘要】本發(fā)明涉及與心血管疾病相關(guān)的藥物領(lǐng)域。具體而言，本發(fā)明涉及一類含胺基的L-薄荷醇結(jié)構(gòu)的P2Y12受體拮抗劑、其制備方法以及在制備治療心血管疾病尤其是血栓栓塞性疾病藥物中的應(yīng)用。
【IPC分類】C07C323/60, A61P7/02, C07C319/14
【公開號(hào)】CN105085346
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510500820
【發(fā)明人】曾華仙
【申請(qǐng)人】天津小新醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2015年11月25日
【申請(qǐng)日】2015年8月14日