一種辣木葉多糖的制備方法及其用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物化學(xué)領(lǐng)域，具體設(shè)及一種辣木葉多糖的制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 辣木（MoringaoleiferaLam.)為辣木科辣木屬的植物，是多年生熱帶落葉喬木， 廣泛種植在亞洲和非洲熱帶和亞熱帶地區(qū)，對(duì)±壤條件和降雨量有很強(qiáng)的適應(yīng)性。我國(guó) 廣東、臺(tái)灣等地亦有栽培，辣木既可W供觀賞，而且根、葉和嫩果可食用；種子可棒油，含油 30%左右，具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，辣木除了具有豐富的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值外，在抗氧化、 降血糖、降血脂、抗真菌方面亦表現(xiàn)出良好的活性，而且辣木葉中的多糖類化合物和多糖類 化合物具有降血糖、降脂、降壓、抗腫瘤、抗氧化、抗病毒、治療屯、血管病、改善睡眠等功效， 是具有極大研究開拓潛力的植物。
[0003] 鑒于辣木葉多糖具有的多種藥理作用，辣木葉多糖成為人們研究的熱點(diǎn)，尤其是 對(duì)辣木葉多糖的提取工藝的研究。陳瑞嬌發(fā)表了一篇題為"辣木葉多糖的提取及分離純化" 的論文，該論文公開的辣木葉多糖的最佳提取工藝為；料液比為1:20,在80°C水浴條件下， 提取3次，每次1.化，該工藝提取的粗多糖得率為15. 86%，但是，該提取方法提取溫度較高， 耗能較多，提取時(shí)間長(zhǎng)，不利于該提取方法的工業(yè)化生產(chǎn)。彭凌發(fā)表了一篇題為；"辣木葉多 糖超聲波輔助提取工藝條件優(yōu)化研究"的論文，該論文公開了超聲波輔助提取工藝的最優(yōu) 條件為：料液比為1:30,在60°C條件下，超聲波處理20min，提取2次，該工藝提取的辣木葉 多糖提取率為24. 52%，但是，其提取率較低，不利于其大規(guī)模的生產(chǎn)和應(yīng)用。。
[0004] 尿酸是人類嚷嶺化合物的終末代謝產(chǎn)物。嚷嶺代謝素亂導(dǎo)致高尿酸血癥。隨著 人們生活水平提高和飲食結(jié)構(gòu)改變，高尿酸血癥的患病率日益上升，嚴(yán)重威脅到人類的健 康。目前，有研究表明辣木葉多糖對(duì)降血糖、抗腫瘤、抗病毒和治療屯、血管病都具有顯著的 效果，但是辣木葉多糖對(duì)高尿酸癥治療效果尚未見(jiàn)有研究，因此，致力于研究辣木葉多糖對(duì) 治療高尿酸癥的效果具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 為了解決現(xiàn)有技術(shù)辣木葉多糖提取工藝的提取時(shí)間較長(zhǎng)，提取率低的缺陷，本發(fā) 明的目的在于提供一種辣木葉多糖的制備方法及其用途，W解決W上缺陷。
[0006] 本發(fā)明提供的一種辣木葉多糖的制備方法，包括W下步驟： (1) 備料；稱取辣木葉，干燥，粉碎，過(guò)40-50目篩，得辣木葉粉； (2) 提?。蝗〔襟E（1)得到的辣木葉粉，加入辣木葉粉質(zhì)量20-30倍體積的蒸饋水，在微 波下處理6-8min，置45°C-55°C溫水浴中超聲提取2-3次，每次處理30-40min，過(guò)濾，合并 濾液，將濾液減壓濃縮，在14°C下離屯、10min,取上清液，將上清液濃縮，得濃縮液； (3) 脫蛋白；將步驟（2)得到的濃縮液加入鹽酸調(diào)節(jié)其抑值至3. 0-4. 0,靜置過(guò)夜，在 300化/min條件下離屯、4-6min，棄沉淀取上清液； (4) 脫色；將步驟（3)的上清液放置溫度為75-85°C水浴中，加入化0H溶液調(diào)節(jié)其抑 值至8-9,接著加入過(guò)氧化氨脫色，過(guò)氧化氨的添加量是上清液體積的0. 2-0. 3倍，脫色 20-30min，過(guò)濾取濾液； (5)分離；將步驟（4)的濾液進(jìn)行逆流水透析40-48h，蒸饋水透析20-2化，將透析液 濃縮，加入大孔吸附樹脂柱，加蒸饋水洗脫，洗脫至洗脫液加入95%己醇無(wú)沉淀，收集洗脫 液；將洗脫液濃縮后加入無(wú)水己醇使含醇量達(dá)到80%，于4°C冰箱中過(guò)夜醇沉，在4°C下離屯、 10min,取沉淀，將沉淀依次用無(wú)水己醇、丙酬洗漆2-4次，干燥后即得辣木葉多糖粉末。
[0007] 本發(fā)明辣木葉多糖的制備方法步驟（2)中的微波的功率為500-600W。
[0008] 進(jìn)一步的，所述步驟（2)中的超聲波的功率為300-400W。
[0009] 本發(fā)明辣木葉多糖的制備方法步驟（2)中離屯、機(jī)的轉(zhuǎn)速進(jìn)一步限定為10000r/ min。
[0010] 更進(jìn)一步的，本發(fā)明辣木葉多糖的制備方法步驟（4)中過(guò)氧化氨的濃度為 16%-23%，進(jìn)一步優(yōu)選過(guò)氧化氨的濃度為20%。
[0011] 還有，本發(fā)明辣木葉多糖的制備方法步驟（5)中的吸附樹脂柱為AB-8型大孔吸 附樹脂柱。
[0012] 進(jìn)一步限定步驟（5)中離屯、機(jī)的轉(zhuǎn)速為40000r/min。
[0013] 優(yōu)選的，本發(fā)明辣木葉多糖的最佳制備方法，包括W下步驟： (1) 備料；稱取1kg辣木葉于50°C干燥2.5h，粉碎，過(guò)45目篩，得辣木葉粉； (2) 提取；取步驟（1)得到的辣木葉粉，加入辣木葉粉質(zhì)量25倍體積的蒸饋水，在功率 為500W的微波下處理7min，置50°C溫水浴中功率為300W的超聲提取2次，每次處理35min， 過(guò)濾，合并濾液，將濾液減壓濃縮至原體積的1/3,在14°C下，轉(zhuǎn)速為10000r/min的離屯、機(jī) 離屯、10min,取上清液，將上清液濃縮至原體積的1/4,得濃縮液； (3) 脫蛋白；將步驟（2)得到的濃縮液加入2mol/L鹽酸調(diào)節(jié)其抑值至3. 5,靜置過(guò)夜， 在3000r/min條件下離屯、55min，棄沉淀取上清液； (4) 脫色；將步驟（3)的上清液放置溫度為80°C水浴中，加入0. 1%的化0H溶液調(diào)節(jié)其 抑值至8. 5,接著加入濃度為20%的過(guò)氧化氨，過(guò)氧化氨的添加量是上清液體積的0. 25倍， 脫色25min，過(guò)濾取濾液； (5) 分離；將步驟（4)的濾液進(jìn)行逆流水透析48h，蒸饋水透析2化，將透析液濃縮，加 入AB-8型大孔吸附樹脂柱，加蒸饋水洗脫，洗脫至洗脫液加入95%己醇無(wú)沉淀，收集洗脫 液；將洗脫液濃縮至原體積的1/5后加入無(wú)水己醇使含醇量達(dá)到80%，于4°C冰箱中過(guò)夜醇 沉，在4°C下，轉(zhuǎn)速為40000r/min的離屯、機(jī)離屯、10min,取沉淀，將沉淀依次用無(wú)水己醇、 丙酬反復(fù)洗漆3次，在50°C低溫干燥至恒重，即得辣木葉多糖粉末。
[0014] 本發(fā)明的制備方法采用微波-超聲波協(xié)同提取，鹽酸法脫蛋白，過(guò)氧化氨法脫色 和AB-8型大孔吸附樹脂柱分離得到辣木葉多糖，該辣木葉制備方法具有提取時(shí)間短，提取 溫度低，耗能低和提取率高的優(yōu)點(diǎn)。
[0015] 本發(fā)明的微波-超聲波協(xié)同提取辣木葉多糖是利用微波能使細(xì)胞內(nèi)部的溫度迅 速上升，細(xì)胞內(nèi)部壓力增高使細(xì)胞破裂，藥材內(nèi)有效成分流出，并在較低的溫度下溶于提取 液。該方法加熱均勻，熱效率較高，提取速度快。與比傳統(tǒng)的回流提取具有高效、省時(shí)、節(jié) 能的優(yōu)點(diǎn)，在中藥提取中具有良好的應(yīng)用前景。
[0016] 本發(fā)明采用的鹽酸法脫蛋白具有脫蛋白率高，提取多糖純度高的優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)，采用 過(guò)氧化氨法脫色，具有脫色率高，操作簡(jiǎn)單，成本低，且不易與辣木葉多糖溶液中的色素發(fā) 生吸附作用的優(yōu)點(diǎn)，為得到高品質(zhì)的辣木葉多糖提供可有價(jià)值的工藝條件。本發(fā)明制備的 辣木葉多糖在波長(zhǎng)為620nm下測(cè)定其含量達(dá)到28-31%，與傳統(tǒng)的辣木葉制備方法相比，具 有提取率高，省時(shí)、節(jié)能的優(yōu)勢(shì)。
[0017] 另外，本發(fā)明還提供了辣木葉多糖在制備治療高尿酸血癥藥物中的用途。經(jīng)本發(fā) 明的試驗(yàn)例證實(shí)，本發(fā)明的辣木葉多糖高、中和低劑量組具有降尿酸作用，而且在一定的范 圍內(nèi)，辣木葉多糖劑量越多降尿酸作用越明顯，該辣木葉通過(guò)降低膽固醇、=酷甘油、尿素 氮、肌酢和黃嚷嶺氧化酶的含量從而達(dá)到降低尿酸生成，同時(shí)也可W直接分解尿酸，改善腎 功能、促進(jìn)尿酸排泄、保護(hù)血管等功能，更有利于高尿酸血癥患者的康復(fù)，具有廣闊的醫(yī)學(xué) 應(yīng)用前景。
[0018] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的辣木葉多糖的制備方法具有W下優(yōu)點(diǎn)： (1) 本發(fā)明辣木葉多糖的制備方法采用了微波-超聲波協(xié)同提取辣木葉多糖，與比傳 統(tǒng)的回流提取具有高效、省時(shí)、節(jié)能的優(yōu)點(diǎn)，在中藥提取中具有良好的應(yīng)用前景； (2) 本發(fā)明辣木葉多糖的制備方法采用了鹽酸法脫蛋白，具有脫蛋白率高，提取制備得 到的多糖純度高的優(yōu)點(diǎn)； (3) 本發(fā)明辣木葉多糖的制備方法采用了過(guò)氧化氨法脫色，具有脫色率高，操作簡(jiǎn)單， 成本低，且不易與辣木葉多糖溶液中的色素發(fā)生吸附作用的優(yōu)點(diǎn)，為得到高品質(zhì)的辣木葉 多糖提供可有價(jià)值的工藝條件。
【具體實(shí)施方式】： W下通過(guò)【具體實(shí)施方式】的描述對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，但該并非是對(duì)本發(fā)明的限制， 本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的基本思想，可W做出各種修改或改進(jìn)，但是只要不脫離本發(fā) 明的基本思想，均在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
[0019] 實(shí)施例1、辣木葉多糖的制備 (1) 備料；稱取1kg辣木葉于50°C干燥化，粉碎，過(guò)40目篩，得辣木葉粉； (2) 提?。蝗〔襟E（1)得到的辣木葉粉，加入辣木葉粉質(zhì)量20倍體積的蒸饋水，在功率 為500W的微波下處理6min，置45°C溫水浴中功率為300W的超聲提取2次，每次處理30min， 過(guò)濾，合并濾液，將濾液減壓濃縮至原體積的1/3,在14°C下，轉(zhuǎn)速為10000r/min的離屯、機(jī) 離屯、10min,取上清液，將上清液濃縮至原體積的1/4,得濃縮液； (3) 脫蛋白；將步驟（2)得到的濃縮液加入2mol/L鹽酸調(diào)節(jié)其抑值至3. 0,靜置過(guò)夜， 在3000r/min條件下離屯、4min，棄沉淀取上清液； (4) 脫色；將步驟（3)的上清液放置溫度為75°C水浴中，加入0. 1%的化0H溶液調(diào)節(jié)其 抑值至8,接著加入濃度為16%的過(guò)氧化氨，過(guò)氧化氨的添加量是上清液體積的0. 2倍，脫 色20min，過(guò)濾取濾液； (5) 分離；將步驟（4)的濾液進(jìn)行逆流水透析40h，蒸饋水透析20h