本發(fā)明涉及植物分子生物學(xué)和植物遺傳工程領(lǐng)域。更具體地說，本發(fā)明涉及用于調(diào)節(jié)植物中的基因表達(dá)的dna分子。

背景技術(shù)：

1、調(diào)控元件是通過調(diào)節(jié)可操作地連接的可轉(zhuǎn)錄dna分子的轉(zhuǎn)錄來(lái)調(diào)控基因活性的遺傳元件。此類元件可包括啟動(dòng)子、前導(dǎo)序列、內(nèi)含子和3′非翻譯區(qū)，并用于植物分子生物學(xué)和植物遺傳工程領(lǐng)域。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明提供了用于植物的新型合成基因調(diào)控元件。本發(fā)明還提供了包含所述調(diào)控元件的重組dna分子構(gòu)建體。本發(fā)明還提供了包含所述調(diào)控元件的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞、植物和種子。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述調(diào)控元件可操作地連接到可轉(zhuǎn)錄dna分子。在某些實(shí)施方案中，所述可轉(zhuǎn)錄dna分子相對(duì)于所述調(diào)控序列可以是異源的。因此，在特定的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的調(diào)控元件序列可被限定為可操作地連接到異源可轉(zhuǎn)錄dna分子。本發(fā)明還提供了使用調(diào)控元件以及制備和使用包含所述調(diào)控元件的重組dna分子以及包含可操作地連接到可轉(zhuǎn)錄dna分子的調(diào)控元件的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞、植物和種子的方法。

2、因此，在一方面，本發(fā)明提供了一種重組dna分子，其包含選自由以下組成的組的dna序列：(a)與seq?id?no:1-19和seq?id?no:26中任一者具有至少約85％序列同一性的序列；(b)包含seq?id?no:1-19和seq?id?no:26中任一者的序列；以及(c)seq?id?no:1-19和seq?id?no:26中任一者的片段，其中所述片段具有基因調(diào)控活性；其中所述序列可操作地連接到異源可轉(zhuǎn)錄dna分子?！爱愒纯赊D(zhuǎn)錄dna分子”意指所述可轉(zhuǎn)錄dna分子相對(duì)于其可操作地連接到的多核苷酸序列是異源的。在特定的實(shí)施方案中，所述重組dna分子包含與seqid?no:1-19和seq?id?no:26中任一者的dna序列具有至少約85％、至少約86％、至少約87％、至少約88％、至少約89％、至少約90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的序列同一性的dna序列。在特定的實(shí)施方案中，所述dna序列包含調(diào)控元件。在一些實(shí)施方案中，所述調(diào)控元件包含啟動(dòng)子。在再其他實(shí)施方案中，所述調(diào)控元件包括內(nèi)含子。在再其他實(shí)施方案中，所述調(diào)控元件包括3′utr。在再其他實(shí)施方案中，所述異源可轉(zhuǎn)錄dna分子包含農(nóng)藝學(xué)感興趣的基因，諸如能夠在植物中提供除草劑抗性的基因，或能夠在植物中提供植物害蟲抗性的基因。在再其他實(shí)施方案中，所述異源可轉(zhuǎn)錄dna分子包含編碼小rna諸如dsrna、mirna或sirna的序列。在再其他實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種構(gòu)建體，其包含如本文所提供的重組dna分子。

3、在另一方面，本文提供了轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，其包含重組dna分子，所述重組dna分子包含選自由以下組成的組的dna序列：(a)與seq?id?no:1-19和seq?id?no:26中任一者具有至少約85％序列同一性的序列；(b)包含seq?id?no:1-19和seq?id?no:26中任一者的序列；以及(c)seq?id?no:1-19和seq?id?no:26中任一者的片段，其中所述片段具有基因調(diào)控活性；其中所述dna序列可操作地連接到異源可轉(zhuǎn)錄dna分子。在某些實(shí)施方案中，所述轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞是單子葉植物細(xì)胞。在其他實(shí)施方案中，所述轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞是雙子葉植物細(xì)胞。

4、在又一方面，本文還提供了轉(zhuǎn)基因植物或其部分，其包含重組dna分子，所述重組dna分子含有選自由以下組成的組的dna序列：a)與seq?id?no:1-19和seq?id?no:26中任一者具有至少85％序列同一性的序列；b)包含seq?id?no:1-19和seq?id?no:26中任一者的序列；以及c)seq?id?no:1-19和seq?id?no:26中任一者的片段，其中所述片段具有基因調(diào)控活性；其中所述序列可操作地連接到異源可轉(zhuǎn)錄dna分子。在具體的實(shí)施方案中，所述轉(zhuǎn)基因植物是包含重組dna分子的任何世代的子代植物。本文還提供了包含所述重組dna分子的轉(zhuǎn)基因種子，所述重組dna分子在生長(zhǎng)時(shí)產(chǎn)生這種轉(zhuǎn)基因植物。

5、在另一方面，本發(fā)明提供了一種生產(chǎn)商品的方法，所述方法包括獲得含有本發(fā)明的重組dna分子的轉(zhuǎn)基因植物或其部分，以及由所述轉(zhuǎn)基因植物或其部分生產(chǎn)商品。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述商品是種子、加工種子、蛋白濃縮物、蛋白分離物、淀粉、谷物、植物部分、種子油、生物質(zhì)、面粉和粗粉。

6、在又一方面，本發(fā)明提供了一種產(chǎn)生包含本發(fā)明的重組dna分子的轉(zhuǎn)基因植物的方法，所述方法包括使用本發(fā)明的重組dna分子轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞以產(chǎn)生轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞，以及從所述轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞中再生轉(zhuǎn)基因植物。

7、序列簡(jiǎn)述

8、seq?id?no:1是合成調(diào)控表達(dá)元件組(exp)exp-zm.gsp850的dna序列，其包含合成啟動(dòng)子(p-zm.gsp850.nno:4)，所述合成啟動(dòng)子將5′可操作地連接到合成前導(dǎo)序列(l-zm.gsp850.nno:3)。

9、seq?id?no:2是合成啟動(dòng)子p-zm.gsp850.nno:4的dna序列。

10、seq?id?no:3是合成前導(dǎo)序列l(wèi)-zm.gsp850.nno:3的dna序列。

11、seq?id?no:4是合成exp?exp-zm.gsp850.nno+zm.gsi153.n?no:2的dna序列，其包含合成啟動(dòng)子(p-zm.gsp850.nno:4)，所述合成啟動(dòng)子將5′可操作地連接到合成前導(dǎo)序列(l-zm.gsp850.nno:3)，所述前導(dǎo)序列將5′可操作地連接到合成內(nèi)含子(i-zm.gsi153.nno:1)。

12、seq?id?no:5是合成內(nèi)含子i-zm.gsi153.nno:1的dna序列。

13、seq?id?no:6是合成exp?exp-zm.gsp990的dna序列，其包含合成啟動(dòng)子(p-zm.gsp990.nno:2)，所述合成啟動(dòng)子將5′可操作地連接到合成前導(dǎo)序列(l-zm.gsp990.nno:1)。

14、seq?id?no:7是合成啟動(dòng)子p-zm.gsp990.nno:2的dna序列。

15、seq?id?no:8是合成前導(dǎo)序列l(wèi)-zm.gsp990.nno:1的dna序列。

16、seq?id?no:9是合成exp?exp-zm.gsp990.nno+zm.gsi197.n?no:2的dna序列，其包含合成啟動(dòng)子(p-zm.gsp990.nno:2)，所述合成啟動(dòng)子將5′可操作地連接到合成前導(dǎo)序列(l-zm.gsp990.nno:1)，所述合成前導(dǎo)序列將5′可操作地連接到合成內(nèi)含子(i-zm.gsi197.nno:1)。

17、seq?id?no:10是合成內(nèi)含子i-zm.gsi197.nno:1的dna序列。

18、seq?id?no:11是合成exp?exp-zm.gsp850.nno+zm.gsi140.nno:1的dna序列，其包含合成啟動(dòng)子(p-zm.gsp850.nno:4)，所述合成啟動(dòng)子將5′可操作地連接到合成前導(dǎo)序列(l-zm.gsp850.nno:3)，所述合成前導(dǎo)序列將5′可操作地連接到合成內(nèi)含子(i-zm.gsi140.nno:1)。

19、seq?id?no:12是合成內(nèi)含子i-zm.gsi140.nno:1的dna序列。

20、seq?id?no:13是合成的3′utr?t-zm.gst9.nno:2的dna序列。

21、seq?id?no:14是合成的3′utr?t-zm.gst18.nno:2的dna序列。

22、seq?id?no:15是合成exp?exp-zm.gsp850.nno+zm.dnak:1的dna序列，其包含合成啟動(dòng)子(p-zm.gsp850.nno:4)，所述合成啟動(dòng)子將5′可操作地連接到合成前導(dǎo)序列(l-zm.gsp850.nno:3)，所述合成前導(dǎo)序列將5′可操作地連接到內(nèi)含子(i-zm.dnak:1)。

23、seq?id?no:16是合成exp?exp-zm.gsp990.nno+zm.dnak:1的dna序列，其包含合成啟動(dòng)子(p-zm.gsp990.nno:2)，所述合成啟動(dòng)子將5′可操作地連接到合成前導(dǎo)序列(l-zm.gsp990.nno:1)，所述合成前導(dǎo)序列將5′可操作地連接到內(nèi)含子(i-zm.dnak:1)。

24、seq?id?no:17是合成增強(qiáng)子e-zm.gsp850的dna序列，所述增強(qiáng)子衍生自合成啟動(dòng)子p-zm.gsp850.nno:4。

25、seq?id?no:18是合成增強(qiáng)子e-zm.gsp990的dna序列，所述增強(qiáng)子衍生自合成啟動(dòng)子p-zm.gsp990.nno:2。

26、seq?id?no:19是3′utr?t-sb.nltp4-1:1:2的dna序列，其衍生自來(lái)自雙色高粱(sorghum?bicolor)的nltp4(非特異性脂質(zhì)轉(zhuǎn)移蛋白4)基因。

27、seq?id?no:20是用于β-葡萄糖醛酸酶(gus)的植物表達(dá)優(yōu)化的合成編碼序列，其具有衍生自馬鈴薯光誘導(dǎo)的組織特異性st-ls1基因(genbank登錄號(hào)：x04753)的可加工內(nèi)含子。

28、seq?id?no:21是exp?exp-camv.35s的dna序列，其包含35s啟動(dòng)子和衍生自花椰菜花葉病毒的前導(dǎo)序列。

29、seq?id?no:22是內(nèi)含子i-zm.dnak:1的dna序列，所述內(nèi)含子衍生自來(lái)自玉米(zeamays)的熱休克蛋白70(hsp70)基因(dnak)。

30、seq?id?no:23是3′utr?t-os.ltp:1的dna序列，其衍生自來(lái)自水稻(oryzasativa)的脂質(zhì)轉(zhuǎn)移蛋白樣基因(ltp)。

31、seq?id?no:24是β-葡萄糖醛酸酶(gus)的編碼序列，其具有衍生自馬鈴薯光誘導(dǎo)的組織特異性st-ls1基因(genbank登錄號(hào)：x04753)的可加工的內(nèi)含子。

32、seq?id?no:25是螢光素酶熒光蛋白(promega，madison，wi?53711)nluc的編碼序列，其通過來(lái)自深海蝦(細(xì)腳刺蝦(oplophorus?gacilirostris))螢光素酶的定向進(jìn)化來(lái)進(jìn)行工程化。

33、seq?id?no:26是合成的3′utr?t-zm.gst43.nno:1的dna序列。