1.一種試劑,其特征在于,包括:
2.如權(quán)利要求1所述的試劑,其特征在于,所述sgrna包括sgrna1和/或sgrna2,所述sgrna1的靶向核酸序列如seq?id?no:1所示:tctcatcgtcatagcaacgtggg;所述sgrna2的靶向核酸序列如seq?id?no:2所示:ctaatccaattatataggcgggg。
3.一種分離的細(xì)胞,其特征在于,所述的細(xì)胞經(jīng)如權(quán)利要求1所述的試劑處理,且所述細(xì)胞中ano3蛋白失活。
4.如權(quán)利要求3所述的細(xì)胞,其特征在于,所述細(xì)胞的基因組中ano3基因轉(zhuǎn)錄本的第1個(gè)外顯子至第13個(gè)外顯子切除。
5.一種ano3基因敲除的非人哺乳動(dòng)物的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
6.如權(quán)利要求5所述的方法,所述細(xì)胞包括如權(quán)利要求3所述的細(xì)胞和/或使用如權(quán)利要求1所述的試劑處理的細(xì)胞。
7.如權(quán)利要求5所述的方法,所述方法還包括:(m3)對(duì)步驟(m2)獲得的非人哺乳動(dòng)物進(jìn)行雜交,通過(guò)基因型鑒定,從而獲得ano3蛋白失活的純合子代。
8.如權(quán)利要求7所述的方法,所述鑒定的引物對(duì)包括wt-f和/或wt-r和/或mut-r引物對(duì),所述wt-f的核苷酸序列如seq?id?no:3所示:gtcaggacagatgccagcttcacc;所述wt-r的核苷酸序列如seq?id?no:4所示:gatgcagagcgggatgtggtgc;所述mut-r的核苷酸序列如seqid?no:5所示:ggggtattgcttaaggacatccacttcc。
9.一種ano3基因敲除的非人哺乳動(dòng)物模型,其特征在于,所述非人哺乳動(dòng)物模型利用如權(quán)利要求5所述的方法制備。
10.如權(quán)利要求9所述的模型,所述非人哺乳動(dòng)物選自下組:嚙齒動(dòng)物(如小鼠、大鼠)。
11.一種用權(quán)利要求5所述的構(gòu)建方法制備的非人哺乳動(dòng)物模型或權(quán)利要求9所述的非人哺乳動(dòng)物模型的用途,其特征在于,可用于篩選,以確定用于治療或緩解熱性驚厥、肌張力障礙相關(guān)疾病的潛在治療劑。