午夜毛片免费看,老师老少妇黄色网站,久久本道综合久久伊人,伊人黄片子

一種Ano3基因敲除的非人哺乳動(dòng)物模型的構(gòu)建方法及其應(yīng)用

文檔序號(hào):39526445發(fā)布日期:2024-09-27 17:02閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種試劑,其特征在于,包括:

2.如權(quán)利要求1所述的試劑,其特征在于,所述sgrna包括sgrna1和/或sgrna2,所述sgrna1的靶向核酸序列如seq?id?no:1所示:tctcatcgtcatagcaacgtggg;所述sgrna2的靶向核酸序列如seq?id?no:2所示:ctaatccaattatataggcgggg。

3.一種分離的細(xì)胞,其特征在于,所述的細(xì)胞經(jīng)如權(quán)利要求1所述的試劑處理,且所述細(xì)胞中ano3蛋白失活。

4.如權(quán)利要求3所述的細(xì)胞,其特征在于,所述細(xì)胞的基因組中ano3基因轉(zhuǎn)錄本的第1個(gè)外顯子至第13個(gè)外顯子切除。

5.一種ano3基因敲除的非人哺乳動(dòng)物的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:

6.如權(quán)利要求5所述的方法,所述細(xì)胞包括如權(quán)利要求3所述的細(xì)胞和/或使用如權(quán)利要求1所述的試劑處理的細(xì)胞。

7.如權(quán)利要求5所述的方法,所述方法還包括:(m3)對(duì)步驟(m2)獲得的非人哺乳動(dòng)物進(jìn)行雜交,通過(guò)基因型鑒定,從而獲得ano3蛋白失活的純合子代。

8.如權(quán)利要求7所述的方法,所述鑒定的引物對(duì)包括wt-f和/或wt-r和/或mut-r引物對(duì),所述wt-f的核苷酸序列如seq?id?no:3所示:gtcaggacagatgccagcttcacc;所述wt-r的核苷酸序列如seq?id?no:4所示:gatgcagagcgggatgtggtgc;所述mut-r的核苷酸序列如seqid?no:5所示:ggggtattgcttaaggacatccacttcc。

9.一種ano3基因敲除的非人哺乳動(dòng)物模型,其特征在于,所述非人哺乳動(dòng)物模型利用如權(quán)利要求5所述的方法制備。

10.如權(quán)利要求9所述的模型,所述非人哺乳動(dòng)物選自下組:嚙齒動(dòng)物(如小鼠、大鼠)。

11.一種用權(quán)利要求5所述的構(gòu)建方法制備的非人哺乳動(dòng)物模型或權(quán)利要求9所述的非人哺乳動(dòng)物模型的用途,其特征在于,可用于篩選,以確定用于治療或緩解熱性驚厥、肌張力障礙相關(guān)疾病的潛在治療劑。


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一種Ano3基因敲除的非人哺乳動(dòng)物模型的構(gòu)建方法及其應(yīng)用。具體地,本發(fā)明提供了一種基于CRISPR/Cas9基因敲除技術(shù)構(gòu)建Ano3基因敲除的非人哺乳動(dòng)物模型,其構(gòu)建方法包括如下步驟:步驟一、設(shè)計(jì)sgRNA和Cas9mRNA并體外轉(zhuǎn)錄成mRNA,將有活性的sgRNA和Cas9mRNA顯微注射入非人哺乳動(dòng)物受精卵中,獲得Ano3基因敲除非人哺乳動(dòng)物;步驟二、Ano3基因敲除非人哺乳動(dòng)物動(dòng)物模型的鑒定。本發(fā)明基于CRISPR/Cas9基因敲除技術(shù)構(gòu)建了Ano3基因敲除的非人哺乳動(dòng)物模型,為研究Ano3與熱性驚厥、肌張力障礙等疾病的關(guān)系提供便捷、可靠、經(jīng)濟(jì)的非人哺乳動(dòng)物模型。

技術(shù)研發(fā)人員:黃潔鴻,靳令經(jīng),萬(wàn)新華,李麗喜,姜莉婷,李暘
受保護(hù)的技術(shù)使用者:同濟(jì)大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2024/9/26
當(dāng)前第2頁(yè)1 2 
網(wǎng)友詢問(wèn)留言 已有0條留言
  • 還沒(méi)有人留言評(píng)論。精彩留言會(huì)獲得點(diǎn)贊!
1