專利名稱：小鼠腹水誘導(dǎo)劑及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗體制備領(lǐng)域，具體地說，涉及小鼠腹水誘導(dǎo)劑及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
目前，小鼠腹水抗體制備中一般采用與雜交瘤SP20相同系的小鼠。常用的誘導(dǎo)劑為pristane和液體石蠟。這兩種誘導(dǎo)劑都屬于免疫抑制劑，抑制動物的正常免疫功能從而促進(jìn)腫瘤生長(Hoogenraad, N. J. and ffraight, C. J. , The effect of Pristane onPristane on ascites tumor formation and monoclonal antibody production, MethodsEnzymoI.，121，375，1986)。采用pristane進(jìn)行誘導(dǎo),每只小鼠可以采集約5_10ml腹水。然而誘導(dǎo)劑pristane成本很高，不適合大規(guī)模生產(chǎn)。另外，在免疫性動物疾病模型中也常使用pristane,比如關(guān)節(jié)炎，pristane腎病等,這表明pristane本身會對動物造成一定的健康損害，不符合動物福利的要求。此后，用液體石蠟或者不完全佐劑代替pristane。盡管液 體石蠟成本低，但用其誘導(dǎo)小鼠后，小鼠體內(nèi)易長實(shí)體瘤，易導(dǎo)致動物窘迫死亡，且腹水產(chǎn)量不高，約2-5ml。對于規(guī)模化生產(chǎn)來說，既費(fèi)時(shí)又增加了成本。以上兩種誘導(dǎo)劑，誘導(dǎo)周期在7-15天，腹水生產(chǎn)時(shí)間較長，一般誘導(dǎo)后10-21天開始采集腹水。相比而言，不完全佐劑比上述兩種誘導(dǎo)劑的誘導(dǎo)效果更好，但這種預(yù)刺激方法會給腹水帶來更多的細(xì)胞因子和其他炎性介質(zhì)的污染。因此，開發(fā)新型的小鼠腹水誘導(dǎo)劑成為小鼠腹水抗體制備領(lǐng)域亟待解決的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種新型的小鼠腹水誘導(dǎo)劑。本發(fā)明的另一目的是提供該新型的小鼠腹水誘導(dǎo)劑在小鼠腹水抗體制備中的應(yīng)用。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的，本發(fā)明的一種小鼠腹水誘導(dǎo)劑，其有效成分為液體石蠟、羊毛脂、卡介苗、白介素及人B淋巴細(xì)胞刺激因子。各組分按重量份計(jì)為
權(quán)利要求
1.一種小鼠腹水誘導(dǎo)劑，其特征在于，其有效成分為液體石蠟、羊毛脂、卡介苗、白介素及人B淋巴細(xì)胞刺激因子。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的誘導(dǎo)劑，其特征在于，其含有以下重量份的各組分
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的誘導(dǎo)劑，其特征在于，其含有以下重量份的各組分
4.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述小鼠腹水誘導(dǎo)劑的制備方法，其特征在于，將液體石蠟、羊毛脂、卡介苗、白介素及人B淋巴細(xì)胞刺激因子按比例混合，-20°C保存。
5.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述小鼠腹水誘導(dǎo)劑在小鼠腹水抗體制備中的應(yīng)用。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，用誘導(dǎo)劑腹腔注射小鼠，2-3天后，腹腔注射雜交瘤細(xì)胞，7-10天后采集腹水。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，小鼠腹水抗體制備中使用的小鼠為BALB/c小鼠。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，小鼠鼠齡為40-80天。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，每只小鼠腹腔注射誘導(dǎo)劑O.5ml/25g (按體重計(jì))。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，每只小鼠腹腔注射O.6X 106-3X IO6個雜交瘤細(xì)胞。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種新型的小鼠腹水誘導(dǎo)劑，其有效成分為液體石蠟、羊毛脂、卡介苗、白介素及人B淋巴細(xì)胞刺激因子。該誘導(dǎo)劑可直接刺激雜交瘤細(xì)胞在小鼠體內(nèi)快速增殖，并大量分泌抗體。腹水生產(chǎn)周期短，腹水量多，效價(jià)高。將本品用于小鼠腹水抗體的大量制備，節(jié)約了成本，具有可觀的經(jīng)濟(jì)效益。
文檔編號C07K16/00GK102875670SQ20121038717
公開日2013年1月16日 申請日期2012年10月11日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月11日
發(fā)明者侯倩女, 宋秀麗, 俞宏, 顧斌, 張銘, 宋新華 申請人:杭州華安生物技術(shù)有限公司