專利名稱：：一種積雪草總苷堿水解制備積雪草總苷元的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種積雪草總苷堿水解制備積雪草總苷元的方法。
背景技術(shù)：
：積雪草Cewfe//"o'a"c"(L.)Urban為傘形科積雪草屬植物，在許多國(guó)家和地區(qū)傳統(tǒng)醫(yī)藥領(lǐng)域中的應(yīng)用有悠久的歷史，我國(guó)中醫(yī)中藥對(duì)積雪草的內(nèi)服和外用已有兩千年的歷史。積雪草味苦、辛，性寒，歸肝、脾、腎、胃經(jīng)。古藥典記載主要用于治療濕熱黃疸、中暑腹瀉、砂淋血淋、癰腫瘡毒、跌打損傷等病癥?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究和應(yīng)用表明，積雪草可用于治療抑郁癥、皮膚創(chuàng)傷、胃潰瘍、傳染性肝炎、皮膚病和流行性腦脊髓膜炎等。積雪草的藥理作用同它的化學(xué)成分是密不可分的。積雪草的化學(xué)成分十分復(fù)雜，其主要成分有三萜類、多炔烯烴類、黃酮類和揮發(fā)油類等。此外，積雪草中還含有氯原酸、內(nèi)消旋肌醇、黃酮醇、脂肪酸、天胡荽堿、甾醇、蠟、葉綠素、烴類、木脂素類、糖、鞣質(zhì)和多元酚類等成分。積雪草的化學(xué)成分中，三萜類皂苷及其皂苷元是研究的最早、生物學(xué)活性研究較深入的一大類組分，其中積雪草酸、羥基積雪草酸、多米諾積雪草酸等是其重要的活性成分。積雪草總苷是從積雪草中提取得到的皂苷類物質(zhì)的總稱，主要由三萜苷類物質(zhì)組成，其主要成分包括積雪草苷(Asiaticoside，CASNo.:16830-15-2，分子式為(:481178019，分子量為959.12)、羥基積雪草苷(Madecassoside，CASNo.:34540-22-2，分子式為C48H7802()，分子量為975.12)和多米諾積雪草苷(Terminoloside，CASNo.:125265-68-1，分子式為C48H78O20，分子量為975.12)。積雪草總苷元是指上述皂苷類成分的糖苷鍵斷裂后生成的糖苷配基(苷元)，分別是積雪草酸(Asiaticacid，CASNo.:464-92-6，分子式為C3。H4805，分子量為488.70)、羥基積雪草酸(Made畫(huà)icacid,CASNo.:18499-41-7，分子式為C30H48O6,分子量為504.70)、多米諾積雪草酸(Terminolicacid，CASNo.:564-13-6，分子式為C3QH4806，分子量為504.70)。羥基積雪草苷也叫積雪草苷A，特米諾苷也叫做積雪草苷B，兩者是一對(duì)同分異構(gòu)體，同樣羥基積雪草酸和特米諾酸也是一對(duì)同分異構(gòu)體。它們差異只在于其中一個(gè)甲基歸屬不同，且兩個(gè)不同的歸屬處于鄰位關(guān)系，性質(zhì)差異較小。它們的結(jié)構(gòu)式分別如下積雪草苷CH，多米諾積雪草苷^c、.、、WCOOHHOHOH2C"CH3"'COOHCOOH多米諾積雪草酸積雪草總苷元的藥理作用十分廣泛，資料顯示，積雪草總苷元可用于治療燒傷性瘢痕、防止冠心病、心肌梗死、腦血栓、腦梗塞、增強(qiáng)記憶、皮膚增白等。近期的研究表明，積雪草總苷元還具有抗抑郁、抗纖維化、抗菌、抗腫瘤和抗氧化等功效。由于積雪草總苷成分的糖苷鍵較易斷裂，因此其作為藥物制劑的穩(wěn)定性難以控制，而積雪草總苷元在化學(xué)性質(zhì)上比總苷穩(wěn)定。而且以積雪草酸為例，積雪草苷在胃腸道內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化為積雪草酸，給藥時(shí)直接使用積雪草酸來(lái)代替積雪草苷，則無(wú)須經(jīng)過(guò)胃腸道細(xì)菌的代謝，使活性作用更直接。因此以積雪草總苷元代替總苷制備藥物制劑，可以克服積雪草總苷給藥劑量難以控制和藥物制劑不穩(wěn)定等問(wèn)題。因此，積雪草總苷元的生產(chǎn)制備對(duì)更好地利用積雪草資源具有重要的意義。目前，積雪草總苷元制備方法主要是從積雪草原草中直接提取，輔以萃取、層析等純化過(guò)程而獲得，不僅耗費(fèi)大量溶劑，而且較為費(fèi)時(shí)費(fèi)力。另外，積雪草中總苷元的含量明顯低于總苷，因此從積雪草中直接獲得的總苷元的量相對(duì)較少，而積雪草總苷的分離純化方法比較成熟，此外皂苷類物質(zhì)較易水解，因此從積雪草總苷出發(fā)進(jìn)行7乂解而獲得積雪草總苷元是一種有效的途徑。本發(fā)明擬在無(wú)機(jī)堿的水溶液中水解積雪草總苷結(jié)合結(jié)晶工藝制備積雪草總苷元。本發(fā)明積雪草總苷元主要由積雪草酸、羥基積雪草酸和多米諾積雪草酸組成，這三種組分的質(zhì)量含量^90%。本方法積雪草總苷元產(chǎn)品收率和純度高，產(chǎn)品可用原料藥或者進(jìn)一步分離得到不同的積雪草酸產(chǎn)品；積雪草總苷元產(chǎn)品作為藥物的應(yīng)用范圍包括治療皮膚創(chuàng)傷、抗抑郁、抗阿爾茨海默病以及保肝、保護(hù)心腦血管和誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡等；同時(shí)該方法工藝過(guò)程簡(jiǎn)單、所需投資少、易于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種積雪草總苷堿水解制備積雪草總苷元的方法。方法的步驟如下1)在無(wú)機(jī)堿的水溶液中分批加入積雪草總苷原料，在459(TC下水解1~24h;2)水解液加入酸，調(diào)節(jié)pH值至2-4，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物；3)沉淀物晾干后加入有機(jī)溶劑溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得積雪草總苷元產(chǎn)品。其中步驟l)中所用的無(wú)機(jī)堿為NaOH、KOH或Na2C03，無(wú)機(jī)堿水溶液中無(wú)機(jī)堿的濃度為0.1-2mol/L;水解溫度為45~90°C，其中較佳溫度為55~80°C;水解時(shí)間為l24h，其中較佳水解時(shí)間為215h;步驟2)中調(diào)節(jié)pH值所用酸為鹽酸或硫酸；步驟3)中的有機(jī)溶劑為甲醇或乙醇，有機(jī)溶劑的用量為5~30mL/g沉淀物(沉淀物經(jīng)晾干后稱量)；步驟3)中水的用量為有機(jī)溶劑體積的8~16倍。步驟l)中積雪草總苷原料采用分批方式加入到無(wú)機(jī)堿的水溶液中，根據(jù)積雪草總苷原料加入量的不同一般分25批，加料時(shí)間一般控制在反應(yīng)時(shí)間的30%以內(nèi)。本發(fā)明積雪草總苷元主要由積雪草酸、羥基積雪草酸和多米諾積雪草酸組成，這三種組分的質(zhì)量含量^90%。本方法積雪草總苷元產(chǎn)品收率和純度高，產(chǎn)品可用原料藥或者進(jìn)一步分離得到不同的積雪草酸產(chǎn)品；積雪草總苷元產(chǎn)品作為藥物的應(yīng)用范圍包括治療皮膚創(chuàng)傷、抗抑郁、抗阿爾茨海默病以及保肝、保護(hù)心腦血管和誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡等；同時(shí)該方法工藝過(guò)程簡(jiǎn)單、所需投資少、易于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化。附圖是積雪草總苷堿水解制備積雪草總苷元的工藝流程簡(jiǎn)圖。具體實(shí)施例方式本發(fā)明所使用的積雪草總苷原料購(gòu)自廣西昌洲天然藥業(yè)有限公司，經(jīng)檢測(cè)積雪草總苷質(zhì)量含量為80.3%，其中積雪草苷的質(zhì)量含量為30.0%，羥基積雪草苷與多米諾積雪草苷的質(zhì)量含量合占50.3%。積雪草總苷和積雪草總苷元含量采用高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定，采用外標(biāo)法定量。采用AgilentllOO液相色譜分析系統(tǒng)，分析條件如下EclipseXDB—C18反相柱((D4.6mmx250mm,5pm,Agilent);采用梯度洗脫，流速0.6mL/min;柱溫為35'C;檢測(cè)波長(zhǎng)210nm。表1HPLC法測(cè)定積雪草總苷和積雪草總苷元的流動(dòng)相梯度<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>以下用實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的工藝方法作進(jìn)一步的說(shuō)明。本發(fā)明的保護(hù)范圍不受實(shí)施例的限制，本發(fā)明的保護(hù)范圍由權(quán)利要求書(shū)決定。實(shí)施例1在1L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入0.1mol/LNaOH水溶液500mL，放入90'C的恒溫水浴中，開(kāi)攪拌和冷凝水，分2批加入積雪草總苷原料10g(反應(yīng)2h后加入第二批)，水解8h;水解液加入鹽酸，調(diào)節(jié)pH值至24，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物，沉淀物晾干后稱重得4.2g;收集晾干后的沉淀物加入21mL甲醇溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入168mL水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得2.5g積雪草總苷元產(chǎn)品，產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析積雪草總苷元的質(zhì)量含量79.5%。實(shí)施例2在1L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入0.3mol/LKOH水溶液500mL，放入85'C的恒溫水浴中，開(kāi)攪拌和冷凝水，分3批加入積雪草總苷原料20g(總加料時(shí)間為lh)，水解4h;水解液加入硫酸，調(diào)節(jié)pH值至2-4，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物，沉淀物晾干后稱重得8.1g;收集晾干后的沉淀物加入81mL乙醇溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入810mL水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得5.8g積雪草總苷元產(chǎn)品，產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析積雪草總苷元的質(zhì)量含量89.6%。實(shí)施例3在1L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入0.5mol/LNa2C03水溶液500mL，放入80'C的恒溫水浴中，開(kāi)攪拌和冷凝水，分4批加入積雪草總苷原料30g(總加料時(shí)間為1.5h)，水解5h;水解液加入鹽酸，調(diào)節(jié)pH值至24，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物，沉淀物晾干后稱重得12.3g;收集晾干后的沉淀物加入184.5mL乙醇溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入2214mL水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得8.8g積雪草總苷元產(chǎn)品，產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析積雪草總苷元的質(zhì)量含量90.1%。實(shí)施例4在1L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入0.7mol/LNaOH水溶液500mL，放入75"C的恒溫水浴中，開(kāi)攪拌和冷凝水，分5批加入積雪草總苷原料40g(總加料時(shí)間為1.5h)，水解5h;水解液加入硫酸，調(diào)節(jié)pH值至24，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物，沉淀物晾干后稱重得16.4g;收集晾干后的沉淀物加入328mL甲醇溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入4592mL水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得11.2g積雪草總苷元產(chǎn)品，產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析積雪草總苷元的質(zhì)量含量90.5%。實(shí)施例5在1L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入0.9mol/LKOH水溶液500mL，放入7(TC的恒溫水浴中，開(kāi)攪拌和冷凝水，分6批加入積雪草總苷原料50g(總加料時(shí)間為1.5h)，水解5h;水解液加入鹽酸，調(diào)節(jié)pH值至24，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物，沉淀物晾干后稱重得20.3g;收集晾干后的沉淀物加入507.5mL甲醇溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入8120mL水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得15.1g積雪草總苷元產(chǎn)品，產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析積雪草總苷元的質(zhì)量含量89.4%。實(shí)施例6在1L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入1.1mol/LNa2C03水溶液500mL，放入65"C的恒溫水浴中，開(kāi)攪拌和冷凝水，分2批加入積雪草總苷原料10g(反應(yīng)1.5h后加入第二批)，水解6h;水解液加入硫酸，調(diào)節(jié)pH值至24，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物，沉淀物晾干后稱重得4.1g;收集晾干后的沉淀物加入123mL乙醇溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入2214mL水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得2.4g積雪草總苷元產(chǎn)品，產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析積雪草總苷元的質(zhì)量含量90.1%。實(shí)施例7在1L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入1.3mol/LNaOH水溶液500mL，放入60'C的恒溫水浴中，開(kāi)攪拌和冷凝水，分3批加入積雪草總苷原料20g(總加料時(shí)間為2h)，水解8h;水解液加入鹽酸，調(diào)節(jié)pH值至24，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物，沉淀物晾干后稱重得8.2g;收集晾干后的沉淀物加入41mL乙醇溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入738mL水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得5.3g積雪草總苷元產(chǎn)品，產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析積雪草總苷元的質(zhì)量含量90.3%。實(shí)施例8在1L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入1.5mol/LKOH水溶液500mL，放入55°C的恒溫水浴中，開(kāi)攪拌和冷凝水，分4批加入積雪草總苷原料30g(總加料時(shí)間為3h)，水解14h;水解液加入硫酸，調(diào)節(jié)pH值至24,沉淀后過(guò)濾，得沉淀物，沉淀物晾干后稱重得12.2g;收集晾干后的沉淀物加入122mL甲醇溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入1952mL水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得8.1g積雪草總苷元產(chǎn)品，產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析積雪草總苷元的質(zhì)量含量90.0%。實(shí)施例9在1L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入1.7mol/LKOH水溶液500mL，放入50'C的恒溫水浴中，開(kāi)攪拌和冷凝水，分5批加入積雪草總苷原料40g(總加料時(shí)間為4.5h)，水解18h;水解液加入鹽酸，調(diào)節(jié)pH值至24，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物，沉淀物晾干后稱重得17.0g;收集晾干后的沉淀物加入255mL甲醇溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入3570mL水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得12.0g積雪草總苷元產(chǎn)品，產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析積雪草總苷元的質(zhì)量含量84.8%。實(shí)施例10在1L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入2mol/LNaOH水溶液500mL，放入45。C的恒溫水浴中，開(kāi)攪拌和冷凝水，分6批加入積雪草總苷原料50g(總加料時(shí)間為7h)，水解24h;水解液加入硫酸，調(diào)節(jié)pH值至24，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物，沉淀物晾干后稱重得21.1g;收集晾干后的沉淀物加入422mL乙醇溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入5064mL水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得14.7g積雪草總苷元產(chǎn)品，產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析積雪草總苷元的質(zhì)量含量80.4%。實(shí)施例11在1L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入0.5mol/LKOH水溶液500mL，放入55°C的恒溫水浴中，開(kāi)攪拌和冷凝水，分3批加入積雪草總苷原料20g(總加料時(shí)間為3h)，水解16h;水解液加入鹽酸，調(diào)節(jié)pH值至24，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物，沉淀物晾干后稱重得8.2g;收集晾干后的沉淀物加入205mL乙醇溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入2050mL水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得5.6g積雪草總苷元產(chǎn)品，產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析積雪草總苷元的質(zhì)量含量90.3%。實(shí)施例12在1L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入1.0mol/LNa2C03水溶液500mL，放入60'C的恒溫水浴中，開(kāi)攪拌和冷凝水，分4批加入積雪草總苷原料30g(總加料時(shí)間為2h),水解9h;水解液加入硫酸，調(diào)節(jié)pH值至24，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物，沉淀物晾干后稱重得12.2g;收集晾干后的沉淀物加入366mL甲醇溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入2928mL水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得8.8g積雪草總苷元產(chǎn)品，產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析積雪草總苷元的質(zhì)量含量90.2%。實(shí)施例13在1L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入1.5mol/LNaOH水溶液500mL，放入65'C的恒溫水浴中，開(kāi)攪拌和冷凝水，分5批加入積雪草總苷原料40g(總加料時(shí)間為1.5h)，水解7h;水解液加入鹽酸，調(diào)節(jié)pH值至24，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物，沉淀物晾干后稱重得16.0g;收集晾干后的沉淀物加入80mL甲醇溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入800mL水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得11.7g積雪草總苷元產(chǎn)品，產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析積雪草總苷元的質(zhì)量含量90.4%。實(shí)施例14在1L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入0.2mol/LKOH水溶液500mL，放入7(TC的恒溫水浴中，開(kāi)攪拌和冷凝水，分3批加入積雪草總苷原料20g(總加料時(shí)間為2h)，水解8h;水解液加入硫酸，調(diào)節(jié)pH值至24，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物，沉淀物晾干后稱重得8.1g;收集晾干后的沉淀物加入81mL乙醇溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入972mL水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得5.6g積雪草總苷元產(chǎn)品，產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析積雪草總苷元的質(zhì)量含量90.3%。實(shí)施例15在1L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入0.4mol/LNa2C03水溶液500mL，放入75'C的恒溫水浴中，開(kāi)攪拌和冷凝水，分4批加入積雪草總苷原料30g(總加料時(shí)間為1.5h)，水解6h;水解液加入鹽酸，調(diào)節(jié)pH值至24，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物，沉淀物晾干后稱重得12.0g;收集晾干后的沉淀物加入180mL乙醇溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入2520mL水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物,結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得9.0g積雪草總苷元產(chǎn)品，產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析積雪草總苷元的質(zhì)量含量90.1%。實(shí)施例16在1L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入0.6mol/LNaOH水溶液500mL，放入80°C的恒溫水浴中，開(kāi)攪拌和冷凝水，分5批加入積雪草總苷原料40g(總加料時(shí)間為lh)，水解3h;水解液加入硫酸，調(diào)節(jié)pH值至24，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物，沉淀物晾干后稱重得16.3g;收集晾干后的沉淀物加入326mL甲醇溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入5216mL水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得11.8g積雪草總苷元產(chǎn)品，產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析積雪草總苷元的質(zhì)量含量90.7%。實(shí)施例17在1L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入0.8mol/LKOH水溶液500mL，放入6(TC的恒溫水浴中，開(kāi)攪拌和冷凝水，分3批加入積雪草總苷原料20g(總加料時(shí)間為1.5h)，水解6h;水解液加入鹽酸，調(diào)節(jié)pH值至2-4，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物，沉淀物晾干后稱重得8.1g;收集晾干后的沉淀物加入202.5mL甲醇溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入2025mL水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得5.8g積雪草總苷元產(chǎn)品，產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析積雪草總苷元的質(zhì)量含量91.0%。實(shí)施例18在1L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入1.0mol/LNa2C03水溶液500mL，放入65'C的恒溫水浴中，開(kāi)攪拌和冷凝水，分4批加入積雪草總苷原料30g(總加料時(shí)間為1.5h)，水解5h;水解液加入硫酸，調(diào)節(jié)pH值至24，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物，沉淀物晾干后稱重得12.4g;收集晾干后的沉淀物加入372mL乙醇溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入4464mL水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得8.7g積雪草總苷元產(chǎn)品，產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析積雪草總苷元的質(zhì)量含量90.8%。實(shí)施例19在1L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入0.6mol/LNaOH水溶液500mL，放入7(TC的恒溫水浴中，開(kāi)攪拌和冷凝水，分5批加入積雪草總苷原料40g(總加料時(shí)間為lh)，水解4h;水解液加入鹽酸，調(diào)節(jié)pH值至24，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物，沉淀物晾干后稱重得16.1g;收集晾干后的沉淀物加入161mL乙醇溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入2254mL水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得11.8g積雪草總苷元產(chǎn)品，產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析積雪草總苷元的質(zhì)量含量91.2%。實(shí)施例20在1L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入0.5mol/LKOH水溶液500mL，放入75'C的恒溫水浴中，開(kāi)攪拌和冷凝水，分3批加入積雪草總苷原料20g(總加料時(shí)間為45min)，水解3h;水解液加入硫酸，調(diào)節(jié)pH值至2-4，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物，沉淀物晾干后稱重得8.3g;收集晾干后的沉淀物加入124.5mL甲醇溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入1992mL水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得5.9g積雪草總苷元產(chǎn)品，產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析積雪草總苷元的質(zhì)量含量90.6%。實(shí)施例21在1L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入0.4mol/LNaOH水溶液500mL，放入8(TC的恒溫水浴中，開(kāi)攪拌和冷凝水，分4批加入積雪草總苷原料30g(總加料時(shí)間為30min)，水解3h;水解液加入鹽酸，調(diào)節(jié)pH值至2-4，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物，沉淀物晾干后稱重得12.4g;收集晾干后的沉淀物加入248mL甲醇溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入2976mL水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得8.9g積雪草總苷元產(chǎn)品，產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析積雪草總苷元的質(zhì)量含量90.7%。實(shí)施例22在1L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入1.5mol/LKOH水溶液500mL，放入90°C的恒溫水浴中，開(kāi)攪拌和冷凝水，分2批加入積雪草總苷原料10g(反應(yīng)15min后加入第二批)，水解lh;水解液加入硫酸，調(diào)節(jié)pH值至24，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物，沉淀物晾干后稱重得3.9g;收集晾干后的沉淀物加入97.5mL乙醇溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入1365mL水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得2.2g積雪草總苷元產(chǎn)品，產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析積雪草總苷元的質(zhì)量含量87.1%。權(quán)利要求1.一種積雪草總苷堿水解制備積雪草總苷元的方法，其特征在于，方法的步驟如下1)在無(wú)機(jī)堿的水溶液中分批加入積雪草總苷原料，在45～90℃下水解1～24h；2)水解液加入酸，調(diào)節(jié)pH值至2～4，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物；3)沉淀物晾干后加入有機(jī)溶劑溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得積雪草總苷元產(chǎn)品。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種積雪草總苷堿水解制備積雪草總苷元的方法，其特征在于步驟l)中的無(wú)機(jī)堿為NaOH、KOH或Na2C03。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種積雪草總苷堿水解制備積雪草總苷元的方法，其特征在于步驟l)中的無(wú)機(jī)堿的濃度為0.1~2mol/L。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種積雪草總苷堿水解制備積雪草總苷元的方法,其特征在于步驟l)中的水解溫度為5580°C。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種積雪草總苷堿水解制備積雪草總苷元的方法，其特征在于步驟l)中的水解時(shí)間為2~15h。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種積雪草總苷堿水解制備積雪草總苷元的方法，其特征在于步驟2)中的調(diào)節(jié)pH值所用酸為鹽酸或硫酸。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種積雪草總苷堿水解制備積雪草總苷元的方法，其特征在于步驟3)中的有機(jī)溶劑為甲醇或乙醇。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種積雪草總苷堿水解制備積雪草總苷元的方法，其特征在于步驟3)中的有機(jī)溶劑的用量為5~30mL/g沉淀物。9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種積雪草總苷堿水解制備積雪草總苷元的方法，其特征在于步驟3)中的水的用量為有機(jī)溶劑體積的816倍。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種積雪草總苷堿水解制備積雪草總苷元的方法。方法的步驟如下1)在無(wú)機(jī)堿的水溶液中分批加入積雪草總苷原料，在45～90℃下水解1～24h；2)水解液加入酸，調(diào)節(jié)pH值至2～4，沉淀后過(guò)濾，得沉淀物；3)沉淀物晾干后加入有機(jī)溶劑溶解、活性炭脫色、過(guò)濾，濾液加入水結(jié)晶，經(jīng)過(guò)濾后得結(jié)晶物，結(jié)晶物再經(jīng)真空干燥后得積雪草總苷元產(chǎn)品。本發(fā)明積雪草總苷元產(chǎn)品收率和純度高，產(chǎn)品可用原料藥或者進(jìn)一步分離得到不同的積雪草酸產(chǎn)品；積雪草總苷元產(chǎn)品作為藥物的應(yīng)用范圍包括治療皮膚創(chuàng)傷、抗抑郁、抗阿爾茨海默病以及保肝、保護(hù)心腦血管和誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡等；同時(shí)該方法工藝過(guò)程簡(jiǎn)單、所需投資少、易于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化。文檔編號(hào)C07J63/00GK101456894SQ200910095289公開(kāi)日2009年6月17日申請(qǐng)日期2009年1月8日優(yōu)先權(quán)日2009年1月8日發(fā)明者呂秀陽(yáng),音李,鄭興芳申請(qǐng)人:浙江大學(xué)