專利名稱：用作PI3K抑制劑的噻吩并[3,2-d]嘧啶的衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及嘧啶衍生物和其作為磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制劑 的用途。
背景技術(shù)：
磷脂酰肌醇(下文縮寫為"PI")是在細(xì)胞膜中發(fā)現(xiàn)的多種磷脂中的 一種。近年來已經(jīng)清楚PI在細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中起重要作用。在二十世 紀(jì)八十年代后期，發(fā)現(xiàn)PI3激酶(PI3K)是使磷脂酰肌醇的肌醇環(huán)的3 位磷酸化的酶(D. Whitman等，1988， Nature, 332, 664)。
最初認(rèn)為PI3K是單酶，但現(xiàn)在業(yè)已闡明PI3K存在多種亞型。每 種亞型具有自己的調(diào)節(jié)活性機(jī)理。業(yè)已基于其體外底物特異性鑒定了 3類主要的PI3K (B. Vanhaesebroeck,1997, Trend in Biol. Sci, 22， 267)。 I類PI3K的底物是PI、 PI 4-磷酸酯(PI4P)和PI 4，5-二磷酸酯(PI (4,5) P2)。根據(jù)其激活機(jī)制，I類PI3K進(jìn)一步分為兩組Ia類和Ib類。Ia類 PI3K包括PI3Kpll0a、 pl 10p和pi 10S亞型，其轉(zhuǎn)導(dǎo)來自酪氨酸激酶 偶聯(lián)性受體的信號(hào)。Ib類PI3K包括通過G蛋白偶聯(lián)性受體活化的 pll0y亞型。已知PI和PI(4)P為II類PI3K的底物。II類PI3K包括 PI3KC2a、 C2(3和C2Y亞型，其特征為在C末端含有C2結(jié)構(gòu)域。III 類PI3K底物只有PI。
在PI3K亞型中，迄今研究最廣泛的是Ia類亞型。Ia類的三個(gè)亞型是催化性的110 kDa亞單位和調(diào)節(jié)性85 kDa或55 kDa亞單位的異 源二聚體。所迷調(diào)節(jié)性亞單位含有SH2結(jié)構(gòu)域，并結(jié)合通過具酪氨酸 激酶活性的生長(zhǎng)因子受體或致癌基因產(chǎn)物磷酸化的酪氨酸殘基，藉此 誘導(dǎo)pl 10催化性亞單位(使其脂類底物磷酸化)的PI3K活性。因此， Ia類亞型被認(rèn)為與細(xì)胞增殖和致癌作用有關(guān)。
WO 01/083456闡述一系列具有PI3K抑制劑活性并抑制癌細(xì)胞生 長(zhǎng)的縮合雜芳基衍生物。
發(fā)明簡(jiǎn)述
現(xiàn)在業(yè)已發(fā)現(xiàn)特定的噻吩并嘧啶是具有類似藥物的物理化學(xué)性 質(zhì)和藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)的PI3K的有效抑制劑。所述化合物相對(duì)于Ib類 PI3K表現(xiàn)出對(duì)Ia類PI3K更高的選擇性，特別是對(duì)P110a亞型的選擇 性。
因此，本發(fā)明提供式(I)噻吩并嘧啶的化合物或其藥學(xué)上可接受的
o
發(fā)明詳述
式(I)噻吩并嘧啶為2-(lH-吲唑-4-基)-6-(4-曱磺?；?哌嗪-l-基甲 基)-4-嗎啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶。
用于制備本發(fā)明化合物的合適的合成策略是采用式(II)前體甲醛:從該前體出發(fā)，合成包括以任一次序?qū)嵤┾Z介導(dǎo)(Suzuki型)交叉 偶聯(lián)反應(yīng)和還原性胺化。因此，可通過包括以下步驟的方法來制備本 發(fā)明化合物
(a)使式(II)化合物與式(IV)的硼酸或其酯在Pd催化劑存在下作 用，并使得到的式(III)化合物在合適還原劑存在下與式(V)胺作用
o
z 、
其中每一個(gè)Ris為H或C廣C6烷基，或兩個(gè)OR"基團(tuán)與其所連接 的硼原子形成硼酸頻哪醇酯基團(tuán)Z卜 .。'
(b)在合適還原劑存在下使式(II)化合物與式(V)胺作用，并使得
到的式(VI)化合物與式(IV)的硼酸或其酯在Pd催化劑存在下作用
o
z 、
、
HN
V<formula>formula see original document page 13</formula><formula>formula see original document page 14</formula>(IV)
其中每一個(gè)Ris為H或C,-C6烷基，或兩個(gè)OR"基團(tuán)與其所連接的硼原子形成硼酸頻哪醇酯基團(tuán)。
此外，本發(fā)明進(jìn)一步提供用于制備如上所定義本發(fā)明化合物的方法，該方法包括使式(VI)化合物與式(IV)的硼酸或其酯在Pd催化劑存
在下作用
<formula>formula see original document page 14</formula>因此所定義的方法可進(jìn)一 步包括通過使式(II)化合物與式(IV)的硼酸或其酯在Pd催化劑存在下作用來制備式(III)化合物<formula>formula see original document page 14</formula>B(OR15):
(IV)
其中每一個(gè)Ris為h或c,-C6烷基，或兩個(gè)OR"基團(tuán)與其所連接 的硼原子形成硼酸頻哪醇酯基團(tuán)。
因此所定義的方法進(jìn)一步包括通過在合適還原劑存在下使式(n)
化合物與式(V)胺作用來制備式(VI)化合物
o
、Z
么、N
N
'CI
、 〉
(V)
可用常規(guī)技術(shù)制備式(I)噻吩并嘧啶的藥學(xué)上可接受的鹽。通常該 方法包括使如上所定義的式(I)噻吩并嘧啶與合適的酸在合適溶劑中 作用。
在本發(fā)明如上所定義的方法中，胺化步驟和Pd介導(dǎo)的交叉偶聯(lián) 步驟都在常規(guī)條件下發(fā)生。鈀催化劑可為通常用于Suzuki型交叉偶聯(lián) 的任何催化劑，例如PdCl2(PPh3)2。還原劑通常為硼氫化物，例如 NaBH(OAc)3、 NaBH4或NaCNBH4,特別是NaBH(OAc)3。
硼酸頻哪醇酯可例如通過以下參考實(shí)施例5和6中的任一個(gè)所述 的方法來制備。
可通過包括使式(VII)化合物與鋰化劑接著與N，N，-二曱基曱酰胺
HN N—s(DMF)作用的方法來制備如上所定義式(II)化合物:
o
Z 、
該反應(yīng)通常通過將存于非極性有機(jī)溶劑(例如烴溶劑，例如己烷) 中的鋰化劑溶液加入到存于有機(jī)溶劑例如四氫呋喃(THF)的式(IX)化 合物混懸液中來進(jìn)行。若使用THF，則在約-78。C的低溫下加入。鋰 化劑通常為烷基鋰，例如正丁基鋰。
所述溶劑通常為醇，例如甲醇。所述反應(yīng)通常在室溫進(jìn)行。 可通過在參考實(shí)施例1中所述的方法，或通過與該方法類似的方
法制備式(vm)化合物。
可通過常規(guī)方法使式(I)噻吩并嘧咬轉(zhuǎn)化為藥學(xué)上可接受的鹽，并 可使鹽轉(zhuǎn)化為游離化合物。藥學(xué)上可接受的鹽的實(shí)例包括與無機(jī)酸的 鹽，例如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、硝酸和磷酸；和與有機(jī)酸的 鹽，例如曱磺酸、苯磺酸、曱酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、草酸、丙 二酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬 酸、乙磺酸、天冬氨酸和谷氨酸。通常所述鹽為甲磺酸鹽、鹽酸鹽、 磷酸鹽、苯^黃酸鹽或^L酸鹽。最通常的所述鹽為甲磺酸鹽或鹽酸鹽。
制備如上所定義的式(VII)化合物:所述鹽，例如與上迷任何無^^或有;tJU酸的鹽，可為單鹽或雙鹽。 因此，例如曱磺酸鹽可為單曱磺酸鹽或雙甲磺酸鹽。
式(I)化合物和其鹽可作為水合物或溶劑化物存在。
業(yè)已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物在生物學(xué)試驗(yàn)中為PI3激酶抑制劑。所述 化合物相比于Ib類PI3激酶對(duì)Ia類PI3激酶更具選擇性，通常相比于 Ib類PI3激酶對(duì)Ia類PI3激酶表現(xiàn)出至少高達(dá)20倍的選擇性。所述 化合物特別對(duì)pllOa同種型具有選擇性。
由此本發(fā)明化合物可用作PI3激酶尤其是Ia類PI3激酶的抑制劑。 因此，本發(fā)明化合物可用于治療起因于異常細(xì)胞生長(zhǎng)、異常細(xì)胞功能 或異常細(xì)胞行為的疾病或病癥。這樣的異常細(xì)胞生長(zhǎng)、異常細(xì)胞功能 或異常細(xì)胞行為通常與PI3激酶有關(guān)。這樣的疾病和病癥的實(shí)例由 Drees等在Expert Opin. Ther. Patents (2004) 14 (5): 703 — 732中論述。 這些疾病和病癥包括癌癥、免疫性疾病、心血管病、病毒感染、炎 癥、代謝/內(nèi)分泌紊亂和神經(jīng)障礙。代謝/內(nèi)分泌紊亂實(shí)例包括糖尿病 和月巴胖癥。
可用本發(fā)明化合物治療的癌癥實(shí)例包括白血病、腦瘤、腎癌、 胃癌和皮膚癌、膀胱癌、乳腺癌、子宮癌、肺癌、結(jié)腸癌、前列腺癌、 卵巢癌和胰腺癌。因此，可通過用包括給予如上所定義的本發(fā)明化合
物的方法治療患有免疫性疾病、癌癥、心血管病、病毒感染、炎癥、 代謝/內(nèi)分泌紊亂或神經(jīng)障礙的人類或動(dòng)物患者。藉此可改善或改進(jìn)患 者的癥狀。
可依照本發(fā)明方法治療的患者的疾病和病癥包括但不限于癌 癥、中風(fēng)、糖尿病、肝腫大、心血管病、阿爾茨海默病、嚢腫性纖維 化、病毒病、自身免疫病、動(dòng)脈硬化癥、再狹窄、牛皮蘚、變態(tài)反應(yīng) 性疾病、炎癥、神經(jīng)障礙、激素相關(guān)疾病、與器官移植有關(guān)的病癥、 免疫缺陷病、破壞性骨病、增殖性疾病、傳染病、與細(xì)胞死亡有關(guān) 的病癥、凝血酶誘導(dǎo)的血小板聚集、慢性骨髓性白血病(CML)、肝病、 涉及T細(xì)胞活化的病理性免疫病和CNS病。在一個(gè)實(shí)施方案中，用式I化合物和藥學(xué)上可接受的載體、輔藥或溶媒治療人類患者，其中
所述式I化合物以能檢測(cè)到抑制PI3激酶活性的量存在。
可依照本發(fā)明方法治療的癌癥包括但不限于乳腺癌、卵巢 癌、宮頸癌、前列腺癌、睪丸癌、泌尿生殖道癌、食道癌、喉癌、 成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胃癌、皮膚癌、角化棘皮瘤、肺 癌、表皮樣癌、大細(xì)胞癌、非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)、小細(xì)胞癌、肺腺 癌、骨癌、結(jié)腸癌、腺瘤、胰腺癌、腺癌、甲狀腺癌、濾泡癌、未分 化癌、乳頭狀癌、精原細(xì)胞瘤、黑素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和膽 管癌、腎癌、骨髓病、淋巴病、毛細(xì)胞癌、口腔癌和咽(口)癌、唇 癌、舌癌、嘴癌、咽癌、小腸癌、結(jié)直腸癌、大腸癌、直腸癌、腦 癌和中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌、何杰金氏病和白血病。
可依照本發(fā)明方法治療的心血管病包括但不限于再狹窄、心臟 擴(kuò)大癥、動(dòng)脈硬化癥、心肌梗塞和充血性心力衰竭。
海默病、帕金森氏病、肌萎縮性側(cè)索硬化癥、亨廷頓病和由創(chuàng)傷性損 傷、谷氨酸神經(jīng)毒性和組織缺氧引起的腦缺血和神經(jīng)變性疾病。
可依照本發(fā)明方法治療的炎癥性疾病包括但不限于風(fēng)濕性關(guān) 節(jié)炎、牛皮蘚、接觸性皮炎和遲發(fā)性過敏性反應(yīng)。
本發(fā)明化合物除了具有生物化學(xué)效能外，還表現(xiàn)出物理化學(xué)和藥 代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)，這使得其特別好地適合于藥物用途。這在例如以下實(shí) 施例3所述的生物學(xué)測(cè)定結(jié)果中顯示。具體而言，所述化合物在生理 pH時(shí)具有高水溶性；溶解度大于100 ^M。在生理pH時(shí)高溶解度是 需要的，因?yàn)槠涮岣呱锢枚取?br> 該化合物還具有高代謝穩(wěn)定性，特別如通過實(shí)施例3所述肝細(xì)胞 清除測(cè)定所顯示，其中顯示所述化合物具有低肝細(xì)胞清除率。低肝細(xì) 胞清除率與低肝代謝率相關(guān)聯(lián)。由此可了解，本發(fā)明化合物擁有改進(jìn) 的物理化學(xué)和藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)，同時(shí)保留作為PI3激酶抑制劑的生物 化學(xué)效能?？梢远喾N劑型給予本發(fā)明化合物，例如，呈例如片劑、膠嚢劑、 糖衣片或薄膜衣片、液態(tài)溶液劑或混懸劑形式經(jīng)口給藥，或例如肌肉 內(nèi)、靜脈內(nèi)或皮下的經(jīng)胃腸外給藥。因此，可通過注射或輸注給予所 述化合物。
劑量視多種因素而定，包括患者的年齡、體重和病癥和給藥途徑。 日劑量可適當(dāng)?shù)刈兓诿恳惶囟ú±袘?yīng)適應(yīng)個(gè)體需求。然而，當(dāng) 將化合物單獨(dú)給予成年人時(shí)，通常對(duì)每種給藥途徑采用的劑量為
0.0001-50 mg/kg，最通常介于0.001-10 mg/kg體重，例如0.01-1 mg/kg。 這樣的劑量可例如每天給予1-5次。對(duì)于靜脈注射而言，合適的曰劑 量為0.0001-1 mg/kg體重、優(yōu)選0.0001-0.1 mg/kg體重。日劑量可作 為單次劑量或依照分開的給藥計(jì)劃給予。
通常治療人類患者的劑量可介于約10mg-約1000 mg本發(fā)明化合 物之間。典型劑量可為約100mg-約300mg化合物。劑量可每天一次 (QID)、每天2次(BID)或更頻繁地給予，這要視藥代動(dòng)力學(xué)和藥效學(xué) 性質(zhì)而定，包括特定化合物的吸收、分布、代謝和排泄。另外，毒性 因素可影響給藥劑量和給藥方案。當(dāng)經(jīng)口給藥時(shí)，可每日咽下丸劑、 膠嚢劑或片劑，或不那么頻繁地在指定時(shí)間段給予。給藥方案可在多 個(gè)治療周期中重復(fù)。
化合物可經(jīng)調(diào)配用作還包含藥學(xué)上或獸藥學(xué)上可接受的載體或 稀釋劑的藥用或獸用組合物。所述組合物通常按常規(guī)方法制備，并以 藥學(xué)上或獸藥學(xué)上合適的形式給予?？梢砸岳缛缦碌娜魏纬Ｒ?guī)形式 給予化合物
A)經(jīng)口主合予，例如，作為片劑、包衣片、糖衣;^、錠劑、糖4定 劑、水性或油性混懸劑、液態(tài)溶液劑、可分散的散劑或顆粒劑、乳 劑、硬或軟膠嚢或糖漿劑或酏劑。意欲用作口服使用的組合物可按照 本領(lǐng)域用于制備藥物組合物的任何已知方法來制備，為了提供藥學(xué)上 精致而適口的制劑，這樣的組合物可含有一種或多種選自以下的作用 劑甜味劑、矯味劑、著色劑和防腐劑。片劑含有與適用于制備片劑的無毒的藥學(xué)上可接受的賦形劑混
合的活性成分。這些賦形劑可為例如惰性稀釋劑，例如碳酸釣、碳 酸鈉、乳糖、葡萄糖、蔗糖、纖維素、玉米淀粉、土豆淀粉、磷酸鈣 或磷酸鈉；造粒劑和崩解劑，例如玉米淀粉、藻酸、藻酸鹽或淀粉羥 乙酸鈉；粘合劑，例如淀粉、白明膠或阿拉伯膠；潤(rùn)滑劑，例如硅石、 硬脂酸鎂或鈣、硬脂酸或滑石粉；泡騰混合物；染料、甜味劑、濕潤(rùn) 劑，例如卵磷脂、聚山梨醇酯或十二烷基硫酸鹽。片劑可不被包衣， 或可通過已知技術(shù)對(duì)片劑進(jìn)行包衣，以延遲在胃腸道的分解和吸收， 藉此提供經(jīng)較長(zhǎng)時(shí)間的持久作用。例如，可采用延遲時(shí)間的材料例如 單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯?？衫缃柚旌?、制粒、壓片、 糖包衣或薄膜包衣方法以已知方式制備這樣的制劑。
口服使用的制劑也可作為硬明膠膠嚢來提供，其中活性成分與惰 性固態(tài)稀釋劑(例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土)混合，或作為軟明膠膠 嚢來提供，其中活性成分同樣呈遞，或與水或油性介質(zhì)例如花生油、 液態(tài)石蠟或橄欖油混合。
水性混懸劑含有與適于制備水性混懸劑的賦形劑混合的活性物 質(zhì)。這樣的賦形劑有懸浮劑，例如羧曱基纖維素鈉、甲基纖維素、 羥丙基曱基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、西黃蓍膠和阿拉伯膠； 可為天然存在的磷脂的分散劑或濕潤(rùn)劑，例如卵磷脂，或環(huán)氧烷烴與 脂肪酸的縮合物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)，或環(huán)氧乙烷與長(zhǎng)鏈脂肪醇 的縮合物(例如十七亞乙氧基十六醇(heptadecaethyleneoxycetanol))，或 環(huán)氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合物(例如聚氧乙烯山 梨醇單油酸酯)，或環(huán)氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的縮合 物(例如聚氧乙烯山梨坦單油酸酯)。
所述水性混懸劑也可含有 一種或多種防腐劑(例如對(duì)羥基苯曱酸 乙酯或?qū)αu基苯曱酸丙酯)、 一種或多種著色劑(例如蔗糖或糖精)?？赏ㄟ^讓活性成分懸浮在植物油(例如花生油、橄欖油、芝麻油或 椰子油)或礦物油(例如液態(tài)石蠟)中來調(diào)配油性混懸劑。油性混懸劑可 含有增稠劑，例如蜂蠟、硬石蠟或十六醇。
可加入甜味劑(例如上述甜味劑)和矯味劑以提供適口的口服制 劑?？赏ㄟ^加入抗氧化劑例如抗壞血酸來保護(hù)這些組合物。適用于通 過加入水來制備水性混懸劑的可分散粉末和顆粒，提供與分散劑或濕 潤(rùn)劑、懸浮劑和一種或多種防腐劑混合的活性成分。合適的分散劑或 濕潤(rùn)劑和懸浮劑由上面已經(jīng)提出的那些作為例子。還可存在另外的賦 形劑，例如甜味劑、矯味劑和著色劑。
本發(fā)明藥物組合物還可呈水包油乳劑形式。油相可為植物油，例 如橄欖油或花生油，或礦物油例如液態(tài)石蠟，或它們的混合物。合適
的乳化劑可為天然存在的樹膠，例如阿拉伯膠或西黃蓍膠；天然存在
的磷脂(例如黃豆卵磷脂)，和衍生自脂肪酸與己糖醇酐的酯或偏酯(例 如油酸山梨坦)，和所述偏酯與環(huán)氧乙烷的縮合物(例如聚氧乙烯山梨 坦單油酸酯)。乳劑還可含有甜味劑和矯味劑?？捎锰鹞秳├绺视?、 山梨醇或蔗糖調(diào)配糖漿劑和酏劑。特別地，糖尿病患者的糖漿劑僅可 含有不代謝為葡萄糖或僅極少量代謝為葡萄糖的產(chǎn)品(例如山梨醇)作 為載體。
這樣的制劑還可含有緩和劑、防腐劑和矯味劑和著色劑； B)呈可注射無菌水性或油性混懸劑形式皮下經(jīng)胃腸外給予，通 過靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、胸骨內(nèi)或通過輸注技術(shù)。該混懸劑可通過已知技 術(shù)用上面已經(jīng)提及的那些適合分散的濕潤(rùn)劑和懸浮劑來調(diào)配。無菌注 射劑還可為存于無毒的胃腸外可接受稀釋劑或溶劑中的無菌注射溶 液劑或混懸劑，例如作為存于1,3-丁二醇中的溶液劑。
在可采用的可接受溶媒和溶劑中有水、Ringer溶液和等滲氯化鈉 溶液。另外，無菌不揮發(fā)性油通常用作溶劑或懸浮媒介。為此目的可 使用任何刺激性小的不揮發(fā)性油，包括合成的甘油單酯或甘油二酯。 另外，發(fā)現(xiàn)脂肪酸例如油酸用于制備注射劑；C) 以氣霧劑或用于噴霧器的溶液形式通過吸入給予；
D) 以栓劑形式直腸給予，通過使藥物與合適的無刺激性的賦形 劑混合來制備栓劑，所述賦形劑在一般溫度下為固態(tài)但在直腸溫度 下為液態(tài)，因此將在直腸融化以釋放藥物。這樣的材料有可可油和聚
乙二醇；
E) 以霜?jiǎng)?、軟膏劑、膠凍劑、洗眼劑、溶液劑或混懸劑形式局部 給予；
F) 以陰道栓、棉球、霜?jiǎng)?、凝膠劑、糊劑、泡沫劑或含有除活性 成分外還有為本領(lǐng)域所知合適載體的噴霧制劑的形式陰道給予。
可制備本發(fā)明化合物的緩釋制備物。合適的緩釋制備物實(shí)例包括 含有式I化合物的固態(tài)疏水聚合物半滲透性基質(zhì)，該基質(zhì)呈成形制品 的形式，例如薄膜或微膠嚢。緩釋基質(zhì)實(shí)例包括聚酯、水凝膠(例如 聚(2-羥乙基-曱基丙烯酸酯)或聚(乙烯醇))、聚交酯(美國(guó)專利第 3,773,919號(hào))、L-谷氨酸和Y-乙基-L-谷氨酸酯共聚物、不可降解的乙 烯-乙酸乙烯、可降解的乳酸-乙醇酸共聚物例如LUPRON DEPOT (由乳酸-乙醇酸共聚物和乙酸亮丙瑞林(leuprolide)組成的可注射微球 體)和聚-D-(-)-3-羥基丁酸。
可將本發(fā)明化合物單獨(dú)或與其它治療藥物聯(lián)合用于治療本文所 述疾病或病癥，例如高度增殖性(hyperproliferative)疾病(例如癌癥)。在 某些實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物與具有抗高度增殖性質(zhì)或用于治療高 度增殖性疾病(例如癌癥)的第二種化合物在藥物組合制劑中聯(lián)合，或 作為聯(lián)合治療在給藥方案中聯(lián)合。藥物組合物制劑或給藥方案中的第 二種化合物優(yōu)選具有補(bǔ)充本發(fā)明化合物的活性，以便它們相互之間不 起反作用。這樣的化合物適當(dāng)?shù)匾詫?duì)計(jì)劃目的有效的量存在于組合 中。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明組合物包含與化療劑(例如本文所述的 化療劑)聯(lián)合的本發(fā)明化合物。
可作為同時(shí)或序貫方案給予聯(lián)合治療。當(dāng)序貫給藥時(shí)，可以2次 或多次給藥來給予組合。聯(lián)合給藥包括用分開的制劑或單一藥物制劑同時(shí)給予和以任一種次序連續(xù)給藥，其中優(yōu)選有一段時(shí)間兩種(或所有) 活性藥物同時(shí)發(fā)揮其生物學(xué)活性。
上述同時(shí)給予的藥物中任一種的合適劑量為目前使用的劑量，根 據(jù)最近鑒別的藥物和其他化療劑或治療的聯(lián)合作用(協(xié)同作用)可降低 該劑量。
本發(fā)明將在以下實(shí)施例中進(jìn)一 步闡述 參考實(shí)施例1: 2,4-二氯-噻吩并〖3,2-dl嘧啶(VIID
(x) (ix) (viii:
將3-氨基-2-噻吩曱酸曱酯(13.48 g, 85.85mmol)和脲(29.75g, 5當(dāng) 量)的混合物在190。C加熱2小時(shí)。然后將該熱反應(yīng)混合物倒入氫氧化 鈉溶液上，通過過濾去除任何不溶性物質(zhì)。然后酸化(HC1,2N)該混合 物，得到作為白色沉淀的lH-噻吩并[3,2-d]嘧啶-2,4-二酮(IX),其通過 過濾收集并風(fēng)干(9.49g, 66%)。
'H NMR (400 MHz, t/6-DMSO) 6.90(1H, d, A5.2Hz), 8.10(1H， d, J=5.2Hz), 11.60-1 U0(2H， br s)。
將lH-p塞吩并[3,2-d]嘧啶-2，4-二酮(9.49g， 56.49mmol)和三氯氧磷 (150mL)混合物回流加熱6小時(shí)。然后冷卻該反應(yīng)混合物，劇烈攪拌 倒入冰/水上制備沉淀。然后過濾該混合物，得到作為白色固體的2,4-二氯-噻吩并[3，2-d]嘧啶(Vin) (8.68 g, 75%)。
'H NMR (400 MHz, CDC13) 7.56(1H, d, A5.5Hz), 8.13(1H, d, /=5.5Hz)。參考實(shí)施例2: 2-氯-4-嗎啉-4-基-噻吩并3,2-dl嘧啶fVn)
將2,4-二氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶(Vin) (8.68g, 42.34mmo1)、嗎啉 (8.11mL， 2.2當(dāng)量)和MeOH (150mL)混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。然后 過濾該反應(yīng)混合物，用水和MeOH洗滌，得到白色固態(tài)標(biāo)題化合物 (11.04 g, 100%)。
'H NMR (400 MHz, c/6-DMSO)3.74(4H， t, /=4.9Hz)， 3.90(4H, t, 7=4.9Hz), 7'40(1H, d, J^5.6Hz), 8'30(1H， d, J=5.6Hz)。
參考實(shí)施例3: 2-氯-4-嗎啉-4-基-噻吩并3,2-dl嘧啶-6-曱醛(ID
于-78。C向無水THF (40mL)中的2-氯-4-嗎啉-4-基-噻吩并[3,2-d] 嘧啶(VII) (1.75g, 6.85mmol)混懸液中加入2.5M nBuLi的己烷(3.3mL, 1.2當(dāng)量)溶液。攪拌1小時(shí)后，加入無水DMF (796|iL, 1.5當(dāng)量)。將 該反應(yīng)混合物在-78。C攪拌1小時(shí)，然后慢慢升溫至室溫。在室溫下再 過2小時(shí)，將該反應(yīng)混合物倒到冰/水上，制備沉淀。通過過濾收集并風(fēng)干，得到標(biāo)題化合物(1.50g，7715/0)。
'H NMR (400 MHz, c/6-DMSO)3.76(4H, t， 《/=4.9), 3.95(4H, t, A4.9): 8.28(1H, s), 10.20(1H, s)。
參者實(shí)施例4 2-氯-6-(4-甲磺?；?哌嗪-l-基甲基)-4-嗎啉-4-基-噻吩
讓N-BOC-哌。秦和曱磺酰氯一起在二氯曱烷和三乙胺中反應(yīng)，得 到4-曱磺酰基-哌*-1-曱酸叔丁酯。用HC1 (2M)在二氯曱烷中裂解 BOC保護(hù)基，得到l-甲磺?；?哌嗪.HCl鹽。
將2-氯-4-嗎啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-曱醛(n) (l.OOg)、 1-曱磺 ?；?哌嗪(750mg)和原曱酸三曱酯(3，80mL)混合物在1,2-二氯曱烷 (30mL)中于室溫?cái)嚢?小時(shí)。向其中加入三乙酰氧基硼氫化鈉 (900mg)，在室溫將該反應(yīng)混合物攪拌24小時(shí)。然后用鹽水淬滅該混 合物，用二氯曱烷萃取，干燥(MgS04)，真空下去除溶劑。用熱乙酸 乙酯研石爭(zhēng)該殘留物，得到白色固態(tài)標(biāo)題化合物(VI) (l.Olg)。
參考實(shí)施例5 4-(4.4.5,5-四甲基-11.3.21二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-111-
并3,2-dl嘧啶rVI)
o
Z 、
/\\
'引唑(IVa)-路徑1(A) (B) (IVa)
向3-溴-2-曱基苯胺(5.0g, 26.9mmol)的氯仿(50mL)溶液中加入乙酸鉀
(1.05當(dāng)量，28.2mmol，2.77g)。加入乙酸酐(2.0當(dāng)量，53.7mmo1,5.07mL),同時(shí)在冰-水中冷卻。然后于室溫將該混合物攪拌IO分鐘，在該時(shí)間之后形成白色凝膠狀固態(tài)。然后加入18-冠醚-6(0.2當(dāng)量，5.37mmo1， 1.42g)，接著加入亞硝酸異戊酯(2.2當(dāng)量，59.1mmo1，7.94mL)，將該混合物回流加熱18小時(shí)。使該反應(yīng)混合物冷卻，在氯仿(3 x lOOmL)和飽和水性碳酸氫鈉(lOOmL)之間分配。用鹽水洗滌(lOOmL)合并的有機(jī)萃取物，分離并干燥(MgS04)。將粗產(chǎn)物蒸發(fā)到硅石上，通過用20Q/o—40。/。EtOAc-汽油洗脫色語純化，得到橙色固態(tài)l-(4-溴-P引唑-l-基)-乙酮(A) (3.14g,49。/。)和淺橙色體4-溴-lH-吲唑(B) (2.13g, 40%)。
A: 'H NMR (400 MHz, CDC13) 2.80(3H, s), 7.41(1H， t, /:7.8Hz),7.50(1H， d, J=7.8Hz), 8.15(1H， s)， 8.40(1H, d,J:7她)。
B: 'H NMR (400 MHz, CDC13)7.25(1H, t, J^7.3Hz)， 7.33(1H, d, 7=7.3Hz), 7.46(1H， d, /=7.3Hz), 8.11(1H, s)， 10.20(1H, br s)。
向l-(4-溴-。引唑-l-基)-乙酮(3.09g, 12.9mmol)的MeOH (50mL)溶液中加入6iVHCl水溶液(30mL)，將該混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。蒸發(fā)MeOH，在EtOAc(2x50mL)和水(50mL)之間分配該混合物。用鹽水洗滌(50mL)合并的有機(jī)層并干燥(MgSO4)。通過減壓蒸發(fā)去除溶劑，得到4-溴-lH-吲唑(2.36 g, 93%)。
向4-溴-lH-吲唑(500 mg, 2.54mmol)和雙戊酰二硼(1.5當(dāng)量,3.81mmol)的DMSO (20mL)溶液中加入乙酸鉀(3.0當(dāng)量，7.61mmo1,747 mg;在干燥槍中干燥)和PdCl2 (dppf)2 (3 mol%, 0.076mmol, 62 mg)。用氬氣去除該混合物的空氣，在80。C加熱40小時(shí)。使該反應(yīng)混合物冷卻，在水(50mL)和醚(3 x 50mL)之間分配。用鹽水洗滌(50mL)合并的有機(jī)層，分離并干燥(MgS04)。通過用30Q/?！?0。/。EtOAc-汽油洗脫色譜純化粗制物質(zhì)，得到4-(4,4,5，5-四曱基-[l，3,2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-lH-。引唑(369 mg， 60%)和吲唑(60 mg， 20%)的不能分離的3: 1混合物；分離作為膠狀物的標(biāo)題化合物(IVa)，其在靜置凝固后為米白色固體。
'H畫R(400 MHz， ^-DMSO)1.41(12H, s), 7.40(1H， dd, /=8.4Hz,6.9Hz), 7.59(1H， d， J=8.4Hz), 7.67(1H， d, J=6.9Hz), IO.OO(IH, br s)，8.45(1H, s)，和口引唑7'40(1H, t), 7'18(1H, t, J-7.9Hz)， 7'50(1H， d， 7=9.1Hz), 7.77(1H，d，/^7.9Hz), 8.09(1H, s)。雜質(zhì)1.25。
參考實(shí)施例6:4畫(4,4,5,5-四曱基-『1,3,21 二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-lH畫丐l唑(IVaV路徑2向2-曱基-3-硝基苯胺(2.27g, 14.91mmol)的乙酸(60mL)溶液中加入亞硝酸鈉(1.13g, 1.1當(dāng)量)的水(5mL)溶液。2小時(shí)后將該深紅色溶液倒入到水/水上面，通過過濾收集得到的沉淀，得到4-硝基-lH-吲唑(67)(1.98g，81%)。
將4-硝基-lH-p引唑(760mg, 4.68mmo1)、炭上把(10%, cat.)和乙醇(30mL)混合物在氫氣球下攪拌4小時(shí)。然后讓該反應(yīng)混合物通過硅藻土過濾，真空下去除溶劑，得到1H-卩引唑-4-基胺(68)(631mg, 100Q/0)。
在0。C以下將亞硝酸鈉(337mg, 4.89mmol)的水(2mL)溶液滴加到1H-吲唑-4-基胺(631mg， 4.74mmol)的6M鹽酸(7.2mL)混懸液中。攪拌30分鐘后，將四氟硼酸鈉(724mg)加入到該反應(yīng)混合物中。獲得粘性溶液，將其過濾并用水簡(jiǎn)單洗滌，得到深紅色固態(tài)四氟硼酸1H-。引哇-4-重氮鹽(69) (218mg, 20%)。
向無水MeOH (4mL)中充氬氣5分鐘。向其中加入四氟硼酸1H-吲唑-4-重氮鹽(218mg, 0.94mmo1)、雙戊酰二硼(239mg, 1.0當(dāng)量)和[l，l，-雙(二苯基膦)二茂鐵]氯化鈀(II) (20mg)。將該反應(yīng)混合物攪拌5小時(shí)，然后通過硅藻土過濾。用快速色譜純化殘留物，得到所期需的標(biāo)題化合物(IVa) G 17mg)。
參考實(shí)施例7: 2-(111-吲唑-4-基)-4-嗎啉-4-基-逸吩并3.2-(11嗜咬-6-曱醛(III)將2-氯-4-嗎啉-4-基-噻吩并[3，2-d]嘧啶-6-曱醛(n) (100mg，0.35mmol)、 4-(4,4，5,5-四曱基-[l,3,2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-lH-吲唑(70) (95mg, 0.39mmol)和碳酸鈉(112mg)混合物懸浮于甲苯(2.5mL)、乙醇(1.5mL)和水(0.7mL)中。向其中加入氯化雙(二苯基膦)合鈀(II)(13.5mg)，用氬氣充入該反應(yīng)瓶。讓該反應(yīng)混合物在120。C微波照射l小時(shí)，然后在DCM和水之間分配，用鹽水洗滌有機(jī)層，經(jīng)硫酸鎂干燥、過濾和真空蒸發(fā)。用快速色譜純化得到的殘留物，得到標(biāo)題化合物(III) (97mg)。
實(shí)施例1: 2-(lH-吲唑-4-基)-6-(4-甲磺?；?哌噢-l-基甲基)-4-嗎啉-4-基-噻吩并f3,2-dl嘧啶a)
將2-氯-6-(4-曱磺酰基-哌嗪-l-基甲基)-4-嗎啉-4-基-噻吩并[3,2-d]嘧啶(2.00g)、 4-(4,4,5，5-四曱基-[l,3,2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-lH-P引唑(2.26g)、曱苯(24mL)、乙醇(12mL)、水(6mL)、碳酸鈉(1.72g)和PdCl2(PPh3)2(325mg)混合物在微波中加熱到130°C 90分鐘。
使該反應(yīng)混合物冷卻，用氯仿稀釋，用鹽水洗滌，干燥(MgSO》并真空下去除溶劑。用快速色語純化殘留物(乙酸乙酯，然后5%乙酸乙酯/曱醇)，然后用醚研碎，得到所期需的標(biāo)題化合物(1.4g)。
MS數(shù)據(jù)(ESI+): MH+514
麗R數(shù)據(jù)(CDC13): 2.67-2.71(4H, m)， 2.81(3H， s), 3.29-3,33(4H,m)， 3.89(2H， s), 3.89-3.93(4H, m), 4.08-4.12(4H, m),7.41(lH， s)， 7.51(1H，t, J=7.2)， 7.60(1H， d, J=8.3)， 8.28(1H， d, J-7.5), 9.02(1H, s), 10.10(1H,br)。
實(shí)施例2: 2-(lH-吲唑-4-基)-6-(4-曱磺酰基-哌嗪-l-基甲基)-4-嗎啉-4-基-遙吩并3,2-dl嗜咬二曱磺酸鹽
向二氯曱烷(50ml)和甲醇(20ml)中的2-(lH-。引唑-4-基)-6-(4-曱磺?；?哌嗪-l-基曱基)-4-嗎啉-4-基-噻吩并[3,2-d]嘧啶(2.00g, 3.89mmo1)加入曱磺酸(2 equiv., 505ul)。將該反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)，在此期間白色沉淀逐漸沉下。真空下去除揮發(fā)性物質(zhì)，用二乙醚研》卒殘
留物，慢慢倒出溶劑，真空下干燥固體，得到標(biāo)題化合物(2.70g)。NMR(400MHz, DMSO)包括以下信號(hào)
2.32(s，6H)， 3.00(s，3H), 3.84-3.86(4H,m). 4.09-4.11(4H，m)，8.8)(1H，s)。
實(shí)施例3生物學(xué)測(cè)試
對(duì)如上所述制備的本發(fā)明化合物進(jìn)行了以下系列生物學(xué)測(cè)試
(i) PI3K生物化學(xué)篩選
用純化的重組酶和ATP在luM濃度時(shí)以放射測(cè)定法測(cè)定化合物對(duì)PI3K的抑制。用100% DMSO對(duì)化合物進(jìn)行系列稀釋。激酶反應(yīng)在室溫孵育1小時(shí)，通過加入PBS來終止該反應(yīng)。隨后用S形劑量反應(yīng)曲線擬合(可變斜率)測(cè)定ICso值。所述化合物對(duì)PI3K的ICso小于O.l一。
(ii) 細(xì)胞增殖抑制
將細(xì)胞以最佳密度接種到96孔板，在測(cè)試化合物存在下將育4天。隨后將Alamar BlueTM加入到測(cè)定培養(yǎng)基中，孵育6小時(shí)，之后于544nm激發(fā)光、590nm發(fā)射光處讀數(shù)。用S形劑量反應(yīng)曲線擬合計(jì)算ECso值。所述化合物在所用細(xì)胞系范圍內(nèi)具有50uM或更低的EC50。
(iii) Caco-2通透性
將Caco-2細(xì)胞以1 x 105個(gè)細(xì)胞/(;1112接種到Millipore Multiscreen板上，培養(yǎng)20天。隨后進(jìn)行化合物通透性評(píng)估。將化合物施用到細(xì)胞單層頂面(A)，測(cè)量滲透到基底(B)間隔區(qū)的化合物。以反向(B-A)實(shí)施該過程以研究主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)。計(jì)算各化合物的滲透系數(shù)值Papp，滲透系數(shù)值是穿過膜的化合物的滲透率的量度標(biāo)準(zhǔn)?；谂c已確定的人吸收對(duì)照化合物比較，將化合物分為低(P叩p〈卜l.Ox 106^11/8)或高(？叩13〉/=1.0 x 1()6cm/s)吸收潛能兩組。
為了評(píng)估化合物經(jīng)受主動(dòng)外排的能力，測(cè)定基底(B)到頂面(A)與A到B比較的轉(zhuǎn)運(yùn)比率。B-A/A-B的值>/- l.O說明出現(xiàn)細(xì)胞主動(dòng)外排。 P叩p值>/= l.Ox 106cm/s。
(iv) 肝細(xì)胞清除率
使用低溫保存的人肝細(xì)胞混懸液。孵育是在化合物濃度為lmM 或3pM以細(xì)胞密度為0.5 x 1C^個(gè)活細(xì)胞/mL下進(jìn)行。孵育中的最終 DMSO濃度為0.25%。還實(shí)施無細(xì)胞的對(duì)照孵育以顯示任何非酶降 解。在0、 5、 10、 20、 40和60分鐘(對(duì)照樣品僅在60分鐘)時(shí)從孵育 混合物中取副樣(duplicate sample) (50|uL)，加到含有內(nèi)標(biāo)(100pL)的 MeOH中以終止反應(yīng)。將甲苯^t丁脲(Tolbutamide)、 7-羥基香豆素和 睪酮用作對(duì)照化合物。將樣品離心，在每一時(shí)間點(diǎn)上合并的清液用于 LC-MSMS分析。根據(jù)峰面積比率(母體化合物峰面積/內(nèi)標(biāo)峰面積)的 自然對(duì)數(shù)對(duì)時(shí)間的關(guān)系曲線，如下計(jì)算內(nèi)在性清除率(CUt): CLint(|Lil/ 分鐘/百萬細(xì)胞"VxA，其中A為清除率常數(shù)，從自然對(duì)數(shù)濃度對(duì)時(shí) 間所作圖的斜率獲得；V為源自孵育體積的體積術(shù)語，以u(píng)L10S田胞 "表示。
以低(CL〈卜4.6pL/分鐘/l()6個(gè)細(xì)胞)、中(CL〉/二4.6; </= 25.2 分鐘/106個(gè)細(xì)胞)和高(>/= 25.2^11/分鐘/106個(gè)細(xì)胞)清除率為基準(zhǔn)，確定 本發(fā)明化合物具有低肝細(xì)胞清除率。
(v) 細(xì)胞色素P450抑制
本發(fā)明化合物一式兩份以IO個(gè)濃度且所用最大濃度為100uM對(duì) 5種CYP450靶標(biāo)(1A2、 2C9、 2C19、 2D6、 3A4)進(jìn)行篩選。用標(biāo)準(zhǔn)抑 制齊'K呋拉茶堿(ftirafylline)、磺胺苯吡唑(sulfaphenazole)、反苯環(huán)丙胺 (tranylcypromine)、查尼丁(quinidine)、酮康哇(ketoconazole))作為對(duì)照。 用BMG LabTechnologies PolarStar在熒光模式讀板。所述化合物對(duì) CYP450的所有同種型表現(xiàn)出弱活性(ICso >/=5uM)。
(vi) 細(xì)胞色素P450誘導(dǎo) 將從單個(gè)供體剛剛分離的人肝細(xì)胞培養(yǎng)48小時(shí)后，加入3種濃
度的測(cè)試化合物并孵育72小時(shí)。在醉育結(jié)束前30分鐘和1小時(shí)加入CYP3A4和CYP1A2的探測(cè)底物。在72小時(shí)時(shí)取走細(xì)胞和培養(yǎng)基，通過LC-MS/MS定量每一探測(cè)底物的代謝程度。通過用單獨(dú)的P450誘導(dǎo)劑在 一種濃度做三次重復(fù)孵育作為本實(shí)驗(yàn)的對(duì)照。本發(fā)明化合物對(duì)誘導(dǎo)細(xì)胞色素P450酶表現(xiàn)出可以忽略不計(jì)的作用。
(vii) 血漿蛋白結(jié)合
在緩沖液和10。/。血漿(v/v,存于緩沖液)中制備測(cè)試化合物溶液(5um， 0.5%最終DMSO濃度)。裝配96孔HT透析板，以使每孔被半滲透纖維素膜分為兩半。將緩沖溶液加入到膜的一邊，血漿溶液加到另一邊；然后以三個(gè)重復(fù)樣在37。C進(jìn)行2小時(shí)孵育。隨后排空小室(cell),將每批化合物溶液合并為2組(無血漿和含血漿)，然后通過LC-MSMS用無血漿(6個(gè)點(diǎn))和含血漿溶液(7個(gè)點(diǎn))的2套標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)分析。計(jì)算各化合物的部分未結(jié)合值高蛋白結(jié)合的化合物(>/=90%結(jié)合)具有Fu </=0.1 。本發(fā)明化合物具有Fu值>/= 0.1 。
(viii) hERG通道阻斷
用已建立的流出方法評(píng)估本發(fā)明化合物調(diào)節(jié)穩(wěn)定表達(dá)hERG鉀通道的HEK-294細(xì)胞的銣流出的能力。在含有RbCl的培養(yǎng)基中制備細(xì)胞，接種到％-孔板，過夜生長(zhǎng)以形成單層。通過在室溫抽吸培養(yǎng)基并用3 x 100|iL預(yù)孵育緩沖液(含有低[K+])洗滌每一孔來啟動(dòng)流出實(shí)驗(yàn)。最后一次抽吸后，將50pL化合物工作儲(chǔ)液(2x)加入到各孔，在室溫孵育IO分鐘。然后將5(^L刺激緩沖液(含有高[K+])加入到各孔，得到最終測(cè)試化合物濃度。然后讓細(xì)胞板在室溫再孵育10分鐘。然后將各孔的80jiL上清液轉(zhuǎn)移到96-孔板的等同孔中，經(jīng)由原子發(fā)射光語學(xué)進(jìn)行分析。從最高100^iM濃度以10pt的2個(gè)重復(fù)的ICso曲線(n-2)篩選所述化合物。
實(shí)施例4 片劑組合物
每片重0.15 g并含有25 mg本發(fā)明化合物的藥片如下制備10,000片的組成成分 活性化合物(250g) 乳糖(800 g) 玉米淀粉(415g) 滑石粉(30g) 硬脂酸鎂(5 g)
將活性化合物、乳糖和一半玉米淀粉混合。然后強(qiáng)使該混合物通 過目徑0.5mm的篩。將玉米淀粉(10g)混懸在溫水(90mL)中。得到的 面糊用于使粉末成粒。干燥該顆粒，讓其在1.4 mm目徑的篩上分為 小碎片。加入剩余量的淀粉、滑石粉和鎂，小心混合，壓制成片。
實(shí)施例5可注射制劑
制劑A
活性化合物 200 mg
鹽酸溶液0.1M或氫氧化鈉溶液0.1M足量到pH 4.0-7.0 無菌水足量到 10mL
將本發(fā)明化合物溶解于大部分水(35'C-40。C)中，用鹽酸或氫氧化 鈉將適當(dāng)?shù)豴H調(diào)整到4.0和7.0之間。然后用水補(bǔ)充成整批的體積， 通過無菌微孔過濾器過濾到無菌的lOmL琥珀色玻璃瓶(l型)，用無菌
封閉物和外封物密封。 制劑B
活性化合物 125 mg 無菌無熱原的pH 7磷酸鹽緩沖液足量到 25mL
活性化合物 200 mg
苯曱醇 0.10 g
四氫呋喃聚乙二醇醚(Glycoforo1)75 1.45 g
注射用水足量到 3.00mL
將活性化合物溶解于四氫呋喃聚乙二醇醚中。然后加入苯曱醇并 溶解，加水到3mL。然后將該混合物通過無菌微孔過濾器過濾，封裝在無菌3mL玻璃小瓶中(1型)。
實(shí)施例6糖漿制劑
活性化合物 250 mg
山梨醇溶液 1.50 g
甘油 2.00 g
苯曱酸鈉 0.005 g
香料 0.0125mL
純化水足量到 5.00mL
將本發(fā)明化合物溶解于甘油和大部分純化水混合物中。然后向該 溶液中加入苯曱酸鈉水液，接著加入山梨醇溶液，最后加入香料。用 純化水補(bǔ)足體積，充分混合。
權(quán)利要求
1. 式(I)噻吩并嘧啶化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽
2. 權(quán)利要求1的化合物，其中所述藥學(xué)上可接受的鹽選自與以 下酸形成的鹽鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、硝酸、磷酸、曱磺酸、 苯磺酸、曱酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富 馬酸、馬來酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、乙磺酸、天冬氨酸 和谷氨酸。
3. 權(quán)利要求1或2的化合物，其中所述藥學(xué)上可接受的鹽為單 鹽或雙鹽。
4. 權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的化合物，其為與曱磺酸、#^黃酸、鹽 酸、磷酸和硫酸形成的單鹽或雙鹽。
5. 權(quán)利要求1的化合物，其為2-(111-吲唑-4-基)-6-(4-曱磺酰基-哌嗪-1 -基甲基)-4-嗎啉-4-基-噻吩并[3 ，2-d]嘧啶雙曱磺酸鹽。
6. 用于制備如權(quán)利要求1所定義的化合物的方法，所述方法包 括在合適還原劑存在下使式(III)化合物與式(V)胺作用<formula>formula see original document page 3</formula>
7.權(quán)利要求6的方法，其進(jìn)一步包括通過在Pd催化劑存在下使式(n)化合物與式(iv)的硼酸或其酯作用制備式(ni)化合物<formula>formula see original document page 3</formula>其中每一個(gè)R's為H或d-C6烷基，或兩個(gè)OR"基團(tuán)與其所連接 的硼原子形成硼酸頻哪醇酯基團(tuán)。
8.用于制備如權(quán)利要求1所定義的化合物的方法，所述方法包 括在Pd催化劑存在下使式(VI)化合物與式(IV)的硼酸或其酯作用<formula>formula see original document page 4</formula>(IV)其中每一個(gè)Ris為H或C廣C6烷基，或兩個(gè)OR"基團(tuán)與其所連接的硼原子形成硼酸頻哪醇酯基團(tuán)。
9.權(quán)利要求8的方法，其進(jìn)一步包括通過在合適還原劑存在下 使式(II)化合物與式(V)胺作用來制備式(VI)化合物<formula>formula see original document page 4</formula>
10.用于制備如權(quán)利要求1所定義的藥學(xué)上可接受的鹽的方法, 所述方法包括使式(I)噻吩并嘧啶與合適酸在合適溶劑中作用<formula>formula see original document page 5</formula>
11. 權(quán)利要求10的方法，其中所述酸選自鹽酸、氫溴酸、氫碘 酸、硫酸、硝酸、磷酸、曱磺酸、苯磺酸、曱酸、乙酸、三氟乙 酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、乳酸、蘋果 酸、酒石酸、檸檬酸、乙磺酸、天冬氨酸和谷氨酸。
12. 權(quán)利要求10或11的方法，其中所述酸選自曱磺酸、苯磺 酸、鹽酸、磷酸和硫酸。
13. 藥物組合物，其包含藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑和作為活 性成分的權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所要求保護(hù)的化合物。
14. 權(quán)利要求13的組合物，其經(jīng)過調(diào)配用于口服給藥。的化合物。
15.通過治療用于人或動(dòng)物體的治療方法中的權(quán)利要求1所定義的化合物.
16. 權(quán)利要求1所定義的化合物在制備用于治療起因于異常細(xì)胞 生長(zhǎng)、異常細(xì)胞功能或異常細(xì)胞行為的疾病或病癥的藥物中的用途。
17. 權(quán)利要求16的用途，其中所述異常細(xì)胞生長(zhǎng)、異常細(xì)胞功能或異常細(xì)胞行為與PI3激酶有關(guān)。
18. 權(quán)利要求16或17的用途，其中所述疾病或病癥選自癌癥、 免疫性疾病、心血管病、病毒感染、炎癥、代謝/內(nèi)分泌紊亂和神經(jīng)障 礙。
19. 權(quán)利要求18的用途，其中所述癌癥選自結(jié)腸、乳房、腦、 肝、卵巢、胃、肺和頭頸的實(shí)體腫瘤。
20. 權(quán)利要求18的用途，其中所述癌癥選自成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、 黑素瘤、前列腺癌、子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌、乳腺癌、肺癌、頭頸癌、 肝細(xì)胞癌和曱狀腺癌。
21. 權(quán)利要求18的用途，其中所述癌癥選自乳腺癌、卵巢癌、 宮頸癌、前列腺癌、睪丸癌、泌尿生殖道癌、食道癌、喉癌、成膠 質(zhì)細(xì)胞瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胃癌、皮膚癌、角化棘皮瘤、肺癌、表 皮樣癌、大細(xì)胞癌、非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)、小細(xì)胞癌、肺腺癌、骨 癌、結(jié)腸癌、腺瘤、胰腺癌、腺癌、甲狀腺癌、濾泡癌、未分化癌、 乳頭狀癌、精原細(xì)胞瘤、黑素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和膽管癌、 腎癌、骨髓病、淋巴病、毛細(xì)胞癌、口腔癌和咽(口)癌、唇癌、舌 癌、嘴癌、咽癌、小腸癌、結(jié)直腸癌、大腸癌、直腸癌、腦癌和中 樞神經(jīng)系統(tǒng)癌、何杰金氏病和白血病。
22. 治療起因于異常細(xì)胞生長(zhǎng)、異常細(xì)胞功能或異常細(xì)胞行為的 疾病或病癥的方法，所述方法包括將權(quán)利要求1所定義的化合物給予 需要治療的患者。
23. 權(quán)利要求22的方法，其中所述異常細(xì)胞生長(zhǎng)、異常細(xì)胞功 能或異常細(xì)胞行為與P13激酶有關(guān)。
24. 權(quán)利要求22或23的方法，其中所述疾病或病癥選自癌癥、 免疫性疾病、心血管病、病毒感染、炎癥、代謝/內(nèi)分泌紊亂和神經(jīng)障 礙。
25. 權(quán)利要求24的方法，其中所述疾病或病癥選自癌癥、免 疫性疾病、心血管病、病毒感染、炎癥、代謝/內(nèi)分泌紊亂和神經(jīng)障礙。
26. 權(quán)利要求24的方法，其中所述癌癥選自成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、黑 素瘤、前列腺癌、子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌、乳腺癌、肺癌、頭頸癌、肝 細(xì)胞癌和曱狀腺癌。
27. 權(quán)利要求24的方法，其中所迷癌癥選自乳腺癌、卵巢癌、 宮頸癌、前列腺癌、睪丸癌、泌尿生殖道癌、食道癌、喉癌、成膠 質(zhì)細(xì)胞瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胃癌、皮膚癌、角化棘皮瘤、肺癌、表 皮樣癌、大細(xì)胞癌、非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)、小細(xì)胞癌、肺腺癌、骨 癌、結(jié)腸癌、腺瘤、胰腺癌、腺癌、曱狀腺癌、濾泡癌、未分化癌、 乳頭狀癌、精原細(xì)胞瘤、黑素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和膽管癌、 腎癌、骨髓病、淋巴病、毛細(xì)胞癌、口腔癌和咽(口)癌、唇癌、舌 癌、嘴癌、咽癌、小腸癌、結(jié)直腸癌、大腸癌、直腸癌、腦癌和中 樞神經(jīng)系統(tǒng)癌、何杰金氏病和白血病。
28. 用于制備藥物組合物的方法，所述方法包括使權(quán)利要求l所 定義的化合物與藥學(xué)上可接受的載體聯(lián)合。
29. 用于治療P13K介導(dǎo)的病癥的藥盒，其包括(a) 包含權(quán)利要求l所定義的化合物的第一藥物組合物；和(b) 使用說明書。
30. 權(quán)利要求29的藥盒，其進(jìn)一步包括(c)第二藥物組合物，其 中所述第二藥物組合物包含具有抗高度增殖活性的第二化合物。
31. 權(quán)利要求30的藥盒，其進(jìn)一步包括將所述第一和第二藥物 組合物同時(shí)、序貫或分開給予需要治療的患者的用法說明。
32. 權(quán)利要求30的藥盒，其中所述第一和第二藥物組合物包含 在單獨(dú)的容器中。
33. 權(quán)利要求30的藥盒，其中所述第一和第二藥物組合物包含 在同一個(gè)容器中。
34. 包含如下物質(zhì)的產(chǎn) 品(a) 權(quán)利要求1所定義的化合物；和(b) 具有抗高度增殖活性的化合物；其在預(yù)防性或治療性治療癌癥中單獨(dú)、同時(shí)、或序貫給予。
全文摘要
式(I)噻吩并嘧啶和其藥學(xué)上可接受的鹽具有PI3K抑制劑活性，且對(duì)P110α亞型具選擇性，其可用于治療起因于異常細(xì)胞生長(zhǎng)、異常細(xì)胞功能或異常細(xì)胞行為的疾病或病癥，尤其是與PI3激酶有關(guān)的疾病或病癥，例如癌癥、免疫性疾病、心血管病、病毒感染、炎癥、代謝/內(nèi)分泌紊亂和神經(jīng)障礙。本發(fā)明還闡述用于合成所述化合物的方法。
文檔編號(hào)C07D495/04GK101472930SQ200780023222
公開日2009年7月1日 申請(qǐng)日期2007年4月24日 優(yōu)先權(quán)日2006年4月26日
發(fā)明者A·富爾克斯, I·楚科夫里, S·舒特爾沃思, T·漢科克斯 申請(qǐng)人:霍夫曼-拉羅奇有限公司