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Sars冠狀病毒核衣殼蛋白的抗原決定簇及其應(yīng)用的制作方法

文檔序號(hào):3552756閱讀:400來(lái)源:國(guó)知局
專利名稱:Sars冠狀病毒核衣殼蛋白的抗原決定簇及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及SARS冠狀病毒核衣殼蛋白(N蛋白)的抗原決定簇及其應(yīng)用。具體地本發(fā)明使用人工合成的源自SARS病毒N蛋白的抗原多肽以及該多肽免疫動(dòng)物后產(chǎn)生的抗體(單抗、多抗),結(jié)合酶聯(lián)免疫的方法檢測(cè)人血清樣品中的早期抗SARS抗體IgM或IgG,或直接檢測(cè)血清樣品中SARS病原體。該多肽可以直接作為治療藥物誘導(dǎo)保護(hù)性的CTL反應(yīng),保護(hù)病人免于急性病癥的折磨,并且進(jìn)一步促進(jìn)病人產(chǎn)生保護(hù)性的抗體,加速康復(fù)的進(jìn)程;還可以作為重要組成部分,構(gòu)建亞單位疫苗用于SARS的預(yù)防和控制。
背景技術(shù)
非典型肺炎即嚴(yán)重急性呼吸綜合征(Severe Acute Respiratory SyndromeSARS)的病原體最近已經(jīng)確認(rèn)是一種冠狀病毒該病毒是一種正鏈RNA病毒基因組為單鏈RNA含有Poly(A)總長(zhǎng)接近30kb病毒表面有約20nm左右的棒狀結(jié)構(gòu)呈皇冠狀該病原體具有很強(qiáng)的感染性和傳染性病毒在患者體內(nèi)經(jīng)15過(guò)早期復(fù)制過(guò)程后在肺部引發(fā)大規(guī)模炎癥反應(yīng)最終導(dǎo)致肺部組織損傷由于臨床缺少有效的治療藥物所以現(xiàn)階段將感染病人迅速隔離治療是最有效的防治手段。
發(fā)明人通過(guò)調(diào)研大量與冠狀病毒有關(guān)的科研文獻(xiàn)和參考新近涌現(xiàn)的非典型肺炎(SARS)病原體-SARS冠狀病毒的臨床及基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究的成果,得出SARS冠狀病毒的核衣殼蛋白(N蛋白)是其重要的致病因子的結(jié)論N蛋白可以引起被感染細(xì)胞的細(xì)胞分裂失常,與細(xì)胞內(nèi)重要的信號(hào)分子接合并干擾正常的細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)和細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄、翻譯等代謝過(guò)程,并且參與病毒的復(fù)制、蛋白質(zhì)合成和包裝等。此外,N蛋白不但可以誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生高效價(jià)的抗體,進(jìn)一步促進(jìn)宿主產(chǎn)生對(duì)S蛋白(冠狀病毒的另一重要毒力因子)的中和抗體;而且能誘導(dǎo)產(chǎn)生保護(hù)性的CTL(細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞),對(duì)消除宿主的急性感染具有決定性的作用。
截止2003年6月2日,全世界已經(jīng)有8384人感染SARS冠狀病毒,并且已經(jīng)有700多人死亡(http//www.who.int/csr/sars/country/2003 06 02/en/)。SARS已經(jīng)成為全人類共同面臨的新的嚴(yán)重傳染病,如何預(yù)防、治療SARS病毒引起的急性傳染病和控制其蔓延是人類能否贏得這場(chǎng)戰(zhàn)爭(zhēng)的核心。
目前已經(jīng)發(fā)展并使用的診斷方法包括RT-PCR、通過(guò)臨床癥狀綜合評(píng)價(jià)診斷、血清免疫檢查病毒抗體(熒光免疫法或ELISA)。這三種方法易產(chǎn)生較多的假陰性和假陽(yáng)性而導(dǎo)致漏診或誤診,或者不能簡(jiǎn)便快速準(zhǔn)確的判斷與區(qū)分患者與疑似病例,常常會(huì)延誤對(duì)疾病進(jìn)行有效的治療。而抗原檢測(cè)(ELISA)準(zhǔn)確率高,操作簡(jiǎn)便,適合臨床推廣,但目前缺少病原體的特異性抗體。
因此本領(lǐng)域迫切需要開發(fā)新的更加有效的早期診斷的方法和試劑盒以及治療、預(yù)防SARS的藥物和疫苗。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的就是提供一種快速簡(jiǎn)便準(zhǔn)確率高的SARS檢測(cè)方法和試劑盒以及治療、預(yù)防SARS的藥物和疫苗。
在本發(fā)明的第一方面提供一種源自SARS病毒的多肽,其氨基酸序列為SEQID NO1-SEQ ID NO54所示的一條氨基酸序列的多肽,這些SARS特異性多肽可特異性地與抗SARS病毒的抗體結(jié)合。較佳的,該多肽為SEQ ID NO39所示的氨基酸序列的多肽。
在本發(fā)明的第三方面提供了一種抗體,所述抗體特異性地與本發(fā)明的SARS特異性多肽結(jié)合。
在一優(yōu)選例中所述的抗體是單克隆抗體。
在本發(fā)明的第四方面提供了一種檢測(cè)試劑盒,它含有本發(fā)明的SARS特異性多肽、抗本發(fā)明多肽的抗體或其組合。
在本發(fā)明的第五方面提供了一種體外檢測(cè)樣品中是否存在SARS病毒或抗SARS病毒抗體的方法包括步驟(a)將樣品與選自下組的物質(zhì)接觸本發(fā)明的SARS特異性多肽、抗本發(fā)明多肽的抗體或其組合;(b)檢測(cè)是否形成抗原-抗體復(fù)合物其中形成復(fù)合物就表示樣品中存在SARS病毒或抗SARS病毒抗體。
在一優(yōu)選例中所述的樣品為血清樣品或痰液。
在另一優(yōu)選例中所述的物質(zhì)是氨基酸序列為SEQ ID NO1-SEQ ID NO54所示的一條氨基酸序列的多肽。
在另一優(yōu)選例中所述的物質(zhì)是單克隆抗體。
在另一優(yōu)選例中步驟(b)的檢測(cè)方法是熒光檢測(cè)法。
在本發(fā)明的第六方面提供了本發(fā)明多肽在制備治療或預(yù)防非典型肺炎的藥物中的應(yīng)用。


圖1MHC II型抗原表位(epitope)。
圖2MHC I型(HLA型)抗原表位。
圖3通過(guò)比較得出的SARS冠狀病毒的N蛋白的主要CTL誘導(dǎo)抗原表位,其中,MHV是鼠肝炎病毒,SARS-CoV是人的SARS冠狀病毒。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明通過(guò)對(duì)SARS病毒潛在抗原蛋白的序列分析找到了具有很強(qiáng)抗原性的氨基酸序列。通過(guò)合成多肽合成這些潛在抗原靶位,再由這些多肽免疫獲得的抗體,研制出一種通過(guò)檢測(cè)SARS病毒或抗SARS病毒抗體進(jìn)行SARS臨床早期診斷的酶聯(lián)免疫方法和試劑盒。這些多肽可以用于構(gòu)建SARS臨床檢驗(yàn)試劑盒,也可以作為候選藥物直接使用或者經(jīng)過(guò)改造而應(yīng)用于臨床,誘導(dǎo)感染早期的病人產(chǎn)生保護(hù)性的CTL,消除急性病征;另外,促進(jìn)機(jī)體產(chǎn)生對(duì)SARS病毒的S蛋白的中和抗體也有利于病人的康復(fù)。同時(shí),本發(fā)明可顯著提高診斷效率并且簡(jiǎn)便準(zhǔn)確率高。
已有的研究表明,采用抗體檢測(cè)病原體可以在病人感染后最短時(shí)間內(nèi)作出有效診斷。采用IgM檢測(cè)可以在感染后一個(gè)星期左右作出診斷,而檢測(cè)病人體內(nèi)IgG則最不理想。為了獲得檢測(cè)SARS病毒所需的相關(guān)抗原與抗體,本發(fā)明人通過(guò)對(duì)SARS病毒基因組的分析與比對(duì),結(jié)合最近與以往文獻(xiàn)資料,對(duì)SARS的潛在抗原蛋白進(jìn)行分析。
通過(guò)與冠狀病毒的分析與比對(duì),本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)冠狀病毒通過(guò)與細(xì)胞表面受體結(jié)合,隨即與細(xì)胞膜發(fā)生融合,病毒粒子進(jìn)入細(xì)胞。病毒的生活周期完全在細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行,不需細(xì)胞核參與。SARS病毒本身編碼兩大類蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白。與RNA結(jié)合構(gòu)成螺旋狀核衣殼樣結(jié)構(gòu)的N蛋白為SARS病毒的結(jié)構(gòu)蛋白。
如本文所用,本發(fā)明多肽或SARS特異性多肽指氨基酸序列如圖1、圖2所示的抗原多肽。
本發(fā)明多肽可用常規(guī)方法人工合成也可用重組方法生產(chǎn)。
本發(fā)明多肽可以直接用于檢測(cè)抗SARS的抗體。
本發(fā)明的多肽可用于免疫兔、鼠等動(dòng)物,從而獲得抗本發(fā)明多肽的抗體(本發(fā)明抗體)。本發(fā)明抗體包括特異性的多克隆抗體和單克隆抗體尤其是單克隆抗體。這里特異性是指抗體能結(jié)合于SARS病毒的基因產(chǎn)物或片段。較佳地,指那些能與非典型肺炎冠狀病毒的基因產(chǎn)物或片段結(jié)合但不識(shí)別和結(jié)合于其它非相關(guān)抗原分子的抗體。
本發(fā)明不僅包括完整的單克隆或多克隆抗體,而且還包括具有免疫活性的抗體片段(如Fab’或(Fab)2片段)、 抗體重鏈、抗體輕鏈、嵌合抗體人源化抗體等。
本發(fā)明的抗體可以通過(guò)本領(lǐng)域內(nèi)技術(shù)人員已知的各種技術(shù)進(jìn)行制備。例如,純化的本發(fā)明多肽可被施用于動(dòng)物以誘導(dǎo)多克隆抗體的產(chǎn)生。對(duì)于單克隆抗體,可利用雜交瘤技術(shù)來(lái)制備(見Kohler等人,Nature 256;495,1975;Kohler等人,Eur.J.Immunol.6511,1976;Kohler等人,Eur.J.Immunol.6292,1976;Hammerling等人,In Monoclonal Antibodies and T Cell Hybridomas,Elsevier,N.Y.,1981)。
本發(fā)明的多肽和抗體都可用于檢測(cè)樣品中是否存在SARS病毒或抗SARS病毒抗體,從而作為早期檢測(cè)SARS的有效指標(biāo)之一。
除了用于檢測(cè),本發(fā)明的SARS特異性多肽還可在體內(nèi)與病毒競(jìng)爭(zhēng)受體,阻止病毒與膜融合抑制病毒感染正常細(xì)胞。此外本發(fā)明的多肽或抗體還可用于制備治療性的藥物組合物或預(yù)防性的疫苗組合物。
因此,另一方面本發(fā)明還提供了一種組合物它含有(a)安全有效量的本發(fā)明多肽或其組合物以及(b)藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。這類載體包括(但并不限于)鹽水緩沖液、葡萄糖水、甘油乙醇佐劑及其組合。本發(fā)明的組合物可通過(guò)常規(guī)方法進(jìn)行制備,以本發(fā)明多肽計(jì)其用量。例如每天約1微克/千克體重-約5毫克/千克體重。此外本發(fā)明的多肽還可與其他治療劑一起使用。
本發(fā)明的主要優(yōu)點(diǎn)在于(a)因?yàn)楸景l(fā)明的SARS特異性多肽與抗SARS病毒抗體的親和力高,本發(fā)明抗體與SARS病毒的親和力高,因此本發(fā)明的檢測(cè)方法靈敏簡(jiǎn)便,準(zhǔn)確率高;(b)本發(fā)明的SARS特異性多肽還可在體內(nèi)與病毒競(jìng)爭(zhēng)受體,阻止病毒與膜融合,抑制病毒感染正常細(xì)胞,所以本發(fā)明具有很高的臨床應(yīng)用價(jià)值;(c)本發(fā)明的SARS特異性多肽也可以作為候選藥物直接使用或者經(jīng)過(guò)改造而應(yīng)用于臨床,CTL在2-3天內(nèi)就可以產(chǎn)生,對(duì)于消除病人的急性病征具有關(guān)鍵作用。本發(fā)明中提供的MHCII型抗原表位多肽就可以直接作為藥物使用,誘導(dǎo)產(chǎn)生保護(hù)性的CTL反應(yīng)并且促進(jìn)抗S蛋白的中和抗體的產(chǎn)生。
下面結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明,而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法。通常按照常規(guī)條件如Sambrook等人分子克隆實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)(New YorkColdSpring Harbor Laboratory Press,1989)中所述的條件或按照制造廠商所建議的條件。
實(shí)施例1多肽的人工合成按序列表SEQ ID NO3-SEQ ID NO54所示的氨基酸序列,在多肽合成儀上合成多肽,合成后經(jīng)質(zhì)譜法驗(yàn)證證明合成的多肽與設(shè)計(jì)相符。
實(shí)施例2抗原多肽免疫動(dòng)物制備抗體取實(shí)施例1制備的各條多肽片斷0.5毫克,分別溶解于1.5ml PBS中,加入等體積的CFA(完全弗氏佐劑),充分混勻,將經(jīng)過(guò)佐劑乳化處理的抗原免疫兔子和小鼠。
每只兔子注射抗原3ml左右,小鼠則注射0.8ml/只。分別皮下多點(diǎn)注射動(dòng)物背部(每點(diǎn)0.2ml),初次免疫三周后,取同樣劑量多肽、PBS,混合2ml IFA(不完全弗氏佐劑),乳化后對(duì)動(dòng)物進(jìn)行加強(qiáng)免疫注射,劑量不變。三周后對(duì)動(dòng)物取血收集抗血清,使用BSA包被的層析柱清除針對(duì)BSA的抗體。挑選抗體滴度較高的抗原多肽制備單克隆抗體。
實(shí)施例3抗原多肽檢測(cè)病人血清樣品使用經(jīng)過(guò)處理的實(shí)施例1制備的抗原多肽包被,與病人血清混合反應(yīng),結(jié)果本發(fā)明的抗原肽段可以識(shí)別病人血清中早期針對(duì)SARS的特異性抗體,并與之結(jié)合,洗滌后加入HRP酶連二抗反應(yīng);最后加入顯色底物進(jìn)行檢測(cè)。
結(jié)果表明本發(fā)明的多肽可特異性地與抗SARS病毒的抗體結(jié)合。
實(shí)施例4抗體(單抗與多抗)檢測(cè)病原體對(duì)于實(shí)施例2獲得的抗體(多抗和單抗),用ELISA法與病人血清反應(yīng),檢測(cè)病人組織液血液中的病毒結(jié)合,對(duì)病原體進(jìn)行檢測(cè)。
結(jié)果表明本發(fā)明的多抗和單抗可特異性地與SARS病毒結(jié)合。
在本發(fā)明提及的所有文獻(xiàn)都在本申請(qǐng)中引用作為參考,就如同每一篇文獻(xiàn)被單獨(dú)引用作為參考那樣。此外應(yīng)理解,在閱讀了本發(fā)明的上述講授內(nèi)容之后,本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改,這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書所限定的范圍。
SEQUENCE LISTING<110>非典病毒(SARS virus)<120>中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院<130>SARS冠狀病毒核衣殼蛋白的抗原決定簇及其應(yīng)用<160>54<170>PatentIn version 3.1<210>1<211>420<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)MHC II型抗原表位<400>1Met Ser Asp Asn Gly Pro Gln Ser Asn Gln Arg Ser Ala Pro Arg Ile1 5 10 15Thr Phe Gly Gly Pro Thr Asp Ser Thr Asp Asn Asn Gln Asn Gly Gly20 25 30Arg Asn Gly Ala Arg Pro Lys Gln Arg Arg Pro Gln Gly Leu Pro Asn35 40 45Asn Thr Ala Ser Trp Phe Thr Ala Leu Thr Gln His Gly Lys Glu Glu50 55 60Leu Arg Phe Pro Arg Gly Gln Gly Val Pro Ile Asn Thr Asn Ser Gly65 70 75 80Pro Asp Asp Gln Ile Gly Tyr Tyr Arg Arg Ala Thr Arg Arg Val Arg85 90 95Gly Gly Asp Gly Lys Met Lys Glu Leu Ser Pro Arg Trp Tyr Phe Tyr
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<210>21<211>9<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>21Ser Thr Asp Asn Asn Gln Asn Gly Gly1 5<210>22<211>9<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>22Pro Lys Gln Arg Arg Pro Gln Gly Leu1 5<210>23<211>9<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>23Asn Thr Ala Ser Trp Phe Thr Ala Leu1 5<210>24<211>9<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>24Gly Lys Glu Glu Leu Arg Phe Pro Arg1 5
<210>25<211>10<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>25Ser Gly Pro Asp Asp Gln Ile Gly Tyr Tyr1 5 10<210>26<211>11<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>26Met Lys Glu Leu Ser Pro Arg Trp Tyr Phe Tyr1 5 10<210>27<211>13<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>27Thr Gly Pro Glu Ala Ser Leu Pro Tyr Gly Ala Asn Lys1 5 10<210>28<211>9<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>28Ile Val Trp Val Ala Thr Glu Gly Ala1 5
<210>29<211>9<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>29Asn Thr Pro Lys Asp His Ile Gly Thr1 5<210>30<211>17<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>30Thr Val Leu Gln Leu Pro Gln Gly Thr Thr Leu Pro Lys Gly Phe Tyr1 5 10 15Ala<210>31<211>16<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>31Gly Thr Thr Leu Pro Lys Gly Phe Tyr Ala Glu Gly Ser Arg Gly Gly1 5 10 15<210>32<211>15<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>32
Leu Gln Leu Pro Gln Gly Thr Thr Leu Pro Lys Gly Phe Tyr Ala1 5 10 15<210>33<211>13<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>33Leu Leu Leu Asp Arg Leu Asn Gln Leu Glu Ser Lys Val1 5 10<210>34<211>9<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>34Gly Gln Gln Gln Gln Gly Gln Thr Val1 5<210>35<211>9<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>35Ala Ala Glu Ala Ser Lys Lys Pro Arg1 5<210>36<211>9<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>36
Arg Thr Ala Thr Lys Gln Tyr Asn Val1 5<210>37<211>22<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>37Gly Pro Glu Gln Thr Gln Gly Asn Phe Gly Asp Gln Asp Leu Ile Arg1 5 10 15Gln Gly Thr Asp Tyr Lys20<210>38<211>9<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>38Gln Ile Ala Gln Phe Ala Pro Ser Ala1 5<210>39<211>9<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>39Ala Pro Ser Ala Ser Ala Phe Phe Gly1 5<210>40<211>9<212>PRT
<213>非典病毒(SARS virus)<400>40Phe Ala Pro Ser Ala Ser Ala Phe Phe1 5<210>41<211>9<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>41Ala Pro Ser Ala Ser Ala Phe Phe Gly1 5<210>42<211>9<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>42Gly Met Ser Arg Ile Gly Met Glu Val1 5<210>43<211>12<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>43Gly Thr Trp Leu Thr Tyr His Gly Ala Ile Lys Leu1 5 10<210>44<211>14<212>PRT
<213>非典病毒(SARS virus)<400>44Arg Ile Gly Met Glu Val Thr Pro Ser Gly Thr Trp Leu Thr1 5 10<210>45<211>9<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>45Lys Leu Asp Asp Lys Asp Pro Gln Phe1 5<210>46<211>12<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>46Gly Thr Trp Leu Thr Tyr His Gly Ala Ile Lys Leu1 5 10<210>47<211>9<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>47Ile Leu Leu Asn Lys His Ile Asp Ala1 5<210>48<211>13<212>PRT
<213>非典病毒(SARS virus)<400>48Lys Thr Phe Pro Pro Thr Glu Pro Lys Lys Asp Lys Lys1 5 10<210>49<211>9<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>49Lys Lys Thr Asp Glu Ala Gln Pro Leu1 5<210>50<211>9<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>50Val Thr Leu Leu Pro Ala Ala Asp Met1 5<210>51<211>9<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>51Lys Lys Gln Pro Thr Val Thr Leu Leu1 5<210>52<211>9<212>PRT
<213>非典病毒(SARS virus)<400>52Gln Leu Gln Asn Ser Met Ser Gly Ala1 5<210>53<211>9<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>53Asp Met Asp Asp Phe Ser Arg Gln Leu1 5<210>54<211>13<212>PRT<213>非典病毒(SARS virus)<400>54Thr Leu Leu Pro Ala Ala Asp Met Asp Asp Phe Ser Arg1 5 10
權(quán)利要求
1.一種多肽,其特征在于其氨基酸序列為SEQ ID NO3-SEQ ID NO54所示的一條氨基酸序列的多肽。
2.如權(quán)利要求1所述的多肽,其特征在于其氨基酸序列為SEQ ID NO39所示氨基酸序列的多肽。
3.一種抗體,其特征在于所述的抗體特異性地與權(quán)利要求1或2所述的多肽結(jié)合。
4.如權(quán)利要求3所述的抗體,其特征在于所述的抗體是單克隆抗體。
5.一種檢測(cè)試劑盒,其特征在于它含有權(quán)利要求1或2所述的多肽,權(quán)利要求3所述的抗體或其組合。
6.一種體外檢測(cè)樣品中是否存在SARS病毒或抗SARS病毒抗體的方法,其特征在于包括步驟(a)將樣品與選自下組的物質(zhì)接觸權(quán)利要求1或2所述的多肽、權(quán)利要求3所述的抗體或其組合;(b)檢測(cè)是否形成抗原-抗體復(fù)合物其中形成復(fù)合物就表示樣品中存在SARS病毒或抗SARS病毒抗體。
7.如權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于所述的物質(zhì)是氨基酸序列為SEQNO1-SEQ NO54所示的一條氨基酸序列的多肽。
8.如權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于步驟(b)的檢測(cè)方法是熒光檢測(cè)法。
9.如權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于所述的物質(zhì)是權(quán)利要求3所述的抗體,且所述抗體是單克隆抗體。
10.如權(quán)利要求1或2所述的多肽在制備治療或預(yù)防非典型肺炎的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及SARS冠狀病毒核衣殼蛋白(N蛋白)的抗原決定簇及其應(yīng)用。具體地本發(fā)明使用人工合成的源自SARS病毒N蛋白的抗原多肽以及該多肽免疫動(dòng)物后產(chǎn)生的抗體(單抗或多抗),結(jié)合酶聯(lián)免疫的方法檢測(cè)人血清樣品中的早期抗SARS抗體IgM或IgG,或直接檢測(cè)血清樣品中SARS病原體。該多肽還可用于制備治療SARS疾病的藥物或預(yù)防SARS疾病的疫苗。
文檔編號(hào)C07K16/08GK1566143SQ03145229
公開日2005年1月19日 申請(qǐng)日期2003年6月25日 優(yōu)先權(quán)日2003年6月25日
發(fā)明者秦磊, 李亦學(xué), 石鐵流, 金由辛, 何偉忠 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院, 上海生物信息技術(shù)研究中心
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