可傳送兩種或兩種以上藥物的高分子納米粒制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種可傳送兩種或兩種以上藥物的高分子納米粒制備方法。將疏水性或兩親性高分子材料溶解于有機(jī)溶劑中形成溶液X，加入在先釋放的藥物A，置于與用于形成納米粒液滴的滴加裝置外層環(huán)形腔相連的容器中；將疏水性高分子材料溶解于有機(jī)溶劑中形成溶液Y，加入在后釋放的藥物B，置于與用于形成納米粒液滴的滴加裝置內(nèi)腔相連的容器中；控制滴加裝置外層環(huán)形腔與內(nèi)腔中的溶液以相同速度，在攪拌下滴加到水溶液中，形成層核納米粒液滴，納米粒液滴揮發(fā)除去有機(jī)溶劑，經(jīng)固液分離得到的固相用蒸餾水充分洗滌后，加入凍干保護(hù)劑經(jīng)冷凍干燥即得到載藥層核結(jié)構(gòu)納米粒。本發(fā)明制備的藥物納米粒，實(shí)現(xiàn)了使藥物之間產(chǎn)生最佳協(xié)同效應(yīng)。
【專利說明】
可傳送兩種或兩種以上藥物的高分子納米粒制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及傳送藥物高分子納米粒技術(shù)，具體涉及一種可同時(shí)傳送兩種或兩種以上藥物的高分子納米粒的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]不同藥物通過組合設(shè)計(jì)產(chǎn)生的協(xié)同治療效果，比每一個(gè)藥物單獨(dú)治療之和的藥效更尚。多藥納米粒治療具有提尚藥物穩(wěn)定性、減小系統(tǒng)毒性、在血液中有更長(zhǎng)循環(huán)時(shí)間、可控的藥物釋放以及靶向特定的組織和細(xì)胞的能力(B1materials 35(2014)9343-9354)，較目前藥物組合治療的主體一裸體小分子藥物組合具有明顯的優(yōu)勢(shì)，將取代裸體小分子藥物組合成為最有希望治療惡性疾病的途徑。多藥納米粒是使用納米粒傳送兩種或多種藥物，將不同性質(zhì)的藥物合并在一種載體中，最終保證目標(biāo)組織按比率的接收到治療藥物。采用多藥納米粒進(jìn)行疾病治療，不同藥物的最優(yōu)比率能夠在人體外調(diào)整并隨后有效地應(yīng)用于臨床。(Ant1-Cancer Drugs 2015,Vol 26No 3,312-322)ο
[0003]已有專利文獻(xiàn)報(bào)道了將兩種或以上的藥物包載到納微米粒中的方法。公開號(hào)為CN103169664的專利文獻(xiàn)公開了一種制備雙層載藥納米粒的方法，該制備方法是采取將藥物與聚乳酸-聚乙醇酸共聚物(PLGA)形成初乳后加入到帶有官能團(tuán)“精氨酸-甘氨酸和天冬氨酸”(RGD)的陽離子聚合物和抗腫瘤烷化劑的增敏劑的水溶液中，攪拌固化凍干得到載藥納米粒。但這種方法不適用于水不溶的增敏劑或其它藥物。公開號(hào)為CN103494820的專利文獻(xiàn)公開了一種采用沉淀法制備載有兩種藥物納米粒的方法，該方法是將尼莫地平和川穹嗪同時(shí)包載到聚乳酸-聚乙醇酸共聚物(PLGA)納米粒中，避免尼莫地平和川穹嗪簡(jiǎn)單合用存在的藥物半衰期短、易產(chǎn)生細(xì)胞毒性并同時(shí)抑制了 P-gp外排作用。盡管這種沉淀法制備多藥納米粒的方法簡(jiǎn)單，但這種方法并不適合那些不相容的藥物的同時(shí)包載，也無法實(shí)現(xiàn)按臨床上需要順序釋藥的要求。公開號(hào)為CN101953801的專利文獻(xiàn)公開了另一種多藥納米粒的制備方法，該方法是采取將藥先形成納米粒，然后再將其分散到含有另一種藥的電噴前驅(qū)液中，之后通過電噴制得具有核殼結(jié)構(gòu)的納微米粒。該方法雖然制得了可程序性控制給藥的核殼結(jié)構(gòu)的多藥納微米粒，但工藝步驟相對(duì)較多，而且需要配備電噴設(shè)備。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]針對(duì)制備傳送藥物納米粒的技術(shù)現(xiàn)狀與不足，本發(fā)明的目的旨在提供一種制備可傳送兩種或兩種以上藥物納米粒的新方法，以實(shí)現(xiàn)藥物之間或藥物與助劑之間產(chǎn)生最佳協(xié)同效應(yīng)，從而提高藥物治療效果。
[0005]本發(fā)明提供的可傳送兩種或兩種以上藥物的高分子納米粒的制備方法，主要包括以下工藝步驟:
[0006](I)將疏水性高分子或兩親性高分子材料Pl溶解于有機(jī)溶劑中形成高分子材料有機(jī)溶液X、將疏水性高分子材料P2溶解于有機(jī)溶劑中形成高分子材料有機(jī)溶液Y，在有機(jī)溶液X中加入在先釋放的藥物A，在有機(jī)溶液Y中加入在后釋放的藥物B;有機(jī)溶液X和有機(jī)溶液Y中的高分子材料重量濃度為0.1?30%，優(yōu)選0.5?20% ;有機(jī)溶液X中加入的藥物A的量和有機(jī)溶液Y中加入的藥物B的量為高分子材料重量的I?50%，優(yōu)先量為高分子材料重量的3
?30% ο
[0007](2)將含在先釋放藥物A的有機(jī)溶液X置于與用于形成納米粒液滴的同軸滴加裝置外層環(huán)形腔相連的容器中，將含在后釋放藥物B的有機(jī)溶液Y置于與用于形成納米粒液滴的同軸滴加裝置內(nèi)腔相連的容器中，控制同軸滴加裝置外層環(huán)形腔與內(nèi)腔中的溶液以50-1000yL/min相同速度，在攪拌下滴加到水溶液中，形成層核納米粒液滴；
[0008](3)滴加形成的層核納米粒液滴，揮發(fā)除去有機(jī)溶劑后，經(jīng)固液分離得到的固相用蒸餾水充分洗滌后，加入凍干保護(hù)劑經(jīng)冷凍干燥即得到載藥層核結(jié)構(gòu)納米粒。
[0009]在本發(fā)明的上述技術(shù)方案中，所述水溶液優(yōu)先選用含有表面活性劑的水溶液，表面活性劑的重量濃度優(yōu)先控制在水溶液的0.05?5 %范圍。表面活性劑可選自聚乙烯醇、泊洛沙姆、十二烷基磺酸鈉、吐溫和膽酸鈉中的一種;優(yōu)選聚乙烯醇，泊洛沙姆。含有藥物的有機(jī)溶液在攪拌下滴加到水溶液中，水溶液的用量一般比較大，通常水溶液中水相量為所述有機(jī)溶液X和有機(jī)溶液Y中的有機(jī)溶劑相總重量的5?50倍。
[0010]在本發(fā)明的上述技術(shù)方案中，所述藥物A和藥物B可為一種藥物或一種以上相容藥物的組合藥物。所述藥物包括治療藥物、治療藥物助劑和治療藥物增敏劑;所述治療藥物可為蛋白質(zhì)類藥物、基因類藥物或化學(xué)類藥物。
[0011]在本發(fā)明的上述技術(shù)方案中，疏水性高分子材料與兩親高分子材料中的疏水嵌段具有可降解性，如聚酯或乙基纖維素或殼聚糖，聚酯中的聚乳酸、聚乳酸-聚乙醇酸、聚己內(nèi)酯、聚乳酸-聚己內(nèi)酯更優(yōu);分子量一般為1000?50000道爾頓，優(yōu)先選用3000?30000道爾頓。
[0012]在本發(fā)明的上述技術(shù)方案中，用于溶解高分子材料的有機(jī)溶劑要具有易揮發(fā)性，如甲醇，乙醇，丙酮，乙酸乙酯，四氫呋喃，二氯甲烷，或它們的二元組合，其中優(yōu)選乙醇，丙酮，乙酸乙酯等毒性小的有機(jī)溶劑或它們的組合。
[0013]在本發(fā)明的上述技術(shù)方案中，所述凍干保護(hù)劑可選自葡萄糖、蔗糖、乳糖、甘露醇、山梨糖醇、棉籽糖、肌醇和木糖醇。
[0014]在本發(fā)明的上述技術(shù)方案中，納米粒液滴滴加到水溶液中，通常采取于常壓、40?60 0C下攪拌2?8h揮發(fā)除去有機(jī)溶劑。
[0015]本發(fā)明將高分子載體材料和藥物溶于能與水混溶的有機(jī)溶劑中，通過能形成殼核結(jié)構(gòu)納米粒液滴的同軸滴加裝置，在攪拌下滴加到含有表面活性劑的水溶液中，納米粒液滴中的有機(jī)溶劑迅速地穿透界面，顯著地降低界面張力，使得逐漸不溶的高分子向界面迀移、沉淀，最終形成納米粒。采用本發(fā)明的方法制備載藥納米粒，可以減少或避免使用含氯溶劑，減少了對(duì)人體的傷害和對(duì)環(huán)境的污染。
[0016]本發(fā)明采用具有同軸結(jié)構(gòu)的滴加裝置，將多種藥物分別包載到內(nèi)核載體材料和外層載體材料中，形成順序釋放不同藥物的多藥納米粒，可以避免藥物不相容的風(fēng)險(xiǎn)、達(dá)到在不同的時(shí)段釋放不同藥物的目的，實(shí)現(xiàn)藥物之間或藥物與助劑之間的最佳協(xié)同效應(yīng)，從而提高治療效果。直到本發(fā)明完成之前，發(fā)明人在已公開的文獻(xiàn)中還未見本發(fā)明方法有關(guān)的報(bào)道。
[0017]本發(fā)明相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，概括起來具有以下十分突出的優(yōu)點(diǎn)和技術(shù)效果:
[0018](I)本發(fā)明提供了一種新方法，能夠?qū)煞N或兩種以上藥物同時(shí)包載到高分子納米粒中，發(fā)揮藥物組合協(xié)同療效，提高治療效果。
[0019](2)本發(fā)明方法工藝簡(jiǎn)單，除了使用滴加高分子溶液的裝置外，其它的制備過程類似于常規(guī)的沉淀法制備高分子載藥納米粒；
[0020](3)本發(fā)明制備的多藥高分子納米?？梢园凑諏?shí)際需要實(shí)現(xiàn)藥物使用比例的變化以及改變釋藥順序。
【附圖說明】
[0021]圖1是本發(fā)明使用的制備含兩種或兩種以上藥物高分子納米粒的滴加裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0022]圖2是本發(fā)明制備的載有兩種藥物的多藥納米粒全剖結(jié)構(gòu)示意圖。
[0023]圖3是本發(fā)明制備的載有兩種藥物的多藥納米粒局部立體結(jié)構(gòu)示意圖。
[0024]在圖2與圖3中，圓點(diǎn)和三角為兩種不同的藥物或藥物組合。
【具體實(shí)施方式】
[0025]下面通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行具體描述。有必要在此指出的是以下實(shí)施例只用于對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明，不能理解為對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限制，該領(lǐng)域的專業(yè)技術(shù)人員根據(jù)上述本發(fā)明的內(nèi)容作出的一些非本質(zhì)的改進(jìn)和調(diào)整，仍屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0026]在下面各實(shí)施例中，所涉及到的組分百分比、份數(shù)，除特別說明外，均為重量百分?jǐn)?shù)、重量份數(shù)。
[0027]實(shí)施例1
[0028]構(gòu)成多藥高分子納米粒的內(nèi)外層高分子材料均選用聚乳酸，分子量約為10000道爾頓，將2份姜黃素與5份聚乳酸溶解于100份丙酮中形成5%溶液X，將I份阿霉素與10份聚乳酸溶解于100份四氫呋喃中形成10%溶液Y;將溶液X置于與同軸針頭結(jié)構(gòu)的滴加裝置外層相連的容器中，將溶液Y置于與同軸針頭內(nèi)層相連的容器中，控制內(nèi)外層溶液注入速度50yL/min在攪拌下緩慢滴加到10倍的含1%泊洛沙姆的水相中；滴加完成后繼續(xù)攪拌直至有機(jī)溶劑完全除去。得到的載藥納米粒為210 土 23nm，載阿霉素量4.6 ± 1.7 %，包封率88.5 土5.2%；姜黃素載藥量10.4 ± 2.5，包封率86.6 ± 5.8 % ;加入5 %的乳糖凍干得到多藥高分子納米粒粉末。
[0029]在使用前將得到粉狀載藥納米粒再分散到注射用的水中使用。
[0030]實(shí)施例2
[0031]構(gòu)成多藥高分子納米粒的內(nèi)層高分子材料選用聚乳酸，分子量約為3000道爾頓，外層高分子材料選用聚乳酸-聚乙二醇，其中聚乳酸嵌段的分子量約為5000道爾頓，聚乙二醇嵌段的分子量約為2000道爾頓。將I份阿霉素與10份聚乳酸-聚乙二醇溶解于四氫呋喃中形成3%溶液X，將姜黃素4份、喜樹堿I份與5份聚乳酸溶解于四氫呋喃中形成0.5%溶液Y。將溶液X置于與同軸針頭結(jié)構(gòu)的滴加裝置外層相連的容器中，將溶液Y置于與同軸針頭內(nèi)層相連的容器中，控制內(nèi)外層溶液注入速度lOOOyL/min在攪拌下緩慢滴加到10倍的水相中；滴加完成后繼續(xù)攪拌直至有機(jī)溶劑完全除去。得到的載藥納米粒為190±25nm，載阿霉素量3.6±0.7%，包封率79.5±7.2%;姜黃素載藥量18.4±4.5，包封率96.6±3.2%;喜樹堿4.3 ±0.8%，包封率97.5 ± 2.2% ;加入2%的山梨糖醇凍干得到多藥高分子納米粒粉末。
[0032]在使用前將得到粉狀載藥納米粒再分散到注射用的水中使用。
[0033]實(shí)施例3
[0034]構(gòu)成多藥高分子納米粒的內(nèi)層選用聚己內(nèi)酯，分子量約為15000道爾頓，外層高分子材料選用聚己內(nèi)酯-二硫-聚乙二醇，其中聚己內(nèi)酯嵌段的分子量約為8000道爾頓，聚乙二醇嵌段的分子量約為2000道爾頓。將0.5份喜樹堿、姜黃素4.5份與5份聚乳酸-聚乙二醇溶解于四氫呋喃與二氯甲烷的混合溶劑中形成2%溶液X，將3份5-氟尿嘧啶與10份聚己內(nèi)酯溶解于四氫呋喃中形成20%溶液Y。將溶液X置于與同軸針頭結(jié)構(gòu)的滴加裝置外層相連的容器中，將溶液Y置于與同軸針頭內(nèi)層相連的容器中，控制內(nèi)外層溶液200yL/min注入速度在攪拌下緩慢滴加到50倍的水相中；滴加完成后繼續(xù)攪拌直至有機(jī)溶劑完全除去。得到的載藥納米粒為235 土 25nm，載阿喜樹堿3.6 ± 5.7 %，包封率79.5 ± 3.2 % ;姜黃素載藥量18.4±4.5，包封率94.6±3.1%;5-氟尿嘧啶15.3±2.4%，包封率73.5±7.2%;加入2%的乳糖凍干得到多藥高分子納米粒粉末。
[0035]在使用前將得到粉狀載藥納米粒再分散到注射用的水中使用。
[0036]實(shí)施例4
[0037]材料選擇同實(shí)施例1。將I份組蛋白脫乙酰酶抑制劑與5份聚乳酸溶解于丙酮中形成5%溶液X，將2份阿霉素與10份聚乳酸溶解于四氫呋喃中形成8%溶液Y;將溶液X置于與同軸針頭結(jié)構(gòu)的滴加裝置外層相連的容器中，將溶液Y置于與同軸針頭內(nèi)層相連的容器中，控制內(nèi)外層溶液500yL/min注入速度在攪拌下緩慢滴加到20倍的含0.1%聚乙烯醇的水相中；滴加完成后繼續(xù)攪拌直至有機(jī)溶劑完全除去。得到的載藥納米粒為205 ±26nm，載組蛋白脫乙酰酶量4.3±2.5%，包封率85.5±6.3%;阿霉素載藥量10.3±2.6，包封率90.6 土5.7%；加入5 %的乳糖凍干得到多藥高分子納米粒粉末。
[0038]在使用前將得到粉狀載藥納米粒再分散到注射用的水中使用。
[0039]實(shí)施例5
[0040]材料選擇同實(shí)施例2。將I份阿霉素與10份聚乳酸-聚乙二醇溶解于四氫呋喃中形成2%溶液X，將達(dá)沙替尼4份與10份聚乳酸溶解于四氫呋喃中形成1%溶液Y。將溶液X置于與同軸針頭結(jié)構(gòu)的滴加裝置外層相連的容器中，將溶液Y置于與同軸針頭內(nèi)層相連的容器中，控制內(nèi)外層溶液100yL/min注入速度在攪拌下緩慢滴加到5倍的水相中；滴加完成后繼續(xù)攪拌直至有機(jī)溶劑完全除去。得到的載藥納米粒為192 ± 27nm，載阿霉素量4.8 ± 0.7 %，包封率91.4±4.2%;達(dá)沙替尼載藥量10.4± 1.5，包封率96.5±3.6%;加入2%的山梨糖醇凍干得到多藥高分子納米粒粉末。
[0041]在使用前將得到粉狀載藥納米粒再分散到注射用的水中使用。
[0042]實(shí)施例6
[0043]構(gòu)成多藥高分子納米粒的內(nèi)層高分子材料選用聚己內(nèi)酯分子量約為30000道爾頓，外層高分子材料選用聚己內(nèi)酯-聚乙二醇，其中聚己內(nèi)酯嵌段的分子量約為15000道爾頓，聚乙二醇嵌段的分子量約為5000道爾頓。將2份姜黃素與5份聚己內(nèi)酯-聚乙二醇溶解于100份四氫呋喃中形成1%溶液X，將I份阿霉素與10份聚己內(nèi)酯溶解于100份四氫呋喃中形成1%溶液Y;將溶液X置于與同軸針頭結(jié)構(gòu)的滴加裝置外層相連的容器中，將溶液Y置于與同軸針頭內(nèi)層相連的容器中，控制內(nèi)外層溶液注入速度lOOyL/min在攪拌下緩慢滴加到30倍的含5%十二烷基磺酸鈉的水相中滴加完成后繼續(xù)攪拌直至有機(jī)溶劑完全除去。得到的載藥納米粒為260 土 25nm，載阿霉素量5.1 ± 0.9 %，包封率93.6 ± 4.2 % ;姜黃素載藥量10.8±1.2，包封率98.5 ± 3.6 % ;加入2 %的山梨糖醇凍干得到多藥高分子納米粒粉末。
[0044]在使用前將得到粉狀載藥納米粒再分散到注射用的水中使用。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種可傳送兩種或兩種以上藥物的高分子納米粒制備方法，其特征在于主要包括以下工藝步驟: (1)將疏水性高分子或兩親性高分子材料Pl溶解于有機(jī)溶劑中形成高分子材料有機(jī)溶液X、將疏水性高分子材料P2溶解于有機(jī)溶劑中形成高分子材料有機(jī)溶液Y，在有機(jī)溶液X中加入在先釋放的藥物A，在有機(jī)溶液Y中加入在后釋放的藥物B;有機(jī)溶液的高分子材料重量濃度為0.1?30%，有機(jī)溶液中加入的藥物量為高分子材料重量的I?50% ; (2)將含在先釋放藥物A的有機(jī)溶液X置于與用于形成納米粒液滴的同軸滴加裝置外層環(huán)形腔相連的容器中，將含在后釋放藥物B的有機(jī)溶液Y置于與用于形成納米粒液滴的同軸滴加裝置內(nèi)腔相連的容器中，控制同軸滴加裝置外層環(huán)形腔與內(nèi)腔中的溶液以50-1000yL/min相同速度，在攪拌下滴加到水溶液中，形成層核納米粒液滴； (3)滴加形成的層核納米粒液滴，揮發(fā)除去有機(jī)溶劑后，經(jīng)固液分離得到的固相用蒸餾水充分洗滌后，加入凍干保護(hù)劑經(jīng)冷凍干燥即得到載藥層核結(jié)構(gòu)納米粒。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可傳送兩種或兩種以上藥物的高分子納米粒制備方法，其特征在于，所述水溶液為含有表面活性劑的水溶液，表面活性劑的重量濃度為水溶液的0.05?5% ο3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的可傳送兩種或兩種以上藥物的高分子納米粒制備方法，其特征在于，所述表面活性劑為聚乙烯醇、泊洛沙姆、十二烷基磺酸鈉、吐溫和膽酸鈉中的一種。4.根據(jù)權(quán)利要求1至3之一所述的可傳送兩種或兩種以上藥物的高分子納米粒制備方法，其特征在于，所述水溶液中水相量為所述有機(jī)溶液X和有機(jī)溶液Y中的有機(jī)溶劑相總重量的5-50倍。5.根據(jù)權(quán)利要求1至3之一所述所述的可傳送兩種或兩種以上藥物的高分子納米粒制備方法，其特征在于，有機(jī)溶液中的高分子材料重量濃度為0.1?20%，有機(jī)溶液中所加入的藥物量為高分子材料重量的3?30%。6.根據(jù)權(quán)利要求1至3之一所述的可傳送兩種或兩種以上藥物的高分子納米粒制備方法，其特征在于，所述藥物A和藥物B為一種藥物或一種以上相容藥物的組合藥物。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的可傳送兩種或兩種以上藥物的高分子納米粒制備方法，其特征在于，所述藥物包括治療藥物、治療藥物助劑和治療藥物增敏劑，所述治療藥物為蛋白質(zhì)類藥物、基因類藥物或化學(xué)類藥物。8.根據(jù)權(quán)利要求1至3之一所述的可傳送兩種或兩種以上藥物的高分子納米粒制備方法，其特征在于，疏水性高分子材料與兩親高分子材料中的疏水嵌段具有可降解性，分子量為1000?50000道爾頓。9.根據(jù)權(quán)利要求1至3之一所述的可傳送兩種或兩種以上藥物的高分子納米粒制備方法，其特征在于，所述有機(jī)溶劑為甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃和二氯甲烷中的一種，或?yàn)樗鼈冎械亩M合。10.根據(jù)權(quán)利要求1至3之一所述的可傳送兩種或兩種以上藥物的高分子納米粒制備方法，其特征在于，所述凍干保護(hù)劑選自葡萄糖、鹿糖、乳糖、甘露醇、山梨糖醇、棉籽糖、肌醇和木糖醇。
【文檔編號(hào)】A61K31/12GK105997945SQ201610536729
【公開日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年7月8日
【發(fā)明人】羅祥林, 曹俊
【申請(qǐng)人】四川大學(xué)